Neohesperidinin ikääntymistä estävä potentiaali ja sen synergistiset vaikutukset Osa 1

Ota yhteyttäoscar.xiao@wecistanche.comLisätietoja

Abstrakti:Monien kasviflavonoidien ikääntymistä estävää vaikutusta sekä niiden vaikutusmekanismeja on tutkittu nykyisessä kirjallisuudessa. Eri flavonoidiyhdisteiden synergistisiä vaikutuksia koskevat tutkimukset olivat kuitenkin aikaisemmissa raporteissa melko rajallisia. Tässä tutkimuksessa testasimme korkean suorituskyvyn määritystä käyttämällä eri sitrushedelmien flavonoidien synergistisiä vaikutuksia hiivan kronologisen elinkaaren (CLS) aikana. Tutkimme neljän flavonoidiyhdisteen, mukaan lukien naringiinin, hesperidiinin, hesperidiinin, neohesperidiinin, sekä niiden eri yhdistelmien vaikutusta BY4742-hiivakannan CLS:ään. Niiden ROS-puhdistuskyky, in vitro antioksidanttiaktiivisuus ja vaikutus solunulkoiseen pH-arvoon testattiin myös. Tulokset osoittivat, että neohesperidiini pidensi hiivan CLS:ää konsentraatiosta riippuvalla tavalla. Erityisesti havaitsimme, että neohesperidiini osoitti suurta potentiaalia pidentää orastavan hiivan CLS:ää erikseen tai synergistisesti hesperetiinin kanssa. Neohesperidiinillä oli voimakkain vaikutus reaktiivisten happilajien (ROS) kertymisen vähentämiseen hiivassa.puritaanit c-vitamiiniNämä havainnot osoittivat selvästi, että neohesperidiini on mahdollisesti ikääntymistä estävä sitrushedelmien flavonoidi, ja sen synergistinen vaikutus muiden flavonoidien kanssa hiivan CLS:ään on mielenkiintoinen aihe tulevassa sitrushedelmien ikääntymistä estävässä tutkimuksessa.

Avainsanat:sitrushedelmien flavonoidit; neohesperidiini; ikääntymistä estävä toiminta; kronologinen elinikä; SYNERGISTINEN vaikutus

1. Esittely

Ikääntyminen, monimutkainen ja monitekijäinen biologinen prosessi, voidaan määritellä fysiologisen ja psykologisen eheyden asteittaiseksi menettämiseksi, mikä johtaa lähes kaikkien toimintojen asteittaiseen heikkenemiseen ja lisääntyneeseen kuolemaan [1]. Hoito, joka kohdistuu useisiin ikääntymisprosessin tekijöihin ja/tai reitteihin, on hyvä ehdokas tutkittavaksi. Tällä hetkellä väestön ikääntymisen trendi on vähitellen lisääntymässä. Tämän väestökehityksen vuoksi on suuri käytännön merkitys löytää tehokkaita tapoja hidastaa ikääntymistä tai parantaa ikääntymisen tervettä tilaa. Useiden eri alojen tutkijat ovat tutkineet fytokemikaalien ikääntymistä estävää vaikutusta. Nykyisessä kirjallisuudessa on ehdotettu monilla erilaisilla kasviyhdisteillä olevan suoraa/mahdollista ikääntymistä estävää vaikutusta [2-5].

Napsauta tätä saadaksesi lisätietoja

Orastava hiiva Saccharomyces cerevisiae on toiminut johtavassa roolissa malliorganismina tutkittaessa evoluutionaalisesti konservoituneita mekanismeja, jotka liittyvät ihmisen ikääntymiseen ja ikääntymiseen liittyviin sairauksiin [6]. Hiivassa on kahdenlaisia ​​eliniän tyyppejä, nimittäin replikoiva elinikä (RLS)[7] ja kronologinen elinikä (CLS)[8]. RLS määritellään tytärsolujen lukumääräksi, jonka emosolu voi tuottaa ennen kuin solujen orastuminen lakkaa [9], kun taas CLS on aika, jonka orastuvat hiivasolut selviävät sen jälkeen, kun ne ovat käyneet läpi ravinteiden ehtymisen aiheuttaman solusyklin pysähtymisen paikallaan olevassa vaiheessa [9]. 10]. RLS ja CLS voivat toimia malleina proliferoituville ja ei-proliferoituville kudoksille korkeammissa eukaryooteissa [6].

Yrttilääkeyhdistelmien pitkäaikainen ja menestyksekäs käyttö perinteisessä lääketieteessä inspiroi meitä tutkimaan terveellisesti toimivien fytokemikaalien synergististä vaikutusta.SistancheNykyään synergiaarvioinnista on tullut keskeinen lääketieteellisen tutkimuksen osa-alue, jolla pyritään parantamaan hoitojen tehokkuutta ja vaikuttamaan ei vain yhteen kohteeseen, vaan useisiin tavoitteisiin[11]. Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että sitrushedelmissä laajalti levinneillä naringiinilla, hesperidiinillä, hesperetiinillä ja neohesperidiinillä on useita biologisia vaikutuksia ikääntymisen estämiseen, ja yksityiskohtaiset tiedot näistä fytokemikaaleista on esitetty kirjallisuudessa [12-21]. Fykokemikaaleja arvioitiin kuitenkin vähemmän yhdistelminä. Ainakin niiden kolmikomponenttisia yhdistelmiä raportoitiin harvoin. Samaan aikaan neohesperidiinin vaikutusta orastavan BY4742-hiivan CLS:ään ei paljastettu aikaisemmin.

Flavonoidiyhdistelmien toiminnan paljastamiseksi orastavan BY4742-hiivan CLS:n pidentämisessä testattiin myös neljä flavonoidiyhdistettä, niiden binääri- ja kolmikomponenttiyhdistelmien vaikutus BY4742-hiivan CLS:ään sekä niiden ROS-puhdistuskyky ja in vitro antioksidanttiaktiivisuus. työ. Samaan aikaan neljällä yhdisteellä käsitellyn hiivan solunulkoiset pH-arvot havaittiin, koska viljelyalustan solunulkoinen happamoittaminen saattaa aiheuttaa solunsisäistä vauriota kronologisesti ikääntyvässä populaatiossa [22].

2. Tulokset

2.1. Neohesperidiini pidensi hiivan elinikää pitoisuudesta riippuvaisella tavalla

DMSO:ta käytettiin yleisesti liuottimena veteen liukenemattomille lääkkeille, ja erilaiset DMSO-pitoisuudet vaikuttivat vaihtelevasti hiivan kasvuun [23]. Siksi seuloimme ensin sopivan DMSO-pitoisuuden. Kuten kuvasta 1(A) näkyy, hiivan eliniässä ei ollut merkittävää eroa viljelyalustassa 0,2 prosentilla ja 0,4 prosentilla DMSO:lla verrattuna kontrolliin, kun taas elinikä 0,6 prosenttia ja 0,8 prosenttia DMSO:ta laskivat merkittävästi. Liuottimen vaikutuksen eliminoimiseksi kokeissa asetimme DMSO:n lopulliseksi väliainepitoisuudeksi 0,2 prosenttia seuraavien kokeiden suorittamista varten.

Cistanche voi estää ikääntymistä

Suuritehoisia määrityksiä käytettiin CLS:n nopeaan kvantifiointiin laajan kronologisen ikääntymismallin ansioiden vuoksi [24,25]. Siksi käytimme tätä menetelmää neljän sitrushedelmän flavonoidin (naringiini, hesperidiini, hesperetiini ja neohesperidiini) seulomiseen niiden ikääntymistä estävän vaikutuksen suhteen. Määritimme neljän fytokemikaalin pitkäikäisyyden tehokkuuden eri annoksilla, välillä 0 μM - 100 μM. Tuloksen perusteella havaittiin, että neohesperidiini osoitti potentiaalia laajentaa BY4742:n CLS-arvoa 0,1 μM:lla, kun taas kolme muuta yhdistettä eivät pystyneet lisäämään solujen eloonjäämistä asetetuilla pitoisuuksilla (kuva 1B). Kombinatorisista kokeista tässä valittiin A:n, B:n, C:n ja D:n pitoisuudet 100, {{20}},1, 0,1 ja 0,1 µM. Nimittäin seuraaviin yhdistelmämäärityksiin käytettiin A (100 uM naringiinia), B (0,1 uM hesperidiiniä), C (0,1 uM hesperetiiniä) ja D (0,1 uM neohesperidiiniä).

Kumulatiivisen prosessointiajan uskotaan olevan tärkeä tekijä solujen kasvuun vaikuttamisessa. Tämän hypoteesin mukaisesti tietomme osoittivat, että neljä flavonoidiyhdistettä eivät vaikuttaneet solujen kasvuun välittömästi 24 tunnin lisäyksen jälkeen eri käsittelyaikoina (kuva 2). Koska A:lla, B:llä, C:llä ja D:llä käsitellyn hiivan kasvukäyrät olivat lähes samat kuin kontrollien.mikä on cistancheTämä osoitti myös, että nämä neljä yhdistettä eivät estäneet hiivasolujen kasvua. Kuitenkin, kun käsittely aloitettiin päivänä 2, kasvun eloonjäämisluvut/CLS saattoivat muuttua pitkän ajanjakson aikana (kuva 3).

Kuva 3. (A) BY4742-hiivan eloonjäämisluvut eri yhdisteiden ja niiden yhdistelmien käsittelyssä päivästä 2 päivään 2 0 mitattiin joka toinen päivä. Eloonjäämisprosentti laskettiin seuraavasti. Missä tOD= 0.3,2day on aika, jolloin päivän 2 ikäpisteen OD-arvo saavuttaa arvon 0,3 kasvukäyrissä. Alkuperäinen ikäpiste (päivä 2) määritellään 100 prosentin elinkelpoisuudeksi, ja kunkin peräkkäisen ikäpisteen suhteellinen eloonjäämisprosentti voidaan laskea seuraavasti: In =,—×100n=päivää, Dt, edustaa keskimääräistä kaksinkertaistumisaikaa. Kunkin kuopan eloonjäämisintegraali (S) määritellään eloonjäämiskäyrän alla olevaksi alueeksi (AUC, ja se voidaan arvioida kaavalla: SI=E(L plus )(päivä-päivä-1), jossa daym on ikäpiste, kuten päivät 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18 ja 20. (B) Neljän flavonoidiyhdisteen ja niiden binääri- ja kolmikomponenttiyhdistelmien vaikutus kronologiseen elinikään hiivassa BY4742 niiden edullisissa pitoisuuksissa.AUC tarkoittaa käyrän alla olevaa pinta-alaa. Yksisuuntainen ANOVA-monivertailu. Tiedot ilmaistiin keskiarvoina ± keskiarvon standardivirhe (SEM), n=4.*p<><0.0001.a（100um naringin）,="" b（0.1="" μm="" hesperidin）,="" c（0.1="" μm="" hesperetin）,="" d="" （0.1="" μum="">

2.2. Neohesperidiini, joka vuorovaikutti positiivisesti hesperetiinin kanssa hiivan BY4742 CLS:n pidentämiseksi

Yhdistelmähoidon osoitettiin olevan uusi ja erittäin tehokas hoitostrategia monien sairauksien, kuten diabeteksen [26], syövän [27], sydän- ja verisuonitautien [28], liikalihavuuden ja osteoporoosin [29], hallitsemiseksi. Täällä tutkimme naringiinin, hesperidiinin, hesperetiinin ja neohesperidiinin binääri- ja kolmikomponenttiyhdistelmien vaikutusta orastavan BY4742-hiivan CLS:ään. Kuvio 3A esitti hiivan eloonjäämisasteet erilaisissa flavonoidikäsittelyissä. Jokaisessa hoidossa havaittiin 10 ikääntymispistettä. Se osoitti, että joidenkin hoitojen eloonjäämisluvut olivat korkeammat verrattuna kontrolliin.Anti-aging -vesisäiliöKuvasta 3B tulos osoitti meille selvästi, että D:n, BD:n ja ABD:n hoidossa oli merkittäviä eroja (p<0.05), just="" weaker="" than="" cd="" and="" bcd=""><0.0001). we="" can="" see="" that="" d(neohesperidin)showed="" an="" important="" function="" in="" the="" individual="" or="" synergistically="" treatments.="" therefore,="" we="" could="" conclude="" that="" neohesperidin="" had="" great="" potential="" in="" increasing="" cls="" of="" budding="" yeast="" by4742="" individually="" or="" synergistically="" with="">

2.3. Neohesperidiinin merkittävästi vähentynyt solunsisäinen reaktiivinen happilaji (ROS)

Harmanin mukaan mitokondrioissa syntyvän ROS:n aiheuttamat solukomponenttivauriot ovat tärkein organismin ikääntymistä kiihdyttävä voima[30,31]. Kuten kuvasta 4A näkyy, kaikilla neljällä flavonoidilla oli huomattava ROS-poistokyky. Neljästä yksittäisestä hoidosta neohesperidiinillä oli merkittävin vaikutus.cistanche benefíciosMuut hoidot yhdessä, kaikki kolmikomponentit yhdistelmät ja BD eivät myöskään vähentäneet solunsisäistä ROS:ää. Mitä tulee binääriyhdistelmiin, kuten AB, AC, AD ja BC, niillä oli korkeampi ROS-poistoaktiivisuus kuin vastaavilla yksittäisillä aineilla. Binääriyhdistelmän BD ROS-poistokyky oli B:n ja D:n välillä, kun taas CD:n toiminto oli melkein sama kuin D:n.

Kuva 4. （A）A:n vaikutus (100 μM naringiinia), B (0.1 μM hesperidiiniä), C (0,1 μM hesperetiiniä), D (0,1 μM neperetiiniä) ), niiden binääriset ja ternääriset yhdistelmät hiivan (BY4742) solunsisäisillä ROS-tasoilla, jotka on kasvatettu tavallisessa SD-elatusaineessa 2 päivän käsittelyn jälkeen (n= 12). Käytettiin ROS-koetinta H2DCFDA. Diklooridihydrofluoreseiini (DCF). Yksisuuntainen ANOVA useita vertailuja. Tiedot ilmaistiin keskiarvoina ± keskiarvon standardivirhe (SEM), n=12. * s<0.0001;(b)the antioxidant="" capacity="" （y="" m="" trolox="" equivalents/μm="" phytochemical）="" of="" a="" （naringin）,="" b（hesperidin）,="" c="" （hesperetin）,="" d="" (neohesperidin)="" and="" their="" binary="" and="" ternary="" combinations="" evaluated="" by="" 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl="" (dpph,="" frap="" and="" abts="" assays.="" apci="" (antioxidant="" potency="" composite="" index)="Z(the" sample="" data="" of="" each="" method/the="" highest="" sample="" data="" of="" every="" method)/the="" number="" of="" methods="" ·100.="" the="" higher="" the="" apci="" is="" the="" lower="" the="" rank="" number="">

Tämä artikkeli on poimittu julkaisusta Molecules 2019, 24, 4093; doi:10.3390/molecules24224093 www.mdpi.com/journal/molecules