Muutokset antioksidanttiaktiivisuudessa entsyymin käymisen aikana

LUKU 4 Muutokset antioksidanttiaktiivisuudessa entsyymin käymisen aikana

Hedelmät ovat runsaasti ravintoaineita, ja niissä on monia lajikkeita. Aineiden tuotanto käymisen aikana on monimutkainen ja monipuolinen, ja niistä on monia tutkimuksiaantioksidanttiaktiivisuus. Ihmiset tutkivat ja löytyvät aina etsimässä ruokia, joista on hyötyäihmisten terveys, joten entsyymeistä on tullut kuuma aihe viime vuosina. Perinteinen entsyymin tuotantoprosessi on saada entsyymejä hedelmien ja vihannesten luonnollisella käymisellä. Aikaisemman tutkimuksen perusteella tämä artikkeli lisää 4 hyödyllistä käymisbakteeria. Nämä bakteerit itsessään on myös entsyymissä. Bakteerien lisäyksen jälkeen fermentointiprosessin mikro -organismien lukumäärä ja tyyppi muuttuu. Mitä vaikutusta tällä muutoksella on sen antioksidanttivaikutukseen? Edellisessä luvussa otimme omenoita esimerkkinä yksityiskohtaisesta selityksestä. Kokeellisen ryhmän ja kontrolliryhmän antioksidanttisen aktiivisuuden vertailu eri entsyymipitoisuuksissa osoitti, että entsyymin antioksidanttiaktiivisuus kokeellisessa ryhmässä oli suurempi kuin kontrolliryhmän. Antioksidanttisen aktiivisuuden voimakkuus heijastaa myös entsyymin luotettavuutta tietyllä tavalla.

Uudet yrtit cistanche vahvalla antioksidanttivoimalla

 

Wecistache-tukeva palvelu-Kiinan suurin Cistanche-viejä:
Sähköposti: wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/tel: +86 15292862950

 

Tämä luku lisää yleisiä hedelmiä päärynöitä ja sitrushedelmiä alkuperäiseen kokeeseen ja seuraa ja havaitsee muutokset niiden suhteenantioksidanttiaktiivisuuskäymisen aikana. Kustannusten vähentämisen perusteella toivomme kokeiden avulla heijastavan entsyymien biologista aktiivisuutta bakteerien lisäämisen jälkeen ja tarjoavan tietyn teoreettisen perustan ja tietojen tukemisen mikrobien entsyymien B tuottamiselley keinotekoinen kantojen inokulointi.

 

 

 

4.1 Materiaalit ja menetelmät

4.1.1 Materiaalit

(1) kokeelliset materiaalit

Pese tuoreita omenoita, päärynöitä ja sitrushedelmiä steriilillä vedellä steriilissä olosuhteissa, kuivaa ne luonnollisesti steriilillä leikkauspöydällä, kuori ne ja viipaloi ne myöhempää käyttöä varten. Lisää valkoinen sokeri ja hedelmät steriloituun lasipurkkiin massasuhteessa 1: 1. Aktivoi kokeen vaadittavat bakteerit ja inokuloi ne entsyymiin optimaalisen kaavion mukaisesti (tämä toimintavaihe jätetään kontrolliryhmälle), sulje se ja aseta se viileään ja kuivaan paikkaan. Ota näytteitä eri käymisaikoina huoneenlämpötilassa saadaksesi kaikki entsyymin nesteet, jotka sisältävät hedelmämassan, ja suodattaa se. Ota supernatantti kokeellisena näytteenä ja käytä sitä merkityksellisten tietojen mittaamiseen sentrifugoitumisen jälkeen 10, 000 rpm nopeassa sentrifugissa 15 minuutin ajan. On syytä huomata, että entsyymien valmistusprosessissa tarpeettoman saastumisen välttämiseksi kaikki toimintamme suoritetaan steriileissä olosuhteissa.

(2) Päävälineet

Kokeeseen vaadittavat instrumentit ovat samat kuin 3.1.1 (2).

 

4.1.2 Menetelmät

(1) Fenolipitoisuuden kokonaisprosessin muutokset käymisen aikana

Tislatulla vedellä lisättiin 450 μl näyteliuosta 46 ml: n äänenvoimakkuuden ja sitten 1 ml: n folin-fenolireagenssin valmistamiseksi. Sekoita hyvin ja reagoi 3 minuuttia. Sitten lisättiin 3 ml 20% NACO3: ta. Seosta ravistettiin vakiona lämpötilavesihauteessa 25 asteen kohdalla 2 tuntia. Tislattua vettä käytettiin tyhjänä kontrollina. Absorbanssi A mitattiin nopeudella 760 nm spektrofotometrillä. Jokaiselle hoidolle suoritettiin kolme toistoa. Kokonaisfenolipitoisuus laskettiin standardikäyrän yhtälön mukaisesti.

(2) muutokset vähentämisessä käymisen aikana

Lisää 45 0 μl näytettä 2,5 ml: seen fosfaattipuskuria, jonka konsentraatio on 0. 2mol/L ja pH -arvo 6,6, lisää sitten 2,5 ml kaliumferrikyanidia (paino/tilavuus) massapitoisuudella 1%, reaktiota 5 {23}} -suunnittelulla, joka on 1%, trichec -hihaeikkaa {23}}. (W/V), jonka massapitoisuus on 10%, sentrifugoi 3000 rpm 10 minuutin ajan, vie ja vedä välittömästi 2,5 ml supernatanttia tilavuuspulloon, lisää 2,5 ml tislattua vettä ja 0,5 ml ferrikloridia (paino/tilavuus) massapitoisuudella 0,1%. Käytä tislattua vettä tyhjänä kontrollina ja mittaa absorbanssi A aallonpituudella 700 nm spektrofotometrillä. Suorita 3 toistoa jokaiselle hoidolle. Vähentämisen voimakkuus määritetään absorbanssiarvon perusteella.

 

(3) muutokset superoksidianionin radikaalin poistokyvyssä käymisen aikana
Aseta 4,5 ml 0. {{1 0}} 5 mol/l pH 8,2 Tris-HCl-puskuri vakiona lämpötilavesihauteessa ja säädä lämpötila 25 asteeseen. Lisää 20 minuutin kuluttua 1 ml entsyyminäyte liuosta ja 0,4 ml pyrogalloliliuosta molaaripitoisuudella 25 mmol/l. Sekoita hyvin ja aseta 25 asteen vesihauteeseen 5 minuutin ajan. Lisää 1,0 ml 8 mol/l HCl reaktion lopettamiseksi. Käytä viitteenä Tris-HCL-puskuria ja mitata absorbanssi A 299 nm: n absorbanssi A: n määrittämiseen. Tyhjä kontrolliryhmä käyttää 1 ml liuotinta näytteen sijasta. Superoksidianionin radikaalin poistonopeus lasketaan kaavan 4.1 mukaisesti: superoksidianionin radikaalin poistonopeuden (%)=(A 1- A2)/A1 × 100 (4,1), missä: A1 on tyhjän kontrolliryhmän absorbanssi; A2 on kokeellisen ryhmän entsyyminäyteasiliön absorbanssi.

 

(4) Hydroksyyliradikaalin poistokyvyn muutokset käymisen aikana

 

Lisää vettä 45 0 μl -näyteasoloon 2 ml: ksi, lisää sitten 1,4 ml vetyperoksidia molaarimassapitoisuudella 6 mmol/l, lisää sitten 0,6 ml natrium -salisylaattia molaarisella massapitoisuudella 20 mmol/l ja 2 ml rautavetyhöyryä, joka on 1,5 mmol/l, ja lämpötilassa olevassa astegnosissa, joka on 1,5 mmol/l. 1H. Nolla tislatulla vedellä ja mittaa absorbanssi A aallonpituudella 562 nm spektrofotometrillä. Jokaiselle hoidolle suoritettiin kolme toistoa. Hydroksyyliradikaalin poistoaste laskettiin kaavan 4.2 mukaisesti: hydroksyyliradikaalin poistonopeus (%)=[(A 1- A2)/A1] × 100 (4,2) Missä: A1 on tyhjän absorbanssi; A2 on näytteen liuoksen keskimääräinen absorbanssi.

 

(5) DPPH: n vapaan radikaalin poistokyvyn muutokset käymisen aikana
Siirrä tarkasti 2 ml entsyyminäyte liuosta 1 0 ml: n tilavuuspulloon, lisää sitten 2 ml 80% DPPH -etanolia vesipitoiseen liuokseen tilavuuspulloon, moolimassan pitoisuudella 2 × 10-4 mol/l. Sekoita hyvin ja anna seistä huoneenlämpötilassa 30 minuutin ajan. Ota viitteenä 80% etanoliliuosta ja mittaa näytteen absorbanssi aallonpituudella 517 nm, joka kirjataan A1: ksi. Sekoita 2 ml DPPH -liuosta ja 2 ml 80 -prosenttista etanoliliuosta ja mittaa niiden absorbanssi samalla aallonpituudella, joka kirjataan A0: ksi. Sekoita 2 ml entsyymiliuosta ja 2 ml 80 -prosenttista etanoliliuosta ja mittaa niiden absorbanssi samalla aallonpituudella, joka kirjataan A2: ksi. Jokaiselle hoidolle suoritettiin kolme toistoa. Laske DPPH: n vapaan radikaalin poistonopeus kaavan 4.3 mukaisesti:
DPPH vapaan radikaalin poistonopeus (%) {{0}} [1- (a 1- a2)/a 0] × 100 (4,3) missä: A1 on 2 ml: n DPPH: n keskimääräinen absorbanssi; A2 on 2 ml: n entsyymiliuoksen absorbanssi ja 2 ml 80% etanolisekoitettu liuos; A0 on 2 ml: n DPPH -liuoksen absorbanssi ja 2 ml 80% etanolisekoitettu liuos.

(6) ABTS: n vapaiden radikaalien radikaalien poistokyvyn muutokset käymisen aikana
8 μl: n näyteliuosta lisättiin 10 μl: ksi fosfaattipuskurilla (5 mmol/l pH 7,4) ja sekoitettiin sitten tasaisesti 10 ml: n kaliumsulfaattia ja ABTS -sekoitettua liuosta reagoidakseen reaktiolämpötilassa 30 asteen ja reaktioajan 5 minuuttia. Nolla liuos tislatulla vedellä ja mittaa absorbanssi A aallonpituudella 734 nm käyttämällä spektrofotometriä. Jokaiselle hoidolle suoritettiin kolme toistoa. ABTS: n vapaan radikaalin poistoaste laskettiin kaavan 4.4 mukaisesti:
ABTS Free Radikaalin poistonopeus (%)=[(a 1- a2)/a1] × 100 (4,4) missä: A1 on tyhjää kontrolliryhmän absorbanssi; A2 on näytteen kokeellisen ryhmän absorbanssi.