Leontopodium Alpinum (Edelweiss) -kalluskulttuuriuutteen ikääntymistä estävät vaikutukset transkriptiprofiilin avulla, osa 3

Klikkaaoscar.xiao@wecistanche.comLisätietoja

3.4. In vitro -arviointi LACCE-uutteesta, joka liittyy kosteuttavaan vaikutukseen

Tutkimme LACCE:n kosteuttavaa vaikutusta HaCaT-soluihin käyttämällä Aquaporin 3:n (AQP3) ilmentymistä, joka koodaa vettä ja ihosoluissa ilmennettyä glyserolia kuljettavaa proteiinia, reaaliaikaisella RT-PCR:llä (kuva 3C). Verrattuna negatiiviseen kontrolliin AQP3-geeniä säädeltiin merkittävästi lisäämällä LACCE-uutetta.cistanche tubulosa hyödyt ja sivuvaikutuksetMielenkiintoista on, että kun LACCE-uutteen pitoisuutta nostettiin, AQP3:n ilmentyminen nousi vähitellen arvosta 3,19 (0,1 prosenttia LACCE) arvoon 4,5 (1 prosentti LACCE).

Napsauta tätä saadaksesi lisätietoja

3.5. LACCE-uutteen in vitro -arviointi ryppyjä ehkäisevänä aineena

Testasimme LACCE:n ryppyjä ehkäisevää vaikutusta reaaliaikaisella RT-PCR:llä (kuva 3D) käyttämällä merkkigeeniä, joka koodaa solujen kasvua edistävää matriisin metalloproteinaasia-2(MMP-2). UVB-säteily lisäsi merkittävästi MMP-2-ilmentymistä verrattuna negatiiviseen kontrolliin ilman UVB-säteilytystä (kertainen muutos 0.67 arvolla alle0.05). MMP{11}}:n ilmentymistä säädeltiin alas lisäämällä LACCE UVB-säteilyä vastaan. Yleensä MMP{13}}:n ilmentyminen väheni vähitellen, kun LACCE:n pitoisuutta nostettiin. MMP-2:n ilmentyminen normaaleissa olosuhteissa ilman UVB-säteilytystä oli verrattavissa 0,5-prosenttisessa LACCE:ssä UVB-säteilytykseen.

3.6. LACCE:n kliininen arvio kasvojen kohottamiseksi ja periorbitaalisten ryppyjen, ihon kimmoisuuden, ihon tiheyden ja ihon paksuuden parantamiseksi

LACCE:n vaikutuksen tutkimiseksi in vivo suoritimme LACCE:n kliinisen arvioinnin, joka liittyy kasvojen kohoamiseen ja silmänympärysryppyjen, ihon kimmoisuuden, ihon tiheyden ja ihon paksuuden parantamiseen. Tätä varten 21 naispuolista vapaaehtoista, jotka jaettiin edelleen 12:een 40-vuotiaisiin ja yhdeksään 50-vuotiaaseen, osallistui kliiniseen arviointiin neljän viikon ajan.

Cistanche voi estää ikääntymistä

Ensin tutkimme LACCEonin periorbitaalisten ryppyjen vaikutusta korkearesoluutioisella PRIMOS-järjestelmällä. Kaksi erilaista karheusparametria, karheuden keskiarvo (Ra) (kuvio 4A) ja neliön keskiarvo (Rq) (kuva 4B), analysoitiin. Neljä viikkoa LACCE-hoidon ja lumelääkkeen jälkeen Ra- ja Rq-arvot pienenivät molemmissa näytteissä.cistanche tubulosa -uute,Ra- ja Rq-arvojen laskunopeus oli kuitenkin paljon suurempi LACCE-käsitellyssä näytteessä kuin lumelääkekäsitellyssä näytteessä (taulukko 2). Esimerkiksi Ra-arvon laskuaste oli 3,654 prosenttia ja 6,118 prosenttia kahden ja neljän viikon kohdalla tilastollisesti merkitsevästi (p<0.05). similarly,="" the="" decrease="" rate="" for="" the="" rq="" value="" was="" 3.583%and="" 6.189%="" at="" two="" and="" four="" weeks,="" respectively,="" with="" statistical="" significance=""><0.05). moreover,="" the="" ratio="" of="" volunteers="" who="" displayed="" a="" reduction="" in="" the="" roughness="" parameters="" for="" the="" lacce-treated="" sample="" was="" much="" higher="" than="" that="" for="" the="" placebo-treated="" sample.="" for="" example,="" at="" four="" weeks,="" the="" ratios="" of="" volunteers="" showing="" a="" decrease="" in="" ra="" and="" rq="" values="" were="" 90.476%="" in="" the="" lacce-treated="" sample="" and="" 57.142%="" in="" the="" placebo-treated="">

Kuva 4. LACCE:n kliiniset in vivo -testit kasvojen kohottamiseksi ja periorbitaalisten ryppyjen, ihon kimmoisuuden, ihon tiheyden ja ihon paksuuden parantamiseksi. Ra (A)- ja Rq(B)-arvot mitattiin PRIMOn korkearesoluutioisella järjestelmällä kolmessa eri ajankohdassa LACCE:n periorbitaalisen ryppyvaikutuksen havaitsemiseksi (1 %). Bruttoelastisuus (R2) (C), nettoelastisuus (R5) (D) ja biologinen elastisuus (R7) (E) mitattiin ihon kimmoisuuden havaitsemiseksi LACCE:lla. Ihon tiheyden (F) ja ihon paksuuden (G) mittaus. R-mitta suun kulmassa (H). Ennen/jälkeen:todennäköisyys p (toistetut mittaukset ANOVA, merkitsevä:*p<><><0.001).lacce lacebo="" b:="" probability="" p(repeated="" measures="" anova,="" significant∶="" 十="" p=""><>

Tutkimme LACCE:n vaikutusta poskiihon kimmoisuuteen Cutometerin avulla. Kolme eri parametria, bruttoelastisuus (R2), nettoelastisuus (R5) ja biologinen elastisuus (R2) (R7), mitattiin (kuva 4C-E). R2-, R5- ja R7-arvot sekä LACCE- että lumelääkehoidetuissa olosuhteissa nousivat neljän viikon aikana.cistanche tubulosa arvostelut,Esimerkiksi LACCE-käsitellyn näytteen R2-arvo nousi arvosta 0,728 arvoon 0,752, kun taas lumelääkekäsitellyn näytteen R2-arvo nousi arvosta 0,74{ {10}} arvoon 0,752 (kuva 4C). Lisäksi nousunopeus LACCE-käsitellyssä näytteessä oli paljon suurempi kuin lumelääkekäsitellyssä näytteessä (taulukko 3). Esimerkiksi LACCE-käsitellyn näytteen kasvuluvut olivat 3,296 (R2), 5,816 (R5) ja 6,756 (R7), kun taas lumelääkekäsitellyssä näytteessä kasvuluvut olivat 1,621 (R2), 2,895 (R5), ja 3,378 (R7) neljän viikon kohdalla. Kuitenkaan ei ollut eroa niiden vapaaehtoisten suhteessa, jotka osoittivat ihon elastisuuden lisääntymistä näiden kahden näytteen välillä.

Tutkimme LACCE:n vaikutusta ihon tiheyteen ja ihon paksuuteen Dermascan-C:llä. Molemmissa näytteissä ihon tiheys ja ihon paksuus kasvoivat neljä viikkoa hoidon jälkeen (kuvio 4F, G). Esimerkiksi LACCE-käsitellyn näytteen ihotiheys nousi arvosta 26 708 arvoon 28 168, kun taas lumelääkekäsitellyn näytteen tiheys kasvoi vuodesta 26.936 - 28.168 (kuva 4F). Ihon tiheyden lisääntymisaste oli paljon suurempi LACCE-näytteessä (5,466 prosenttia) kuin lumelääkekäsitellyssä näytteessä (3,118 prosenttia) neljä viikkoa hoidon jälkeen (taulukko 4). Jälleen ihon paksuuden kasvunopeus oli paljon suurempi LACCE-näytteessä (10,192 prosenttia) kuin lumelääkehoidetussa näytteessä (4,829 prosenttia) neljä viikkoa hoidon jälkeen. Mielenkiintoista on, että monet vapaaehtoiset osoittivat voimakasta lisäystä ihon tiheydessä (90,476 prosenttia) ja ihon paksuudessa (100 prosenttia) neljän viikon LACCE-hoidon jälkeen.

Tutkimme LACCE:n vaikutusta kasvojen kohotukseen suun kulmassa Moireé-analyysin avulla. Sekä LACCE- että lumelääkekäsitellyt näytteet osoittivat kasvojen kohoamisen vähentymistä (kuvio 4H); Kuitenkin kasvojen kohotuksen väheneminen oli paljon suurempi LACCE-näytteessä (2,541 prosenttia) kuin lumelääkenäytteessä (0,437 prosenttia) neljän viikon hoidon jälkeen. Vapaaehtoisten osuus kasvojen kohottamisen vähentymisestä oli suurempi LACCE:n (85,714 prosenttia) kuin lumelääkettä saaneiden (57,142 prosenttia).

3.7. HaCaT-solujen transkriptioanalyysi vasteena LACCE:lle RNA-Seq:n avulla

Vaikka LACCE-uutte osoitti useita myönteisiä vaikutuksia kosmeettisena aineena, saattaa olla huomionarvoista tarkastella muutosta ihmisen transkriptiossa vasteena LACCE:lle. Tätä varten käytimme 1 prosentin LACCE-uutetta pienemmän pitoisuuden sijasta, koska oletimme, että LACCE:n alhaisen pitoisuuden mahdollinen vaikutus keratinosyyttisoluihin saattaa olla pieni. HaCaT-solut käsiteltiin 1-prosenttisella LACCE:llä (käsittely), kun taas kontrolli HaCaT-soluja käsiteltiin steriilillä vedellä. Kolme biologista replikaattia käytettiin RNA-Seg:lle. Lukujaksojen lukumäärä vaihteli välillä 32 776 672 - 42 640,000(taulukko 5). Yli 90 prosenttia kaikkien kuuden näytteen lukemista kartoitettiin ihmisen vertailutranskripteihin, jotka sisälsivät 159 998 transkriptia (kuvio 5A). Geeniekspressio-analyysiä varten laskemme fragmentteja transkriptin kiloemästä kohti miljoonaa (FPKM) arvoa kohti. Kuten kuviossa 5B esitetään, kolmen käsitellyn näytteen FPKM-arvot olivat korkeammat kuin kolmen kontrollinäytteen arvot. Ylimääräisten transkriptien poistamisen jälkeen vain 11 290 transkriptia 68 158 transkriptista ilmentyi ihmisen keratinosyyttisoluissa (taulukko S1).

Kuva 5. Kartoitustulokset, fragmenttien jakauma transkriptin kiloemäkseltä miljoonaa (FPKM) arvoa kohti ja differentiaalisesti ilmentyneiden geenien visualisointi. (A) Osa kartoitettuja (oranssi) ja kartoittamattomia (harmaa) lukemia ihmisen vertailutranskriptomissa. (B) Boxplot, joka näyttää FPKM-arvojen jakautumisen kussakin kirjastossa. (C) Tulivuorikaavio, joka näyttää log1o(adj) ja log2 (FC) -jakauman kaikille ilmennetyille geeneille. Pad ja FCosoittavat säädetyn p-arvon ja taitteen muutoksen, vastaavasti. Kymmenen tunnistettua DEG:tä on merkitty sinisillä (alas säädellyt geenit, alas), punaisilla (ylössäädellyt geenit, ylös) ja harmailla (ei merkitsevästi ekspressoituneet geenit, NS) pisteillä.

Vaikka käytimme korkeampaa LACCE-pitoisuutta (1 prosentti), joka oli 1 0 kertaa suurempi kuin normaali LACCE (0,1 prosenttia), jota käytettiin kosmetiikassa, ihmisen keratinosyyttisolujen transkripti ei muuttunut merkittävästi vasteena LACCE-hoidolle, tulivuorikaavion mukaisesti (taulukko S1 ja kuva 5C).cistanche UKPerustuen säädettyyn p-arvoon, joka on pienempi kuin 0.001 ja log2(kertainen muutos) yli 1, tunnistimme yhteensä 10 differentiaalisesti ekspressoitunutta geeniä (DEG) LACCE:n perusteella (taulukko 6). 10 astetta,

neljä alassäädeltyä geeniä olivat geenejä, jotka koodaavat DNA:ta sitovan 3:n, ankyriinin toistodomeenin 1, Rho-sukuisen BTB-domeenin sisältävän 3:n ja 18S ribosomaalisen N5:n inhibiittoria. Kuusi säädeltyä geeniä olivat geenit, jotka koodaavat hiilihappoanhydraasi 2:ta, insuliinin kaltaista kasvutekijää sitovaa proteiinia 3, keratiinia 15, BCL2-vuorovaikutteista proteiinia 3, fibroblastien kasvutekijää sitovaa proteiinia 1 ja DNA-vaurioiden aiheuttamaa transCript4:ää.

3.8. Ylössäänneltyjen geenien toiminnalliset roolit vasteena LACCE:lle

LACCE:n vaikutus keratinosyyttitranskriptomiin oli lievempi kuin muiden stressihoitojen. Saadaksemme toiminnallisen yleiskatsauksen ylös- ja alas-säädellyistä geeneistä suoritimme GO-rikastusanalyysin. Emme kuitenkaan saaneet merkittäviä tuloksia rikastetuista GO-termeistä johtuen pienistä differentiaalisesti ekspressoituneista geeneistä. Siksi lisäsimme differentiaalisesti ilmentyneiden geenien määrää soveltamalla säädettyä p-arvoa alle 0.05 ja log2(kertainen muutos) yli 0,5. Tuloksena tunnistimme 22 ylös- ja 13 alas-säädeltyä geeniä (taulukko S1). GO-rikastusanalyysi tunnisti 36 rikastettua GO-termiä, jotka koostuivat 21 GO-termistä (biologinen prosessi), kahdesta GO-termistä (molekyylifunktio) ja 13 GO-termistä (solukomponentti) ylössäädellyissä geeneissä (taulukko S2). Sitä vastoin vain 12 rikastettua GO-termiä biologiselle prosessille tunnistettiin 13 alas säädellyssä geenissä (taulukko S2).

Biologisen prosessin mukaan geenit, jotka osallistuvat keratinisaatioon, sarveistumiseen, ohjelmoituun solukuolemaan, soluliitosorganisaatioon, kehitysprosessin positiiviseen säätelyyn ja ihoesteen muodostumiseen, olivat voimakkaasti säädeltyjä (kuvio 6A).cistanche wirkungMolekyylifunktion osalta sytoskeleton rakenteellinen ainesosa ja rakenteellinen molekyyliaktiivisuus ilmenivät voimakkaasti (taulukko S2). Solukomponentin tapauksessa geenit välifilamentissa, ekstrasellulaarisessa eksosomissa ja keratiinifilamentissa ilmenivät voimakkaasti (kuvio 6B). 12:sta GO-termistä 13:lle alasäädellylle geenille geenit, jotka liittyvät vasteeseen sinkki-ioneille, luutumisen säätelyyn ja biologisen prosessin negatiiviseen säätelyyn, olivat usein alasäädeltyjä.

Kuva 6. Tunnistettujen rikastettujen GO-termien hierarkkinen rakenne ylössäädellyille ihmisen geeneille vasteena LACCE:lle. Suunnatut asykliset graafit (DAG:t) visualisoivat tunnistettujen rikastettujen GO-termien hierarkkisen rakenteen ylössäädellyille geeneille LACCE-käsittelyn jälkeen biologisen prosessin (A) ja solukomponentin (B) mukaisesti. Jokainen GO-termi on merkitty eri laatikon värillä p-arvon perusteella. Yksityiskohtaiset tiedot tunnistetuista GO-termeistä löytyvät taulukosta S2.

4. Keskustelu

Kosmetiikka määritellään klassisesti kaikkina valmistetuiksi tuotteiksi, joita voidaan levittää ihmiskehoon, mukaan lukien kasvoille, iholle, hiuksiin, suuhun ja silmiin, muuttamaan tai vahvistamaan ihmiskehon ulkonäköä [21]. Lisäksi kosmetiikkaa käytetään puhdistukseen, tuoksuun ja suojaamiseen. Suurin osa kosmetiikasta koostuu kemiallisista yhdisteistä, jotka voivat olla peräisin luonnollisista lähteistä tai synteettisistä aineista [22].

Tässä tutkimuksessa tarkastelimme LACCE:n mahdollisia vaikutuksia kosmetiikan luonnollisena yhdisteenä erilaisilla määrityksillä in vitro ja in vivo. Useat in vitro -määritystulokset osoittivat LACCE:n vahvan antioksidanttiaktiivisuuden vasteena UVB-käsittelylle. Mielenkiintoista on, että LACCEasan-antioksidantin vaikutus korreloi LACCE-pitoisuuden kanssa. LACCE:n (1 prosentti) antioksidanttiaktiivisuus oli verrattavissa NAC:n antioksidanttiseen aktiivisuuteen tai paljon korkeampi kuin C-vitamiinin. LACCE sisältää suuremman määrän klorogeenihappoa, 3,5-dikafeoyylikiinihappoa, leontopodihappoa B ja leontopodihappoa A kuin normaalit edelweissin kallusviljelmät, kuten aikaisemmassa tutkimuksessa [4] osoitettiin. Erityisesti edellinen tutkimus, jossa tunnistettiin kaksi leontopodihappoa edelweissistä, osoitti LACCE:n toiminnallisen roolin antioksidanttina [23].

LACCE-hoito tukahdutti kahden tulehdusgeenin ilmentymisen, mikä viittaa LACCE:n mahdolliseen rooliin anti-inflammatorisessa aktiivisuudessa, kuten aiemmin osoitettiin [7, 24]. Mielenkiintoista on, että tulehdusta ehkäisevässä vaikutuksessa ei ollut merkittävää eroa eri LACCE-pitoisuuksien välillä, mikä osoittaa, että 1 prosentti LACCE saattaa olla riittävä käytettäväksi anti-inflammatorisena aineena kosmetiikassa. Sitä vastoin kosteuttamiseen ja rypistymiseen tarvittavat AQP3:n ja MMP2:n ilmentymät muuttuivat dramaattisesti eri LACCE-pitoisuuksilla suoritetun käsittelyn jälkeen.

Kliininen testi on tärkein vaihe kasviuutteen käyttämisessä kosmeettisena lähteenä. Tässä tutkimuksessa tutkimme LACCE:n vaikutuksia in vivo 21 vapaaehtoisen kanssa. LACCE:n levittäminen kasvoille ja ihokudoksille osoitti merkitsevää lisäystä neljässä eri tekijässä (parannus silmänympärysrypyissä, ihon kimmoisuus, ihon tiheys ja ihon paksuus) lumelääkkeeseen verrattuna. Erityisesti LACCE:n jatkuva käyttö paransi kasvojen ja ihon kudoksia merkittävästi. Vaikka Edelweiss-uutteet tunnetaan kosmetiikan lähteinä, tämä on ensimmäinen raportti, joka osoittaa LACCE:n onnistuneen käytön kosmeettisena materiaalina.

Kasviuutteiden arvioimiseksi kosmeettisena tai lääkelähteenä in vitro markkerigeenien ilmentymisen tutkiminen on suosittu kokeellinen lähestymistapa. Kuitenkin vain valittujen geenien soveltamisella geeniekspressioanalyysiin on useita rajoituksia. Seuraavan sukupolven sekvensoinnin viimeaikainen nopea kehitys helpottaa geeniekspressioanalyysiä genominlaajuisesti. Tässä tutkimuksessa käytimme RNA-Seq:a tutkiaksemme transkription laajuisia muutoksia ihmisen keratinosyyttisoluissa vasteena LACCE:lle. Tuloksemme osoittivat, että vähintään 16,56 prosenttia ihmisen geeneistä ilmentyi keratinosyyttisoluissa, mikä osoittaa ihmisen geenien kudosspesifisen ilmentymisen. LACCE indusoi useiden geenien ilmentymistä; LACCE:n aiheuttama globaali muutos ihmisen transkriptomissa oli kuitenkin lievä verrattuna muihin stressiolosuhteisiin. Tämä tulos takaa LACCE:n turvallisuuden käytettäväksi ihmiskudoksissa.

rikastusanalyysi paljasti, että keratiini 5:tä (KRT5), KRT19:ää, KRT6A:ta, KRT15:tä, KRT14:ää, KRT17:ää ja liitosplakoglobiinia (JUP) koodaavat ylössäädellyt geenit osallistuivat keratinisaatioon ja sarveistumiseen. Epidermaalisilla keratinosyyteillä on tärkeä rooli erilaisten ympäristötekijöiden esteenä [25]. Tarkemmin sanottuna terminaalisesti erilaistuneet epidermaaliset solut kehittyvät kuolleiksi keratinosyyteiksi ohjelmoidun solukuoleman kautta, jota kutsutaan kornifikaatioksi ja muodostavat vahvan epidermaalisen esteen [26]. Solukuoleman jälkeen sarveistunut ihokerros tarjoaa monia etuja kasvoille ja kudoksille, mukaan lukien elastisuuden, stabiilisuuden, kosteutuksen ja mekaanisen kestävyyden lisääntymisen [25]. Tunnistetuista KRT-geeneistä keratiinigeeniperheeseen kuuluvaa Keratin15:tä (KRT15) koodaava geeni tunnetaan karvatupen kantasolumarkkerina, joka ilmentyy voimakkaasti ihokudoksissa [27,28]. Äskettäinen tutkimus on ehdottanut, että KRT15 toimii epiteelin regeneraatiossa säteilyä vastaan ​​ja haavan korjaamisessa [29,30].

Useiden KRT-proteiineja koodaavien geenien lisäksi DDIT4-, BNIP3- ja IGFBP3-proteiinia koodaavat geenit toimivat ohjelmoidussa solukuolemassa. Esimerkiksi DNA-vaurioilla indusoituva transkripti4 (DDIT4) ilmentyy voimakkaasti eri stressien vaikutuksesta ja inhiboi syövän hoitoon liittyvän rapamysiinikompleksin 1 (mTORC1) -reitin nisäkäskohdetta [31]. Aiemmat tutkimukset ovat tunnistaneet DDIT4-geenin, jota ekspressoi voimakkaasti deksametasoni, joka on kemoterapeuttinen aine, joka indusoi autofagiaa lymfosyyteissä, mikä viittaa sen mahdolliseen rooliin solujen kasvun, proliferaation ja eloonjäämisen säätelyssä [32,33]. LACCE osoitti samanlaisia ​​vaikutuksia kuin deksametasoni anti-inflammatorisena aineena. Bcl-2/adenovirus E1B 19-kDa:n kanssa vuorovaikuttava proteiini (BNIP3) on solujen lisääntymistä säätelevän pro-apoptoosin proteiiniperheen jäsen[34]. . Lisäksi BNIP3 osallistuu keratinosyyttien suojaamiseen UVB-indusoidulta apoptoosilta säätelemällä sen geeniekspressiota [35]. Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että insuliinin kaltainen kasvutekijää sitova proteiini 3 (IGFBP-3) ilmentyminen liittyy solujen vanhenemiseen [36,37]. IGFBP-3:n lisääminen indusoi tai estää apoptoosia solutyypeistä riippuen [37]. Esimerkiksi IGFBP-3 lisääntyi ihmisen papilloomaviruksen immortaloiduissa kohdunkaulan soluissa, mikä johti IGF-1--indusoidun mitogeneesin tehostumiseen [37]. Äskettäinen tutkimus on osoittanut IGFBP-3:n vaimenemisen vanhentuvissa ja H, O2--indusoiduissa vanhoissa soluissa verrattuna nuoriin soluihin, mikä viittaa sen mahdolliseen rooliin ikääntymismarkkerina [36].

BNIP3, IGFBP3, stratifiini (SFN), CA2, FGFBP1, KRT17 ja JUP ovat mukana kehitysprosessin positiivisessa säätelyssä. Niistä hiilihappoanhydraasit ovat kaikkialla esiintyviä entsyymejä, joita esiintyy prokaryooteissa ja eukaryooteissa, mukaan lukien eläimet ja kasvit [38]. Ihmisillä hiilihappoanhydraasi katalysoi hiilihapon muodostumista vedestä ja hiilidioksidista (CO,), joita tarvitaan aivojen, munuaisten ja luuston fysiologiaan [39]. Aiempi tutkimus osoitti, että CA4:n ja CA9:n säätely lisääntyi hiiressä haavan hypoksian aikana RNA-Seq:n vaikutuksesta [40]. Lisäksi rekombinantin CA9-entsyymin lisääminen edisti haavan epitelisaatiota [40]. Lisäksi proteomitutkimus paljasti myös CA2-proteiinin osallistumisen ikääntymiseen ja hermoston rappeutumiseen hiirellä [41]. Täällä osoitimme, että LACCE edisti ihmisen keratinosyyttisolujen regeneraatiota säätelemällä CA2-ekspressiota. Fibroblastin kasvutekijää sitova proteiini 1 (FGFBP1) on solunulkoisesti erittynyt kaperoni, joka sitoutuu FGF:iin ja se moduloi FGF-signalointia J42]. Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että FGFBP1 ekspressoituu voimakkaasti angiogeneesin aikana ja sillä on tärkeä rooli ihokarsinogeneesissä, tulehduksissa ja haavan paranemisessa [42-44]. Lisäksi ylöspäin säädeltyjen geenien lokalisaatio rakkulassa, solunulkoisessa eksosomissa, välifilamentissa ja keratiinifilamentissa viittaa siihen, että nämä proteiinit ovat sytoskeleton ensisijainen komponentti.

Alassäädellyissä geeneissä useimpien geenien tiedetään indusoituvan erilaisten stressien vaikutuksesta. Esimerkiksi kaksi metallotioneiini 2a:ta (MT2A) ja metallotioneiini le:tä (MT1E) koodaavaa geeniä indusoituu metallistressiolosuhteissa, mukaan lukien sinkki-ioni, kupari-ioni ja kadmiumioni, sekä oksidatiivisessa stressissä, kuten UVB [45,46]. Lisäksi DNA:ta sitovan 3:n (ID3) estäjä, helix-loop-helix-proteiinien jäsen, on välittömästi varhainen geeni vasteena mitogeenisille signaaleille ja oksidatiiviselle stressille [47]. Ankyriinin toistodomeeni 1 (ANKRD1), joka tunnetaan myös nimellä sydämen ankyriinin toistoproteiini (CARP), on transkription kofaktori, joka säätyy ylös haavan paranemisen aikana ja indusoi angiogeneesiä [48]. Sekä ID3 että ANKRD1 ovat mukana biologisen prosessin negatiivisessa säätelyssä. ID3 toimii transkription säätelijänä, joka estää kantasolujen erilaistumista ja edistää solusyklin etenemistä [47]. Lisäksi äskettäinen tutkimus osoitti, että ANKRD1-toiminnan menetys hiirillä johti haavan viivästymiseen, mikä viittaa sen rooliin haavassa ja kudosvauriossa [49]. ]. Lisäksi Rho:hon liittyvä BTB-domeenia sisältävä 3 (RHOBTB3) toimii edistäen hypoksian aiheuttamien tekijöiden (HIF:iden) proteasomaalista hajoamista, jotka ovat alhaiseen happipitoisuuteen kohdistuvien adaptiivisten vasteiden pääsäätelijät [50]. Lisäksi interferonin indusoima transmembraaniproteiini 1 (IFITM1) estää monien virusten pääsyn isäntäsoluun [51]. Samalla tavalla interferoni indusoi alfa-interferonilla indusoituvaa proteiinia 6 (IFI6) koodaavaa geeniä, ja se säätelee apoptoosia ja antiviraalista luontaista immuniteettia [52,53]. Stressiin reagoivien geenien säätely LACCE-hoidolla viittaa siihen, että LACCE ei aiheuta stressiä ihmisen keratinosyyttisoluissa.

5. Johtopäätökset

Tässä arvioimme LACCE:n luonnonkosmeettisena materiaalina useilla in vitro ja in vivo -testeillä, mikä viittaa sen voimakkaisiin vaikutuksiin kasvojen ja ihokudosten paranemiseen. Erityisesti RNA-Seg-pohjainen transkriptianalyysi paljasti molekyylimekanismin ihmisen keratinosyyttisoluissa vasteena LACCE:lle. LACCE säätelee keratinisaatioon ja kornifikaatioon osallistuvaa geeniä, mikä tarjosi ihosuojan, jota edistävät ohjelmoituun solukuolemaan tarvittavat geenit. Monia kehitysprosessin positiivisia säätelijöitä säädeltiin ylöspäin, kun taas erilaiset stressin aiheuttamat geenit vähensivät LACCE-hoitoa. Kaiken kaikkiaan tutkimuksemme osoitti, että LACCE on ikääntymistä estävä kosmetiikka tai kosmeettinen aine.

Tämä artikkeli on poimittu julkaisusta Genes 2020, 11, 230; doi:10.3390/genes11020230 www.mdpi.com/journal/genes