Perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumus degeneratiivisten luusairauksien hoitoon ja sen valmistusmenetelmä ja sovellukset
Nov 12, 2026
(57) Tiivistelmä
Esillä oleva keksintö esittää perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumuksen rappeuttavien luusairauksien hoitoon yhdessä sen valmistusmenetelmän ja sovellusten kanssa. Koostumus valmistetaan seuraavista lääkeraaka-aineista paino-osissa:
Valmistettu rehmanniajuuri, 30–50 osaa; hirvensarvigelatiini, 15-30 osaa; yrtti, 20–80 osaa; morinda-juuri, 15–50 osaa; kilpikonnankuorigelatiini, 15-50 osaa; goji-marjat, 30-80 osaa; curculigo-juurakko, 10–50 osaa; eucommia-kuori, 15–50 osaa; 20–80 osaa; kiinalainen jamssijuurakko, 30–50 osaa; drynaria-juurakko, 15–50 osaa; Huai achyranthes -juuri, 10-50 osaa; taxillus-yrtti, 20–50 osaa; paperimulperihedelmät, 15-30 osaa; klematisjuuri ja juurakko, 15–50 osaa; ja acanthopanax-juuren kuori, 15–50 osaa.
Keksintö säätelee systemaattisesti luun aineenvaihduntaa, mahdollistaa osteoporoosin ja osteofytosin kaksoisehkäisyn ja -hoidon, puuttuu sekä taustalla oleviin syihin että ilmenemismuotoihin ja tarjoaa korkean turvallisuuden pitkäaikaisen käytön aikana.
Väitteet
1. Koostumus
Perinteinen kiinalainen lääkeainekoostumus, tunnettu siitä, että se on valmistettu paino-osissa seuraavista lääkeraaka-aineista:
Valmistettu rehmanniajuuri, 30–50 osaa; hirvensarvigelatiini, 15-30 osaa; yrtti, 20–80 osaa; morinda-juuri, 15–50 osaa; kilpikonnankuorigelatiini, 15-50 osaa; goji-marjat, 30-80 osaa; curculigo-juurakko, 10–50 osaa; eucommia-kuori, 15–50 osaa; 20–80 osaa; kiinalainen jamssijuurakko, 30–50 osaa; drynaria-juurakko, 15–50 osaa; Huai achyranthes -juuri, 10-50 osaa; taxillus-yrtti, 20–50 osaa; paperimulperihedelmät, 15-30 osaa; klematisjuuri ja juurakko, 15–50 osaa; ja acanthopanax-juuren kuori, 15–50 osaa.
2. Suositellut ainesosien osuudet
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumus, tunnettu siitä, että lääkeraaka-aineita on läsnä seuraavina paino-osina:
Valmistettu rehmanniajuuri, 35–45 osaa; hirvensarvigelatiini, 20-25 osaa; yrtti, 40–60 osaa; morinda-juuri, 25–35 osaa; kilpikonnankuorigelatiini, 25–35 osaa; goji-marjat, 45–65 osaa; curculigo-juurakko, 20–40 osaa; eucommia-kuori, 25–35 osaa; Doder-siemenet, 40–60 osaa; kiinalainen jamssijuurakko, 35–45 osaa; drynaria-juurakko, 25–35 osaa; Huai achyranthes -juuri, 20–40 osaa; taxillus-yrtti, 30–40 osaa; paperimulperihedelmät, 20–25 osaa; klematisjuuri ja juurakko, 25–35 osaa; ja acanthopanax-juuren kuori, 25–35 osaa.
3. Otelomake
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumus, tunnettu siitä, että koostumus on perinteisen kiinalaisen lääketieteen uute.
4. Apuaineet
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumus, tunnettu siitä, että koostumus sisältää lisäksi farmaseuttisesti hyväksyttäviä täyteaineita.
5. Annostusmuodot
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumus, tunnettu siitä, että sen annosmuoto on oraalinen valmiste.
Edullisesti oraalinen valmiste valitaan kapseleista, tableteista, pillereistä, rakeista, jauheista tai oraalisista nesteistä.
6. Valmistusmenetelmä
3. Menetelmä patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukaisen perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumuksen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että se käsittää seuraavat vaiheet:
Punnitse kaikki 16 lääkeraaka-ainetta määritettyjen suhteiden mukaisesti ja sekoita ne.
Lisää vettä 6-12 kertaa lääkeraaka-aineiden kokonaismassa. Suorita keittouutto 1–3 kertaa, 1–3 tuntia kerrallaan. Yhdistä keitteet, suodata ja väkevöi ja kuivaa suodos koostumuksen saamiseksi.
Vaihtoehtoisesti voidaan lisätä 30-95 tilavuusprosenttista etanoliliuosta 6-12 kertaa lääkeraaka-aineiden kokonaismassa. Suorita refluksointiuutto 1–3 kertaa, joka kerta 1–3 tuntia. Yhdistä uutteet, ota talteen etanoli ja konsentroi ja kuivaa jäljelle jäänyt neste koostumuksen saamiseksi.
7. Edullinen vesiuuttomenetelmä
7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaihe (2) käsittää:
Lisätään vettä 8–10 kertaa lääkeraaka-aineiden kokonaismassaa vastaava määrä ja tehdään keittouutto kahdesti, jolloin ensimmäinen uutto kestää 2 tuntia ja toinen uutto 1,5 tuntia.
Yhdistä keitteet, suodata ja väkevöi suodos paksuksi uutteeksi, jonka suhteellinen tiheys on 1,20–1,30, tai kuivaa se edelleen kuivatuksi uutejauheeksi.
8. Osteoporoosihakemus
7. Jonkin patenttivaatimuksen 1-6 mukaisen perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumuksen käyttö osteoporoosin hoitoon ja/tai ehkäisyyn tarkoitetun lääkkeen valmistuksessa.
9. Osteofytoosiin liittyvän kivun hakemus
7. Jonkin patenttivaatimuksen 1-6 mukaisen perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumuksen käyttö lääkkeen valmistuksessa osteofytoosin aiheuttaman kivun hoitoon ja/tai ehkäisyyn.
Kääntäjän huomautus: Vaatimuksissa 8 ja 9 olevat viittaukset "vaatimuksiin 1–6" säilyvät lähteestä, vaikka väite 6 on valmistusmenetelmäväite.
Perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumus degeneratiivisten luusairauksien hoitoon ja sen valmistusmenetelmä ja sovellukset
Tekninen ala
[0001]Esillä oleva keksintö koskee perinteisen kiinalaisen lääketieteen teknistä alaa, erityisesti perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumusta rappeuttavien luusairauksien hoitoon, ja sen valmistusmenetelmää ja sovelluksia.
Tausta Art
[0002]Degeneratiiviset luusairaudet ovat yhteisnimitys kroonisille sairauksille, joille on pääasiallisesti tunnusomaista luiden, nivelten ja ympäröivien pehmytkudosten progressiivinen rappeutuminen. Yleisiä kliinisiä tiloja ovat pääasiassa osteoporoosi ja osteofytoosi, jotka tunnetaan yleisesti "luun kannuiksi".
Maailman väestön ikääntymisen kiihtyessä rappeuttavien luusairauksien ilmaantuvuus on lisääntynyt vuosi vuodelta, mikä tekee niistä suuren kansanterveysongelman, joka uhkaa vakavasti keski-ikäisten ja iäkkäiden aikuisten terveyttä ja elämänlaatua.
Osteoporoosi on systeeminen luuston sairaus, jolle on tunnusomaista alhainen luumassa ja luun mikroarkkitehtuurin heikkeneminen, mikä lisää luun haurautta ja murtumien herkkyyttä. Sen patogeneesi on monimutkainen ja siihen liittyy pääasiassa osteoblastivälitteisen luunmuodostuksen ja osteoklastivälitteisen luun resorption välisen dynaamisen tasapainon häiriintyminen. Kun luun resorptio ylittää jatkuvasti luun muodostumisen, tapahtuu luumassan nettohäviö.
Osteofytoosiin liittyy luisten kasvainten muodostuminen luun reunoihin pitkäaikaisen epätasaisen kuormituksen, kulumisen tai rappeutumisen vuoksi. Siihen liittyy usein paikallinen tulehdus, pehmytkudosten puristuminen ja jatkuva krooninen kipu.
Nämä kaksi ehtoa esiintyvät usein rinnakkain kliinisessä käytännössä ja vaikuttavat toisiinsa, mikä aiheuttaa huomattavia vaikeuksia hoidossa.
[0003] Nykyiset länsimaiset lääkehoidot, kuten kalsiumvalmisteet, bisfosfonaatit ja ei-steroidiset tulehduskipulääkkeet, kohdistuvat ensisijaisesti yksittäisiin patologisiin prosesseihin. Pitkäaikaiseen käyttöön liittyy merkittäviä haittavaikutuksia, kuten maha-suolikanavan ärsytystä, maksan ja munuaisten vajaatoimintaa ja sydän- ja verisuonisairauksia, kun taas osteofytoosiin liittyvän kroonisen kivun lievitys on edelleen rajallista.
Sitanche-uute, joka sisältää runsaasti akteosideja ja ekinakosidi-bioaktiivisia yhdisteitä, hyödyttää osteoporoosia.
Napsauta vieraillaksesi 16 % Acteoside Cistanche -uutteen luettelossa
Vaikka perinteinen kiinalainen lääketiede tarjoaa etuja kokonaisvaltaisessa säätelyssä, olemassa olevat formulaatiot noudattavat yleensä kapeaa formulaatiostrategiaa. Useimmat korostavat joko yksinään munuaislisää tai veren aktivointia ja kivun lievitystä puuttumatta riittävästi "maksan ja munuaisten vajaatoiminnan, esanssin ja veren riittämättömyyden sekä jänteiden ja luiden riittämättömän ravinnon" patogeneesiin.
Näillä formulaatioilla on se haittapuoli, että ne tarjoavat liiallista täydennystä, mutta riittämätöntä vapautumista, mikä johtaa luun metabolisen tasapainon epätäydelliseen säätelyyn, rustokudoksen suojaamiseen ja kroonisen luukivun lievitykseen.
[0004]Sen mukaisesti perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumusta rappeuttavien luusairauksien hoitoon, yhdessä sen valmistusmenetelmän ja sovellusten kanssa, ehdotetaan ratkaisemaan edellä mainitut ongelmat.
Yhteenveto keksinnöstä
[0005]Esillä olevan keksinnön tarkoituksena on saada aikaan perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumus degeneratiivisten luusairauksien hoitoon yhdessä sen valmistusmenetelmän ja sovellusten kanssa.
Keksintö on tarkoitettu korjaamaan taustalla tunnistettuja puutteita: olemassa olevilla länsimaisilla osteofytoosin lääkkeillä on huomattavia haittavaikutuksia ja rajalliset terapeuttiset kohteet, kun taas olemassa olevilla perinteisillä kiinalaisilla lääkkeillä on rajoitetut formulaatiostrategiat, eivätkä ne pysty riittävästi yhdistämään "täydentävä puutetta" "lukituksen poistamiseen".
Molemmilla lähestymistavoilla on vaikeuksia keskeyttää tehokkaasti "maksan ja munuaisten vajaatoiminnan, esanssin ja veren riittämättömyyden sekä jänteiden ja luiden riittämättömän ravinnon" ydinpatogeneesin.
[0006]Edellä olevan tarkoituksen saavuttamiseksi esillä oleva keksintö tarjoaa seuraavan teknisen ratkaisun: perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumus, joka on valmistettu seuraavista lääkeraaka-aineista paino-osissa:
Valmistettu rehmanniajuuri, 30–50 osaa; hirvensarvigelatiini, 15-30 osaa; yrtti, 20–80 osaa; morinda-juuri, 15–50 osaa; kilpikonnankuorigelatiini, 15-50 osaa; goji-marjat, 30-80 osaa; curculigo-juurakko, 10–50 osaa; eucommia-kuori, 15–50 osaa; 20–80 osaa; kiinalainen jamssijuurakko, 30–50 osaa; drynaria-juurakko, 15–50 osaa; Huai achyranthes -juuri, 10-50 osaa; taxillus-yrtti, 20–50 osaa; paperimulperihedelmät, 15-30 osaa; klematisjuuri ja juurakko, 15–50 osaa; ja acanthopanax-juuren kuori, 15–50 osaa.
[0007]Edullisesti lääkeraaka-aineita on läsnä seuraavissa paino-osissa:
Valmistettu rehmanniajuuri, 35–45 osaa; hirvensarvigelatiini, 20-25 osaa; yrtti, 40–60 osaa; morinda-juuri, 25–35 osaa; kilpikonnankuorigelatiini, 25–35 osaa; goji-marjat, 45–65 osaa; curculigo-juurakko, 20–40 osaa; eucommia-kuori, 25–35 osaa; Doder-siemenet, 40–60 osaa; kiinalainen jamssijuurakko, 35–45 osaa; drynaria-juurakko, 25–35 osaa; Huai achyranthes -juuri, 20–40 osaa; taxillus-yrtti, 30–40 osaa; paperimulperihedelmät, 20–25 osaa; klematisjuuri ja juurakko, 25–35 osaa; ja acanthopanax-juuren kuori, 25–35 osaa.
[0008]Edullisesti perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumus on perinteisen kiinalaisen lääketieteen uute.
[0009]Edullisesti perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumus sisältää lisäksi farmaseuttisesti hyväksyttäviä täyteaineita.
[0010]Edullisesti perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumuksen annosmuoto on oraalinen valmiste. Edullisesti oraalinen valmiste valitaan kapseleista, tableteista, pillereistä, rakeista, jauheista tai oraalisista nesteistä.
[0011]Esillä oleva keksintö tarjoaa lisäksi menetelmän perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumuksen valmistamiseksi, joka menetelmä käsittää seuraavat vaiheet:
Punnitse kaikki 16 lääkeraaka-ainetta määritettyjen suhteiden mukaisesti ja sekoita ne.
Lisää vettä 6-12 kertaa lääkeraaka-aineiden kokonaismassa. Suorita keittouutto 1–3 kertaa, 1–3 tuntia kerrallaan. Yhdistä keitteet, suodata ja väkevöi ja kuivaa suodos koostumuksen saamiseksi.
Vaihtoehtoisesti voidaan lisätä 30-95 tilavuusprosenttista etanoliliuosta 6-12 kertaa lääkeraaka-aineiden kokonaismassa. Suorita refluksointiuutto 1–3 kertaa, joka kerta 1–3 tuntia. Yhdistä uutteet, ota talteen etanoli ja konsentroi ja kuivaa jäljelle jäänyt neste koostumuksen saamiseksi.
[0012]Edullisesti vaihe (2) sisältää:
Lisätään vettä 8–10 kertaa lääkeraaka-aineiden kokonaismassaa vastaava määrä ja tehdään keittouutto kahdesti, jolloin ensimmäinen uutto kestää 2 tuntia ja toinen uutto 1,5 tuntia.
Yhdistä keitteet, suodata ja väkevöi suodos paksuksi uutteeksi, jonka suhteellinen tiheys on 1,20–1,30, tai kuivaa se edelleen kuivatuksi uutejauheeksi.
[0013]Esillä oleva keksintö tarjoaa lisäksi käyttöön perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumuksen käytön osteoporoosin hoitoon ja/tai ehkäisyyn tarkoitetun lääkkeen valmistuksessa.
[0014]Esillä oleva keksintö tarjoaa lisäksi käyttöön perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumuksen käytön osteofytoosin aiheuttaman kivun hoitoon ja/tai ehkäisyyn tarkoitetun lääkkeen valmistuksessa.
Hyödylliset vaikutukset
[0015]Tekniikan tasoon verrattuna esillä oleva keksintö tarjoaa seuraavat hyödylliset vaikutukset:
Perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumus säätelee systemaattisesti luun aineenvaihduntaa, mahdollistaa osteoporoosin ja osteofytoosin kaksoisehkäisyn ja -hoidon, käsittelee sekä taustalla olevia syitä että ilmenemismuotoja, ja tarjoaa korkean turvallisuuden pitkäaikaiskäytön aikana.
Erityiset edut kuvataan alla.
Ensinnäkin esillä oleva keksintö koskee olemassa olevien länsimaisten lääketieteellisten hoitojen rajoituksia, mukaan lukien niiden kapeat terapeuttiset kohteet ja maha-suolikanavan ärsytys, maksan ja munuaisten vajaatoiminta ja pitkäaikaiseen käyttöön liittyvät kardiovaskulaariset riskit.
Siinä käsitellään myös olemassa olevien perinteisen kiinalaisen lääketieteen formulaatioiden haittapuolia, jotka yleensä keskittyvät joko pelkkään lisäravinteeseen tai veren aktivointiin ja kivunlievitykseen, mikä johtaa "liialliseen lisäravinteeseen, mutta riittämättömään eston poistamiseen".
Keksintö ehdottaa innovatiivisesti formulaatiostrategiaa "maksan ja munuaisten yhteissäätelyssä, sekä esanssin että veren täydentämisessä ja täydentämisen yhdistämisessä eston poistamiseen".
Koostumuksessa käytetään ainesosia, kuten valmistettua rehmanniajuurta, hirvensarvigelatiinia, kilpikonnankuoren gelatiinia, goji-marjoja ja doder-siemeniä. Se yhdistää eläinperäisiä lääkkeitä aineisiin, joita on perinteisesti käytetty munuaisten täydentämiseen ja esanssin täydentämiseen – maksan ja munuaisten vahvaan ravitsemiseen ja aliytimien korjaamiseen.
Niihin yhdistetään sitanche-yrtti, morinda-juuri, curculigon juurakko, eucommia-kuori, Huai achyranthes -juuri ja taxillus-yrtti lämmittämään yangia, tukemaan munuaisia ja vahvistamaan jänteitä ja luita, mikä tehostaa ilmentymien hoitoa.
Drynaria-juurakkoa, klematiksen juurakkoa ja juurakkoa sekä acanthopanax-juuren kuorta käytetään lisäksi tuulen ja kosteuden poistamiseen, kanavien avaamiseen ja kivun lievittämiseen, mikä hoitaa kiireellisiä oireita.
Kokonaiskoostumus täydentää aiheuttamatta pysähtymistä ja vapauttaa tervettä qi:tä heikentämättä. Se vastaa läheisesti degeneratiivisten luusairauksien monimutkaista patogeneesiä, jota kuvataan taustalla olevaksi puutteeksi, johon liittyy ylimääräisiä ilmenemismuotoja, kuten "maksan ja munuaisten vajaatoimintaa, esanssin ja veren riittämättömyyttä sekä jänteiden ja luiden riittämätöntä ravintoa".
Siten se saavuttaa luun metabolisen tasapainon kokonaisvaltaisen säätelyn useiden kohteiden ja reittien kautta.
[0016]Toiseksi tietyt prosessit, kuten vesiuutto tai etanoliuutto, voivat riittävästi uuttaa kaavan tärkeimmät aktiiviset aineosat, mukaan lukien katalpoli, gelatiinista johdetut peptidit ja aminohapot, naringiini ja anemoniini.
Esillä olevan keksinnön mukainen koostumus voi järjestelmällisesti säädellä luun aineenvaihduntaa molempiin suuntiin edistäen luun muodostumista ja inhiboimalla luun resorptiota luun mineraalitiheyden lisäämiseksi ja luun mikroarkkitehtuurin parantamiseksi.
Samalla se voi estää ruston matriisin hajoamista, suojata nivelrustoa ja lievittää tehokkaasti osteofytoosin aiheuttamaa kroonista tulehduskipua ja raajan kontraktuuria estämällä tulehdustekijän vapautumista ja parantamalla paikallista mikroverenkiertoa.
Aiempiin tekniikoihin verrattuna esillä oleva keksintö ei ainoastaan tarjoa osteoporoosin ja osteofytoosin kaksoisehkäisyä ja -hoitoa, vaan myös parantaa systeemisiä oireita, kuten alaselän ja polvien arkuus ja heikkous puuttumalla niiden taustalla oleviin syihin.
Siten se hoitaa sekä taustalla olevia syitä että ilmenemismuotoja, tarjoaa korkean turvallisuuden ja vähän haittavaikutuksia pitkäaikaisessa käytössä, ja se sopii erityisen hyvin iäkkäille potilaille, joilla on rappeuttavia luusairauksia ja jotka vaativat pitkäaikaista hoitoa.
Yksityiskohtainen kuvaus suoritusmuodoista
[0017]Esillä olevan keksinnön suoritusmuotojen tekniset ratkaisut on kuvattu alla selkeästi ja täydellisesti.
Kuvatut suoritusmuodot ovat vain joitakin, eivätkä kaikki, esillä olevan keksinnön suoritusmuodoista.
Kaikki muut suoritusmuodot, jotka alan tavallinen ammattimies on saanut esillä olevan keksinnön suoritusmuotoihin perustuen ja ilman keksinnöllistä vaivaa, kuuluvat esillä olevan keksinnön suojapiiriin.
Esimerkki 1
Raaka-aineen punnitus
Punnitse lääkeraaka-aineet seuraavissa paino-osissa:
| Lääkkeen raaka-aine | Kiinalainen nimi / Pinyin | Osat painon mukaan |
|---|---|---|
| Valmistettu rehmanniajuuri | 熟地 / Shu Di | 40 |
| Hirvensarvigelatiini | 鹿角胶 / Lu Jiao Jiao | 22 |
| Cistanche-yrtti | 肉苁蓉 / Rou Cong Rong | 50 |
| Morinda juuri | 巴戟日 / Ba Ji Tian | 30 |
| Kilpikonnankuoren gelatiini | 龟甲胶 / Gui Jia Jiao | 30 |
| Goji marjat | 枸杞子 / Gou Qi Zi | 55 |
| Curculigo-juurakko | 仙茅 / Xian Mao | 30 |
| Eucommia kuori | 杜仲 / Du Zhong | 30 |
| Dodder siemenet | 菟丝子 / Tu Si Zi | 50 |
| Kiinan jamssin juurakko | 山药 / Shan Yao | 40 |
| Drynaria-juurakko | 骨碎补 / Gu Sui Bu | 30 |
| Huai achyranthes -juuri | 怀牛膝 / Huai Niu Xi | 30 |
| Taxillus-yrtti | 桑寄生 / Sang Ji Sheng | 35 |
| Paperimulperihedelmät | 楮实子 / Chu Shi Zi | 22 |
| Clematis-juuri ja juurakko | 威灵仙 / Wei Ling Xian | 30 |
| Acanthopanax-juuren kuori | 5加皮 / Wu Jia Pi | 30 |
Pinyin-tunnisteet toimitetaan terminologian selkeyden vuoksi. Ne eivät korvaa lajien tunnistamista tai hankinnan farmakopean eritelmiä.
Valmistusvaiheet
Jauhe yllä mainitut 16 lääkkeen raaka-ainetta, suodata ne 40 meshin siivilän läpi ja sekoita huolellisesti, jotta saadaan homogeeninen sekoitettu raaka-ainejauhe.
Lisää tislattua vettä määrä, joka on yhdeksän kertaa sekoitetun raaka-ainejauheen kokonaismassa. Suorita keittouutto kahdesti, jolloin ensimmäinen uutto kestää 2 tuntia ja toinen 1,5 tuntia. Yhdistä kaksi keittoa ja suodata 300 meshin suodatinkankaan läpi jäännösten poistamiseksi ja kirkkaan keitteen saamiseksi.
Laita kirkas keite pyöröhaihduttimeen ja väkevöi 60 asteessa ja 0,08 MPa:ssa, kunnes saadaan paksu uute, jonka suhteellinen tiheys on 1,25 mitattuna kuumana 60 asteessa. Tämän jälkeen laita paksu uute tyhjökuivausuuniin ja kuivaa 65 asteessa ja 0,09 MPa:ssa vakiopainoon. Jauhe ja vie 80 meshin seulan läpi saadaksesi kuivattua perinteisen kiinalaisen lääketieteen uutejauhetta, joka muodostaa esillä olevan keksinnön mukaisen koostumuksen.
Esimerkki 2
Raaka-aineen punnitus
Punnitse lääkeraaka-aineet seuraavissa paino-osissa:
| Lääkkeen raaka-aine | Osat painon mukaan |
|---|---|
| Valmistettu rehmanniajuuri | 30 |
| Hirvensarvigelatiini | 15 |
| Cistanche-yrtti | 20 |
| Morinda juuri | 15 |
| Kilpikonnankuoren gelatiini | 15 |
| Goji marjat | 30 |
| Curculigo-juurakko | 10 |
| Eucommia kuori | 15 |
| Dodder siemenet | 20 |
| Kiinan jamssin juurakko | 30 |
| Drynaria-juurakko | 15 |
| Huai achyranthes -juuri | 10 |
| Taxillus-yrtti | 20 |
| Paperimulperihedelmät | 15 |
| Clematis-juuri ja juurakko | 15 |
| Acanthopanax-juuren kuori | 15 |
Valmistusvaiheet
Jauhe yllä mainitut 16 lääkkeen raaka-ainetta, suodata ne 40 meshin siivilän läpi ja sekoita huolellisesti, jotta saadaan homogeeninen sekoitettu raaka-ainejauhe.
Lisää 70 tilavuusprosenttista etanoliliuosta kuusi kertaa sekoitetun raaka-ainejauheen kokonaismassa. Aseta seos palautusjäähdytysuuttolaitteeseen ja suorita uutto kolme kertaa, joka kerta 1 tunnin ajan. Yhdistä kolme uutetta ja suodata 300 meshin suodatinkankaan läpi jäännösten poistamiseksi ja kirkkaan uutteen saamiseksi.
Laita kirkas uute pyöröhaihduttimeen ja ota talteen etanoli 55 asteessa ja 0,07 MPa:ssa, kunnes etanolin hajua ei enää ole jäljellä. Jatka väkevöimistä, kunnes saadaan paksu uute, jonka suhteellinen tiheys on 1,20 mitattuna kuumana 60 asteessa. Tyhjiökuivaus 60 asteessa ja 0,09 MPa vakiopainoon. Jauhe ja vie 80 meshin seulan läpi saadaksesi kuivattua perinteisen kiinalaisen lääketieteen uutejauhetta, joka muodostaa esillä olevan keksinnön mukaisen koostumuksen.
Kääntäjän huomautus: Painearvot toistetaan kirjoitetulla tavalla. Lähde ei täsmennä, edustavatko ne absoluuttista painetta, ylipainetta vai ilmoitettua tyhjiön suuruutta.
Esimerkki 3
[0022]Ota 100 osaa esimerkissä 1 valmistettua kuivattua perinteisen kiinalaisen lääketieteen uutejauhetta ja lisää farmaseuttisesti hyväksyttäviä apuaineita, nimittäin 20 osaa tärkkelystä ja 2 osaa magnesiumstearaattia.
Sekoita huolellisesti ja täytä tyhjät kapselin kuoret kapselin täyttökoneella. Jokainen kapseli sisältää 0,5 g kuivattua perinteisen kiinalaisen lääketieteen uutejauhetta, jolloin saadaan esillä olevan keksinnön mukaisen koostumuksen kapselivalmiste.
Eläinkokeet
[0023]Esillä olevan keksinnön mukaisen perinteisen kiinalaisen lääketieteellisen koostumuksen terapeuttisten vaikutusten ja turvallisuuden varmistamiseksi osteoporoosin ja osteofytoosin aiheuttaman kivun hoidossa suoritettiin seuraavat pieneläinkokeet.
Kaikki koe-eläimet olivat spesifisesti patogeenivapaita eli SPF-rottia. Heidän asuntoympäristönsä oli sen mukainenLaboratorioeläinten ympäristö- ja asuintilojen vaatimukset, GB 14925-2023.
Koe 1: Koostumuksen terapeuttiset vaikutukset rotilla, joilla on osteoporoosi
Kokeelliset materiaalit
[0024]Käytettiin seuraavia materiaaleja:
Kuusikymmentä SPF-naaraspuolista Sprague–Dawley-rottaa, paino 220 ± 20 g ja iältään 6–8 kuukautta.
Esillä olevan keksinnön mukainen perinteisen kiinalaisen lääketieteen koostumus: esimerkissä 1 valmistettu kuivattu uutejauhe, joka on formuloitu eri pitoisuuksiksi suspensioiksi käyttämällä fysiologista suolaliuosta.
Positiivinen kontrollilääke: alendronaattinatriumtabletit, jauhettu ja formuloitu suspensioksi fysiologista suolaliuosta käyttäen.
Fysiologinen suolaliuos.
Luun tiheysmittari.
Seerumin luunkierron markkerimäärityssarjat P1NP:lle ja CTX:lle.
Mikrotietokonetomografia tai mikro-CT, skanneri.
Mallin perustaminen
[0025]Munasarjapoiston aiheuttama osteoporoosin rottamalli määritettiin käyttämällä seuraavaa menettelyä:
Rotat nukutettiin vatsaontelonsisäisellä injektiolla 10 % kloraalihydraattia pitoisuudella 3 ml/kg. Keskiviivan vatsan viilto tehtiin, molemmat munasarjat paljastettiin ja poistettiin, ja viilto suljettiin kerroksittain.
Valeleikkatussa ryhmässä vatsaontelo avattiin ja munasarjat paljastettiin, mutta niitä ei poistettu, minkä jälkeen viilto suljettiin.
Rottia pidettiin rutiininomaisissa kasvatusolosuhteissa 2 kuukauden ajan leikkauksen jälkeen. Lanneluun mineraalitiheys mitattiin sitten onnistuneen mallin vahvistamiseksi. Luun mineraalitiheys malliryhmässä oli pienempi kuin valeleikkausryhmässä, P < 0,01.
Kokeelliset ryhmät
[0026]Rotat, joissa malli oli onnistuneesti luotu, jaettiin satunnaisesti viiteen ryhmään, 10 rottaa per ryhmä.
Mukaan otettiin myös valeleikattu 10 rotan ryhmä ja normaali 10 rotan kontrolliryhmä, jotka eivät saaneet mitään kirurgista interventiota.
Ryhmät olivat seuraavat:
| ryhmä | Hoito |
|---|---|
| Normaali ohjaus | Säännöllinen karjanhoito; fysiologinen suolaliuos, 10 ml/kg päivittäin suun kautta letkulla |
| Valeleikkaus | Säännöllinen karjanhoito; fysiologinen suolaliuos, 10 ml/kg päivittäin suun kautta letkulla |
| Mallin ohjaus | Säännöllinen karjanhoito; fysiologinen suolaliuos, 10 ml/kg päivittäin suun kautta letkulla |
| Positiivinen ohjaus | Säännöllinen karjanhoito; alendronaattinatriumsuspensio, 0,2 mg/kg päivittäin suun kautta letkulla |
| Pienen annoksen koostumus | Säännöllinen karjanhoito; koostumussuspensio, 1,0 g/kg päivittäin suun kautta letkulla, kuivatun uutejauheena ilmaistuna |
| Keskiannoksen koostumus | Säännöllinen karjanhoito; koostumussuspensio, 2,0 g/kg päivittäin suun kautta letkulla, kuivatun uutejauheena ilmaistuna |
| Suuriannoksinen koostumus | Säännöllinen karjanhoito; koostumussuspensio, 4,0 g/kg päivittäin suun kautta letkulla, kuivatun uutejauheena ilmaistuna |
Kääntäjän huomautus: Lähde luettelee materiaaliosiossa 60 rottaa, mutta kuvaa seitsemän 10 rotan ryhmää, yhteensä 70. Tämä epäjohdonmukaisuus on pikemminkin säilytetty kuin hiljaa korjattu.
Hallinto
[0027]Hoito annettiin kerran päivässä suun kautta letkulla 12 peräkkäisen viikon ajan.
Hallintojakson aikana kaikkia ryhmiä pidettiin samanlaisissa kasvatusolosuhteissa, ja niillä oli vapaa pääsy juomaveteen ja ruokaan.
Tulosmittaukset ja tulokset
Luun mineraalitiheys
12 viikon annon jälkeen rotat nukutettiin antamalla vatsaontelonsisäisesti ja lanneluun mineraalitiheys L3-L5:ssä mitattiin käyttämällä luun tiheysmittaria.
Tulokset on esitetty taulukossa 1.
Taulukko 1. Lanneluun mineraalitiheys kussakin rottaryhmässä
| ryhmä | Luun mineraalitiheys, BMD | Vertailu mallin ohjaukseen |
|---|---|---|
| Normaali ohjaus | 0.286 ± 0.015 | - |
| Valeleikkaus | 0.278 ± 0.013 | - |
| Mallin ohjaus | 0.201 ± 0.011 | - |
| Positiivinen ohjaus | 0.245 ± 0.012 | P < 0,01 |
| Pienen annoksen koostumus | 0.223 ± 0.010 | P < 0,05 |
| Keskiannoksen koostumus | 0.251 ± 0.014 | P < 0,01 |
| Suuriannoksinen koostumus | 0.268 ± 0.013 | P < 0,01 |
Mukana toimitettu taulukko ei määrittele BMD-yksikköä.
Kuten taulukosta 1 käy ilmi, luun mineraalitiheys mallikontrolliryhmässä oli pienempi kuin normaaleissa kontrolliryhmissä ja valeleikkausryhmissä P < 0,01, mikä osoitti osteoporoosimallin onnistuneen perustamisen.
Verrattuna mallikontrolliryhmään luun mineraalitiheys kasvoi kaikissa annosryhmissä, jotka saivat esillä olevan keksinnön mukaista koostumusta. Ero oli merkitsevä, kun P < 0,05 pienen annoksen ryhmässä ja P < 0,01 keskisuuren ja suuren annoksen ryhmässä.
Luun mineraalitiheys suuren annoksen saaneessa ryhmässä lähestyi valeleikkauksen ryhmän tasoa, ja vaikutus oli parempi kuin positiivisessa kontrolliryhmässä.
Nämä tulokset osoittavat, että koostumus voi lisätä luun mineraalitiheyttä rotilla, joilla on osteoporoosi, parantaa luun aineenvaihduntaa ja tarjota edullisia terapeuttisia vaikutuksia osteoporoosia vastaan.
Seerumin luun vaihtuvuuden merkkiaineet
12 viikon annon jälkeen veri kerättiin rotista orbitaalisella näytteenotolla ja seerumi erotettiin sentrifugoimalla.
Luunmuodostusmarkkerin P1NP, tyypin I prokollageenin N-terminaalisen propeptidin ja luun resorptiomarkkerin CTX, tyypin I kollageenin C-terminaalisen silloitetun telopeptidin, seerumipitoisuudet määritettiin ELISA:lla.
Tulokset on esitetty taulukossa 2.
Taulukko 2. Seerumin luun vaihtuvuuden markkerit kussakin rottaryhmässä
| ryhmä | P1NP, ng/ml | CTX, ng/ml |
|---|---|---|
| Normaali ohjaus | 185.62 ± 12.35 | 35.26 ± 4.12 |
| Valeleikkaus | 178.95 ± 11.87 | 36.78 ± 3.95 |
| Mallin ohjaus | 102.38 ± 9.65 | 68.95 ± 5.78 |
| Positiivinen ohjaus | 146.72 ± 10.53 | 48.32 ± 4.56 |
| Pienen annoksen koostumus | 125.46 ± 10.12 | 56.78 ± 5.13 |
| Keskiannoksen koostumus | 152.89 ± 11.36 | 45.62 ± 4.38 |
| Suuriannoksinen koostumus | 170.53 ± 12.08 | 38.95 ± 4.02 |
Kuten taulukosta 2 näkyy, seerumin P1NP pieneni ja CTX nousi mallikontrolliryhmässä P < 0,01, mikä osoittaa vähentyneen luunmuodostuksen, lisääntyneen luun resorption ja luun aineenvaihdunnan epätasapainon.
Verrattuna mallikontrolliryhmään seerumin P1NP nousi ja CTX laski kaikissa annosryhmissä, jotka saivat koostumusta, P < 0,05 tai P < 0,01.
Suuren annoksen ryhmässä ei havaittu eroa valeleikkauksen saaneeseen ryhmään.
Nämä havainnot osoittavat, että koostumus voi säädellä luun aineenvaihduntaa molempiin suuntiin edistämällä luun muodostumista ja inhiboimalla luun resorptiota, mikä siten puuttuu taustalla olevaan osteoporoosiin.
Tämä on yhdenmukainen formulaatiostrategian kanssa, jonka mukaan "yhdissääntely maksaa ja munuaisia ja täydentää sekä esanssia että verta", ja se voi tehokkaasti korjata luun mikroarkkitehtuurin vaurioita.
Luun mikroarkkitehtuuri
12 viikon annon jälkeen L4 nikamavartalo kerättiin ja skannattiin mikro-CT:llä käyttämällä seuraavia parametreja:
Jännite: 80 kV.
Virta: 500 μA.
Resoluutio: 13 μm.
Trabekulaarinen paksuus, Tb.Th; trabekulaariluku, Tb.N; ja trabekulaarinen erotus, Tb.Sp, analysoitiin.
Tulokset on esitetty taulukossa 3.
Taulukko 3. Luun mikroarkkitehtuuriparametrit kussakin rottaryhmässä
| ryhmä | Trabekulaarinen paksuus, Tb.Th, μm | Trabekulaariluku, Tb.N, 1/mm | Trabekulaarierotus, Tb.Sp, μm |
|---|---|---|---|
| Normaali ohjaus | 58.62 ± 4.35 | 3.25 ± 0.28 | 185.36 ± 12.45 |
| Valeleikkaus | 56.89 ± 4.12 | 3.12 ± 0.25 | 192.58 ± 13.12 |
| Mallin ohjaus | 32.15 ± 3.87 | 1.86 ± 0.21 | 305.62 ± 15.78 |
| Positiivinen ohjaus | 45.78 ± 4.05 | 2.68 ± 0.24 | 238.45 ± 14.36 |
| Pienen annoksen koostumus | 38.95 ± 3.92 | 2.25 ± 0.22 | 276.89 ± 15.13 |
| Keskiannoksen koostumus | 48.62 ± 4.21 | 2.85 ± 0.26 | 225.78 ± 14.05 |
| Suuriannoksinen koostumus | 54.35 ± 4.32 | 3.02 ± 0.27 | 201.25 ± 13.56 |
Kuten taulukosta 3 esitetään, mallikontrolliryhmässä oli vähentynyt trabekulaarinen paksuus ja lukumäärä sekä lisääntynyt trabekulaarisen erottuminen, P < 0,01, mikä osoitti luun mikroarkkitehtuurin vakavaa heikkenemistä.
Verrattuna mallikontrolliryhmään, kaikissa koostumusta saaneissa annosryhmissä oli lisääntynyt trabekulaarisen paksuus ja lukumäärä ja vähentynyt trabekulaarinen erottuminen P < 0,05 tai P < 0,01.
Luun mikroarkkitehtuuriparametrit suuren annoksen ryhmässä lähestyivät valeleikkauksen ryhmän vastaavia.
Nämä tulokset osoittavat, että koostumus voi tehokkaasti parantaa luun mikroarkkitehtuuria rotilla, joilla on osteoporoosi, parantaa luun lujuutta ja vähentää murtumariskiä.
Koe 2: Koostumuksen terapeuttiset vaikutukset rotilla, joilla on osteofytoosiin liittyvää kipua
Kokeelliset materiaalit
[0034]Käytettiin seuraavia materiaaleja:
Kuusikymmentä SPF Sprague–Dawley -rottaa, joissa on yhtä suuri määrä uroksia ja naaraita, paino 200 ± 20 g ja ikä 6–8 kuukautta.
Esillä olevan keksinnön mukainen koostumus: esimerkissä 1 valmistettu kuivattu uutejauhe, joka on formuloitu eri pitoisuuksiksi suspensioiksi käyttämällä fysiologista suolaliuosta.
Positiivinen kontrollilääke: ibuprofeenisuspensio.
Fysiologinen suolaliuos.
Von Frey filamentit kipukynnyksen testaukseen.
ELISA-sarjat: IL-6 ja TNF- .
Safranin O-Fast Green -värjäyssarja.
Valomikroskooppi.
Mallin perustaminen
[0035]Osteofytoosin tai nivelrikon rotan malli perustettiin käyttämällä mediaalisen nivelkiven repeämää tai MMT-menetelmää.
Menettely oli seuraava:
Rotat nukutettiin vatsaontelonsisäisellä injektiolla 10 % kloraalihydraattia pitoisuudella 3 ml/kg. Oikean polven ympärillä oleva alue poistettiin ja desinfioitiin, ja polvinivelen paljastamiseksi tehtiin mediaalinen viilto.
Mediaalinen kollateraalinen ligamentti leikattiin läpi, mediaalinen meniskki repeytyi ja viilto suljettiin kerroksittain.
Valeleikkatussa ryhmässä polvinivel avattiin ja mediaalinen sivuside ja meniski paljastettiin vahingoittumatta, minkä jälkeen viilto suljettiin.
Rottia pidettiin rutiininomaisissa kasvatusolosuhteissa 4 viikon ajan leikkauksen jälkeen.
Onnistunut mallin perustaminen varmistettiin mittaamalla oikean takaraajan kipukynnys von Frey-filamenteilla ja polvinivelradiografialla. Malliryhmässä havaittiin alentunut kipukynnys, osteofyyttien muodostuminen ja niveltilan kapeneminen, P < 0,01.
Kokeelliset ryhmät
[0036]Rotat, joissa malli oli onnistuneesti luotu, jaettiin satunnaisesti viiteen ryhmään, 10 rottaa per ryhmä.
Mukaan otettiin myös valeleikattu 10 rotan ryhmä ja normaali 10 rotan kontrolliryhmä, jotka eivät saaneet mitään interventiota.
Ryhmät olivat seuraavat:
| ryhmä | Hoito |
|---|---|
| Normaali ohjaus | Säännöllinen karjanhoito; fysiologinen suolaliuos, 10 ml/kg päivittäin suun kautta letkulla |
| Valeleikkaus | Säännöllinen karjanhoito; fysiologinen suolaliuos, 10 ml/kg päivittäin suun kautta letkulla |
| Mallin ohjaus | Säännöllinen karjanhoito; fysiologinen suolaliuos, 10 ml/kg päivittäin suun kautta letkulla |
| Positiivinen ohjaus | Säännöllinen karjanhoito; ibuprofeenisuspensio, 20 mg/kg päivittäin suun kautta letkulla |
| Pienen annoksen koostumus | Säännöllinen karjanhoito; koostumussuspensio, 1,0 g/kg päivittäin suun kautta letkulla, kuivatun uutejauheena ilmaistuna |
| Keskiannoksen koostumus | Säännöllinen karjanhoito; koostumussuspensio, 2,0 g/kg päivittäin suun kautta letkulla, kuivatun uutejauheena ilmaistuna |
| Suuriannoksinen koostumus | Säännöllinen karjanhoito; koostumussuspensio, 4,0 g/kg päivittäin suun kautta letkulla, kuivatun uutejauheena ilmaistuna |
Kääntäjän huomautus: Kuten kokeessa 1, materiaaliosiossa luetellaan 60 rottaa, kun taas ilmoitettu jako vaatii 70.
Hallinto
[0037]Hoito annettiin kerran päivässä suun kautta letkulla 8 peräkkäisen viikon ajan.
Hallintojakson aikana kaikkia ryhmiä pidettiin samanlaisissa kasvatusolosuhteissa, ja niillä oli vapaa pääsy juomaveteen ja ruokaan.
Tulosmittaukset ja tulokset
Kipukynnys
Ennen antoa ja 4 ja 8 viikon annon jälkeen oikean takaraajan mekaaninen kipukynnys mitattiin käyttämällä von Frey-filamentteja.
Pienin painearvo, joka sai aikaan käpälän vetäytymisvasteen, kirjattiin kipukynnykseksi.
Tulokset on esitetty taulukossa 4.
Taulukko 4. Takarajan mekaaninen kipukynnys kussakin rottaryhmässä
| ryhmä | Ennen antoa | 4 viikon kuluttua | 8 viikon jälkeen |
|---|---|---|---|
| Normaali ohjaus | 18.62 ± 2.35 | 19.15 ± 2.42 | 19.38 ± 2.51 |
| Valeleikkaus | 17.89 ± 2.28 | 18.56 ± 2.37 | 18.89 ± 2.45 |
| Mallin ohjaus | 6.25 ± 1.87 | 6.58 ± 1.92 | 6.72 ± 1.95 |
| Positiivinen ohjaus | 6.32 ± 1.85 | 11.89 ± 2.15 | 14.56 ± 2.28 |
| Pienen annoksen koostumus | 6.28 ± 1.89 | 9.65 ± 2.08 | 12.38 ± 2.21 |
| Keskiannoksen koostumus | 6.35 ± 1.86 | 12.58 ± 2.12 | 15.62 ± 2.35 |
| Suuriannoksinen koostumus | 6.29 ± 1.88 | 14.25 ± 2.21 | 17.89 ± 2.42 |
Toimitettu taulukko ei määrittele mekaanisten kynnysarvojen yksikköä.
Kuten taulukosta 4 on esitetty, ennen antoa kipukynnykset eivät eronneet mallirottien ryhmien välillä, P > 0,05, ja olivat alhaisemmat kuin normaaleissa kontrolliryhmissä ja valeleikkausryhmissä, P < 0,01.
Annon jälkeen kipukynnykset kaikissa koostumusta saaneissa annosryhmissä nousivat progressiivisesti hoidon keston myötä.
8 viikon jälkeen kipukynnykset olivat kaikissa annosryhmissä korkeammat kuin mallikontrolliryhmässä, P < 0,01.
Suuriannosryhmässä kipukynnys lähestyi valeleikkauksen saaneen ryhmän kipukynnystä ja oli parempi kuin positiivisen kontrolliryhmän.
Nämä havainnot osoittavat, että koostumus voi tehokkaasti lievittää osteofytoosin aiheuttamaa kipua ja saada aikaan jatkuvan ja vakaan vaikutuksen.
Tämä on sopusoinnussa ainesosien, kuten klematiksen juuren ja juurakon, acanthopanax-juuren kuoren ja drynaria-juurikon perinteisten toimintojen kanssa tuulen ja kosteuden poistamisessa, kanavien avaamisessa ja kipujen lievittämisessä.
Seerumin tulehdustekijät
8 viikon annon jälkeen veri kerättiin orbitaalisella näytteenotolla ja seerumi erotettiin sentrifugoimalla.
Tulehdustekijöiden IL-6, interleukiini-6:n ja TNF-, tuumorinekroositekijä-alfan seerumipitoisuudet määritettiin ELISA:lla.
Tulokset on esitetty taulukossa 5.
Taulukko 5. Seerumin tulehdustekijät kussakin rottaryhmässä
Keskiarvo ± keskihajonta; n=10; pg/ml.
| ryhmä | IL-6 | TNF- |
|---|---|---|
| Normaali ohjaus | 35.62 ± 4.35 | 28.95 ± 3.87 |
| Valeleikkaus | 37.89 ± 4.52 | 30.12 ± 3.95 |
| Mallin ohjaus | 125.38 ± 10.65 | 108.62 ± 9.78 |
| Positiivinen ohjaus | 78.45 ± 8.72 | 65.38 ± 7.65 |
| Pienen annoksen koostumus | 95.62 ± 9.15 | 82.56 ± 8.32 |
| Keskiannoksen koostumus | 72.38 ± 8.56 | 60.15 ± 7.48 |
| Suuriannoksinen koostumus | 48.95 ± 5.21 | 38.62 ± 4.56 |
Kuten taulukosta 5 käy ilmi, seerumin IL-6- ja TNF-pitoisuudet nousivat mallikontrolliryhmässä P < 0,01:n ollessa osoitus merkittävästä kroonisesta tulehdusvasteesta rotilla, joilla oli osteofytoosi.
Verrattuna mallikontrolliryhmään seerumin IL-6- ja TNF-pitoisuudet laskivat kaikissa koostumusta saaneissa annosryhmissä P < 0,05 tai P < 0,01.
Tulehdustekijöiden tasot suuren annoksen ryhmässä lähestyivät valeleikkauksen ryhmän tasoja.
Nämä havainnot osoittavat, että koostumus voi tehokkaasti estää tulehdustekijän vapautumista, vähentää niveltulehdusta ja siten lievittää kipua.
Tämä on yhdenmukainen ehdotetun mekanismin kanssa, joka sisältää paikallisen mikroverenkierron parantamisen ja tulehdusvasteiden eston.
Nivelruston histologia
8 viikon annon jälkeen rotat lopetettiin ja oikeat polvinivelet kerättiin, poistettiin kalkki, upotettiin parafiiniin ja leikattiin.
Safranin O-Fast Green -värjäys suoritettiin ja nivelruston morfologiaa tutkittiin valomikroskoopilla.
Rustovaurio arvioitiin käyttämällä modifioitua Mankin-pistemäärää, joka vaihteli välillä 0-14, ja korkeammat pisteet osoittavat vakavampaa rustovauriota.
Tulokset on esitetty taulukossa 6.
Taulukko 6. Polven nivelruston modifioidut ihmispisteet kussakin rottaryhmässä
Keskiarvo ± keskihajonta; n=10; pisteitä.
| ryhmä | Mankin pisteet | Vertailu mallin ohjaukseen |
|---|---|---|
| Normaali ohjaus | 1.25 ± 0.42 | - |
| Valeleikkaus | 1.58 ± 0.51 | - |
| Mallin ohjaus | 9.86 ± 1.25 | - |
| Positiivinen ohjaus | 5.62 ± 0.98 | P < 0,01 |
| Pienen annoksen koostumus | 7.89 ± 1.12 | P < 0,05 |
| Keskiannoksen koostumus | 5.25 ± 0.95 | P < 0,01 |
| Suuriannoksinen koostumus | 2.89 ± 0.65 | P < 0,01 |
Kuten taulukosta 6 näkyy, polvinivelruston Mankin-pisteet nousivat mallivertailuryhmässä P < 0,01.
Värjäys osoitti ruston pinnan vaurioita, kondrosyyttien menetystä ja merkittävää proteoglykaanien ehtymistä, mikä heijastui vähentyneenä safraniini O -värjäytymisenä.
Verrattuna mallikontrolliryhmään Mankin-pisteet laskivat kaikissa koostumusta saaneissa annosryhmissä P < 0,05 tai P < 0,01.
Suuria annoksia saaneiden ryhmän pisteet lähestyivät valeleikkauksen ryhmän arvoa. Värjäytyminen osoitti taipumusta kohti koskematonta ruston pintaa, säännöllisempää rustosolujen järjestelyä ja vähentynyttä proteoglykaanien häviämistä.
Nämä havainnot osoittavat, että koostumus voi estää ruston matriisin hajoamisen, suojata nivelrustoa, viivyttää osteofytoosin etenemistä ja käsitellä sekä taustalla olevia syitä että ilmenemismuotoja.
Koe 3: Koostumuksen pitkäaikaisturvallisuus
Kokeelliset materiaalit
[0044]Käytettiin seuraavia materiaaleja:
40 SPF Sprague–Dawley -rottaa, joissa on yhtä suuri määrä uroksia ja naaraita, paino 200 ± 20 g ja ikä 6–8 kuukautta.
Esillä olevan keksinnön mukainen koostumus: esimerkissä 1 valmistettu kuivattu uutejauhe, joka on formuloitu suspensioksi käyttämällä fysiologista suolaliuosta.
Fysiologinen suolaliuos.
Automaattinen biokemiallinen analysaattori.
Täydelliset verenkuvan määritysreagenssit.
Kokeelliset ryhmät
[0045]Rotat jaettiin satunnaisesti neljään ryhmään, 10 rottaa per ryhmä:
| ryhmä | Hoito |
|---|---|
| Normaali ohjaus | Fysiologinen suolaliuos, 10 ml/kg päivittäin suun kautta letkulla |
| Pienen annoksen koostumus | Koostumussuspensio, 2,0 g/kg päivittäin suun kautta letkulla, kuivatun uutejauheena ilmaistuna |
| Keskiannoksen koostumus | Koostumussuspensio, 4,0 g/kg päivittäin suun kautta letkulla, kuivatun uutejauheena ilmaistuna |
| Suuriannoksinen koostumus | Koostumussuspensio, 8,0 g/kg päivittäin suun kautta letkulla, kuivatun uutejauheena ilmaistuna; ilmoitettu olevan 10 kertaa ehdotettu kliininen annos |
Hallinto
[0046]Hoito annettiin kerran päivässä suun kautta letkulla 24 peräkkäisen viikon ajan.
Annostelun aikana tarkkailtiin rottien yleistä tilaa, mukaan lukien ruoan saanti, veden saanti, aktiivisuus, ruumiinpaino ja turkin kunto. Kaikki kuolemat kirjattiin.
Tulosmittaukset ja tulokset
Yleinen kunto
Annostelun aikana ruoan, veden saanti ja aktiivisuus olivat normaaleja kaikissa ryhmissä.
Kehon paino kasvoi asteittain ajan myötä, turkki pysyi sileänä, epänormaalia käyttäytymistä ei havaittu eikä rotta kuollut.
Nämä havainnot osoittavat, että koostumus ei aiheuttanut ilmeistä akuuttia tai pitkäaikaista toksisuutta rotilla.
[0048] Täydellinen verenkuva ja maksan ja munuaisten toiminta
24 viikon annon jälkeen veri otettiin talteen orbitaalisella näytteenotolla ja seerumi erotettiin sentrifugoimalla.
Automaattista biokemiallista analysaattoria käytettiin täydellisen verenkuvan parametrien sekä maksan ja munuaisten toimintaindeksien määrittämiseen, mukaan lukien:
Valkosolujen määrä, WBC.
Punasolujen määrä, RBC.
Hemoglobiini, Hb.
Verihiutaleiden määrä, PLT.
Alaniiniaminotransferaasi, ALT.
Aspartaattiaminotransferaasi, AST.
Seerumin kreatiniini, Cr.
Veren ureatyppi, BUN.
Tulokset osoittivat, että täydellinen verenkuva sekä maksan ja munuaisten toimintaparametrit olivat normaaleissa rajoissa kaikissa ryhmissä eivätkä eronneet normaalin kontrolliryhmän arvoista, P > 0,05.
Nämä havainnot osoittavat, että koostumuksen pitkäaikainen antaminen ei vaurioita maksan toimintaa, munuaisten toimintaa tai hematologista järjestelmää rotilla ja että koostumus tarjoaa korkean turvallisuuden ja soveltuu pitkäaikaiseen käyttöön.
Kääntäjän huomautus: Lähderyhmät suorittavat verenkuvatestin ja seerumin biokemiallisen analyysin. Käytännössä täydellinen verenkuva vaatii asianmukaisen kokoverinäytteen ja hematologisen tutkimuksen; sitä ei voida suorittaa erotetulle seerumille.
Loppulausunto
[0049]Vaikka esillä olevaa keksintöä on kuvattu yksityiskohtaisesti viitaten edellä oleviin suoritusmuotoihin, alan ammattilainen voi silti muokata noissa suoritusmuodoissa kuvattuja teknisiä ratkaisuja tai tehdä vastaavia korvauksia tiettyihin teknisiin ominaisuuksiin.
Kaikki esillä olevan keksinnön hengen ja periaatteiden mukaisesti tehdyt muutokset, vastaavat korvaukset tai parannukset kuuluvat esillä olevan keksinnön suojapiiriin.
Ennen kaupallistamista: mitä kehitystiimin tulisi varmistaa?
Toimitettu spesifikaatio tarjoaa hyödyllisen teknisen lähtökohdan, mutta useita kysymyksiä on ratkaistava ennen lisensointia, laajennusta, kliinistä kehitystä tai markkinointia.
1. Tarkista patentti ja taustalla olevat tutkimustiedot
Pyytää:
Patenttijulkaisun ja hakemusnumerot.
Hakijan ja keksijän tiedot.
Arkistointi-, julkaisu- ja myöntämispäivät.
Nykyinen oikeudellinen asema kaikilla suunnitelluilla markkinoilla.
Täydellinen alkuperäinen asiakirja ja mahdolliset myöhemmät muutokset.
Täydelliset eläintutkimusraportit, yksittäisten eläinten tiedot ja eettiset hyväksynnät.
Patenttiasiakirja ei ole viranomaishyväksyntä, eivätkä patenttivaatimukset itsenäisesti vahvista kokeellisia tuloksia. Kaupallinen käyttö voi myös vaatia erillisen toimintavapauden arvioinnin.
2. Ratkaise eläinten ja numeroiden epäjohdonmukaisuus
Molemmat tehokkuuskokeet ilmoittavat, että käytettiin 60 rottaa, mutta kukin kuvaa seitsemää 10 rotan ryhmää.
Ennen kuin luotat tuloksiin, sovita yhteen:
Ostettujen eläinten lukumäärä.
Jokaisen toimenpiteen kohteena oleva numero.
Mallin perustamisvirheet.
Poissulkemiset ja kuolemat.
Jokaisessa ryhmässä analysoitu lopullinen luku.
Tämä ero ei sinänsä osoita, että havainnot ovat pätemättömiä. Se tarkoittaa, että raportoitu tutkimuspopulaatio on tarkistettava.
Ilmoitetut ikä- ja ruumiinpainoyhdistelmät tulee myös tarkistaa alkuperäisistä eläinrekistereistä.
3. Hanki tilastollinen analyysi
Spesifikaatio ilmoittaa P-arvot, mutta ei kuvaa tilastollisia menetelmiä riittävän yksityiskohtaisesti.
Uskottavassa kehityspaketissa tulisi tunnistaa:
Ensisijainen ja toissijainen päätepiste.
Otoskoon perustelut.
Satunnaistaminen ja sokkomenetelmät.
Tilastolliset testit ja mallioletukset.
Useita vertailumenettelyjä.
Toistuvien mittausten käsittely kipututkimuksessa.
Vaikutusten koot ja luottamusvälit.
Sukupuolikohtaiset analyysit tarvittaessa.
Numeerisesti parempi keskiarvo ei ole sama kuin osoitettu tilastollinen paremmuus.Taulukoissa ei ole suoria tilastollisia vertailuja, jotka osoittaisivat paremmuuden alendronaattiin tai ibuprofeeniin verrattuna.
SamoinP > 0,05 ei vahvista vastaavuutta tai osoita haitan puuttumista.
4. Erottele mitatut tulokset ehdotetuista mekanismeista
Toimitetut tutkimukset raportoivat BMD:stä, seerumin markkereista, mikro-CT-parametreista, kipuun liittyvästä käyttäytymisestä, tulehdusmarkkereista ja rustopisteistä.
Ne eivät suoraan määritä jokaista kertomuksessa väitettyä mekanismia.
Esimerkiksi:
Parantunutta paikallista mikroverenkiertoa ei mitattu suoraan.
Kliinistä murtumien vähentämistä ei testattu.
Luun lujuuden testausta ei ole kuvattu.
Osteofyyttiregressiota ei kvantifioitu.
Pelkästään seerumimarkkereiden muutokset eivät muodosta spesifistä molekyylimekanismia.
Nimettyjen aktiivisten aineosien läsnäoloa ja pitoisuutta ei osoitettu analyysituloksilla.
Tarkin sanamuoto on siis"yhdenmukainen", "ehdottaa", tai"tukee lisätutkimuksia"eikä "todistaa mekanismin".
MMT-mallia tulisi myös kuvata ensisijaisesti annivelrikon mallisen sijaan, että niitä pidettäisiin korvattavissa kaikkien sairauksien kanssa, joita yleisesti kutsutaan "luun liikakasvuksi".
5. Luo raaka-aineen tunnistetiedot ja valmistuksen valvonta
Ennen hankintaa määritä jokaisen ainesosan hyväksytty laji, lääkeosa, käsittelymenetelmä ja sovellettava farmakopean standardi.
Tarkista eläinperäisten materiaalien osalta lajin tunnistetiedot, jäljitettävyys, laillinen hankinta ja määräpaikkamarkkinoiden tuontivaatimukset.
Määritä uutteen ja valmiin tuotteen osalta:
| Kehitysalue | Tietoja tarvitaan |
|---|---|
| Raaka-aineen laatu | Identiteetti, aitous, käsittelyn tila, toimittajan pätevyys ja epäpuhtauksien hallinta |
| Poisto | Liuotinmäärät uuttamista kohti, uuttosaanto, prosessin toistettavuus ja ainesosien talteenotto |
| Gelatiinia sisältävät ainesosat | Talteenotto ja jakelu veden ja etanolin käsittelyn aikana |
| Kemiallinen konsistenssi | Kromatografiset sormenjäljet ja perustellut kvantitatiiviset merkkiainemääritykset |
| Kuivaus | Määritelty painekäytäntö, kuivauksen päätepiste, kosteus ja prosessin stabiilisuus |
| Liuotinjäämät | Validoitu analyyttinen testaus etanolin hajun puuttumisen sijaan |
| Valmiit kapselit | Täyttöpainon säätö, uutteen sisällön tasaisuus, hajoaminen tai liukeneminen tarpeen mukaan |
| Säilyvyys | Stabiilisuustiedot ehdotetuissa pakkauksissa |
Identiteetin, kemiallisen ja biologisen standardoinnin, toksikologian, vuorovaikutuksen arvioinnin ja kliinisen tutkimuksen tärkeyttä käsitellään myös Turvallisten ja tehokkaiden kasvitieteellisten ravintolisien kehittämisessä.
6. Älä käsittele vesi- ja etanoliuutteita keskenään vaihtokelpoisina
Eläinkokeissa käytettiin esimerkin 1 vesiuutetta.
Paljon laajempi väitetty etanolialue -30 % - 95 % voisi tuottaa olennaisesti erilaisia ainesosien profiileja. Tämä on erityisen tärkeää kaavoille, jotka sisältävät gelatiinista johdettuja komponentteja.
Kaupallinen etanolilla uutettu versio vaatisi vertailevan luonnehdinnan ja asianmukaisen todisteiden yhdistämisstrategian. Se, että patentti sisältää molemmat menetelmät, ei osoita niiden vastaavuutta.
7. Luo ihmisturvallisuus- ja annoskehitysstrategia
24 viikkoa kestäneessä tutkimuksessa raportoidaan yleisiä havaintoja ja valikoituja laboratoriolöydöksiä, mutta se ei sisällä numeerisia turvallisuustaulukoita, yksityiskohtaisia elinten patologiaa, altistusmittauksia tai validoitua ihmisannosperustetta.
Väitettä, jonka mukaan 8,0 g/kg edustaa "10 kertaa ehdotettua kliinistä annosta", ei voida vahvistaa toimitetuista tiedoista.
Eläinten annoksia ei pitäisi muuttaa kuluttajaannoksiksi pelkällä kehon painon kertomalla. Annoksen valinta edellyttää uutteen koostumuksen, altistumisen, toksikologian ja aiotun populaation pätevää arviointia.
Samoin0,5 g uutetta kapselia kohden on formulaatioyksityiskohta – ei vakiintunut kliininen annossuositus.
Usein kysytyt kysymykset
Onko tämä kliinisesti todistettu luonnollinen hoito osteoporoosiin?
Ei. Toimitettu materiaali kertoo eläinkokeista. Se ei tarjoa kliinisiä ihmisillä tehtyjä tuloksia, jotka osoittaisivat osteoporoosin hoidon tehokkuuden, murtumien vähentämisen tai pitkän aikavälin turvallisuuden ihmisille.
Onko koostumus kokonaan kasvipohjainen?
Ei. Se sisältää hirvensarvigelatiinia ja kilpikonnankuorigelatiinia.
Näiden ainesosien poistaminen tai korvaaminen johtaisi muunneltuun formulaatioon. Alkuperäisiä eläintuloksia ei pitäisi automaattisesti liittää muunnetun tuotteen ansioksi.
Mikä on asiakirjan kaupallisesti hyödyllisin puoli?
Sen arvo on määritellyn formulaation, kuvatun valmistusprosessin ja useiden raportoitujen prekliinisten päätepisteiden yhdistämisessä.
Tämä voi auttaa kehitystiimiä päättämään, mitä kopioida, standardoida ja testata seuraavaksi.
Tarkoittaako ilmoitettu 33,3 % korkeampi BMD samanlaista hyötyä ihmisillä?
Ei. Luku on laskettu suuren annoksen ja käsittelemättömän mallikontrollin keskiarvoista 12 viikon rottikokeessa.
Se ei ole ihmisen tulos, ei koehenkilön sisäinen parannus lähtötasosta eikä ennustettu kliininen vaikutus.
Voiko kaavaa myydä lisäravinteena, joka hoitaa osteoporoosia?
Patentti ei vahvista tätä oikeutta.
Ainesosien kelpoisuus, tuotteen luokitus, väitteet ja myyntilupa on arvioitava kunkin lainkäyttöalueen osalta. Yhdysvalloissa osteoporoosin hoitoa koskevat väitteet liittyvät yleensä lääkesääntelyyn; täydennysmarkkinoinnin ei pitäisi olettaa, että tällaiset väitteet ovat sallittuja.
Mitä mahdollisen ostajan tulee kysyä ensin?
Aloita kolmella paketilla:
Immateriaaliomaisuus:patenttitunnisteet, omistus, oikeudellinen asema ja lisenssin laajuus.
Todisteet:täydellinen tutkimusraportit, raakatiedot, tilastolliset analyysit ja turvallisuusasiakirjat.
Valmistus:ainesosien tekniset tiedot, uutteen saanto, eräanalyysit, stabiiliustiedot ja prosessin säädöt.
Johtopäätös: Tutkimusjohtaja, ei vielä validoitu kaupallinen terapia
Tämä 16 ainesosaa sisältävä TCM-koostumus tarjoaa määritellyn lähtökohdan luonnollista alkuperää olevalle luun terveystutkimukselle. Sen raportoidut eläintiedot kattavat luun tiheyden, vaihtuvuusmarkkerit, mikroarkkitehtuurin, kipuun liittyvän käyttäytymisen, tulehduksen ja ruston histologian.
Vakavalle kehitystiimille seuraava askel ei ole vahvistaa väitteitä. Sen tarkoituksena on tarkistaa tutkimustiedot, toistaa löydökset, standardoida testattu uutte ja määrittää asianmukainen sääntely- ja kliinisen kehityksen reitti.
Näin formulaatiokonseptista tulee uskottava tuotekehitysmahdollisuus.
