Nanomaitoproteiini-mucilage-kompleksit: karakterisointi ja syöpälääke, osa 2

Lisätietoja saat ottamalla yhteyttätina.xiang@wecistanche.com

Napsauta linkkiä oppiaksesi osan 1:https://www.xjcistanche.com/news/nano-milk-protein-mucilage-complexes-characte-55049142.html

3. Materiaalit ja menetelmät

3.1 Materiaalit

Plantago ovata (subgoal) kuori ja Ziziphus Spina-Christin (Nabeq) kypsymishedelmät ostettiin Gizasta, Egyptistä; maitoproteiinikonsentraatti (MP,81,3% proteiinia) ostettiin Fonterra-yhtiöltä (Auckland, Uusi-Seelanti). MPC: n kaseiini- ja heraproteiinit ovat suurelta osin alkuperäisessä ja samankaltaisessa, micellarissa, muodossaan kuin maidossa. Kaikki käytetyt kemikaalit olivat analyyttisiä.

3.2.Isabgol Husk Mucilagen (IHM) ja Nabeg Mucilagen (NabM) valmistus

Isabgolin kuoren limakalvo (IHM) ja Nabeq mucilage (NabM) valmistettiin El-Maksoud et al. [5] kuvaamalla menetelmällä. Lyhyesti sanottuna isabgolin kuoren suspensio valmistettiin liuottamalla 1,2 g 100 ml: aan tislattua vettä ja puhdistettiin asetoniliuoksella. Saatua geeliä säilytettiin jääkaapissa (4-5 °C), kunnes sitä käytettiin.

NabM: lle kypsytetyt Nabeq-hedelmät pestiin perusteellisesti vesijohtovedellä lian poistamiseksi. Tuoreet hedelmät erotettiin siemenistä ja sekoitettiin tislattuun veteen suhteessa 1:10 (w/v) pieniksi paloiksi leikkaamisen jälkeen. Seos sekoitettiin laboratoriosekoittimella (Toshiba Mixie, Japani) ja annettiin seistä 12 tuntia jääkaapissa.

Limainen uute sentrifugoitiin sitten nopeudella 2000 rpm 30 minuutin ajan ja suodatettiin musliinikankaan läpi. Tuloksena oleva viskoosi liukoinen lima saostui asetonilla. Saatua raakaa limaa säilytettiin jääkaapissa, kunnes sitä käytettiin.

Analyyttisiä tarkoituksia varten limakuivattiin ilmauunissa 40 °Cand -maassa käyttäen MM400-kuulamyllyä (Retsch, Saksa). Psyllium-kuoren muskilirehujauheen (PHMP) ja Nabeq-limajauheen (NabMP) kemiallinen koostumus on mitattu. Kosteus, proteiini, rasva, tuhka, raakakuitu ja hiilihydraattien kokonaispitoisuus olivat 8,49, 0,34,0,21,2,13,1,53 ja 87,44% PHMP:llä ja 9,18,4,72,2,05,2,69,1,70,ja 78,26% NabMP:llä. Saatua jauhetta säilytettiin viileässä lämpötilassa (4-5 °C), kunnes se analysoitiin tarkemmin.

Napsauta saadaksesi lisätietoja

3.3 Maitoproteiini-lihaskompleksien (MPMC) valmistus

Maitoproteiinikompleksit (MP), joissa oli IHM ja NabM, valmistettiin Morr et ai.: n mukaisesti joillakin muunnoksilla [44]. Maitoproteiinikonsentraatti konsentroidaan tislatussa vedessä (10 %). Tuloksena oleva maitoproteiinikolloidi sekoitettiin IHM:n ja NabM:n kanssa suhteessa 1:3 (o/o). Seoksen pH säädettiin arvoon 10 ja jätettiin seisomaan 10 min. Sen jälkeen pH laskettiin 3,5:een käyttäen 0,1 N HCl:ää ja jätettiin vielä 10 minuutiksi. Sitten pH säädettiin pH 4.6: een käyttäen 0.5 M NaOH: ta MPMCby-suodatuksen keräämiseksi suodatinpaperille: MP ja tuloksena oleva MPMC kuivattiin kylmäkuivaamalla -45 ° CC: ssa 24 tunnin ajan käyttäen Novalyphe-NL500-lyofilizeria, Savant Instruments, Holbrook, NY, USA.

3.4 Fysikaalis-kemialliset ja toiminnalliset ominaisuudet

3.4.1.pH mittaus

Saatujen tuotteiden pH 10-prosenttisessa liuoksessa mitattiin kalibroidulla pH-mittarilla (HANNA, HI 902 m, Saksa).

3.4.2 Irtotiheyden (BD), napautetun tiheyden (TD) ja Carrin indeksin määrittäminen

MPMC-jauhe kaadettiin 50 ml: n mittapulloon, joka oli enintään 25 ml, mikä vastaa käyttämätöntä tilavuutta, ja napautetaan sitten 5-10 kertaa, kunnes jauheen tilavuudessa ei enää havaittu muutosta, joka vastaa napautettua tilavuutta.

Irtotiheys, napautettu tiheys ja Carrin indeksi määritettiin soveltamalla seuraavia yhtälöitä [45]:

(1) BD = massa/ käyttämätön tilavuus

(2) TD = massa/napautettu tilavuus

(3) Carrin indeksi (%)= (TD-BD)/TD×100

3.4.3 Veden absorptioindeksi (WAI) ja vesiliukoisuusindeksi (WSD)

MP: n ja MPMC: n vesiliukoisuus- ja veden absorptioindeksejä tutkittiin Yagc: n ja Gogusin kuvaaman menetelmän mukaisesti joillakin muunnoksilla [46]. Näytteet(0,5 g) dispergoidaan 10 ml:aan tislattua vettä 25 °C:ssa sentrifugiputkessa. Seisottuaan 30 minuuttia, putken kääntyessä 5 minuutin välein, näytteitä sentrifugoitiin nopeudella 3500 rpm 15 minuutin ajan. Suodos siirrettiin alumiinilevylle ja kuivattiin 3 tuntia 105 °C:ssa. Jäljellä olevan geelin paino kirjattiin ja WSI ja WAI määritettiin seuraavasti:

(4) WAI(g/g)= Geelin painonnousu/näytteen kuivapaino

(5) WSI%= Kuivan kiintoaineen paino supernatantissa ×100/näytteen kuivapaino

3.4.4 Maitoproteiinin sulavuus

Proteiinin sulavuus määritettiin Abd El-Ghany et ai. [47]. Lyhyesti sanottuna MP- ja MPMC-näytteet dispergoidaan tislattuun veteen pitoisuutena 6,38 mg/ml, ja pH säädettiin arvoon 8,0. Yksi millilitra juuri valmistettua entsyymikantaliuosta (1,6 mg/ml trypsiiniä, 3,1 mg/ml kymotrypsiiniä ja 1,3 mg/ml ER-aminopeptidaasia1

(ERAP1)sekoitettiin proteiinisuspension kanssa 37 °C:ssa. PH kirjattiin 10 minuutin kuluttua, ja entsyymiaktiivisuus määritettiin käyttäen kaseiinia vertailukohtana. Seuraavaa yhtälöä käytettiin proteiinin sulavuuden laskemiseen [47]:

(6)% sulavuus = 210,46-18,10 (pH)

3.5.PHM:n ja NabM:n fenolifraktiot

Limanäytteiden fenoliyhdisteet HPLC-analyysillä suoritettiin Elsayed et al. [48] kuvaamalla protokollalla. Lyhyesti sanottuna mucilage-uute analysoitiin agilent 1260 -sarjan HPLC-järjestelmällä (Agilent Technologies Inc., Santa Clara, CA, USA). Erotus johdettiin C18-pylväällä (100 mm×4,6 mm i.d.,5 um). Liikkuva faasi sisälsi (A) vettä 0,2% H3PO4, (B)metanolia ja (C) asetonitriiliä virtausnopeudella 0,6 ml/min. Gradientti elute oli seuraavan kaavion mukainen: 0-11 min (96%A., 2% B);11-13 min (50% A,25%B);13-17min (40% A,30%B),17-20,5 min (50%B,50%C) ja 20,5-30 min (96% A,2% B). Detektioaallonpituus (UV-ilmaisin,284 nm) asetettiin arvoon 284 nm. Injektiokoko oli 20 μL ja kolonnin lämpötila pidettiin 30 °C:ssa. Yhdisteet tunnettiin vertaamalla niiden säilytysaikaa aitojen standardien aikaisiin. Kalibrointikäyriä käytettiin yhdisteiden määrien arvioimiseen.

3.6.MP: n ja MPMC: n fenoli- ja flavonoidipitoisuus yhteensä

Polyfenolipitoisuus määritettiin Folin-Ciocalteu-menetelmällä joillakin muunnoksilla [5]. Lyhyesti sanottuna 2,8 ml milli-Qwateria, joka sisälsi 10 mg MP:tä tai MPMC:tä, sekoitettiin 2 ml:aan 2-prosenttista natriumkarbonaattia ja 0,1 ml:aan 50-prosenttista Folin-Ciocalteau-reagenssia. 30 minuutin inkuboinnin jälkeen huoneenlämpötilassa reaktioseoksen absorbanssi mitattiin 750 nm: ssä deionisoitua vettä vastaan aihiona käyttäen spektrofotometriä (Hitachi, malli 100-20). Galliinihappoa(GA)käytettiin tavallisena fenoliyhdisteenä, ja rakennettiin seitsemän pisteen standardikäyrä (0-200 mg/l).. Tulokset ilmaistiin milligrammoina galliinihappoekvivalentteina grammaa proteiinia kohti (GAE/g).

Flavonoiditpitoisuus määritettiin alumiinikloridimenetelmällä, kuten Abedelmaksoud et ai. on aiemmin kuvannut, joillakin muunnoksilla [5]. Lyhyesti sanottuna 2,8 ml milli-Q vettä, joka sisälsi 10 mg MP:aa tai MPMC:tä, sekoitettiin 0,1 ml:aan 10 %:aan alumiinikloridiheksahydraattia ja 0,1 ml:aan 1 M kaliumasetaattia. Inkuboinnin jälkeen huoneenlämpötilassa 40 minuutin ajan reaktioseoksen absorbanssi mitattiin 415 nm: ssä deionisoitua vettä vastaan aihiona. Kvertsetiiniä käytettiin standardina käyttäen seitsemän pisteen standardikäyrää (0-50 mg/l). Flavonoidien kokonaispitoisuus ilmaistiin milligrammaisina kvertsetiiniekvivalentteina (QE/g).

3.7 MP: n ja MPMC: n antioksidanttiaktiivisuus

MP: n ja MPMC: n vapaiden radikaalien kokonaispoistokapasiteettia arvioitiin käyttämällä kolmea erilaista antioksidanttimääritystä: stabiili 2,2-difenyyli-1-pikrylhydratsyyli(DPPH), Azino-bis(3-etyylibentsotiatsoli-6-sulfonihappo (ABTS) ja Hydroksyyliradikaalit (HS) radikaalit, kuten El-Maksoud et ai. on aiemmin kuvannut [5].

3.8 MP:n ja MPMC:n aminohappoprofiili

Proteiininäytteet hydrolysoitiin happohydrolysoimalla käyttäen 6 N HCl: ää Peksa et ai. [49. Automaattinen aminohappoanalysaattori (AAA 400, INGOs Ltd.) käytettiin aminohappojen määrittämiseen.

3.9 Reologiset ominaisuudet

Näytteet valmistettiin Barnesin kuvaamalla tavalla [50] muutamin muutoksin. 2,5 %:n (w/w)liuoksen viskositeetti pH7:ssä määritettiin 25±1 °C:ssa käyttäen Brookfieldin viskosimetriä (DV-II+ Pro, Rheocalc Software, Saksa). Jännitys (σ) ja viskositeetti (n) piirrettiin leikkausnopeuden funktiona. Teholakimallin konsistenssi-indeksi(K) ja virtauksen käyttäytymisindeksi (n) laskettiin:

N: n arvo on 1 Newtonin nesteille ja vaihtelee välillä 0 - 1 nesteille, jotka ovat leikkausohenteisia, ja suurempi kuin 1 leikkausta sakeuttaville nesteille [51].

3.10.Differentiaalinen pyyhkäisykalorimetria (DSC)

MP: n ja MPMC: n lämpöominaisuudet mitattiin differentiaaliskannauskalorimetrillä (PerkinElmer, USA). Näytteet(4-6 mg)laitettiin alumiinilevyyn ja suljettiin. Jokainen pannu kuumennettiin sitten 350 °C:seen kuivan typpikaasun virtauksella 20 ml:n min-I:n lämpötilassa 10 °C:n min-1:n lämmitysnopeudella. DSC-termogrammin endotermisestä huipusta arvioitiin denaturoinnin alkamislämpötila, suurin siirtymälämpötila ja hajoamispiste [52]. Siirtymäen entalpia-arvo(AH) DSC-käyrän endotermisen piikin alla olevasta alueesta määritettiin ja vertailukohtana käytettiin tyhjää alumiinipannua.

3.11. Fourier-Transform-infrapunaspektroskopia (FTIR)

Infrapunaspektrit välillä 600-3500 cm-I mitattiin 25 °: ssa FTIR-spektrofotometrillä (QFA Flex, USA) heikennetyllä kokonaisheijastusmenetelmällä käyttäen resoluutiota 4 cm-I ja hankkimalla 10 skannausta sekunnissa.

3.12 Lähetyselektronimikroskopia

MP: n ja MPMC: n mikrorakenne visualisoitiin käyttämällä lähetyselektronimikroskooppia (JEOL, JEM 1400 Flash, Japani) 80 kV: n jännitteellä. Negatiivisen värjäysmenetelmän kryovaihetta käytettiin [53].

3.13.Mpmc:tä ja MPMC:tä koskevat biologiset tutkimukset

3.13.1.In vitro syöpälääke

Kaikki tässä kokeessa käytetyt solulinjat saatiin American Type Culture Collectionista (ATCC, Manassas, VA, USA). Tässä määrityksessä käytettiin kahta ihmisen syöpäsolulinjaa: rinta-adenokarsinooma (MCF-7, ATCCHTB-22TM) ja hepatosellulaarinen karsinooma (HepG2, ATCC4 HB-8065TM). Vertailua varten testattiin myös ei-syöpäoireisen ihon fibroblastin BJ-1(ATCC(8) CRL-2522TM) ja epiteelin rintojen MCF-12F(ATCC CRL-10782TM) solulinjoja. Solulinjoja kasvatettiin Dulbeccon modifioidussa Eaglen väliaineessa (DMEM/korkea glukoosi, HyCloneTM, USA) täydennettynä 10% sikiön naudan seerumilla (FBS, Gibco, Brasilia), 100 U/ml penisilliinillä, 100 ug/ml streptomysiinillä ja 25 ng/ml amfoterisiini B:llä (Sigma, Oakville, ON, Kanada) ja viljeltiin 37 °C:ssa 5%: lla CO: lla kostutetussa inkubaattorissa. Viljelyväline korvattiin joka toinen päivä tuoreella välineellä. Kun solut saavuttivat 70 %:n konfluenssin, ne irrotettiin käyttäen 0,25 %:n Trypsin-EDTA(1X) Gibcoa Kanadassa ja siirrettiin uuteen viljelypulloon. Toisen vaiheen jälkeen solut trypsinisoitiin ja pinnoitettiin 96-kuoppaiseen levyyn pitoisuutena 2×10* solua/kaivo. 24 tunnin inkuboinnin jälkeen väliaine dekantoitiin ja solut pestiin kahdesti PBS:llä ja käsiteltiin sitten 200 μl:lla viljelynestettä, joka sisälsi erilaisia pitoisuuksia proteiininäytteitä(1, 5,10 ja 20ug/ml). Doksorubisiini HCl(4 ug/ml)käytettiin positiivisena kontrollina, kun taas paisumattomalla väliaineella käsiteltyjä soluja pidettiin negatiivisena kontrollina. Levyjä inkuboitiin 37 °CC:ssa 24 tunnin ajan jasyövän vastainennäytteiden aktiivisuus määritettiin käyttämällä neutraalia punaista ottomääritystä Repetto et al. [54]. Lyhyesti sanottuna inkubointiajan jälkeen väliaine korvattiin 150 uL neutraalilla punaisella väriaineella (100 mg/ml), joka liuotettiin seerumittomaan väliaineeseen, ja soluja inkuboitiin 37 °C:ssa 3 tunnin ajan. Seuraavaksi solut huuhdeltiin PBS: llä ja lisättiin 150 μl eluutioväliainetta (EtOH/AcCOOH,50∶1) ja sen jälkeen hellä ravistelu 10 minuutin ajan täydellisen liukenemisen varmistamiseksi. Absorbanssi mitattiin 540 nm:ssä mikrotitterilevynlukijalla (BioTek,96 Well Plates, ELX808, USA).

jossa Ac on kontrollin absorbanssi ja As on näytteen absorbanssi. Sytotoksisuus(%):na esitetty solukuoleman prosentuaalinen osuus ja pitoisuus, joka tappaa 50 % soluista (IC50), laskettiin kullekin näytteelle.

3.13.2.P53-, Bax-, Caspaase-3- ja Bcl-2-proteiinitasojen määrittäminen

Keskeisten apoptoosiproteiinimarkkereiden solutasot määritettiin 24 tunnin kuluttua MP: n ja MPMC: n ICso-hoidosta. Lyhyesti sanottuna Hep G-2-, MCF-7-, Bj-1- ja MCF-12F-soluja kylvettiin 5× 10* soluun/hyvin 6-kuoppalevyihin. Kun näytteet oli inkuboitu 24 tunnin ajan 37 °C:ssa, solut kerättiin ja hajotettiin ja sentrifugoitiin sentrifugoitiin 10 000 rpm:n lämpötilassa 20 minuutin ajan 4 °C:ssa. Proteiinipitoisuus kvantifioitiin supernatantissa Bradfordin määrityksellä [55]. Caspase-3-aktiivisuus analysoitiin kolorimetrisellä määrityssarjalla (Abcam, ab39401) valmistajan ohjeiden mukaisesti [56]. Lyhyesti sanottuna 10 mg proteiinia lisättiin 50 ul: aan Caspaasisubstraattia ja lopullinen tilavuus säädettiin 200 μl: iin käyttäen reaktiopuskuria 37 ° C: ssa ja seosta inkuboitiin 1 tunnin ajan pimeässä, minkä jälkeen mitattiin Caspase-3-pitoisuus 405 nm: ssä.

Pro-apoptoottisen markkerin p53, siihen liittyvän X(Bax)-markkerin ja anti-apoptoottisen markkerin B-solulymfooma-2:n taso määritettiin solulysaatissa käyttäen entsyymisidonnaista immunosorbenttimääritystä Simple Step ELISA valmistajan ohjeiden mukaisesti (ab207225, ab119506 ja ab199080; Abcam, USA), vastaavasti [57,58].

3.13.3.Oksidatiivisen stressisuojauksen aiheuttamat DNA-vauriot

DNA-vauriomääritys tehtiin, kuten Leba et ai. [59] on aiemmin kuvannut, pienellä muutoksella. Lyhyesti sanottuna 3 μl ribonukleaasin estäjäplasmidia RNH1(NM_203387)Ihmisen merkitsemä ORF-klooni 10 μg/μl sekoitettiin Fentonin reagenssin kanssa (5 mM H2O2:ta ja 0,3 mM FeSO4:ää ja 0,6 mM EDTA:ta), ja lopullinen tilavuus säädettiin 25 μl:aan käyttäen fosfaattipuskuria (H2POA, 8,3 mM, pH 7,4). Sitten liuosta inkuboitiin 20 minuutin ajan 37 °C:ssa. MP: n ja MPMC: n antioksidanttisuojakyvyn arvioimiseksi Fentonin reagenssin aiheuttamilta DNA-vaurioilta lisättiin ennen inkubointia 5 μg / ml MP / NabM, MP / IHM ja MP. RNH1-plasmidi-DNA:ta(3 μL, 10 μg/μl) käytettiin DNA:n suojauskontrollina.

3.13.4.PCR-pohjainen genominen DNA-vauriomääritys

Homo sapiens metyleenitetrahydrofolaattideduktaasi (MTHFR) -geeni vahvistettiin käyttämällä PCR:ää veren genomisesta verestä, joka oli aiemmin uutettu terveistä verinäytteistä, käyttäen tavallista DNA-uuttopakkausta [60]. DNA: ta inkuboitiin 10 minuutin ajan Fentonin reagenssilla tai ilman sitä täydennettynä MP: llä tai MPMC: llä. 198-bp:n fragmentti vahvistettiin käyttämällä eteenpäin 5'-TGAAGGAGAAGGTGTCTGCGGGA-3' ja käänteisiä 5'-AGGACGGTGCGGTGAGAGTGTG-3'-alukkeita. Käyttäen 50ng käsiteltyä DNA: ta PCR-monistus suoritettiin seuraavan lämpösyklisen jälkeen (94 ° C 5 minuutin ajan, jota seurasi 25 hammastaatiota, 30 sekuntia 94 ° C: ssa; hehkutus, 30s 60 ° C: ssa; ja pidennys, 30 s 72 ° C: ssa) 25 syklin ajan ja 1 viimeinen pidennysjakso 72 ° C: ssa 5 minuutin ajan. PCR-reaktionäytteitä käytettiin agaroosigeelielektroforeesiin (2%).

3.13.5 Geeniekspression profilointi RT-qPCR:n avulla

Analyysit tärkeimpien pro- ja anti-apoptoottisten markkerigeenien geeniekspressiosta suoritettiin HepG-2-, MCF-7-, Bj-1- ja MCF-12F-soluilla, jotka altistettiin IC50:n saamille tiedoille (taulukko 3) 72 tunnin ajan. Lyhyesti sanottuna kokonais-RNA uutettiin käyttämällä Total RNA -puhdistussarjaa (QIAGEN., Thorold, ON, Kanada) valmistajan ohjeiden mukaisesti. cDNA-koodi

synteesi toteutettiin aboul-sound et ai. [61] kuvaamalla tavalla. Vahvistusohjelmat ja PCR-amplikonispesifisyys suoritettiin ja arvioitiin käyttämällä Rotor-Gene O 5-Plex HRM -lämpösykliä (Qiagen, Saksa) Quanti-Tect SYBR-Green PCR Kitillä (Qiagen, Saksa), kuten aiemmin dokumentoitiin vakioprotokollien mukaisesti [61]. Käytettiin seuraavia alukkeita: Hs_P53_1 SG QuantiTect Primer -määritys (QT00060235); Hs_CASP3_1_SG Quan-tiTect Primer -määritys (QT00023947); B-solulymfooma 2 Hs_BCL2_1_SG QuantiTect Primer -määritys (QT00025011); Bcl-2:n kaltainen proteiini Hs_BAX_1_SG QuantiTect Primer -määritys (QT00031192); ja 18S rDNA house-keeping (HK) -geeni Hs_RRN18S_1_SGQuantiTect Primer Assay (QT00199367). PCR-lämpösykliohjelma ja geeniekspressioanalyysi taittumamuutoksen määrittämiseksi suhteessa 18S-geeniin suoritettiin olennaisesti aiemmin raportoidulla tavalla [61].

3.14.Tilastollinen analyysi

Saadut tulokset ilmaistiin keskimääräisenä ± keskihajonnana. Tilastot saavutettiin SPSSsoftware 11.5: llä (SPSS, Inc.Chicago, IL, USA). Duncanin monialuetestiä käytettiin määrittämään merkittävät erot kaikkien näytteiden välillä, ja eroja pidettiin merkittävinä p<>

4. Päätelmät

Yhteenvetona voidaan todeta, että tämä tutkimus paljasti, että maitoproteiinin sekoittaminenpolysakkariditliuoksen eriyttämisen kautta pH on sopiva tekniikka kompleksointiin. Tuloksena olevilla maitoproteiinin mucilage-komplekseilla (MPMC) on huomattavasti korkeampi fenoli- jaflavonoiditsisältö kuin maitoproteiini (MP). DSC-tulokset osoittivat, että MP: n monimutkaisuus polysakkarideilla lisäsi merkittävästi lämpöstabiilisuutta denaturaatiolämpötilan muuttuessa. FTIR-analyysit suoritettiin funktionaalisten ryhmien tunnistamiseksi, ja valmistettujen kompleksien virtauskäyttäytymistä tutkittiin. Maitoproteiinin WSI: tä ja WAI: ta lisättiin kompleksoimalla NabM: n tai IHM: n kanssa. TEM: ää käytettiin simuloimaan valmistettujen kompleksien mikrorakennetta. Toisaalta tuloksena olevien maitoproteiinikompleksien, joilla on isabgolikuoren limakalvo (HM) tai Nabeq-mucilage (NabM), odotetaan ylittävän alkuperäiset maitoproteiinit antioksidantti- ja syöpälääkkeessä. Yhteenvetona voidaan todeta, että MPMC ilmensi ainutlaatuisia syöpälääkkeitä rintasyövän ja maksasyövän solulinjojen (MCF7 ja HEPG2) mallin vastaisia syöpälääkkeitä vastaan, kuten neutraali punainen ottomääritys osoittaa.

MPMC paransi molempiaantioksidanttija proliferaation vastainen toiminta. Kaspaasit ovat keskeisiä säätelyproteiineja, jotka liittyvät apoptoosin induktioon. Kaspaasi-3-proteiini- ja mRNA-transkriptioiden säätely (kuva 9A, B) kontrolloi muita proteiineja apoptoosin reitillä, jolle on tunnusomaista mitokondrioiden kalvon romahtaminen Baxin indusoimalla sytokromi c:n vapautumisella ja kaspaasi-9: n aktivoituminenjohdella kaspaasin 3 myöhempään sitoutumiseen. Casp3: n, p53: n ja Baxin säätely yhdessä Bcl-2-ilmentymisen vähenemisen kanssa paljasti, että MPMCinduced apoptosis -induktio, jossa p53: n säätely stimuloi Baxin ilmentymistä, mikä puolestaan indusoi sytokromi c: n vapautumista, jota seuraa kaspaasi-9: n ja-3: n aktivaatio. Lisäksi Bcl-2:n tiedetään estävän sytokromi c:n vapautumista. Tutkimuksessamme MPMC:n aiheuttaman Bcl-2-alasäätelyn osoitettiin helpottavan Baxin aiheuttamaa baxin aiheuttamaa sytokromi c:n vapautumista ja sitä seuraavaa apoptoosia.

Proteiini-polysakkaridikompleksien syöpälääkevaikutus antaa lisävalistusta näiden kompleksien sovellettavuudesta käytettäväksi kohtuuhintaisten ja tehokkaiden syöpähoitojen kehittämisessä, joilla on minimaaliset sivuvaikutukset.