Saponiinien kokonaispitoisuuden määritys Boschniakia Rossican ja Herba Cistanchesissa spektrofotometrialla Ⅰ

Abstrakti:

Tavoite Tämä kvantitatiivinen menetelmä määritetään Boschniakia rossican ja saponiinien kokonaismäärästäHerba vesisäiliötja sisällöstäkokonaissaponiinit määritetään． Menetelmät Salidrosidi valittiin vertailuaineeksi, värireaktiota käytettiin vanilliinin ja perkloorihapon kanssa. Sitten Boschniakia rossican ja Herba cistansien kokonaissaponiinipitoisuus määritettiin 523 nm:ssä spektrofotometrialla. Ｒtulokset Salidrosidikäyrä oli lineaarinen alueella 0． 05133 - 0. 2567 mg · ml – 1 korrelaatiolla 0． 9992, ja lineaarinen regressioyhtälö oli Y=1． 611X + 0. 0573. Boschniakia rossican salidrosidin keskimääräinen saanto oli 99. 68 %, kun ＲSD on 1. 68 % (n=6); ja Herba-etäisyyksillä salidrosidin keskimääräinen saanto oli 101. 18 % ja ＲSD on 0. 94 % (n=6)). Johtopäätös Menetelmä on tarkka, yksinkertainen ja luotettava. Joten sitä voidaan käyttää Boschniakia rossica- ja Herba cistanches -saponiinien kokonaispitoisuuden määrittämiseen.

Avainsanat:Boschniakia rossica;Herba vesisäiliöt; Saponiinit yhteensä; Päättäväisyys; Spektrofotometria; Salidrosidi

KUINKA KAUVAN KESTÄÄ, ETTÄ CISTANCHE TOIMII?

Cistanche deserticola Y. C. Ma ja Bosehniakia rossica Fedtseh et Flerov ovat Orobanchiaceae-heimoon kuuluvia loislääkekasveja. Cistanche deserticola on loiskavi, joka elää aavikkopuun Haloxylon ammodendronin juurissa. Sitä valmistetaan pääasiassa Xinjiangissa ja Alxa Leaguessa, Sisä-Mongoliassa. Se tunnetaan "aavikon ginsenginä" alhaisen tuoton ja korkean lääkearvon vuoksi. Heinäsirkkaa [1] tuotetaan kotimaani koillisosassa [2]. Kansanperinteen mukaan sillä on kuolemattomuuden vaikutus, joten se on nimetty koilliseen "ikuisen ajan ruohoksi". Sitä käytetään munuaisten vajaatoiminnasta johtuvaan impotenssiin, vyötärön ja polvien kylmäkipuun, suolen kuivumiseen ja ummetukseen. Se voi ravita ja vahvistaa kehoa, hidastaa ikääntymistä, ja se on aito lääkelähde koillisessa [3]. Molemmilla on samanlaiset vaikutukset, ja molemmilla on munuaisia ​​vahvistavia, yangia vahvistavia, suolistoa kostuttavia ja laksatiivisia vaikutuksia [4]. Li Shizhenin Ming-dynastian "Compendium of Materia Medica" -kirjan Cistanche deserticolaa koskevien tietojen mukaan "Tämä aine on tonisoiva, mutta ei karkea, joten sitä kutsutaan rauhalliseksi. On harvinaista saada sitä Congrongista, joten se on täynnä Cistanche deserticola." Toisin sanoen Cistanche deserticolaa käytettiin kerran vaihtoehtoisena lääkeaineena Cistanche deserticolalle. Nykyaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että sekä Cistanche deserticolalla että Estuary deserticolalla on farmakologisia vaikutuksia, kuten ikääntymistä estäviä [5, 6], väsymystä [7, 8], immuunitoimintaa parantavia [9, 10] ja muistia parantavia vaikutuksia [{{ 12}}].

Grasshopperin ja Cistanche deserticolan kokonaisglykosidien pitoisuudella on perusteellisen tutkimuksen arvo. Molemmat sisältävät saponiineja, haihtuvia öljyjä, sokereita, aminohappoja ja muita komponentteja. Tutkijat ovat raportoineet vertailevista tutkimuksista haihtuvien öljyjen, sokereiden, aminohappojen ja muiden näiden kahden komponenttien komponenteista [4, 14, 15], mutta näiden kahden kokonaisglykosidipitoisuuden määrittäminen Kirjallisuudessa ei ole raportoitu. . Cistanche deserticolan pääkomponentit ovat fenyylipropanoidiglykosidit (sarja glukosideja A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K) [16], ja Cistanche deserticola on fenyylietanoidiglykosidit (Cistanche deserticolan sarja )[17,18], näiden kahden saponiinit ovat samanlaisia, ja niillä on samanlainen komponentti, salidrosidi. Uskomme, että glykosidit ovat molempien tärkeitä vaikuttavia aineita, ja tutkimme spektrofotometrian käyttöä kokonaisglykosidien pitoisuuden määrittämiseen. , tarjota teoreettinen perusta Echinacea deserticola- ja Cistanche deserticola -varojen edelleen kehittämiselle ja hyödyntämiselle.

1 Materiaalit ja välineet

1. 1 Materiaali ja reagenssit: Amaranth officinale, kerätty Changbai-vuoren ympäristöstä, tunnistettu Orobanaceae-heimon kasveksi

Kuivattu koko Orobanche coerulescens -kasvi, näyte pestään ja vesi valutetaan pois

Erottele, laita vakiolämpötilaiseen kuivauslaatikkoon 40 asteeseen, kuivaa vakiopainoon, murskaa, laita 40 meshin siivilän läpi ja valmista

[19]; Cistanche deserticola, Hohhot Enhe Trading Co., Ltd., tunnistettu luetteloituksi

Cistanche deserticola Y. C. Ma:n kuivattua lihaa

Varret, pestyt, ilmakuivatut, kuivatut vakiopainoon, murskattu, läpäisty 40-verkkoseulan läpi, laitettu sivuun; punainen

Crassuside-vertailuaine (toimittaja China Institute of Pharmaceutical and Biological Products, eränumero 110818

- 200404, sisällön määrittämiseen); kaikki käytetyt kokeelliset reagenssit ovat kotimaista analyyttistä laatua.

1. 2 instrumenttia 752N UV-näkyvä spektrofotometri (Shanghai Jingke); Tu-1901 pari

Säteen UV-spektrofotometri (Beijing Puxi General Co., Ltd.); elektroninen analyyttinen vaaka

AL104 1/100,000 (Mettler-Toledo Instrument Shanghai Co., Ltd.); FW-80

Nopea yleismurskain (Shandong Hualu Electric Heating Instrument Co., Ltd.).

2 menetelmää

2. 1 Vertailuliuoksen valmistaminen

Käytä analyyttistä vaakaa salidrosidin 15, 40mg tarkasti punnitsemiseen, liuotetaan metanoliin, siirrä 25-mittapulloon ja säädä tilavuus merkkiin. Valmistele sisältämään 0,0 % salidrosidia millilitrassa. 616 mg:n liuosta käytetään vertailuliuoksena ja se suljetaan jääkaapissa myöhempää käyttöä varten.

2. 2 Testiliuoksen valmistaminen

Punnitse Grasshopper- ja Cistanche deserticolan lääkejauheet tarkasti analyyttisellä vaakalla. 2. 0g, aseta se pyöreäpohjaiseen pulloon, lisää 40 ml 90-prosenttista etanolia, kuumenna ja refluksoi Grasshopper-uutto kerran ja kuumenna ja palautusjäähdytä Cistanche deserticola kahdesti, kumpikin uuttoaika on 1,5 tuntia, sen jälkeen imusuodatus, yhdistä suodos, konsentroi kuivaksi vesihauteessa, lisää 25 ml vettä liukenemaan, uuta 3 kertaa petrolieetterillä, 25 ml joka kerta, hävitä petrolieetterineste ylemmästä kerroksesta ja jatka sitten uuttamista 3 kertaa vedellä kyllästetyllä n-butanolilla. 25 ml joka kerta, yhdistä kolme n-butanoliuutetta, haihduta n-butanolineste vesihauteessa vetokaapissa, laimenna se metanolilla 10 ml:n mittapulloon, sekoita hyvin, mittaa sitten tarkasti 1 ml liuosta ja laimenna se metanolia 25 ml:n tilavuuteen. pullo, sekoita hyvin ja käytä sitä testiliuoksena myöhempää käyttöä varten.

2. 3. Mittausaallonpituuden valinta

tulee 1. Aseta 25 ml vertailuliuosta ja testiliuosta asteikolla varustettuihin koeputkiin, joissa on tulpat, haihduta metanoliliuotin vakiolämpötilaisessa vesihauteessa 60 asteessa ja lisää 0. 2 ml 5-prosenttista vanilliini-jääetikkahappoliuosta ja 0,8 ml perkloorihappoliuosta saatettiin reagoimaan 60-asteisessa vesihauteessa 15 minuutin ajan. Ota koeputki ulos ja jäähdytä sitä välittömästi jäävedellä 5 minuutin ajan. Lisää 5 ml jääetikkaa ja ravista hyvin [20]. Valmistele vertailuliuos metanolilla samalla tavalla. Liuos värinkehityksen jälkeen alistettiin aallonpituuspyyhkäisylle ja salidrosidin värireaktion jälkeen maksimiabsorptioaallonpituus 523 nm valittiin välillä 400-800 nm Escherichia colin ja Cistanche deserticolan kokonaisglykosidien mittausaallonpituudeksi. Kontrolliaineen ja testiaineen skannauskuviot on esitetty kuvassa 1.

2. 4. Lineaarisen suhteen tutkiminen: Piirrä vertailuliuos 0 pipetillä tarkasti. 5,1. 0,

1. 5,2. 0,2. 5 ml laitettiin suljettuihin koeputkiin, jotka oli numeroitu 1 - 5, ja värireaktio suoritettiin kohdan "2.3" vaiheiden mukaisesti. Nollakoe suoritettiin metanolilla rinnakkaisissa olosuhteissa ja absorbanssi mitattiin aallonpituudella 523 nm. Absorbanssi A (Y ) on ordinaatta, pitoisuus mg·ml-1

(X) on abskissa, suoritetaan lineaarinen regressio ja regressioyhtälö on Y {{0}}. 611X +0. 0573 (r=0. 9992), tulos osoittaa, että salidrosidin massapitoisuus on 0. Lineaarinen suhde on hyvä alueella 05133-0.2567mg·ml-1. Tulokset näkyvät kuvassa 2.

2. 5 Vakavuustesti

Mittaa tarkasti sopiva määrä Grasshopperin ja Cistanche deserticolan testiliuosta, kehitä väri kohdassa "2.3" olevan menetelmän mukaisesti ja mittaa absorbanssiarvo tasaisesti 6 kertaa 30 minuutin sisällä. Tämä osoittaa, että 30 minuutin kuluessa värin kehittymisestä, Grasshopper ja Cistanche deserticola. Testiliuoksen stabiilisuus on suhteellisen hyvä. Tulokset on esitetty taulukossa 1.

2. 6 Tarkkuustesti

Mittaa tarkasti sopiva määrä vertailuliuosta, kehitä väri edellä kohdassa "2.3" olevan menetelmän mukaisesti ja mittaa absorbanssi 6 kertaa jatkuvasti. Tulokset on esitetty taulukossa 2. Tulokset osoittavat, että tämän koelaitteen tarkkuus on hyvä.

Kuva 1 Salidrosidivertailuaineen (A), heinäsirkkatestiliuoksen (B) ja cistanche deserticola -testiliuoksen (C) ohutkerrosskannauskuviot

2. 7. Toistettavuustesti.

Punnitse tarkasti 6 annosta heinäsirkka- ja cistanche deserticola -jauhetta, jokainen annos sisältää 2, 0 g, kuumentamisen ja palautusjäähdytyksen jälkeen käyttämällä määritettyä optimaalista uuttoprosessia, seuraa kohdan "2.3" vaiheita ja mittaa absorbanssi aallonpituudella 523 nm. Mittaustulokset on esitetty taulukoissa 3 ja 4.

2. 8. Näytteen palautusnopeuden testi.

Punnitse tarkasti kuusi näytettä Grasshopper- ja Cistanche deserticolasta, joiden glykosidien kokonaismassaprosentti on tiedossa. Jokainen näyte on 12 mg. Lisää tarkasti 2 ml salidrosidivertailuliuosta. Seuraa kohtaa "2. 2" Uutetaan näyte kohdan alta, määritetään glykosidin kokonaispitoisuus värin kehittymisen jälkeen kohdan "2.3" mukaisesti ja lasketaan näytteen talteenottonopeus. Tulokset on esitetty taulukoissa 5 ja 6.