Going Micro in Leptospiroosi Munuaistauti Ⅱ

4. Isännän immuniteettivasteet Leptospira spp.

Leptospiran pääreitti on suora tunkeutuminen limakalvoille tai avautuneelle iholle veren, kudosten, virtsan tai saastuneen veden kautta, joka leviää kaikkialle systeemiseen verenkiertoon ja leviää useisiin elimiin, kutenmaksakeuhkoihin ja proksimaaliseen tubulukseennefroni munuaisissa, jossa se voi lisääntyä ja selviytyä kuukauden [51]. Infektion alkuvaiheessa,synnynnäinen immuunivastesillä on perustavanlaatuinen rooli leptospiroosin ensimmäisenä puolustuslinjana, mikä vaikuttaa leptospiroosin vasteeseenmuodontunnistusreseptorit, makrofagifagosytoosi, solunulkoisten solujen induktioneutrofiilien kerääntyminen, jakomplementtijärjestelmän interventio [52].

Theimmuunivasteihmisillä on keskeinen roolikliinisten oireiden kehittyminensamoin kuin joidenkin patogeenisten kantojen virulenssitekijät. Suurin osa ihmisen leptospiroosista on oireeton tai lievä, ja vain 10 prosentissa tapauksista kehittyy vakavia muotoja, joihin liittyy monielinten vajaatoiminta ja lisääntynyt kuolleisuus, joka liittyysytokiinimyrskyja immunohalvauksen tila. Patogeeniset lajit stimuloivat humoraalista vastetta bakteremiavaiheessa, vaikka myöhempi käyttäytyminenimmuunivasteon epäselvä. Tutkimuksissa potilailla, joilla on useita leptospiroosin kliinisiä ilmentymiä, kliinisen kuvan vakavuus on yhdistetty erilaisiin seerumin sytokiinitasoihin, kuten TNF-, IL-10 ja IL-6 [53], mutta Tämä johtopäätös on edelleen kiistanalainen [54]. Nämä olosuhteet ovat johtaneet lisääntyneeseen kiinnostukseen ymmärtää immuunivastetta yleensä ja infektion aikana tapahtuvia biologisia tapahtumia.

KUINKA KAUVAN KESTÄÄ, ETTÄ CISTANCHE TOIMII?

4.1. Leptospira ja komplementtijärjestelmä

Leptospiraalisten proteaasien proteolyyttinen aktiivisuus solunulkoista matriisia vastaan ​​mahdollistaa infektion pääsyn verenkiertoon. Verenkiertojärjestelmän komplementtijärjestelmä on yksi tärkeimmistä synnynnäisen immuunivasteen mekanismeista patogeeniselle Leptospiralle. Leptospira on kuitenkin kehittänyt strategioita välttääkseen komplementtijärjestelmän hyökkäyksen sitomalla proteiineja komplementimolekyyleihin ja tuottamalla proteaaseja, kuten termolysiiniä, lämpöstabiilia neutraalia metalloproteinaasientsyymiä, joka vaikuttaa C3-proteiiniketjuun. Patogeeniset kannat sitovat tekijä H:n (FH), komplementtitekijä H:n liittyvän proteiinin 1:n (FHR-1), tekijän H:n kaltaisen proteiinin 1:n (FHL-1) ja C4b:tä sitovan proteiinin (C4BP). jotka ovat vastuussa komplementtijärjestelmän estämisestä [55]. Patogeenisen Leptospiran [55,56] komplementin välttämiseksi on kolme päästrategiaa isäntäkomplementin säätelijöiden, isännän proteaasin ja bakteeriproteaasin häiritsemisen kautta. Leptospira käyttää komplementtisäätelijöinä tekijä H:ta (FH; vaihtoehtoisen komplementtireitin säätelijä) ja C4:ää sitovaa proteiinia (C4BP; klassisen ja lektiinikomplementtireittien säätelijä) nopeuttamaan C3-konvertaasien hajoamista ja toimimaan myös tekijä I:n kofaktoreina. C3b:n ja C4b:n pilkkomiseen [57,58]. Leptospiraaliproteiini (LcpA) sitoo yhdessä vitronektiinin (Vn; terminaalisen reitin säätelijä) kanssa C9:n ja estää sen polymeroitumista [59], mikä mahdollisesti estää kalvoa aktivoivan kompleksin (MAC) muodostumisen [60]. Lisäksi patogeeninen Leptospira sitoo useita isäntäproteaaseja, kuten urokinaasityyppistä plasminogeeniaktivaattoria (uPA), jotka indusoivat aktiivisen plasmiinin [61] (seriiniproteaasi) C3b:n, C4b:n ja C5:n pilkkomiseen Leptospiran pinnalla [62]. Lisäksi metalloproteaasit ja termolysiini, endogeeninen Leptospira-proteaasi, voivat pilkkoa ja inaktivoida useita komplementtiproteiineja (C2, C3, C4 ja tekijä B) [60]. Isännästä peräisin olevien komplementin säätelijöiden ja patogeenisen Leptospiran yhdistelmä helpottaa bakteerien kolonisaatiota isännän kohde-elimissä [63].

4.2. Leptospira ja neutrofiilit

Infektion aikana patogeeniset Leptospira-lajit laukaisevat voimakkaan neutrofiilien aktivoitumisen ja pro-inflammatorisen vasteen. Neutrofiilit ovat tärkeitä mikro-organismien torjunnassa, mutta ne myös edistävät kudosvaurioita isännässä. On osoitettu, että alhaisesta solunulkoisten neutrofiilien kertymisen taso verenkierron alhaisesta neutrofiiliaktiivisuudesta lisää leptospiremiaa, mikä osoittaa, että neutrofiilien muodostuminen suonensisäisesti voi olla kriittinen tekijä patogeenisen leptospiran varhaisen leviämisen estämisessä [64].

4.3. Leptospira ja makrofagit

Leptospira-infektion alkuvaiheessa makrofageilla on tärkeä rooli spirokeetan eliminaatiossa. Tämä efektorimekanismi yhdessä tehokkaan sytokiinivasteen kanssa liittyy fagosyyttisen torjuntaan ja infektion leviämiseen, vaikka Leptospira spp. on osoitettu indusoivan apoptoosia makrofageissa Fas/FasL-kaspaasi-8/-3-reitin kautta ja helpottavan niiden selviytymistä ja lisääntymistä isännässä mitokondriotekijää indusoivan apoptoosin ja endonukleaasin vapautumisen vuoksi infektoituneessa makrofagit [65]. Viimeaikaisia ​​tutkimuksia on tehty Leptospira-tartunnan saaneiden makrofagien mikrotranskriptomista epigeneettisten mekanismien, kuten RNA:n transkription jälkeisen säätelyn, määrittämiseksi. Leptospiralla infektoidut makrofagit ovat osoittaneet, että mikroRNA:ita (miRNA:ita) säätelee spirokeetan aiheuttama infektio, mikä osoittaa, että tämä säätely on elintärkeää näiden immuunijärjestelmän solujen vasteessa Leptospira-infektiossa [66]. Ihmisen makrofageissa Leptospira-infektion tuottaman reaktiivisten happilajien ja lysosomaalisen katepsiini B:n välittämän tulehduksen aktivaatiolla on huomattavat NLRP3- ja IL-18-tasot, mikä edistää IL-1-tuotantoa ja johtaa korkeaan fagosytoosin mahdollisuus ja joidenkin sytokiinien nopea mallintaminen korreloivat leptospiroosiresistenssin kanssa [67].

4.4 Humoraalinen vastaus Leptospiraan

Spesifiselle humoraaliselle vasteelle Leptospiraa vastaan ​​on tunnusomaista IgM- ja IgG-vasta-aineiden tuotanto kolmantena oireiden alkamispäivänä. Lisäksi IgA-tuotantoa on raportoitu ensimmäisestä päivästä yhdeksänteen infektion jälkeiseen kuukauteen; itse asiassa IgM:n nousua on käytetty vaihtoehtoisena mittana leptospiroosin varhaisessa diagnosoinnissa [68]. Humoraalisen vasteen vaikutus ihmisillä, joilla on leptospiroosi, mahdollistaa serologisen diagnoosin tekemisen luonnollisen infektion jälkeen [69]. Leptospira-infektion humoraalisen vasteen tärkein osa voi olla suojaavien vasta-aineiden muodostuminen. Leptospiroosia varten tällä hetkellä saatavilla olevat rokotteet koostuvat täydellisistä soluvalmisteista, ja niillä on rajoituksia, kuten alhainen tehokkuus, useita sivuvaikutuksia, alhainen immuunimuistin muodostuminen ja ristisuojan puute serovarioiden eroille. Näin ollen uusien rokotteiden kehittäminen on välttämätöntä tautien torjumiseksi, ja tällä hetkellä tutkitaan rokotteiden tuottamista geneettisestä immunisaatiosta [70]. Leptospiran OMP:itä on pidetty antigeeninä, jolla on parempi immunogeenisyys B-lymfosyyteille, joihin kuuluvat rakenteelliset epitoopit OmpL187- 98, OmpL1173-191, OmpL1297-320, LipL4130-48, LipL{ {9}} ja LipL41263-282 [71]. Nämä epitoopit ovat lupaavia ehdokkaita yleismaailmallisen rokotteen kehittämiseen.

4.5. Mukautuva immuunivaste Leptospiralle: T-solut ja sytokiinit

Patogeeniset Leptospira-lajit indusoivat T- ja B-lymfosyyttien välittämän immuunivasteen, johon liittyy sytokiinien ilmentyminen, jotka voivat liittyä painovoimakaavioihin. T-solujen aktivaatio Leptospira-infektion aikana käynnistää tulehdusvasteen pääasiassa sytokiinituotannon kautta. Tämä on kriittistä infektion varhaisessa eliminoinnissa, mutta tulehdusta edistävien sytokiinien hallitsematon tuotanto voi myös johtaa sytokiinien ylituotantoon, jota seuraa immunohalvaus, joka voi johtaa sepsikseen ja monielinten vajaatoimintaan. T-lymfosyytit tuottavat IL-1-, IL-6-, IL-12-, interferoni- (IFN)- ja TNF-proteiinia, jotka toimivat kemo-attraktantteina ja keräävät leukosyyttejä infektiokohtaan. Mielenkiintoista on, että ex vivo naiivit δ-T-solut lisääntyivät perifeerisen veren mononukleaarisolujen (PBMC) viljelmissä, joita oli stimuloitu Leptospiran antigeeneillä, sekä tuottaen sekä IL--17- että IFN-proteiinia [72]. Lisäksi kun leptospiroositartunnan saaneet villityypin hiiret osoittivat korkeampia sytokiinitasoja, mukaan lukien IL-4, IL-10 ja IL-13, verrattuna infektoitumattomiin hiiriin, Leptospira-indusoitu hiiren krooninen nefriitti (Daf1-/- hiiret) osoitti korkeampaa sileän lihaksen aktiinin, IL-10, IL-13 ekspressiota, mutta ei eroa IL-12:n ja IL{{21}:n välillä. } tasot [73]. Sellaisenaan Daf1:llä ja IL{24}}:lla voi olla ratkaiseva suojaava rooli CKD:n etenemisessä Leptospiran aiheuttaman hiiren kroonisen munuaistaudin ja munuaisfibroosin välillä [72,73]. Kuitenkin hypoteesi valitusta sytokiinivasteesta taudin etenemisessä on vielä epäselvä ihmisen leptospiroosissa toistaiseksi. Potilailla, joilla oli vaikea leptospiroosi ja keuhkovaurioita, IL-6, CXCL8 ja IL-10 olivat kohonneet verrattuna potilaisiin, joilla oli lievä leptospiroosi [53]. Nämä korkeat sytokiinipitoisuudet leptospiroosipotilailla korostavat niiden keskeistä roolia vaikean leptospiroosin kehittymisessä.

Potilailla, joilla on vakava infektio, havaitaan CD4+ T-lymfosyyttejä, joilla on pro-inflammatorinen profiili ja IL-2- ja IFN-tuottajia, kun taas CD4+ CD25 tuottaa runsaasti IL-10 ovat melkein poissa. T-lymfosyyttivälitteisen immuunivasteen säätely ei näytä estävän Leptospiran tulehdusvasteen aiheuttamia kudosvaurioita. Vaikeaa leptospiroosia sairastavien ihmisten CD4+ T-lymfosyyteissä TNF- ja muiden tulehdusta edistävien sytokiinien tuotanto on korkeampaa kuin taudin lievää muotoa sairastavilla, mikä viittaa siihen, että näitä sytokiinejä voidaan käyttää vakavuus infektion immunologisessa vaiheessa [74]. IL{12}}:n tuotanto on yhdistetty leptospiroosiin sairastuvien ihmisten kuolemanriskiin; altistuneilla ja oireettomilla ihmisillä tehty tutkimus kuitenkin liitti tämän sytokiinin tuotannon tulehdusvasteen ja eloonjäämisen säätelyyn [74]. Leptospira-infektion aikana tulehduksen välittäjät ja joidenkin leukosyyttisolujen, kuten T-lymfosyyttien, toiminta säätelevät nopeasti vastustuskykyisillä yksilöillä, toisin kuin henkilöillä, joilla on vakavia leptospiroosimuotoja [75].

Yhteenvetona voidaan todeta, että immuunivastetta Leptospira-infektiolle ei täysin ymmärretä leptospiroosipotilaiden kliinisen käyttäytymisen vuoksi, koska he ovat vuorovaikutuksessa bakteerigenomin eri virulenssitekijöiden kanssa, mikä antaa Leptospiralle vankan patogeenisen kapasiteetin.

5. Kliiniset ilmenemismuodot

Leptospiroosin kliiniset ilmenemismuodot ovat erilaisia, ja ne vaihtelevat lievistä, epäspesifisistä oireista, kuten flunssan kaltaisista oireista (kuume, lihaskipu ja päänsärky), vakaviin oireisiin sekä loppuvaiheen elinvaurioihin (esim. AKI, akuutti maksan vajaatoiminta). ja verenvuotodiateesi, joka tunnetaan myös nimellä Weilin oireyhtymä), akuutti hemoptysis keuhkoverenvuodosta, akuutti sekavuus aseptisesta meningoenkefaliitista ja akuutti sydämen vajaatoiminta akuutista tai subakuutista sydänlihastulehduksesta [7]. Näin ollen kolme epäillyn leptospiroosiinfektion indikaattoria koostuvat (i)akuutti kuumeinen sairaus, (ii) keltaisuus ja (iii)akuutti munuaisvaurio[12]. Leptospiroosin vaikean muodon ennustajia ovat vakava myalgia alussa, vaikea verenvuototaipumus ja selvä keltaisuus. Mielenkiintoista on, että jommankumman olemassaolo on olemassakrooninen munuaissairaus(pieni munuaiskoko) tai laajentuneet, tukkoiset munuaiset ja anuria liittyvät pahimpaan lopputulokseen [12]. Siksi potilaita, joilla on leptospiroosiin liittyvä munuaissairaus, tulee hoitaa viipymättä.

6. Diagnoosi

6.1. Kliininen diagnoosi

Leptospiroosin diagnoosi perustuu altistushistoriaan, riskitekijöihin ja kliinisiin oireisiin. Korkea epäilys voi kiertää myöhemmän elinvaurion. Leptospiroosin oireet erehtyvät kuitenkin usein muihin akuutin kuumeisen oireyhtymän syihin, kuten dengue-infektioon, malariaan, hepatiittiin ja aktiiviseen autoimmuunisairauteen. Leptospiroosin patognomonisten merkkien puuttuminen tarkoittaa, että diagnoosi perustuu alustavasti endeemisen alueen potilaiden kuumeen ja myalgian arviointiin. Tästä syystä leptospiroosin laboratoriodiagnoosi on välttämätöntä.

6.2. Laboratoriodiagnoosi

Leptospiroosia on vaikea diagnosoida laboratoriossa, varsinkin akuutin vaiheen aikana. Se voidaan suorittaa tunnistamalla suoraan spirokeetat tai niiden komponentit kehon nesteissä tai kudoksissa, eristämällä leptospirit viljelmässä tai havaitsemalla tiettyjä vasta-aineita eri kliinisissä vaiheissa. Leptospiroosia on vaikea erottaa sairauksista, kuten malariasta, denguekuumeesta, riketsiasta, influenssasta, hepatiitista ja keltakuumesta sen epämääräisen kliinisen ilmeen vuoksi. Tämän seurauksena diagnoosin vahvistamiseksi tarvitaan laboratoriotutkimuksia. Näiden testien (DNA) perustana on vasta-aineiden havaitseminen leptospireja, itse leptospireja tai niiden deoksiribonukleiinihappoa vastaan. Nykyinen laboratoriodiagnostiikka sisältää sekä suoran tunnistamisen (Leptospira-spirokeettien tai DNA:n havaitseminen näytteistä tai organismin eristämisen näytteistä) että epäsuoran havaitsemisen (serologinen diagnoosi tai serologia Leptospiraali-infektion tunnistamiseksi, joka perustuu spesifisten vasta-aineiden havaitsemiseen eri tauteja vastaan). Leptospiraaliset antigeenit) (taulukko 1).

6.2.1. Suora mikroskooppinen tutkimus, viljely ja antigeenin havaitseminen

Leptospirit ovat ohuita, kirkkaita, aktiivisesti liikkuvia spiraaleja, jotka pyörivät tyypillisesti nopeasti (nykivä liikkuvuus) tavanomaisessa pimeyden kenttämikroskoopissa (DFM) ja noin 10 leptospiria/ml tarvitaan yhden solun havaitsemiseen kenttää kohden. Kun tartunnan kesto on yksi viikko pidempi, DFM-saanto on kuollut noin 10 % (100 - 90 %). Herkkyyden parantamiseksi useita erityisiä värjäysmenetelmiä; Warthin– Starry hopeavärjäys [76] ja immunovärjäys (immunohistokemia, immunofluoresenssi, immunomagneettinen antigeenin sieppaus ja immunoperoksidaasivärjäys [77]), jotka vaativat serovarsille spesifisiä primäärisiä vasta-aineita (eristettynä tai yhdistelmänä).

Taulukko 1. Laboratoriotutkimukset leptospiroosin diagnosoimiseksi.

LAMP, silmukkavälitteinen isoterminen vahvistus; PCR, polymeraasiketjureaktio; NGS, seuraavan sukupolven sekvensointi; IHA, epäsuora hemagglutinaatio; ELISA, entsyymi-immunosorbenttimääritys; IgM, immunoglobuliini M; MAT, makroskooppinen agglutinaatiotesti; MCAT, mikrokapseleiden agglutinaatiotesti; DNA, deoksiribonukleiinihappo; DFM, tummakenttämikroskopia

Samanaikaisesti Leptospira-viljelmä verestä, virtsasta, aivo-selkäydinnesteestä ja biopsiakudoksesta on mahdollista ensimmäisten päivien ja 10 päivän aikana sairauden oireiden ilmaantumisen jälkeen (leptospiroosivaihe). Koska ne ovat hitaasti kasvavia (6–8 tunnin kaksinkertaistumisaika), vaativia ja alttiita kontaminaatiolle, viljelmänäytteet on säilytettävä vähintään 3–4 kuukautta ennen kuin ne hylätään negatiivisina) vain 23 % herkkyydellä, mutta se on välttämätöntä. lääkeherkkyystestiä varten [6]. Sellaisenaan EMJH (Ellinghausen–McCullough–Johnson–Harris) -väliaine (oleiinialbumiinikompleksi) koostuu naudan seerumin albumiinista (fraktio V), Tween 80:stä, ammoniumkloridi-tiamiinista, monokaliumfosfaatista, dinatriumfosfaatista ja useista ravintoaineista [78] yleisesti käytetty, kun taas erikoistuneempi T80/40/LH-väliaine (polysorbaatti 40, laktalbumiinihydrolysaatti, superoksididismutaasi ja kaniinin seerumi) vaaditaan joissakin serovarsissa [79]. Hornsby-Alt-Nally (HAN) näyttää olevan hyvä kasvatusalusta suuren ja monimuotoisen vaativien patogeenisten leptospirien primäärieristykseen [80].

Leptospiraalisten antigeenien havaitseminen immunoperoksidaasilla, immunofluoresenssilla tai immunomagneettisella antigeeninsieppausjärjestelmällä on kehitetty näytteille, joilla on alhainen bakteerikuormitus, tai tummakenttämikroskopiaa ei voida käyttää, mutta sitä ei tehdä rutiininomaisesti primaarisen vasta-aineen rajoituksen vuoksi [77]. Sitä vastoin nukleiinihapon tunnistus uudella DNA-amplifikaatiolla; polymeraasiketjureaktio (PCR) (eli sisäkkäinen PCR, kvantitatiivinen PCR [qPCR]), silmukkavälitteinen isoterminen amplifikaatio (LAMP) ja seuraavan sukupolven sekvensointi (NGS) ovat arvokkaita varhaisessa ja tarkassa laboratoriodiagnoosissa, erityisesti Leptospiran eristäminen käyttämällä biologista väliainetta inokulaatiota ja DNA-hybridisaatiota (DNA-koetin) [81,82]. Erilaisia ​​leptospiraalikohteita (kuten 16S ribosomaalista RNA:ta) tai DNA:ta voidaan monistaa diagnoosia varten [83], ja reaaliaikainen PCR (RT-PCR) on herkempi ja spesifisempi kuin tavallinen PCR [84]. Koska jotkin RT-PCR-alukkeet voivat sitoutua epäspesifiseen kohtaan, mikä johtaa vääriin positiivisiin tuloksiin, viimeisimmät reaaliaikaiset multipleksi-PCR-määritykset on kehitetty käyttämällä kahta alukesarjaa [85]. Sisäkkäinen PCR auttaa myös havaitsemaan spesifisempiä ja herkempiä DNA-kohtia lisäalukesarjoilla [86,87]. Nykyiset suuntaukset leptospiroosin diagnosoinnissa ovat kuitenkin sekä serologisten että molekulaaristen tekniikoiden, kuten PCR:n ja ELISA:n (helppompi kuin kultastandardi serologinen MAT), käyttö resurssirajoitteisissa maissa [88,89]. Lisäksi LAMP-tekniikka [90] 16S-rRNA-geenin (rrs) havaitsemiseksi on kustannustehokas, nopea ja korkea tuotto patogeenisten leptospirien havaitsemiseksi virtsasta. Tällä hetkellä NGS on tarkimmin perustuva kulttuurista riippumaton menetelmä kehon nesteiden (veri ja virtsa) ydingenomianalyysiin [91] ja leptospiroositestien tulevaisuuden suunta olisi siirtyä kohti leptospirien molekyyliluokitusta, joka voittaa rajoituksen. leptospirien kulttuurieristys kliinisistä näytteistä. Tästä syystä PCR:n arvo leptospiroosin kliinisessä diagnoosissa on erityisen hyvä ja useita nykyaikaisia ​​tekniikoita on tulossa.

6.2.2. Anti-Leptospira-vasta-aineiden tunnistus

Useita serologisia diagnooseja käytetään; esimerkiksi sukuspesifiset vasta-ainetestit (epäsuora hemagglutinaatio [IHA], entsyymi-immunosorbenttimääritys [ELISA], Lepto Dri Dot [lateksiagglutinaatio], mikrokapseliagglutinaatio [MCAT]) ja serovarispesifiset vasta-ainetestit (mikroskooppinen agglutinaatiotesti [ MAT]) [92,93]. Sellaisenaan diagnoosin MAT-kriteerit ovat (i) nelinkertainen tiitterin nousu pariisissa seerumeissa (nykyisen infektion serokonversio) tai (ii) yksittäinen korkea tiitteri (suurempi tai yhtä suuri kuin 1:400 tai 1:800, korkeampi epidemiassa alueet) (seropositiivisuus) (vasta-aineet voivat säilyä jonkin aikaa tartunnan jälkeen tai ristireagoivat muiden sairauksien kanssa). Lisäksi MAT vaatii elävän paneelin kaikista alueen Leptospira-serovaroista, ja paikallisesti standardoitujen serovarsien paneelin [93,94] Maailman eläintautijärjestön mukaan (19 antigeeniä edustaa 15 seroryhmää) [95]. Koska vasta-aineet ovat havaittavissa 5–7 päivää tartunnan jälkeen, MAT-testi voi olla negatiivinen (tiitteri < 1:50) infektion ensimmäisten päivien aikana. Leptospiroosin diagnoosi voidaan tehdä virtsanäytteillä [96] käyttämällä sekä serologiaa että molekyylidetektiota (16S rRNA), erityisesti potilailla, joilla on äskettäinen infektio (MAT suurempi tai yhtä suuri kuin 1:800 tai ELISA IgM-positiivinen tai molemmat) [97] .

Rajallisilla resursseilla kliininen ennustepistemäärä [98], joka perustuu asiaankuuluvaan kliiniseen historiaan ja siihen liittyviin laboratoriotesteihin, joissa pisteytetään seitsemässä näkökohdassa, on seuraava: hypotensio (3), keltaisuus (2), lihaskipu (2), AKI (1,5) , matala hemoglobiini (3), hypokalemia ja hyponatremia (3) ja neutrofiilia (1) ehdotetaan (yhteenvedon raja-arvolla 4 on vastaanottimen toimintakäyrän alla oleva pinta-ala {{10}}.78 ( 95 % CI 0,68–0,89) leptospiroosidiagnoosissa [77]). Tämä Thai-Lepto-on-on-admission -todennäköisyyspistemäärä voisi olla diagnostinen työkalu leptospiroosin varhaiseen oletettuun diagnoosiin potilailla, joilla on vakava kliininen epäily taudista.