Terapeuttisen hypotermian vaikutus munuaisvaurioita vastaan ​​tukehtuvan sydänpysähdyksen rottamallissa: Α Keskity eloonjäämisasteeseen, patofysiologiaan ja antioksidanttisiin entsyymeihin

Eli EUN KIM^1*, HA-YOUNG SHIN^2*, EUI-YONG LEE², YEO-JIN YOO², RYUN-HEE KIM², ET AL

Abstrakti.

Vaikka usean elimen toimintahäiriö liittyy eloonjäämisasteeseen sydämenpysähdyksen jälkeen (ca), suurin osa tähän mennessä tehdyistä tutkimuksista on keskittynyt sydämeen ja aivoihin, ja harvoissa tutkimuksissa on käsitelty munuaisten vajaatoimintaa. Tämän tutkimuksen tavoitteena oli siksi tutkia terapeuttisen hypotermian vaikutuksia eloonjäämisasteeseen, patofysiologiaan ja antioksidanttisiin entsyymeihin rotan munuaisissa tukehtumisen jälkeen. Rotat tapettiin yksi päivä CA:n jälkeen. Eloonjäämisprosentti, joka arvioitiin Kaplan-Meier-analyysillä, oli 42,9 prosenttia yhtenä päivänä noin. Kuitenkin hypotermia, joka aiheutettiin noin jälkeen, lisäsi merkittävästi eloonjäämisprosenttia (71,4 prosenttia). normotermiarotilla, joilla oli noin, seerumin veren ureatyppitaso nousi merkittävästi yhden päivän kuluttua noin. lisäksi seerumin kreatiniinitaso nousi merkittävästi yhden päivän kuluttua CA:n jälkeen. Kuitenkin hypotermialle altistuneilla CA-rotilla ureatypen ja kreatiniinin tasot laskivat merkittävästi noin n. Histokemiallinen värjäys paljasti merkittävän ajallisen lisääntymisen munuaisvauriossa sen jälkeen, kun normotermiaryhmälle tehtiin n. Kuitenkin munuaisvaurio väheni merkittävästi hypotermiaryhmässä. munuaisten immunohistokemiallinen analyysi paljasti antioksidanttientsyymien (kupari-sinkki-superoksididismutaasi, mangaani-superoksididismutaasi, glutationiperoksidaasi ja katalaasi) merkittävän vähenemisen ajan myötä normotermiaryhmässä. Kuitenkin hypotermiaryhmässä nämä entsyymit olivat merkittävästi koholla noin n. yhdessä tulokset paljastivat, että tukehtumisen jälkeinen munuaisten toimintahäiriö liittyy vahvasti varhaiseen eloonjäämisasteeseen, ja terapeuttinen hypotermia vähensi munuaisvaurioita tehokkaiden antioksidanttimekanismien avulla.

Avainsanat: asfyksiaalinen sydämenpysähdys, sydänpysähdyksen jälkeinen oireyhtymä, hypotermian hoito, munuaiset, histopatologia, antioksidanttientsyymit

Ottaa yhteyttä:joanna.jia@wecistanche.com

cistanche kadonneen imperiumin yrttejäestäämunuaissairaus, napsauta tästä saadaksesi näytteen

Johdanto

Sydämenpysähdys (ca), joka tunnetaan myös nimellä kardiopulmonaalipysähdys tai verenkiertopysähdys, tarkoittaa normaalin verenkierron äkillistä pysähtymistä, koska sydän ei pysty pumppaamaan verta riittävästi (1). ca aiheuttaa koko kehon iskemiaa, joka vahingoittaa useita elimiä, mukaan lukien aivot, sydän, munuaiset ja maksa. Suurin osa tutkimuksista, joihin on osallistunut noin viimeisen puolen vuosisadan aikana, on keskittynyt parantamaan spontaanin verenkierron (roSc) onnistuneen palautumisen nopeutta, mikä on edistynyt merkittävästi (2–4). Vaikka välitön elvytys voi parantaa roSc:tä, eloonjäämisprosentti huonolla ennusteella on huolenaihe (5–7). Post-sydänpysähdysoireyhtymä (PcaS) viittaa roSc:n patofysiologisiin seurauksiin onnistuneen kardiopulmonaalisen elvytystoimenpiteen (cPr) jälkeen noin (8). PcaS on tärkein syy heikentyneeseen eloonjäämiseen roSc:n jälkeen (9). Potilaiden PcaS-eloonjäämisaste alkuvaiheessa on vain 30 prosenttia (5). Ei ole epäilystäkään siitä, että sydän ja aivot ovat tärkeitä elimiä PcaS:ssä. Samaan aikaan tutkimuksissa on harvoin tutkittu munuaisten vajaatoimintaa noin (1,10,11). Ohimenevä munuaisten vajaatoiminta on yleistä potilailla, jotka elävät noin (12). Ca:n jälkeisten munuaisten vajaatoiminnan ilmaantuvuutta ja vaikutuksia ei ole kuvattu hyvin (13). Lisäksi edellinen tutkimuksemme ehdotti, että alhainen varhainen eloonjäämisaste roSc:n jälkeen kokeellisissa tutkimuksissa (14) voi olla vahvasti yhteydessä munuaisten vajaatoimintaan, kuten akuuttiin munuaisvaurioon. yksi yleisimmistä akuutin munuaisvaurion syistä on noin (15). akuutti munuaisvaurio on yleinen PcaS, joka kehittyy noin 30 prosentilla sairaalapotilaista, joilla on noin (16).

reaktiiviset happilajit (roS) koostuvat sarjasta happivälituotteita, mukaan lukien vapaan radikaalin superoksidianioni (o2•-), ei-radikaalinen vetyperoksidi (H2o2), erittäin reaktiivinen hydroksyylivapaa radikaali (OH•), peroksinitriitti (onoo) ja singlettihappi (102) (17). roS:llä on havaittu olevan olennainen rooli useissa kokeellisissa munuaissairauksissa, kuten akuutissa iskeemisessä munuaisten vajaatoiminnassa, munuaissiirteen hylkimisreaktiossa, akuutissa glomerulonefriitissä ja toksisissa munuaissairauksissa (18). On olemassa merkittävää näyttöä, joka tukee roS-synteesiä välittömästi akuutin iskeemisen aivohalvauksen (19) ja akuutin sydäninfarktin (20) jälkeen. roS:n tiedetään olevan tärkeä iskeemisissä sairauksissa, kuten aivohalvauksessa ja sydäninfarktissa. Esimerkiksi Hackenhaar et ai. (21) raportoivat, että roS:ää syntyy PcaS-potilaiden veressä; tutkimukset ovat kuitenkin harvoin tutkineet roS:n muodostumista munuaisissa noin varhaisen post-PcaS-jakson aikana (22,23).

Tästä syystä oletettiin, että roS ovat tärkeitä munuaisvaurioissa ca:n jälkeen ja myötävaikuttavat alhaiseen eloonjäämisasteeseen PcaS:n alkuvaiheissa. Tämän hypoteesin tutkimiseksi rotilla indusoitiin asfyksiaalinen ca ja havaittiin eloonjäämisprosentti PcaS:n alkuvaiheessa. lisäksi suoritettiin välitön ja viivästetty hypotermia PcaS:iin liittyvän alhaisen eloonjäämisasteen lisäämiseksi roSc:n jälkeen. Lisäksi munuaisten toimintahäiriö analysoitiin histopatologisesti ja roS:n aiheuttamat muutokset, kuten kupari-sinkkisuperoksididismutaasi (Sod-1), mangaani-superoksididismutaasi (Sod-2), katalaasi (caT) ja glutationiperoksidaasi (GPX) immunohistokemiallisella analyysillä roSc:n jälkeen.

cistanche pharma erikois

Materiaalit ja menetelmät

Koeeläimet ja ryhmät.Jeonbukin kansallisen yliopiston (iksan, Korean tasavalta) koe-eläinkeskuksesta saatiin yhteensä 62 urospuolista Sprague-Dawley (Sd) -rottaa (paino, 270-300 g; ikä, 10 viikkoa). Niitä pidettiin 23 ± 2 ˚C:n lämpötilassa ja 60 ± 10 prosentin kosteudessa 12 tunnin valo/pimeysjakson alla. He saivat vapaasti ruokaa ja vettä. Jeonbukin kansallisen yliopiston laitoseläinten hoito- ja käyttökomitea hyväksyi kaikki koeprotokollat ​​eettisten menettelyjen ja tieteellisen huolenpidon perusteella (hyväksyntänumero JBnu 2020-084).

Koeeläimet jaettiin kolmeen kategoriaan [valeleikkausryhmä, ca normotermian alla ja ca- ja hypotermiahoito (HT)] seuraavasti: i) ryhmä I, valeryhmä (n=5) pidettiin normaalilämpöolosuhteissa. ilman ca; ii) ryhmä ii, normotermiaryhmä ilman hypotermiaa (33˚C) CA:n jälkeen (n=17); ja iii) ryhmä iii (n=40), ryhmä, jolle tehtiin ca normotermia ja jota hoidettiin HT:lla noin 2 tunnin (n=17), 4 tunnin (n=13) jälkeen ja 6 h (n=10) roSc:n jälkeen, jolloin kaikki rotat lämmitettiin uudelleen normotermiaan.

CA-induktio ja elvytys.Ca ja cPr suoritettiin aiemmin kuvatulla tavalla (24, 25) pienin muutoksin (kuva 1). Lyhyesti sanottuna rotat nukutettiin 2-3 prosentilla isofluraanilla ja ventiloitiin mekaanisesti hengityksen ylläpitämiseksi käyttämällä jyrsijähengityslaitetta (Harvard-laite). Perifeerisen happisaturaation (Spo2) tarkkailemiseksi vasempaan jalkaan kiinnitettiin pulssioksimetrinen happisaturaatioanturi (Nonin Medical, Inc.). Kehon lämpötila pidettiin 37±0.5˚C:ssa ca-leikkauksen aikana ja sen jälkeen. Elektrokardiogrammin (ecG) muutosten seuraamiseksi raajoihin asetettiin elektrokardiografiset koettimet (cytiva) kolmen kytkentätietojen saamiseksi, joita seurattiin jatkuvasti. Vasen reisivaltimo ja oikea reisilaskimo kanyloitiin erikseen keskimääräisen valtimopaineen (MaP) (MLT 1050/d; ADInstruments, ltd.) ja suonensisäisen injektion seuraamiseksi.

5 minuutin stabilointijakson jälkeen vekuroniumbromidia (2 mg/kg; Gensia Sicor Pharmaceuticals, inc.) annettiin suonensisäisesti, anestesia lopetettiin ja koneellinen ventilaatio lopetettiin. CA:n määrittämiseen käytettiin alle 25 mmHg:n MaP-arvoa ja sitä seuraavaa pulssitonta sähköistä aktiivisuutta (25,26). CA vahvistettiin 3–4 minuutin kuluttua vekuroniumbromidi-injektiosta. 5 minuuttia noin toimenpiteen jälkeen cPr aloitettiin antamalla suonensisäisesti bolusinjektio epinefriiniä (0,005 mg/kg; Sigma-Aldrich;

Merck KGaa) ja natriumbikarbonaatti (1 mekv/kg; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), mitä seurasi mekaaninen ventilaatio 100-prosenttisella hapella ja manuaaliset rintakehän puristukset nopeudella 300/min, kunnes MaP saavutti arvon 60 mmHg ja elektrokardiografista aktiivisuutta havaittiin . kun eläin oli hemodynaamisesti stabiili ja hengitti spontaanisti (yleensä 1 tunnin kuluttua roSc:stä), katetrit poistettiin ja eläin ekstuboitiin.

Lämpötilan hallinta ryhmien kesken.Normotermiaryhmän ruumiinlämpö pidettiin 37±0,5 ˚C:ssa CA-leikkauksen aikana ja sen jälkeen ja pidettiin yllä, kunnes rotat lopetettiin aikataulun mukaisesti. hypotermiaryhmässä ca määritettiin normaalissa lämpötilassa; sitten ruumiinlämpöä pidettiin jääpakkauksilla ja tuulettimilla 33±0,5˚C:ssa välittömästi elvytystoimenpiteen jälkeen 2, 4 ja 6 tunnin ajan, ja niitä lämmitettiin nopeasti uudelleen lämmitystyynyllä haluttuun lämpötilaan ( 37±0.5˚C) saavutettiin. Rotat palautettiin sitten häkkeihinsä, kunnes ne lopetettiin yksi päivä CPR/roSc:n jälkeen. Kehon lämpötilaa seurattiin käyttämällä peräsuolen lämpötila-anturia (27).

Seerumin biokemiallinen analyysi.Kaikkien eläinten nukutukseen käytettiin vatsaontelonsisäistä injektiota 30 mg/kg pentobarbitaalinatriumia (JW Pharm co., ltd.). Veri kerättiin kunkin eläimen vatsan suonista kussakin ryhmässä. Seerumi kerättiin verisentrifugoinnilla (2 774 x g, 15 min, 4 °C) ja säilytettiin -80 °C:ssa analyysiin asti. Veren ureatypen (Bun) ja kreatiniinin tasot seerumissa määritettiin Kansainvälisen kliinisen kemian liiton (28) määrittelemillä menetelmillä käyttämällä automaattista kemiallista analysaattoria Hitachi 2070 (Hitachi, ltd.). kaikki määritykset suoritettiin kolmena rinnakkaisena käyttämällä tuoretta seerumia.

Kudosten käsittely.Rotat nukutettiin syvästi vatsaontelonsisäisellä injektiolla 200 mg/kg pentobarbitaalinatriumia (JW Pharm co., Ltd.), ja ne perfusoitiin transkardiaalisesti 0,1 M:lla fosfaattipuskuroitua suolaliuosta (PBS; pH 7,4), jonka jälkeen 4 prosenttia paraformaldehydiä 0,1 M fosfaattipuskurissa (PB; pH 7,4). Munuaiset eristettiin kustakin eläimestä ja kiinnitettiin 4-prosenttisella paraformaldehydillä 0,1 M PB:ssä (pH 7,4) huoneenlämpötilassa 1 viikon aikana, sitten viipaloitiin sagittaalisesti, upotettiin parafiiniin ja leikattiin (6 um).

Hematoksyliini ja eosiini (H&E), Periodic Acid-Schiff (PAS) ja Massonin trikromivärjäys.H&e-värjäys suoritettiin munuaisten patologisten muutosten tutkimiseksi aiemmin kuvatun menettelyn mukaisesti (29). PaS-värjäys suoritettiin glomerulusten muutosten tutkimiseksi aiemmin kuvattujen menetelmien mukaisesti (30–32). Massonin trikromivärjäysmenetelmää käytettiin tubulusvaurion määrittämiseen ottaen huomioon tubuluksen laajentuminen, tubulusatrofia, tubuluskipsimuodostus, vakuolisoituminen, degeneraatio, interstitiaalinen fibroosi ja tubulaaristen epiteelisolujen hilseily tai tubulaarisen tyvikalvon paksuuntuminen (33 aiemmin kuvattujen menetelmien mukaisesti). ,34).

yhteensä 2 kokenutta patologia arvioi histopatologiset muutokset kaksoissokkoutetulla tavalla. kuvat 10 värjätyistä leikkeistä/rotta otettiin x400 suurennoksilla käyttämällä Leica dM 2500 valomikroskooppia (Leica Microsystems GmbH). Jokaisessa osiossa analysoitiin yhteensä 10 kenttää. Munuaisvaurioiden histopatologinen analyysi suoritettiin aiemmin kuvattujen menetelmien mukaisesti (35, 36). Lyhyesti sanottuna leesiot luokiteltiin ei-merkittäviin mikroskooppisiin leesioihin (nSMl), minimaalisiin, lieviin, kohtalaisiin tai merkittäviin leesioihin, vastaavasti, luokiteltiin käyttämällä seuraavaa asteikkoa sokkotestillä: normaali, 0 pistettä;<25% damage,="" 1="" point;="" 26‑50%="" damage,="" 2="" points;="" 51‑75%="" damage,="" 3="" points;="" and="" 76‑100%="" damage,="" 4="">

Glomerulaariset vauriot määriteltiin soluelementtien katoamisen, kapillaarin luumenin romahtamisen, amorfisen hyaliinimateriaalin, jossa oli tai ei tartuntaa Bowmanin kapseliin (30-32) perusteella, ja pisteytettiin seuraavilla numeerisilla asteikoilla: ei vaurioita, { {7}} pistettä; erittäin lievä, 1 piste; lievä, 2 pistettä; kohtalainen, 3 pistettä; ja vakava, 4 pistettä. Tubulusvamma pisteytettiin seuraavalla pisteytysjärjestelmällä: ei putkivammaa, 0 pistettä; 1–9 prosenttia tubuluksista loukkaantui, 1 piste; 10–25 prosenttia tubuluksista loukkaantui, 2 pistettä; 26–50 prosenttia tubuluksista loukkaantui, 3 pistettä; 51–75 prosenttia tubuluksista loukkaantui, 4 pistettä; ja vähintään 76 prosenttia tubuluksista loukkaantui, 5 pistettä (33,34).

Malondialdehydi (MDA).Mda-pitoisuus munuaiskuoressa arvioitiin aiemmin kuvatun protokollan mukaisesti (23, 37, 38). lyhyesti sanottuna, munuaiskudosten homogenointi ja sentrifugointi suoritettiin nopeudella 8 832 xg 10 minuutin ajan 4 °C:ssa, ja supernatantti kerättiin ja säilytettiin -80 °C:ssa MDA-analyysiä varten. MDA-pitoisuus määritettiin TBarS-määrityssarjan ohjeiden mukaisesti (luettelonumero 10009055; Cayman Chemical Company).

Immunohistokemia (IHC) antioksidanttientsyymeille. iHc suoritettiin Sod-1:llä, Sod-2:lla, caT:llä ja GPX:llä tutkimaan muutoksia munuaisten antioksidanttien immunoreaktiivisuuksissa. iHc suoritettiin aiemmin kuvatulla menetelmällämme (22). Lyhyesti sanottuna leikkeitä (6 µm) inkuboitiin primäärisellä vuohen anti-Sod1:llä (1:500; luettelonro SaB2500976; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), vuohen anti-Sod2:lla (1:1). ,000; luettelonro SaB2501676; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), kani anti-caT (1:1, 000; luettelonro ab16731; Abcam) ja kanin anti-GPX ( 1:1,000; luettelonro ab22604; Abcam) yön yli 4 ˚C:ssa, jonka jälkeen biotinyloitu konjugoitu anti-kani (1:250; luettelonro Ba-1000-1,5; Vektorilaboratoriot , inc.) ja biotinyloidut konjugoidut anti-vuohen (1:250; luettelonro Ba-5000-1,5; Vector Laboratories, Inc.) sekundaariset vasta-aineet 2 tunnin ajan 24 °C:ssa ja kehitettiin käyttämällä Vectastain aBc:tä (Vector laboratories) , sis.). Sitten ne visualisoitiin 3,3'-diaminobentsidiiniliuoksella (0,1 M Tris-HCl-puskurissa).

Leica dM 2500 -mikroskooppia käytettiin leikkeiden kuvaamiseen 400-kertaisella suurennuksella. Valittiin yhteensä 10 leikettä/rotta ja 10 aluetta vangittiin. Kuvakynnysanalyysiohjelmiston versiota 1.52a (National Institute of Health) käytettiin mittaamaan suhteellisen optisen tiheyden (sauva) prosenttiosuutta (prosenttia).

Tilastollinen analyysi.Kaikki kokeet toistettiin kolmena rinnakkaisena. Datan analysointiin käytettiin Graph Pad Prism -versiota 5.{1}} (GraphPad Software, inc.), jotka ilmaistiin keskiarvoina ± keskiarvojen (SeM) standardivirhe. Eloonjäämistä analysoitiin Kaplan-Meier-tilastoilla ja log-rank-testillä. MaP:tä ja perifeeristä happea verrattiin käyttämällä yksi- ja kaksisuuntaisia ​​toistuvia varianssianalyysimittauksia ajan vaikutuksen arvioimiseksi. Erojen merkityksen määrittämiseksi suoritettiin post hoc -analyysejä käyttäen Tukeyn testiä kaikille parittaisille moninkertaisille vertailuille. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Tulokset

Fysiologiset muutokset, eloonjäämisaste ja seerumin biokemialliset muuttujat. Ryhmien välillä ei ollut tilastollisesti merkitsevää eroa lähtötason ominaisuuksien suhteen, mukaan lukien ruumiinpaino, MaP ja Spo2 (taulukko i ja kuvio 2). Ca:n induktio tapahtui 3–4 minuuttia vekuroniumbromidin (2 mg/kg) suonensisäisen injektion jälkeen. CA vahvistettiin isoelektrisellä ecG:llä, Spo2:lla ja MaP:llä, ja nämä muuttuivat odotetusti koeprotokollan mukaan (kuvat 2a-c). Kuten kuvasta 2d paljastettiin, kehon lämpötila oli erilainen kaikissa roSc:tä seuranneissa ryhmissä, kuten kuvassa 3 paljastettiin, kunkin ryhmän eloonjäämisaste arvioitiin yhden päivän kuluttua noin. Ryhmän II korko oli 42,9 prosenttia.

Ryhmässä iii taajuus 2 h-HT:n jälkeen oli 42,9 prosenttia, 4 h-HT:n jälkeen 57,1 prosenttia ja 6 h-HT:n jälkeen 71,4 prosenttia. tässä kokeessa ei ollut eroa ryhmän ii rottien ja ryhmän iii 2 h-HT:n rottien välillä.

kuten kuviossa 4B on osoitettu, seerumin Bun-taso ryhmässä i oli 13,8 mg/dl yhden päivän kuluttua noin. ryhmässä ii pullataso nousi merkittävästi arvoon 35,3 mg/dl. ryhmässä iii pullataso oli 3{{10}},7 mg/dl 2 h-HT:n jälkeen, 25.0 mg/dl 4 h-HT:n jälkeen ja 22,7 mg/dl dl 6 h-HT jälkeen. lisäksi, kuten kuvasta 4c käy ilmi, seerumin kreatiniinitaso ryhmässä I oli {{20}},23 mg/dl. ryhmässä ii kreatiniinitaso nousi merkittävästi arvoon 0,43 mg/dl. ryhmässä iii kreatiniinitasot olivat alhaisemmat kuin havaittiin ryhmässä ii seuraavasti: 0,39 mg/dl 2 h-HT:n jälkeen, 0,37 mg/dl 4 h-HT:n jälkeen ja 0,36 mg/dl 6 h-HT:n jälkeen.

Histopatologiset löydökset. ryhmässä I (huijaus) ehjät histologiset rakenteet paljastettiin H&e-, PaS- ja Massonin trikromivärjäyksellä (kuvio 5A). Interstitiaalista fibroosia ei havaittu kaikissa ryhmissä, kun taas ryhmässä ii ca:n aiheuttamaa munuaisten histopatologiaa tutkittiin yhtenä päivänä roSc:n jälkeen käyttäen H&e-, PaS- ja Massonin trikromivärjäystä. Vaikea CA:n aiheuttama munuaisvaurio lisääntyi merkittävästi proksimaalisissa tubuluksissa ja glomeruluissa; erityisesti munuaisten tubulaaristen epiteelisolujen harjan reunat olivat vakavasti syöpyneet (kuviot 5a ja B). lisäksi tässä ryhmässä glomerulaariset kapillaarit olivat laajentuneet tulehduksellisilla soluilla, ja interstitiaalinen turvotus ja akuutti munuaisten tubulusnekroosi olivat vakavia verrattuna ryhmässä I havaittuihin (kuvio 5a).

ryhmässä iii munuaisvaurio heikkeni yhtenä päivänä roSc:n jälkeen (kuviot 5a ja B). erityisesti ca-indusoitu vamma proksimaalisissa tubuluksissa väheni merkittävästi 6 h-HT:n jälkeen verrattuna ryhmään ii havaittuun. lisäksi proksimaalisten tubulusten paikallinen laajeneminen väheni verrattuna ryhmässä ii havaittuun (kuvio 5A). Keräskerästen osalta 6 h-HT heikensi merkittävästi munuaiskerästen vauriota verrattuna ryhmässä ii paljastettuun (kuvat 5a ja B).

MDA taso. kuten kuviosta 4a paljastetaan, Mda-taso munuaiskuoressa nousi merkittävästi yhden päivän kuluttua ca:sta ryhmässä ii verrattuna ryhmään i. Ryhmässä III MDA-taso laski kuitenkin merkittävästi 4 tunnin ja 6 tunnin HT:n jälkeen. se väheni myös 2 h-HT:ssa, mutta tilastollisesti merkitsevää eroa ei ollut ryhmään ii verrattuna.

Löydökset antioksidanttientsyymien immunoreaktiivisuudesta.

Ryhmässä I arvioitiin normaalit Sod-1-, Sod-2-, GPX- ja caT-immunoreaktiivisuudet, mikä paljasti, että ne sijaitsivat pääasiassa tubuluksissa (kuva 6a). ryhmässä ii, Sod-1:n, Sod-2:n, GPX:n ja CAT:n immunoreaktiivisuus väheni merkittävästi yhtenä päivänä roSc:n jälkeen verrattuna ryhmässä i paljastettuihin (kuvat 6a ja B).

ryhmässä iii, Sod-1, Sod-2, GPX ja caT immunoreaktiivisuus 2 h-HT:n jälkeen eivät eronneet merkittävästi ryhmässä ii havaituista (kuvat 6a ja B). 4 h-HT:n tapauksessa neljä immunoreaktiivisuutta olivat merkittävästi korkeampia kuin ne, jotka paljastettiin ryhmässä ii (kuviot 6a ja B), mikä osoittaa, että erityisesti GPX-immunoreaktiivisuus oli merkittävästi korkeampi verrattuna muihin immunoreaktiivisuuksiin. 6 h-HT:n tapauksessa kaikki immunoreaktiivisuudet olivat korkeampia kuin rotilla, jotka saivat 4 h-HT:tä, mikä paljastaa, että kunkin Sod-1-, Sod-2-, GPX- ja caT-immunoreaktiivisuuden sauva oli 78,4, 67,4, 86,5 ja 79,5 prosenttia verrattuna ryhmään i (kuvat 6a ja B).

herba epimedium sagittatum

Keskustelu

Eläinkokeissa sydän ja aivot ovat eniten kärsineet elimet iskemia/reperfuusiovaurion jälkeen noin (39,40). Tietyt tutkimukset ovat kuitenkin raportoineet, että akuutilla munuaisvauriolla on vaikutusta neurologiseen paranemiseen (41,42). Siksi on tärkeää tutkia akuutti munuaisvaurio ca ja cPr:n jälkeen. tässä tutkimuksessa aikuisia urospuolisia Sd-rottia käytettiin tukehtumisen hoitoon injektoimalla vekuroniumbromidia. CA vahvistettiin 3–4 minuuttia asfyksian induktion jälkeen ja cPr suoritettiin 5 minuutin kuluttua n. MaP, ecG ja Spo2 muuttuivat odotetusti noin roSc:n aikana ja sen jälkeen. nykyisessä tutkimuksessamme eloonjäämisaste ryhmässä iii oli 42,9 prosenttia yhden päivän roSc:n jälkeen rotilla, jotka altistettiin 2 h-HT:lle, 57,1 prosenttia rotilla, joita hoidettiin 4 h-HT:lla, ja 71,4 prosenttia rotilla, jotka altistettiin 6 h-HT:lle. che et al (26) raportoivat, että eloonjäämisaste oli 40 prosenttia kaksi päivää roSc:n jälkeen rottamallissa, jossa oli asfyksia noin. lisäksi Wang et al (43) raportoivat, että rotilla hypotermian ja levosimendaanin (kalsiumherkistäjä ja kaliumkanavan avaaja) yhdistelmä roSc:n jälkeen lisäsi merkittävästi eloonjäämistä. Näiden löydösten perusteella HT rotilla, joilla on ca, voi lisätä eloonjäämisprosenttia muutaman päivän kuluttua roSc:stä. Kuitenkin ihmisillä HT ca:n jälkeen tuskin lisää eloonjäämisprosenttia roSc:n jälkeen (44).

munuaisten vajaatoimintaa raportoitiin 12–28 prosentilla potilaista, joilla oli ca onnistuneen elvyttämisen jälkeen (13). lisäksi akuutti munuaisvaurio kehittyi 43 prosentilla elvytetyistä potilaista noin jälkeen, ja yli 75 prosenttia näistä tapauksista tapahtui kolmen päivän kuluessa noin (45). eläinmalleissa i/R:n (eli CA:n jälkeinen ROSC) aiheuttamaa akuuttia munuaisvauriota heikensi merkittävästi HT (43,46,47). Esimerkiksi Tissier et al (47) raportoivat munuaisvaurioiden merkittävästä heikentymisestä HT:n vaikutuksesta ca:n kaniinimallissa histopatologiaan ja elektronimikroskopiaan verrattuna kontrolliryhmään. Tässä tutkimuksessamme ryhmän ii munuaisten histopatologiset glomerulaariset ja tubulaariset vauriopisteet paranivat ilmeisesti yhtenä päivänä roSc:n jälkeen. tässä ryhmässä seerumin Bun- ja kreatiniinitasot nousivat merkittävästi ROSC:n jälkeen verrattuna valeryhmään (ryhmä i). Nämä tulokset olivat samankaltaisia ​​kuin aikaisemmissa tutkimuksissa, joissa oli mukana koira-, kani- ja porsas ca -malleja (47–49). Siten munuaisvaurio lisääntyi voimakkaasti varhaisessa vaiheessa noin koe-eläimillä. Tässä tutkimuksessamme munuaiskerästen ja tubulusten vauriot ja histopatologiset pisteet ryhmässä iii vähenivät merkittävästi 4 h- ja 6 h-HT:n jälkeen yhden päivän roSc:n jälkeen verrattuna ryhmään ii. Ribeiro et al (46) ja Souza et al (50) raportoivat, että HT oli tehokas munuaisten i/r-vaurion eläinmalleissa. Islam et al (23) ja Jawad et al (22) määrittelivät, että HT vähensi munuaisvaurion vakavuutta ja lisäsi eloonjäämisprosenttia tukehtumisen ca-mallissa. Löydökset viittaavat siihen, että HT:lla on merkittävä munuaisia ​​suojaava vaikutus, mikä liittyi lisääntyneeseen eloonjäämisasteeseen.

Endogeenisiä antioksidanttientsyymejä ovat pääasiassa Sods, CAT ja GPX. Nämä entsyymit tarjoavat ensimmäisen puolustuslinjan o2•- ja OH•:a vastaan. SOD-1 ja SOD-2 tarjoavat suojan oksidatiivista stressiä vastaan ​​katalysoimalla o2•-:n dismutaatiota o2:ksi ja H2o2:ksi (51). oksidatiivinen stressi on ratkaiseva tekijä elinvaurioissa ja hemodynaamisissa toimintahäiriöissä PcaS:n aikana ja roS:n muodostumisessa i/r-vaurion aikana. Antioksidanttientsyymien aktiivisuus muuttuu i/r-vaurion seurauksena noin (21). tutkimuksemme paljasti, että Sod-1-, Sod-2-, GPX- ja caT-tasot laskivat roSc:n jälkeen ryhmässä ii verrattuna ryhmään i. Näiden antioksidanttientsyymien tasot laskevat i/r:n jälkeen, mikä aiheuttaa soluvaurioita ja kuolemaa endogeenisten antioksidanttien kulutuksen seurauksena roS:n vapautumisen seurauksena (52).

Xia et al (53) raportoivat lisääntyneestä antioksidanttiaktiivisuudesta HT:lle altistuneiden hiirten munuaiskudoksissa munuaisten i/r-vauriossa. Hackenhaar ym. (21) havaitsivat merkittävän nousun Sod-1:n, Sod-2:n, GPX:n ja caT:n aktiivisuudessa 6, 12, 36 ja 72 tunnin HT:n jälkeen ihmisillä roSc:n jälkeen. aiemmissa tutkimuksissa, joissa käytettiin asfyksiaalisen ca:n rottamallia, Islam et al (23) raportoivat, että ca:n jälkeinen HT vähentää oksidatiivista stressiä munuaisissa, ja Jawad et al (22) raportoivat, että ca:n jälkeinen HT suojaa munuaista ca:n aiheuttamilta vaurioilta, osoittavat, että nrf2/Ho-1 lisääntyi munuaisissa. Tässä tutkimuksessamme Sod-1:n, Sod-2:n, GPX:n ja caT:n immunoreaktiivisuus lisääntyi merkittävästi 4 h-HT:n ja 6 h-HT:n jälkeen ryhmässä iii verrattuna ryhmään ii, mikä viittaa siihen, että HT aktivoi antioksidanttientsyymejä ja vähensi. oksidatiivista stressiä.

Tämän tutkimuksen eloonjäämisen, histopatologian, biokemiallisten ja immunohistokemiallisten tulosten perusteella määritettiin, että munuaisten toimintahäiriö on yleistä ja liittyy kuolleisuuteen PcaS:n varhaisissa vaiheissa roSc:n jälkeen, meidän rottamallissamme asfyksiasta noin. Kuitenkin 4 h- tai 6 h-HT ROSC:n jälkeen vähensi merkittävästi munuaisvaurioita, mikä viittaa siihen, että HT indusoi antioksidanttientsyymien, kuten Sod-1:n, Sod-2:n, GPX:n ja caT:n, aktivoitumista, mikä johtaa munuaisten oksidatiivisen stressin vähenemiseen. seurauksena oletettiin, että HT vähentää munuaisvaurioita antioksidanttimekanismilla ja lisää varhaista eloonjäämisprosenttia. Western blot -analyysi tarvitaan kuitenkin munuaisvaurion ja HT:n mekanismin selvittämiseksi ca roSc:n jälkeen. Tämä on tämän tutkimuksen mahdollinen rajoitus ja korostaa lisätutkimusten tarvetta.

myrisetiini

1 hätälääketieteen laitos, Jeonbukin kansallisen yliopiston kliinisen lääketieteen tutkimuslaitos, Jeonju, Jeollabuk-do 54907;

2 College of Veterinary Medicine and Biosafety Research Institute, Jeonbukin kansallinen yliopisto, san, Jeollabuk-do 54596;

3 Biolääketieteen laitos ja Biotieteen ja biotekniikan tutkimuslaitos, Hallym University, chuncheon, Gangwon-do 24252;

4 kirurgian osasto, Kangwonin kansallinen yliopistosairaala,

School of Medicine, Kangwonin kansallinen yliopisto, chuncheon, Gangwon-do 24289; 5 Neurobiology, School of Medicine, Kangwon National University, chuncheon, Gangwon-do 24341, Korean tasavalta

Kiitokset

ei sovellettavissa.

Rahoitus

Tätä tutkimusta tuki perustieteiden tutkimusohjelma Korean opetusministeriön rahoittaman kansallisen tutkimussäätiön kautta (apurahanumerot nrF-2019r1c1c1002564, nrF-2019r1F1a1062696 ja nrF-2021r1F1a1059992).

Tietojen ja materiaalien saatavuus

Tämän tutkimuksen aikana käytetyt ja/tai analysoidut aineistot ovat saatavilla vastaavalta tekijältä kohtuullisesta pyynnöstä.

Tekijöiden panokset

SeK, HYS, MHW ja HJT vastasivat kokeellisesta suunnittelusta, tiedonkeruusta, data-analyysistä ja käsikirjoituksesta. eYl, YJY, rHK, JHc ja TKl suorittivat kokeet ja data-analyysin. dca, BYP, JcY, SKH ja iSK suorittivat data-analyysin ja antoivat kriittisiä kommentteja koko tutkimusprosessista. kaikki kirjoittajat ovat lukeneet ja hyväksyneet lopullisen käsikirjoituksen. HYS ja HJT vahvistavat kaikkien raakatietojen aitouden.

Eettinen hyväksyntä ja suostumus osallistumiseen

Jeonbukin kansallisen yliopiston Institutional Animal Care and Use Committee (hyväksyntänumero JBnu 2020-084; Jeonju, Etelä-Korea) hyväksyi kaikki kokeelliset protokollat ​​eettisten menettelyjen ja tieteellisen huolenpidon perusteella.

Potilaan suostumus julkaisuun

ei sovellettavissa.

Kilpailevat kiinnostuksen kohteet

Kirjoittajat ilmoittavat, että heillä ei ole kilpailevia etuja.

Viitteet

1. Girotra S, chan PS ja Bradley SM: Elvytyksen jälkeinen hoito sairaalan ulkopuolisen ja sairaalan sisäisen sydänpysähdyksen jälkeen. Sydän 101: 1943–1949, 2015.

2. ROH Yi, Jung WJ, Hwang So, Kim S, Kim HS, Kim JH, Kim TY, Kang HS, Lee JS ja Cha KC: Lyhyempi defibrillointiväli edistää onnistuneita defibrillointi- ja elvytystuloksia. elvytys 143: 100-105, 2019.

3. Xanthos T, iacovidou n, Pantazopoulos i, Vlachos I, Bassiakou e, Stroumpoulis K, Kouskouni e, Karabinis a ja Papadimitriou l: Iskemialla modifioitu albumiini ennustaa kardiopulmonaalisen elvytystuloksen: kokeellinen tutkimus. elvytys 81: 591-595, 2010.

4. Yeh ST, Cawley RJ, aune Se ja Angelos MG: hapentarve kardiopulmonaalisen elvytystoimenpiteen (cPr) aikana spontaanin verenkierron palauttamiseksi. elvytys 80: 951-955, 2009.

5. lópez-Herce J, del castillo J, Matamoros M, canadas S, rodriguez-calvo a, cecchetti c, rodríguez-núnez a ja carrillo Á; iberoamerican Lasten sydänpysähdys Tutkimusverkosto riBePci: Kuolleisuuteen liittyvien spontaanien verenkiertotekijöiden palautumisen jälkeinen lasten sairaalasydänpysähdys: tuleva monikansallinen havainnointitutkimus. crit care 18: 607, 2014.

6. Mongardon n, Dumas F, tulee S, Grimaldi d, Hissem T, Pène F ja cariou a: Sydänpysähdysoireyhtymä: Välittömästä elvytyksestä pitkäaikaiseen lopputulokseen. ann tehohoito 1: 45, 2011.

7. Neymar RW, Nolan JP, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin RG, Jauch EC, et ai.: Sydänpysähdyksen jälkeinen oireyhtymä: epidemiologia, patofysiologia, hoito ja ennuste. konsensuslausunto kansainväliseltä elvytyskomitealta (American Heart Association, Australian ja Uuden-Seelannin elvytysneuvosto, Euroopan elvytysneuvosto, Kanadan Heart and Stroke Foundation, Interamerican Heart Foundation, Aasian elvytysneuvosto ja Etelä-Afrikan elvytysneuvosto ); Amerikan sydänyhdistyksen sydän- ja verisuonitautien hätähoitokomitea; sydän- ja verisuonikirurgian ja anestesian neuvosto; kardiopulmonaalista, perioperatiivista ja tehohoitoa käsittelevä neuvosto; kliinisen kardiologian neuvosto; ja aivohalvausneuvosto. levikki 118: 2452-2483, 2008.

8. Nolan JP, Neumann RW, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin rG, et ai.: Sydänpysähdyksen jälkeinen oireyhtymä: epidemiologia, patofysiologia, hoito ja ennuste. Kansainvälisen elvytyskomitean tieteellinen lausunto; Amerikan sydänyhdistyksen sydän- ja verisuonitautien hätähoitokomitea; sydän- ja verisuonikirurgian ja anestesian neuvosto; kardiopulmonaalista, perioperatiivista ja tehohoitoa käsittelevä neuvosto; kliinisen kardiologian neuvosto; neuvosto aivohalvauksesta. elvytys 79: 350-79, 2008. DOI: 10.1016/j.resuscitation.2008.09.017

9. Jentzer Jc, muutos Md ja dezfulian c: Sydänlihaksen toimintahäiriö ja sokki sydämenpysähdyksen jälkeen. BioMed res int 2015: 314796, 2015.

10. Madl c ja Holzer M: Aivojen toiminta sydämenpysähdyksen jälkeen elvytyksen jälkeen. curropin crit care 10: 213-217, 2004.

11. Roberts BW, Kilgannon JH, chansky Me, Mittal n, Wooden J, Parrillo Je ja Trzeciak S: Useiden elinten toimintahäiriöt spontaanin verenkierron palautumisen jälkeen sydänpysähdysoireyhtymässä. crit care Med 41: 1492-1501, 2013.

12. Zeiner a, Sunder-Plassmann G, Sterz F, Holzer M, häviäjät H, laggier an ja Müllner M: Lievän terapeuttisen hypotermian vaikutus munuaisten toimintaan kardiopulmonaalisen elvytyshoidon jälkeen miehillä. elvytys 60: 253-261, 2004.

13. Yanta J, Guyette FX, Doshi a, Callaway CW ja Rittenberg Jc; Sydämenpysähdyksen jälkeinen palvelu: munuaisten vajaatoiminta on yleistä sairaalan ulkopuolisen sydänpysähdyksen jälkeen tapahtuneen elvyttämisen jälkeen. elvytys 84: 1371-1374, 2013.

14. Lee JH, Lee TK, Kim iH, lee Jc, Won MH, Park JH, Ahn JH, Shin Mc, ohk TG, Moon JB, et al: muutokset histopatologiassa ja kasvainnekroositekijätasoissa rottien sydämissä asfyksiaalinen sydämenpysähdys. Clin Exp Emerg Med 4: 160-167, 2017.

15. Lucchino S, Kellum Ja, Bellomo r, Doig GS, Morimatsu H, Morgera S, Schetz M, Tan i, Bouman c, Macedo e et ai.; Aloitus ja lopetus Supportive Therapy for the Kidney (BeST Kidney) tutkijat: akuutti munuaisten vajaatoiminta kriittisesti sairailla potilailla: monikansallinen, monikeskustutkimus. JAMA 294: 813-818, 2005.

16. Mattana J ja Singhal Pc: Akuutin munuaisten vajaatoiminnan esiintyvyys ja tekijät kardiopulmonaalisen elvytystoimenpiteen jälkeen. arkkiharjoittelija Med 153: 235-239, 1993.

17. Sachse a ja Wolf G: angiotensiini ii:n aiheuttamat reaktiiviset happilajit ja munuaiset. J am Soc Nephrol 18: 2439-2446, 2007.

18. Baud l ja ardaillou r: reaktiiviset happilajit: tuotanto ja rooli munuaisissa. am J Physiol 251: F765-F776, 1986.

19. rodrigo r, Fernández-Gajardo r, Gutiérrez r, Matamala JM, carrasco r, Miranda-Merchak a ja Feuerhake W: oksidatiivinen stressi ja iskeemisen aivohalvauksen patofysiologia: uusia hoitomahdollisuuksia. CNS Neurol Disord Drug Targets 12: 698-714, 2013.

20. Shahzad S, Hasan a, Faizy AF, Mateen S, Fatima n ja Moin S: kohonnut DNA-vaurio, oksidatiivinen stressi ja heikentynyt vasteen puolustusjärjestelmä sydäninfarktipotilailla. Clin Appl Thromb Hemost 24: 780-789, 2018.