Solar Lentigosin melanosyyttien aktivointimekanismit ja järkevät terapeuttiset hoidot

Abstrakti:Auringon lentigojen (SL:iden) patobiologian karakterisoimiseksi puolikvantitatiivisen RT-PCR:n, Western blottingin ja immunohistokemian analyysit paljastivat endoteliinin (EDN) -1/endoteliini B -reseptorien (EDNBR:t), kantasolutekijän (SCF) lisääntyneen ilmentymisen. )/c-KIT ja tuumorinekroositekijä (TNF) leesionaalisessa epidermiksessä, mikä erosi interleukiinin (IL) vähentyneen ilmentymisen kanssa. Nämä havainnot tukevat vahvasti hypoteesia, että aiempi toistuva UVB-altistus laukaisee keratinosyytit jatkuvasti tuottamaan TNF:ää. Sitten TNF stimuloi EDN:ien eritystä ja SCF:n tuotantoa autokriinisesti, mikä johtaa viereisten melanosyyttien jatkuvaan melanogeeniseen aktivaatioon, mikä aiheuttaa SL:itä. Kliininen tutkimus, jossa 36 potilasta, joilla oli SLs kuuden kuukauden ajan ja joita hoidettiin M. Chamomilla -uutteella, jolla oli voimakas kyky kumota EDN1--indusoitu DNA-synteesin lisääntyminen ja melanosyyttien lisääntyminen ihmisen melanosyytissä viljelmässä, paljasti pigmenttipisteiden merkittävän paranemisen. ja värierot ilmaistuna L-arvoina. Toinen kliininen tutkimus, jossa käytettiin atyrosinaasiinhibiittori L-askorbaatti-2-fosfaatti 3 Na (ASP) osoitti, että testivedellä (6 prosenttia APS) käsitellyn ihon L-arvot nousivat merkittävästi SL:issä ja ei-leesionaalisessa ihossa ja merkittävästi korkeampi ∆L-arvo SL:issä, kun verrattuna vaurioitumattomaan ihoon. Näiden löydösten summa viittaa vahvasti siihen, että paikallishoito yhdistettiin EDN-signalointisalpaajilla jatyrosinaasiinhibiittorit on toivottava terapeuttinen valinta SL:ille.

Avainsanat: aurinkolentigo; endoteliini; kantasolutekijä; keratinosyyttien kasvutekijä; interleukiini-1; tuumorinekroositekijä; solunsisäinen signalointi; kalsiumin mobilisointi; merkinanto esto; M. chamomilla; askorbaatti-fosfaatti Na; valkaisuun agentti; tyrosinaasin estäjä

Cistanche on tyrosinaasin estäjä.

Klikkaa nähdäksesi tyrosinaasia estävät vaikutukset

1. Esittely

Aasian ihon yleisimmin esiintyvä epidermaalinen hyperpigmentaarinen sairaus on aurinkolentigot (SL), joita esiintyy yleensä kasvoissa ja käsien selässä. Toisin kuin UVB-indusoitu hyperpigmentaatio (UVB-melanoosi), joka katoaa potilaan iästä riippuen kahdesta viikosta muutamaan kuukauteen UVB-altistuksen lopettamisen jälkeen, SL:itä kehittyy auringolle altistuneelle iholle, erityisesti kasvoille. eivät koskaan häviä keratinosyyttien mahdollisen DNA-vaurion vuoksi, joka johtuu leesion epidermiksen toistuvasta UVB-säteilystä. Yleensä pigmenttiä estävät aineet kohdistuvat yleensä hyperpigmentaarisiin häiriöihin, ja niihin kuuluvat UVB-melanoosi, SL:t ja melasma. Japanissa erilaisista pigmenttihäiriöistä kärsivien potilaiden lopullisen diagnoosin esiintymistiheyden perusteella SL-tautien ilmaantuvuus on suurin, ja niitä esiintyy noin 60 prosentilla kaikista hyperpigmentaarisia häiriöitä sairastavista potilaista, kun taas melasmaa ja tulehduksen jälkeistä hyperpigmentaatiota (mukaan lukien UVB-melanoosi) esiintyy niinkin alhainen kuin 5,2 prosenttia ja 3,3 prosenttia potilaista, vastaavasti [1]. Tämä viittaa siihen, että SL:t ovat pääasiallinen kohde aasialaisen ihon pigmenttiä estävissä aineissa. Pigmentin muodostumista ehkäisevien aineiden kliinisistä vaikutuksista SL:iin on kuitenkin julkaistu vain vähän artikkeleita, koska monet pigmenttiä estävät aineet toimivattyrosinaasiestäjiä, eikä sen ole odotettavissatyrosinaasiesto olisi riittävä parantamaan SL:iden hyperpigmentaatiota. Lisäksi vaikuttaa vaikealta rationaalisesti suunnitella tehokasta terapeuttista paikallista hoitoa SL:ille, koska melanosyyttien aktivaatiomekanismeista leesionaalisessa epidermiksessä tiedetään vain vähän. Tässä katsausartikkelissa luonnehdimme SL:ien patobiologiaa SL:iden paikallishoidon mukaan, koska melanosyyttien aktivaatiomekanismeista leesionaalisessa epidermiksessä tiedetään vain vähän. Tässä katsausartikkelissa luonnehdimme SL:ien patobiologiaa tunnettujen melanogeenisten parakriinisten sytokiiniverkostojen mukaan ja SL:ien leesionaalisessa epidermiksessä löydettyjen melanosyyttien aktivaatiomekanismien perusteella esittelemme rationaalisia kliinisiä lähestymistapoja SL:iden paikalliseen hoitoon hyperpigmentaation parantamiseksi. taso.

2. Kliiniset ominaisuudet

SL:t kehittyvät kliinisesti litteinä, hyvin rajattuina iholaastareina, joiden värit ja koko vaihtelevat ja joita esiintyy usein kasvoissa ja käsien selässä (kuva 1a) [2]. Hemoksiliinilla ja eosiinilla värjättyjen SL-leesioiden histokemia paljasti lievää akantoosia ja pigmentaatiota tyvisolukerroksessa (kuva 1b) [2]. Kasvojen SL:iden histopatologisissa piirteissä on kaksi mallia: yksi kuvio osoitti litistynyttä orvaskettä, jossa oli basaalimelanoosia, ja toinen kuvio osoitti epidermaalista hyperplasiaa pitkänoineine harjanteineen, jotka koostuivat syvästi pigmentoituneista basaloidisoluista [3].

3. Melanosyyttien aktivaation mekanismit aurinkolentigossa melanogeeniseen parakriinisytokiiniverkostoon perustuen

3.1. Melanosyyttien lukumäärä ja tyrosinaasin ilmentyminen

Vaikka melanosyyttien lisääntyneestä määrästä SL:issä on esitetty joitakin väitteitä, immunohistokemiallinen analyysi melanosyyttispesifistä markkeria MART-1 käyttäen paljasti melanosyyttien määrän lisääntyneen aurinkolentigossa [5–7]. Kuitenkin melanosyyttien todellinen tiheys dermiksen ja orvaskeden välisellä rajalla SL:issä on samanlainen kuin perilesionaalisessa kontrolliihossa keratinosyyttien lisääntyneen proliferaation vuoksi [7]. Immunohistokemia käyttämällä anti-tyrosinaasipaljasti sentyrosinaasi-positiiviset melanosyytit lisääntyivät merkittävästi 2-kertaisesti SL:iden leesionaalisessa epidermiksessä [4]. Geenianalyysi semikvantitatiivisella RT-PCR:llä paljasti, että tyrosinaasin mRNA:n ilmentymistaso on merkittävästi 2{5}-kertainen leesion epidermiksessä [4]. Yllä olevat havainnot tukevat sitä mahdollisuutta, että SL-leesionaalisissa melanosyyteissä esiintyy sekä proliferaation että melanisaation stimulaatiota. Siksi oletimme, että hieman lisääntyvät keratinosyytit SL:issä laukaisevat viereisten melanosyyttien aktivoitumisen erittämällä melanosyyttejä stimuloivia sytokiinejä.

3.2. Melanogeeniset parakriiniset sytokiiniverkot

Me ja muut ryhmät olemme selvittäneet, että ihosolujen välillä on useita tärkeitä melanogeenisiä parakriinisytokiiniverkostoja (kuva 2). Näitä ovat pääasiassa endoteliini (EDN)-1 [8–15], kalvoon sitoutunut kantasolutekijä (mSCF) [16], proopiomelanokortiini (POMC) [17–20], prostaglandiini E2 [21], granulosyyttimakrofagi pesäkkeiden stimulaatiotekijä (GM-CSF) [22], perusfibroblastikasvutekijä [23], kasvuun liittyvä onkogeeni [24] ja keratinosyyttikasvutekijä (KGF) [25,26], jotka osallistuvat keratinosyyttien ja melanosyyttien vuorovaikutukseen ja liukoiseen SCF:ään [27]. ], hepatosyyttien kasvutekijä (HGF) [8, 10, 27–29] ja KGF [30], jotka osallistuvat fibroblastien ja melanosyyttien vuorovaikutukseen. Selvitettyjen melanogeenisten parakriinisytokiiniverkkojen perusteella, mukaan lukien niitä vastaavat reseptorit, on tärkeää määrittää, mitkä melanogeeniset parakriinisytokiiniverkostot ovat osallisina ja aktivoituvat spesifisesti in vivo SL:ien leesionaalisessa epidermiksen hyperpigmentaatiomekanismeissa.

3.3. Tärkeimmät parakriiniset sytokiinit ja reseptorit, jotka vastaavat melanosyyttien aktivaatiosta SL:issä

Yllä olevien melanogeenisten sytokiinien ja niitä vastaavien reseptorien joukossa määritimme ensin emäksisen fibroblastikasvutekijän (bFGF) ja kasvuun liittyvän onkogeenin (GRO) roolin SL:iden epidermiksessä. Perus-FGF:n havaittiin yli-ilmentyneen UVB-säteilylle altistetuissa ihmisen keratinosyyteissä, joiden homogenaatteilla oli selvä potentiaali stimuloida melanogeneesiä ja ihmisen melanosyyttien lisääntymistä viljelmässä, vaikka melanogeeniseen stimulaatioon tarvitaan olennaisesti kofaktoreita, jotka pystyvät lisäämään syklisiä AMP-tasoja [23]. ]. Tutkimusryhmämme tunnisti GRO:n melanogeeniseksi sytokiiniksi, jolla on olennainen rooli fenyyliatsonaftolin aiheuttamassa hyperpigmentaatiossa allergisen reaktion jälkeen ruskeankeltaisessa marsun ihossa [24,31]. Semikvantitatiivinen RT-PCR paljasti, että bFGF:n ja GRO:n geeniekspressiotasoissa ei tapahtunut muutosta SL-leesionaalisessa epidermiksessä verrattuna ei-leesionaaliseen epidermikseen [2]. Yhdenmukaisesti bFGF:n ja GRO:n mRNA-ekspressiotason kanssa immunohistokemia paljasti, että anti-bFGF:n (kuvio 1c, d) ja anti-GRO:n (kuvio 1e, f) immuunivärjäytymisen intensiteetissä ei ollut eroa SL-leesionaalisen ja ei-leesionaalisen epidermis [2]. Nämä havainnot osoittivat, että bFGF:llä tai GRO:lla ei ollut osallisuutta luontaisina melanogeenisinä sytokiineinä melanosyyttien aktivaatiomekanismiin SL:issä.

UVB-indusoidun hyperpigmentaation biologisessa mekanismissa EDN1:n, alun perin sian endoteelisoluista eristetyn vasokonstriktoripeptidin [32], ja mSCF:n [16] ilmentyminen lisääntyy autokriinisesti UVB-stimuloidun interleukiinin vapautumisen vaikutuksesta. IL)-1 reaktiivisten happilajien (ROS) muodostumisen kautta [15]. Nämä sytokiinit saavat viereiset melanosyytit lisäämään kriittisten melaniinia syntetisoivien entsyymien, tyrosinaasin [14,33], EDNBR:n [34] ja melanosomimatriisiproteiinin PMEL17 [34], sekä proliferaatioon liittyvien entsyymien, kuten syklisestä riippuvaisesta kinaasista (CDK)2. [34], jotka johtavat hyperpigmentaatioon UVB-säteilylle altistuneessa ihossa. UVB-melanoosissa oleellisesti mukana olevien tärkeimpien melanogeenisten sytokiinien perusteella määritimme seuraavaksi EDN1:n roolin melanosyyttien aktivaatiomekanismissa SL-solujen epidermissä. EDN1:n mRNA-ekspressiotason karakterisointi orvaskessä semikvantitatiivisella RT-PCR-analyysillä osoitti, että SL-leesionaalisessa orvaskedessä ilmeni selvästi keskimäärin 3{21}}-kertaiseksi verrattuna ei-leesionaaliseen orvasketeen verrattuna. [4]. EDN1:n kohonneen geeniekspressiotason mukaisesti anti-EDN1:llä lisääntynyt immunovärjäytyminen SL-leesionaalisessa epidermiksessä (kuvio 1g,h) [4].

EDN1:n lisäksi määritimme seuraavaksi EDN-reseptorien roolin SL:iden taustalla olevassa melanosyyttiaktivaatiomekanismissa. EDN:n sitoutuminen reseptoriinsa on ensimmäinen askel keratinosyyttien ja melanosyyttien välisessä suuressa parakriinisessa linjassa, joka säätelee ihon pigmentaatiota [11,14,35,36]. EDN-reseptorit ovat seitsemän transmembraanista G-proteiinikytkettyä reseptoria, joissa on kaksi isoformia (A ja B), jotka ovat vuorovaikutuksessa spesifisesti EDN1:n ja kaikkien EDN-muotojen kanssa (EDN1, EDN2 ja EDN3), vastaavasti [37]. Mitä tulee EDN-reseptoriantagonistien estävään vaikutukseen ihmisen melanosyyttien EDN-stimuloimaan proliferaatioon viljelmässä, merkittävä estävä vaikutus ilmeni vain BQ 788:n, anendoteliini B -reseptorin (EDNBR) antagonistin, mutta ei endoteliinin BQ123:n tai BQ610:n läsnä ollessa. Reseptorin (EDNAR) antagonisti [9], joka osoitti, että EDN1/EDN-reseptorisignalointi välittyy EDNBR:n kautta. EDNBR-mRNA:n ilmentymisen semikvantitatiivinen RT-PCR-analyysi paljasti, että erityyppisten ihosolujen joukossa melanosyytit ovat ainoa olennainen EDNBR:ää ilmentävä solutyyppi. Koska olemme jo osoittaneet, että keratinosyyttien erittämä EDN1 laukaisee solunsisäisen proteiinikinaasi C:n (PKC) aktivoitumisen EDNBR:n kautta [35], määritimme, korostuiko EDNBR:n ilmentymistaso myös melanosyyteissä leesion SL-epidermiksessä. EDNBRmRNA:n semikvantitatiivinen RT-PCR-analyysi SL-solujen orvaskessa osoitti selvästi lisääntyneen ilmentymisen keskimäärin 6{23}}-kertaiseksi leesionaalisessa SL-epideriksessä [4]. EDNBR-mRNA:n lisääntyneen ilmentymisen mukaisesti lisääntynyt immunovärjäytyminen anti-EDNBR:llä lokalisoitui melanosyytteihin leesionaalisen SL-epidermiksen (kuvio 1i, j) [4]. Näiden löydösten summa viittaa vahvasti EDN1:n ilmentymisen ja sen reseptorisidoksen koordinoituun lisääntymiseen SL:iden leesionaalisessa epidermiksessä.

UVB-melanoosissa mukana olevien tärkeimpien melanogeenisten sytokiinien perusteella määritimme seuraavaksi SCF:n roolin melanosyyttien aktivaatiomekanismissa leesionaalisessa SL-epideriksessä. Olemme jo raportoineet, että viljeltyjen ihmisen keratinosyyttien ja ihmisen orvaskeden UVB-altistus stimuloi merkittävästi SCF:n ilmentymistä sekä geeni- että proteiinitasoilla [15,16]. SCF-mRNA:n semikvantitatiivinen RT-PCR-analyysi SL-solujen orvaskessa osoitti selvästi lisääntyneen ilmentymisen keskimäärin 3{5}}-kertaiseksi leesionaalisessa SL-epideriksessä verrattuna ei-leesionaaliseen orvasketeen [2]. Kuuden SL-potilaan ihon SCF:n Western blot -tutkimus osoitti, että SCF-proteiinissa oli keskimäärin 16--kertainen kasvu leesionaalisen SL-orvaskeden ihossa verrattuna ei-leesionaaliseen orvasketeen [2].

SCF:n kohonneen geeni- ja proteiiniekspressiotason mukaisesti lisääntynyt immunovärjäytyminen anti-SCF:llä koko leesionaalisen SL-epidermiksen alueella (kuvio 1k, l) [2]. Keskusteltiin siitä, onko leesionaepidermiksen proteiinitasolla lisääntynyt SCF liukoista vai kalvoon sitoutunutta tyyppiä. Jos tyvikalvoa läpäisevää liukoista SCF:ää säätelee enemmän orvaskessä, dermiksessä olevat syöttösolut tulee aktivoida lisääntymään ja lisääntymään. Koska toluidiinisininen värjäytyminen SL-soluissa ei osoittanut syöttösolujen määrän lisääntymistä vaurioituneessa SL-dermiksessä [2], on todennäköistä, että SL:issä lisääntynyt SCF-tyyppi on kalvoon sitoutunutta tyyppiä.

SCF:n lisäksi määritimme seuraavaksi SCF-reseptorin c-KIT:n roolin SL:iden taustalla olevassa melanosyyttiaktivaatiomekanismissa. Olemme jo raportoineet, että viljeltyjen ihmisen melanosyyttien sekä ihmisen orvaskeden UVB-altistus stimuloi merkittävästi c-KIT:n ilmentymistä sekä geeni- että proteiinitasoilla [15,38]. Lisäksi ruskeankeltaisen marsun ihon UVB-stimuloidussa pigmentaatiossa c-KIT:n estävä vasta-aine kumosi merkittävästi lisääntyneen dopa-positiivisten melanosyyttien määrän sekä hyperpigmentaation UVB-indusoidun pigmenttiprosessin varhaisessa vaiheessa [16] , mikä osoittaa vahvasti, että SCF:n sitoutumisella c-KIT:hen on tärkeä rooli UVB-indusoidussa melanosyyttien aktivoinnissa, mikä johtaa hyperpigmentaatioon. Yhdessä SCF:n lisääntyneen ilmentymisen kanssa geeni- ja proteiinitasoilla sen c-KIT-reseptorin geenin ilmentymistaso nousi myös keskimäärin 2{13}}leesionaalisessa SL-epideriksessä [2]. Johdonmukaisesti c-KIT-mRNA:n lisääntyneen ilmentymisen kanssa lisääntyi immunovärjäytyminen c-KIT-vasta-aineella, joka oli lokalisoitunut melanosyytteihin leesionaalisessa SL-epideriksessä (kuvio 1m, n) [2]. Tämä viittaa siihen, että SCF:n ja sen reseptorin c-KIT:n ekspressio lisääntyy koordinoidusti leesionaalisessa SL-epideriksessä.

Toisaalta muut ryhmät ovat olettaneet, että keratinosyyttien kasvutekijällä (KGF)/KGF-reseptorilla (KGFR) on tärkeä rooli SL-muodostuksen käynnistymisessä ja lisääntyneessä pigmentaatiossa vain aiempien SL-vaiheiden orvaskedessä [25]. SL:ien leesionaalisessa epidermiksessä [30] ja/tai dermiksessä [25] KGF:n ilmentyminen lisääntyy vain immuunivärjäytymistasolla, vaikka sen geenin ja proteiinin ilmentymistä koskevat lisätutkimukset ovat tarpeen, jotta voidaan tehdä lopullisia johtopäätöksiä siitä, että se on luontainen sytokiini. SL:t. Vaikka IL-1:n tiedetään saavan keratinosyyttejä stimuloimaan KGF:n tuotantoa, jää epäselväksi, kuinka KGF:n ilmentyminen lisääntyy leesionaalisessa epidermiksessä, jossa IL-1:n ilmentyminen on melko vähäistä [2]. Tietenkin tulisi määrittää, onko TNF:llä (joka on vaurioituneen orvaskeden lisääntynyt säätely) kykyä stimuloida KGF-tuotantoa. Koska KGF:n ilmentyminen ihossa rajoittuu ensisijaisesti dermaalisiin fibroblasteihin, on todennäköistä, että KGF:n lisääntynyt ilmentyminen ihon fibroblastien toimesta SL:ien leesionaalisessa dermis [25] liittyy sekä keratinosyyttien lisääntyneeseen proliferaatioon että stimuloituneeseen melanogeneesiin. Siten on todennäköistä, että ihon fibroblastit aktivoituvat jatkuvasti UV-altistuksen vaikutuksesta vapauttaen KGF:ää, joka vaikuttaa suoraan tai epäsuorasti perusteellisesti keratinosyyteihin SCF:n ilmentymisen moduloimiseksi, mikä myötävaikuttaa SL:n hyperpigmentaatioon [25].

Seuraavaksi määritimme biologiset mekanismit, joilla EDN1:n eritys lisääntyy SL:ien leesionaalisessa epidermiksessä. On hyvin tunnettua, että ihmisen keratinosyyttien EDN-erityksen stimulaatioon liittyviä biologisia tekijöitä ovat IL-1, tuumorinekroositekijä (TNF) ja endoteliinia konvertoiva entsyymi (ECE)-1. Havaintomme UVB-melanoosiin liittyvästä autokriinisestä sytokiinistimulaatiosta osoittivat, että IL-1:n noususäätely on pääasiallisesti vastuussa EDN1:n ja SCF:n tuotannon stimuloinnista UVB:lle altistuvissa ihmisen keratinosyyteissä [12,16]. Siten IL-1 ja sen on havaittu olevan EDN-erityksen potenttistimulaattoreita, joilla on viivästynyt huippu ihmisen keratinosyyteissä viljelmässä, joka muistuttaa UVB-indusoitua EDN:n eritystä [11]. On myös hyvin tunnettua, että UVB-säteily stimuloi merkittävästi IL-1:n, mutta ei IL-1:n vapautumista viljellyissä ihmisen keratinosyyteissä ja että IL-1:n estävä vasta-aine estää merkittävästi lisääntynyttä EDN1:n eritystä. [11], mikä osoittaa, että UVB-indusoitu hyperpigmentaatio välittyy epidermaalisten melanosyyttien aktivoitumisen kautta, mikä johtuu UVB:lle altistuneiden keratinosyyttien lisääntyneestä EDN1:n erityksestä. Lisäksi mSCF-proteiinin ilmentymisen on havaittu stimuloivan merkittävästi IL-1-käsittelyn ihmisen keratinosyyteissä viljelmässä [16]. Siksi määritimme seuraavaksi, säädeltiinkö myös IL-1 EDN1:n ja/tai SCF:n ilmentymistä SL:iden leesionaalisessa epidermiksessä. Mielenkiintoista on, että semikvantitatiivinen RT-PCR-analyysi paljasti, että IL-1-mRNA:n ilmentyminen on melko heikosti säädeltyä leesion epidermiksessä [16]. Tämän RT-PCR-analyysin mukaisesti immunohistokemia IL-1-vasta-aineella paljasti heikomman immuunivärjäytymisen leesionaalisessa orvaskessä kuin ei-leesionaalisessa epidermiksessä (kuva 1o,p) [2], mikä viittaa siihen, että IL{ {33}} ei ole vastuussa EDN1:n ja SCF:n lisääntyneestä ilmentymisestä SL:iden leesionaalisessa epidermiksessä.

Mitä tulee mekanismeihin, jotka ovat taustalla EDN1:n lisääntyneen ilmentymisen SL:issä, Tsuboiet ai. raportoivat IL-1:n lisäksi TNF:stä pitoisuutena 10 ng/ml. olla voimakas stimulaattori (10--kertaisesti) viljeltyjen ihmisen keratinosyyttien EDN-eritykseen [39]. Mitä tulee SCF:n lisääntyneen ilmentymisen SL:issä taustalla olevaan mekanismiin, tutkimme seuraavaksi TNF:n vaikutuksia SCF:n ilmentymiseen viljellyissä ihmisen keratinosyyteissä. Western blottaus käyttämällä ananti-SCF-vasta-ainetta osoitti, että TNF stimuloi merkittävästi mSCF:n tuotantoa [15]. Siksi päätimme seuraavaksi, onko TNF:ää säädelty EDN1:n ja/tai SCF:n ilmentymisen stimuloimiseksi SL:ien leesionaalisessa epidermiksessä. Mielenkiintoista on, että semikvantitatiivinen RT-PCRa-analyysi paljasti, että TNF-mRNA:n ilmentyminen lisääntyy merkittävästi leesionaalisessa SL-epideriksessä [2]. RT-PCR-analyysin mukaisesti immunohistokemia anti-TNF-vasta-aineella paljasti voimakkaamman immunovärjäytymisen leesionaalisessa SL-epideriksessä kuin ei-leesionaalisessa epidermiksessä (kuvio 1q,r) [2]. Siten oli ajateltavissa, että TNF:n lisääntynyt ilmentyminen on pääasiallisesti vastuussa EDN1:n ja SCF:n lisääntyneestä ilmentymisestä SL:ien leesionaalisessa epidermiksessä.

Mitä tulee EDN1:n lisääntyneeseen ilmentymiseen liittyvään mekanismiin, määritimme seuraavaksi, onko ECE-1 lisääntynyt leesionaalisessa SL-epideriksessä. Koska mikään tutkimus ei ole tähän mennessä kuvaanut ECE-1:n ilmentymistä ihmisen keratinosyyteissä, karakterisoimme ECE-1:n viljellyissä ihmisen keratinosyyteissä verrattuna endoteelisoluihin. ECE-1-aktiivisuuden analyysi erityyppisissä ihosoluissa paljasti, että ihmisen keratinosyyteillä eikä ihmisen melanosyyteillä on ECE-1-aktiivisuutta, jota esiintyy vähemmän kuin endoteelisoluissa [40]. Western blotting, jossa käytettiin ECE-1:lle valmistamiamme vasta-aineita, osoitti, että ECE-1-proteiinia on ihmisen endoteelisoluissa, ihmisen fibroblasteissa ja ihmisen keratinosyyteissä, mutta ei ihmisen melanosyyteissä [40]. ECE-1-aktiivisuuden määritykset supernatanteissa immunosaostuksen jälkeen ECE-1-vasta-aineella osoittivat, että endoteelisoluilla ja ihmisen keratinosyyteillä on havaittavissa olevaa ECE-1-aktiivisuutta pH:ssa 6,8, mikä korreloi hyvin ECE{ {15}} immunosaostettu ECE-vasta-aineellamme-1 [40]. ECE-1-mRNA-tasojen semikvantitatiivinen RT-PCR-analyysi paljasti, että IL-1, mutta ei TNF:llä, oli lievästi stimuloiva vaikutus ECE-1-geenin ilmentymiseen viljellyissä ihmisen keratinosyyteissä [40]. RT-PCR-analyysin mukaisesti Western blotting paljasti, että IL-1, mutta ei TNF, stimuloi ECE-1-proteiinin ilmentymistä viljellyissä ihmisen keratinosyyteissä [40]. Lopuksi määritimme, onko ECE-1 myös tehostettu stimuloimaan EDN1:n ilmentymistä SL:iden leesionaalisessa epidermiksessä. SL:issä lisääntyneen TNF:n stimuloivan vaikutuksen puuttuessa ECE-1:n mRNA:n ilmentymistasossa ei ollut eroa SL:iden leesion ja ei-leesionaalisen epidermiksen välillä [2], mikä viittaa siihen, että ECE-1 ei ole vastuussa lisääntyneestä EDN1:n erittymisestä SL:issä.

Kuvio 3 esittää yhteenvedon autokriinisestä stimulaatiosta ihmisen keratinosyyteissä viljelmässä. Mitä tulee biologisiin mekanismeihin, jotka johtavat EDN- ja SCF-signalointikaskadien [9] aktivoitumiseen, in vitro -tutkimuksemme viittaavat mielenkiintoiseen vastakohtaan, että vaikka IL-1:n noususäätely on pääasiallisesti vastuussa EDN1- ja SCF-tuotannon stimulaatiosta UVB-säteilyssä. melanoosissa TNF:n lisääntyminen liittyy pääasiassa näiden samojen sytokiinien stimuloituun tuotantoon SL:issä.

3.4. EDN1:n ja SCF:n yhdistelmän synergistiset stimuloivat vaikutukset

Olemme jo raportoineet, että viljeltyjen ihmisen melanosyyttien stimuloidussa DNA-synteesissä on synergiaa mitattuna 14C-tymidiinin sisällyttämisellä SCF:n ja EDN1:n samanaikaisesti esiintymiseen [41]. Samanlainen synergia oli myös melaniinin synteesin stimulaatiossa mitattuna 14C-tiourasiilin sisällyttämisellä viljeltyihin ihmisen melanosyytteihin SCF:n ja EDN1:n samanaikaisesti läsnä ollessa [41]. Sitä vastoin EDN1:n ja granulosyyttimakrofagipesäkkeitä stimuloivan tekijän (GM-CSF) tai HGF:n välillä ei ollut tällaista synergiaa [13,42]. Mitä tulee noihin synergistisiin vaikutuksiin liittyviin signalointimekanismeihin, havaitsimme, että SCF- ja EDN1-signaloinnin välinen ristikeskustelu sai alkunsa c-KIT:n tyrosiinifosforylaatiosta, jota aktivoitu PKC stimuloi epäsuorasti, mikä tehostaa Shc-Grb{:n muodostumista. {18}}SOS-kompleksi, joka puolestaan ​​johtaa Ras/Raf-1/MEK/MAP-kinaasisilmukan synergistiseen aktivaatioon [41].

3.5. Keskinäiset vuorovaikutukset EDN/EDNBR:n ja SCF/c-KIT:n välillä

Seuraavaksi määritimme, laukaiseeko SCF:n lisääntynyt tuotanto EDNBR:n ilmentymisen tai sen affiniteetin EDN-ligandiin ihmisen melanosyyteissä sen lisäksi, että sillä on stimuloiva vaikutus niiden lisääntymiseen. Western blot -analyysi paljasti, että SCF voi stimuloida EDNBR-proteiinin ilmentymistä viljellyissä ihmisen melanosyyteissä [43]. Kun EDNBR:n affiniteettia ligandiinsa arvioitiin viljellyssä ihmisen melanosyyteissä ligandin sitoutumismääritystä käyttäen, 125I-leimatun EDN1:n sitoutumisen EDNBR:ään havaittiin merkittävästi lisääntyneen kaksi päivää SCF:n kanssa inkuboinnin jälkeen [43]. Yhdessä nämä havainnot osoittavat, että varhaisessa vaiheessa ilmennetty SCF voi lisätä EDNBR:n ilmentymistä, mikä saa melanosyyttejä herkemmiksi myöhemmälle EDN1:n erittymiselle. Toisaalta, kun viljeltyjä ihmisen melanosyyttejä käsiteltiin 48 tuntia EDNl:llä 10 nM:lla, ligandin sitoutumismääritys 125I-SCF:llä paljasti, että EDN1 lisäsi selvästi SCF:n sitoutumisaffiniteettia c-KIT-reseptoriin [43].

4. Yhteenveto SL:iden patobiologiasta

Taulukko 1 esittää yhteenvedon parakriinisistä sytokiiniverkostoista, joita esiintyy erilaisissa epidermaalisen hyperpigmentaarisen häiriön yhteydessä. Mitä tulee näihin verkkoihin, SL:t ovat hyvin samankaltaisia ​​kuin UVB-melanoosi, lukuun ottamatta sytokiinejä, kuten TNF, jotka lisäävät EDN1:n ja SCF:n tuotantoa.

Mitä tulee biologisiin mekanismeihin, jotka johtavat EDN- ja SCF-signalointikaskadien lisääntyneeseen toimintaan, in vitro -tutkimuksemme viittaavat siihen, että vaikka IL:n-1 noususäätely on pääasiassa vastuussa EDN1- ja SCF-tuotannon stimulaatiosta UVB-melanoosissa, noususäätely TNF liittyy näiden samojen sytokiinien stimuloituun tuotantoon SL:issä. Kuva 4 esittää yhteenvedon monimutkaisista suhteista SCF- ja EDN1-sidosten välillä SL:iden orvaskedessä. Tämä sisältää synergismin SCF:n ja EDN1:n välillä sekä EDNBR:n ja c-KIT:n aktivoinnin SCF:n ja EDN1:n toimesta. Keratinosyyttien TNF:n vapautuminen simuloi SCF:n ja EDN:n tuotantoa autokriinisellä tavalla, joilla molemmilla on synergistinen vaikutus melanosyyttien aktivaatioon sekä stimuloiva vaikutus vastaavien reseptoriensa, c-KIT:n ja EDNBR:n, ilmentymiseen. Nämä synergistiset ja solujen väliset vuorovaikutukset helpottavat melanosyyttien aktivaatiota suuremmassa määrin SL-solujen leesionaalisessa epidermiksessä kuin UVB:lle altistuneessa epidermiksessä, mikä johtaa SL-solujen intensiivisempään hyperpigmentaatioon.

Tuloksemme viittaavat kollektiivisesti siihen, että kahdella signalointikaskadilla, EDN1/EDNBR:llä ja mSCF/c-KIT:llä, on luontainen ja koordinoitu rooli, joka korostaa melanosyyttien mitogeneesiä ja melanogeneesiä SL:iden hyperpigmentoituneessa epidermiksessä. Kuvio 5 esittää biologisen sekvenssin SL:ihin liittyville hyperpigmentaatiomekanismeille, joissa tuntemattomat kasvaimia aiheuttavat tekijät, jotka johtuvat kumulatiivisesta DNA-vauriosta kaukaisessa menneisyydessä, saavat keratinosyyttejä tuottamaan ja erittämään TNF:ää. Siten TNF saa keratinosyytit ylituottamaan melanogeenisiä sytokiinejä, kuten SCF:tä ja EDN1:tä autokriinisellä tavalla, mikä laukaisee viereiset melanosyytit stimuloimaan melaniinin synteesiä, mikä johtaa epidermaalisen hyperpigmentaatioon.

5. Terapeuttiset paikalliset hoitomenetelmät

Perustuen koordinoituun melanogeeniseen parakriiniseen verkkoon ja aktivoituihin signalointimekanismeihin, jotka johtavat melanosyyttien aktivaatioon leesionaalisessa SL-epideriksessä, välttämättömän melanogeenisen solunsisäisen signaloinnin estäminen on toivottava terapeuttinen lähestymistapa pigmentin muodostumista ehkäisevien vaikutusten saavuttamiseksi SL:issä. Tällainen lähestymistapa saattaa aiheuttaa hypopigmentaatiota, mutta sen ei pitäisi olla tehokas ei-leesionaalisessa ihossa, jossa sellaiset signalointikaskadit eivät aktivoidu melanosyyteissä. Toisaalta tyrosinaasiaktiivisuuden estäminen on toinen tapa parantaa hyperpigmentaatiota SL:issä, vaikka se saattaa aiheuttaa hypopigmentaatiota ja saattaa myös olla tehokas ei-leesionaalisessa ihossa.

5.1. Estää välttämättömän melanogeenisen solunsisäisen signaalin

Koska lähes kaikki geneettisiin hypopigmentaarisiin häiriöihin johtavat mutaatiot esiintyvät EDN1/EDNBR- ja SCF/c-KIT-akselilla [44] ja koska EDN1/SCF:llä on synergistinen stimuloiva vaikutus solujen lisääntymiseen ja melanisaatioon viljellyissä ihmisen melanosyyteissä, on mahdollista, että se estää. joko EDN1/EDNBR- tai SCF/c-KIT-signalointi voisi estää hyperpigmentaation johtuen EDN1:n ja SCF:n koordinoidusti lisääntyneestä ilmentymisestä, koska synergististä stimuloivaa vaikutusta ei esiinny. Siksi yritimme saavuttaa pigmenttiä estäviä vaikutuksia SL:issä estämällä EDN/EDNBR-signalointilinjan.

EDN-aktivoitu solunsisäinen signalointireitti koostuu sitoutumisesta EDNBR:ään, aktivoivasta PKC:stä, MAP-kinaasikaskadista ja cAMP/PKA-kaskadista [34,35,41]. Siten nämä solutoiminnot alkavat EDN1:n sitoutumisella G-proteiiniin kytkettyyn EDNBR:ään, jota seuraavat peräkkäiset signalointiprosessit, jotka koostuvat pääasiassa PKC:stä ja MAPK:sta. Reseptoriinsa sitoutumisen jälkeen EDN1 laukaisee polyfosfoinositidin hydrolyysin aktivoimalla fosfolipaasi C:tä, joka tuottaa inositolitrifosfaatteja (IP3) ja diasyyliglyserolia, mobilisoi solunsisäistä Ca plus plus ja aktivoi PKC:tä. PKC-aktivaatio saavutetaan siirtymällä sytosolista plasmakalvoon ja aktivoi Raf{10}} fosforylaation kautta. Siten Raf-1 näyttää olevan konvergentti PKC- ja MAPK-polkujen välillä. Raf-1-aktivointi johtaa sarjan MAPK-reitin välituotteita, jotka koostuvat MEK:stä, ERK:sta ja RSK:sta. Fosforyloitu Raf-1 aktivoi MEK:n fosforyloimalla ja aktivoitu MEK fosforyloi ERK:n. Aktivoitu ERK fosforyloi sitten mikroftalmiaan liittyvän transkriptiotekijän (MITF) seriinissä 75, mikä johtaa koaktivaattorin värväämiseen useiden melanogeenisten tekijöiden geeniekspression säätelemiseksi [41]. Samanaikaisesti aktivoitu MAPK johtaa RSK:n aktivoitumiseen, joka fosforyloi CREB:tä, mikä johtaa MITF:n transkriptioon. Toisaalta aktivoidulla PKC:llä on ristipuhelu adenyylisyklaasikaskadin kanssa cAMP:n tuottamiseksi[8], mikä johtaa PKA:n aktivaatioon, joka myös aktivoi CREB:n fosforyloimalla, mikä johtaa MITF:n lisääntyneeseen ilmentymiseen. MITF-proteiinin lisääntynyt taso stimuloi melanosyyttispesifisten geenien, mukaan lukien tyrosinaasin, PMEL17:n, EDNBR:n, c-KIT:n ja CDK2:n, ilmentymistä.

Koska useat solunsisäiset signalointireitit johtavat stimuloituun melanogeneesiin melanosyyteissä ja EDN-signalointikaskadi liittyy erityisesti PKC-reittiin, johon liittyy kalsiumin mobilisaatio endoplasmisesta retikulumista [13], käytimme kalsiummobilisaatiomääritystä erilaisten EDNBR-antagonistien seulomiseen. yrttiuutteista. Kalsiumin mobilisaatio endoplasmisesta retikulumista tapahtuu IP3:n ja diasyyliglyserolin muodostumisen jälkeen, mikä johtuu polyfosfoinositidin hydrolyysistä aktivoidun fosfolipaasi C:n kautta. Kun ihmisen melanosyyttejä käsitellään viljelmässä EDN1:llä, fura-2AM-reagenssilla havaittava kalsiumin mobilisaatio tuottaa fluoresenssia sitoutumisen jälkeen vapautuneeseen kalsiumiin, mikä näkyy nopeasti ilmaantuvana keltaisena värinä, joka voidaan mitata reaaliajassa digitaalinen kuvantamismikroskopia. Monien yrttiuutteiden seulonnan perusteella havaitsimme, että esi-inkubointi Matricaria chamomilla -uutteen kanssa keskeytti EDN1:n [1] indusoiman kalsiummobilisaation, mikä viittaa siihen, että se voi toimia tehokkaana antagonistina EDNBR:ää vastaan. M. chamomilla, joka tunnetaan yleisesti kamomillana, on yksivuotinen kasvi, joka kuuluu Asteraceae-heimoon. M. chamomilla on suosituin kasviperäisen kamomillan lähde, vaikka kamomillana käytetään myös muita lajeja.

Perustuen M. chamomilla -uutteesta fraktioitujen näytteiden estävään vaikutukseen EDN{{0}}indusoituun kalsiumin mobilisaatioon viljellyissä ihmisen melanosyyteissä, tunnistimme spiroeetterin sen aktiiviseksi yhdisteeksi, jolla on voimakas kyky keskeyttää kalsiumin mobilisaatio (kuva 6). ) [1]. Spiroeetterillä on kaksi isomeeriä (E ja Z), ja spiroeetterin E-isomeeri voi kokonaan poistaa kalsiumin mobilisaation yli 1 uM pitoisuuksilla. Käsittely spiroeetteri-E-isomeerillä 0,2 ja 1,0 prosentin pitoisuuksilla vähensi merkittävästi UVB-indusoitua pigmentaatiota ruskeankeltaisessa marsun ihossa ∆L-arvolla arvioituna, mikä osoitti, että EDN-välitteisen signalointikaskadin estäminen on tehokas UVB:n aiheuttaman hyperpigmentaation estämisessä. Tämä on tärkeä in vivo -todiste, joka osoittaa EDN-kaskadin sisäisen osallisuuden UVB-melanoosissa. Toisaalta, kuten odotettiin, M. chamomilla -uutteella oli voimakas kyky hävittää melanosyyttiviljelmässä esi- tai yhteisinkuboituna. EDN1-indusoitu DNA-synteesin lisääntyminen (mitattuna 14C-tymidiinin liittymisellä) sekä melaniinin synteesissä (mitattuna 14C-tiourasiilin liittymisellä) viljeltyjen ihmisen melanosyyttien toimesta. Rinnakkaisessa tutkimuksessa, jossa käytettiin viljeltyjä ihmisen keratinosyyttejä, varmistimme, että M. chamomilla -uutteella ei ollut estävää vaikutusta IL-1 -indusoituun EDN1:n eritykseen [1]. Lisäksi käyttämällä ihmisen melanosyyteistä peräisin olevia tyrosinaaseja vahvistimme, että M. chamomilla -uutteella ei ollut inhiboivaa vaikutusta tyrosinaasiaktiivisuuteen in vitro, toisin kuin hyvin tunnetuilla valkaisuaineilla, kojiinihapolla ja arbutiinilla [1]. Kun M. chamomilla -uutetta levitettiin paikallisesti päivittäin ruskeankeltaiselle marsun iholle kahden viikon ajan välittömästi UVB-säteilytyksen jälkeen, UVB-indusoidun pigmentaation voimakkuus väheni merkittävästi verrattuna hoitoon, jossa oli 10 prosenttia arbutiinia tai vehikkeliä [1].

Ihmisellä tehdyssä kliinisessä tutkimuksessa M. chamomilla -uutteiden paikallisen levityksen UVB-säteilylle altistuneelle ihmisen kyynärvarren iholle kuuden viikon ajan välittömästi säteilytyksen jälkeen havaittiin estävän merkittävästi UVB-indusoitua hyperpigmentaatiota värieromittarilla mitattuna ja ilmaistuna ∆:na. L arvo.

Käyttämällä M. chamomilla -uutetta sisältävää tikkutyyppistä vahaa tutkimme kliinisiä vaikutuksia pigmentaatioon SL:issä. Tässä kliinisessä tutkimuksessa jokainen pigmentoitunut täplä tutkittiin värimuutosten varalta ja kliinisen paranemisen asteet ja validiteetti arvioitiin. Tokion naisten lääketieteellisessä yliopistossa suoritettu kliininen arviointi paljasti, että kahden kuukauden hoito M. chamomilla -uutteella johti siihen, että 48 prosentilla koehenkilöistä havaittiin huomattavaa paranemista ja 4 0 prosentilla lievää paranemista [1]. Pigmentaatiotason muutoksissa ∆L-arvoilla mitattuna kaikkien SL-potilaiden ∆L-arvo nousi selvästi yli kaksi, mikä on näkyvästi tunnistettavissa oleva taso 2-3 kuukauden hoidon jälkeen. Pigmentaatiotaso laski merkittävästi ∆L-arvoilla mitattuna välillä 0, 1 ja 2 kuukautta hoidon jälkeen (kuva 7). Kaiken kaikkiaan kolmen kuukauden kliininen arviointi paljasti, että hoito M. chamomilla -uutteella johti siihen, että 42 prosentilla koehenkilöistä havaittiin huomattavaa paranemista, 12 prosentilla kohtalaista paranemista ja 25 prosentilla lievää paranemista. Toinen kliininen tutkimus, joka suoritettiin kahdessa toisiinsa liittyvässä dermatologisessa sairaalassa Tokiossa, osoitti, että hoito M. chamomilla -uutteella vähensi vähitellen pigmentaatiota ja johti kuuden kuukauden jälkeen noin 70 prosentilla koehenkilöistä enemmän kuin vähäiseen paranemiseen, mukaan lukien 10 prosentilla katoaminen ja 15 prosentilla huomattava parannus. . Kahdessa tapauksessa SL:t hävisivät kokonaan noin kuuden kuukauden hoidon jälkeen ∆L-arvojen noustessa 8,4:ään ja 6,9:ään kuuden kuukauden hoidon jälkeen (kuva 8) [1].

Yhteenvetona voidaan todeta, että mitä tulee SL:ien terapeuttisiin lähestymistapoihin estämällä välttämätön melanogeeninen solunsisäinen signalointi, yllä olevat kliiniset tutkimukset viittaavat siihen, että EDN1/EDNBR:ään liittyvän signaloinnin estäminen on tehokas terapeuttinen hoito SL:ille ilman hypopigmentoivia vaikutuksia.

5.2. Tyrosinaasiaktiivisuuden estäminen

Tyrosinaasiaktiivisuuden estäminen on toinen lähestymistapa hyperpigmentaation parantamiseksi SL:issä, jolla on mahdollisia hypopigmentaation haittoja, mutta potentiaalinen hyöty, joka on tehokas myös ei-leesionaalisessa ihossa. Koska valkaisuaineet on yleensä suunniteltu UVB-melanoosin hoitoon, ei ole tehty kliinistä kaksoissokkotutkimusta valkaisuaineiden mahdollisista pigmentoitumista ehkäisevistä vaikutuksista SL:iin. Teimme kaksoissokkoutetun puolikasvotutkimuksen 27:llä japanilaisella vapaaehtoisella naispuolisella vapaaehtoisella. Tuossa kliinisessä tutkimuksessa kasvovedet, joissa oli 6 prosenttia L-askorbaatti-2-fosfaatti 3 Na:ta (APS) tai ilman niitä (testivoiteita/plasebovoidetta), levitettiin paikallisesti kahdesti päivässä kasvoille 24 viikon ajan [45]. Edustavat valokuvat koehenkilöiden nro 012 ja nro 016 kasvoista ennen ja jälkeen hoidon osoittivat, että testivedellä käsiteltyjen SL-solujen pigmenttitaso näytti hieman laskevan yhdessä testivedellä käsitellyn ei-leesionaalisen ihon pienen laskun kanssa [ 45]. Sitä vastoin lumelääkeaineella käsiteltyjen SL:iden ja ei-leesionaalisen ihon pigmenttitaso näytti pysyvän ennallaan. Kun L-arvot koevedellä käsitellyissä SL:issä nousivat merkittävästi 24 viikon hoidon jälkeen, L-arvot lumelääkevedellä käsitellyissä SL:issä pysyivät ennallaan (kuva 9) [45]. OL-arvojen vertailut ennen hoitoja ja niiden jälkeen paljastivat merkittävästi korkeamman oL-arvo koevedellä käsitellyissä SL:issä kuin lumelääkevedellä käsitellyissä SL:issä (kuva 9). Nämä havainnot viittaavat siihen, että APS:ää sisältävällä testivedellä oli huomattavasti voimakkaampi pigmenttiä estävä vaikutus SL:iin kuin lumelääkevedellä. Kun L-arvot koevedellä käsitellyssä ei-leesionaalisessa ihossa nousivat merkittävästi 24 viikon hoidon jälkeen, L-arvot lumelääkevedellä käsitellyssä ei-leesionaalisessa ihossa pysyivät muuttumattomina. OL-arvojen vertailu ennen ja jälkeen hoitoja paljasti merkittävästi korkeamman oL-arvon testivedellä käsitellyssä ei-leesionaalisessa ihossa kuin lumelääkevedellä käsitellyssä ei-leesionaalisessa ihossa [45]. Nämä havainnot viittaavat siihen, että testivedellä oli huomattavasti voimakkaampi valkaiseva vaikutus ei-vaurioituneeseen ihoon kuin lumelääkkeellä. Pigmentaatiota ehkäisevien vaikutusten vertailu SL:n ja ei-leesionaalisen ihon välillä paljasti, että vaikka SL:issä oli merkittävästi korkeammat oL-arvot testiemulsiolla suoritetun ennen ja jälkeen hoidon välillä kuin ei-leesionaalisessa ihossa, oL-arvot esiintyivät samalla tasolla. SL:issä ja ei-leesionaalisessa ihossa ilman merkittävää eroa niiden välillä [45].

Cistanche estää tyrosinaasin aktiivisuutta.

L-arvojen ja melaniiniindeksien välinen suhde kaikissa tämän kliinisen tutkimuksen mittauksissa paljasti merkittävän korrelaation niiden välillä. Tämä tulos osoitti, että 2.0 ∆L-arvo vastasi suunnilleen 20 ∆ melaniiniindeksiä, ja melaniiniindeksin herkkyys oli 10-kertaisesti L-arvoa suurempi. Vertailu L-arvojen ja melaniiniindeksien välillä jokaisessa mittauksessa viikoilla 0 ja 24 SL:illä paljasti merkittäviä korrelaatioita. Nämä L-arvojen ja melaniiniindeksien väliset vertailut osoittivat, että koevedellä käsitellyissä SL-väreissä esiintyi selvä jakautumismuutos kohti vaaleampaa väriä, kuten suurempaa L-arvoa ja pienempi melaniiniindeksi, kun taas lumelääkevedessä ei havaittu selkeää jakautumismuutosta. -käsitellyt SL:t [45].

Yhteenvetona voidaan todeta, että mitä tulee SL:ien terapeuttiseen lähestymistapaan, jossa käytetään tyrosinaasi-inhibiittoria, edellä olevien löydösten summa osoittaa vahvasti, että APS:llä on heikko, mutta merkittävä pigmenttiä estävä vaikutus SL:iin ja merkittävä valkaisuvaikutus jopa normaaliväriseen terveeseen ihoon, ilman hypopigmentointivaikutusta.

6. Johtopäätökset

Yhteenvetona voidaan todeta, että mitä tulee melanosyyttien aktivaatiomekanismeihin ja SL:ien terapeuttiseen paikalliseen hoitoon, mikä perustuu yllä oleviin löydöksiin melanosyyttien aktivaatiomekanismista SL:issä sekä kliinisen tehon perusteella, joka on saatu käyttämällä EDN-signalointisalpaajaa ja tyrosinaasin estäjää, on vahvasti ehdotettu, että EDN-signaloinnin estäjä ja tyrosinaasin estäjä on toivottava terapeuttinen hoito SL:ille.

cistanche-tabletit

Saat lisätietoja napsauttamalla kuvaa.