Cistanche Deserticolan vaikutukset akuuttiin keuhkovaurioon rotilla, joilla on sepsis

Yhteystiedot: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Sähköposti:audrey.hu@wecistanche.com

[Abstrakti]Tavoite: Tutkia vaikutustaCistanche deserticolaakuutissakeuhkovaurio(ALI) rotilla, joilla on sepsis. Menetelmät: Sepsiksen malli tehtiin umpisuolen ligaatiolla ja pistoksella. Histopatologiset tutkimukset suoritettiin ja ALI:n biologiset markkerit mitattiin. Tulokset: Valomikroskoopin alla suolaliuosryhmässä oli turvotustakeuhkojen välitila, suuri määrä erytrosyyttejä ja neutrofiilejä sekä plasmaproteiinia keuhkorakkuloissa. Thekeuhkomärkä/kuivapaino, neutrofiilien määrä ja proteiinipitoisuus keuhkojen alveolaarisessa huuhtelunesteessä keuhkojen verisuonten läpäisevyys ja keuhkojen alveolaarinen läpäisevyys ja MDA, SOD sekä MPO nousivat vastaavasti merkittävästi. Ryhmässä kanssaCistanche deserticolaNämä ALI-indeksit olivat merkittävästi alhaisemmat kuin suolaliuosta saaneessa ryhmässä.

Johtopäätös: Cistanche deserticolasillä on suuri vaikutus ALI:hen rotilla, joilla on sepsis. Terapeuttinen mekanismi on mahdollisesti neutrofiilien ja oksidatiivisten vapaiden radikaalien estäminen.

【Avainsanat】Sepsis; Akuutti keuhkovaurio; Cistanche deserticola

Sepsis on kliininen hätä- ja kriittinen sairaus, ja tehokkaiden hoitolääkkeiden etsiminen on aina ollut suuri ongelma kliinisessä ja perustutkimuksessa. Perinteisen kiinalaisen lääketieteen sepsiksen patogeneesi on vanhurskauden puute ja pahuuden runsaus. Kehon pahan hyvinvoinnin hyökkäävä hoito on yksi tehokkaista hoitotoimenpiteistä.Cistancheon perinteinen tonic kiinalainen lääketiede. Farmakologiset tutkimukset ovat vahvistaneet, että sillä on suojaavia toimintoja, kuten solujen DNA-synteesin nopeuttaminen ja happivapaiden radikaalien vastustuskyky. Kirjoittaja tarkkailee kokeellisesti vaikutustaCistanche keuhkosairausvauriostasepsiksessä, jotta sepsiksen hoitoa voitaisiin tutkia tehokkaasti.

Cistanche Echinacoside hoitaa keuhkosairauksia

1 Materiaali ja menetelmät

1. 1 EläinTerveys 40 urospuolista 5D-rottaa, paino 200-250 g, toimittanut Huazhongin tiede- ja teknologiayliopiston koeeläinkeskus, laaduntarkastusnumero: TJLA-2008-1670, jaettiin satunnaisesti 3 ryhmään: 8 normaalia suolaliuosryhmää, Ig/ 12 rottaa ml munakoisopastaryhmässä ja 12 5g/mlCistancheryhmä. Koe-eläimille annettiin vastaavat lääkkeet rutiiniletkurilla 15 päivän ajan kahdesti päivässä (Cistanchedeserticola-uutetta toimitti tämän sairaalan perinteisen kiinalaisen lääketieteen valmistushuone), ja koe-eläimissä käytettiin annosta 200 mg/kg kirjallisuuden U] menetelmän mukaisesti 12 minuuttia umpisuolen ligaation ja perforoinnin jälkeen. Näytteiden kokoelma.

1.2 Rotan keuhkojen histologinen tutkimus.Ota pieni määrä eläimen vasenta lohkoakeuhkojokaisesta ryhmästä kiinnitä se 10-prosenttisella formaldehydillä, upota leike parafiinilla ja HE-värjäykset, tarkkailee tavallisella optisella mikroskoopilla ja ota tämän perusteellakeuhkoongelma 1 mm3:n valmistaminen 25:lle Se kiinnitettiin prosenttiseen glutaraldehydiliuokseen, kiinnitettiin sitten 1-prosenttiseen tetroksidiliuokseen, kuivattiin etanolilla ja asetonilla, upotettiin Epon 81:een, valmistettiin ultraohuet osat, värjättiin uraanilyijyllä ja tarkkailtiin transmissioelektronilla mikroskooppi.

1.3 Rotan keuhkoongelman märkä/kuivapainosuhteen, alveolaarisen huuhtelunesteen solujen lukumäärän ja proteiinipitoisuuden Painosuhteen määrittäminen.Toiselle rottien ryhmälle tehtiin keuhkorakkuloiden huuhtelu rintakehänpoiston jälkeen, ja huuhtelunesteelle tehtiin solujen lukumäärä ja soluluokittelu mikroskoopilla. Proteiinipitoisuuden määrittämiseen ja laskemiseen käytetään Coomassie briljanttisinistä menetelmääkeuhkoläpäisevyysindeksi (alveolaarisen huuhtelunesteen proteiini/plasmaproteiini, LPI).

1.4 Muutokset keuhkojen verisuonten läpäisevyydessä (PVP) rotillaZhoun et ai. esittelemän menetelmän mukaisesti. (2) antamisen jälkeen kunkin ryhmän eläimille tehtiin umpisuolen ligaatio ja rei'itys, ja reisisuoneen 50 mg/kg lantaani-injektiota käytettiin rintakehän avaamiseen ja keuhkojen poistamiseen. Poista ympäröivät ongelmat, liotakeuhkoihinformamidiliuoksessa (formamidin määrä 20mg/100g ruumiinpainoa), inkuboidaan 45-50T-inkubaattorissa 72h, odota kunnes kaikki ongelmapigmentit ovat huuhtoutuneet, ota ongelmat pois, sentrifugoi ja ota supernatantti. Suorita kolorimetria ultraviolettispektrofotometrillä 620 nm:ssä ja laske etanolipitoisuus standardikäyrän mukaisesti PVP:n muutoksen määrittämiseksi.

1.5 Malondialdehydin (MDA) määritys rotan keuhkoongelmassaMDA-aktiivisuuden määrittämiseen käytettiin tiobarbituurihappomenetelmää (TBA). Lisää 4 ml 1,67 mol/l rikkihappoa. 0.541 % fosfonihappoa 50 ml:aan testinäytettä, sekoita hyvin, sentrifugoi nopeudella 3000 r/min 10 minuuttia ja käsittele sakka vielä kerran kuten yllä, lisää sitten 1 ml kahdesti tislattua vettä, 1 ml TBA-liuosta, 95 % vedetöntä haude 60 minuuttia, uutto 5 ml:lla n-butanolia, tetraetoksipropaani standardina, lopullinen pitoisuus lnmol/l, fluoresenssispektrofotometri aallonpituudella 532 nm absorbanssin mittaamiseksi.

1.6 Superoksididismutaasin (SOD) määritys rotan keuhko-ongelmissaKirjallisuuden menetelmän [4] mukaan SOD-aktiivisuus määritettiin Huangpuyin-oksidaasimenetelmällä (sarja ostettu Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering -instituutista).

1.7 Myeloperoksidaasin (MPO) määritys rotallakeuhkoongelma.Ota keuhkosairaus ja pese jäännösveri mahdollisimman paljon isotonisessa suolaliuoksessa ja aseta se fosfaattipuskuriin, joka sisältää {{0}},5 prosenttia setyylitrimetyylibromidia (PH6,0). Tee 5 prosenttia homogenaatista, ja toimi sarjan ohjeiden mukaan.

1.8 Tilastolliset menetelmätKäytä SPSS-tilastoohjelmistoa ja mittaa tiedot (x±s)-muodossa t-testillä ja X2-testillä.

Cistanche

2 tulosta

2.1 Märkä/kuiva-painosuhteen vertailukeuhkoTaulukossa 1 on esitetty kunkin ryhmän ongelmat, solujen lukumäärä ja proteiinipitoisuus alveolaarisessa huuhtelunesteessä.keuhkomärkä/kuivapaino-suhde suolaliuosryhmässä oli merkittävästi korkeampi kuin vuonnaCistancheryhmä (s<0.05 or="" 0.01).="" the="" cell="" count="" ratio="" and="" protein="" content="" in="" the="" alveolar="" lavage="" fluid="" of="" the="">Cistancheryhmässä olivat merkittävästi alhaisemmat kuin suolaliuosryhmässä (P<0.05 or="" 0.01).="" 0.="" 01),="" and="" with="" the="" increase="" of="" the="" dose="" concentration,="" it="" shows="" a="" significant="">

Taulukko 1 Vertailu keuhkosairauden märkä/kuivapainosuhteen sekä solujen lukumäärän suhteen ja proteiinipitoisuuden suhteen rottien alveolaarisessa huuhtelunesteessä kussakin ryhmässä (X ± S)

Normaaliin suolaliuosryhmään verrattuna P<0.><001. below="" is="" the="">

2.2 Rottien keuhkosairauden morfologisten muutosten vertailu kussakin ryhmässä. Yleinen huomio:keuhkoihinsuolaliuosryhmässä olivat merkittävästi suurentuneet ja tummanpunaiset, ja pinnalla oli vaihtelevaa tukkoisuutta ja turvotusta sekä suuri määrä keuhkoinfarkteja reunassa; keuhkotCistancheryhmä oli vaaleanpunainen, ja niiden pinta oli lievä tukkoisuus ja turvotus, ei ilmeistä keuhkoinfarktia. Valomikroskoopilla suoritettu havainnointi osoitti, että suolaliuosryhmässä esiintyi alveolaarista ja keuhkojen interstitiaalista tukkoisuutta ja turvotusta, suuri määrä diffuusia neutrofiilien infiltraatiota keuhkorakkuloissa, jonkin verran paiseiden muodostumista ja eriasteista atelektaasia, nekroosia ja kompensoivaa emfyseemaa. , Trombien ja vastaavien läpinäkyvien kalvojen muodostuminen. Yllä mainitut leesiot Cistanche-ryhmässä vähenivät merkittävästi. Suolaliuosryhmässä keuhkorakkuloiden epiteelisolut turposivat, lamellisolut tyhjentyivät selvästi, muodostui suuria tyhjiöitä, kapillaarien endoteelisolut turposivat, endoteelisolut vaurioituivat jatkuvasti, solujen välinen tila laajeni, kapillaarit ja keuhkorakkuloiden tyvikalvot löystyivät ja levenivät. Epäsäännöllinen paksuus, epätasainen paksuus. Cistanche-ryhmässä keuhkorakkuloiden epiteelisolut eivät turvonneet, lamellikorpuskkelin tyhjentyminen väheni, muodostuneiden vakuolien määrä oli pieni, yhteys kapillaarien endoteelisolujen välillä oli lähellä normaalia ja tyvikalvo oli hieman löysä ja epäsäännöllisesti paksuuntunut. Verrattuna Ig/niL cistanche-ryhmään, 5 g/ml cistanche-ryhmässä oli pienempi keuhkoongelmien morfologisten muutosten alue ja keuhkovaurion aste oli kevyempi.

2.3 Rottien LPI:n ja PVP:n vertailu kussakin ryhmässä on esitetty taulukossa 2. Suolaliuosryhmän LPI ja PVP olivat merkittävästi korkeammat kuin Cistanche-ryhmän (PV0.05 tai 0,01). ). Cistanche-ryhmän LPI ja PVP olivat alhaisemmat, millä oli merkittävä annos-vaikutussuhde.

2.4 MDA.SOD.MPO:n aktiivisuuden vertailukeuhkorottien ongelmat kussakin ryhmässä on esitetty taulukossa 3. MDA-pitoisuus ryhmässäkeuhkosuolaliuosryhmän ongelma oli huomattavasti suurempi kuinCistancheryhmässä, kun taas SOD-aktiivisuus ja MPO-aktiivisuus Cistanche-ryhmän keuhkoongelmassa lisääntyivät merkittävästi (F<0.05 or="">

3 Keskustelu

Monielinten vajaatoiminta on peruuttamattoman tilan ja korkean kuolleisuuden perimmäinen syy sepsiksen myöhäisessä vaiheessa (5). Elinten toiminnan suojaamisella on suuri merkitys sepsiksen korkean kliinisen kuolleisuuden vähentämisessä. Keuhkot on monielinten vajaatoiminnan ensimmäinen elin. 1/3 sepsispotilaista kuolee akuuttiin keuhkovaurioon (ALI) ja akuuttiin hengitysvaikeusoireyhtymään (ARDS). ALI:n pääasiallinen patofysiologinen mekanismi on suuren määrän neutrofiilien kerääntyminen keuhkoongelmiin, ja se aktivoi ja kiinnittyy verisuonten endoteelisoluihin. Samanaikaisesti yksittäisiä elektroneja siirtävän pelkistyneen koentsyymi II -oksidaasin pitoisuus kasvaa aiheuttaen hengityspurskeita, synnyttäen suuren määrän happivapaita radikaaleja ja aiheuttaen voimakkaan hapettumisen kautta solukalvojen ja kalvorakenteiden vaurioita ja toimintaa. Esteet⑹. Lipidiperoksidi heijastaa happivapaiden radikaalien muutosta ongelmassa ja liittyy suoraan keuhkovaurion asteeseen (7). Elimistön entsymaattisessa ja ei-entsymaattisessa antiradikaalihapetusjärjestelmässä SOD:n aktiivisuus ylläpitää hyvää korrelaatiota ongelmavaurion asteen kanssa ⑺. Fysiologiseen suolaliuosryhmään verrattuna Cistanche-ryhmän MDA- ja SOD-aktiivisuudet osoittivat tilastollisesti merkitseviä eroja. Cistanchen tehtävänä on parantaa immuunitoimintaa, estää ikääntymistä ja parantaa solujen DNA-synteesinopeutta. Koetulokset osoittivat, että Cistanche-ryhmän keuhkojen kerroin, PLT, keuhkohuuhtelunesteen neutrofiilien suhde ja keuhkojen verisuonten läpäisevyys vähenivät merkittävästi, keuhkoongelman MDA-aktiivisuus väheni, SOD lisääntyi merkittävästi ja MPO-aktiivisuus väheni. Samanaikaisesti morfologiset havainnot osoittivat, että keuhkosairausvaurion aste väheni merkittävästi, neutrofiilien tunkeutuminen väheni ja 5g/ml Cistanche-ryhmällä oli vähemmän keuhkovaurioita kuin Ig/ml Cistanche-ryhmällä ja oli hyvä. annos-vaikutussuhde. Se viittaa siihen, että Cistanchella on merkittävä suojaava vaikutus ALI:lle. Mekanismi voi olla: (1) Estää tulehduksellisten solujen migraatiotakeuhkoihinvähentää neutrofiilien ja muiden aktivoituneiden solujen tuottamia happivapaita radikaaleja niin, että biofilmi on suojattu; (2) Edistää nukleiinihappo- ja proteiinisynteesiä ja suojaa keuhkovaurioilta Vaikutus; (3) Paranna fagosyyttien immuunitoimintaa ja vähentääkeuhkoendotoksiinin aiheuttama ongelmavaurio. Kokeelliset tulokset antavat kokeellisen pohjan kliinisen sepsiksen akuutin keuhkovaurion hoidolle kehoa vahvistamalla ja puutetta vahvistamalla.

viittauksia

[1] Jin Huiming. Sepsismalli umpisuolen ligaation ja perforaation jälkeen [J]. Chinese Journal of Pathophysiology "990, 6 (2): 126 - 127.

[2] Zhou WG, Mc Collum MO, Levine BA, et ai. Verihiutaleita aktivoivan tekijän rooli haimatulehdukseen liittyvässä akuutissa keuhkovauriossa rotalla [J]. Am J Pathol, 1992, 140: 971 -979.

[3] Wang Qian, Zhu Xiaofeng, Zhao Xilong. Modernin lääketieteen kokeelliset menetelmät [M]. Peking: People's Medical Publishing House, 2007:508.

[4] Zhang Xiuming, Li Jianzhai, Wei Mingjing. Nykyaikainen kliininen biokemiallinen laboratoriotiede [M]. Peking: People's Military Medical Press, 2008: 896.

[5] Luo Zhengyao. Shokkitutkimukset [M]. Tianjin: Tianjin Science and Technology Press, 2008:345.

[6]Xanthous CA, Hall JB. Samsel RW. Endotoksiini ihmisen sairauksissa, osa 2 Antiendotoksiinihoitojen biologinen vaikutus ja kliininen arviointi[J]