Lantana Camara etanolipitoisilla lehtiuutteilla on ikääntymistä estäviä ominaisuuksia Drosophila Melanogasterissa: selviytymisprosenttia ja elinikää koskevat tutkimukset

Ota yhteyttäoscar.xiao@wecistanche.comLisätietoja

Abstrakti

Tässä artikkelissa pyrimme tutkimaan Lantana camaran etanolisen lehtiuutteen ikääntymistä estävää vaikutusta Drosophila melanogasterissa: selviytymistä ja pitkäikäisyyttä (elinikä). L.camaran lehdet kerättiin ja pestiin perusteellisesti hiekkahiukkasista, ilmakuivattiin, jauhettiin. ja uutettiin maserointimenetelmällä käyttäen etanolia liuottimena. Suoritettiin fytokemiallinen seulonta.168-tunti LCso määritettiin altistamalla hedelmäkärpäsiä pitoisuuksille, jotka vaihtelivat välillä 5-5000 mg/10 g ruokavaliota 7-päivän ajan. Kahdenkymmenenkahdeksan päivän eloonjäämis- ja pitkäikäisyystutkimukset suoritettiin antamalla L.camara etanolipitoista lehtiuutetta 5, 10 ja 20 mg/10 g ruokavaliossa 1-3 päivän ikäisille hedelmäkärpäsille. Kukin konsentraatio toistettiin neljä kertaa 50 hedelmäkärpäsellä kukin. Myös nuorten hedelmäkärpästen ilmaantuminen munista hedelmäkärpäsen munista, kun annettiin L. camara -lehtiuutteita. Uuton kokonaissaannon määritettiin olevan 18 prosenttia. Fytokemiallinen analyysi paljasti alkaloidien, flavonoidien, fenolin, steroidien, sydämen glykosidien ja hiilihydraattien läsnäolon.{18}}L. camaran tunnin LCso määritettiin myös 1135 mg/10 g ruokavaliota. L.camara pitkittynyt merkittävästi (P<0.05)survival rate="" and="" extended=""><0.05)d.melanogaster life="" span="" compared="" with="" control.l.camara="" significantly="" increased=""><().05) emergence="" rate="" of="" young="" fruit="" flies="" from="" eggs="" laid="" by="" fruit="" flies="" administered="" l.="" camara="" ethanolic="" leaves="" extracts.="" from="" the="" experimental="" results,it="" can="" be="" concluded="" that="" the="" ethanol="" extract="" of="" l.camara="" leaves="" extended="" the="" life="" span="" of="" d.melanogaster="" at="" these="" concentrations.="" due="" to="" similarities="" of="" conserved="" genes="" between="" humans="" and="" fruit="" flies,="" the="" use="" of="" l.camara="" ethanolic="" leaves="" extract="" at="" these="" concentrations="" is="" safe="" and="" may="" be="" recommended="" as="" herbal="" medicine="" in="">

Avainsanat:eloonjäämisprosentti,elinikä,168-tunti-LCso,anti-aging,L.camara

Johdanto

Ikääntyminen on luonnollinen prosessi kaikessa elossa, mutta sen nopeuteen vaikuttavat vaaralliset ympäristötekijät, vaarallisten aineiden ja sairauksien imeytyminen ja assimilaatio [1]. Iho on kudos, johon ikääntyminen vaikuttaa eniten ihmisillä; ihon ryppyjä näkyy luonnollisessa ikääntymisessä[1]. Vapaat radikaalit ovat yksi tekijä työkaluja ja sen edullinen hinta ja ylläpito laboratoriossa [3].D. melanogaster on ollut hyödyllinen mallina ikääntymisen tutkimuksessa [1,2]. Elinikätutkimus on tärkeä mitta drosophilan ikääntymisnopeudelle nopean sukupolven ja postmitoottisten solujen ansiosta, jotka ovat tehneet tästä lajista hyvän mallin ikääntymisen tutkimus [4].

Napsauta tätä saadaksesi lisätietoja

Lantana Camara tunnetaan myös nimellä "Espanjan lippu tai Länsi-Intian Lantana"; ja tunnetaan joskus nimellä "Red Sage".L. Camara on "koristeruoho", jolla on aromaattiset lehdet, ruskeat, siniset, punaiset, keltaiset ja kirkkaan punaiset kukat sekä tummansiniset ja mustat hedelmät (drupes)[5]. L. Camara erityisesti lehtiä on käytetty kasvainten vastaisena, antibakteerisena, verenpainetta alentavana aineena, tonicina ja yskänlääkkeenä, kun taas juuret tunnetaan reuman, ihottuman ja malarian hoidossa [5-7]. Infuusiomenetelmä lehtien ja muiden osien uuttamiseksi tunnetaan anti-inflammatorisista ominaisuuksistaan, ja sitä lisätään kylpyyn reumaattisena aineena [6]. L. camaran lehdistä valmistettua keittoa käytetään enimmäkseen yrttilääkkeissä haavojen parantamiseen, kuumeen hoitoon, yskän hoitoon, influenssan hoitoon, vatsakipuihin, malariaan jne. [8].cistanche-salsan edutSe on myös kirjattu, että sitä voidaan käyttää syöpien, vesirokon, tuhkarokkoreuman ja haavan hoitoon [9]L. camaralla on myös seuraavat toiminnot, kuten antioksidantti, sieni-, diabeteksen-, kipu- ja tulehdusta ehkäisevä vaikutus [8].

L:n ikääntymistä estävästä toiminnasta on vain vähän tai ei ollenkaan tietoa.cistanche peniksen kasvuCamara. Tämän työn tavoitteena on tuottaa tieteellistä tietoa tämän kasvin ikääntymistä ehkäisevistä vaikutuksista D. melanogaster -mallissa. Tutkimme L. camaran lehtien etanoliuutteen vaikutusta hedelmäkärpästen eloonjäämisasteeseen ja elinikään.

Materiaalit ja menetelmät Kasvien keräys ja uuttaminen

L. Camara -lehdet kerättiin Josin yliopiston vanhemman henkilöstön tiloista elokuussa 2019 ja huuhdeltiin hiekan ja muiden hiukkasten poistamiseksi juoksevan vesijohtoveden alla. Lehdet ilmakuivattiin huoneenlämmössä 7 vuorokautta, ja sitten ne muutettiin jauheeksi huhmareella ja survimella. Noin 110 g L. Camaran jauhettuja lehtiä uutettiin etanolissa 72 tunnin ajan maserointimenetelmällä ja väkevöitiin edelleen kuiviin käyttämällä vesihautetta (50 astetta), kuten Alexander et al. [10] ovat kuvanneet. Kokonaissadon prosenttiosuus oli lasketaan alla olevalla kaavalla [11].

missä Wo=alkuperäisen kuivatun näytteen paino, Wi=pelkän säiliön paino ja Wz=uutteen ja säiliön paino.

Cistanche voi estää ikääntymistä

Perhokanta D. melanogaster Harwich-kantoja Afrikan huippuyksiköstä kasvatettiin ja pidettiin yksinkertaisella ruokavaliolla, joka valmistettiin käyttämällä 100 g maissijauhoa, 20 g leivinhiivaa, 12 g agar-agaria, 1 g metyyliparabeenia 5 ml:ssa etanolia ja 1 700 ml vettä. Perholaboratorion lämpötila pidettiin vakiona 25 asteessa.

168-L. Camara Etanolilehtiuutteen akuutti myrkyllisyys tuntia

L. camaran akuutin toksisuuden määritys suoritettiin Alexander et ai. [10]. 1-3 päivän ikäiset hedelmäkärpäset nukutettiin, laskettiin ja altistettiin 5, 10, 20, 50, 100, 250 500 ja 5 000 mg/10 g ruokavaliolle kahdessa rinnakkaiskappaleessa, kussakin rinnakkaiskappaleessa oli 30 aikuista kärpästä. Hedelmäkärpästen annettiin tottua 24 tuntia. Kuolleisuus pisteytettiin 24 tunnin välein 7 peräkkäisenä päivänä.

28-päivän selviytymis- ja elinikätutkimukset

Eloonjäämis- ja pitkäikäisyystutkimukset suoritettiin noudattaen Abolajin et ai. [12].cistanche tubulosa annostus reddit1-3 päivän ikäiset hedelmäkärpäset nukutettiin miedolla jääpalalla, laskettiin ja altistettiin 5, 10 ja 20 mg/10 g ruokavaliolle neljänä rinnakkaisena 50 kärpäsen kanssa. Käsiteltävät hedelmäkärpäset siirrettiin juuri valmistettuun pitoisuuteen (ruokavalioon sekoitettuna uutteen kanssa) 3-päivän välein. Kuolleisuus pisteytettiin 24 tunnin välein 28 päivän ajan, kuten eloonjäämisaste ja elinikä, kuten pitkäikäisyystutkimuksessa.

Syntymisprosentti

Täysikasvuisille hedelmäkärpäsille annettiin 5, 10 ja 20 mg/10 g L. camara-ruokavaliota kolmena kappaleena kunkin 50 kärpäsen pullon kanssa 7 päivän ajan. Koiras ja naaras hedelmäkärpäsiä, kumpaakin viisi, lajiteltiin parittelemaan ja munimaan juuri valmistetulla ruokavaliolla ilman uutetta (L.camera-lehdet) 24 tunnin ajan. 24 tunnin kuluttua aikuiset kärpäset (vanhemmat) siirrettiin pois ja tapettiin, kun taas injektiopulloja (jotka sisälsivät vastamunittuja munia) pidettiin vakiolämpötilassa 25 asteessa ja tarkkailtiin nuorten kärpästen (jälkeläisten) ilmaantumista [10].

Fytokemiallinen seulonta L. Camara Etanolilehtiuutteet. Kvalitatiivinen fytokemiallinen seulonta suoritettiin käyttämällä standardimenettelyä, kuten Software [13] on kuvannut. L. camaran etanolipitoisesta lehtiuutteesta seulottiin alkaloidien, fenolihappojen, tanniinien, flavonoidien, saponiinien, hiilihydraattien, sydämen glykosidien, terpenoidien, antrokinonin ja steroidien esiintyminen.

Tilastollinen analyysi

Tiedot ilmaistiin ja esitettiin muodossa Mean ± SEM (keskiarvon standardivirhe), yksisuuntainen varianssianalyysi suoritettiin ilmaantuvuuden suhteen, mitä seurasi Turkin posthoc-testi. Eloonjäämiskäyrät ja LCso analysoitiin käyttämällä log-ranka (Mentel-Cox) ja epälineaarista regressiota; Dose-response-X on vastaavasti log (annos) (Graphpad Prism tilastoohjelmiston versio 7.04). Tuloksia pidettiin tilastollisesti merkittävinä P<>

Tulokset

L. Camara etanolipitoisen lehtiuutteen kokonaissaanto ja fytokemikaalit

L. camaraleaves -materiaalien alkuperäinen paino oli 110, kun taas uutteen paino uuttoliuottimen (etanolin) poistamisen jälkeen oli 20 g. Prosenttisannon laskettiin olevan 18 % w/w. L.camaran etanolipitoisen lehtiuutteen fytokemiallinen seulonta on esitetty taulukossa 1.

168-tuntia L. camaran etanolilehtiuutteen LCso D. melanogasterissa

Tulos paljasti, että L.camara ei ole tappava 1000 mg/10g asti, mutta välillä 100-500 mg/g, kuolleisuudesta tuli merkittävä (P<0.05) compared="" with="" the="" negative="" control.="" the="" mortality="" rate="" 28-day="" survival="" rate="" of="" d.="" melanogaster="" administered="" l.="" camara="" ethanolic="">

The survival rate of fruit flies administered L. Camara ethanolic leaf extract ranged from 50 to 59%. The highest survival rate was recorded in 10 mg/10 g diet while the lowest survival rate was recorded in the negative control.L. camara increased non-significantly (P>0.05) hedelmäkärpästen eloonjäämisprosentti annoksilla 5,10 ja 20 mg/10 g verrattuna negatiiviseen kontrolliin, kuten kuvassa 2 on esitetty. Tämä tulos viittaa siihen, että L. Camara etanolipitoisilla lehtiuutteilla voi olla suojaavia vaikutuksia D. melanogasterissa.

Hedelmäkärpästen pitkäikäisyys (elinikä) Annettujen L. Camara etanolisten lehtiuutteiden

Hedelmäkärpästen elinikä, jolle annettiin L. Camara etanolisia lehtiuutteita, ikääntyi merkittävästi (P<0.05) the="" negatively="" controlled="" flies.l.="" camara="" ethanolic="" leaf="" extracts-treated="" flies="" lived="" up="" to="" 50days="" with33.5,33.6,and44.5%percentage="" increase="" at="" 5,10,and="" 20="" mg/10="" g="" diet="" respectively="" whereas="" the="" negatively="" controlled="" flies="" lived="" up="" to="" 39="" days="" as="" shown="" in="" fig.3.this="" result="" implies="" that="" l.="" camara="" ethanolic="" leaf="" extracts="" may="" have="" some="" anti-aging="" properties="" or="" activities="" in="" d.="">

Nuorten kärpästen ilmaantuvuus munista

of D. melanogaster Annettu L. camara etanolilehtiuutteita Nuorten hedelmäkärpästen ilmaantuvuus aikuisten hedelmäkärpästen munista, joille annettiin L. camara etanolisia lehtiuutteita, vaihteli 91-100 prosentissa. Korkein itämisprosentti kirjattiin 20 mg/10 g ruokavaliossa, kun taas alhaisin itämisprosentti kirjattiin negatiivisessa kontrollissa.cistanche แอ ม เว ย์The extracts,at 5,10,and 20mg/10 g diet increased emergence rate non-significantly (P>0.05) verrattuna

Keskustelu

Fenoliyhdisteet ovat sekundaarisia metaboliitteja, joita syntyy Penrose-fosfaatin fenyylipropanoidimetaboliasta. Niitä tuotetaan myös kasvien shikimihapossa [14]. Fenoliyhdisteet (flavonoidit, fenolihappo, tanniinit, sydämen glykosidit, steroidit, saponiinit ja alkaloidit) ovat osoittaneet ikääntymistä estäviä, anti-inflammatorisia, antiproliferatiivisia ominaisuuksia, antioksidanttisia a-glykosidaasia ja a-amylaasia estäviä ominaisuuksia [{{6 }}]. Sydänglykosidin on raportoitu estävän yli-ilmentyneiden eturauhassyöpäsolujen neljää geeniä, mukaan lukien apoptoosin estäjä surviviinin ja transkriptiotekijöiden estäjät [17]. Fenoliyhdisteet tunnetaan suuresti niiden parantavasta ja ehkäisevästä mahdollisuudesta joissakin sairauksissa; Syöpä, diabetes, sydän- ja verisuonisairaudet, liikalihavuus, bakteeri- ja sieni-infektiot [14-18].kuinka paljon cistanchea ottaaL. Camaran etanolipitoisen lehtiuutteen laadullinen fytokemiallinen seulonta paljasti alkaloidien, fenolihapon, flavonoidien, sydämen glykosidin, hiilihydraattien ja steroidien läsnäolon, jotka ovat yhtäpitäviä [19] kanssa. Nämä yhdisteet voivat johtaa Drosophilan ikääntymistä estävään ilmiöön joko yksittäin tai synergiassa.

D. melanogaster as a model is mostly appreciable in drug screening and toxicity studies due to the conserved genes and biochemical pathways between the species and humans. European Centre for the Validation of Alternative Methods (ECVAM) has approved this species as an alternative model having met the standard for validation of the alternative model known as 3Rs: Reduction, Refinement, and Replacement of laboratory animal [20]. Our 168-hour also revealed that this plant leaves extract is safe for use since its LCso is 1135 mg/10 g diet in D. melanogaster which agrees with Pour and Sasidharan [21], who reported a high value for LCso of L. Camara in the Artemia salina model and no obvious acute toxicity in adult mice. It has been recorded that plants with a high value of LCso are less or non-toxic while plants with a low value of LCso are considered to be very toxic and shorten or reduce life expectancy [22]. The survival rate result further supported the claim that L. Camara ethanolic leaves extract is safe to use in folk medicine as it increased through the non-significantly (P>0.05) uutteita saaneiden hedelmäkärpästen eloonjäämisprosentti. Tämä tulos on samaa mieltä Pourin ja Sasidharanin [21] kanssa, jotka raportoivat L. Camara -lehtiuutteen erittäin alhaisesta in vivo toksisuudesta Artemia salina -mallissa.

L. Camaran vaikutusta ikääntymiseen tutkittiin käyttämällä pitkäikäisyysmääritystä. Hedelmäkärpästen ryhmä, jolle annettiin L. Camara etanolipitoista lehtiuutetta, eli merkittävästi pidempään (P < 0,05)="" kuin="" negatiivisesti="" kontrolloidut="" kärpäset.="" tämä="" tarkoittaa,="" että="" l.="" camara="" etanolipitoinen="" lehtiuute="" ei="" ole="" vain="" turvallinen="" käytettäväksi="" kansanlääketieteessä,="" vaan="" se="" pidentää="" eloonjäämistä="" ja="" pidentää="" elinikää="" toimimalla="" ikääntymistä="" estävällä="">

The emergence rate revealed that L. Camara ethanolic leaf extracts had no toxic effect on the emergence rate at the concentration tested in D.melanogaster as it increased the emergence rate of young flies with no significance(P>0,05) negatiiviseen kontrolliin verrattuna.

Tämä artikkeli on poimittu julkaisusta doi: 10.1093/toxres/tfaa098 Advance Access Julkaisupäivämäärä: 12. tammikuuta 2021 Paperi