Cistanche Deserticolan raakatuoteviipaleiden ja viinihöyrykäsitellyn tuotteen kemiallisten komponenttien ja biologisten toimintojen ero

Yhteystiedot: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Sähköposti:audrey.hu@wecistanche.com

Ying Zhang, Yuewu Wang, Song Yang, Yunfeng Xiao, Haibin Guan, Xin Yue, Xiaoqin Wang ja Xiangri Li

Abstract

Tunnetun kiinalaisena yrttilääkkeenä,Cistanche deserticolaon käytetty hoitoonmunuaisten vajaatoimintaoireyhtymä (klikkaa aiheeseen liittyviä tuotteita)Kiinassa tuhansia vuosia. Molemmat raakatuoteCistanche deserticolaviipaleita (RCD) ja sen Wine Steam-Processed Productia (WSCD) käytetään kliinisesti erilaisiin vaikutuksiin. Tässä tutkimuksessa vaikutteita höyrytysprosessin kanssa viini (SPW) alkaenCistanche deserticolakemiallisia koostumuksia ja biologisia vaikutuksia tutkittiin. Kemiallisten koostumusten eroja tutkittiin pääkomponenttianalyysillä (PCA) ja kvantitatiivisella analyysillä. Ravitsevien munuaisten vaikutuksia tutkittiin myös RCD:n ja WSCD:n välisten erojen vertaamiseksi. PCA-tulokset osoittivat, että ilmeinen erottelu saavutettiin RCD:ssä ja WSCD:ssä. Kvantitatiivisen analyysin tulokset osoittivat, että WSCD:ssä on enemmän kokonaispolysakkaridien, PhG:iden, isoakteosidin ja osmantusidi B:n määrät kuin RCD:ssä, kun taas 2? -asetyylilakteosidi ja akteosidi vähenivät SPW:n jälkeen. RCD:n ja WSCD:n vertailu biologisiin aktiivisuuksiin osoitti, että molemmat pystyivät palauttamaan sukupuolihormonitason munuais-yangin puutteen mallissa ja parantamaan antioksidanttivaikutusta. Te WSCD oli paljon parempi lisäämään munuaisen ja siemenrakkulan sisäelinten painoa. Tulokset osoittivat, että SPW muutti kemiallisia komponenttejaan ja tehosti biologista aktiivisuuttaan.

AKA: King of Cistanche--Dr.You

Johdanto

Cistanche deserticolaon yleinen perinteinen kiinalainen lääketiede, ja sitä on yleisesti käytetty tonicina Kiinassa ja Japanissa useiden vuosien ajan, ja se tunnetaan yleisesti nimellä "Desert ginseng".Cistanche deserticolakirjattiin ensimmäisen kerran huippuluokkaan "Shennong's Herbal Classic of Materia Medica (Shen Nong Ben Cao Jing)" noin 100 eKr., ja sitä käytettiin erilaisten sairauksien hoitoon, mukaan lukien munuaisten vajaatoiminta, impotenssi, naisten hedelmättömyys, sairaalloinen leukorrea, runsas metrorrhagia (valkoiset) , kylmyyden tunne lanteissa ja polvissa ja krooninen ummetus vanhuksilla [1]. Tähän mennessä on eristetty useita pääaineosia, kuten polysakkarideja [2, 3], fenyylietanoidiglykosideja (PhG:t) [1, 4], iridoideja [1] ja lignanoideja [1, 5]. Niistä PhG:t ja polysakkaridit ovat tärkeimmät biologisesti aktiiviset komponentitCistanche deserticola[6–9]. Nykyaikaiset farmakologiset kokeet ovat osoittaneet tämänCistanche deserticolavoi tehostaa testosteronin tuotantoa ja suojella siittiöitä, stimuloida solujen lisääntymistä ja parantaa solujen eloonjäämisastetta, osoittaen huomattavaa seksuaalista tehoa, muistia parantavaa, ikääntymistä estävää, vapaiden radikaalien poistamista ja hermosolujen suojaamista [10–13].

Myrkyllisyyden vähentämiseksi ja/tai vaikutusten tehostamiseksi suurin osa perinteisistä kiinalaisista yrteistä tulee käsitellä ennen reseptiä. Perinteisiä prosessivaiheita ovat puhdistus, vesiprosessi (jauhatus vedessä, höyrytys ja paahtaminen) ja vapaa prosessi (sekoituslämmitys viinin, etikan, suolan tai hunajan kanssa) [14]. Prosessin aikana kemialliset komponentit voivat muuttua: tiettyjen komponenttien suhteelliset pitoisuudet voivat muuttua tai uusia komponentteja voi muodostua [15]. Te prosessiCistanche deserticolaon pitkä historia jaCistanche deserticolatulee käsitellä liottamalla riisiviinissä, höyryttämällä Kiinan farmakopeassa (2015 painos) [16] kuvatulla tavalla. SPW:n on osoitettu vaikuttavan niiden vaikutuksiin munuaismeridiaaneihin perinteisen kiinalaisen lääketieteen (TCM) teorian mukaan [17]. WSCD on ensimmäisen kerran dokumentoitu "Lei Gongs Treatise on Preparation and Boiling of Materia Medica (Lei Gong Pao Zhi Lun)" Pohjois- ja Etelä-Dynastiassa Kiinassa. WSCD:tä käytetään paremmin munuaisten vajaatoiminnan hoitoon ja siemennesteen suojaamiseen, kuten Kiinan Song-dynastian "Taiping Shenghui Fangissa" on kirjattu. RCD:n ja WSCD:n välisistä kemiallisista komponenteista ei kuitenkaan toistaiseksi ole tehty vertailevia tutkimuksia.

Nykyaikaiset farmakologiset tutkimukset ovat osoittaneet, että WSCD voi vahvistaa munuaista essenssin turvaamiseksi stimuloimalla hypotalamus-aivolisäke-sukurauhas-akselia vaihtelevasti, ja sitä käytetään munuaisten vajaatoiminnan, kuten munuais-yangin puutteen, hoitoon [18]. Toistaiseksi RCD:n ja WSCD:n biologisten aktiivisuuksien eroja ei kuitenkaan ole tutkittu. Äskettäin kokeellisen tutkimuksen helpottamiseksi munuais-yangin puutoseläinmallia on kopioitu injektoimalla rotille suuri annos hydrokortisonia, jolloin rotilla on oireita, jotka muistuttavat suuresti TCM:n munuais-yangin puutteessa kuvattuja oireita [19, 20]. . Rotilla, joilla on munuais-yangin puutos, on aina joitain oireita, kuten laihtuminen, ruoan kulutuksen väheneminen, heikkous, lisääntynyt veden saanti ja vähentynyt aktiivisuus. Tämän eläinmallin perusteella havaittiin erot ravitsevien munuaisvaikutusten välillä RCD:n ja WSCD:n välillä, ja ne paljastavat jopa perinteisen kiinalaisen prosessin tieteellisen olemuksen.

Cistanche deserticola

2. Materiaalit ja metodit

2.1 Materiaalit ja kemikaalit

Standardiaineet, kuten akteosidi, isoakteosidi, ekinakosidi, cistanosidi A ja 2? - asetyylilakteosidi ostettiin Shanghai Yuanye Biotechnology Co. Ltd:ltä (Shanghai, Kiina). Cistanosidi F, sistanosidi C, osmantusidi B ja tubulosidi B ostettiin Chengdu Pfeide Biotechnology Co. Ltd:ltä (Chengdu, Kiina). Kaikkien standardien puhtaus oli vähintään 98 prosenttia. HPLC-laatuista metanolia ja asetonitriiliä ostettiin yhtiöltä Aladdin Chemistry Inc. (Shanghai, Kiina). Deionisoitu vesi saatiin käyttämällä MilliQ50 SP Reagent Water System -järjestelmää (Bedford, MA, USA) näytteiden ja liikkuvien liuosten valmistukseen. Kaikki muut tässä tutkimuksessa käytetyt orgaaniset liuottimet olivat analyyttistä laatua ja ostettu Shanghai Chemical Co. Ltd:ltä (Shanghai, Kiina).

2.2 Näytteiden kerääminen

Kaikki raakaCistanche deserticola(7 näyteerää) keräsi Sisä-Mongolian lääketieteellinen yliopisto Sisä-Mongolian ja Ningxian maakunnista. Kaikki tunnistettiincistanchedeserticolaYC Makirjoittanut Xiao qin Wang, Sisä-Mongolian lääketieteellisen yliopiston farmakognosian osaston professori. Lahjakorttinäyte talletettiin Sisä-Mongolian lääketieteellisen yliopiston farmasian kouluun. Keräyksen jälkeen kukinnotCistanche deserticolapoistettiin, varret viipaloitiin ja kuivattiin huoneenlämmössä ilmalla, ja sitten viipaleet jaettiin satunnaisesti kahteen ryhmään kussakin erässä: toinen on RCD ja toista käytetään WSCD:n valmistukseen.

WSCD:t valmistettiin laboratoriossa Kiinan farmakopean (2015 painos) [16] mukaisesti, mikä tarkoittaa, että viipaloituja RCD-levyjä liotettiin riisiviinissä suljetussa astiassa 6 tuntia, kunnes ne pehmenivät, ja höyrytettiin vesihauteessa vielä 12 tuntia, kunnes pinta muuttuu mustaksi ja kuivataan huoneenlämmössä ilman kanssa.

2.3 Pääkomponenttianalyysi (PCA)

Pääkomponenttianalyysi (PCA) on pitkälle kehitetty tekniikka, jota käytetään laajalti monimuuttujaongelmien mittojen pienentämiseen. Se vähentää alkuperäisen tietojoukon ulottuvuutta selittämällä useiden muuttujien välisen korrelaation pienemmän määrän taustalla olevia tekijöitä ilman merkittävää tiedon menetystä. Tässä tutkimuksessa erot RCD:n ja WSCD:n välillä tehtiin valvomattomalla PCA:lla käyttäen SIMCA 13.0 -ohjelmistoa HPLC-kromatografian suhteellisten piikkialueiden perusteella. PCA:n avulla selvitettiin kemikaalien tärkeimmät vaikutukset luokitteluun eri näytteiden välillä.

2.4 Näytteen valmistelu

2.4.1 Uutteen valmistus eläimille

RCD ja WSCD valittiin näytteistä, jotka kerättiin ja valmistettiin kohdassa 2.2 kuvatulla tavalla.

Ilmakuivattu ja viipaloitu RCD jauhettiin jauhaimella (FW135, Tianjin Taisite Instrument Co., Ltd.), punnittiin tarkasti 1.0 kg ja liotettiin 50-prosenttisessa etanolissa 30 minuuttia sekä kasvien suhteet. /käytetty etanoli oli 1/10 (w/w). Ja sitten se uutettiin palautusjäähdyttäen kahdesti 1 tunnin ajan kullakin kerralla. Nämä kaksi uutetta yhdistettiin ja suodatettiin ja etanoli otettiin talteen alennetussa paineessa 60 °C:ssa. PhG:iden raakauutteet kuivattiin tyhjössä 60 °C:ssa ja puhdistettiin makrohuokoisella hartsilla. Lopuksi saatiin RCD:n PhGs-uute ja se punnittiin tarkasti. WSCD:n PhGs-uute saatiin noudattamalla samaa edellä olevaa menettelyä.

PhG:iden uuttamisesta saadut sedimentit ilmakuivattiin ja decoktittiin kahdesti 1,5 tunnin ajan joka kerta 20 kertaa vedellä. Nämä kaksi uutetta yhdistettiin ja sentrifugoitiin nopeudella 4 000 rpm 10 minuuttia, ja supernatantti konsentroitiin ja saostettiin 95-prosenttisella etanolilla. Sentrifugoinnin jälkeen sakka kuivattiin tyhjössä 60°C:ssa. Lopuksi saatiin RCD:n polysakkaridiuute ja se punnittiin tarkasti.

WSCD:n polysakkaridiuute saatiin noudattamalla samaa edellä olevaa menettelyä.

RCD:n ja WSCD:n PhG:t ja polysakkaridiuutteet olivat sekoitettuja suspensioita vedessä, kun rottia käsiteltiin suun kautta.

2.4.2. Näytteen valmistelu PhG:iden määritystä varten

Kohdan 2.4.1 PhGs-uutteet punnittiin tarkasti (0,15 g) ja uutettiin ultraäänikäsittelyllä 50 ml:lla 50-prosenttista metanolin vesiliuosta 40 minuutin ajan. Jäähdytyksen jälkeen painon menetystä täydennettiin 50-prosenttisella metanolilla. Kaikki näytteet ja liuottimet suodatettiin 0,45 um:n kalvon läpi ennen analysointia. Neljän PhG:n pitoisuus RCD:ssä ja WSCD:ssä määritettiin käyttämällä HPLC:tä, ja PhG:iden kokonaismäärä määritettiin UV-spektrofotometrialla.

2.5. HPLC:n kromatografiset olosuhteet ja neljän PhG:n määrittäminen.

Kromatografinen erotus suoritettiin UltiMate 3000 HPLC-järjestelmässä (Thermo Fisher Scientific, USA), joka oli varustettu kaksoisgradienttipumpulla, kolonniosastolla ja DAD-detektorilla. . Tiedot kerättiin ja käsiteltiin ChromeLeon Chromatography Data System -järjestelmän avulla. Näytteet erotettiin Agilent Zorbax SB-C18:lla (25 0 mm x 4,6 mm, 5 um), jossa oli C18-suojakolonni (4,6 mm x 12,5 mm, 5 um). Liikkuva faasi koostui asetonitriilistä (A) ja 0,1-prosenttisesta fosforihappoliuoksesta (B) virtausnopeudella 1 ml/min. Gradienttieluointi on seuraava: alku0-13 min. , lineaarinen muutos AB:sta (5:95, tilavuus/tilavuus) AB:ksi (15:85, tilavuus/tilavuus); 13–25 min, lineaarinen muutos AB:hen (20:80, v/v); 25–43 min, lineaarinen muutos AB:hen (25:75, v/v). Ilmaisimen aallonpituutta tarkkailtiin aallonpituudella 330 nm. Kolonnin lämpötila asetettiin arvoon 30 °C ja injektoitu näytetilavuus oli 10 l [21]. Neljää vertailustandardia sisältävä varastoliuos valmistettiin liuottamalla vertailustandardit 50-prosenttiseen metanoliin lopulliseen pitoisuuteen 0,20 mg/ml 2-asetyylilakteosidille, 0,20 mg/ml akteosidille, 0,05 mg/ml osmantusidi B:lle, ja 0,10 mg/ml isoakteosidille. Liuos laimennettiin sitten viiteen eri pitoisuuteen kolmella toistolla kalibrointikäyrien muodostamiseksi. Näytepitoisuus ilmaistiin g/kg raakapainoa.

2.6. PhG:iden kokonaismäärän määritys.

PhG:iden kokonaismäärä määritettiin käyttämällä UV-spektrofotometriamenetelmää aallonpituudella 33 0 nm UV1000-spektrofotometrissä (Shanghai Tianmei Scientific Instrument Co., Ltd.). Varastoliuos valmistettiin liuottamalla ekinakosidistandardeja 50-prosenttiseen metanoliin lopulliseen pitoisuuteen 0,10 mg/ml ja laimennettiin sitten viiteen eri konsentraatioon kolmella toistolla kalibrointikäyrien muodostamiseksi.

2.7. Polysakkaridien määritys.

Polysakkaridien määritys suoritettiin fenoli-rikkihappomenetelmällä. 1 ml näyteliuosta laitettiin 20 ml:n koeputkeen, jossa oli lasitulppa, ja lisättiin 1 ml 6-prosenttista fenoliliuosta ja 5 ml väkevää rikkihappoa ja ravisteltiin 5 minuuttia. Seos siirrettiin kiehuvaan vesihauteeseen 10 minuutiksi ja jäähdytettiin huoneenlämpötilaan ultraviolettisäteilyn havaitsemista varten. Ultraviolettiabsorptiota seurattiin 480 nm:ssä UV1000-spektrofotometrillä. Vedettömän D-glukoosin vertailustandardi punnittiin tarkasti ja liuotettiin tislattuun veteen lopulliseen pitoisuuteen 0,10 mg/ml. Sitten liuos laimennettiin viiteen eri pitoisuuteen kolmella toistolla kalibrointikäyrien muodostamiseksi.

2.8. Eläinkokeet

2.8.1. Eläimet ja asuminen.

Sukukypsät urospuoliset SD-rotat (180-200 g) ostettiin Xinglongin (Peking) Experimental Animal Farmilta (ikä: 6 viikkoa) ja laboratorioeläinlisenssi oli SCXK (Jing):2016-0003. Kaikki eläintoimenpiteet ovat Sisä-Mongolian lääketieteellisen yliopiston eläintutkimuskomitean hyväksymiä, ja ne suoritettiin National Institute of Healthin eläintenhoidon periaatteita koskevien ohjeiden (2004) mukaisesti. Kaikki eläimet pidettiin sulkujärjestelmässä, jonka lämpötila oli säädellyt 21–23 astetta ja suhteellinen kosteus 40–65 prosenttia, sekä 12 tunnin pimeä/valo-sykli. Rotille annettiin ad libitum ruokaa ja vettä, ja ne sopeutuivat yllä olevaan ympäristöön viikon ajan.

2.8.2. Annostus ja näytteenotto.

Rotat siirrettiin yksittäisiin metabolisiin häkkeihin ja jaettiin satunnaisesti 6 ryhmään (?=10 kussakin ryhmässä). Heille annettiin lihaksensisäinen injektio 15 mg/kg hydrokortisoninatriumsukkinaattia (ostettu yhtiöltä Tianjin Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd., Tianjin, Kiina) 2 viikon ajan, paitsi ryhmälle 1, jolle injektoitiin yhtä suuri määrä fysiologista suolaliuosta. 14. päivänä kerättiin ruumiinpaino, ruoankulutus, veden saanti, virtsan määrä ja spontaani aktiivisuus 5 minuutin sisällä varmistaakseen, onko munuaisten yangin puutosmalli tehty onnistuneesti. 15. päivästä lähtien 6 ryhmää käsiteltiin seuraavasti: ryhmä 1 ja ryhmä 2 (malliryhmä, M) käsiteltiin yhtä suurella tilavuudella tislattua vettä, ryhmä 3 (RCD-ryhmän PhGs-uute, PR) käsiteltiin {{12 }},42 g/kg RCD:n PhGs-uutetta, joka vastasi noin 1,8 g/kg raaka-ainettaCistanche deserticolaja muut ryhmät olivat samat, ryhmä 4 (PhGs-uute WSCD-ryhmästä, PW) käsiteltiin annoksella 0,49 g/kg PhGs-uutetta WSCD:stä, ryhmä 5 (RCD-ryhmän polysakkaridiuute, SR). Käsiteltiin 0,18 g/kg:lla RCD:n polysakkaridiuutetta ja ryhmä 6 (WSCD-ryhmän polysakkaridiuute, SW) käsiteltiin annoksella 0,22 g/kg polysakkaridiuutetta WSCD. Kaikki rotat käsiteltiin mahan perfuusiolla päivässä. Kuukauden hoidon jälkeen rotilta evättiin ruokaa 12 tunnin ajan ennen verenottoa. Seuraavana päivänä kaikki rotat nukutettiin ja tapettiin. Testin aikana rotat punnittiin kerran viikossa annostuksen säätämistä varten ja punnittiin uudelleen ennen lopettamista. Verinäytteet kerättiin Eppendorf-putkeen, jossa oli 10 % EDTA-2Na-liuosta. Seerumi erotettiin sentrifugoimalla nopeudella 2000 rpm 15 minuutin ajan ja säilytettiin -80 asteessa. Lisäkäyttöön. Lisäksi munuaiset, kivekset, lisäkives, eturauhanen ja siemenrakkula poistettiin ja punnittiin nopeasti. Punnituksen jälkeen kivekset jäädytettiin nestetypessä SOD:n ja MDA:n määrittämistä varten.

2.9. Hormoni- ja antioksidanttivaikutusanalyysi.

Testosteroni (T) ja estradioli (E2) tasot määritettiin Qingdao Kechuang Quality Inspection Centerissä radioimmuniteetti- ja kolorimetrisellä menetelmällä. Jäätyneet kivekset punnittiin ja sekoitettiin 20 kertaa kylmään fysiologiseen suolaliuokseen (W/W). Kudoshomogenaatilla jäähauteessa saatu kiveshomogenaatti sentrifugoitiin supernatantin saamiseksi. Kiveksen SOD- ja MDA-pitoisuudet määritettiin SOD- ja MDA-sarjoilla ohjeita noudattaen.

2.10. Tilastollinen analyysi.

Ryhmien välisten erojen merkitystä verrattiin yksisuuntaisella ANOVA-testillä, jota seurasi Schefen testi merkitsevyysrajalla 0.05 käyttämällä SPSS-ohjelmistoa 25.0. Kaikki tiedot ilmaistiin keskiarvona ± standardipoikkeama (SD)

(n=3).

Cistanche deserticolaottaa talteen

3. Tulokset

3.1. Te PhG-muutosten analyysi SPW:n jälkeen PCA:ta käyttämällä.

PhGs-muutosten vertaamiseksi SPW:n jälkeen 9 kromatografista piikkiä valittiin tunnusomaisiksi huipeiksi ja tunnistettiin. Niiden rakenteet on esitetty kuvassa 1, jonka suhteelliset piikkien pinta-alat laskettiin kvantitatiiviselle ilmentymiselle. Kuviossa 2 esitetty HPLC-kromatogrammi osoitti, että tärkeimpien PhG:iden suhteellinen pitoisuus muuttui SPW:n aikana. PCA-analyysi yhdeksän komponentin suhteellisista piikkialueista saatiin eri näytteiden erottamiseksi. RCD ja WSCD olivat kaukana toisistaan ​​pisteytyskaaviossa (kuva 3 (a)), mikä osoitti, että näytteet luokiteltiin kahteen klusteriin. Joten uskotaan, että kemiallisten aineosien pitoisuudet olivat erilaisia. Mahdollisten kemiallisten merkkiaineiden löytämiseksi erottelua varten suoritettiin laajennettu tilastollinen analyysi latausbiplotin muodostamiseksi (kuva 3(b)). Huiput 2, 3, 4, 6 ja 7 pienenevät SPW:n jälkeen, kun taas piikit 5, 8 ja 9 kasvavat, ja ne kaikki olivat tärkeimmät komponentit erottamaan RCD ja WSCD. Piikin 1 suhteellinen sisältö ei vaihtele paljon SPW:n jälkeen.

3.2. Kokonaispolysakkaridien ja PhG:iden sisältö muuttunut SPW:n jälkeen.

Kuten kuvasta 3(b) näkyy, 8 komponenttia (5, 8 ja 9 lisääntyi ja 2, 3, 4, 6 ja 7 pieneni) olivat muuttuneet merkittävästi ja niillä oli suuri vaikutus näytteiden klusterointiin. Niistä isoakteosidi ja osmantusidi B olivat lisääntyneet eniten, kun taas 2? -asetyylilakteosidi ja akteosidi vähenivät eniten. Joten isoakteosidin sisältö, Osmanthuside B, 2? -asetyylilakteosidi ja akteosidi määritettiin HPLC:llä. Kuten kuviossa 1 esitetään, piikki 4 oli akteosidi, piikki 5 oli isoakteosidi, piikki 7 oli 2? -asetyylilakteosidi ja piikki 8 oli osmantusidi B. RCD:n ja WSCD:n PhG:t kokonaismäärä määritettiin UV-menetelmällä ja kokonaispolysakkaridit suoritettiin fenoli-rikkihappomenetelmällä, tulokset on esitetty taulukossa 1, isoakteosidi, osmantusidi B. , kokonaispolysakkaridit ja PhG:t WSCD:ssä olivat lisääntyneet merkittävästi RCD:hen verrattuna. 2? -asetyylilakteosidi ja akteosidi olivat vähentyneet merkittävästi.

3.3. Hydrokortisonin aiheuttama munuais-Yangin puutosmalli tehtiin.

Normaaliryhmään verrattuna 2 viikon lihaksensisäisen injektion jälkeen 15 mg/kg hydrokortisoni-natriumsukkinaattia ruumiinpaino, ruoankulutus ja spontaani aktiivisuus laskivat merkittävästi (P<0.05), and="" the="" water="" intake="" and="" urine="" volume="" were="" increased;="" the="" results="" were="" shown="" in="" table="" 2.te="" t="" and="" e2="" levels="" in="" the="" serum="" of="" the="" model="" group="" were="" lower="" than="" the="" normal="" group="" as="" shown="" in="" figure="" 4.="" from="" the="" above,="" the="" kidney-yang="" deficiency="" model="" was="" successfully="">

3.4. Uutteiden vaikutus sisäelinten keskimääräiseen painoon ja indeksiin.

Kaikki rotat ja niiden sisäelimet punnittiin ja sitten keskimääräinen sisäelinten indeksi laskettiin. Verrattuna N-ryhmään M-ryhmä oli alentanut välittömästi munuaisen, siemenrakkulan, lisäkiveksen ja kiveksen sisäelinten painoja, mikä osoitti myös, että hydrokortisonin aiheuttama munuais-yang-puutosmalli tehtiin onnistuneesti. Verrattuna M-ryhmään, kaikkien havaittujen sisäelinten paino oli lisääntynyt PW- ja SR-ryhmässä, PR-ryhmässä kiveksen, lisäkiveksen, rakkulan ja eturauhasen paino ja SW-ryhmässä munuaisten, kivesten, lisäkiveskiven, ja siemenrakkula. PR-ryhmiin verrattuna PW-ryhmä oli parempi munuaisissa, siemenrakkuloissa ja eturauhasessa. SR- ja SW-ryhmien välillä ei ollut merkittävää eroa kiveksen, lisäkiveksen, siemenrakkulan ja eturauhasen painossa. Tulokset on esitetty taulukossa 3.

Verrattuna N-ryhmään munuaisen, kiveksen, lisäkiveksen ja siemenrakkulan sisäelinten indeksit laskivat M-ryhmässä. M-ryhmään verrattuna PW- ja SR-ryhmät olivat nostaneet munuaisten, kivesten, eturauhasen ja rakkulan indeksiä, PR-ryhmissä kiveksen, eturauhasen ja siemenrakkulan indeksiä ja SW-ryhmässä lisäsi munuaisten, kivesten ja siemenrakkuloiden indeksiä. PR-ryhmiin verrattuna PW-ryhmä oli parempi munuaisissa, siemenrakkuloissa ja eturauhasessa. SW- ja SR-ryhmällä oli samanlainen munuais-, kives-, rakkula- ja lisäkivesindeksi. Tulokset on esitetty taulukossa 4.

3.5. Uutteen vaikutus hormonitasoon (T ja E₂)

Kuten kuvasta 4 näkyy, verrattuna M-ryhmään T- ja E2-tasot kaikissa hoitoryhmissä (PW, PR, SW ja SR-ryhmä) olivat lisääntyneet merkittävästi (P<0.05). however,="" the="" pw="" group="" was="" better="" than="" pr="" group="" in="" the="" level="" t="" and="" e2.="" te="" sr="" and="" sw="" groups="" had="" no="" significant="">

3.6. Uutteiden vaikutus antioksidanttiseen vaikutukseen.

SOD on tärkeä antioksidanttientsyymi. MDA on lipidien peroksidaatiotuote, joka on osoitus hapettimen vaurion asteen korjaamisesta. SOD:n ja MDA:n pitoisuudet heijastavat hapettimen ja antioksidanttikyvyn laajuutta. Kuten kuvassa 5 on esitetty, M-ryhmään verrattuna antioksidanttivaikutus kaikissa hoitoryhmissä (PW, PR, SW ja SR) oli parantunut. SW-ryhmällä oli suurin antioksidanttivaikutus.

Cistanche deserticola

4. Keskustelu

Ennen kliinistä käyttöä raakamateriaalit tulee käsitellä perinteisillä kiinalaisilla prosessitekniikoilla. Höyrytys on eräiden kiinalaisten lääkeyrttien perinteinen käsittelytapa, joka antaa Maillardin reaktion [22] tuottaman mustan värin, mikä lisää joidenkin bioaktiivisten komponenttien [23] määriä ja farmakologisia aktiivisuuksia. WSCD yhtenä prosessituotteena ravitsee paremmin munuaisia ​​kuin RCD, kuten Kiinan farmakopean 2015 painoksessa dokumentoidaan. Tässä tutkimuksessa PCA-tulokset osoittivat, että SPW:n oli muutettava RCD:n kemiallista profiilia. Lisäksi kahdeksan komponenttia PhG:issä oli muuttunut merkittävästi. PhG:t, kokonaispolysakkaridit, isoakteosidi ja osmantusidi B olivat lisääntyneet eniten, kun taas 2? -asetyylilakteosidi ja akteosidi vähenivät SPW:n jälkeen. Tulokset osoittivat, että SPW voi muuttaa RCD:n kemiallisia ainesosia. PhG:iden pitoisuudet, joissa oli 1,3,4- trisubstituoituja glukopyranosyyliosia (kuten akteosidi, 2'-asetyylilakteosidi ja cistanosidi C), vähenivät WSCD:ssä, mutta niiden isomeerien pitoisuudet 1,3,{{13 }} trisubstituoitu glukopyranosyyliosa (kuten isoakteosidi ja tubulosidi B) lisääntyi, mikä osoitti, että kemiallisten aineosien transformaatiota saattaa tapahtua SPW:n aikana, ja hydrolyysireaktio on yksi syy. Ehdotetut transformaatioreitit on esitetty kuvassa 6. Polysakkaridien lisääntyminen SPW:n jälkeen oli raportoitu myös ginsengissä [24].

Cistanche deserticoladokumentoitiin virkistävän munuaisia ​​ja kumoavan testosteronitason laskua, ja sillä on antioksidanttinen vaikutus ja anti-inflammatorinen vaikutus [25], ja PhG:t ja polysakkaridit olivat kaksi tärkeintä biologisesti aktiivista komponenttiaCistanche deserticola. PhG:inä isoakteosidilla ja osmantusidi B:llä oli hapettumisenesto- ja anti-inflammatorisia puutteita [26, 27]. Niinpä tutkittiin RCD:n ja WSCD:n farmakologisten vaikutusten vertailua testosteronitasossa ja antioksidanttivaikutuksessa. Hydrokortisonin aiheuttaman munuais-yangin puutteen mallissa hormonitoiminta häiriintyi ja sukupuolihormonitaso veressä laski huomattavasti. Tässä tutkimuksessa sukupuolihormonianalyysin tulokset osoittivat, että sekä RCD että WSCD voivat merkittävästi lisätä T- ja E2-tasoa, ja sekä PhG:t että polysakkaridit osoittivat sukupuolihormonien paranemista. Te WSCD oli parempi kuin RCD, erityisesti PhGs-uuteryhmissä. Sisäelinten indeksien tulokset osoittivat, että sekä PhG:t että polysakkaridit voivat parantaa sisäelinten painoja ja niiden painoindeksejä. PhGs-uuteryhmissä WSCD on parempi kuin RCD lisäämään munuaisten ja siemenrakkuloiden painoja ja indeksejä. Lisäksi,Cistanche deserticolasillä on merkittävä antioksidanttivaikutus, erityisesti polysakkaridiuuteryhmät, joissa on WSCD. Kuten edellä käsiteltiin, sekä RCD että WSCD voisivat parantaa munuais-yangin puutosoireyhtymää; WSCD on kuitenkin parempi kuin RCD nostaessaan T-, E2-tasoa, lisäkiveksen ja kiveksen painoja ja indeksejä. Farmakologisten vaikutusten tutkimuksen tulokset osoittivat, että SPW oli muuttanut PhG:iden kemiallisia komponentteja ja lisännyt polysakkaridien pitoisuutta, mikä puolestaan ​​nosti sukupuolihormonitasoa ja tehosti antioksidanttivaikutusta.

5. Päätelmät

Tutkimuksen tarkoituksena oli selvittää PhG:iden, kokonaispolysakkaridien muutos sekä farmakologinen vaikutus RCD:ssä ja WSCD:ssä munuais-yangin puutosrotilla, erityisesti hormonitasolla ja antioksidanttisella vaikutuksella. Tämä tutkimus on osoittanut, että perinteisten kiinalaisten yrttien valmistusprosessi voi muuttaa niiden kemiallisia ainesosia ja vaikuttaa niiden bioaktiivisuuteen. Tukea on myös se, että raakoja tuotteita ja jalostettuja tuotteita määrättiin klinikalla eri tavalla.

cistanche-kapselit

Viitteet

[1] Y. Jiang ja P.-F. Tu, "Kemiallisten aineosien analyysiCistanchelajit", Journal of Chromatography A, voi. 1216, nro 11, s. 1970–1979, 2009.

[2] W. Zhao, H. Yan, Z.-Y. Liang, Y.-J. Zhang ja X.-Q. Jiao, "Vesiliukoisen polysakkaridi SPA:n rakenneanalyysi, joka on eristetty varrestaCistanchedeserticolaMa"Chemical Journal of Chinese Universities, osa 26, nro 3, s. 461–463, 2005.

[3] Q. Dong, J. Yao, J.-N. Fang ja K. Ding, "Kahden kylmässä vedessä uutettavasta polysakkaridin rakenteellinen karakterisointi ja immunologinen aktiivisuusCistanchedeserticolaYC Ma”, Carbohydrate Research, osa 342, nro 10, s. 1343–1349, 2007.

[4] X.-M. Wu ja P.-F. Tu, "P-(1?→6)-glukaanien eristäminen ja karakterisointiCistanchedeserticola", Journal of Asian Natural Products Research, osa 7, nro 6, s. 823–828, 2005.

[5] B. Koˇs´ıkov´a, A. Ebringerov´a ja R. Naran, "Puun loisista eristettyjen ligniini-hiilihydraattifraktioiden karakterisointiCistanche deserticola YC Ma.," Holzforschung, osa 53, nro 1, s. 33–38, 1999.

[6] G. Sheng, X. Pu, L. Lei, P. Tu ja C. Li, "Tubuloside B fromCistanchesalsa pelastaa PC12-hermosolut 1-metyyli-4--fenyylipyridinium-ionien aiheuttamalta apoptoosilta ja oksidatiiviselta stressiltä", Planta Medica, osa 68, nro 11, s. 966–970, 2002.

[7] M. Deng, J.-Y. Zhao, X.-D. Ju, P.-F. Tu, Y. Jiang ja Z.-B. Li, "Tubulosidi B:n suojaava vaikutus TNF-alfan aiheuttamaan apoptoosiin hermosoluissa", Acta Pharmacologica Sinica, voi. 25, ei. 10, s. 1276–1284, 2004.

[8] X. Geng, L. Song, X. Pu ja P. Tu, "Fenyylietanoidiglykosidien hermostoa suojaavat vaikutuksetCistanchessalsaa 1- metyyli-4-fenyyli-1,2,3,6-tetrahydropyridiinin (MPTP) aiheuttamaa dopaminergistä toksisuutta vastaan ​​C57-hiirillä", Biological & Pharmaceutical Bulletin, osa 27 , nro 6, s. 797–801, 2004.

[9] H. Chen, FC Jing, CL Li, PF Tu, QS Zheng ja ZH Wang, "Echinacoside estää aivojuovion solunulkoisten monoamiinin välittäjäaineiden tasoja alenemasta 6- hydroksidopamiinileesiorotissa", Journal of Ethnopharmacology, vol. 114, nro 3, s. 285–289, 2007.

[10] J. Pan, C. Yuan, C. Lin, Z. Jia ja R. Zheng, "Pharmacological activities andmekanismit luonnollisten fenyylipropanoidiglykosidien", Die Pharmazie, voi. 58, nro. 11, s. 767–775, 2003.

[11] G. Fu, H. Pang ja YH Wong, "Luonnollisesti esiintyvät phenylethanoid glycosides: Potential leads for new therapys", Current Medicinal Chemistry, voi. 15, ei. 25, s. 2592–2613, 2008.

[12] X.-W. Wang, X.-F. Wang ja L.-Y. Wu, "Hiirten fenyylietanoidiglykosidien muistin parantaminenCistanchedeserticola", Chinese Pharmacological Bulletin, nro 19, s. 41-42, 2002.

[13] J.-X. Xie ja C.-F. Wu, "Ethanoliuutteen vaikutusCistanchedeserticolamonoamiinin välittäjäaineiden sisällöstä rotan aivoissa", Chinese Traditional and Herbal Drugs, nro 24, s. 417–419, 1993.

[14] H. Wu ja C.-J. Hu, Kiinan lääketieteen prosessin kuri, People's Medical Publishing House, Peking, Kiina, 2012.

[15] ZZ Zhao, ZT Liang, K. Chan et ai., "Ainutlaatuinen ongelma kiinalaisen materia medican standardoinnissa: käsittely", Planta Medica, voi. 76, nro. 17, s. 1975–1986, 2010.

[16] Chinese Pharmacopoeia Commission, Pharmacopoeia of the People's Republic of China 2015, voi. IV, Kiinan kansantasavallan farmakopea, Peking, Kiina, 2015.

[17] J.-M. Chen, Materia Medicalin valaiseva primer, perinteinen kiinalainen lääketiede Ancient Books Press, Peking, Kiina, 2009.

[18] B.-R. Li ja Y.-C. Hän, "Tonisoivien munuaislääkkeiden vaikutukset hypotalamus-aivolisäke-gonad (HPG) akseliin", Journal of Traditional Chinese Medicine, no. 7, s. 63–65, 1984.

[19] M. Chen, L. Zhao ja W. Jia, "Metabonomic study on the biochemical profiles of a hydrocortisone-induced animal model", Journal of Proteome Research, voi. 4, ei. 6, s. 2391–2396, 2005.

[20] Q. Chen ja N.-Y. Yi, "Te eläinmallit ja lääkkeet Yindefciency- ja Yang-deficienssiin", teoksessa Experimental Methodology of Pharmacological Research in Traditional Chinese Medicine, People's Health Publishing House, Peking, Kiina, 1993.

[21] Z.-G. Ma, Z.-L. Yang, P. Li ja C.-H. Li, "Kahdeksan fenyylietanoidiglykosidin samanaikainen määritys suvun eri lajeistaCistanchekorkean erotuskyvyn nestekromatografialla", Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies, voi. 31, no. 18, s. 2838–2850, 2008.

[22] Z. Liu, Z. Chao, Y. Liu, Z. Song ja A. Lu, "Maillard-reaktio, joka liittyy Polygonum multiformin juuren höyrytysprosessiin", Planta Medica, voi. 75, nro. 1, s. 84–88, 2009.

[23] W.-T. Chang, YH Choi, R. Van Der Heijden, et ai., "Perinteinen prosessointi vaikuttaa voimakkaasti metaboliittikoostumukseen hydrolyysin kautta Rehmannia glutinosan juurissa", Chemical & Pharmaceutical Bulletin, voi. 59, nro. 5, s. 546–552, 2011.

[24] Y. Jin, Y.-J. Kim, J.-N. Jeon et ai., "Valkoisen, punaisen ja mustan ginsengin vaikutus fysikaalis-kemiallisiin ominaisuuksiin ja ginsenosideihin", Plant Foods for Human Nutrition, voi. 70, ei. 2, s. 141–145, 2015.

[25] T. Wang, X.-Y. Zhang ja W.-Y. Xie, "CistanchedeserticolaYC Ma, "aavikon ginseng": katsaus", American Journal of Chinese Medicine, osa 40, nro 6, s. 1123–1141, 2012.

[26] S.-Y. Nam, H.-Y. Kim, M.-S. Yoou et ai., "Anti-inflammatoriset vaikutukset isoakteosidista Abeliophyllum distichumista", Immunopharmacology and Immunotoxicology, voi. 37, nro. 3, s. 258–264, 2015.

[27] S. Chae, JS Kim, KA Kang, et ai., "Antioxidant activity of isoacteoside from Clerodendron trichotomum", Journal of Toxicology and Environmental Health, osa A. Current Issues, voi. 68, nro. 5, s. 389–400, 2005.