Laminaria Japonica - ja Cistanche Tubulosa -uutteiden yhdistelmähoidon tehokkuus hiusten kasvussa

Ota yhteyttä: emily.li@wecistanche.com

Kyungha Shin1# et ai

Koska päänahan hiustenlähtö on lisääntynyt viime aikoina jopa nuorilla, mikä vaikuttaa vakavasti yksilöiden elämänlaatuun,hiusten kasvua-Laminaria japonica -uutteen (LJE) stimuloivat vaikutukset jaCistanche tubulosaote (CTE) tutkittiin. Kun parranajon aikana oli varmistettu follikkelien anageenivaihe, urospuolisille C57BL/6-hiirille levitettiin ihon kautta 3-prosenttista minoksidiilia tai annettiin suun kautta LJE:n ja CTE:n yhdistelmiä.Cistanche tubulosaottaa talteen)21 päivän ajan. Minoksidiili edisti hiusten uudelleenkasvua ja lisäsi -glutamyylitranspeptidaasin (-GTP) ja alkalisen fosfataasin (ALP) aktiivisuutta. Lisäksi minoksidiili nosti epidermaalisen kasvutekijän (EGF) ja verisuonten endoteelin kasvutekijän (VEGF) tasoja. LJE:n ja CTE:n yhteishallinto（Cistanche tubulosaottaa talteen)54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg, CTE (Cistanche tubulosaottaa talteen)vaikutti synergistisesti hiusten kasvuun, verrattavissa 3 prosentin minoksidiiliin. LJE tehosti ensisijaisesti ALP-aktiivisuutta, kun taas CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen)lisäsi sekä -GTP- että ALP-aktiivisuuksia sekä EGF- ja VEGF-ilmentymiä. In vivo -ilmapussitulehdusmalli, karrageenin aiheuttama verisuonten erittyminen ja kohonneet typpioksidi- ja prostaglandiini-E2-pitoisuudet eritteissä tukahdutettiin synergistisesti LJE:n ja CTE:n yhteiskäytöllä.（Cistanche tubulosaottaa talteen). Lisäksi yhdistelmähoito esti olennaisesti tulehduksellisten solujen infiltraatiota. Tulokset viittaavat siihen, että yhdistelmähoito suun kautta LJE:n ja CTE:n kanssa（Cistanche tubulosaottaa talteen)sopimattomat annokset ja suhteet estävät hiustenlähtöä ja parantavat hiustenlähtöä, mikä saattaa osittain johtua niiden anti-inflammatorisesta vaikutuksesta.

Avainsanat Hiusten kasvu, tulehdus, Laminaria japonica,Cistanche tubulosa, yhdistelmähoito

Cistanche tubulosaotteessa on monia toimintoja

Viime aikoina päänahan hiustenlähtö on lisääntynyt jopa nuorilla, mikä vaikuttaa vakavasti yksilön elämänlaatuun. Vaikka kaljuuntuminen ei ole yksi terveysongelmista, se voi aiheuttaa syvää psykologisesti epämukavaa sosiaalista stressiä. Siksi on erittäin mielenkiintoista kehittää uusia ehkäiseviä ja/tai terapeuttisia materiaaleja hiustenlähtöä ja uudelleenkasvua varten. Huolimatta miljardin dollarin markkinoista, saatavilla on muutamia tällä hetkellä tehokkaita tuotteita [1].
Karvatupet uusiutuvat kasvun (anageeni), regression (katageeni), lepäämisen (telogeenin) ja irtoamisen (eksogeenin) aikana [2]. Katageenin aikana monet follikkelisolut läpikäyvät ohjelmoidun solukuoleman (apoptoosin) [3], mikä pienentää follikkelien kokoa, kun follikkelit tulevat telogeeniin. Harvoin kiertävien epiteelisolujen aktivoituminen, jotka sijaitsevat follikkelien pullistuma-alueella, saa aikaan follikkelien regeneraation seuraavan anageenivaiheen alkaessa [4]. Kantasolujen jälkeläiset muodostavat uuden follikulaarisen matriisin varhaisen anageenin aikana, ja karvavarsi ja juuren sisätuppi ovat peräisin näistä suhteellisen erilaistumattomista matriisisoluista [5]. On hyvin tunnettua, että karvatupen koko ja anageenivaiheen kesto säätelevät vastaavasti hiusvarren kokoa (halkaisijaa) ja pituutta. Tätä hiusten syklistä kasvua säätelevät erilaiset kasvutekijät.

Minoksidiili, finasteridi ja Propecia ovat kaupallisesti saatavilla hidastamaan hiustenlähtöä ja helpottamaan hiusten kasvua. Minoksidiili on verisuonia laajentava aine, joka helpottaa sivuvaikutuksiahiusten kasvua[6], mikä saattaa johtua sen ravinteita tarjoavasta ja kaliumkanavaa avaavasta toiminnasta [7,8]. Minoksidiili tehoaa androgeeniseen hiustenlähtöön muiden kaljuuntuneiden hoitojen ohella, vaikka sen teho häviää kuukausien kuluessa hoidon lopettamisen jälkeen. Vertailun vuoksi, finasteridi ja Propecia, hyvänlaatuisen eturauhasen liikakasvun ja eturauhassyövän hoitoaineet, on rekisteröity monissa maissa androgeneettiseen hiustenlähtöön (miesten kaljuuntuminen). Finasteridi ja Propecia ovat synteettisiä antiandrogeeneja, jotka estävät tyypin II 5- reduktaasia, entsyymiä, joka muuttaa testosteronin dihydrotestosteroniksi (DHT) karvatuppien alaosassa olevissa papillasoluissa [9].

Laminaria japonica, Undaria pinnatifida ja Cladosiphon okamuranus, jotka ovat laajalle levinneitä monissa maissa, ovat olleet itämaisen lääketieteen terapeuttisia lääkkeitä pitkään. Aiemmissa tutkimuksissa fukoidaania, sulfaattipolysakkaridikompleksia, oli uutettu ja tunnistettu merilevistä, ja sillä on varmistettu olevan antioksidanttisia, antikoagulatiivisia, syöpää ja tulehdusta estäviä vaikutuksia [10,11]. Sen jälkeen on osoitettu fukoidaanin hyödylliset vaikutukset tulehdussairauksiin, iskemiaan, immuunijärjestelmän toimintahäiriöihin ja kasvaimiin [12,13]. Toisaalta,Cistanche tubulosauutetta (CTE) on myös käytetty laajalti perinteisessä lääkinnässä Kiinassa. CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen)parantaa verenkiertoa alentamalla veren kolesterolitasoa [14]. Äskettäin raportoitiin, että CTE vähensi tuumorinekroositekijän (TNF-) ja interleukiinin-4 (IL-4) tuotantoa, jotka ovat tärkeimpiä tekijöitä typpioksidin (NO) tuotannossa tulehdusreitillä. [15]. Osoitimme myös, että fukoidaani Laminaria japonica -uutteesta (LJE) ja CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen)synergistisesti vaimentanut tulehdusta in vitro ja in vivo [16]. Erityisesti on osoitettu, että ihon (erityisesti kyynelrauhasen) tulehduksella oli läheinen yhteys hiustenlähtöön [17]. Siten hiustenlähtöhoidon anti-inflammatoriset näkökohdat ovat nousemassa esiin [18].
Verenkiertoa ja tulehdusta parantavien toimintojen perusteella tutkimme LJE:n ja CTE:n yhdistelmätehoa.（Cistanche tubulosa ottaa talteen)päällähiusten kasvuaja taustalla olevat mekanismit, verrattuna 3 prosentin Minoksidiiliin (Hyundai Pharmaceutical, Soul, Korea), joka on hyvin tunnettuhiusten kasvuatehostaja.

Cistanche tubulosauute on hyväHiusten kasvu

Materiaalit ja menetelmät

Materiaalit

LJE ja CTE (Cistanche tubulosaottaa talteen)saatiin Misuba RTech Co., Ltd.:ltä (Asan, Korea). Kuivattu Laminaria japonica -jauhe uutettiin puhdistettuun veteen 60 oC:ssa 24 tunnin ajan, suodatettiin 0,45 μm:n kalvon läpi, desinfioitiin ja suihkukuivattiin.Cistanche tubulosauutettiin 80-prosenttiseen etanoliin, desinfioitiin, konsentroitiin ja kuivattiin. LJE ja CTE (Cistanche tubulosaottaa talteen)pidettiin 4 oC:ssa, sekoitettiin (1:3) ja liuotettiin puhdistettuun veteen ennen käyttöä ja annettiin suun kautta tilavuudessa 5 ml/kg.
Eläimet
Urospuoliset C57BL/6-hiirethiusten kasvuatutkimus ja urospuoliset ICR-hiiret tulehdustutkimusta varten hankittiin Daehan Biolinkistä (Eumseong, Korea) ja sijoitettiin huoneeseen, jossa ympäristöolosuhteet olivat vakiot (23±2ºC; suhteellinen kosteus 45-65 prosenttia; 12-tunnin valo -tumma sykli; 150-300 luksia kirkkaus). Pellettirehua ja puhdistettua vettä oli saatavilla ad libitum. Kaikki eläinkokeet hyväksyi Korean Chungbukin kansallisen yliopiston (CBNU) Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC), ja ne suoritettiin CBNU:n laboratorioeläintutkimuskeskuksen (SOP) standardien mukaisesti.

Hoito hiusten kasvua varten

Kun anageenivaihe oli varmistettu tarkkailemalla tasaisesti vaaleanpunaista ihon väriä C57BL/6-hiirten (6 viikkoa vanha, n=8/ryhmä) selän ihossa telogeenivaiheessa tapahtuneen leikkaamisen jälkeen, karvat ajeltiin [1,19 ,20]. Seuraavasta päivästä lähtien valittiin hiiret, joilla ei ollut näkyviä naarmuja, ja suun kautta
hoidettiin LJE:llä (18 tai 54 mg/kg), CTE:llä (54 tai 162 mg/kg) tai niiden seoksella (18 plus 54 tai 54 plus 162 mg/kg) kerran päivässä 21 päivän ajan. Pienet LJE:n (18 mg/kg) ja CTE:n (54 mg/kg) annokset olivat peräisin arvioiduista ihmisannoksista 100 mg/keho (70 kg) ja 300 mg/ruumis ruumiinpainon pinta-alan muuntamisen jälkeen (Km{14}). } ihmiselle/km=3 hiirelle). Suuret annokset LJE:tä ja CTE:tä（Cistanche tubulosaottaa talteen)määritettiin 3-kertaiseksi, yksin tai yhdistelmänä maksimaalisten synergististen vaikutusten arvioimiseksi [16]. Minoksidiilia (3 prosenttia, 0,2 ml) levitettiin paikallisesti kerran päivässä ajeltulle iholle samassa aikataulussa LJE/CTE-hoidon kanssa.

Karkea havainto hiusten kasvusta

Päivinä 3-päivän välein parranajon jälkeen ja hoidon aikana hiiret nukutettiin kevyesti dietyylieetterillä ja niiden selästä otettiin valokuvia. Karvojen uudelleenkasvun suhde (uudelleenkasvualue/ajeltu alue) valokuvissa analysoitiin käyttämällä tietokoneistettua kuva-analyysijärjestelmää (Imageinside, Daejeon, Korea).

Hiustuppien mikroskooppinen tutkimus

Päivinä 14 ja 21 hiiret tapettiin syväanestesiassa dietyylieetterillä ja niiden selkänahat poistettiin [1]. Selän iho leikattiin kahteen osaan. Formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotetut kudosleikkeet (halkaisijaltaan 5 μm) yhdestä osasta värjättiin hematoksyliini-eosiinilla karvatuppien lukumäärän ja histologisten löydösten tutkimiseksi. Toinen osa kudoksesta jäädytettiin nestetypessä entsyymimääritystä ja immunomääritystä varten.

Entsyymiaktiivisuuden määritys

Ihokudos homogenisoitiin 4 tilavuudessa fosfaattipuskuria (pH 7,4). Homogenaattia sentrifugoitiin nopeudella 3, 000 rpm 20 minuuttia, ja supernatanttia käytettiin -glutamyylitranspeptidaasin (-GTP) ja alkalisen fosfataasin (ALP) aktiivisuuksien määrittämiseen käyttämällä p-nitrofenyylifosfaattia (PNPP)-DEAV:tä. substraatti [1,21].

Cistanche tubulosa

Kasvutekijöiden kvantifiointi

Epidermaalinen kasvutekijä (EGF) ja verisuonten endoteelikasvutekijä (VEGF) määritettiin käyttämällä entsyymikytkettyjen immunosorbenttimääritysten (ELISA) kittejä (R&D Systems, Minneapolis, USA) valmistajan ohjeiden mukaisesti [1,22].

Tulehduksen hoitoon

ICR-hiiriä (7 viikkoa vanha, n=8/ryhmä) hoidettiin suun kautta LJE:llä (18 tai 54 mg/kg), CTE:llä（Cistanche tubulosaottaa talteen)(54 tai 162 mg/kg) tai niiden seos (18 plus 54 tai 54 plus 162 mg/kg) kerran päivässä 7 päivän ajan [16]. LJE:n ja CTE:n ensimmäisenä päivänä（Cistanche tubulosaottaa talteen)hiirille injektoitiin ihonalaisesti 10 ml steriiliä ilmaa takapuolelle pussin muodostamiseksi [16,23,24]. 2 ja 5 päivän kuluttua pussiin injektoitiin uudelleen 5 ml ilmaa. Tunti viimeisen LJE:n ja CTE:n jälkeen（Cistanche tubulosaottaa talteen)käsittelyssä pussiin injektoitiin 1 ml karrageenia (1 % suolaliuoksessa; Sigma-Aldrich, St. Louis, USA) tai sen vehikkeliä (suolaliuos).

Eritteiden analyysi

Ilmapussi pestiin 1 ml:lla kylmää suolaliuosta 6 tuntia karrageeniruiskeen jälkeen, ja huuhtelunesteen nettotilavuus kirjattiin [16]. Tulehdussolujen, mukaan lukien neutrofiilit, monosyytit ja lymfosyytit, kokonaismäärät määritettiin käyttämällä colter-laskuria.

NO:n ja prostaglandiini E2:n (PGE2) pitoisuudet määritettiin Griess-reagenssilla (Sigma-Aldrich) ja entsyymi-immunoanalyysillä (EIA) käyttämällä vastaavasti Correlate-EIA-kittiä (Assay Designs, Ann Arbor, USA) [16].

Tilastollinen analyysi

Tiedot esitetään keskiarvona ± standardivirhe. Tilastollinen merkitsevyys määritettiin yksisuuntaisella varianssianalyysillä, jota seurasi posthoc Tukeyn monivertailutesti. P-arvot<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">

Tulokset

Minoksidiilin (3 prosenttia), vertailumateriaalin, käyttö helpotti huomattavastihiusten kasvuaC57BL/6-hiirillä, jotka peittävät lähes täydellisen (92,4 prosenttia) ajetun alueen (kuvat 1, 2B) verrattuna 29,2 prosenttiin normaalissa kasvussa (kuvat 1, 2A) päivänä 21. Vaikkakin vähemmän tehokas kuin minoksidiilisovellus , LJE:n suun hoito helpotti myöshiusten kasvua, mikä johti 33,5 ja 69,1 prosentin peittoon annoksilla 18 ja 54 mg/kg (kuvat 1, 2C, 2D). CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen)oli myös tehokas parantamaanhiusten kasvuasaavuttaen 73,6 ja 80,4 prosentin peiton annoksella 54 ja 162 mg/kg (kuvat 1, 2E, 2F). Erityisesti yhdistelmähoito suurilla LJE-annoksilla (54 mg/kg) ja CTE:llä（Cistanche tubulosaottaa talteen)(162 mg/kg) paransi merkittävästihiusten kasvuapäivästä 12 alkaen, verrattavissa minoksidiilin vaikutukseen (kuvat 1, 2H), vaikka LJE:n (18 mg/kg) ja CTE:n pienet annokset（Cistanche tubulosaottaa talteen)(54 mg/kg) saa aikaan synergistisen vaikutuksen vain alkuvaiheessa (kuviot 1, 2G).

Kuva 1. Minoksidiililla tai Laminaria japonica -uutteella (LJE) ja/tai käsiteltyjen hiirten karvojen uudelleenkasvun aika.Cistanche tubulosauute (CTE). ,

○ normaali; ● Minoksidiili (3 prosenttia) sovellus; △, 18 mg/kg LJE; ▼, 54 mg/kg LJE; □, 54 mg/kg CTE; ■ 162 mg/kg CTE; ◇ 18 mg/kg LJE plus 54 mg/kg CTE; ◆, 54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen).

Kuva 2. Edustavat karvat kasvuhavainnot hiirillä, joita on käsitelty minoksidiililla tai Laminaria japonica -uutteella (LJE) ja/taiCistanche tubulosaote (CTE) päivänä 21.

A, normaali; B, minoksidiili (3 prosenttia) sovellus; C, 18 mg/kg LJE; D, 54 mg/kg LJE; E, 54 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen); F, 162 mg/kg CTE; G, 18 mg/kg LJE plus 54 mg/kg CTE; H, 54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen).

Verrattuna normaaleihin karvatuppeihin (kuva 3A), Minoksidiilin käyttö paransi karvatuppien eheyttä, jolloin tuli isommat follikkelit ja paksummat hiusvarret (kuva 3B). Tällaisia ​​vaikutuksia havaittiin myös LJE:llä ja/tai CTE:llä käsiteltyjen hiirten nahoissa（Cistanche tubulosaottaa talteen)(Kuvat 3C-3H). Erityisesti LJE:n ja CTE:n yhdistelmähoidon karvatuppea vahvistava teho (Cistanche tubulosaottaa talteen)oli verrattavissa minoksidiiliin.

Kuva 3. Edustavat mikroskooppiset löydökset karvojen uudelleenkasvusta hiirillä, joita on käsitelty minoksidiililla tai Laminaria japonica -uutteella (LJE) ja/taiCistanche tubulosaote (CTE) päivänä 21.

A, normaali; B, minoksidiili (3 prosenttia) sovellus; C, 18 mg/kg LJE; D, 54 mg/kg LJE; E, 54 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen); F, 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen); G, 18 mg/kg LJE plus 54 mg/kg CTE; H, 54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg CTE

Minoksidiilin käyttö lisäsi karvatupet anageenivaiheeseen indusoivan -GTP:n aktiivisuutta 90-120 prosenttia päivinä 14 ja 21 verrattuna normaalin ihon tasoon (kuva 4). LJE (54 mg/kg) lisäsi myös entsyymiaktiivisuutta, vaikka vaihteluita oli suuria. CTE:llä oli samanlaisia ​​vaikutuksia, mikä lisäsi merkittävästi -GTP-aktiivisuutta päivänä 14. Mielenkiintoista on, että LJE:n ja CTE:n yhdistelmähoito（Cistanche tubulosaottaa talteen)lisäsi entsyymiaktiivisuutta edelleen korkeammaksi kuin silloin, kun uutteita käytettiin yksinään.
ALP-aktiivisuus, luun kasvun ja angiogeneesin merkkiaine, lisääntyi merkittävästi ihossa päivinä 14 ja 21 minoksidiilin paikallisen käytön jälkeen (kuvio 5). LJE ja CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen)lisäsi myös ALP-aktiivisuutta oraalisen annon jälkeen annoksesta riippuvalla tavalla. Erityisesti entsyymiaktiivisuutta paransi synergistisesti yhdistelmähoito LJE:n ja CTE:n kanssa.

Kuva 4. Minoksidiilin (MXD, 3 prosenttia) tai Laminaria japonica -uutteen (LJE) ja/taiCistanche tubulosauute (CTE) (mg/kg) -glutamyylitranspeptidaasin (-GTP) aktiivisuuteen hoitopäivinä 14 (A) ja 21 (B).

*Poikkeaa merkittävästi normaalista (Nor) kontrollista (s<>

Kuva 5. Minoksidiilin (MXD, 3 prosenttia) tai Laminaria japonica -uutteen (LJE) ja/taiCistanche tubulosauute (CTE) (mg/kg) alkalisen fosfataasin (ALP) aktiivisuudesta hoitopäivinä 14 (A) ja 21 (B).

*Poikkeaa merkittävästi normaalista (Nor) kontrollista (s<>

EGF:n analyysissä hyvin tunnettuhiusten kasvuatekijä, minoksidiilin käyttö paransi EGF:n tasoa 3,5-kertaisesti normaaliin kontrolliin verrattuna sekä päivinä 14 että 21 (kuvio 6). LJE (18 mg/kg) lisäsi EGF:ää vain päivänä 21, kun taas CTE (162 mg/kg) lisäsi tuotantoaan huomattavasti päivinä 14 ja 21. On mielenkiintoista huomata, että LJE:n ja CTE:n yhdistelmähoito（Cistanche tubulosaottaa talteen)jopa pienillä annoksilla osoitti merkittäviä synergistisiä vaikutuksia.

Minoksidiilikäsittely nosti myös VEGF-tasoa 50-80 prosenttia kontrolliarvon yläpuolelle (kuva 7). Vaikka LJE oli tehoton, CTE (Cistanche tubulosaottaa talteen)sillä oli merkittäviä parantavia vaikutuksia. Lisäksi LJE:n ja CTE:n yhdistelmähoito（Cistanche tubulosaottaa talteen)osoitti synergististä aktiivisuutta varhaisessa vaiheessa päivänä 14.

Kuva 6. Minoksidiilin (MXD, 3 prosenttia) tai Laminaria japonica -uutteen (LJE) ja/taiCistanche tubulosauutetta (CTE) (mg/kg) epidermaalisen kasvutekijän (EGF) pitoisuudesta hoitopäivinä 14 (A) ja 21 (B).

*Poikkeaa merkittävästi normaalista (Nor) kontrollista (s<>

Kuva 7. Minoksidiilin (MXD, 3 prosenttia) tai Laminaria japonica -uutteen (LJE) ja/taiCistanche tubulosauutetta (CTE) (mg/kg) verisuonten endoteelin kasvutekijän (VEGF) pitoisuudesta hoitopäivinä 14 (A) ja 21 (B).

*Poikkeaa merkittävästi normaalista (Nor) kontrollista (s<>

Karrageenin injektio ICR-hiiren ilmapussiin lisäsi eritetilavuutta pussissa 6-kertaiseksi kontrollitasoon verrattuna (taulukko 1). Tällainen lisääntynyt erittyminen vaimensi merkittävästi hoito LJE:llä (18 ja 54 mg/kg) tai CTE:llä（Cistanche tubulosaottaa talteen)(54 ja 162 mg/kg). Erityisesti yhdistelmähoito LJE:llä ja CTE:llä vähensi edelleen eritteen määrää yksittäisiin vaikutuksiin verrattuna. Tulehdussolujen lukumäärä lisääntyi dramaattisesti karrageeniruiskeella: neutrofiilien, monosyyttien ja lymfosyyttien kontrollitasot olivat 34,6-, 4,2- ja 24,9-kertaiset (taulukko 1). Kuitenkin LJE ja CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen)vähensi merkittävästi tulehdussoluja annoksesta riippuvaisilla tavoilla, joissa LJE oli jonkin verran parempi kuin CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen). Synergistisiä vaikutuksia tulehdussolujen infiltraatiossa saavutettiin odotetusti antamalla samanaikaisesti LJE:tä ja CTE:tä（Cistanche tubulosaottaa talteen).
Samanaikaisesti pussissa tapahtuvan tulehduksellisten solujen infiltraation kanssa, NO- ja PGE2-pitoisuudet pussissa lisääntyivät myös dramaattisesti karrageeniruiskeen jälkeen (taulukko 1). Verrattuna LJE:n, CTE:n mietoon vaikutukseen（Cistanche tubulosaottaa talteen)alensi merkittävästi NO-pitoisuutta. LJE:n ja CTE:n yhdistelmähoito（Cistanche tubulosaottaa talteen)laski edelleen NO-tasoa annoksesta riippuvaisella tavalla. Samalla tavalla kohonnut PGE2-taso vaimensi synergistisesti LJE:n ja CTE:n yhdistelmähoitoa (taulukko 1).

Keskustelu

Ihmisen päässä on keskimäärin 100,{1}} karvatuppea. Elämän aikana jokainen follikkeli kasvaa ja irtoaa noin 20 kertaa, mikä osoittaa 100 säikeen päivittäistä hiustenlähtöä [25]. Hiustenlähtö, mukaan lukien hiustenlähtö ja kaljuuntuminen, on miehille ja naisille ahdistava tila, erityisesti nyky-yhteiskunnassa. Siksi on erittäin tärkeää kehittää uusia hoitoja, jotka estävät hiustenlähtöä ja edistävät hiusten kasvua. Tässä suhteessa vaihtoehtoinen lääketiede on herättänyt tutkijoiden kiinnostusta.

Ikääntymiseen liittyvät morfologiset, histokemialliset ja biokemialliset näkökohdat miesten kaljuuntumisesta on paljastettu useissa kantopyrstömakakeja koskevissa tutkimuksissa. Miestyyppisessä kaljuuntumisessa telogeenivaihe piteni, kun taas anageenivaihe lyheni. Näin ollen katsotaan, että hiustenlähdön parantamiseksi hiustuppien pidentymisen ylläpitäminen, joka tapahtuu varhaisesta anageenista puoliväliin, on erittäin tärkeää [26]. Tässä tutkimuksessa osoitimmehiusten kasvua- helpottaa LJE:n ja CTE:n yhdistelmähoidon toimintaa（Cistanche tubulosaottaa talteen). Mikä tärkeintä, LJE:n (54 mg/kg) ja CTE:n (162 mg/kg) yhdistelmäresepti osoitti erinomaista hiusten kasvuaktiivisuutta huolimatta uutteiden oraalisesta antamisesta. Erityisesti yhdistelmähoidon vaikutus oli verrattavissa suuren pitoisuuden (3 prosenttia) puhdistetun minoksidiilin iholle levittämiseen, vaikka LJE:n ja CTE:n aktiivisten aineosien pitoisuudet（Cistanche tubulosaottaa talteen)iholla suun kautta annon jälkeen ei vahvistettu.
Pyörivän hiiren ihossa -GTP-aktiivisuus on voimakasta anageenin aikana, mutta heikkenee suuresti telogeenin aikana [27]. Ihossa entsyymi esiintyy yksinomaan karvatuppien ulko- ja sisäjuurituppeissa, jotka ovat alle talirauhasten tason, joissa -GTP:tä ei ole [27]. Vertailun vuoksi, ALP ilmentyy näkyvästi pilosebaceous-yksiköissä, ja aktiivisuus lisääntyy karvan uudelleenkasvun alueella. ALP angiogeenisenä tekijänä parantaa ravinnon saantia ihon papilleille ja siten lisää paksuutta anageenin aikana [28]. Kuitenkin vahvistettiin, että ALP-aktiivisuus väheni hiustenlähtöisessä ihossa [21]. Mekanistisessa tutkimuksessa vertailuyhdiste Minoksidiili lisäsi merkittävästi -GTP:n ja ALP:n aktiivisuutta, mikä viittaa siihen, että minoksidiili helpottaahiusten kasvuaei vain indusoimalla karvatupet
anageenivaiheeseen, mutta myös parantamalla verenkiertoa angiogeneesin kautta. Koska LJE lisäsi ALP-aktiivisuutta, ehdotetaan, että LJE:llä on myönteinen vaikutushiusten kasvuaangiogeenisen potentiaalinsa kautta, kuten aiemmasta tutkimuksesta pääteltiin, että fukoidaanilla, LJE:n aktiivisella ainesosalla, on verenkiertoa parantavaa vaikutusta [29]. Vertailun vuoksi CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen)tehosti sekä -GTP- että ALP-aktiivisuutta, mikä viittaa sen vaikutuksiin anageenifaasin induktioon sekä verenvirtauksen paranemiseen. -GTP- ja ALP-entsyymeihin kohdistuvien synergististen vaikutusten mukaan uskotaan, että hiusten kasvua voidaan saavuttaa tehokkaammin antamalla LJE:tä ja CTE:tä samanaikaisesti.（Cistanche tubulosaottaa talteen).
On hyvin tunnettua, että erilaiset sytokiinit ja kasvutekijät, mukaan lukien EGF ja VEGF, osallistuvat hiusten morfogeneesin ja kasvun säätelyyn [30,31]. On mielenkiintoista huomata, että ihon papillasoluista peräisin olevilla tekijöillä on kemotaktisia vaikutuksia ympäröiviin soluihin, mikä puolestaan ​​johtaahiusten kasvua[32]. EGF ilmentyy hiustuppien kehityksen yhteydessä [33,34]. Vaikka sekä EGF:n että sen reseptorin (EGFR) ilmentyminen uloimmassa juurekuoressa vähenee follikulaarisen kasvun päätyttyä, niiden ilmentyminen palautuu, kun follikkelisolut tulevat anageenifaasiin. VEGF:llä on tärkeä rooli angiogeneesissä tulehdusreaktion ja kasvaimen kehittymisen aikana [35]. Erityisesti verisuoniverkosto liittyy läheisesti hiusten kasvukiertoon [36-38]. Siksi vahvistettiin, että VEGF:n geeniekspressio vaihtelee ihmisen hiusten syklin mukaan [39].

Tämän tutkimuksen tuloksista selitetään, ettähiusten kasvua- Minoksidiilin edistävä vaikutus voi johtua sen mahdollisesta EGF:n ja VEGF:n tehostamisesta, jotka helpottavat follikkelien kasvua ja angiogeneesiä. Vaikka LJE ei vaikuttanut VEGF-ilmentymiseen, se lisäsi EGF-pitoisuutta ihossa oraalisen annon jälkeen. Vertailun vuoksi CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen)oli tehokas sekä EGF:n että VEGF:n ilmentymisessä. Erityisesti LJE ja CTE（Cistanche tubulosaottaa talteen)lisäsi kasvutekijöiden ilmentymistä.

Karvojen pidentymisen lisäksi karvatuppien eheys parani huomattavasti Minoksidiili-, LJE- ja/tai CTE-hoidon jälkeen.（Cistanche tubulosaottaa talteen)mikroskooppisessa tutkimuksessa. Ihmispotilailla ja eläinmalleilla hiustenlähtöön ja kaljuuntumiseen liittyvän alkuvaiheessa follikkelien eheys heikkeni ja karvan paksuus pieneni, kun taas uusiutuvissa hiuksissa follikkelien eheys ja varren paksuus palautuivat. Mielenkiintoista on, että tällaisia ​​positiivisia vaikutuksia hiuskomponenttien eheyteen ja uudelleenkasvuun saavutettiin LJE plus CTE:n oraalisella annolla.（Cistanche tubulosaottaa talteen), jossa vaikutus oli verrattavissa suuren minoksidiilipitoisuuden paikalliseen käyttöön. Siksi suun kautta otettavan LJE:n ja CTE:n yhdistelmän odotetaan olevan（Cistanche tubulosaottaa talteen)voi olla resepti suhteellisen kätevä verrattuna Minoksidiilin ihon käyttöön.
Hiiren hiustenlähtömallissa steroideille herkkä lymfosyyttien infiltraatio karvatuppien ympärillä on yleistä, ja siinä on samanlainen kuvio kuin ihmisen kyynelrauhastulehdukseen liittyvässä hiustenlähtössä [17,40]. Tässä tutkimuksessa LJE ja CTE heikensivät merkittävästi karrageenin aiheuttamaa ihotulehdusta.（Cistanche tubulosaottaa talteen)hoito; eli verisuonten erittyminen ja tulehdussolujen infiltraatio tukahdutettiin synergistisesti. Kvantitatiivisessa analyysissä tärkeimmät tulehdusvälittäjät NO ja PGE 2 olivat oleellisesti hallinnassa LJE:n ja CTE:n oraalisen yhteisantamisen jälkeen.Cistanche tubulosaottaa talteen). Mielenkiintoista on, että koska LJE:n anti-inflammatorinen aktiivisuus oli korkeampi kuin puolipuhdistetulla fukoidaanilla [16], oletetaan, että LJE:ssä voi olla fukoidaanin lisäksi muita aktiivisia ainesosia.

Yhdessä tulokset osoittavat, että yhdistelmähoito suun kautta LJE:n ja CTE:n kanssa（Cistanche tubulosaottaa talteen)parantaa hiustenlähtöä säätelemällä kasvutekijöitä ja niihin liittyviä entsyymitoimintoja ja osittain tulehdusta ehkäisevän potentiaalin kautta. Siksi ehdotetaan, että yhdistelmä sisältää LJE:n ja CTE:n（Cistanche tubulosaottaa talteen)sopimattomat kliiniset annokset ja suhteet voivat olla ehdokas resepti hiustenlähtöpotilaille.

Cistanche tubulosauutetuotteet

Kiitokset

Tätä tutkimusta tukivat taloudellisesti Chungcheongin johtavan teollisuustoimiston talousalueen johtava teollisuuskehitys, Korean teknologian kehittämisinstituutti (KIAT) ja tietotalouden ministeriö (MKE) sekä osittain korkean lisäarvon elintarviketeknologian kehitysohjelma. , Maatalous-, elintarvike- ja maaseutuministeriö (MAFRA; apurahanumero 113034-3).

Eturistiriita

Kirjoittajat vakuuttavat, että näiden tulosten julkaisemiseen ei liity taloudellista eturistiriitaa.

Lähde: "Laminaria japonica- ja Cistanche tubulosa -uutteiden yhdistelmähoidon tehokkuus hiusten kasvussa"Kyungha Shin1# et ai

--- Lab Anim Res 2015: 31(1), 24-32http://dx.doi.org/10.5625/lar.2015.31.1.24

VIITTEET

1. Kim JS, Kang BS, Park HJ, Kim DY, Hwang SY, Nam SY, Yun YW, Lee BJ. Yrttiuuteseosten vaikutusta hiusten uudelleenkasvuun edistäminen C3H/HeJ-hiirillä. J Biomed Res 2009; 10(3): 99-108.
2. Paus R, Cotsarelis G. Hiustuppien biologia. N Engl J Med 1999; 341(7); 491-497.
3. Cotsarelis G. Karvatuppi: kuolee huomion saamiseksi. Am J Pathol 1997; 151(6): 1505-1509.
4. Cotsarelis G, Sun TT, Lavker RM. Leimaa säilyttävät solut sijaitsevat pilosebaceous-yksikön pullistuma-alueella: vaikutukset follikulaarisiin kantasoluihin, hiusten kiertokulkuun ja ihon karsinogeneesiin. Cell 1990; 61(7): 1329-1337.
5. Oshima H, Rochat A, Kedzia C, Kobayashi K, Barrandon Y. Morphogenesis and renewing of hair follicles from aikuisten multipotent kantasolut. Cell 2001; 104(2): 233-245.
6. Burton JL, Marshall A. Minoksidiilin aiheuttama hypertrichoosi. Br J Dermatol 1979; 101(5): 593-595.
7. Meisheri KD, Cipkus LA, Taylor CJ. Minoksidiilisulfaatin aiheuttaman verisuonten laajentumisen vaikutusmekanismi: rooli lisääntyneessä K plus läpäisevyydessä. J Pharmacol Exp Ther 1988; 245(3): 751-760.
8. Buhl AE, Waldon DJ, Baker CA, Johnson GA. Minoksidiilisulfaatti on aktiivinen metaboliitti, joka stimuloi karvatupeita. J Invest Dermatol 1990; 95(5): 553-557.
9. Kaufman KD, Dawber RP. Finasteridi, tyypin 2 5alfa-reduktaasin estäjä, miehillä, joilla on androgeneettinen hiustenlähtö. Expert Opin Investig Drugs 1999; 8(4): 403-415.
10. Feldman SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damont EB. Leathesia difformiksen fukoidaanifraktioiden antiviraaliset ominaisuudet. Phytomedicine 1999; 6(5): 335-340.
11. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. Laminaria japonicasta uutettujen alhaisen molekyylipainon fukoidaanifraktioiden mahdollinen antioksidantti- ja antikoagulanttikapasiteetti. Int J Biol Macromol 2010; 46(1): 6-12.
12. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan parantaa munuaisten verenkiertoa munuaisiskemian/reperfuusiovaurion varhaisessa vaiheessa rotalla. J Physiol Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.
13. Li N, Zhang Q, Song J. Laminaria japonicasta Wistar-rotissa uutetun fukoidaanin toksikologinen arviointi. Food Chem Toxicol 2005; 43(3): 421-426.
14. Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ, Su MH. Cistanche tubulosa -uutteen, perinteisen kiinalaisen raakalääkkeen, hypokolesteroleemiset vaikutukset hiirillä. Am J Chin Med 2009; 37(6): 1125-1138.
15. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. Cistanche tubulosasta eristetyn akteosidin estävä vaikutus kemiallisen välittäjän vapautumiseen ja tulehdussytokiinien tuotantoon RBL-2H3- ja KU812-soluilla. Planta Med 2010; 76(14): 1512-1518.
16. Kyung J, Kim D, Park D, Yang YH, Choi EK, Lee SP, Kim TS, Lee YB, Kim YB. Laminaria japonica fukoidanin ja Cistanche tubulosa -uutteen synergistiset anti-inflammatoriset vaikutukset. Lab Anim Res 2012; 28(2): 91-97.
17. Chee E, Fong KS, Al Jajeh I, Nassiri N, Rootman J. Kyynelrauhasen tulehduksen ja alopecia areatan yhteys. Orbit 2015; 34(1): 45-50.
18. Brzezinska-Wcislo L, Bergler-Czop B, Wcislo-Dziadecka D, LisSwiety A. Uusia näkökulmia alopecia areatan hoidossa. Postepy Dermatol Alergol 2014; 31(4): 262-265.
19. Hattori M, Ogawa H. Biochemical analysis ofhiusten kasvuaikääntymisen ja entsyymitoiminnan näkökulmista. J Dermatol 1983; 10(1): 45-54.
20. Lee SH, Lee HJ, Baek IJ, Yon JM, Nam SY, Lee BJ, Yun YW, Kim YB, Hwang SY, Hong JT. DREAMMO® hiuspohjavoiteen vaikutushiusten kasvuaedistäminen C57BL/6-hiirten hiustenlähtömallissa. Lab Anim Res 2006; 22(1): 91-96.
21. Handjiski BK, Eichmüller S, Hofmann U, Czarnetzki BM, Paus R. Alkalisen fosfataasin aktiivisuus ja lokalisaatio hiiren karvasyklin aikana. Br J Dermatol 1994; 131(3): 303-310.
22. Cross MJ, Dixelius J, Matsumoto T, Claesson-Welsh L. VEGF-reseptorin signaalin transduktio. Trends Biochem Sci 2003; 28(9): 488-494.
23. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YB. Angelica gigasin etanoliuutteen anti-inflammatoriset vaikutukset karrageeni-ilmapussin tulehdusmallissa. Exp Anim 2009; 58(4): 431-436.
24. Kim D, Park D, Kyung J, Yang YH, Choi EK, Lee YB, Kim HK, Hwang BY, Kim YB. Houttuynia cordata superkriittisen uutteen tulehdusta ehkäisevät vaikutukset karrageeni-ilmapussitulehdusmallissa. Lab Anim Res 2012; 28(2): 137-140.
25. Rebora A. Androgeneettisen hiustenlähtö. J Am Acad Dermatol 2004; 50(5): 777-779.
26. Shirai A, Ikeda J, Kawashima S, Tamaoki T, Kamiya T. KF19418, uusi yhdistehiusten kasvuain vitro- ja in vivo -hiirimallien edistäminen. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 213-218.
27. Kawabe TT, Kubicek MF, Johnson GA, Buhl AE. Gamma-glutamyylitranspeptidaasiaktiivisuuden käyttö hiuskierron ja anageenin induktion merkkiaineena hiiren karvatuppeissa. J Invest Dermatol 1994; 103(1): 122-126.
28. Hamada K, Suzuki K. Biokemiallisten indeksien arviointi hiussyklin merkkiaineena C3H-hiirissä. Exp Anim 1996; 45(3): 251-256.
29. Park SJ, Lee KW, Lim DS, Lee S. Sulfatoitu polysakkaridi fukoidaani stimuloi ihmisen rasvaperäisten kantasolujen osteogeenista erilaistumista. Stem Cells Dev 2012; 21(12): 2204-2211.

30. Danilenko DM, Ring BD, Pierce GF. Kasvutekijät ja sytokiinit karvatuppien kehityksessä ja pyöräilyssä: viimeaikaiset näkemykset eläinmalleista ja kliinisen hoidon mahdollisuudet. Mol Med Today 1996; 2(11): 460-467.
31. Ozeki M, Tabata Y. In vivo edisti hiirien karvatuppien kasvua kasvutekijöiden kontrolloidulla vapautumisella. Biomateriaalit 2003; 24(13): 2387-2394.
32. Fujie T, Katoh S, Oura H, Urano Y, Arase S. Dermal papilla cell-derived tekijän kemotaktinen vaikutus ulompiin juurituppisoluihin. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 206-212.
33. Stenn KS, Paus R. Hiustuppien kiertokulku. Physiol Rev 2001; 81(1): 449-494.
34. Chapman RE, Hardy MH. Ihonsisäisesti ruiskutetun ja paikallisesti levitetyn hiiren epidermaalisen kasvutekijän vaikutukset merinolampaiden villan kasvuun, ihoon ja villarakkuloihin. Aust J. Biol. Sci 1988; 41(2): 261-268.
35. Dvorak HF, Brown LF, Detmar M, Dvorak AM. Verisuonten läpäisevyystekijä / verisuonten endoteelin kasvutekijä, mikrovaskulaarinen hyperpermeabiliteetti ja angiogeneesi. Am J Pathol 1995; 146(5): 1029-1039.
36. Ellis RA, Moretti G. Verisuonimallit, jotka liittyvät katageenisiin hiusrakkuloihin ihmisen päänahassa. Ann NY Acad Sci 1959; 83: 448-457.
37. Stenn KS, Fernandez LA, Tirrell SJ. Rotan vibrissa-karvatuppien angiogeeniset ominaisuudet liittyvät sipuliin. J Invest Dermatol 1988; 90(3): 409-411.
38. Yano K, Brown LF, Detmar M. Control ofhiusten kasvuaja follikkelien koko VEGF-välitteisen angiogeneesin avulla. J Clin Invest 2001; 107(4): 409-417.
39. Lachgar S, Charveron M, Ceruti I. VEGF-mRNA:n välinpitämättömien karvatupen vaiheiden jakautuminen fluoresenssiin situ -hybridisaatiolla yhdistettynä konfokaaliseen lasermikroskopiaan. Julkaisussa: Hair Research for the Next Millennium (Van Neste DJJ, toim.), Elsevier, Amsterdam, 1996; ss 407-12.
40. Freyschmidt-Paul P, Sundberg JP, Happle R, McElwee KJ, Metz S, Boggess D, Hoffmann R. Alopecia areatan kaltaisen hiustenlähdön onnistunut hoito kosketusherkistäjällä, neliöhapon dibutyyliesteri (SADBE) C3H/HeJ-hiirillä . J Invest Dermatol 1999; 113(1): 61-68.