Osa Ⅰ: Albumiinin munuaiskäsittely – varhaisista löydöistä nykykäsitteisiin

Ottaa yhteyttä:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Jakub Gburek, Bogusława Konopska ja Krzysztof Goł ˛ab

1. Esittely

Albumiinion yksi varhaisimmista tunnistetuista proteiineista kehossa. Denis kuvasi sen ensimmäisen kerran vuonna 1840. Sen nimi juontuu latinan sanasta Albus (valkoinen) valkoisen sakan muodostumisen ominaisuuden vuoksi happamassa ympäristössä. Tämä proteiini on hyvin yleinen kehossa, ja sitä esiintyy muun muassa plasmassa, imusolmukkeessa, aivo-selkäydinnesteessä ja solunulkoisessa nesteessä. Sillä on monia tärkeitä fysiologisia toimintoja.Albumiiniosuus kaikista plasman proteiineista on yli 5 0 prosenttia, ja sen suhteellisen korkea pitoisuus (45 g/l, 0,6 mM) määrittää noin 80 prosenttia veriplasman kolloidisen osmoottisesta paineesta [1]. Se vastaa veden jakautumisesta plasman ja muun solunulkoisen nesteen välillä, mikä varmistaa veren normaalin hemodynamiikan ylläpitämisen ja ehkäisee turvotusta. Kuljetustoimintoalbumiinion yhtä tärkeä. Suuri jakautumistilavuus, joka liittyy sen suhteellisen helppoon tunkeutumiseen kapillaariepiteelin läpi, aiheuttaa yli 60 prosentin tämän proteiinin kokonaismäärästä olevan läsnä ekstravaskulaarisessa tilassa. Tällainen suuri levinneisyysalbumiiniinterstitiaalisiin nesteisiin mahdollistaa sen kosketuksen useimpien kehon solujen kanssa, mikä tekee siitä ihanteellisen pienimolekyylisten metaboliittien kantajan. Endogeeniset aineet kuljetetaanalbumiinisisältävät muun muassa: pitkäketjuiset rasvahapot, aromaattiset karboksyylihapot, bilirubiini, sappihapot, porfyriinit, typpioksidi ja kaksiarvoisten metallien ionit, mukaan lukien Co-, Cu-, Ni-, Zn-kationit.Albumiinion myös proteiini, joka sitoo vapaiden radikaalien muodostukseen osallistuvien siirtymämetallien kationeja, kuten Cu tai Fe. Sille on myös tunnusomaista antioksidanttitehtävä ja se mahdollistaa Cd-, Hg- ja V-ionien kompleksoitumisen, mikä on tärkeää detoksifikaatioprosesseille. Vapaan SHCys34-ryhmän läsnäolon vuoksialbumiiniitsessään on antioksidantti ja tärkeä elementti plasman antioksidanttiesteessä [2]. On myös syytä mainita, että pitkäaikaisen nälkäänalbumiinihajoaa tarjoamaan välttämättömiä aminohappoja makromolekyylisynteesiä ja energiantuotantoa varten. Proteiinin puutteen tilassa synteesialbumiinion 2.{1}}kertainen, ja sen resurssit vähenevät lähes 50 prosenttia [3,4].

cistanchevoi hoitaamunuainensairausparantaamunuaisten toiminta

Kun otetaan huomioon se tosiasia, ettäalbumiinisillä on merkittävä rooli homeostaasissa, elimistön on välttämätöntä ylläpitää normaalia plasmapitoisuuttaan. Vähennys sisäänalbumiinipitoisuutta havaitaan monissa eri etiologioissa olevissa aineenvaihduntahäiriöissä. Se voi johtua väärästä jakautumisesta esimerkiksi haimatulehduksessa, heikentyneestä synteesiä maksakirroosissa, aminohappojen imeytymishäiriöistä tai vähäproteiinisista ruokavalioista; menetys enteropatian, palovammojen, kirurgisten toimenpiteiden tai nefroottisen oireyhtymän aikana sekä kiihtynyt katabolia tulehduksissa ja syövissä. Edellä mainittu lasku ilmenee monista vakavista keskushermostoon, hengityselimistöön ja sydän- ja verisuonijärjestelmään vaikuttavista häiriöistä, mukaan lukien turvotuksen muodostuminen, hyytymistekijöiden aktivoituminen, hypotransferrinemia, HDL-dyslipidemia, oksidatiivinen stressi ja monet sen kuljetustoimintoihin liittyvät aineenvaihduntahäiriöt. Lisäksi hypoalbuminemiatiloissa lääkkeiden vapaa farmakologisesti aktiivinen osuus kasvaa, mikä tulee ottaa huomioon optimaalista annostusta määritettäessä. Hyperalbuminemia on harvinainen tila, ja se voi johtua merkittävästä kuivumisesta tai liiallisesta laskimoveren pysähtyneisyydestä. Kuitenkin liiallinen plasmaalbumiinitasot eivät liity vakavampiin sairauksiin [5,6].

Laskimonsisäinen antoalbumiinihypoalbuminemia-tilassa olevat valmisteet aiheuttavat nopean, tilapäisen onkoottisen paineen korjauksen ja ehkäisevät hypovolemiaa. Siksi,albumiinivalmisteita on käytetty mm. laajojen palovammojen, akuutin hengitysvajauksen, vaikean hemolyyttisen oireyhtymän hoidossa vastasyntyneillä ja potilailla sydänleikkauksen jälkeen [7,8]. Lisäksi, koska se pystyy kerääntymään kasvainten ja tulehduskohtien kudoksiin, tutkimuksia lääkeaineista, jotka perustuvat konjugaatteihin, jotka sisältävätalbumiinisuoritettiin. Esimerkiksi lääkkeet yhdistettynä ekso- tai endogeenisiinalbumiini, silloitettu muodossaalbumiinitutkittiin mikro- ja nanokapseleita sekä geneettisiä fuusioita polypeptidilääkkeiden tapauksessa [9].

Siksi,albumiinikatabolismi on merkittävä tutkimusongelma patofysiologian ja interventiolääketieteen kannalta. Yksi tärkeimmistä tässä prosessissa mukana olevista elimistä on munuaiset. Munuaisten katabolian häiriöt voivat johtaa hypoalbuminemiaan liittyvien komplikaatioiden lisäksi myös nefroottisen oireyhtymän kehittymiseen albuminuriassa ja sen seurauksena tämän elimen terminaaliseen vajaatoimintaan. Proteinurian ja munuaisten vajaatoiminnan välinen suhde on monimutkainen ja sisältää sarjan patologisia tapahtumia, jotka kemokiinit välittävät interstitiaaliseen tulehdukseen, mononukleaaristen solujen kertymiseen ja komplementin munuaistensisäiseen aktivaatioon. Proinflammatoriset ja profibrogeeniset signaalit johtavat paikallisiin vammoihin ja niihin liittyvään interstitiaaliseen munuaisfibroosiin. Tämän seurauksena havaitaan toiminnallisten nefronien ehtyminen [10]. Tästä syystä tämä kysymys on ollut laajan tutkimuksen kohteena useiden vuosien ajan. Viimeisen vuosikymmenen aikana tehdyt tutkimukset ovat merkittävästi edistäneet tähän prosessiin liittyvien molekyylimekanismien sekä joidenkin niihin liittyvien ristiriitojen ymmärtämistä. Tutkimus esittelee tämän alan viimeisimmän tutkimuksen tuloksia.

cistanche miesten edut

2. Yleinen albumiiniaineenvaihdunta

2.1. Synteesi

Albumiinisitä tuotetaan hepatosyyttien karkean endoplasmisen retikulumin polysomeissa ja erittyy esiproteiinina. Siirtyessään sileään endoplasmiseen retikulumiin signaalipeptidi poistetaan. Lisäprosessointi tapahtuu eritysreitillä, ja se sisältää heksapeptidin poistamisen, joka on läsnä molekyylin N-päässä [11]. KorkoalbumiiniSynteesi on 10-15g päivässä, mikä on noin 10 prosenttia maksan kokonaisproteiinisynteesistä. Pieni määräalbumiini(noin 2 g) varastoituu maksaan, kun taas suurin osa erittyy verisuonitilaan. Tämän proteiinin plasmapooli muodostaa 30-40 prosenttia sen kokonaismäärästä, ja loppuosa löytyy pääasiassa ihosta ja lihaksista. Noin 5 prosenttiaalbumiinivuotaa solunulkoiseen tilaan, josta se palaa lymfaattista reittiä systeemiseen verenkiertoon [4]. Synteesialbumiinion jatkuva prosessi, jota säätelevät transkription ja translaation aloituksen tasolla eri ärsykkeet. Esimerkiksi synteesi tehostuu ruoan nauttimisen jälkeen ja vähenee aterioiden välisenä aikana. Tähän prosessiin vaikuttavat myös hormonit. Synteesialbumiinilisääntyy kilpirauhasen liikatoiminta ja vähenee kilpirauhasen vajaatoiminta. Kortikosteroidit ja insuliini lisäävät tuotantoaalbumiiniterveillä ihmisillä, kun taas tämän proteiinin synteesi estyy akuutin vaiheen vasteessa. Kaliumpitoisuuden lasku maksasoluissa vähentää maksasolujen määrääalbumiinivapautuu verenkiertoon, mutta ei estä itse proteiinisynteesiä. Kuitenkin muutokset onkoottisessa paineessa osoittavat hallitsevaa vaikutusta intensiteettiinalbumiinisynteesi. Oikeaalbumiinipitoisuus säilyy myös kaikissa kudoksissa olevan tasapainoisen katabolian ansiosta [12].

2.2. Katabolismi

Thealbumiinitpuoliintumisaika plasmassa on 19 päivää, ja sen päivittäinen jakautuminen ihmiskehossa ei ylitä 14 g. Tämän proteiinin katabolia tapahtuu pääasiassa lihaksissa ja ihossa (noin 40-60 prosenttia o) ja tarkemmin näiden kudosten verisuonten endoteelisoluissa. Viimeaikaisten tutkimusten valossa uskotaan, että sisäistämisen molekyylimekanismi ja kuljetusalbumiininäiden solujen hajoaviin organelleihin on kaveoliiniriippuvainen endosytoosi, johon osallistuvat scavenger-reseptorit gp18,gp30 ja gp60 (albondiini)[13-16]. Maksa on mukana tässä prosessissa pienemmässä määrin (noin 15 prosenttia). Verisuonten endoteelisolujen lisäksi hepatosyytit osallistuvat myösalbumiiniottaminen. Sen katabolia parenkymaalisissa soluissa tapahtuu myös kaveoliiniin liittyvien rakenteiden kautta [17,18]. Proteolyyttinen hajoaminenalbumiinitapahtuu sen jälkeen, kun caveolae on sisäistetty ja fuusioitunut lysosomien kanssa. Molekyylit hajoavat vapaiksi aminohapoiksi, jotka ruokkivat systeemistä aminohappopoolia.

On näyttöä siitä, että tulehdukseen liittyvä hypoalbuminemia johtuu pikemminkin lisääntyneestä vaihtumisesta kuin vähentyneestä synteesiä. Hapettunutalbumiinitaialbumiinimuilla tavoilla muunnettu hajoaa maksassa. Tulehdustiloissa nämä prosessit lisääntyvät myös kapillaarien lisääntyneen läpäisevyyden ja plasmaproteiinien intensiivisen virtauksen vuoksi interstitiumiin [19].

Albumiinikataboliaa esiintyy myös munuaisissa (noin 10 prosenttia), mutta munuaisiin liittyvät molekyylimekanismitalbumiiniliikevaihto on olennaisesti erilainen. Glomerulaarisen suodatuksen jälkeen proteiini internalisoituu proksimaalisiin tubuluksiin klatriinista riippuvaisen endosytoosin kautta makromolekyylien scavenger-reseptoreiden tandemin – megaliinin ja kubiliinin – mukana. Sittenalbumiinimolekyylit läpikäyvät lysosomaalisen hajoamisen ja/tai transsytoosin, joita käsitellään yksityiskohtaisesti seuraavissa luvuissa.

cistanche miesten edut

3. Munuaisten albumiinin katabolia

Munuaisetalbumiinikatabolia sisältää suodatuksen glomeruluksessa, takaisinabsorption proksimaalisissa tubuluksissa ja solunsisäisen hajoamisen tai osittaisen transsytoosin verenkiertoon. Vain pieni määräalbumiini, eli jopa noin 100 mg päivässä, erittyy virtsaan. Jos suodatussulku on vaurioitunut tai proksimaalisten tubulusten toimintahäiriö,albumiiniesiintyy virtsassa pitoisuuksina, jotka voivat ylittää 3 g päivässä [20].

3.1. Albumiinin glomerulaarinen suodatus

Glomerulaarisen esteen läpäisevyys määrää primaarisen suodoksen koostumuksen. Se muodostuu kolmesta kerroksesta: sisimmästä fenestroituneesta endoteelisolukerroksesta, glomerulaarisesta tyvikalvosta ja uloimmasta podosyyttikerroksesta, jonka jalkaprosesseja yhdistää rakokalvo. Seulan monikerroksiset ominaisuudet pienentävät huokosten kokoa vähitellen. Viime vuosina geneettisten eläinmallien kehityksen ansiosta on voitu tunnistaa pääkomponentit, jotka ovat vastuussa tästä esteen eheydestä. Tärkein rooli on tällä hetkellä katsottu joillekin glomerulaarisen tyvikalvon (GBM) rakenteellisille komponenteille (esim. tyypin IV kollageeni ja laminiini 2) ja podosyyttien glykokaliksiproteiineille (esim. podosiini ja nefriini) [21,22]. Podosyyttien toiminta ei kuitenkaan rajoitu seulomiseen. On osoitettu, että sekä ihmisen että eläimen podosyytit endosytoosivatalbumiiniin vitro [23,24]. Tiedot viittaavat myös siihen, että podosyytit poistavat proteiineja GBM:stä transsytoosin kautta [25]. Nämä tutkimukset viittaavat siihen, että podosyytit sisäistyvätalbumiinija muut plasmaproteiinit (esim. IgG) ja estävät tällä tavoin glomerulussuodatusesteen (GFB) tukkeutumisen.

Kerästen läpäisevyyden mitta on glomerulusten seulontakerroin (GSC), joka on tietyn molekyylin pitoisuuden suhde primäärisuodoksessa sen plasmapitoisuuteen. Astealbumiiniläpäisy on aiheena monia kiistoja, ja eri kokeellisissa malleissa määritetyt GSC-arvot eroavat jopa kolmella suuruusluokalla.

Teoreettiset laskelmat osoittavat, että tämän esteen huokoshalkaisija on noin 4 nm ja se on negatiivisesti varautunut johtuen suhteellisen korkeasta glykosaminoglykaanipitoisuudesta. Siksi halkaisijaltaan suurempien hiukkasten ja/tai keskimääräisen negatiivisen nettovarauksen omaavien hiukkasten suodatuksen pitäisi olla vaikeaa. Muodon suhteenalbumiinimolekyyli muistuttaa ellipsoidia, jonka suuret ja pienet halkaisijat ovat 14 nm ja 3,8 nm, ja sen tuloksena oleva varaus on -15 (pI=4.5). Jos kyseessä on molekyyli, jolla on edellä mainitut ominaisuudet, GSC:n tulee olla suhteellisen alhainen ja välillä (5.10-4-7.10-4)[26,27]. Pitoisuusalbumiiniplasmassa on noin 45 g/l, joten sen pitoisuuden primaarisessa suodoksessa tulisi vaihdella välillä 22-32 mg/l [28]. Nämä arvot ovat samanlaiset kuin ne, jotka saatiin havainnoissa potilailla, joilla on harvinaisia ​​sairauksiaalbumiinimunuaisten käsittelyä tai eläinkoemalleja. Terveiden rottien varhaisten proksimaalisten tubulusosien mikropunktiomenetelmällä saadut tulokset (6.10-4) ovat pitkälti teoreettisen mallin mukaisia ​​[27,29]. GSC ofalbumiinilaskettuna sen pitoisuudesta virtsassa potilailta, joilla on Fanconin oireyhtymä, joille on ominaista tubulaarinen albuminuria, on hieman pienempi kuin teoreettisten arvojen alempi alue (8.0.10-5)[30]. Sitä vastoin GSC lasketaan virtsan perusteellaalbumiinipitoisuus rotilla, joilla on farmakologisesti estetty tubulusreabsorptio, on hieman korkeampi (3,3·10-4)[31]. Lisäksi tutkimuksissa eristetyllä munuaisella, joka oli perfusoitu 8 asteessa, jossa tubulustoiminta on täysin estynyt solukalvon juoksevuuden puutteen vuoksi, GSC-arvot olivat vielä korkeammat (110-3)[32]. Edellä mainitut erot selittyvät sovellettavien mittausmenetelmien teknisillä rajoituksilla. Esimerkiksi mikropunktioteknologiaa käytettäessä on olemassa riski, että kerätty näyte saattaa kontaminoitua pipetin projisoinnin aikana vaurioituneiden kapillaareiden plasmalla, eikä se siksi heijasta todellista suodosta proteiinien erittäin nopean imeytymisen vuoksi. proksimaalisen tubuluksen ensimmäinen osa. Fanconin oireyhtymää sairastavista potilaista saaduilla tiedoilla ei ole mahdollista arvioida tarkasti proksimaalisen tubuluksen vaurion astetta, ja on oletettava, että proteiinien reabsorptio ei ole täysin estynyt. Sama koskee malleja, joissa on farmakologinen reabsorption esto. Myös eristettyjä elimiä käyttävistä kokeista saatuja tietoja on vaikea tulkita, koska hemodynamiikka on täysin erilainen kuin in vivo. Huolimatta eri tekniikoilla määritetyistä GSC-arvojen eroista monien vuosien ajan yleisesti hyväksytty paradigma oli, että glomerulussuodatusalbumiinion suhteellisen pieni ja sille on ominaista GSC-indeksi alle 1.10-3.

Tulokset, jotka on saatu käyttämällä vähän invasiivista tekniikkaa in situ -kaksifotonimikroskopioissa, ovat herättäneet suurta kiistaa viime vuosina. Määritetty GSC oli merkittävästi korkeampi verrattuna aikaisempiin tutkimuksiin (2-4.10-2). Fluoresoivalla merkittyalbumiiniannettiin suonensisäisesti diabeettisille Munich-Wistar-rotille, joilla oli pintaglomerulukset ja normaali bulimia. GSC määritettiin vertaamalla plasman fluoresenssin intensiteettiä glomerulaarisissa kapillaareissa ja primäärisuodosta Bowman-tilassa. Samanlaiset arvot saatiin riippumatta pitoisuudesta ja leimausmenetelmästäalbumiinianto (bolus/infuusio)33]. Nämä tiedot ovat yhdenmukaisia ​​aiempien rotilla tehtyjen tutkimusten kanssa, joissa puromysiiniaminonukleosidin antaminen aiheutti proteinurian. Tämä lääkkeiden aiheuttama hypoalbuminemia osoittaa seerumin yli 60 prosentin laskunalbumiinikeskittyminen. Terveisiin koehenkilöihin verrattuna ei ollutalbumiinitakaisinotto proksimaalisten tubulussolujen harjan reunassa puromysiinille altistetuilla rotilla, mikä johti munuaisten lisääntymiseenalbumiinierittymisindeksi yli 300 mg päivässä [34]. Reabsorption puute liittyi megaliinin, V-ATPaasin ja klatriinin ilmentymisen huomattavaan vähenemiseen tubuluksen apikaalisessa navassa [35]. Edellä mainittujen tutkimusten kirjoittajat uskovat, että glomerulaarinenalbumiinisuodatus on erittäin tehokas prosessi, joka perustuu yleensä kiinteän konvektiivisen virtauksen periaatteeseen diffuusion sijaan ja että suodattimen koosta johtuvat rajoitukset.albumiiniglomerulaarisen esteen molekyyli- ja rakenteelliset piirteet eivät ole niin suuria kuin odotettiin. Tämän seurauksena he ehdottavat, että albuminuria johtuu vain epänormaalistaalbumiinireabsorptio, eikä se ole seurausta glomerulaarisen esteen vauriosta, kuten aiemmin on ajateltu. Vaihtoehtoinen malli on esitelty parissa arvostelussa [36-38].

Varaukseen liittyvää glomerulaarisen esteen selektiivisyyttä ei varsinaisesti havaittu aikaisemmissa tutkimuksissa [39,40]. Lisääntynyt suodatus voi liittyä myös vapaaseenalbumiiniläpäisy suurten huokosten läpi, joiden halkaisija on 75-110 A, joiden esiintymistä glomerulaarisessa esteessä ovat ehdottaneet Ohlson et al.[32] tutkimuksessa proteiinisuodatuksesta eristetyssä perfusoidussa munuaisessa. Tällaisten huokosten esiintyminen in vivo vahvistettiin tutkimuksissa Fanconin oireyhtymää sairastavilla potilailla, joiden virtsasta löydettiin merkittäviä määriä suurempia proteiineja, kuten transferriiniä tai IgG:tä [30].

Kuitenkin Russon et ai. [33] tiedeyhteisö ei pitänyt niitä luotettavina. Gekle [41] huomautti, että vaikka kaksifotonimikroskopiatekniikkaa voidaan käyttää menestyksekkäästi pienimolekyylisten yhdisteiden suodatuksen arvioimiseen,albumiini, se voi johtaa harhaanjohtaviin havaintoihin. Niin suuri ero pitoisuudessa leimattualbumiinitubuluksen plasmassa ja luumenissa taustakohina on saattanut lisätä suodoksesta tulevaa fluoresenssisignaalia merkittävästi. Lisäksi kirjoittaja korosti, että proksimaalinen tubuluksen reabsorptiojärjestelmä ei todennäköisesti ollut tarpeeksi tehokas kuljettamaan niin suurta määrääalbumiini. Lisäksi de Borst [42] totesi, että esitetyt tulokset eivät anna mahdollisuutta tehdä näin yksiselitteistä johtopäätöstä, ja ehdotti, että havaittu vaikutus voi johtua suurten määrien suorasta myrkyllisestä vaikutuksesta.albumiiniproksimaalisissa tubulaarisissa epiteelisoluissa. On osoitettu, että pitkällä aikavälilläalbumiinialtistuminen vähentää endosytoosia proksimaalisissa tubulussoluissa [43]. Lisäksi muut tutkimukset kertoivat, että korkeaalbumiinitasot indusoivat apoptoosia proksimaalisissa tubulussoluissa vähentämällä megaliinia, proteiinikinaasi B:tä ja Bad-proteiinia [44]. Remuzzi et al.:n kommentissa puolestaan. [45], kirjoittajat sisällyttivät München-Wistar-rottien mikropunktion tulokset, jotka ovat yhdenmukaisia ​​aiemmin määritettyjen GSC-arvojen kanssa ja joita ei ole koskaan aiemmin julkaistu. Edellä mainittujen rottien tapauksessa munuaisen pinnalla sijaitsi glomerulusten osajoukko, mikä mahdollisti ultrasuodoksen poistamisen suoraan Bowmanin tilasta, mikä sulki pois reabsorption vaikutuksen tubuluksen ensimmäisessä osassa 46]. Varmasti tarvitaan lisätutkimuksia todellisten GSC-arvojen selkeäksi määrittelemiseksialbumiinisuodatus.

cistanche miesten edut

3.2. Albumiinin reabsorptio

Sivustoalbumiinireabsorptio on hyvin tunnistettu. 1960-luvun alusta lähtien useilla mikroskooppisilla tekniikoilla tehdyt tutkimukset osoittavat epäilemättä, että tämä prosessi tapahtuu proksimaalisessa tubuluksessa, mikä on tehokkain sen varhaisessa segmentissä [26]. In vivo -mikropunktiota käyttämällä todettiin, ettäalbumiinisisäänotto tapahtuu saman verran proksimaalisen kierteisen tubuluksen alku- ja loppuosassa sekä osittain myös suoran tubuluksen laskevassa osassa. Ei merkittävääalbumiiniabsorptiota havaittiin muissa nefronin osissa [27]. Kuitenkin mekanismialbumiinikäyttö pysyi selittämättömänä pitkään. Proksimaalinen tubulus on vuorattu tiheällä kuutiomaisella epiteelillä. Siten solunsisäinen tunkeutuminenalbumiiniepiteelin kautta verenkiertoon vaikutti epätodennäköiseltä alusta alkaen. Sitä haittaisi myös sen suhteellisen suuri koko ja alhainen pitoisuus suodoksessa [46]. Yleiset kineettiset ominaisuudetalbumiiniImeytymisprosessi saatiin aikaan Parkin ja Mackinin pioneeritutkimuksissa 1984[47], joissa käytettiin eristettyjä perfusoituja munuaistiehyitä. He osoittivat kahden ottojärjestelmän olemassaolon: ensimmäinen, suuren kapasiteetin ja alhaisen affiniteetin järjestelmä, jolle on tunnusomaista Michaelis-vakio (Km) 1,2 mg/ml ja (Bmax) 3,7 ng/min tubuluksen pituutta kohti, ja toinen, pienikapasiteettinen järjestelmä – korkea affiniteetti, Km:llä 0.031 mg/ml ja sitoutumiskapasiteetilla Bmax 0,064 ng/min tubuluksen pituutta kohti.

Tutkimukset endosytoosiprosessista nestefaasissa (pinosytoosi) proksimaalisissa tubulaarisissa epiteelisoluissa osoittivat, että se jatkuu liian vähäisellä tehokkuudella selittääkseenalbumiini. Tämän proteiinin imeytyminen tapahtuu lähes 40-kertaisesti nopeammin kuin pinosytoosiprosessissa absorboituneiden yhdisteiden, kuten dekstraanin tai inuliinin [48].

1990-luvulla tehdyt kokeet osoittivat, että käyttöönottoalbumiinion pitkälti erityinen prosessi. Merkittyjen sitominenalbumiinileimaamattomien molekyylien ylimäärä voi estää lähes täysin. Lisäksi etiketöimätönalbumiinitehostaa leimattujen molekyylien dissosiaatiota proksimaalisesta putkimaisesta epiteelisolukalvosta. Niille on tunnusomaista dissosiaatiovakio Ka välillä 100-300·10-"M (7-20 mg/L). Albumiinin sitoutumiskinetiikka osoittaa ainakin yhden sitoutumiskohdan olemassaolon. Tämä ominaisuus viittasi siihen, että pääroolialbumiiniReabsorptio tapahtuu adsorptiolla endosytoosilla. Vahvistettiin, että tämän prosessin farmakologinen estäminen rotilla endosomien alkalisoinnilla NH Cl:lla tai bafilomysiini A1:llä johtaa lisääntyneeseenalbumiinierittyminen virtsaan [43,49].

Lisäksi proksimaalisista tubulusperäisistä opossum-munuaissoluista (OK-soluista) tehdyt tutkimukset osoittivat, ettäalbumiiniendosytoosi riippuu sytoskeleton eheydestä. Aktiinin polymerisaation estäminen sytokalasiini D:llä johtaa lähes täydelliseen toiminnan pysähtymiseenalbumiiniimeytyminen. Ilmeisesti prosessia kiihdyttää myös vuorovaikutus mikrotubulusten kanssa. Huomattava väheneminen imeytymisessäalbumiinihavaittiin nokodatsolin vaikutuksesta johtuvan mikrotubulusten hajoamisen seurauksena, mutta lopettaminen ei ollut täydellinen. Vaikuttaa siltä, ​​että rakkuloiden liike solukalvolta kohti endosomaalista osastoa endosytoosin alkuvaiheessa riippuu aktiinirungon eheydestä, ja myöhemmässä vaiheessa havaitaan vuorovaikutuksia mikrotubulusten kanssa. Toisaalta näissä tutkimuksissa osoitettiin, että klatriinista riippuvainen endosytoosi on hallitseva mekanismi molekyylien uudelleenabsorptiossa [50,51]. Vaikka kaveoliiniekspressiota havaittiin proksimaalisten tubulaaristen epiteelisolujen apikaalisessa kalvossa, kaveoliiniriippuvaista endosytoosia ei koskaan raportoitu [52,53].

Vasta viimeaikaiset tutkimukset ovat selittäneet sen molekyylimekanisminalbumiiniimeytyminen proksimaaliseen tubulukseen suuressa määrin. Osoittautuu, että cubilinin vuorovaikutus amnion vähemmän proteiinin (AMN) kanssa on välttämätöntä tämän proteiinin tehokkaalle ottamiselle proksimaaliseen tubulukseen. Tämän kompleksin läheisen yhteyden ja toiminnallisen riippuvuuden vuoksi sitä kutsutaan CUBAMiksi. Lisäksi tämän kompleksin oikea ilmentyminen ja tehokas toiminta riippuu toisesta endosyyttireseptorista – megaliinista [54-56]. CUBAM:n ja megaliinin normaali ekspressio ja toiminta munuaisissa ovat välttämättömiä tehokkaan otteen vastaanottamiseksialbumiiniproksimaalisissa tubulussoluissa, kuten voidaan nähdä todisteista albuminuriasta useissa perinnöllisissä tai hankituissa sairauksissa, jotka koskevat näitä endosyyttisiä reseptoreja (taulukko 1).

Reseptorikompleksin yleiset rakenteet ja toiminnalliset assosiaatiot on esitetty kuvassa 1. Äskettäin tutkimuksissa, joissa käytettiin hepatosyyttien ydintekijä 1:n knockout-hiiriä, osoitettiin, että tämä proteiini säätelee molempien reseptoreiden konstitutiivista ilmentymistä [63]. Megaliini, cubilin ja amnion sisältävät vähemmän tunnettuja alueita ja motiiveja. Megaliini sitoo useita suodatettuja proteiineja komplementtityyppisten toistojensa kautta ja pystyy sisäistämään ligandeja NPXY-motiivien kautta sytoplasmisessa hännän. Cubilin sisältää useita sitoutumisdomeeneja (CUB-domeeneja) ja epidermaalisen kasvutekijätyypin (EGF-tyyppisiä) toistoja perifeerisenä kalvoproteiinina, joka riippuu megaliinista ja/tai AMN:stä. AMN sisältää NPXY-motiivin ja luultavasti auttaa cubilinia myös endosytoosissa. kuten solunsisäisessä kuljetuksessa synteesin aikana.

Taulukko 1. Albumiinin munuaisten heikentyneeseen käsittelyyn liittyvät häiriöt	Kuva 1. Endosyyttinen megaliini-kubiliini-ambitionless kompleksi munuaisen proksimaalisen tubuluksen apikaalisessa kalvossa.

NAPSAUTA TÄSTÄ OSASIAKSI Ⅱ