Tutkimus UHPLC-pohjaisesta uutto- ja ultrasuodatuserotusprosessin optimoinnista Cistanche-uutteille
Apr 01, 2026
Käyttäjän antama lähdelinkki:https://www.xjcistanche.com/news/hplc-for-simultaneous-determination-of-four-ph-77351688.html
Huomautus:Alla oleva sisältö on käännetty ja toimituksellisesti optimoitutehtaita ja pieniä työpajojakiinnostunutyrttiuutteen prosessin optimointi, pitäen samallaalkuperäinen tekninen merkitys ja rakennemahdollisimman ehjänä.
Abstrakti
Tavoite:Perustaaksesi aUHPLC-monikomponenttinen kvantitatiivinen analyysimenetelmävartenCistancheja optimoidauuttoprosessijaultrasuodatuskalvoerotusprosessi.
Menetelmät:Nopea UHPLC-menetelmä kehitettiin samanaikaiseen kvantifiointiinkolme fenyylietanoidiglykosidia (PhG)sisäänCistancheuuteliuos. Uuttoprosessi optimoitiin käyttämällä aBox–Behnken vastepintamalli. Ultrasuodatusta vartenkolmen markkeriyhdisteen retentionopeudetjakalvovirtausvalittiinlaatujatehokkuuttaindikaattoreita. TheKRIITTINEN menetelmäKäytettiin indikaattoripainojen määrittämiseen, mikä mahdollistaa anortogonaalinen ultrasuodatuskoe, ja optimaaliset kalvoerotusolosuhteet valittiin.
Tulokset:Vakiintunut UHPLC-menetelmäCistancheuuteliuos olivakaa, nopea ja tehokas. Vasteen pinta-analyysin ja teollisen toteutettavuuden perusteella optimoitu uuttoprosessi määritettiin seuraavasti:
"Uuta kahdesti 7-kertaisella liuotintilavuudella 60 % etanolia, 80 min joka kerta."
Ultrasuodatuksen ortogonaalisen kokeen kattava arviointi osoitti senkalvon huokoskokovaikutti merkittävästi kokonaispistemäärään. Optimaalinen ultrasuodatuserotusprosessi oli:
"100 kDa kalvomoduuli, 35 astetta, 0,5 MPa."
Johtopäätös:Tämä tutkimus perusti aUHPLC-monikomponenttinen kvantitatiivinen menetelmäja arvioinut kattavastiuutto- ja ultrasuodatuserotusprosessitvartenCistanche. Analyyttinen menetelmä ja prosessi ovatvakaa ja luotettava, joka tarjoaa käytännön viitteitälaajennus ja teollinen sovellus/Cistancheuutto ja kalvoerotus.
Avainsanat: Cistanche; UHPLC; louhinta; ultrasuodatus kalvo; erottaminen prosessi; prosessin optimointi; fenyylietanoidiglykosidit; laadunvalvonta; kuinka tehdä korkealaatuista uutetta.
Cistanche Tubulosa -uutteen valmistuksen vuokaavio (lähde wecistanchesta)
Wecistanchen tukipalvelu - Lisätietoja yhteistyöstä
Sähköposti:wallence.suen@wecistanche.com
1. Taustaa (Miksi tämä on tärkeää laadukkaan tekemisen kannaltaCistancheote)
Cistanchesillä on pitkä käyttöhistoria elintarvikkeena ja perinteisenä yrttimateriaalina Kiinassa, ja se on perinteisesti liitetty toimintoihin, kuten "kiinteyttävä munuais-yang" ja "ravitseva essenssi ja veri". Sen bioaktiivisia aineosia ovat mmfenyylietanoidiglykosidit, iridoiditerpeenit, lignaanit, polysakkariditjne. Niiden joukossafenyylietanoidiglykosidit (PhG)ovat laajalti tunnustettuja keskeisiksi aktiivisiksi komponenteiksi ja raportoituihin toimiin kuuluu mmanti-inflammatorinen, kasvaimia estävä, antioksidantti, ikääntymistä estävä, luutiheyttä parantava ja hermosuojaus.
Cistancheloistaa juurissaHaloxylon(Chenopodiaceae-kasvi) ja sitä levitetään pääasiassa Xinjiangissa, Gansussa ja muilla alueilla. Viljelyn laajentuessa sen käyttö mmlääkkeet ja ravintolisäton kasvanut nopeasti.
Nykyaikaisessa yrttivalmistuksessamonikomponenttiarviointikäytetään yhä useammin raaka-aineiden laadunvalvontaan ja uutto-/erotteluvaiheisiin. Kuitenkin systemaattinen tutkimus arvioidaCistancheuutto ja kalvoerotus käyttämällä useita PhG-markkereita - erityisesti kauttanopeat ja tehokkaat kvantitatiiviset menetelmät- on ollut suhteellisen vähäistä. Samaan aikaan kalvoerotusta on käytetty laajalti TCM:ssä ja täydennysten valmistuksessakorkea erotustarkkuusjavähähiilisempää, ympäristöystävällistä käsittelyäja se voi parantaa nestemäisten valmisteiden stabiilisuutta.
Tämä tutkimus siis:
kehitti nopean UHPLC-menetelmänkolme keskeistä PhG:täsisäänCistancheuute liuos;
optimoitu poisto käyttämällävastauspinnan metodologia;
arvioitiin ultrasuodatus käyttäenmarkkerin retentio + kalvovirta, objektiivisella painotuksellaKRIITIKKO, joka tukee teollistumisen prosessien valintaa.
2. Välineet ja materiaalit
2.1 Instrumentit
Agilent 1290 Infinity II UHPLC(Agilent Technologies, USA)
ACQUITY UPLC HSS T3 -kolonni(100 mm × 2,1 mm, 1,8 μm; Waters, USA)
XS-105DU analyyttinen saldo(Mettler Toledo)
BONA-GM-18 mikrosuodatus/ultrasuodatus/nanosuodatuskalvoerotusyksikkö
TKF-18 ultrasuodatuskalvot(50, 100, 200 kDa; Shandong Bona Biotechnology Co., Ltd.)
PURELAB klassinen ultrapuhdas vesijärjestelmä(ELGA, Iso-Britannia)
Huomautus:1:ekinakosidi;2:verbaskosidi;3:isoakteosidi
2.2 Materiaalit ja reagenssit
Viitestandardit (National Institutes for Food and Drug Control, Kiina):
Ekinakosidi (111670-201907, 91.8%)
Acteoside / Verbascoside (111530-202315, 97.6%)
Isoakteosidi (112112-202401, 97.0%)
Asetonitriili, HPLC-laatu (Fisher Chemical, USA)
Vesi:ultrapuhdas vesi
Cistanchekeittopalat (eränumero. 250221), ostettu yhtiöltä Henan Dali Pharmaceutical Co., Ltd.
Tunnistanut tutkija Sun Daihua (Jingpai Chizhengtang Pharmaceutical Co., Ltd.)
Kasvitieteellinen alkuperä:Cistanche tubulosa (Schenk) Wight
Vahvistettu noudattamaanKiinan kansantasavallan farmakopea (vuoden 2020 painos)vaatimukset.
Taulukko 1. Kolmen komponentin lineaarisuus, korrelaatiokerroin, lineaarinen alue ja LOQ
| Komponentti | Regressioyhtälö (Y=piikin pinta-ala, X=pitoisuus) | Korrelaatiokerroin (R) | Lineaarinen alue (µg·mL⁻¹) | LOQ (µg·mL⁻¹) |
|---|---|---|---|---|
| Ekinakosidi | Y = 1.873X + 49.049 | 0.9998 | 24.21–774.79 | 0.69 |
| Acteoside (Verbascoside) | Y = 2.038X − 6.483 | 0.9996 | 15.96–510.64 | 0.46 |
| Isoakteosidi | Y = 2.039X − 3.105 | 0.9999 | 5.00–159.86 | 0.52 |
Taulukko 2. Tarkkuus-, toistettavuus-, vakaus- ja piikkipalautustulokset (n=6)
| Komponentti | Tarkkuus (RSD, %) | Toistettavuus (RSD, %) | Vakaus (RSD, %) | piikin palautuminen (%) | Palautus RSD (%) |
|---|---|---|---|---|---|
| Ekinakosidi | 0.93 | 1.05 | 1.38 | 98.47 | 1.27 |
| Acteoside (Verbascoside) | 0.86 | 1.39 | 1.54 | 101.35 | 1.04 |
| Isoakteosidi | 0.62 | 0.89 | 1.07 | 99.58 | 0.93 |
Taulukko 3. Kokeelliset tekijät ja tasot (Box–Behnken-malli)
| Taso | Tekijä A: Etanolipitoisuus (%) | Tekijä B: Liuottimen ja materiaalin suhde (×) | Tekijä C: Uuttoaika (min) |
|---|---|---|---|
| 1 | 50 | 6 | 30 |
| 2 | 60 | 7 | 60 |
| 3 | 70 | 8 | 90 |
Taulukko 4. Laatikko–Behnken-vastepinnan kokeet
| Juokse | A: Etanolipitoisuus (%) | B: Liuotinsuhde (×) | C: Uuttoaika (min) | Y1: Uuton kokonaissaanto (%) |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 70 | 8 | 60 | 8.40 |
| 2 | 70 | 7 | 90 | 8.31 |
| 3 | 60 | 6 | 90 | 9.09 |
| 4 | 60 | 7 | 60 | 9.56 |
| 5 | 60 | 8 | 30 | 8.69 |
| 6 | 60 | 7 | 60 | 9.46 |
| 7 | 50 | 6 | 60 | 8.24 |
| 8 | 60 | 7 | 60 | 9.57 |
| 9 | 70 | 7 | 30 | 7.74 |
| 10 | 50 | 7 | 30 | 7.81 |
| 11 | 60 | 7 | 60 | 9.54 |
| 12 | 60 | 8 | 90 | 9.53 |
| 13 | 50 | 8 | 60 | 8.84 |
| 14 | 50 | 7 | 90 | 8.99 |
| 15 | 70 | 6 | 60 | 7.77 |
| 16 | 60 | 6 | 30 | 8.03 |
| 17 | 60 | 7 | 60 | 9.51 |
Taulukko 5. ANOVA vastepintamallille
| Lähde | Neliöiden summa | df | Keskimääräinen neliö | F-arvo | P-arvo | Merkitys |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Malli | 7.76 | 9 | 0.8627 | 377.29 | < 0.0001 | **** |
| A | 0.3444 | 1 | 0.3444 | 150.65 | < 0.0001 | **** |
| B | 0.6786 | 1 | 0.6786 | 296.80 | < 0.0001 | **** |
| C | 1.6700 | 1 | 1.6700 | 728.35 | < 0.0001 | **** |
| AB | 0.0002 | 1 | 0.0002 | 0.0984 | 0.7629 | ns |
| AC | 0.0930 | 1 | 0.0930 | 40.69 | 0.0004 | *** |
| eKr | 0.0121 | 1 | 0.0121 | 5.29 | 0.0550 | ns |
| A² | 3.5600 | 1 | 3.5600 | 1555.28 | < 0.0001 | **** |
| B² | 0.3702 | 1 | 0.3702 | 161.89 | < 0.0001 | **** |
| C² | 0.6619 | 1 | 0.6619 | 289.51 | < 0.0001 | **** |
| Jäännös | 0.0160 | 7 | 0.0023 | - | - | - |
| Sopivuuden puute | 0.0081 | 3 | 0.0027 | 1.37 | 0.3712 | ns |
| Puhdas virhe | 0.0079 | 4 | 0.0020 | - | - | - |
| Kokonais | 7.78 | 16 | - | - | - | - |
3. Menetelmät ja tulokset
3.1 Monikomponenttinen sisällön määritys (UHPLC)
3.1.1 Sekavertailuliuoksen valmistaminen
Punnitse tarkasti sopivat määrät ekinakosidi-, akteosidi- (verbaskosidi) ja isoakteosidistandardeja ja liuotetaan metanoliin kantaliuosten valmistamiseksi pitoisuuksina1936.980, 1702.144, ja799,280 ug·mL⁻¹, vastaavasti. Pipetoi tarkasti1.00 mL, 0.50 mL, ja0.50 mLkolmesta kantaliuoksesta a5 ml:n mittapullo, laimenna tilavuuteen metanolilla ja sekoita hyvin, jotta saadaan sekoitettu vertailuliuos.
Kuva 3. Kolmiulotteinen vastepintakaavio eri tekijöiden välisistä vuorovaikutuksista.
Kuva 4. Lämpötilan (A), paineen (B) ja huokoskoon (C) vaikutukset ultrasuodatuskalvon erotustehokkuuteen.
3.1.2 Näyteliuoksen valmistaminen
Pipetoi tarkasti1.00 mL/Cistancheuuteliuos tai ultrasuodatus a10 ml:n mittapullo, laimenna määräksi50 % etanolia, sekoita hyvin, suodata ja kerää seuraava suodos testiliuokseksi.
3.1.3 Kromatografiset olosuhteet
Sarake:ACQUITY UPLC HSS T3(100 mm × 2,1 mm, 1,8 μm)
Liikkuva vaihe:Asetonitriili (A) – 0,1 % muurahaishappoliuos (B)
Gradienttieluointi:
0–5 min: 15–22 % A
5–7 min: 22–27 % A
7–10 min: 27–30 % A
Tunnistuksen aallonpituus:330 nm
Virtausnopeus:0,3 ml/min
Kolonnin lämpötila:30 astetta
Ruiskutusmäärä:1 μL
Tyhjiösäiliö (Wecistanche)
Taulukko 6. Yksitekijäkokeiden alueet ultrasuodatuserottelua varten
| Tekijä | Taso 1 | Taso 2 | Taso 3 | Taso 4 | Taso 5 |
|---|---|---|---|---|---|
| V: Lämpötila ( aste ) | 20 | 25 | 30 | 35 | 40 |
| B: Paine (MPa) | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
| C: MWCO (kDa) | 10 | 30 | 50 | 100 | 200 |
3.1.4 Spesifisyys
Koeliuokset (S1), sekoitettu vertailuliuos ja nollaliuos (50 % etanolia) injektoitiin. Jokaisen komponentin huippuresoluutio oli> 1.5, ja tyhjä ei osoittanut häiriöitä.
Taulukko 7. Ortogonaalisen kokeen tekijät ja tasot
| Taso | V: Lämpötila ( aste ) | B: Paine (MPa) | C: MWCO (kDa) | D: Tyhjä |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 30 | 0.3 | 50 | 1 |
| 2 | 35 | 0.4 | 100 | 2 |
| 3 | 40 | 0.5 | 200 | 3 |
3.1.5 Lineaarisuus ja määräraja (LOQ)
Valmista vertailuliuos, joka sisältää ekinakosidia, akteosidia ja isoakteosidia774.792, 510.643, ja159,856 ug·mL-1, laimenna sitten2×, 4×, 8×, 16×, 32×saada kuusi pitoisuustasoa. Käytä yllä olevissa kromatografisissa olosuhteissa pitoisuutta (X) vs. piikin pinta-ala (Y) kalibrointikäyrien luomiseksi. Korrelaatiokertoimet (R) olivatSuurempi tai yhtä suuri kuin 0,9996, mikä osoittaa erinomaista lineaarisuutta. (Regressioyhtälö, lineaarinen alue ja LOQ on raportoitu alkuperäisissä taulukoissa.)
Taulukko 8. Ortogonaalinen kokeellinen suunnittelu ja tulokset ultrasuodatuskalvoerottelulle
Huomautus:Retentioprosentti WWW on raportoitu kolmelle analyytille:
W1W_1W1 Ekinakosidi; W2W_2W2 Acteoside (Verbascoside); W3W_3W3 Isoakteosidi.
Kalvovuon W4W_4W4 yksikkö: [L⋅(m2⋅h)−1][ \\mathrm{L \\cdot (m^2 \\cdot h)^{-1}} ][L⋅(m2⋅t)−1]. Kokonaispistemäärä Y2Y_2Y2 yksikkö: (%).
| Juokse | V: Lämpötila ( aste ) | B: Paine (MPa) | C: MWCO (kDa) | D (tyhjä) | W1W_1W1 (%) | W2W_2W2 (%) | W3W_3W3 (%) | W4W_4W4 [L⋅(m2⋅h)−1][L·(m²·h)⁻¹][L⋅(m2⋅h)−1] | Y2Y_2Y2 (%) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1 | 30 | 0.3 | 50 | 1 | 3.49 | 1.12 | 0.36 | 2.05 | 39.88 |
| 2 | 30 | 0.4 | 100 | 2 | 5.72 | 1.62 | 0.50 | 11.14 | 67.71 |
| 3 | 30 | 0.5 | 200 | 3 | 1.59 | 0.61 | 0.20 | 32.14 | 52.85 |
| 4 | 35 | 0.3 | 100 | 3 | 6.65 | 1.89 | 0.62 | 9.38 | 76.48 |
| 5 | 35 | 0.4 | 200 | 1 | 1.65 | 0.63 | 0.21 | 25.00 | 46.27 |
| 6 | 35 | 0.5 | 50 | 2 | 3.36 | 1.08 | 0.35 | 3.04 | 39.64 |
| 7 | 40 | 0.3 | 200 | 2 | 1.74 | 0.68 | 0.22 | 26.79 | 49.36 |
| 8 | 40 | 0.4 | 50 | 3 | 3.23 | 1.04 | 0.33 | 2.96 | 37.94 |
| 9 | 40 | 0.5 | 100 | 1 | 5.52 |
Tekijätason kokonaismäärät/alueet (kuten kuvassa):
| Tilastollinen | A | B | C | D |
|---|---|---|---|---|
| k1k_1k1 | 53.48 | 55.24 | 39.15 | 52.39 |
| k2k_2k2 | 54.13 | 50.64 | 71.74 | 52.24 |
| k3k_3k3 | 52.78 | 54.51 | 49.49 | 55.76 |
| RRR | 1.35 | 4.60 | 32.59 | 3.52 |
Taulukko 9. Varianssianalyysin (ANOVA) tulokset
| Tekijä | DfD_fDf | Adj SS | Adj MS | F | P |
|---|---|---|---|---|---|
| V: Lämpötila | 2 | 2.75 | 1.37 | 0.12 | 0.90 |
| B: Paine | 2 | 36.65 | 18.32 | 1.54 | 0.39 |
| C: MWCO | 2 | 1663.72 | 831.86 | 70.12 | 0.01 |
| D: Tyhjä | 2 | 23.73 | 11.86 | - | - |
Taulukko 10. Ortogonaalisen kokeen varmistustulokset
| Juokse | Ekinakosidin retentio (%) | Akteosidin retentio (%) | Isoakteosidin retentio (%) | Kalvovirtaus [L⋅(m2⋅h)−1][L·(m²·h)⁻¹][L⋅(m2⋅h)−1] |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 94.85 | 92.54 | 91.04 | 10.42 |
| 2 | 94.71 | 93.03 | 92.54 | 10.04 |
| 3 | 94.71 | 92.54 | 91.04 | 10.61 |
| Tarkoittaa | 94.76 | 92.70 | 91.54 | 10.36 |
| RSD (%) | 0.1 | 0.3 | 0.9 | 2.8 |
3.1.6 Tarkkuus, toistettavuus, vakaus ja palautuminen
Menetelmän validointi suoritettiin analyyttisten menetelmien validointiohjeiden mukaisestiKiinan farmakopea (2020)mukaan lukien tarkkuus, toistettavuus,48 tunnin vakaus, ja piikkien palautuminen. Tulokset osoittivat, että menetelmä soveltuu sisällön määrittämiseenCistancheuuteliuos.
3.2 Uuttoprosessitutkimus (Kuinka uuttaa korkean laadun ja suuren tuoton saavuttamiseksi)
3.2.1 Yhden tekijän kokeet
Jokainen käytetty uutto30 gmurskattuCistancheraaka-aine. Käyttäen ekinakosidin, akteosidin ja isoakteosidin uuttosaantoa arviointiindikaattoreina tutkittiin seuraavia tekijöitä:
Etanolin pitoisuus:40%, 50%, 60%, 70%, 80%
Poistoajat:1, 2, 3, 4, 5
Liuottimen ja materiaalin suhde:5×, 6×, 7×, 8×, 9×
Poistoaika:30, 60, 90, 120, 150 min
Kun tutkittiin yhtä tekijää, muut korjattiin (perustilanne:60 % etanolia, 7 x liuotin, 3 kertaa, 1,5 tuntia). Poistomenetelmä:refluksiuutto(vesikylpy klo80 astetta). Jokainen ehto suoritettiin kolmena kappaleena.
Havainnot:
Kolmen markkerin kokonaisuuttosaanto kasvoi ja sitten pieneni etanolipitoisuuden myötä; erot olivat merkittäviä (P < 0,05).Paras etanolipitoisuus: 60 %.
Liuotinsuhde, uuttoajat ja aika osoittivat samanlaisia suuntauksia: saanto kasvoi ja sitten tasaantui. Jälkeen7× liuotin, 2 poistoa, ja1 h, erot eivät olleet enää merkittäviä.
Kun otetaan huomioon mittakaavan lisäyskustannukset ja tehokkuus, käytetty vastepintarakenne: etanoli50–70%, liuotin6–8×, aika30-90 min, poistoajat on asetettu arvoon2.
Kalvonerotuslaitteet (Wecistanche)
3.2.2 Box–Behnken-vastepinnan suunnittelu ja tulokset
Lisäoptimointiin käytettiin Box–Behnken-vastepintamallia. Vastausmuuttuja oliuuton kokonaissaanto (Y1)kolmesta fenyylietanoidiglykosidista.
Sovitettu regressioyhtälö oli:
Y1=9.53−0.21A+0.29B+0.46C+0.01AB−0.15AC−0.06BC−0.92A2−0.30B2−0.40C2Y1=9.53 - 0.21A + 0.29B + 0.46C + 0.01AC - 0.158 - 0.92A^2 - 0.30B^2 - 0.40C^2Y1=9.53−0.21A+0.29B+0.46C+0.01AB−0.15AC−0.06BC−0.92A2−0.30B2−0.40C2
kanssa R2=0.9979R^2=0.9979R2=0.9979.
ANOVA osoitti:
Malli oli erittäin merkitsevä (P < 0,0001)
Sopivuuden puute ei ollut merkittävä (P=0.3712), mikä osoittaa hyvää mallin sopivuutta
Tekijän vaikutusjärjestys:C > B > A
A, B, C ja neliötermit A2A^2A2, B2B^2B2, C2C^2C2 olivat erittäin merkittäviä (P < 0,0001)
VuorovaikutustermiAColi erittäin merkittävä (P < 0,001)
Käyttämällä Design-Expert 12:ta ennustetut optimaaliset olosuhteet olivat:
Etanoli:58.41%
Liuotinsuhde:7.44×
Aika:77.26 min
Teollisen ohjauksen mukavuus ja kustannukset huomioon ottaen lopullinen käytännön kunto muutettiin seuraavasti:
60 % etanolia, 7 x liuotin, 80 min, uutettiin kahdesti.
3.2.3 Prosessin vahvistus
Kolme rinnakkaista validointikoetta suoritettiin valituissa optimiolosuhteissa. Keskimääräinen uuttosaanto oli9.66%, joka vastaa mallin ennustetta hyvin (suhteellinen virhe0.11%). Kaikkien kolmen merkkiyhdisteen uuttosannot olivat korkealla tasolla, mikä osoitti hyvää sopivuutta ennustettujen ja todellisten tulosten välillä.
3.3 Ultrasuodatuserotteluprosessin tutkimus (miten parantaa kirkkautta/stabiilisuutta säilyttäen samalla aktiiviset aineet)
3.3.1 Ultrasuodatussyöttöliuoksen valmistaminen
Kaksitoista kiloa murskattuaCistanchekeittopalat uutettiin käyttämällä yllä olevaa optimoitua uuttoprosessia, ja uuteliuosta käytettiin ultrasuodatussyöttönä. Mitatut pitoisuudet olivat:
Ekinakosidi:6,99 mg·mL-1
Akteosidi:2,01 mg·ml-1
Isoakteosidi:0,67 mg·ml-1
3.3.2 Ultrasuodatusmenettely ja arviointiindikaattorit
Jokaista juoksua kohden,2 Lsyöttöliuoksesta käsiteltiin kalvoerotusyksikössä. Lämpötila ja transmembraanipaine säädettiin koesuunnitelman mukaan. Tasapainon (0,2 l) jälkeen kalvovirta laskettiin seuraavasti:
Flux=VtA\\text{Flux}=\\frac{V}{tA}Flux=tAV
missä VVV on permeaatin tilavuus, ttt on suodatusaika ja AAA on tehollinen kalvoalue.
UHPLC:tä käytettiin permeaatin kolmen markkerin kvantifiointiin. Ultrasuodatusvaikutus arvioitiin käyttämällä:
Säilytysprosenttijokaisesta aktiivisesta komponentista
Säilytys (%)=Sisältö ultrasuodattimessaSyötteen sisältö×100%\\teksti{Säilytys (\\%)}=\\frac{\\text{Sisältö ultrasuodatuksessa}}{\\teksti{Syötteen sisältö}} \\kertaa 100\\%Säilytys (%)=Syötteen sisältö x0%Content×0
Kalvovirtaus(tehokkuusindikaattori)
3.3.3 Yksitekijäsuunnittelu
Lämpötilaa, painetta ja MWCO:ta (huokoskoko) tutkittiin yksittäisinä tekijöinä perusolosuhteiden ollessa asetettuina30 astetta, 0,3 MPa, 50 kDa. Ortogonaaliseen kokeeseen valitut vaihteluvälit määritettiin yhden tekijän tulosten perusteella.
3.3.4 Yhden tekijän havainnot (käytännöllinen merkitys tuotannon kannalta)
Lämpötila: retentiotrendit olivat samanlaisia;35 astettaantoi parhaan kokonaisvaikutuksen; virtauksella oli taipumus kasvaa lämpötilan mukaan → valittuna30, 35, 40 astetta
Paine: retentio pieneni paineen myötä, mutta virtaus riippui voimakkaasti paineesta ja määrää läpimenon → valittu0.3, 0.4, 0.5 MPa
MWCO: vaikutti voimakkaasti sekä retentioon että virtaukseen.100 kDasaavuttanutkorkein säilytyskolmelle merkille, kun200 kDaantoi alhaisemman säilytyksen → valittu50, 100, 200 kDa
Kattava arviointi ja optimaaliset ultrasuodatusolosuhteet
Koska virtaus vaihteli voimakkaammin kuin retentio eri olosuhteissa, tutkimuksessa sovellettiinKRIITIKKOmenetelmä, jossa on dynaaminen säätömekanismi, jotta vältetään erittäin hajaantuneiden indikaattoreiden (vuon) ylipainottaminen. Kokonaispisteiden perusteellakalvon huokoskokovaikutti merkittävästi pistemäärään.
Optimaalinen ultrasuodatusprosessi:
100 kDa kalvomoduuli, 35 astetta, 0,5 MPa
Tätä prosessia kuvataan vähähiiliseksi ja ympäristöystävälliseksiaktiivisten merkkiaineiden korkea retentiosamalla kun otetaan huomioon erottelutehokkuus, mikä tekee siitä sopivan laajempaan käyttöön.
4. Keskustelu (Toteutusohjeet tehtaille ja työpajoille)
4.1 Multi-marker QC on "korkealaatuisen uutteen" perusta
Jos haluat valmistaa yhtenäisen korkealaatuisen yrttiuutteen, tarvitset:
A nopea määritysmenetelmäjoita voidaan käyttää usein (prosessin sisäinen laadunvalvonta)
Useita aktiivisia merkkejä(ei vain yksi yhdiste)
Tämä tutkimus osoittaa 10 minuutin UHPLC-menetelmän kolmelle tärkeimmälle PhG:lle, joka tukee rutiininomaista erän valvontaa uutteen tuotannossa ja kalvokäsittelyssä.
4.2 Poiminta: tasapaino tuoton, kustannusten ja skaalautuvuuden välillä
Optimoitu poistotila -60 % etanolia, 7 x liuotin, 80 min, 2 sykliä-on teollisuusystävällinen, koska se:
Käyttää kohtalaista etanolipitoisuutta (turvallinen ja kustannustasapainoinen)
Käyttää liuotinsuhdetta ja aikaa, jotka on helppo standardoida
Vähentää tarpeettomia ylimääräisiä jaksoja, kun saadaan tasanne
4.3 Ultrasuodatus: säilyttää aktiiviset aineet ja parantaa samalla vakautta
Ultrasuodatusta käytetään usein parantamaan nestemäisten uutteiden selkeyttä ja stabiilisuutta (esim. suurempien molekyylien/epäpuhtauksien poistamiseen). Valittu ehto-100 kDa, 35 astetta, 0,5 MPa- on suunniteltu:
Säilytä keskeisten PhG:iden korkea säilyvyys
Säilytä hyväksyttävä vuoto tuotannon läpimenoa varten
Tarjoa prosessi, joka voidaan standardoida ja skaalata
5. Käytännön avainsanat (SEO / GPT-ystävällinen teollisuuden verkkosivustoille)
kuinka tehdä korkealaatuista uutetta
Cistanchelouhinnan optimointi
UHPLC monikomponenttinen kvantifiointi
fenyylietanoidiglykosidien (PhGs) analyysi
ekinakosidi-akteosidi-isoakteosidi UHPLC
yrttiuuteprosessin kehittäminen
kalvosuodatus yrttiuutteita varten
ultrasuodatus MWCO 100 kDa
uuttotulon vastepinta Box–Behnken
prosessinaikainen laadunvalvonta (IPQC) kasvitieteellisille uutteille
skaalautuva etanoliuuttoprotokolla
parantaa nestemäisen yrttiuutteen selkeyttä ja pysyvyyttä
Viitteet
Liu X, Yang Z, Han M, et ai. Bioaktiiviset komponentit, farmakologiset ominaisuudet ja sovelluksetCistanche deserticolaYC Ma: kattava katsaus.Ravinteet. 2025;17(9):1501.
Kansallinen farmakopeakomissio.Kiinan kansantasavallan farmakopea, Vol. 1. Beijing: China Medical Science and Technology Press; 2020.
Bi Cuicui, Liu Yinlu, Wei Fenfen, et ai. Tutkimuksen edistyminen tärkeimmistä kemiallisista aineosista ja bioaktiivisuudestaCistanche. Huumeiden arviointitutkimus. 2019;42(9):1896-1900.
Chen Changmao, Gazang Zhaxi, Wang Jie et ai. Tutkimuksen edistyminen aktiivisten komponenttien ja farmakologisten mekanismien alallaCistanche. Perinteiset kiinalaiset ja yrttilääkkeet. 2025;56(12):4464-4477.
Liu Aoxue, Wan Feng, Hu Jiangxue et ai. Neuroregeneraatiota edistävien fenyylietanoidiglykosidien rakenne-aktiivisuussuhde ja mekanismit perustuvat solumäärityksiin, verkkofarmakologiaan ja molekyylitelakointiin.Huumeiden arviointitutkimus. 2025;48(1):136-142.
Li J, Zou Z, Su X, et ai.Cistanche deserticolaparantaa munasarjojen poiston aiheuttamaa osteoporoosia pääasiassa säätelemällä lipidiaineenvaihduntaa: Näkemyksiä seerumin metabolomiikasta UPLC/Q-TOFMS:n avulla.J Etnopharmacol. 2024;322:117570.
Wen L, Hu J, Zhang J, et ai. Herba Cistanchen fenyylietanoliglykosidit parantavat hypoksisen kasvaimen mikroympäristöä ja tehostavat oksaliplatiinin vaikutuksia HIF-1-signalointireitin kautta.Mol Med Rep. 2021;24(1):517.
Yao SQ, Xu ZP, Guo WX, et ai. Neuroprotektiivinen vaikutusCistanche deserticolaglykosideihin MPTP-indusoidussa Parkinsonin taudin hiirimallissa liittyy Nrf2-aktivaatio.J Toxicol Environ Health A. 2025;88(14):576-588.
Feng Duo, Duan Hao, Lü Yanni et ai. SovellusCistancheterveysruoissa Kiinassa.Elintarviketiede ja teknologia. 2021;46(12):76-81.
Zhao Hongting, Xin Guoxiong, Guo Yuan. Lääketieteellisen ja syötävän homologisen TCM:n tutkimuksen edistyminenCistanche. Perinteiset kiinalaiset ja yrttilääkkeet. 2025;56(9):3316-3329.
Mei Ju, Wu Tao, Li Qiang et ai. Laatuun ja jalostukseen liittyvät komponenttimuutokset eri alkuperää olevan kanelin osalta.Luonnontuotteiden tutkimus ja kehitys. 2024;36(3):377-387,399.
Meng Ran, Wu Zhe, Feng Wei et ai. Voikukan laadun arviointi HPLC-sormenjälkien, kemometrian ja monikomponenttimäärityksen perusteella.Perinteiset kiinalaiset ja yrttilääkkeet. 2022;53(24):7887-7896.
Wu Xin, Wu Tao, Wang Bingqing et ai. UPLC-sormenjälkien määrittäminen ja kuuden komponentin kvantifiointi eri alkuperää olevasta lakritsista.Perinteiset kiinalaiset ja yrttilääkkeet. 2025;56(7):2518-2526.
Li Yang, Bubi Ajiar·Hayirati, Qin Yadi, et ai. Neljän fenyylietanoidiglykosidin samanaikainen määritysCistanchekeittopalat jaCistanche tubulosauutteet HPLC:llä.Kiina Pharmaceuticals. 2022;31(6):77-80.
Ding Yanxia, Wang Xiaoqin, Zhang Ying. Kuuden tärkeimmän fenyylietanoidiglykosidin määritys inCistanchelääkeaineista HPLC:llä.Shizhen Guoyi Guoyao. 2020;31(4):813-816.
Dong Zhiguo, Zhou Rong, He Jinfeng, et ai. Kalvoerotusteknologian sovellus ja näkymät TCM:n vihreässä valmistuksessa.Perinteiset kiinalaiset ja yrttilääkkeet. 2024;55(12):4225-4234.
Li Yaxin, Liang Huizhen, Zhang Wensheng, et ai. Terveysalkoholin jalostusteknologian tutkimuksen edistyminen.Kiinan panimo. 2022;41(5):23-27.
Wang Yuetong, Liu Hongbo, Xu Sining et ai. Ultrasuodatuskalvoteknologian vaikutukset Astragalus-vesiuutteiden fysikaalis-kemiallisiin ominaisuuksiin ja antioksidanttiseen aktiivisuuteen.Moderni kiinalainen lääketiede. 2024;26(4):695-701.
Huang Xiang, Guo Yehong, Jia Cunqin ym. Tutkimus uuttoprosessista ja kuivausmenetelmästäCistanche. Perinteiset kiinalaiset ja yrttilääkkeet. 2019;50(15):3622-3630.
Ma Jincheng, Wang Xuxing, Li Qian, et ai. Kahdeksan kemiallisen komponentin UPLC-pohjainen vertailu kahdesta alkuperästäCistancheraakatuotteet ja viinivalmisteet.Moderni kiinalainen lääketiede. 2025;27(6):1040-1048.
