Kalsitriolin ikääntymistä estävä vaikutus ihmisen luonnollisiin tappajasoluihin in vitro Ⅱ

3. Tulokset

Tämä tutkimus keskittyi kalsitriolin ikääntymistä estävään vaikutukseen NK-soluihin. Tulokset osoittivat, että Calcitriolvähensi ikääntymiseen liittyvien biomarkkerien, mukaan lukien CD16, ilmentymistä, TIM3, PD-1, KIR jalisäsi NK-solujen NKG2A:n ilmentymistä. se myösesti NK-solujen lisääntymisenjapidätä heidät G1-vaiheessa. Kalsitriolivähentänyt tulehdustekijöiden vapautumistakuten IL-5, IL-13, IFN- ja TNF-, ja niillä oli tiettyjäantioksidanttivaikutuksia, joka voisi edistää sitäikääntymistä estäviä vaikutuksia.

Napsauta tätä saadaksesi tietää Cistanchen antioksidanttivaikutuksista ja saada näytteen

3.1 Kalsitrioli käänsi pinnan ikääntymismarkkerien ilmentymisen, hidasti NK-solujen monistumista ja piti NK-solut G1-vaiheessa.

Vanhenevat NK-solut osoittivat korkeaa ikääntymiseen liittyvien biomarkkerien, kuten CD16:n, PD-1:n, TIM3:n ja KIR:n ilmentymistä, ja alhaista NKG2A:n ilmentymistä. Havaitsimme, että ikääntymiseen liittyvien biomarkkerien NKG2A (kuva 1a) (*P < 0.05) ilmentymistasot lisääntyivät, kun taas CD16:n (kuva 1b), TIM3:n (kuva 1c) ilmentymistasot kasvoivat. ), PD-1 (kuvio 1d) ja KIR (kuva 1e) (*P < 0,05) vähenivät 72 tunnin kalsitriolikäsittelyn jälkeen. Käänteiset vaikutukset korreloivat positiivisesti kalsitriolin pitoisuuden kanssa (täydentävä kuva 1).

Laajensimme soluja ihmisen ääreisverinäytteistä in vitro. Sitten eristimme NK-solut (CD{{0}}CD56 plus) magneettihelmien lajittelulla (kuva 1f). Lajiteltuja NK-soluja viljeltiin sitten eri konsentraatioilla kalsitriolia tai rapamysiiniä 72 tuntia. CCK8-värjäystulokset osoittivat, että kalsitriolilla käsiteltyjen korkean pitoisuuden (10− [7] M) NK-solujen kasvunopeus oli hitaampaa kuin negatiivisen kontrolliryhmän (NC) (*P < {{17) }}.{25}}5) (Kuva 1g). Lisäksi kalsitrioli sääteli NK-solusykliä. 48 tunnin kalsitriolilla käsittelyn jälkeen NK-solut osoittivat suurta kalsitriolipitoisuudesta riippuvaa siirtymää kohti G1-faasia (*P < 0,05), kun taas solujen osuus G2-faasissa (#P < 0,05) väheni. Kalsitriolilla käsiteltyjen NK-solujen osuus S-vaiheessa ei osoittanut muutosta kalsitriolin pitoisuudesta riippumatta (kuva 1h, täydentävä kuva 2). Testasimme sitten, indusoiko tämä kalsitriolista johdettu G1-vaiheen pysähtyminen NK-solujen apoptoosia ja havaitsimme, että NK-solujen apoptoottinen biomarkkeri, T-soluimmunoglobuliini ja immunoreseptorin tyrosiinipohjainen estoaine (ITIM) -domeeni (TIGIT) ei osoittanut merkittävää muutosta (P > 0,05). , NS) (kuvio 1i). Nämä tulokset viittasivat siihen, että kalsitriolin lisääminen vähensi NK-solujen kasvunopeutta, vähensi niiden proliferaatiota ja indusoi NK-solujen G1-vaiheen pysähtymisen sen sijaan, että se aiheuttaisi apoptoosia.

3.2 Kalsitrioli vähensi tulehduksellisten sytokiinien vapautumista NK-soluissa ja esti NK-solujen sytotoksisuutta

Tulehdus on krooninen matala-asteinen tulehdus. Se nopeuttaa NK-solujen ikääntymistä, koska NK-solut osallistuvat tähän krooniseen tulehdukseen. Kuva 2a osoittaa, että IL-5, IL-13, IFN- ja TNF-tasot laskivat merkittävästi kaikissa ryhmissä kuin negatiivisessa kontrollissa (*P < 0.05). IFN- ja TNF- ovat hyvin tunnettuja tulehdusta edistäviä sytokiinejä, mutta jotkut tutkimukset ovat osoittaneet myös IL:n tulehdusta edistäviä ominaisuuksia-5. IL-13:n on raportoitu myötävaikuttavan erityyppisiin limakalvotulehduksiin, kuten allergiseen astmaan, haavaiseen paksusuolitulehdukseen, eosinofiiliseen esofagiittiin ja useisiin fibroosiin liittyviin sairauksiin.

NK-solujen sytotoksisuuteen liittyy kuitenkin pääasiassa tulehduksellisten sytokiinien vapautumista ja solujen degranulaatiota. Leimaamme K562-solut DIO:lla ja viljelimme DIO-K562-soluja yhdessä kalsitriolilla käsiteltyjen NK-solujen kanssa 4 tuntia. DIO plus PI plus -solujen prosenttiosuus oli pienempi kaikissa efektori (E)/tavoite (T) -suhderyhmissä kuin negatiivisessa kontrollissa (*P < 0.05) (Kuva 2b, c). Erilaistumisklusterin 107 (CD107) päätelty ilmentyminen osoitti pienempää degranulaatiota (*P < 0,05) (kuvio 2d). Nämä tulokset osoittavat, että kalsitrioli estää NK-tappamistoiminnon.

3.3 Kalsitrioli aktivoi SIRT1- ∆Exon8:n ilmentymisen ja ikääntymisen estoon liittyvän SIRT1/pERK-reitin

Tutkiaksemme kalsitriolin ikääntymistä estäviä vaikutuksia NK-soluihin havaitsimme ikääntymiseen liittyvät signalointireitit immunoblottauksella. Western blot -analyysi suoritettiin VDR:n, SIRT1-∆Exon8:n, SIRT1:n ja PERK:n ilmentymistasojen arvioimiseksi kalsitriolilla käsitellyissä NK-soluissa. Tilastollinen analyysi osoitti, että kalsitrioli aktivoi VDR/SIRT1/pERK-akselin korkeilla pitoisuuksilla. Sillä välin kalsitrioli aktivoi SIRT1-∆Exon8:n ilmentymisen (*P < 0.05). (Kuva 3a).

Kuva 1. NK-solujen ikääntymiseen liittyvä fenotyyppi, solulaajeneminen ja solusyklianalyysi. (ae) Kalsitriolilla tai rapamysiinillä 72 tunnin ajan käsitellyt ihmisen NK-solut osoittivat seuraavat solubiomarkkerit: luonnollinen tappajaryhmän 2 jäsen A (NKG2A), erilaistumisklusteri 16 (CD16), T-soluimmunoglobuliini ja musiinidomeenia sisältävä proteiini 3 ( TIM3) ohjelmoitu solukuolema-1 (PD-1) ja tappaja-immunoglobuliinin kaltainen reseptori (KIR), jotka liittyivät ikääntymiseen. Positiivisena kontrollina käytettiin 50 nM rapamysiiniä (RAPA). n=3 jokaiselle ryhmälle. *P < 0.05 ja **P < 0.01 verrattiin negatiivisen kontrollin (NC) ryhmään. (f) NK-solut (oikealla), jotka on eristetty ihmisen perifeerisen veren mononukleaarisista soluista (PBMC:t, vasemmalla) magneettihelmien lajittelulla. (g) Soluproliferaatioanalyysi mitattuna solulaskentasarjalla 8 (CCK8). (h) Kalsitriolin tai rapamysiinin vaikutus cel cyceen lajiteltuissa nk-soluissa 72 tunnin käsittelyn jälkeen, wp 0.0, 0.05 ja fp < 0,05 osoittivat merkitsevän erot G1-, S- ja G2-vaiheissa, vastaavasti. Kaikkia ryhmiä verrattiin vastaavasti NC:hen. n=3. ) T-soluimmunoaglobuliinin ja immunoreseptorin tyrosiinipohjaisen estomotiivi(M) -domeenin (TGI) -positiivisten NK-solujen prosenttiosuutta 72 tunnin kalsitriolilla tai rapamysiinillä käsittelyn jälkeen.*p < 0,05 ja **p < 0,01 verrattiin NC:hen. n=3.

3.4 Kalsitrioli vastusti oksidatiivisen stressin aiheuttamaa NK-solujen ikääntymistä in vitro

On laajalti hyväksyttyä, että ikääntyminen johtuu oksidatiivisten vaurioiden kertymisestä vuosien mittaan löydetyn suuren aineiston vuoksi [31]. Viljelimme NK-soluja eri H2O2-pitoisuuksilla 24 tuntia ja havaitsimme, että 1{{1{{20}}}0 μM oli lähin pitoisuus mediaaniletaalia annosta (LD50) (kuva 3b) . TIM3:n ilmentyminen NK-solupopulaatiossa lisääntyi lisäämällä H202:ta, kun taas ilmentyminen väheni kalsitriolikäsittelyn jälkeen (*P < 0,05) (kuvio 3c). Lisäksi ikääntyvät NK-solut värjättiin siniseksi -galaktosidaasin läsnä ollessa. Tämä solujen sininen väri on vanhenevien solujen erityinen tunnusmerkki. Tilastollinen analyysi osoitti, että käsittelemättömillä NK-soluilla on vähemmän sellulaarista galaktosidaasiaktiivisuutta, kun taas H202:lle altistetut NK-solut osoittivat kohonnutta galaktosidaasiaktiivisuutta. Kalsitrioli vähensi -galaktosidaasipositiivista populaatiota, mikä osoittaa, että ikääntyviä soluja oli vähemmän (*P < 0,05) (kuvio 3d). Vähentynyttä mitokondrioiden kalvopotentiaalia on havaittu myös useissa ikääntyneissä soluissa useista nisäkäslajeista. Arvioimme NK-solujen mitokondrioiden kalvopotentiaalia tässä tutkimuksessa. Tilastolliset tulokset osoittivat, että H202 vähensi merkittävästi NK-solujen soluaktiivisuutta käsittelemättömiin soluihin verrattuna, kun taas kalsitrioli lisäsi H202:n aiheuttamaa vauriota (*P < 0,05) (kuva 3e).

Kuva 2. Kalsitriolin vaikutukset NK-solujen toimintoihin. (a) Kalsitriolilla käsiteltyjen NK-solujen 48 tunnin aikana vapauttaman sytokiinin analyysi. b) Fluoresenssiaktivoidun solulajittelun (FACS) tulokset osoittivat kuolleita K562-soluja, jotka oli leimattu 3,3 -oktadekyylioksakarbosyaniiniDlO) ja propidiumjodidilla (P).K562-soluja viljeltiin yhdessä kalsitriolilla käsiteltyjen Nk-solujen eri suhteiden kanssa. 4 tunnin ajan. (C) Kuolleiden K562-solujen FACS-analyysi tappamismäärityksissä. (d) Käsiteltyjen Nk-solujen degranulaatiovaikutukset tappamismäärityksissä. n=3 eaciyroupille. *p < 0.05 ja **p < 0,01 verrattiin NC:hen

3.5 Kalsitrioli vastusti oksidatiivisen stressin aiheuttamaa NK-solujen apoptoosia in vitro

Seuraavaksi mittasimme apoptoottisten solujen lukumäärän. Virtaussytometriatulokset osoittivat, että käsittely 100 μM H2O2:lla 24 tunnin ajan johti merkittävään NK-solujen apoptoosiin. Kalsitriolikäsittely kuitenkin vähensi apoptoottista suhdetta (*P < 0,05) (kuvio 4a). Kaikki yllä olevat tulokset osoittivat kalsitriolin vastustuskyvyn H2O2:n aiheuttamaa oksidatiivista stressiä vastaan. Havaitsimme kuitenkin apoptoottisia proteiineja NK-soluista oksidatiivisen stressin alla. Ennen H2O2-käsittelyä NK-soluihin lisättiin 10− [7] M kalsitriolia 24 tunnin ajaksi. Apoptoosiin liittyvien proteiinien, kaspaasi-3 p17 ja kaspaasi-3 p20, tasot nousivat merkittävästi H2O2-hoidon jälkeen. Kalsitrioli vähensi H2O2-peräistä apoptoosia ja vähensi kaspaasin-3, p17:n ja kaspaasin-3 p20:n ilmentymistä (*P < 0,05) (kuva 4b). Nämä tulokset osoittivat, että kalsitrioli vastusti H202:n indusoimaa apoptoosia.

Kuva 3ikääntymistä estäviä vaikutuksiakalsitriolia NK-soluissa. (a) D-vitamiinireseptorin (VDR), sirtuiini 1:n (SIRT1), SIRT1- ∆Exon8:n ja proteiinikinaasi R:n kaltaisen endoplasmisen retikulumkinaasin (pERK) ilmentyminen NK-soluissa havaittiin Western blot -analyysillä. 48 tunnin kalsitriolikäsittelyn jälkeen. Glyseraldehydi-3-fosfaattidehydrogenaasia (GAPDH) käytettiin latauskontrollina. Pylväskaavio, joka havainnollistaa Western blot -tuloksia (n=3). *P < 0.{{10}}5 ja **P < 0.01 verrattiin NC:hen (n=3). (b) NK-solujen annoskuolleisuuskäyrä vetyperoksidilla (H2O2) 24 tunnin ajan käsittelyn jälkeen. (c) Prosenttiosuus TIM3-soluista, joilla on korkea ekspressio 100 μM H2O2:lla 24 tunnin käsittelyn jälkeen. (d) Vanhenemiseen liittyvä -galaktosidaasivärjäys ja -analyysitulokset. Vanhenevat solut värjättiin sinisellä ja osoitettiin punaisilla nuolilla. Mittakaava, 50 μm. (e) NK-solut värjättiin Hoechstilla ja kloorimetyyli-X-Rosamiinilla (CMXRos) solun sijainnin ja mitokondrioiden kalvopotentiaalin määrittämiseksi. Ikääntyvät ja apoptoottiset solut olivat Hoechst plus CMXRos− ja merkitty valkoisilla nuolilla. Mittakaava, 50 μm. Tilastollinen analyysi osoitti suhteellisen fluoresenssin intensiteetin. *P < 0,05 ja **P < 0,01 verrattiin H2O2-ryhmään kuvissa C, D ja E (n=3).

Kuva 4. Kalsitriolin anti-apoptoottiset vaikutukset NK-soluihin. (a) Kalsitriolin anti-apoptoottiset vaikutukset H2O2--indusoidussa vauriossa. FACS-analyysi osoitti apoptoottisten NK-solujen prosenttiosuuden 100 μM H2O2:lla 24 tunnin käsittelyn jälkeen. (b) Kaspaasin -3 p20 ja kaspaasi-3 p17 ilmentymistasot NK-soluissa havaittiin Western blot -analyysillä 100 µM H2O2:lla 24 tunnin käsittelyn jälkeen. GAPDH:ta käytettiin latauskontrollina. Pylväskaavio, joka havainnollistaa Western blot -tuloksia (n=3). *P < 0,05 verrattiin H202-ryhmään.

4. Keskustelu

Tulehduksen ja oksidatiivisen stressin pitkäaikainen vuorovaikutus on tärkeä tekijä ikääntymisessä. Lisäksi tulehdus ja oksidatiivinen stressi ovat synergistisiä [32]. Oksidatiivisen stressin tuottama ylimääräinen ROS hyökkää kehon soluja vastaan. Tämän prosessin aikana aktivoitunut immuunijärjestelmä vapauttaa tulehduksellisia tekijöitä tappamaan epänormaalit solut, mikä johtaa edelleen ROS-muodostukseen. Kalsitriolin puute voi aiheuttaa autoimmuunisairauksia, kroonisia aineenvaihduntasairauksia ja kasvaimia. Kalsitriolin ikääntymistä estävästä vaikutuksesta immuunijärjestelmään, erityisesti NK-soluihin, tiedetään kuitenkin vähän.

Tässä tutkimuksessa tutkimme kalsitriolin ikääntymistä estäviä vaikutuksia NK-soluihin. Havaitsimme, että kalsitrioli lisäsi NKG2A:n ilmentymistä samalla kun vähensi KIR:n ilmentymistä in vitro. NK-solujen CD56-CD16 plus alapopulaatio, jonka tiedetään liittyvän krooniseen tulehdukseen, on lisääntynyt merkittävästi vanhuksilla [33]. Siksi kalsitriolin indusoima CD16-ekspression väheneminen voidaan katsoa johtuvan sen anti-inflammatorisesta vaikutuksesta. TIM-3:n ja PD-1:n on raportoitu olevan NK-soluja estäviä ja heikentäviä reseptoreja. Tutkimuksemme osoitti, että kalsitrioli alensi TIM-3- ja PD-1-ilmentymistasoja ja esti NK-solujen apoptoosia.

Lisäksi kalsitrioli esti NK-solujen laajentumista ja piti NK-solupopulaation G1-vaiheessa in vitro. S-vaiheen soluihin ei kuitenkaan ollut vaikutusta. NK-solujen tarkistuspistetekijänä tunnettu TIGIT pysyi ennallaan. Nämä tulokset osoittivat, että kuvio 4. Kalsitriolin anti-apoptoottiset vaikutukset NK-soluihin. (a) Kalsitriolin apoptoottiset vaikutukset H2O2--indusoidussa vauriossa. FACS-analyysi osoitti apoptoottisten NK-solujen prosenttiosuuden 100 μM H2O2:lla 24 tunnin käsittelyn jälkeen. (b) Kaspaasin-3 p20:n ja kaspaasin-3 p17:n ilmentymistasot NK-soluissa havaittiin Western blot -analyysillä, kun niitä oli käsitelty 100 µM H2O2:lla 24 tunnin ajan. GAPDH:ta käytettiin latauskontrollina. Pylväskaavio, joka havainnollistaa Western blot -tuloksia (n=3). *P < 0,05 verrattiin H202-ryhmään. BIOENGINEERED 6851 kalsitrioli ei johtanut NK-solujen kuolemaan, mutta se vain hidasti NK-solujen laajenemisnopeutta.

On hyvin tunnettua, että tulehdus johtaa immunosensenssiin [34,35]. Lisäksi havaitsimme, että kalsitrioli alensi IL-5-, IL-13-, IFN- ja TNF-tasoja NK-soluissa. NK-solujen sytotoksisuus välittyy osittain tulehdustekijöiden vapautumisesta [36]. Lisäksi K562-kasvainsolujen kuolleisuus ja NK-solujen degranulaatio vähenivät. Nämä tulokset vastasivat odotuksiamme. Rapamysiini on hyvin tunnettu lääke, joka hidastaa aineenvaihduntaa ikääntymisen estämiseksi[37], jota käytetään tässä tutkimuksessa positiivisena kontrollina. Se johtaa immunosuppressioon ja lisää mahdollista kasvaimen riskiä ja kasvaintaakkaa. Tämä taakka on vahvistettu rintasyövän hiirimalleissa [38]. Ei tiedetä, onko kalsitriolilla samanlaisia ​​vaikutuksia kuin rapamysiinillä. Eläin- ja kliinisiä tutkimuksia tulisi tehdä enemmän niiden vaikutusten ihmiskehoon todentamiseksi.

Lopuksi tutkimme kalsitriolin vaikutuksia antioksidanttien vanhenemiseen. Resveratroli, tunnettu ikääntymistä estävä lääke, voi vähentää NF-κB-reittiä aktivoimalla SIRT1/PERK-akselin. Tämän vaimenemisen on myös osoitettu olevan hyödyllinen hermostoa rappeuttavien häiriöiden ja sydän- ja verisuonisairauksien hoidossa [39]. SIRT1-deasetylaatio liittyy aineenvaihdunnan säätelyyn ja mitokondrioiden biogeneesiin. Tämäntyyppisessä säätelyssä kohonneet SIRT1-tasot voivat edistää peroksisomiproliferaattorin aktivoiman reseptorin gamma-koaktivaattorin -1 alfa (PGC-1) kerääntymistä ytimeen, mikä johtaa geenien transkriptioon, jotka ovat välttämättömiä mitokondrioiden toiminta [40]. Lisäksi SIRT1 suppressoi rapamysiinin (mTOR) signaalireitin nisäkkään kohdetta, joka voi suojata hermoja ja vastustaa aivojen ikääntymistä hiirillä [41]. Tässä tutkimuksessa tunnistimme samanlaisen säätelyreitin kalsitriolille. Kalsitrioli aktivoi SIRT1:n VDR:n kautta ja nosti SIRT1/pERK-akselia.

Lisäksi havaitsimme, että kalsitrioli säätelee SIRT1-∆Exon8:n ekspressiota. Stressit tunnetaan SIRT1-∆Exon8:n ylössäätelytekijänä. Vaikka SIRT1-∆Exon8 itsessään osoittaa vähentynyttä p53:n deasetylaatioaktiivisuutta, sillä on additiivinen deasetylaatiovaikutus p53:een, kun se ekspressoituu yhdessä täyspitkän SIRT1:n kanssa [42]. Tämä vaikutus osoitti kalsitriolin apoptoottista toimintaa NK-soluissa. SIRT1-∆Exon8:n rooli ikään liittyvissä reiteissä on kuitenkin vielä ymmärrettävä paremmin. Koska SIRT1:n lasku saattaa johtua oksidatiivisista vaurioista [43], loimme akuutisti ikääntyvän NK-solumallin in vitro käyttäen H2O2:ta. H2O2:n aiheuttama oksidatiivinen ikääntyminen lisäsi TIM3:n ilmentymistä sekä -galaktosidaasin aktiivisuutta NK-soluissa. Huomasimme, että kalsitrioli vastusti oksidatiivisia vaurioita ja säilytti NK-solujen mitokondriaalisen aktiivisuuden ja solujen elinkelpoisuuden estäen samalla solujen apoptoosia. Kalsitriolia ei kuitenkaan ole vielä tunnistettu kliinisen lääketieteen ikääntymistä estäväksi lääkkeeksi, koska tarvitaan lisää todisteita tämän lääkkeen ikääntymistä estävästä vaikutuksesta in vivo. Yhteenvetona, esitimme alustavia todisteita kalsitriolin ikääntymistä estävästä vaikutuksesta NK-soluihin in vitro. Uskomme, että tämän lääkkeen vaikutuksia tulisi tutkia tarkemmin tulevissa eläin- ja kliinisissä tutkimuksissa.

5. Päätelmät

Tässä tutkimuksessa osoitimmeikääntymistä estäviä vaikutuksiakalsitriolia NK-soluissa. Kalsitrioli käänsi ilmentymisenikääntyviä biomarkkereitaNK-soluissa. Se hidasti NK:n vahvistusta ja piti ne G1-vaiheessa. Lisäksi kalsitrioli esti tulehduksellisten sytokiinien vapautumista ja vähensi NK-solujen degranulaatiota. SIRT1-∆Exon8- ja VDR/SIRT1/pERK-akselin aktivointi kalsitriolilla saattaa olla kalsitriolin ikääntymistä estävän vaikutuksen päämekanismi kaiken edellä olevan perusteella. Lopuksi kalsitrioli vastusti NK-solujen oksidatiivista vanhenemista in vitro. Jatkotutkimuksissa tulisi keskittyä eläin- ja kliiniseen tutkimukseen.

Kohokohdat

(1) Kalsitrioli vähensi ikääntymiseen liittyvien biomarkkerien, mukaan lukien CD16, TIM3, PD-1, KIR, ilmentymistä ja lisäsi NK-solujen NKG2A:n ilmentymistä. (2) Kalsitrioli kykeni estämään NK-solujen lisääntymistä ja pysäyttämään ne G1-vaiheessa. (3) Kalsitrioli vähensi tärkeimpien tulehdustekijöiden, kuten NK-solujen IL-5, IL-13, IFN- ja TNF- vapautumista.(4) Kalsitriolin ikääntymistä estävä vaikutus NK-soluihin voi saavutetaan Sirt1- pERK -signaalireitin kautta.

Kiitokset Haluamme kiittää kaikkia ryhmämme henkilöstöä heidän tuestaan ​​ja Shenzhenin tiede- ja teknologiainnovaatiokomiteaa rahoitustuesta tälle tutkimukselle.

Rahoitus Tätä työtä tukivat taloudellisesti Shenzhenin tiede- ja teknologiainnovaatiokomitea (JCYJ20170412155231633), Shenzhen Key Medical Discipline Construction Fund (nro SZXK062), Chengdu Wecistanche Biotech ja Shenzhenissä sijaitseva Sanming Project of Medicine (nro SZSM202011010); Shenzhenin tiede- ja teknologiainnovaatiokomitea [JCYJ20170412155231633]; Shenzhen Key Medical Discipline Construction Fund [No. SZXK062]; Sanmingin lääketieteen projekti Shenzhenissä [No. SZSM202011010].

Eettinen hyväksyntä Kaikki menettelyt hyväksyttiin Shenzhen Luohun kansansairaalan eettisen komitean toimesta (ZLNK 12/2019, Shenzhen, Kiina). Tietoinen suostumus saatiin kokeisiin ihmisnäytteillä.

Ilmoitus Kaikki kirjoittajat hyväksyivät tämän käsikirjoituksen lähettämisen. Kirjoittajat ilmoittavat, että heillä ei ole tiedossa kilpailevia taloudellisia etuja tai henkilökohtaisia ​​suhteita, jotka olisivat voineet vaikuttaa tässä artikkelissa raportoituun työhön.

Viitteet

[1] Ovadya Y, Landsberger T, Leins H, et ai. Heikentynyt immuunivalvonta nopeuttaa vanhenevien solujen kertymistä ja ikääntymistä. Nat Commun. 2018; 9 (1): 5435.

[2] López-Otín C, Blasco MA, Partridge L, et ai. Ikääntymisen tunnusmerkit. Cell. 2013;153:1194–1217.

[3] Hodgins JJ, Khan ST, Park MM, et ai. Killers 2.0: NK-soluterapiat syövänhallinnan kärjessä. J Clin Invest. 2019;129(9):3499–3510.

[4] Zhu H, Blum RH, Bjordahl R, et ai. Pluripotentit kantasoluista johdetut NK-solut, joilla on korkeaaffiniteettinen lohkeamaton CD16a, välittävät parantuneen kasvainten vastaisen aktiivisuuden. Veri. 2020;135(6):399–410.

[5] Mandal A, Viswanathan C. Luonnolliset tappajasolut: terveydessä ja taudeissa. Hematol Oncol Stem Cell Ther. 2015;8(2):47–55.

[6] Le Garff-Tavernier M, et ai. Ihmisen NK-solut osoittavat merkittäviä fenotyyppisiä ja toiminnallisia muutoksia eliniän aikana. Ikääntyvä solu. 2010;9(4):527–535.

[7] Le Garff-Tavernier M, Béziat V, Decocq J et ai. NKG2A:n, KIR:n ja CD57:n ilmentymismallit määrittelevät CD56dim NK-solujen erilaistumisprosessin, joka ei ole kytketty NK-solujen kasvatukseen. Veri. 2010; 116 (19): 3853–3864.

[8] Manser AR, Uhrberg M. Ikään liittyvät muutokset luonnollisten tappajasolujen repertuaarissa: vaikutus NK-solujen toimintaan ja immuunivalvontaan. Cancer Immunol Immunother. 2016;65(4):417–426. [9] Bi J, Tian Z. NK Cell Exhaustion. Front Immunol. 2017; 8:760.

[10] Furman D, Campisi J, Verdin E, et ai. Krooninen tulehdus sairauden etiologiassa koko elinkaaren ajan. Nat Med. 2019;25(12):1822–1832.

[11] Liu Y, et ai. Sytomegaloviruksen peptidispesifinen vasta-aine muuttaa luonnollista tappajasolujen homeostaasia, ja sitä esiintyy useissa autoimmuunisairauksissa. Soluisäntämikrobi. 2016;19(3):400–408.

[12] Kampus X, Pera A, Solana R, et al. NK-solut terveessä ikääntymisessä ja ikään liittyvissä sairauksissa. J Biomed Biotechnol. 2012; 2012: 195956.

[13] Liu Y, Mu R, Gao YP, et ai. Ikääntymisen vaikutus nk-solupopulaatioon ja niiden lisääntymiseen ex vivo -viljelyolosuhteissa. Anal Cell Pathol (Amst). 2018; 2018: 7871814.

[14] Sintov AC, Yarmolinsky L, Dahan A, et ai. D-vitamiinin ja sen analogien farmakologiset vaikutukset: viimeaikainen kehitys. Huumeiden disco tänään. 2014; 19 (11): 1769–1774. [15] Halicka HD, Zhao H, Li J, et ai. Konstitutiivisen DNA-vaurion signaalin vaimennus

Kysy lisää:

Sähköposti:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: plus 86 15292862950