Wuchanglahnan (Megalobrama Amblycephala) pernassa ja pää-munuaisissa esiintyvän immuunipuolustuksen ammoniakkityppialtistuksen arviointi Ⅱ
Nov 14, 2023
3. Keskustelu
Kuinka kalojen immuunijärjestelmä reagoi erilaisiin ympäristön epäpuhtauksiin, on tullut kuuma aihe [34–37]. Ammoniakkilla voi olla kaikkialla esiintyvä myrkyllinen ominaisuus, jolla voi olla odottamaton vaikutus vesieläinten terveyteen, koska kalat kärsivät usein kroonisesta ammoniakkistressistä realistisissa tilanteissa. Tässä tutkimuksessamme selvitettiin pitkäaikaisen ammoniakkialtistuksen vaikutuksia kalojen immuniteettiin ja sen mekanismiin.
Tässä kokeessamme seerumin kortisoli nousi merkittävästi ammoniakkialtistuksen pitoisuuden lisääntyessä, mikä viittaa stressiin Wuchang-lahnassa. Samankaltaisia tuloksia havaittiin piikkikampelalla (Scophthalmus ma. imus), karppilla (Cyprinuscarpio) ja nuorella tylppä lahnalla (Megalobrama). amblycephala) [32,38,39. Krooninen ammoniakkialtistus johti myös seerumin lysotsyymin, komplementin ja C4:n merkittävään laskuun tässä tutkimuksessa. Lysotsyymi, joka on synnynnäisen immuunitoiminnan indikaattori, on ensisijainen immuunientsyymi infektioiden torjunnassa (40). Komplementtijärjestelmällä, yhtenä siltana synnynnäisen immuniteetin ja hankitun immuniteetin välillä, on keskeinen rooli immuunikompleksien puhdistamisessa ja sairauksia aiheuttavien sairauksien tappamisessa. bakteerit ja virukset [41,42). Joissakin aikaisemmissa tutkimuksissa on raportoitu, että akuutti ammoniakkistressi voi estää lysotsyymiaktiivisuutta (17,43] ja vähentää kalojen C3- ja C4-proteiini- ja mRNA-tasoja (44-46]). Näin ollen nykyiset tulokset paljastivat, että krooninen ammoniakkistressi heikensi kalojen synnynnäinen immuniteetti.Tässä tutkimuksessa pitoisuudesta riippuvaisia ammoniakkipitoisuuksien nousuja havaittiin sekä pernassa että päämunuaisessa, mutta merkittävä ero havaittiin vain pernassa. Samanlaisia nousuja havaittiin pernassa japää-munuaisindeksit, mikä osoittaa, että ammoniakkistressi aiheutti vakavia vaurioita kahdelle tärkeimmälle immuunielimelle. Histologiset löydökset paljastivat lisäksi, että ammoniakin kerääntyminen saattaa olla pääasiallinen syy patologisiin vaurioihin pernassa ja pernassa.pää munuainen, joille oli ominaista lisääntyneet melanooma-makrofagikeskukset ja sytoplasman vakuolisaatio. Melano-makrofagikeskukset tunnetaan makrofagiaggregaatteina, ja niiden päätehtävät ovat soluperäisten fosfolipidien ja raudan varastointi erytrofagosytoosin jälkeen, resistenttien patogeenien kerääntyminen ja antigeenin prosessointi immuunivasteissa [47–51]. Melano-makrofagikeskusten lisääntynyt koko ja tiheys osoittavat usein, että kalat kokevat stressiä tai vaurioita tai vanhenevat [36,48,52]. Kwonin ja Changin tutkimus raportoi, että 5-päivä ammoniakkialtistus (4.0~10,4 mg/l ammoniakkityppeä yhteensä) aiheutti vakavan hemosideriinikertymän ja lisäsi melaniini-makrofageja mustaahven pernassa [ 53]. Samanlainen melano-makrofagikokoonpano havaittiin Pelteobagrus vachelliin pernassa, joka altistui 1 ja 5 mg/l kokonaisammoniakityppeä varten [17]. Lisäksi histopatologisten muutosten kvantitatiivinen arviointi osoitti, että jatkuvan ammoniakkistressin aiheuttaman patologisen vaurion aste oli suurempi pernassa kuin päämunuaisessa.
Orgaaninen kaskansuuute, jossa on 25 % KINAKOOSIDEA JA 9 % AKTEOSIDIA MUUNAISINFEKTIÖIN
Kalojen immuunielinten vauriot liittyvät aina immuunimolekyylien muutoksiin [35]. Vuonnasynnynnäinen immuunijärjestelmä,tulehdukselliset sytokiinit IL-1ja TNF- ovat tärkeitä tulehdusvasteen alkamisen ja moduloinnin säätelijöitä [54–57]. Sytokiinimolekyylien (TNF-, IL-1) alentuneet tasot edustavat solujen immunologisen toiminnan heikkenemistä, mikä johtaa viime kädessä korkeaan infektiotasoon ulkoisten stressitekijöiden vaikutuksesta [58–60]. Rajoitetut tutkimukset ovat dokumentoineet, että akuutti altistuminen 40 mg/l ammoniakkitypelle voi nostaa sytokiinien, kuten IL-1 ja TNF- piikkikampelan (Scophthalmus maximus) transkriptiotasoja, kun taas krooninen altistuminen suurelle ammoniakille (50 mg/l) kokonaisammoniakityppi) aiheutti päinvastaisen suuntauksen risteyksessä (Carassius auratus) [14,60]. Nykyiset tuloksemme osoittivat, että krooninen ammoniakkialtistus aiheutti huomattavaa laskua proteiini- ja transkriptiotasoissa pernan IL-1 ja TNF-, mitä tuki myös Spearman-korrelaatioanalyysi ammoniakkipitoisuuksien ja pernan IL-tasojen välillä{15} } ja TNF-. Samanlaisia tuloksia havaittiin myös päämunuaisessa. Nykyiset tietomme osoittivat, että krooninen ammoniakkialtistus häiritsi luontaista immuunipuolustusta estämällä tulehduksellisten molekyylien IL-1 ja TNF- transkription ja proteiinisynteesin kahdessa immuunielimessä, pernassa ja päämunuaisessa.
Luontaisen immuunipuolustusjärjestelmän lisäksi myös adaptiivisella immuniteetilla on ratkaiseva rooli kalojen immuunipuolustuksessa. IgM on ensimmäinen vasta-aine, jota erittää adaptiivinen immuunivaste uudelle infektiolle tai vieraalle antigeenille, joka ilmentyy pääasiassa kalojen pernassa ja pää-munuaisissa [61,62]. Pienemmät IgM-tasot voivat liittyä heikkoon adaptiiviseen immuniteettiin [63]. Tässä tutkimuksessa havaittiin merkittäviä laskuja proteiini- ja IgM:n transkriptiotasoissa pernassa, mutta ei päämunuaisessa, mikä osoittaa, että ammoniakkialtistuksella on estävä vaikutus pernan IgM:n tuotantoon. Qin et ai. raportoi, että altistuminen kokonaisammoniakityppelle 1 mg/l 48 tunnin ja 96 tunnin ajan vähensi merkittävästi igm:n transkriptiotasoja Pelteobagrus vachellii -lajin pernassa, mutta ei pää-munuaisessa [17]. Alentuneita IgM-tasoja havaittiin myös Rhynchocypris lagowskin kiduksista, pernasta ja aivoista, jotka altistettiin 0,99 mg/l ionisoimattomalle ammoniakille 96 tunnin ajan [18]. Spearman-korrelaatioanalyysimme osoitti lisäksi, että ammoniakkialtistuspitoisuus korreloi merkittävästi negatiivisesti pernan IgM:n kanssa, mutta ei merkittävästi korreloi pää-munuaisen IgM:n kanssa. Siten tutkimuksemme ehdotti, että krooninen ammoniakkistressi heikensi adaptiivista immuniteettia vain pernassa. Tämä saattaa viitata siihen, että perna on herkempi ympäristön ammoniakkistressille kuin päämunuainen. Yksi syy tähän hypoteesiin voi olla ammoniakkistressin aiheuttama poikkeava pernan ja pään munuaisen rakenteen heikkeneminen tässä tutkimuksessamme.
Immuunisoluissa laajalti levinneet TLR:t ovat tunkeutuvien patogeenien ensisijaisia antureita. Tässä tutkimuksessa TLR:ien transkription alentuneita tasoja havaittiin Wuchang-lahnan pernassa ja päämunuaisessa, mikä viittaa siihen, että ammoniakki voi aiheuttaa negatiivisia vaikutuksia TLR-signalointireitin kautta. Itse asiassa TLR:ien estyminen saattaa liittyä ammoniakkialtistuksen aiheuttamaan seerumin kortisolin nousuun. Carrizo et ai. osoitti, että kortisolihoito alensi TLR:ien mRNA-tasoja (tlr1/5 m/9/22) Oncorhynchus mykiss -myotubesissa [64]. Susarla et ai. havaitsivat, että kortisoli voisi vähentää sytokiinien (VEGF, CCL5, IFN-, CXCL-10, IL-8 ja GCSF) transkriptiotasoja ihmisen primaaristen sarveiskalvon fibroblastien TLR3- ja TLR4-stimulaation jälkeen [65]. Lisäksi TLR:n esto saattaa tarkoittaa TLR-signalointireittien lohkoa. MyD88-riippuvaista reittiä säätelevät kaikki TLR:t, ja MyD88-riippumaton reitti on omituinen TLR3- ja TLR4-signalointireiteille [66]. TLR-signalointi johtaa myös PI3 K-AKT -reitin aktivaatioon, mikä puolestaan aktivoi B-solut tuottamaan vasta-aineita ja syntetisoimaan tulehdusta edistäviä molekyylejä, kuten IL-1 ja TNF- NF-κB-signalointireitin kautta [67–69]. On syytä huomata, että traf6:n transkriptiotasot laskivat sekä pernassa että pään munuaisissa ammoniakkialtistuksen jälkeen, kun taas myd88:n ja pi3 k:n ilmentymisessä ei havaittu merkittäviä muutoksia. Näin ollen tuloksemme osoittivat, että ammoniakki häiritsi MyD88- -riippumatonta reittiä estämällä TRAF6:ta sekä pernassa että pään munuaisissa. Lisäksi TRAF6-aktivaatio voi laukaista alavirran NF-KB- ja MAPK-signaloinnin (p38, JNK ja ERK) aktivoitumisen, mikä lopulta indusoi erilaisten tulehduksellisten sytokiinien, mukaan lukien TNF- ja interleukiinin, tuotannon-1 /6/12 (IL-1 /6/12) [70,71]. Lisäksi TRAF6 on myös ratkaiseva CD40-signaloinnin välittäjä, joka säätelee IL-6- ja Ig-eritystä [72]. Tutkimuksessamme pernan erk1- ja nf-κb2-mRNA:iden sekä pää-munuaisen erk1-, jnk1- ja nf-κb1-mRNA:iden merkittävä heikkeneminen viittasi siihen, että ammoniakkialtistus tukahdutti alavirran NF-κB- ja MAPK-signalointimolekyylejä pernassa ja päässä. -munuainen. Lisäksi ammoniakkialtistus vähensi NF-kB-signalointia estämällä geenin nf-κb1 pernassa, mutta geenin nf-κb2 pää-munuaisessa, mikä heijastaa kudosspesifistä tulehdusreaktiotaperna ja pää-munuainen. Mitä tulee MAPK-signalointireittiin, ammoniakkialtistus esti merkittävästi pernan erk1:n ja pää-munuaisen erk1:n ja jnk1:n ilmentymistä. Spearman-korrelaatioanalyysin jälkeen havaitsimme, että ammoniakkialtistuspitoisuus korreloi merkittävästi negatiivisesti immuuniparametrien (IL-1, TNF- ja IgM) tasojen sekä TLR-signalointiin liittyvien geenien ilmentymisen kanssa pernassa ja pernassa. pää-munuainen. Tästä syystä tuloksemme viittaavat siihen, että krooninen ammoniakkialtistus voi heikentää synnynnäistä ja adaptiivista immuniteettia TLR/MyD{8}}riippumattoman signalointireitin kautta.
Korkeat IBR-arvot heijastivat lisääntyneitä biologisia vasteita ja organismien huonoa terveydentilaa [73]. Nykyiset tulokset IBR-arvoista kasvoivat ympäristön ammoniakkipitoisuuden nousun myötä sekä pernassa että pään munuaisissa. Tämä tulos oli yhdenmukainen histopatologiaa ja seerumi-immuuniparametreja koskevien tietojen kanssa. Lisäksi samalla ammoniakkistressipitoisuudella IBR-arvo oli korkeampi pernassa kuin päämunuaisessa, mikä edelleen osoitti, että ammoniakkistressin vaikutukset pernaan olivat vakavampia kuin Wuchang-lahnan päämunuaisissa.
4. Materiaalit ja menetelmät
4.1. Eläinten ylläpito ja kokeellinen pöytäkirja Nuori
Wuchang-lahna, jonka keskipaino oli 9,98 ± 0,48 g Tuanfeng Fisherystä (Hubei, Kiina), siirrettiin 300 litran lasikuitusäiliöihin, joissa ne toimitettiin juoksevina kloorattuina ja jatkuvasti ilmastettuina. vettä. Heidät totutettiin 14 päivän ajan ruokkimalla kaupallista ruokavaliota kahdesti päivässä (9:{{10}} aamulla ja 15:00 illalla). Alustavan kokeen jälkeen 96 tunnin LC50 ja ammoniakkitypen turvalliset pitoisuudet lahnapoikille todettiin 46.013 mg/L ja 4,601 mg/L. Siksi ammoniakin altistusalueeksi asetettiin 0 mg/l, 5 mg/l, 10 mg/l, 20 mg/l ja 30 mg/l ammoniakkityppeä. Kalat jaettiin satunnaisesti viiteen käsittelyryhmään, joissa oli kolme säiliötä, ja istutustiheys oli 20 nuorta säiliötä kohti. Ammoniakin kokeelliset pitoisuudet saatiin 10 g/l:n varastoliuoksesta, joka oli valmistettu reagenssilaatuisella ammoniakkikloridilla (BASFR, 99,5 %). Vakaiden ammoniakkikäsittelypitoisuuksien ylläpitämiseksi 1/2-koeliuos uusittiin joka päivä uudella ja yhtä suurella pitoisuudella ammoniakkityppiliuosta. Sillä välin kontrolliryhmälle tehtiin samanlainen käsittely ilmastetulla vesijohtovedellä. Todelliset ammoniakkitypen kokonaistasot kullekin hoidolle mitattiin neslerisoinnilla joka päivä. HQ40 D Water Analyzerin (Hach, Loveland, CO, USA) päivittäiset seurantatiedot osoittivat koko koejakson ajan, että veden lämpötila oli 25,0 ± 0,60 ◦C, liuenneen hapen pitoisuudet olivat yli 5,0 mg/L ja pH pidettiin arvossa. 7,55 ± 0,04, pienillä säädöillä käyttämällä 10 % H2SO4:a ja 10 % NaOH:a. Kaloja ruokittiin kaupallisella ruokavaliolla kahdesti päivässä samalla tavalla kuin totuttelussa.
4.2. Näytteiden kerääminen ja valmistelu
30-päivän kokeellisen altistuksen jälkeen kalat paastottiin ensin 48 tuntia ja nukutettiin sitten MS-222-liuoksessa. Kunkin nuoren ruumiinpaino mitattiin ennen dissektiota, ja veri otettiin välittömästi talteen suonista seerumin erottamiseksi myöhempää biokemiallisten parametrien määritystä varten. Kudokset (perna ja pää-munuainen) uutettiin ja punnittiin. Perna- ja pää-munuaisindeksit laskettiin käyttämällä kaavaa [kudoksen paino (g) / ruumiinpaino (g) * 100 %]. Kolmea yksittäistä pernaa ja päämunuaista kustakin ryhmästä käytettiin histopatologiseen analyysiin, ja muut jäädytettiin välittömästi -80 ◦C kudosten ammoniakkipitoisuuksien, immuniteettiparametrien ja geenitranskriptiotasojen analysoimiseksi. Tämän M. amblycephalaan tehdyn työn hyväksyi Huazhong Agricultural Universityn, Wuhan, Kiina (HZAUFI{8}}) eläinten hoito- ja käyttökomitea (IACUC).
4.3. Ammoniakin havaitseminen pernassa ja pää-munuaisessa
Ammoniakkitasojen analysointia varten kudosnäytteiden esikäsittely ja ammoniakin havaitseminen suoritettiin aikaisempien tutkimusten mukaisesti [74,75]. Yksityiskohtaiset testivaiheet löytyvät tukitiedoista (lisäteksti S1).
4.4. Seerumin immuuniparametrien määritys
Verinäytteet sentrifugoitiin (845 g, 20 min, 4 ◦C) seeruminäytteiden valmistusta varten. Jokaisella koeryhmällä oli kuusi toistoa ja yksi toisto sisälsi seerumin 10 yksilöstä samasta säiliöstä. Seerumin kortisoli määritettiin radioimmunomäärityksellä (RIA) käyttämällä Beijing North Institute of Biotechnology Co., Ltd:n (Peking, Kiina) (www.bnibt.com, 15. maaliskuuta 2020) sarjaa aiemman tutkimuksen mukaan [76]. Komplementin C3 ja komplementin C4 pitoisuudet ja lysotsyymin aktiivisuus mitattiin Jiancheng Bioengineering Instituten (Nanjing, Kiina) kaupallisilla sarjoilla (www.njjcbio.com, 15.3.2020).
4.5. Kudos-immuuniparametrien määritys
Kudosnäytteet viidestä saman ryhmän kalasta yhdistettiin yhdeksi kaksoiskappaleeksi ja homogenisoitiin 0,85 % natriumkloridilla, sitten sentrifugoitiin 845 × g:llä 15 minuuttia (4 ◦C) supernatantin keräämiseksi. Jokaisella koeryhmällä oli kuusi toistoa. Kuten aikaisemmissa tutkimuksissa [77, 78] on kuvattu, supernatanttia käytettiin IgM:n, IL-1:n, TNF- ja kokonaisproteiinin pitoisuuksien testaamiseen käyttämällä kaupallisia tarvikkeita. Kaikki sarjat ostettiin Jiancheng Bioengineering Institutelta (Nanjing, Kiina) (www.njjcbio.com, 15. maaliskuuta 2020).
4.6. Geeniekspressioanalyysi
Pernan ja pää-munuaisen immuunijärjestelmään liittyvien geenien Mrna-tasot testattiin aikaisemman tutkimuksen menetelmällä [79]. Yksityiskohtaiset tiedot testausmenettelystä löytyvät tukitiedoista (lisäteksti S2). Alukesekvenssit on lueteltu taulukossa 3. Sulakäyräanalyysi suoritettiin kullekin alukkeelle reaktion lopussa reaktion spesifisyyden osoittamiseksi. Sen jälkeen kun oli varmistettu, että kaikkien valittujen geenien monistustehot vaihtelivat välillä 90–110 %, suhteelliset Mrna-tasot laskettiin menetelmällä 2−∆∆Ct ja -aktiini sisäisenä kontrollina [80].
4.7. Histopatologinen arviointi
Perna- ja pää-munuaisnäytteet kiinnitettiin 10-prosenttisessa neutraalisti puskuroidussa formaliinissa, dehydratoitiin sitten etanolissa ja upotettiin parafiiniin. Lopuksi kudosviipaleet värjättiin hematoksyliinillä ja eosiinilla (H&E). Patologisten muutosten kvantitatiivinen analyysi suoritettiin aiempien tutkimusten mukaisesti [82,83]. Yksityiskohtainen analyysiprotokolla toimitetaan tukitiedoissa (lisäteksti S3).
4.8. Integroitu biomarkkerivasteanalyysi
IBR-analyysi on menetelmä, jolla integroidaan kaikki mitatut biomarkkerivasteet integratiiviseksi indeksiksi stressitasojen arvioimiseksi [84–86]. Tässä tutkimuksessa sitä käytettiin arvioimaan eri ammoniakkipitoisuuksien myrkyllisiä vaikutuksia Wuchang-lahnan pernaan ja päämunuaiseen 30-päiväaltistuksen jälkeen. Yksityiskohtaiset tiedot laskentamenettelystä on annettu tukitiedoissa (lisäteksti S4).
4.9. Tilastolliset analyysit
Kaikille arvoille suoritettiin yksisuuntainen varianssianalyysi, jota seurasi Dunnettin post hoc -testi keskiarvojen välisten erojen arvioimiseksi (SPSS 22.0, Chicago, IL, USA). Spear man -korrelaatioanalyysi valittiin ammoniakin kokonaispitoisuuksien, immuuniparametrien ja geenin ilmentymistasojen välisen suhteen määrittämiseksi. Normaalisuus ja varianssin homogeenisuus varmistettiin aiemmin. Erot mitattiin ja katsottiin merkittäviksi p-arvolla < 0,05.
5. Johtopäätökset
Tutkimuksemme tarjoaa todisteita siitä, että krooninen ammoniakkistressi nosti seerumin COR-arvoa, vähensi seerumin lysotsyymiä ja C3/C4:ää ja alensi IL-1:n, TNF- ja IgM:n proteiini- ja transkriptiotasoja sekä TLR-geenien ilmentymistasoja. /MyD88- riippumaton signalointireitti pernassa ja pää-munuaisessa M.Amblycephala. Lisäksi indeksit japatologinen vauriomolempiin immuunielimiin lisääntyi kudosten ammoniakin kertymisen myötä. Nämä havainnot osoittivat, että ammoniakin kertyminen pernaan ja päämunuaiseen aiheutti histopatologisia vaurioita ja indusoi immuunisuppressiota estämällä TLR:ien/MyD{1}}riippumattoman signaloinnin. Lisäksi kroonisen ammoniakkistressin haitallisten vaikutusten pernaan osoitettiin olevan vakavampia kuin Wuchanglahnan pää-munuaisissa.
Rahoitus: Tätä työtä tukivat yhdessä Kiinan kansallinen tutkimus- ja kehitysohjelma (2019 YFD0900303), MOF:n ja MARA:n Kiinan maatalouden tutkimusjärjestelmä (CAS-45-24) ja Kiinan kansallinen luonnontieteellinen säätiö (nro 32071621) .
Institutional Review Boardin lausunto: Noudatimme kaikkia paikallisia, kansallisia ja kansainvälisiä määräyksiä ja sopimuksia ja kunnioitimme normaaleja tieteellisiä eettisiä käytäntöjä. Tässä tutkimuksessa käytetyt näytteet tulivat pääasiassa kaupallisesti kalastettuja ihmisravinnoksi tarkoitettuja yksilöitä. Eläinprotokollan hyväksyi Huazhongin maatalousyliopiston (Wuhan, Kiina) (HZAUFI{0}}) Institutional Animal Care and Use Ethics Committee.
Ilmoitettu suostumus: Tietoinen suostumus saatiin kaikilta tutkimukseen osallistuneilta koehenkilöiltä.
Tietojen saatavuusilmoitus: Kaikki tätä tutkimusta varten luodut tietojoukot sisältyvät artikkeliin / lisämateriaaleihin.
Eturistiriidat: Kirjoittajat ilmoittavat eturistiriidoista.
Viitteet
1. Randall, DJ; Tsui, T. Ammoniakin myrkyllisyys kaloissa. Maaliskuu Pollut. Sonni. 2002, 45, 17–23. [CrossRef]
2. David, AA; Debbie, C.; Allen, WK; John, EY:n ionisoidun ja ionisoimattoman ammoniakin vuorovaikutus katkaravun toukkien lyhytaikaisessa selviytymisessä ja kasvussa, Macrobrachium rosenbergii. Biol. Sonni. 1978, 154, 15–31. [CrossRef]
3. Thurston, RV; Russo, RC; Vinogradov, GA Ammoniakin myrkyllisyys kaloille. pH:n vaikutus ionisoitumattomien ammoniakkilajien myrkyllisyyteen. Ympäristö. Sci. Technol. 1981, 15, 837-840. [CrossRef]
4. Armstrong, BM; Lazorchak, JM; Murphy, CA; Haring, HJ; Jensen, KM; Smith, ME Ammoniakin vaikutusten määrittäminen rasvapäiden (Pimephales promelas) lisääntymiseen. Sci. Koko ympäristö. 2012, 420, 127–133. [CrossRef] [PubMed]
5. Eddy, FB Ammoniakki suistoissa ja vaikutukset kaloihin. J. Fish Biol. 2005, 67, 1495–1513. [CrossRef]
6. Miron, DS; Moraes, B.; Becker, AG; Crestani, M.; Spanevello, R.; Loro, VL; Baldisserotto, B. Ammoniakin ja pH:n vaikutukset joihinkin hopeamonnien aineenvaihduntaparametreihin ja kidusten histologiaan, Rhamdia quelen (Heptapteridae). Vesiviljely 2008, 277, 192–196. [CrossRef]
7. Yu, C.; Huang, X.; Chen, H.; Godfray, HCJ; Wright, JS; Hall, JW; Gong, P.; Ni, S.; Qiao, S.; Huang, G.; et ai. Typen hallinta veden laadun palauttamiseksi Kiinassa. Nature 2019, 567, 516. [CrossRef] 8. Maailman terveysjärjestö (WHO). Maailmanlaajuinen yleiskatsaus juomaveden laatua koskevista kansallisista määräyksistä ja standardeista, 2. painos; Maailman terveysjärjestö: Geneve, Sveitsi, 2021; 66 p.
9. Passell, HD; Dahm, CN; Bedrick, EJ Ammoniakkimallinnus mahdollisen myrkyllisyyden arvioimiseksi kalalajeille RIO grandessa, 1989–2002. Ecol. Appl. 2007, 17, 2087–2099. [CrossRef]
10. Fan, B.; Li, J.; Wang, X.; Chen, J.; Gao, X.; Li, W.; Ai, S.; Gui, L.; Gao, S.; Liu, Z. Ammoniakin spatiotemporaalinen jakautuminen ja riskinarviointi makean veden lajien vesiekosysteemissä Kiinassa. Ecotox. Ympäristö. Saf. 2021, 207, 111541. [CrossRef]
11. Yue, F.; Pan, LQ; Xie, P.; Zheng, D.; Li, J. Immuunivasteet ja immuunijärjestelmään liittyvien geenien ilmentyminen uimaravussa Portunus trituberculatus, joka on alttiina kohonneelle ympäristön ammoniakki-N-stressille. Comp. Biochem. Physiol. A Mol. Integr. Physiol. 2010, 157, 246–251. [CrossRef]
12. Qin, CJ; Shao, T.; Zhao, DX; Duan, HG; Wen, ZY; Yuan, D.; Li, HT; Qi, ZM Ammoniakki-N:n ja patogeenin altistuksen vaikutus komplementin komponenttien 8 ja 8 ilmentymiseen tummaparhamonni Pelteobagrus vachellii -sellassa. Kala äyriäiset Immunol. 2017, 62, 107–115. [CrossRef] [PubMed]
13. Cheng, CH; Yang, FF; Ling, RZ; Liao, SA; Miao, YT; Kyllä, CX; Wang, AL Ammoniakkialtistuksen vaikutukset apoptoosiin, oksidatiiviseen stressiin ja immuunivasteeseen pufferfishissa (Takifugu obscurus). Aquat. Toxicol. 2015, 164, 61–71. [CrossRef]
14. Liu, BL; Jia, R.; Huang, B.; Lei, JL Ammoniakin ja tiivistymisstressin vuorovaikutteinen vaikutus immuunijärjestelmään liittyvien geenien ionisääntelyyn ja ilmentymiseen nuorten piikkikampeloiden (Scophthalmus maximus). Mar. Freshw. Behav. Physiol. 2017, 50, 179–194. [CrossRef]
15. Li, M.; Zhang, M.; Qian, Y.; Shi, G.; Wang, R. Ammoniakin myrkyllisyys keltaisessa monnissa (Pelteobagrus fulvidraco): Mekaaninen näkemys fysiologisesta myrkytyksen poistamisesta myrkytykseen. Kala äyriäiset Immunol. 2020, 102, 195–202. [CrossRef] [PubMed]
Wecistanchen tukipalvelu - Kiinan suurin vesisäiliön viejä:
Sähköposti:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Puhelin:+86 15292862950
Osta lisätietoja teknisistä tiedoista:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
