Maksakirroosin sydän- ja munuaisvaikutukset kasvavassa eläinmallissa

edmund.chen@wecistanche.com

JohdantoMaksakirroosi johtuu normaalin parenkyyman asteittaisesta korvautumisesta fibroosilla, kyhmyjen muodostumisesta sekä portaaliverenpaineen ja elinten vajaatoiminnan merkkien ja oireiden kehittymisestä. Lapsilla maksansiirtoa vaativan kirroosin yleisin syy on sapen atresia1,2. Kirroosi voi myös johtaa ilmentymiin muissa elimissä, kuten sydämessä3, keuhkoissa4, aivoissa5 jamunuaiset 6. Varmistettiin, että portaaliverenpainetautia sairastavat potilaat ovat lisänneet sekä verenkierrossa että endoteelin verisuonia laajentavia aineita7 – kuten typpioksidia (NO)8 – johtuen maksan vajaatoiminnasta ja verisuonia laajentavien lääkkeiden pakenemisesta portosysteemisten shunttien kautta9. Tämä prosessi edistää valtimoiden verisuonten laajenemista, mikä johtaa hyperdynaamisen oireyhtymän kehittymiseen, jossa keskusveren tilavuus on pienentynyt, mitä seuraa baroreseptorien aiheuttama reniini-angiotensiini-aldosteronijärjestelmän (RAAS) ja sympaattisen hermoston (SNS) aktivaatio10. . Tämä aktivointiilmiö aiheuttaamunuaistenvasokonstriktio, joka liittyy olennaisesti hepato-munuaisoireyhtymän kehittymiseen11.

CISTANCHE PARANTAA MUUNAISTEN/MUUNAISTEN TOIMINTAA

Normaaleissa olosuhteissa,munuaisten toimintaon erittäin riippuvainen veren perfuusiosta ja kudosten hapettumisesta, joita säätelevät pääasiassa typpioksidi (NO) ja typpioksidisyntaasi (NOS). NOS tuottaa NO:ta, jota on kolmessa muodossa: hermosolujen (nNOS), endoteelin (eNOS) ja sytokiinien indusoimana (iNOS)12. eNOS ilmentyy normaalisti kudoksissa ja tuottaa NO:ta fysiologisina määrinä. Iskemia-reperfuusiovaurion aikana eNOS:n tuottama NO parantaa mikroverenkiertoa edistämällä vasodilataatiota ja estämällä verihiutaleiden aggregaatiota13. Samoin kirroosipotilaiden näennäinen hypovolemia johtaa veden ja natriumin pidättymiseenmunuainenja sitä seuraava plasmatilavuuden kasvu, mikä vasokonstriktiomekanismien lisäksi edistää sydämen minuuttitilavuuden ja sydämen ylikuormituksen lisääntymistä14. Tämän uskotaan olevan kirroosisen kardiomyopatian patofysiologinen mekanismi, tila, jota esiintyy lähes 50 prosentilla kirroosipotilaista15, jolle on ominaista tylsistynyt supistumisherkkyys stressiin ja/tai muuttunut diastolinen rentoutuminen sähköfysiologisilla poikkeavuuksilla ilman aikaisempaa sydänsairautta. Kirroosiin liittyy sydänlihassolujen histologisia poikkeavuuksia, kuten turvotusta, lievää diffuusia fibroosia, eritystä, tuman ja sytoplasman vakuolisaatiota, epätavallista pigmentaatiota sekä kammioiden laajentumista ja hypertrofiaa16-18. Kirroottinen kardiomyopatia on etiologisesti riippumaton kirroosista ja se on osallisena komplikaatioiden, kuten hepaattisen nefropatian, kehittymiseen16.

Itse asiassa,munuaistenKirroosin ja sydämen vaikutukset ovat suhteellisen hyvin määriteltyjä aikuisilla, vaikka ei tiedetä, ovatko nämä löydökset samanlaisia ​​kirroosia sairastavilla lapsilla. Kliinisten tutkimusten lisäksi kokeellisten mallien käyttö maksakirroosin ja sen vaikutusten tutkimisessa on houkuttelevaa. BDL-mallilla rotilla, sekä aikuisilla että kasvavilla eläimillä, on useita etuja, kuten alhainen hinta, helppo käsittely ja eläinten hoito sekä kirurgisen toimenpiteen yksinkertaisuus. Ryhmämme on standardoinut tämän mallin vastasyntyneillä ja vieroittavilla rotilla, ja sen on osoitettu olevan luotettava malli kehittyvien organismien sappikirroosista17-19. Harvat tutkimukset ovat selventäneetmunuaistenja maksakirroosin sydänoireet nuorissa organismeissa, jotka simuloivat lapsia, joilla on sapen atresia. Siksi tämän tutkimuksen tavoitteena oli arvioidamunuaistenja BDL:n sydänvaikutukset vieroitusrottamallissa käyttämällä biokemiallisia, histologisia, histomorfometrisiä ja molekyylianalyysejä.

Avainsanat:Sappitiet, Ekstrahepaattinen, Maksakirroosi, Mallit, Munuaiset, Munuaiset

menetelmätEläimiä hoidettiin kansallisen tiedeakatemian laatimassa Laboratorioeläinten hoito- ja käyttöoppaassa esitettyjen kriteerien mukaisesti. Tutkimusprotokollaa oli kaksi, jotka tarkasteltiin ja hyväksyttiin.laitoksemme eläineettinen toimikunta. Käytettiin 52 vieroitettua Wistar-rottaa molemmista sukupuolista (Rattus norvegicus Albinus, Rodentia, Mammalia), 21 päivän ikäisiä ja painoi 50-70 g. Kaikki eläimet pidettiin erityisissä taudinaiheuttajista vapaissa olosuhteissa, pidettiin muovihäkeissä (mitat: 49 × 34 × 16 cm) kahden poikuekumppanin kanssa, sahanpurukuivaimella ja alistettiin 12-tunnin valo-pimeä-jaksolle lämpötilassa 22 °C. ± 2 astetta, kosteussäädelty ympäristö (55 prosenttia) ja vapaa pääsy puhdistettuun veteen ja ruokaan (Nuvilab CR-1 kaupallinen ruoka, Quimtia, Colombo, PR, Brasilia). Häkit vaihdettiin kahdesti viikossa. Eläimet sopeutettiin koehuoneeseen vähintään kolme päivää ennen kokeita. Kliinisiä oireita, kuten ruuan kulutusta, selkäkarvojen erektiota, kovakalvon eritystä (jota esiintyy, kun eläimet ovat ärsyyntyneitä tai huolestuneita), ripulia ja letargiaa seurattiin ja kirjattiin kerran viikossa kaikkien koejaksojen ajan. Rotat, joilla oli kliinisiä merkkejä vakavasta kivusta ennen kokeen päättymistä, lopetettiin välittömästiisofluraanin yliannostus (Isoforine®, Cristalia, Itapira, SP, Brasilia).Eläimet jaettiin kahteen ryhmään: kokeellisiin (n=32) ja kontrolliin (n=20). Koeryhmässä eläimille tehtiin yhteinen sappitiehyeligaatio (BDL), ja ne jaettiin neljään alaryhmään, joissa kussakin oli kahdeksan rotta, BDL:stä eutanasiaan kuluneen ajan mukaan: ● Ryhmä 1: eutanasia kaksi viikkoa BDL:n jälkeen; ● Ryhmä 2: eutanasia neljä viikkoa BDL:n jälkeen; ● Ryhmä 3: eutanasia kuusi viikkoa BDL:n jälkeen; ● Ryhmä 4: eutanasia kahdeksan viikkoa BDL:n jälkeen. Kontrollieläimet jaettiin neljään alaryhmään, joissa kussakin oli viisi rotta, joiden iät vastasivat koeryhmän eläimiä.

CISTANCHE PARANTAA MUNUAIS-/MUUNAISDIALYYSIÄ

Anestesia ja leikkausKaikki tutkijat olivat asianmukaisesti päteviä ja päteviä käytettävien kirurgisten toimenpiteiden koulutuksen ansiosta. Rotat nukutettiin vatsaontelonsisäisellä injektiolla ketamiinihydrokloridia (Ketalar®) 30 mg/kg ja deksmedetomidiinia (Precedex®) 10mg/kg, sekä isofluraania hengitettynä leikkauksen aikana. menettelyä. Anestesian riittävä syvyys varmistettiin ajoittain nosiseptiivisen vasteen puuttuessa hännän kärkeen ja sormien väliseen puristumiseen. Tällainen nosiseptiivinen vaste voi olla joko mikä tahansa reaktiivinen liike tai refleksi (yleensä polkimen vetäytysrefleksi) tai huomattava sydämen tai hengityksen nousu. Riittämättömän kivunlievityksen tapauksessa suoritettiin ylimääräinen intraperitoneaalinen anto 15 mg/kg ketamiinia. Toimenpide koostui 2- cm:n keskilinjan viillosta ylävatsaan, joka alkoi välittömästi nivelkalvon alapuolelta. Suolet ja maksa ulkoistettiin sappitiehyiden visualisoimiseksi. Mon nylon 6.0:aa käyttämällä suoritettiin yhteisen sappitiehyen kaksoisligaatio, jota seurasi kahden ligaation välinen leikkaus. Vatsa suljettiin jatkuvalla yhdellä ompeleella käyttämällä Mononylon 4.0:aa. Sitten eläimet puhdistettiin ja asetettiin toipumaan analgesiaan, ja vettä ja ruokaa toimitettiin ad libitum.

Koeprotokollan päätyttyä rotat punnittiin ja lopetettiin isofluraanin yliannostuksella (Isoforine®, Cristália, Itapira, SP, Brasilia) laitoksemme eläinten käytön eettisen komitean ohjeiden mukaisesti. Laaja pitkittäinen laparotomia suoritettiin vatsa-aortan paljastamiseksi, ja valtimoverta kerättiin biokemiallisia kokeita varten. Sternotomian jälkeen sydän poistettiin. Maksa jamunuainennäytteet kerättiin molekyyli-, histologisia ja histomorfometrisiä analyysejä varten. Sydämen tilavuus: eläinten sydämet poistettiin (suurten verisuonten risteyksessä) rinnasta ja asetettiin normaaliin suolaliuokseen veren pesemiseksi sydämen onteloista. Sydän upotettiin sitten formaldehydillä täytettyyn astiaan ja elimen kokonaistilavuus laskettiin astiasta syrjäytyneen nesteen tilavuuden perusteella.

Biokemialliset testitKaikkien eläinten seerumin urea- ja kreatiniinitasot mitattiin.Histologiset ja histomorfometriset analyysitHistologista analyysiä varten näytteitä pidettiin 24 tuntia 10-prosenttisessa formaldehydissä. Kiinnityksen jälkeen materiaali dehydratoitiin ja sen jälkeen upotettiin parafiiniin, ja 4-μm paksuiset histologiset leikkeet värjättiin hematoksyliinieosiinilla (HE) yleisiä morfologisia tutkimuksia varten ja pikrosiriuspunaisella kollageenikuitujen tunnistamiseksi. Histologiset objektilasit tutkittiin valomikroskopialla ja kaksi patologia tarkasteli niitä sokeasti. Maksan parenkyyman analyysi suoritettiin HE:llä värjätyissä osissa BDL:n edistämien muutosten tarkistamiseksi. Kaksi patologia analysoi histologiset objektilasit sokeasti optisella mikroskoopilla ottaen huomioon ductular-proliferaation asteen. Sappitiehyiden laskemiseksi analysoitiin viisi satunnaisesti valittua kenttää diaa kohden, jotka sisälsivät vähintään yhden portaalitilan. Analysoidut portaalitilat rajattiin tietokoneen hiiren avulla.

Ottaen huomioonmunuainen,themunuaistenparenkyyma valmistettiin poikittaisleikkeissä, jotka oli värjätty HE:llä ja arvioitiin bilirubiinikyllästymisen suhteenmunuaistentubulukset ja sytologiset muutokset (hydrooppinen rappeuma, ytimien ja plasmakalvorajojen menetys). Kutakin diaa kohden analysoitiin viisi satunnaisesti valittua kenttää. Näiden havaintojen perusteella jokainen kenttä luokiteltiin seuraavien kriteerien mukaan: 1. Poissa; 2. Lievä bilirubiinikyllästys; 3. Kohtalainen bilirubiinikyllästys: a. ilman sytologisia muutoksia; b. sytologisilla muutoksilla; 4. Voimakas bilirubiinikyllästys: a. ilman sytologisia muutoksia; b. sytologisilla muutoksilla.

CISTANCHE PARANTAA MUNUAIKAISTEN/MUUNAISTEN VAATTOA

Mitä tulee sydämeen, lyhyen 10-prosenttisessa neutraalissa puskuroidussa formaliinissa tapahtuneen fiksaation jälkeen sydän leikattiin keskeltä, välittömästi eteis-kammioläppien alapuolelta. Molemmat puolikkaat asetettiin sitten uudelleen 10-prosenttiseen neutraaliin puskuroituun formaliiniin upotuskiinnitystä varten. Myöhemmin ne upotettiin parafiinilohkoihin, joista valmistettiin 4-μm paksuiset parafiinikudoslevyt. Nämä objektilasit, sarja poikkileikkauksia kammioiden läpi, värjättiin HE:llä ja picrosirius-punaisella. Morfometrinen analyysi suoritettiin viidelle levylle kustakin sydämestä. Kvantitatiiviset tiedot saatiin tietokoneistetun kuva-analyysijärjestelmän avulla (NIS-Elements Advanced Research). Seuraavat parametrit mitattiin: vasemman ja oikean kammion vapaan seinämän paksuus (200-kertainen suurennus); ja oikean ja vasemman kammion sisähalkaisijat (400x suurennus).

Kollageenin kertymä sydänkudoksessa analysoitiin. Kollageenin kertymistä sydänlihaskidokseen arvioitiin Sirius-punaisella värjätyillä levyillä. Tämä analyysi suoritettiin kahdella eri menetelmällä. Perivaskulaarinen kollageeni kvantifioitiin arvioimalla värjäytyneen kudoksen (kollageenikuitujen) prosenttiosuus rajatulla kokonaisalueella, ja arvot ilmaistiin prosentteina kollageenista/μm2. Kolme satunnaista kenttää kammiota kohti, joissa kussakin oli vähintään yksi suoni, siepattiin. Mitattavat suonialueet rajattiin tietokonehiiren avulla. Kvantifioitavien rakenteiden (kollageenikuidut) merkitsemiseen käytettiin graafista resurssia. Kollageeni- ja suonitilan pinta-alat mitattiin neliömikrometreinä. Kollageenipinta-ala jaettiin suonitilassa ääriviivatun alueen pinta-alalla ja saatu arvo ilmaistiin kollageenin prosentteina (eli alueen murto-osana). Interstitiaalinen kollageeni analysoitiin käyttämällä puolikvantitatiivista asteikkoa. Jokaisen dian neljä satunnaista kenttää tallennettiin 200x suurennuksella. Värjäytyneen kudoksen (interstitiaaliset kollageenisäikeet) esiintyminen kenttää kohden arvioitiin seuraavan asteikon mukaan: ● 0: puuttuu; ● 1: lievä; ● 2: kohtalainen; ● 3: vakava.

MolekyylianalyysiNOS:n ja eNOSin ilmaisut sydämessä jamunuaistenkudokset analysoitiin kvantitatiivisella käänteistranskriptiopolymeraasiketjureaktiomenetelmällä (RT-PCR) laboratoriomme aiempien julkaisujen mukaisesti21,22.Tilastolliset analyysitMorfometrisiä ja sydämen tilavuustietoja varten laskettiin näiden tietojen ja eläimen painon välinen suhde ja niitä käytettiin tilastollisiin vertailuihin. Tilastolliset analyysit suoritettiin Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) -ohjelmistolla 18.0 Windowsille (SPSS, Yhdysvallat). Shapiro-Wilkin testiä käytettiin määrittämään, oliko tietoryhmillä Gaussin jakauma. Jatkuvat kvantitatiiviset tiedot analysoitiin t-testillä, yksisuuntaisella varianssianalyysillä (ANOVA) ja Tukeyn posthoc-testillä kahdelle ja kolmelle tai useammalle ryhmälle, vastaavasti. Ei-parametriset tiedot analysoitiin Mann-Whitney-testillä kahden ryhmän vertaamiseksi ja Kruskal Wallisin ja Dunn post-hoc -testillä kolmen tai useamman ryhmän vertaamiseksi, vastaavasti. Kaksisuuntaista arvoa pienempi tai yhtä suuri kuin 0,05 pidettiin tilastollisesti merkitsevänä.

TuloksetKuusi eläintä koeryhmistä (18,7 prosenttia) kuoli kokeen aikana. Kokeen lopussa kussakin alaryhmässä oli vähintään viisi elossa olevaa eläintä. Kaikilla BDL-eläimillä esiintyi yhteisen sappitiehyen laajentumista, mikä johtui distaalisesta tukkeutumisesta, joka korostui ajan mittaan, ja ilmeisiä maksan parenkyymin muutoksia, vesivatsan kertymistä ja splenomegaliaa. Biokemiallisten testien tulokset sekä ruumiinpainon, sydämen tilavuuden ja sydämen tilavuuden suhteesta ruumiinpainoon liittyvät morfometriset arviot on esitetty kuvassa 1. Verrokki- ja kirroosieläimillä ei ollut eroja seerumin urea- ja kreatiniinitasojen välillä. tutkittua ajanjaksoa. Kirroosia sairastavien eläinten sydämet havaittiin olevan suurempia kuin kontrollieläimillä kuusi viikkoa BDL:n jälkeen (p{3}}.042).

KeskusteluVaikka maksakirroosin sydänlihas- ja todelliset vaikutukset ovat kliinisesti ja kokeellisesti hyvin määriteltyjä aikuisilla, lapsilla ne on eläinlääkärin selvittämiseksi täysin. Monet tutkimukset ovat osoittaneet, että lapset, joilla on pitkälle edennyt maksakirroosivaihe, kehittyvät sapen atresiastamunuaistentoimintahäiriö1 ja viime aikoina sydänlihaksen toimintahäiriö" pääasiassa stressin alla. Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli karakterisoida nuorten organismien sappikirroosin aiheuttamia munuais- ja sydämen muutoksia käyttämällä vieroitusrottien yhteisen sappitiehyen ligaation tekniikkaa. Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että sappien ligaatio aikuisilla hiirillä ja rotilla on hyvä malli kirroosin sydämen192- ja munuaisvaikutusten tutkimiseen. Ryhmä on tehnyt aikaisempia tutkimuksia BDL:llä vieroittavilla rotilla ja havainnut näissä eläimissä kirroosin histologisten ja kliinisten merkkien huomattavan ja nopean kehittymisen9,20. Huolimatta vieroitusrottien käsittelyn teknisistä vaikeuksista, kuten rakenteiden pienestä koosta, kudosten (pääasiassa maksalohkojen) murenemisesta, saavutettiin intensiivisen harjoittelun avulla leikkaukseen liittyvät alhaiset kuolleisuusluvut. Kuitenkin, kun aika BDL:n jälkeen pidentyi (erityisesti neljän viikon jälkeen), kirroosin eteneminen vaikutti lisääntyvään kuolleisuuteen. Samoin sydänlihaksen ja munuaisten toimintahäiriöiden odotettiin ilmenevän mitä pitempään BDL:n jälkeen. Sydämen tilavuusanalyysi mahdollisti sydänlihaskudoksen yksilöllisen mittaamisen, lukuun ottamatta kammioiden sisätilaa. Kirroosista kärsivien eläinten sydämet olivat suurempia kuin kontrollien sydämet, mutta näkyivät

laskeva trendi kahdeksan viikon jälkeen. Tämä viittaa siihen, että kirroosisydämessä kehittyy aluksi hypertrofiaa, mutta tietyn pisteen jälkeen lihakselliset seinämät alkavat kapeneta ja supistumisvoima sen seurauksena heikkenee. Histomorfometrinen arviointi tuki näitä havaintoja. Oikean ja vasemman kammion sisähalkaisijan ja kokonaispainon välinen suhde pysyi vakaana kontrollieläimissä niiden kasvaessa. BDL-eläimillä molempien kammioiden sisähalkaisija pieneni aluksi, mikä viittaa sydänlihaksen hypertrofiaan. Myöhemmissä eläinryhmissä kammioiden kammiot osoittivat kuitenkin taipumusta laajentua, mikä viittaa sydämen vajaatoimintaan. Kontrolliryhmissä kammion seinämän paksuus näytti pienenevän eläimen kasvaessa, stabiloituen lopulta. Sitä vastoin koeryhmät eivät osoittaneet tätä fysiologista kapenemista. Se on selvä osoitus kirroosin kielteisistä vaikutuksista kasvavaan sydämeen. Tässä tutkimuksessa arvioitiin myös, seurasiko näitä sydämen histomorfometrisiä muutoksia sydänlihasfibroosia. Itse asiassa havaittiin progressiivinen perivaskulaarinen kollageenikertymä vasemmassa kammiossa, ja interstitiaalisen kollageenin määrä oli jatkuvasti korkeampi kaikissa koe-eläimissä verrattuna vastaaviin kontrolliryhmiin.

Äskettäin maksan sydämen tulehdusakselin ja kannabinoidi 2 -reseptorin (CB2-R) vuorovaikutusten vaikutuksia tutkittiin maksan kardiomyopatian kokeellisessa mallissa. Osoitettiin, että CB2-R-aktivaatio alensi seerumin TNF-alfa-tasoja ja paransi sydämen toimintahäiriöitä, sydänlihaksen tulehdusta ja oksidatiivista stressiä, mikä korostaa tulehdusvälittäjien merkitystä maksan kardiomyopatian patologiassa21. Voidaan päätellä, että nuorilla organismeilla esiintyy samanlaista tulehdusprosessia, joka johtaa myöhemmin perivaskulaarisen ja interstitiaalisen kollageenin kertymiseen, jolla todennäköisesti on rooli kirroosissa sydänlihaksen toimintahäiriössä. Muissa viimeaikaisissa tutkimuksissa osoitettiin, että sydämen kronotrooppinen toimintahäiriö johtuu pääasiassa lisääntyneestä sydämen NO-synteesistä22. NO muuttaa sydämen toimintaa guanylyylisyklaasista riippumattomien ja riippumattomien mekanismien kautta. Samalla tavalla, vaikka NOS:n kokonaisekspressio ei muuttanut sapen ligaatiota, eNOS-ilmentymisen lasku sydämessä havaittiin alun perin verrattuna kontrollieläimiin. Kirroosin edetessä tämän geenin ilmentyminen lisääntyi, ilmiötä on tutkittu monissa tutkimuksissa22-24. Osoitettiin, että eNOS-aktiivisuudesta johtuvalla NO:lla on hyödyllisiä vaikutuksia22-24. Siksi on mahdollista, että jotkin suoja- tai palautemekanismit, jotka yrittävät vähentää kirroosin haitallisia vaikutuksia sydämessä, johtavat eNOS-geenin ilmentymisen lisääntymiseen maksasairauden myöhäisissä vaiheissa.

Samanaikaisesti tässä tutkimuksessa havaittiin, että kirroosi johtaa munuaisvaikutuksiin histologisella ja molekyylitasolla. ThemunuaistenBDL:n vaikutuksia aikuisilla rotilla on aiemmin osoitettu aiheuttaneen munuaisten toiminnan vaurioita, mikä heijastuu lisääntyneinä urea- ja kreatiniinipitoisuuksina, jotka havaittiin kaksi viikkoa kolestaasin induktion jälkeen, vaikkakaan histologisia muutoksia ei havaittumunuaistenparenchyma havaittiin22. Mielenkiintoista on, että tässä tutkimuksessa vieroittavilla rotilla oli erilainen munuaisvaste normaalilla sarjatasolla ureaa ja kreatiniinia huolimatta histologisista muutoksistamunuainen, joka osoitti intensiivistä bilirubiinin kyllästymistä soluihin, solunsisäisten tulppien muodostumista, hydropista rappeutumista, ytimien menetystä ja plasmakalvorajojen puuttumista. Siksi näyttää siltämunuaisten toimintasäilyy maksakirroosista kärsivillä lapsilla verrattuna kirroosista kärsiviin aikuisiin. Näiden löydösten mukaisesti kliininen käytäntö osoittaa, että munuaisten vajaatoiminta on yleisempää ja voimakkaampaa kirroosista kärsivillä aikuisilla kuin lapsilla23. Tästä syystä loppuvaiheen maksasairauden (MELD) pistemäärän malli, jota käytetään maksansiirtoon kelpaavien aikuisten luokitteluun, ottaa huomioon kreatiniinin sarjatasot, kun taas lasten loppuvaiheen maksasairaus (PELD) ei ota kreatiniinitasoja huomioon. tili 24. Jotkut tutkimukset, joissa käytettiin aikuisen BDL-rotan mallia, korreloivat oksidatiivisen stressin ja vapaiden radikaalien muodostumisen kirroosin aiheuttaman munuaisvaurion kanssa25,26. Samoin muutoksia NOS-geenin ilmentymisessä munuaisissa havaittiin mallissamme. Kokonais-NOS-ilmentyminen BDL-eläimissä oli korkeampi kuin kontrolleissa kahden viikon kuluttua ja se oli yleensä korkeampi kuin kontrolleissa muina ajankohtina. Mitä tulee eNOS-ilmentymiseen, se oli korkeampi kaikissa koe-eläimissä verrattuna kontrolleihin. Ottaen huomioon, että iNOS-munuaisten aktivaatio korreloimunuaistentoimintahäiriö aikuisilla rotilla, joille tehdään BDL27, on mahdollista päätellä, että tämä lisääntynyt eNOS-aktivaatio nuorilla eläimillä liittyy suhteellisen parempaanmunuaistensietokykyyn ja lievempiin toiminnallisiin vaikutuksiin verrattuna aikuisiin. Kuten aiemmin mainittiin, eNOS-aktivointi liittyy hyödyllisiin vaikutuksiin muissa olosuhteissa.

JohtopäätöksetOsoitettiin, että BDL:n aiheuttama maksakirroosi johtaa progressiivisiin histologisiin ja histomorfometrisiin muutoksiin sydämessä jamunuaisetnuorista eläimistä, ja tämä voi olla hyvä malli kirroosisen nefropatian ja kardiomyopatian paremmin selvittämiseen lapsilla. Lisäksi muutokset NOS- ja eNOS-geenien ilmentymisessä sydämessä jamunuainenviittaavat siihen, että NO:lla on tärkeä rooli kirroosin sydän- ja munuaisvaikutusten synnyssä.