Osa 2: Integroitu verkkofarmakologia ja seeprakalamalli Cistanche Tubulosan kaksivaikutteisten komponenttien tutkimiseksi sekä osteoporoosin että Alzheimerin taudin hoidossa
Mar 30, 2022
Ottaa yhteyttä:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
KLIKKAA TÄSTÄ OSAAN 1
3. Tulokset
3.1 Ehdokasyhdisteet ja Popotentiaaliset tavoitteet
CT:n kemiallisten aineosien tutkimuksessa TCMSP:ltä saatiin yhteensä 75 ainesosaa. Sitten suoritettiin PCA CT:n kemiallisen jakautumisen visualisoimiseksi. Kuten kuvasta 1 näkyy, CT:n ainesosat olivat kemiallisessa tilassa moninaiset, ja niistä 28 täytti Lipinskin viiden säännön (Lipinski, 2003). Mielenkiintoista on, että CT:n ainesosien ja OP/AD:hen hyväksyttyjen pienimolekyylisten lääkkeiden välillä oli monia päällekkäisiä osia. Se osoitti, että monilla CT:n yhdisteillä oli potentiaalinen lääkekelpoisuus OP/AD:ssä. Niiden lääkekelpoisuuden arvioimiseksi edelleen 43 yhdistettä seulottiin DL:llä. Kohteiden ennustamisen jälkeen valittiin 26 kandidaattiyhdistettä seuraavaa analyysiä varten. Ja niihin voidaan kiinnittää yhteensä 847 kohdeproteiinia.
cistamchesillä on Alzheimerin tautia estävä vaikutus.
OP- tai AD:hen liittyvät geenimerkinnät kerättiin DisGeNET- ja GeneCards-tietokannoista. Tuloksena kerättiin 3052 ja 8042 geenimerkintää. Otimme kaksi DisGeNET- ja GeneCards-tietokannan pistemäärää arviointipisteiksi, seuloen kohteista ylimmän viidennen. Viidesosan suhde päätettiin esikokeiden perusteella. Sitten 211 yleistä OP-ED-kohdetta säilytettiin vastaamaan 26 ehdokasyhdisteen kohteita. Lopuksi yhteensä 81 proteiinikohdetta (lisätaulukko S2), jotka liittyivät 22 ehdokasyhdisteeseen (lisätaulukko S3), valittiin toimintaanalyysin molekyylimekanismeja varten, mikä muodosti kuvassa 2 esitetyn proteiini-proteiini-vuorovaikutusverkon (PPI).
22 yhdistettä jaettiin 11 luokkaan: 5 fenyylietanoidiglykosidia (PhG) (dekafeoyylilakteosidi, sistanosidi E jne.), 3 fenyyliakryylioligosakkaridia (Cistanoside H, Cistanoside F jne.), 3 iridoidia ja iridoidi-uridiglykosidit, jne.), 3 lignaania ja lignaaniglykosidia (yangambiin, ( plus )-pinoresinol-O- -D-glukopyranosidi jne.), 2 flavonoidia (kversetiini, genisteiini), 1 alkaloidi, 1 terpeeni, 1 steroli, 1 rasva-alkoholi, 1 rasvahappo ja muut. Aiempien raporttien mukaan nämä yhdisteet ovat CT:n pääkomponentteja tai aktiivisia toiminnallisia ainesosia (Fu et al., 2018).
Kuvassa 2 yhteensä 81 yhteisellä kohteella havaittiin korrelaatiota OP:n ja AD:n kanssa. PPI:n aste otettiin ominaiseksi parametriksi määrittämään mahdollisten kohteiden merkitys. Top 5 oletettua kohdeproteiinia, jotka liittyvät OP:hen ja AD:hen, olivat albumiini (ALB), insuliini (INS), interleukiini 6 (IL6), TNF-alfa (TNF) ja epidermaalinen kasvutekijä (EGF).
Kuvio 1.Kemiallinen jakautuminen perustuu pääkomponenttianalyysiin (PCA).
3.2 Integroitu ja luokiteltu verkkoanalyysi
81 oletettua kohdeproteiinia taulukosta S2 valittiin aloittamaan GO- ja KEGG-reitin rikastumisanalyysin. Suodatuksen jälkeen p-arvolla (GO-raja pienempi tai yhtä suuri kuin 0.05, KEGG-polun raja-arvo on pienempi tai yhtä suuri kuin 0,01), 15 GO-termiä ja 66 KEGG:tä Reittitermit palautettiin, kuten kuvioissa 3 ja 4 esitetään. Mukana on yhteensä 16 GO-termiä: 5 molekyylitoiminnalle, 5 biologisille prosesseille ja 6 solukomponenteille. Koska tämän tutkimuksen tarkoituksena oli selvittää OP:n ja AD:n mahdollinen yhteinen patogeneesi, poistimme suoraan muihin sairauksiin liittyvät polkutermit ja luokittelimme loput eri toiminnallisiin luokkiin. Se ehdotti, että CT:n 22 aktiivista ainesosaa voisivat säädellä yhteensä 66 reittiä, jotka pääasiassa korreloivat signaalinsiirron, endokriinisen järjestelmän, immuunijärjestelmän, solujen kasvun ja kuoleman kanssa, jotta ne voisivat toimia vastakkainasetteluna OP:ta ja AD:ta vastaan.
Eri tyyppisten yhdisteiden vaikutuksen erojen paljastamiseksi kuvassa 2 muodostettu PPI-verkosto analysoitiin niiden luokkien mukaan taulukossa S3. Kuva 5 havainnollistaa, että 5 PhG:tä, 2 flavonoidia, 1 terpeeniä ja 1 sterolia, erityisesti flavonoideja, saattavat olla tärkeämpiä kuin muut CT:n aineosat OP:ta ja AD:ta vastaan. Sen jälkeen nämä 4 aktiivisten yhdisteiden sarjaa valittiin paljastamaan niiden puristetut reitit. Kuten kuviosta 6 voidaan nähdä, PhG:t, flavonoidit, terpeeni ja steroli toimivat yhdessä tai yksin 27 reitillä, jotka sisälsivät 11 moduulia: solujen kasvu ja kuolema, endokriininen järjestelmä, immuunijärjestelmä, signaalinsiirto, kehitys ja muut. Tulokset viittasivat siihen, että näillä yhdisteillä saattaa olla synergistinen rooli CT:n positiivisissa vaikutuksissa OP:hen ja AD:hen. On syytä huomata, että PhG:iden suojaavat vaikutukset voivat olla merkittävämpiä kuin flavonoidien hermostoa rappeuttavassa sairaudessa, koska PhG:illä oli suoria vuorovaikutuksia Alzheimerin taudin reitin kanssa, kun taas flavonoidit liittyvät signalointimolekyyleihin ja vuorovaikutukseen. Vain steroli ja terpeeni liittyivät lipidiaineenvaihduntaan ja eritysjärjestelmään. Lisäksi PhG:t, terpeenit ja flavonoidit osoittivat mahdollisen yhteyden endokriinisiin ja aineenvaihduntasairauksiin.
PPI-kuvan mukaan 2 flavonoidia (GE, QU), 1 terpeeniä (AA) ja 1 sterolia (BSS) otettiin arvokkaiksi yhdisteiksi molekyylimekanismien lisätutkimukseen. Mielenkiintoista on, että havaitsimme, että ne kaikki liittyvät toisiinsa MAPK-signalointireitin ja TGF-beeta-signalointireitin kanssa. Ja myös näiden kahden reitin p-arvo oli paljon suurempi. Kuvassa 7 osoitettiin neljän arvokkaan yhdisteen oletetut kohteet ja niihin vaikuttaneiden proteiinien jakautuminen kahdella reitillä.
3.3 Arvokkaiden yhdisteiden tehokkuuden validointi
Tässä kohdassa 3.2 perustetussa verkkoanalyysissä saimme 4 arvokasta yhdistettä farmakologisen aktiivisuuden validointia varten. Tämän tutkimuksen topologisella rakenneanalyysimenetelmällä havaitsimme, että genisteiini (GE, C9, DL=0.21), kversetiini (QU, C11, DL=0.28), abietiinihappo (AA, C19, DL=0.28) ja -sitosteroli (BSS, C20, DL=0.21) osoittivat toteuttamiskelpoisen vuorovaikutuksen OP:ta ja AD:ta vastaan. Tässä osassa muodostettiin Pre- tai AlCl3:lla indusoimia seeprakalan toukkien in vivo -malleja, jotta voidaan arvioida neljän yhdisteen suojaavia vaikutuksia OP:ta ja AD:ta vastaan.
3.3.1. 4 yhdisteen vaikutus OP:hen
Sen havaitsemiseksi, onko neljällä yhdisteellä suojaavia vaikutuksia OP:ta vastaan, Pre käytettiin OP-seeprakalamallin luomiseen. Osteoblastien kehitystä tutkittiin ensin alitsariinipunavärjäyksellä, jotta tutkittiin neljän yhdisteen suoria vaikutuksia luun muodostukseen. Verrokkiseeprakalaan verrattuna Pre ilmeisesti aiheutti muutoksen luun morfologiassa ja luutiheydessä seeprakalan kalloissa malliryhmässä (kuva 8). Värjäytysalueen ja IOD:n väheneminen Pre-ryhmässä ja päinvastainen trendi Ed-ryhmässä osoittivat myös visuaalisesti OP-mallin menestystä. Lisäksi BSS/GE/QU/AA-ryhmissä seeprakalan kallon värjäytymisalue ja 2 IOD kasvoivat merkittävästi malliryhmään verrattuna (kuva 9). Luun muodostumisen ja resorption tyypilliset markkerit, kuten ALP ja TRAP, analysoitiin näiden neljän yhdisteen osteoporoosin vastaisen vaikutuksen arvioimiseksi edelleen. Kuten kuviossa 10 esitetään, Pre vähensi merkittävästi ALP-aktiivisuutta ja lisäsi TRAP-aktiivisuutta verrattuna kontrolliryhmään. Sitä vastoin Ed ja 4 yhdisteet osoittivat merkitsevästi päinvastaista suuntausta kuin Pre-ryhmä seeprakalan ALP- ja TRAP-aktiivisuuksissa. Nämä tulokset yhdistettynä vahvistivat, että BSS:llä, QU:lla, GE:llä ja AA:lla saattaa olla positiivinen rooli luun muodostumisessa esi-indusoidussa OP-seeprakalassa.
3.3.2. Neljän yhdisteen vaikutus AD:hen
Neljän yhdisteen AD:ta vastaan suojaavien vaikutusten arvioimiseksi on käytetty hyvin tunnettua AlCl3--indusoitua AD-seeprakalamallia. Tässä AD-dyskinesian mallissa käyttäytymisanalysaattoria käytettiin seeprakalan liikkeen seuraamiseen. Kuten kuvassa 11 on esitetty, AlCl3-ryhmän AS oli merkittävästi alhaisempi kuin kontrolliryhmän, kun taas DPZ:n ja kaikkien 4 yhdisteen AS:t olivat lähellä kontrollia. DRR ja RE lueteltiin taulukossa S4. Tulokset osoittivat, että GE:n, BSS:n, QU:n ja AA:n eri pitoisuudet lisäsivät DRR:ää 2.37-37.64 prosenttia , 60.18-103.92 prosenttia , 70.{{14 }}.61 prosenttia , 2.37-42.64 prosenttia , vastaavasti osittain merkitsevällä (p-arvo < 0.001-0.01).="" ∆s:t="" kontrolliryhmässä,="" alcl3-ryhmässä="" ja="" dpz-ryhmässä="" tukivat="" edelleen="" sitä,="" että="" ad-mallin="" rakentaminen="" onnistui.="" ge:n,="" bss:n,="" qu:n="" ja="" aa:n="" re="" oli="" 13.12-50.45="" prosenttia="" ,="" 11.41-63.09="" prosenttia="" ,="" 1.63-66.89="" prosenttia="" ,="" 13.{{34}="" },09="" prosenttia.="" nämä="" tulokset="" merkittävillä="" eroilla="" osoittivat,="" että="" ge,="" bss,="" qu="" ja="" aa="" voivat="" parantaa="" seeprakalan="" dyskinesiaa="" jossain="" määrin.="" hermojen="" johtumismarkkerien="" (ache="" ja="" chat)="" aktiivisuuksien="" määrittäminen="" ryhmissä="" esitettiin="" kuviossa="" 12.="" alcl3="" lisäsi="" merkittävästi="" ache-aktiivisuutta="" ja="" vähensi="" chat-aktiivisuutta="" kontrolliryhmään="" verrattuna.="" mutta="" dpz="" ja="" 4="" yhdistettä="" osoittivat="" kykyä="" osittain="" palauttaa="" alcl3:n="" aiheuttamat="" muutokset="" ache-="" ja="" chat-toiminnassa.="" se="" on="" yhdenmukainen="" kuntoutusvaikutuksen="" dyskinesian="" arvioinnin="" tulosten="" kanssa.="" yhteenvetona="" voidaan="" todeta,="" että="" ge:llä,="" bss:llä,="" qu:lla="" ja="" aa:lla="" saattaa="" olla="" potentiaalia="" tulla="" merkittäviksi="">
3.4 Putatiivisten tavoitteiden validointi
Tässä työssä ennustettujen oletettujen kohteiden tarkistamiseksi qRT-PCR-analyysiin valittiin MAPK- ja TGF-beeta-signalointireitteihin liittyvät kohteet. Niiden suhteelliset mRNA:n ilmentymistasot OP-mallissa on esitetty kuvassa 13. Pre-ryhmään verrattuna GE nosti mapk14a-, fgfr1b-, tgfb1-, bmp2-tasoja ja laski tp53-, TNF-, jun-, tgfbr1- ja c-fos-tasoja. . QU lisäsi mapk14a-, fgfr1b-, tgfb1-, bmp2-tasoja ja laski tp53-, jun- ja il1b-tasoja. BSS osoitti vain vähentäviä vaikutuksia tp53:een, TNF- ja mapk3:een. Kuten kuviossa 14 esitetään, AD-mallissa GE, QU, BSS ja AA vähensivät tp53:n mRNA-ilmentymistasoa. Sekä GE että QU alensivat TNF-, bmp2-, tgfbr1-, sp1-, tgfb2- ja ifn-tasoja ja lisäsivät jun-tasoja, kun taas GE ja AA lisäsivät mapk3:n tasoja. Vain GE näytti kääntävän mapk14a:n, fgfr1b:n, fgfr1a:n ja igf1ra:n nousun. Lisäksi QU alensi il1b:n ja EGF:n korkeita tasoja. Geenien, mukaan lukien tp53, TNF-, mapk14a, mapk3, fgfr1b, bmp2, jun, il1b ja tgfbr1, suhteelliset mRNA-ilmentymistasot muuttuivat merkittävästi verrattuna kontrolliryhmään kussakin mallissa. Nämä tulokset viittaavat siihen, että ne voivat toimia linkkinä näiden kahden taudin välillä. Lisäksi nämä tulokset viittasivat myös 4 yhdisteen synergististen vaikutusten mahdollisuuteen.
4. Keskustelu
OP ja AD ovat yleisimmät ikääntymiseen liittyvät kliiniset sairaudet. Niiden monimutkaiset patofysiologiset mekanismit ovat rajoittaneet kahden sairauden tehokasta hoitoa vuosia. OP:n ja AD:n riskitekijät osoittivat, että molempien sairauksien altis ryhmä on osittain samanlainen, kuten iäkkäät naiset (Abraham et al., 2013; Patel, 2017), diabeetikot (Vieira ym., 2018; Xia et al., 2017). 2012), pitkäaikaiset tupakoitsijat (Franic ja Verdenik, 2018; Zhong ym., 2015) ja passiiviset yksilöt (Koedijk et al., 2017; Sofi ym., 2011). Lisäksi nykyiset tutkimukset ovat osoittaneet, että joillakin AD:n avainproteiineilla oli myös toimintoja luun aineenvaihdunnassa (Li et al., 2016; Pan et al., 2018). On syytä uskoa, että OP ja AD eivät ole täysin riippumattomia, vaikka niillä on joitain mahdollisia yhteyksiä. Tämä ehdotti mahdollista heteropatian homoterapiaa, mikä tarkoittaa OP:n ja AD:n hoitoa samalla terapialla.
TCM:n terapeuttisten tavoitteiden ja periaatteiden perusteella sairauden epämukavuus voidaan luokitella useisiin "kuvioihin". Joten useat sairaudet, kuten OP ja AD, voivat jakaa yhden "kuvion" ja niitä hoitavat samat TCM:t (Jiang, 2005). Munuaista vahvistavana yrttinä CT:tä käytetään laajalti OP- ja AD-hoidossa. Nykyaikaiset tutkimukset ovat antaneet kompakteja todisteita siitä, että CT:llä on positiivisia farmakologisia vaikutuksia luustoon ja hermostoon. Se vaatii kuitenkin vielä yksityiskohtaisempia tutkimuksia paljastaakseen CT: n mekanismit.
cistanche ja tongkat aliomistaapositiivisia farmakologisia vaikutuksiapäälläluusto ja hermosto.
Tässä tutkimuksessa, jotta ymmärrettäisiin selkeästi CT:n vaikutukset OP:iin ja AD:hen, luotiin verkostofarmakologinen lähestymistapa ennakoimaan mahdollisia vaikuttavia aineita ja analysoimaan niihin liittyviä reittejä. Se eroaa aiemmista TT-farmakologisista verkkotutkimuksista (Liu et al., 2017). "Yksi lääke – kaksi sairautta" -molekyyliverkosto toteutettiin ensimmäistä kertaa sen sijaan, että keskittyisi vain yhteen sairauteen. Toisaalta integroidulla verkkoanalyysillä löydettiin yhteensä 22 aktiivista CT-yhdistettä, joilla on kaksinkertainen vaikutus sekä OP:n että AD:n hoitoon. Toisaalta näiden kahden taudin kuviot tukivat niiden yhteyksien paljastamista. Luokiteltu analyysi osoitti, että näillä aktiivisilla yhdisteillä voi olla synergistisiä vaikutuksia moniin biologisiin toimintamoduuleihin, ja PhG:t, flavonoidit, terpeeni ja steroli osoittivat parempia tehoja. Tämän johdetun verkon toteutettavuuden ja sopivuuden tarkistamiseksi seeprakalaa käytettiin OP- ja AD-mallien rakentamiseen in vivo ja arvioitiin neljän yhdisteen tehokkuus. Ja oletettuja tavoitteiden validointia käytettiin niiden mahdollisten synergiaetujen paljastamiseksi. Nämä yhdistetyt tutkimukset in silico ja in vivo antoivat uuden lähtökohdan CT:n suojaavan vaikutuksen paljastamiselle kahdelle sairaudelle. Se voi tarjota uusia vihjeitä OP:n ja AD:n patogeneesin välisestä korrelaatiosta sekä auttaa kahden sairauden terapeuttisten strategioiden kehittämisessä tulevaisuudessa. Siitä huolimatta menetelmä tarvitsee edelleen parannusta ja täydellisyyttä, jotta voidaan täysin tutkia CT:n synergiset mekanismit OP:n ja AD:n hoidossa. Tässä tutkimuksessa vain tietyt yhdisteet valittiin validointia varten. Muut 18 aktiivista ainesosaa, joilla on taustalla olevat tavoitteet ja reitit, on edelleen tarkistettava kokein. Ja OP:n ja AD:n välisiä yhteisiä piirteitä on vielä tutkittava ja löydettävä, erityisesti hoidon näkökulmasta.
mistä ostaa cistanchea
Tutkimuksessamme BSS:llä, GE:llä, AA:lla ja QU:lla osoitettiin olevan suojaavia vaikutuksia OP:lle ja AD:lle seeprakaloissa. Ilahduttavampaa on, että nämä arvokkaat ainesosat on myös kokeellisesti validoitu muussa kirjallisuudessa, ja ne ovat osoittaneet farmakologisia aktiivisuuksia, jotka ovat yhdenmukaisia tämän artikkelin kanssa (Ayaz et al., 2017; Chauhan et al., 2018; King et al., 2015; Ramnath et al. , 2018; Thummuri et ai., 2018; Vargas-Restrepo ym., 2018; Wang ym., 2019; Yuan ym., 2018). Se osoitti edelleen tämän verkoston tehokkuuden ja rationaalisuuden ja osoitti jäljellä olevien 18 yhdisteen kaksinkertaiset vaikutukset. Mitä tulee oletettujen kohteiden validointiin, 9 tehokasta kohdetta, jotka koostuivat TP53:sta, JUN:sta, TNF:stä, IL1B:stä, MAPK14:stä, MAPK3:sta, FGFR1:stä, BMP2:sta ja TGFBR1:stä, seulottiin lopuksi OP:n ja AD:n yleisinä kohteina. TP53 on keskeinen kasvainsuppressori, ja sen aktivaatio voi indusoida hermosolujen apoptoosia (Xiao et al., 2019). TP 53, JUN ja SP1 ovat aktiivisia transkriptiotekijöitä primaarisessa OP:ssa (Xie et al., 2015). TNF ja IL1B ovat yleisiä tulehduksellisia sytokiinejä, joiden tehtävänä on edistää osteoklastogeneesiä (Geissler et al., 2018) ja luukadoa (Sang et al., 2017). Lisäksi ne molemmat ovat AD:n terapeuttisia kohteita estämällä hermoston tulehduksia hermosolujen suojaamiseksi (Liu et al., 2017). TGFB1:llä, TGFB2:lla, TGFBR1:llä ja TGFBR1:llä on monimutkaisia vaikutuksia hermosolujen tulehdukseen (Lippa et ai., 1998) ja osteolyysiin (Quinn et ai., 2001). Luun morfogeneettiset proteiinit (BMP:t) ovat yksi tekijöistä, jotka osallistuvat hermosolujen esisolujen glia-erilaistumiseen (Kwak et al., 2014). BMP2:n lisääntyneellä ilmentymisellä on osoitettu olevan olennainen rooli osteoblastien erilaistumisessa (Li et al., 2017). Näiden kokeellisesti validoitujen kohteiden lisäksi taulukossa S2 lueteltujen 81 yleistä kohdetta odotettiin myös olevan terapeuttisia kohteita, mutta niitä ei ole tutkittu tai niillä on ollut esitutkimuksia muissa tutkimuksissa.
On erityisen huomionarvoista, että nämä arvokkaat kohteet liittyvät kaikki MAPK- ja TGF-beeta-signalointireitteihin KEGG-rikastusanalyysin perusteella. MAPK-signalointireitti säätelee solujen lisääntymistä, erilaistumista, eloonjäämistä tai apoptoosia, tulehdusta ja synnynnäistä immuniteettia. On raportoitu, että vaarantunut MAPK-signalointireitti vaikutti neurodegeneraation, kuten AD:n, patologiaan (Kim ja Choi, 2015) sekä esti osteoblasteja suoraan (Xiao et al., 2019). Mitä tulee TGF-perheen jäseniin, niillä oli erilaisia rooleja luurankossa, mikä vaikutti suoraan luun vajaatoimintaan (Sun et al., 2016), kun taas hermosolujen TGF-beeta-signaloinnin aktivoituminen lisää neurodegeneratiivisia häiriöitä ja AD:n kaltaisia sairauksia (Tesseur et al. ., 2006). Siten MAPK- ja TGF-beeta-signalointireiteistä voidaan odottaa muodostuvan yhteisiä mekanismeja OP:n ja AD:n patogeneesin paljastamiseksi tai etenemisen hidastamiseksi. Kahden reitin lisäksi 22 aktiivista yhdistettä säätelevät yhteensä 66 reittiä, erityisesti reittejä, joilla on korkein p-arvo, kuten prolaktiinin signalointireitti, FoxO-signalointireitti ja Th17-solujen erilaistumisreitti, ovat myös huomion ja tutkimuksen arvoisia. avaimena OP:n ja AD:n välisen korrelaation paljastamiseen. Lopuksi yhteenvetona tehdyt löydöt voivat viitata näiden kahden immuunijärjestelmän ja endokriinisen sairauden väliseen yhteyteen.
5. Päätelmät
Tässä työssä ehdotimme verkkofarmakologista lähestymistapaa, jossa yhdistyvät PCA-analyysi, DL-seulonta, useiden kohteiden kerääminen ja ennustaminen, PPI-verkoston rakentaminen sekä GO- ja KEGG-polkuanalyysit CT:n tehokkuuden tutkimiseksi OP:n ja AD:n hoidossa. Tuloksemme viittasivat siihen, että CT:n 22 aktiivista ainesosaa saattavat pääasiassa säädellä signaalinsiirtoa, endokriinistä järjestelmää, immuunijärjestelmää, solujen kasvua ja kuolemaa ollakseen tärkeässä roolissa OP:n ja AD:n hoidossa. CT:n mekanismien ymmärtämiseksi paremmin tätä verkkoa kaivettiin syvälle ja analysoitiin yhdisteiden tyypistä riippuen. Lopulta sovelsimme seeprakalan OP- ja AD-malleja erikseen tunnistaaksemme 4 arvokasta yhdistettä ja niihin liittyviä kohteita, tarjoten toteuttamiskelpoisen menetelmän yhdistää genomi farmakodynamiikkaan ja löytää kaksivaikutteisia yhdisteitä.
