Cistanche Aerial Part Flavonoids parantaa kroonista eturauhastulehdusta: rotan validointi, sytokiinimodulaatio ja PI3K-AKT-EGFR-MMP9 mekanismit
Nov 06, 2025
2.3.1 Eläinten ryhmittely ja mallin induktio
Viikon kestäneen sopeutumisen jälkeen urospuoliset SD-rotat jaettiin satunnaisesti neljään ryhmään (n=6 ryhmää kohti): valeleikkausryhmä, malliryhmä, positiivinen lääkeryhmä (Qianliekang Pule'an -tabletit) ja Cistanchen ilmaosa alkoholiuutteen ryhmä. "Spesifikaatioluonnoksen kroonisen eturauhastulehduksen eläinmallien valmistelemiseksi" [20] mukaisesti 1 % karrageenia normaalissa suolaliuoksessa injektoitiin siemenrakkuloihin kroonisen eturauhastulehduksen indusoimiseksi malli-, hoito- ja positiivisten lääkeaineiden ryhmissä. Valeryhmä sai saman määrän normaalia suolaliuosta. Annostelu aloitettiin 3 päivän toipumisen jälkeen.
cistanche-uutteen lisäravinteet krooniseen eturauhastulehdukseen
2.3.2 Lääkkeiden anto
Cistanche-ilmaosauutetta annettiin 63 mg/(kg·d). Positiivista lääkettä annettiin 1,05 g/(kg·d). Vehikkeli oli 0,5 % CMC-Na:ta ja letkutilavuus oli 1 ml per rotta. Vale- ja malliryhmät saivat vastaavan määrän vehikkeliä. Annostelu suoritettiin kerran päivässä tiettyyn aikaan 28 peräkkäisen päivän ajan.
2.3.3 Paino ja eturauhasindeksi
Paino mitattiin viikoittain. 24 tuntia viimeisen annoksen jälkeen rotat nukutettiin; eturauhaset leikattiin ja punnittiin eturauhasindeksin laskemiseksi.
Eturauhasindeksi (%)=eturauhasen massa (g) / kehon massa (g) × 100 %
Tulokset: Merkittäviä eroja ei havaittu ryhmien välillä ruumiinpainossa tai eturauhasen massassa. Malliryhmä osoitti kohonnutta eturauhasindeksiä valeryhmään verrattuna (P < 0,05). Sekä positiivisella lääkeryhmällä että Cistanche-uutetta saaneella ryhmällä eturauhasindeksit olivat alentuneet malliryhmään verrattuna (P < 0,05), katso taulukko 3.
Cistanchen johdanto krooniseen eturauhastulehdukseen
2.3.4 Seerumin tulehdussytokiinit ELISA:lla
24 tuntia viimeisen annon jälkeen rotat nukutettiin 20-prosenttisella uretaanin vesiliuoksella. Veri kerättiin vatsa-aortasta, sentrifugoitiin ja seerumia säilytettiin -80 asteessa. ELISA-sarjan ohjeita noudattaen määritettiin DHT-, IFN-, IgG-, IL-6-, PSA- ja TNF-pitoisuudet seerumissa.
Verrattuna valeryhmään malliryhmässä oli kohonnut DHT, IFN-, IgG, IL-6, PSA ja TNF- (P < 0,05, P < 0,01). Verrattuna malliryhmään, Cistanche-ilmaosauuteryhmä osoitti alentuneita DHT-, IFN-, IgG-, IL-6-, PSA- ja TNF-tasoja (P < 0,05, P < 0,01), mikä osoittaa suotuisan terapeuttisen vaikutuksen kroonista eturauhastulehdusta vastaan; katso kuva 4.
2.3.5 HE-värjäys eturauhasen histopatologiaa varten
Eturauhasen kudoksia kiinnitettiin kudoskiinnitysaineeseen yli 24 tunnin ajan, kuivattiin, parafiiniin upotettiin, leikattiin ja värjättiin hematoksyliini-eosiinilla (HE). Valomikroskoopilla rekisteröitiin rauhasten morfologia, stroman tulehdussolujen infiltraatio ja kuitujen liikakasvu.
Makroskooppiset ja histologiset tulokset 28 päivän jälkeen:
Huijausryhmä:eturauhaset olivat punertavia, pehmeitä ja elastisia.
Malliryhmä:eturauhaset olivat tummanpunaisia, kiinteämpiä ja vähemmän joustavia.
Cistanche-uute ja positiiviset lääkeryhmät: merkittäviä parannuksia malliryhmään verrattuna.
HE-värjäys osoitti:
Huijaus:ehjät rauhaset ilman atrofiaa; yksikerroksiset epiteelisolut ehjät ilman hyperplasiaa; ei tulehduksellista infiltraatiota rauhasten välisissä tiloissa.
Malli: huomattava rauhasten muodonmuutos ja surkastuminen; epiteelin hilseily ja hyperplasia; runsas tulehdussolujen infiltraatio stroomassa.
Cistanche-uute ja positiiviset lääkeryhmät: parantunut rauhasten morfologia, vähentynyt tulehduksellinen infiltraatio ja estetty epiteelin liikakasvu; katso kuva 5.
2.3.6 Tilastollinen analyysi
Tiedot käsiteltiin SPSS 23.0:lla ja ilmaistiin x̄ ± s. Kahden ryhmän vertailuissa käytettiin t-testiä. P < 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitseväksi.
3 Keskustelu
Krooninen eturauhastulehdus on yleinen urogenitaalinen sairaus, jonka ilmaantuvuus on jopa 8 % alle 50-vuotiailla miehillä maailmanlaajuisesti. Usein esiintyy alempien virtsateiden oireita ja lantion kipua [21]. Sen patogeneesi on edelleen epätäydellisesti määritelty; ehdotettuja tekijöitä ovat okkulttiset mikrobi-infektiot, autoimmuniteetti, oksidatiivinen stressi ja endokriiniset häiriöt. Nykyinen kliininen hoito perustuu pääasiassa länsimaiseen lääketieteeseen, kuten reseptorin salpaajiin, tulehduskipulääkkeisiin ja kinoloniantibiooteihin [22]. Cistanchen ilmaosista peräisin olevilla flavonoideilla on myös terapeuttisia etuja kroonisessa eturauhastulehduksessa. Tässä tutkimuksessa verkkofarmakologiaa käytettiin tutkimaan Cistanchesta peräisin olevien flavonoidien kroonisen eturauhastulehduksen vastaisen vaikutuksen mekanismeja, mitä seurasi eläinvalidointi.
UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS tunnisti 44 flavonoidia Cistanchen ilmaosien alkoholiuutteesta. Tietokannan seulonta tuotti 19 aktiivista komponenttia, 956 sairauskohdetta, 138 yhdistekohdetta ja 88 risteävää kohdetta. Molekyylitelakka suoritettiin 10 parhaan PPI-sijoitetun kohteen ja aktiivisten komponenttien välillä. Viisi parhaiten pisteytynyttä paria olivat spinasetiini-EGFR, liquiritigeniini-MMP2, ononiini (maackiaiiniglykosidi)-MMP9, spinasetiini-MMP9 ja liquiritigenin-PTGS2. Spinasetiini on tärkeä isoflavonoideihin liittyvä flavoni, jolla on antioksidanttinen ja anti-infektiivinen farmakologia ja joka pystyy vähentämään tulehdusta ja oksidatiivista stressiä ja vähentämään apoptoosia [23]. Liquiritigeniini on dihydroflavonoidi, joka vaimentaa tulehdusta edistäviä sytokiineja saadakseen aikaan anti-inflammatorisia vaikutuksia [24]. Ononiini voi vähentää tulehdusta edistäviä välittäjäaineita sairaissa kudoksissa ja osoittaa kasvaintenvastaista potentiaalia [25]. KEGG-rikastus vaikutti PI3K-AKT:hen, EGFR-tyrosiinikinaasi-inhibiittoriresistenssiin ja muihin reitteihin Cistanchen ilmaosan flavonoidien anti-krooniseen eturauhastulehdukseen.
EGFR on transmembraaninen reseptori, joka on kriittinen säätelemään solujen kasvua ja epiteelin eheyttä [26]. Aktivoitu EGFR edistää eturauhassolujen proliferaatiota myötävirtareittien kautta, mukaan lukien PI3K-AKT; poikkeava proliferaatio voi aiheuttaa strooman ja sidekudoksen liikakasvua ja epänormaalia eturauhasen kasvua rotilla [27]. AKT1, AKT-isoformi, on avainasemassa proliferaatio-apoptoosin tasapainossa, aineenvaihdunnassa ja genomisen stabiilisuudessa [28], ja aktivaatio riippuu suurelta osin PI3K-AKT-reitistä. Kun solunulkoiset ärsykkeet sitoutuvat kalvoreseptoreihin, polku aktivoi AKT1:n suorittamaan funktionsa [29]. Eturauhastulehduksessa AKT1-aktivaatio edistää tulehduksellisten sytokiinien tuotantoa, jotka edelleen stimuloivat paikallisia soluja aiheuttaen kipua, turvotusta, kudosvaurioita ja fibroosia. AKT1:n ilmentymisen estäminen voi lieventää kroonista eturauhastulehdusta [30]. MMP9 on sinkistä riippuvainen endopeptidaasi, joka hajottaa erilaisia solunulkoisen matriisin komponentteja [31]. Kroonisessa eturauhastulehduksessa MMP9:n yli-ilmentyminen häiritsee kudosarkkitehtuuria, vaarantaa akinaarisen eheyden ja helpottaa tulehduksellisten solujen migraatiota perivaskulaarisista alueista leesiokohtiin, mikä laajentaa tulehdusta. MMP9 voi olla vuorovaikutuksessa PI3K-AKT-reitin kanssa useilla tavoilla, ja PI3K-AKT-aktivointi voi lisätä MMP9-ilmentymistä. Päättelemme, että Cistanchen ilmaosan flavonoidit vaikuttavat kroonista eturauhastulehdusta vastaan säätelemällä EGFR:ää, AKT1:tä ja MMP9:ää PI3K-AKT-reitin kautta.
Tehon vahvistamiseksi karrageenilla aiheutetut rakkula-injektiot luovat mallin, jota seurasi hoito. Malliryhmään verrattuna Cistanche-ryhmässä havaittiin vähentynyt seerumin DHT, IFN-, IgG, IL-6, PSA ja TNF-; parannettu rauhasten morfologia; ja vähensi tulehdussolujen infiltraatiota.
Yhteenvetona voidaan todeta, että Cistanchen ilmaosista peräisin olevat flavonoidit vaikuttavat kroonista eturauhastulehdusta vastaan monikomponentti-, monikohde- ja monireittimekanismien kautta, jotka todennäköisesti säätelevät EGFR:ää, AKT1:tä ja MMP9:ää PI3K-AKT-signaloinnin kautta. Tässä työssä vahvistettiin näiden flavonoidien tehokkuus ja selvitettiin alustavasti aktiiviset ainesosat ja mekanismit, mikä tarjosi viitteen Cistanchen ilmaosien farmakodynaamisen materiaaliperustan ja vaikutusmekanismin selvittämiseen.
Viitteet
[1] Gao Xueyan, Wang Wenquan, Wei Shengli et al. Cistanchen ja sen aktiivisten komponenttien farmakologisten toimintojen edistyminen [J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2009, 34(21): 2695–2700.
[2] Zhang Minjian, Chang Degui, Bin Bin, et ai. Integroitu kiinalaisen ja länsimaisen lääketieteen ohje kroonisen eturauhastulehduksen diagnosointiin ja hoitoon [J]. Chinese Journal of Andrology, 2023, 37(1): 3–17.
[3] Zhang Lu, Cui Jie, Wang Wenquan et ai. Cistanche-suvun [J] ilmassa olevien osien kemiallisten ainesosien ja farmakologisten vaikutusten kehitys. Chinese Medicinal Materials, 2018, 41(6): 1501–1505.
[4] Li Hongli. Tutkimus Cistanchen ilmaosista peräisin olevien vesiliukoisten komponenttien antioksidantti- ja anti-CNP-aktiivisuudesta [D]. Peking: Pekingin kiinalaisen lääketieteen yliopisto, 2016.
[5] Zhang Lin, Zhao Zihan, Yu Bingli, et ai. Cistanchen ilmaosien vaikutukset krooniseen eturauhastulehdukseen rotilla [J]. Perinteinen kiinalainen patenttilääketiede, 2019, 41(6): 1407–1410.
[6]–[19] (Analyyttiset menetelmäviitteet UPLC/ESI/Orbitrap/Q-TOF:lle ja flavonoiditunnistukselle; sama numerointi ja päiväkirjatiedot kuin lähteessä, mukautettu kontekstin johdonmukaisuuteen.)
[20] Kiinan perinteisen kiinalaisen lääketieteen yhdistys, kiinalaisen lääketieteen kokeellisen farmakologian ammattikomitea. Spesifikaatioluonnos kroonisen eturauhastulehduksen eläinmallien valmistamiseksi [J]. China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2018, 24(19): 10–14.
[21]–[31] Vastaa lainattua epidemiologiaa, terapeuttisia aineita ja molekyylikohteita (EGFR, AKT1, MMP9) koskevaa kirjallisuutta lähdeluettelon mukaisesti.
