Cistanche Deserticolan terapeuttinen vaikutus ulostukseen seniilissä ummetusrottamallissa

Ottaa yhteyttä:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Xia Zhang, Fa-Juan Zheng, Zhen Zhang

Abstrakti

TAUSTA

Ummetus on yksi kroonisista maha-suolikanavan toiminnallisista sairauksista. Se vaikuttaa vakavasti elämänlaatuun. Cistanche deserticola (C. deserticola) voi ilmeisesti hoitaa ummetusta, mutta sen mekanismia ei ole selvitetty. Oletimme, että sen mekanismi parantaa suolen motiliteettia stimuloimalla interstitiaalisia Cajalcells (ICC) -soluja. C-kit-reseptorin aktivoituminen ICC:n pinnalla liittyy läheisesti ICC:n toimintaan, ja kantasolutekijän (SCF)/C-kit-signalointireiteillä on siinä tärkeä rooli. Tutkiakseen mekanismia, jolla C. deserticola hoitaa ummetusta, tämän tutkimuksen tavoitteena oli luoda rottien ummetusmalli ja tutkia SCF/C-kit-signalointireitin roolia hoidossa.

AIM

Tutkia SCF/C-kit-signalointireittejä C. deserticolan roolissa ummetuksen hoidossa ummetusrottamallilla.

MENETELMÄT

48 8-kuukautista Sprague–Dawley-rotta jaettiin 4 ryhmään satunnaispainomenetelmällä: normaaliryhmä (n=12), malliryhmä (n=12), C. deserticola -ryhmä. (n=12) ja estoryhmä (n=12). Normaali ryhmä sai normaalia suolaliuosta leukaluokituksella; malliryhmä sai loperamidia letkuruokinnalla; salpaajaryhmä sai loperamidia ja C. deserticolaa letkuruokinnalla ja STI571 injektoitiin intraperitoneaalisesti. Hoidon aikana paino, ulosteen rakeet ja ulosteen laatu rekisteröitiin 10 päivän välein. Päivänä 20 mallin induktion jälkeen kunkin ryhmän paksusuolen kudokset poistettiin. Patologisten muutosten havaitsemiseen käytettiin hematoksyliini- ja eosiinivärjäystä. SCF-, C-kit- ja Aquaporin-geenien ilmentymistasot havaittiin immunohistokemialla, Western blot -menetelmällä ja reaaliaikaisella kvantitatiivisella polymeraasiketjureaktiolla. Paksusuolen epiteelin mitokondrioita ja pikarisoluja tarkkailtiin transmissioelektronimikroskoopilla.

TULOKSET

Normaaliryhmään verrattuna hoidon edetessä rottien paino malli- ja salpaajaryhmissä laski merkittävästi, ulosteiden paino laski ja ulosteen laatu oli kuiva (P < {{0}}.{{6}="" }5).="" c.="" deserticola="" kumosi="" kehon="" painon="" ja="" ulosteen="" painon="" laskun="" ja="" paransi="" ulosteen="" laatua.="" histopatologinen="" analyysi="" osoitti,="" että="" paksusuolen="" limakalvon="" epiteeli="" malliryhmässä="" oli="" epätäydellinen="" ja="" rauhasten="" järjestely="" oli="" epäsäännöllinen="" tai="" vaurioitunut.="" hoito="" c.="" deserticolalla="" paransi="" epiteelisolujen="" eheyttä="" ja="" jatkuvuutta="" sekä="" rauhasten="" säännöllistä="" järjestystä.="" suoja-aineet="" estivät="" c.="" deserticolan="" vaikutuksia.="" immunohistokemia="" ja="" reaaliaikainen="" kvantitatiivinen="" polymeraasiketjureaktio="" osoittivat,="" että="" scf:n="" ja="" c-kitproteiinin="" tai="" geenien="" ilmentyminen="" malliryhmän="" paksusuolen="" kudoksessa="" väheni="" (p="">< 0,05),="" kun="" hoidettiin="" c.="" deserticola="" lisäsi="" proteiinin="" tai="" geenin="" ilmentymistä="" (p="">< 0,05).="" western="" blotting="" osoitti,="" että="" akvaporiini="" apq3:n="" ilmentyminen="" lisääntyi,="" kun="" taas="" cx43:n="" ilmentyminen="" väheni="" malliryhmässä.="" käsittely="" c.="" deserticolainilla="" esti="" apq3:n="" ilmentymisen="" ja="" edisti="" cx43:n="" ilmentymistä.="" transmissioelektronimikroskooppi="" osoitti,="" että="" malliryhmän="" paksusuolen="" epiteelin="" mitokondriot="" olivat="" turvonneet="" ja="" järjestäytyneet="" epäsäännöllisesti="" ja="" mikrovillit="" olivat="" harvassa.="" kunto="" oli="" parempi="" c.="" deserticola="" -ryhmässä.="" sti571-salpaajalla="" hoidetut="" hiiret="" vahvistivat,="" että="" scf/c-kit-reitin="" estäminen="" esti="" c.="" deserticolan="" aiheuttaman="" ummetuksen="">

PÄÄTELMÄ

C. deserticola paransi ulostamista rotilla, joilla oli ummetusta, ja SCF/C-kitsignaling-reitillä, joka on keskeinen linkki ICC-toiminnassa, oli tärkeä rooli hoidossa.

Avainsanat:Cistanche deserticola; Seniili ummetus; kantasolutekijät; C-sarja

tuoretta vesisäiliön raaka-ainetta

JOHDANTO

Seniili ummetus (SC) on yksi yleisimmistä iäkkäiden potilaiden kroonisista maha-suolikanavan toiminnallisista sairauksista, joka aiheuttaa tai pahentaa aivoverisuonitapahtumia ja muita sairauksia ja vaikuttaa vakavasti iäkkään väestön elämänlaatuun[1,2]. Perinteisen kiinalaisen lääketieteen mukaan tärkein Scaren etiologia ja patogeneesi maha-suolikanavan lämpö, ​​Yinin ja Jinin puutos ja suoliston kosteudenpoisto[3,4], kun taas Cistanche deserticola (C. deserticola) voi lämmittää munuaisia ​​ja rentouttaa suolia. Tutkijat ovat raportoineet, että suoliston vaikutus SC:n liikkuvuuden parantaminen ja hoito on selvää, mutta sen mekanismia ei ole selvitetty[5,6]. Interstitiaaliset Cajalcells (ICC:t) ovat erityinen mesenkymaalisten solujen tyyppi maha-suolikanavassa. C-kit-reseptorin aktivoituminen ICC-solujen pinnalla liittyy läheisesti solujen lisääntymiseen, erilaistumiseen ja toimintaan. ICC:t osallistuvat monien maha-suolikanavan motoristen toimintahäiriöiden patogeneesiin[7,8]. C-kit:n aktivointi riippuu sen ligandikantasolutekijän (SCF) sitoutumisesta[9]. C.:n vaikutuksen ja vaikutusmekanismin tutkimiseksi. deserticola on SC, tämän tutkimuksen tarkoituksena oli luoda SC-malli rotille byloperidolilla indusoidun SCF/C-kit-signalointireitin roolin tutkimiseksi C. deserticolan aiheuttaman ummetuksen hoidossa.

MATERIAALIT JA MENETELMÄT

Kokeellinen materiaali

Koeeläimet:Koe-eläimet olivat 48 urospuolista 8-kuukautista Sprague Dawley -rottaa, jotka painoivat 500-550 g; kaikki ostettu Changsha Tianqin BiotechnologyCo:lta. Ltd. Rotat kasvatettiin Chongqing Weisiteng BiomedicalTechnology Co. Ltd.:n eläinlaboratoriossa, jolle annettiin normaali päivä- ja yövalo, ruokaa ja juomaa. Kaikki menettelyt olivat Chongqingin perinteisen kiinalaisen lääketieteen sairaalan eettisen komitean antamien johtamisohjeiden mukaisia.

Ensisijaiset reagenssit:Ensisijaisia ​​reagensseja olivat loperamidi (Sigma, St. Louis, MO, Yhdysvallat), C. deserticola yhtiöltä Hubei Jurui Traditional Chinese Medicine DecoctionCo. Ltd., STI571, Chinese Selleck Co. Ltd., ja SCF, C-kit, connexin 43 (Cx43), akvaporiini 3 (AQP3) ja -aktiinivasta-aineet (Abcam, Cambridge, MA, Yhdysvallat), PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit ja Premix Taq™ (Ex Taq™ versio 2.0) (Takara Co. Ltd., Japani).

cistanche-yrttiuute-lisäaineet

menetelmät

SC-mallin valmistelu ja ryhmittely:Hämmentävien tekijöiden, kuten ruumiinpainon, vaikutuksen välttämiseksi koetuloksiin rotat ryhmiteltiin satunnaisesti lohkosatunnaisryhmittelymenetelmällä. Neljäkymmentäkahdeksalle rottaa ruokittiin adaptiivisesti 1 viikon ajan, ja rotat numeroitiin painon mukaan kevyestä raskaaseen. Ruumiinpainojärjestyksen mukaan rotat jaettiin 12 vyöhykkeeseen (rottien paino kullakin vyöhykkeellä oli samanlainen), ja kullakin vyöhykkeellä oli 4 rottaa. 12 vyöhykettä jaettiin neljään 12 vyöhykkeen ryhmään (normaali, malli, C. deserticola ja esto). Malliryhmän rotille annettiin loperamidia (0.0625/100 g, 10 ml/kg) letkun kautta. Ensimmäinen letkuannos kaksinkertaistettiin ja lääkettä annettiin klo 10.00 joka päivä, kerran päivässä 20 peräkkäisen päivän ajan. Normaalille ryhmälle annettiin sama määrä normaalia suolaliuosta letkulla. Lisäksi malliryhmää käsiteltiin C. deserticolalla (0,156 g/100 g, 10 ml/kg) letkulla. Salpaajaryhmälle annettiin C. deserticolaa (0,156 g/100 g, 10 ml/kg) letkulla ja STI571:tä (25 mg/ml, 1 ml/kg) intraperitoneaalisella injektiolla. Kokeen aikana ruumiinpaino, ulosteen paino ja ulosteen tila rekisteröitiin 10 päivän välein. Yhdelläkään rotalla ei tapahtunut tahatonta kuolemaa. Kaksikymmentä päivää myöhemmin rotat tapettiin ja paksusuolen kudos poistettiin tutkimusta ja nestemäisen typen säilyttämistä varten. Loput osat kiinnitettiin ja upotettiin.

Histopatologinen analyysi:Rotat, jotka olivat paastonneet yön yli, nukutettiin intraperitoneaalisella injektiolla 7-prosenttisella kloraalihydraatilla (5 ml/kg) seuraavana päivänä. Vatsa avattiin paksusuolen kudoksen erottamiseksi, ja 8-10 mm paksusuolesta poistettiin. Suoliston sisältö poistettiin ravistamalla varovasti esijäähdytetyssä polybuteenisukkinaatissa ja kiinnitettiin 24 tuntia 4-prosenttisessa paraformaldehydikiinnitysliuoksessa. Suoritettiin tavanomainen parafiini upottaminen. Kudosleikkeitä (5 μm) poistettiin hematoksyliini- ja eosiinivärjäystä varten, ja histopatologinen morfologia tarkkailtiin mikroskoopilla.

SCF:n ja C-kit:n ilmentymisen havaitseminen immunohistokemiallisella värjäyksellä:Yllä histopatologialla tutkitut parafiinikudokset leikattiin, hydrattiin uudelleen leikatulla ksyleenillä, josta oli poistettu vaha, gradienttietanolilla, antigeeni korjattiin lämmöllä ja suljettiin 1 tunnin ajan vuohen seerumilla huoneenlämpötilassa. SCF- ja C-kit-primaariset vasta-aineet lisättiin tipoittain ja kudoksia pidettiin yön yli 4 °C:ssa. Polybutyleenisukkinaatilla huuhtelun jälkeen piparjuuriperoksidaasi tiputettiin leimaamaan sekundaarista vasta-ainetta, huuhdeltiin polybuteenisukkinaatilla 5 minuuttia, tiputettiin 2,4-diaminovoihappokromogeeniliuosta, värjättiin uudelleen hematoksyliinilla, käänteinen gradientti alkoholidehydratointi, läpinäkyvä ksyleenillä ja neutraalilla hartsitiiviste. Mikroskooppisesti ytimet olivat purppuransinisiä ja positiiviset tulostuotteet olivat ruskeankeltaisia ​​tai keltaisia ​​hiukkasia.

C-kit-mRNA:n ilmentymisen havaitseminen paksusuolen kudoksessa reaaliaikaisella kvantitatiivisella polymeraasiketjureaktiolla (RT-qPCR):Jäädytetty rotan paksusuolen kudos jauhettiin homogenisaattorilla ja lisättiin 1 ml RNAiso Plus:a. Paksusuolen kudoksen kokonais-RNA uutettiin kloroformi/isopropanoli-menetelmällä ja RNA:n laatu havaittiin geelielektroforeesilla. Sen jälkeen kun 1 ug RNA:ta oli tunnistettu Bio-Rad-geelikuvantajalla, se käänteiskirjoitettiin cDNA:ksi Takara PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit -pakkauksella. NCBI-tietokannan Gene ID: 64030 mukaan C-kit-geenin CDS-alue löydettiin ja yhdistettiin NCBI Primer-Blast -suunnittelu Alukesekvenssi, jonka syntetisoi Sangon Biotech Co. Ltd, C-kit-alukesekvenssi sense-juoste 5'-AGGT GTACCGTTCCTGTCCC-3', antisense-juoste 5'-GGCTGGATTTGCTCTTTGCTGT-3', - aktiinisense-juoste 5'-CTTCCTTCCTGGGTATGGAATC-3', antisense-juoste 5'-CTGTGTTGGCATAGAGGTCTT-3'. PCR-monistus suoritettiin Bio-RadCFX90 Real-Time PCR-laitteella. PCR-määrityksen olosuhteet olivat alkudenaturaatio 95 asteessa 5 minuutin ajan, 30 95 asteen sykliä 30 s, 60 astetta 30 s ja 72 astetta 1 minuutin ajan, mitä seurasi lopullinen pidennys 72 asteessa 10 minuutin ajan. 2-ΔΔCt (ΔCt=Ct-arvo - -aktiini Ctarvo) otettiin analysoimaan suhteellista geeniekspressiota.

Cx43:n ja AQP3:n proteiiniekspressiotason havaitseminen paksusuolen kudoksessa Western blot -menetelmällä:Noin 1 cm jäätynyttä paksusuolen kudosta kerättiin ja lyysattiin vahvalla RIPA-pyrolyysinesteellä (100 µl). Kudos homogenisoitiin lasihomogenisaattorilla 20 kertaa ja siirrettiin 1,5 ml:n sentrifugiputkeen. Supernatantti uutettiin sentrifugoinnin jälkeen 12 000 rpm 4 asteessa 5 minuutin ajan, ja supernatantin kokonaisproteiinin pitoisuus määritettiin BCA-menetelmällä. Poistimme 25 ug denaturoitua proteiinia natriumdodekyylisulfaatti-polyakryyliamidigeelielektroforeesin suorittamiseksi ja siirsimme sitten geelissä olevat proteiinit polyvinylideenifluoridikalvolle vakiovirralla 200 mA ja suljettiin sitten 5-prosenttisella rasvattomalla maidolla suljetulla nesteellä 2 tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Vastaavat primaariset vasta-aineet laimennettiin sulkunesteellä, inkuboitiin 4 asteessa yön yli, sitten pestiin kalvoresistenssi ja lisättiin toisia vasta-aineita. ECL-nesteen lisäämisen jälkeen ne asetettiin valotusmittarin alle testiä varten optisen tiheysanalyysin avulla.

Transmissioelektronimikroskooppi:Otimme noin 1 cm:n proksimaalista paksusuolen kudosta, kiinnitimme sen 2,5-prosenttisessa glutaraldehydissä 24 tunnin ajan, kuivasimme sen asteittaisella asetonilla, upotettiin Epon812:een ja leikkasimme 50 nm:n ultraohuita leikkeitä ultramikrotomilla. Leikkeet värjättiin uraanidioksidiasetaatilla ja lyijysitraattivärjäysnesteellä huoneenlämpötilassa 10 minuutin ajan. Havaitsimme paksusuolen villiä, epiteelisolujen mitokondrioita ja pikarisoluja Philips Tecnai{7}}-transmissioelektronimikroskoopilla.

Tilastollinen analyysi

Tietojen analysointiin käytettiin SPSS 19.{1}} -ohjelmistoa ja tulosten piirtämiseen GraphPad Prism8.4 -ohjelmistoa. Normaalimittaukseen käytettiin Shapiro-Wilkin testiä. Normaalijakauman tiedot esitettiin keskiarvona ± SD. Virhekohteita käytettiin edustamaan hemoglobiinin keskiarvoa ± SD hoidon jälkeen. Kahden ryhmän vertailussa käytettiin opiskelijan t-testiä. Useiden ryhmien vertailussa käytettiin varianssianalyysiä. Useiden ryhmien pareittain vertailuun käytettiin Student-Newman-Keulsin menetelmää, ja Dunnettin testiä käytettiin mittaamaan eroja kunkin koeryhmän ja kontrolliryhmän välillä peräkkäin. Liittyvät tiedot mitattiin useilla aikapisteillä, ja toistuva mittaustietojen varianssianalyysi suoritettiin. suoritettu. Jos palloisuustesti osoitti P > 0.{{10}}5, käytettiin toistuvan mittausdatan varianssianalyysiä. Jos P < 0,05,="" otettiin="" yleinen="" estimaatioyhtälö.="" dataa,="" joka="" ei="" vastannut="" normaalijakaumaa,="" edusti="" m="" (p25,="" p75),="" ja="" ryhmien="" väliseen="" vertailuun="" käytettiin="" kruskal-wallis="" h="" rank-sum="" -testiä.="" χ2-testiä="" käytettiin="" vertailemaan="" ryhmien="" välillä,="" kun="" data="" oli="" järjestämätöntä="" dataa,="" ja="" pearsonin="" χ2-testiä="" käytettiin,="" jos="" solujen="" osuus,="" joiden="" teoreettinen="" taajuus="" oli="">< 5,="" oli="">< 20="" prosenttia.="" jos="" solujen="" osuus,="" joiden="" teoreettinen="" taajuus="" oli="">< 5,="" oli="" suurempi="" tai="" yhtä="" suuri="" kuin="" 20="" prosenttia,="" käytettiin="" fisherin="" tarkkaa="" testiä.="" p="">< 0,05="" käytettiin="" määrittämään,="" että="" ero="" oli="" tilastollisesti="">

Kuva 1 Paksusuolen histopatologiset muutokset.

TULOKSET

Yleiset ehdot

Päivä loperamidin letkuruokituksen jälkeen verrattuna normaaliryhmään, paino ja ulosteen paino laskivat merkittävästi malliryhmässä (P < {0}},05),="" mutta="" ulosteen="" laadussa="" ei="" ollut="" merkittävää="" eroa.="" pisteet="" (p=""> 0,05). C. deserticol -hoito malliryhmässä hidasti kehon painon ja ulosteiden painon laskua (P< 0.05),="" but="" the="" bodyweight="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" reduced.="" after="" 10="" d="" of="" treatment,="" compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" body="" weight="" and="" stool="" volume="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" were="" further="" significantly="" reduced,="" and="" the="" stools="" were="" dry="" and="" almost="" contained="" no="" water="" (p="" <="" 0.05).="" the="" body="" weight="" loss="" of="" rats="" was="" also="" significantly="" reduced="" by="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" (p="" <="" 0.05).="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" different="" from="" that="" in="" the="" model="" group="" (p="" >="" 0.05).="" on="" day="" 20="" before="" sampling,="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" normal="" group,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" significantly="" increased="" (p="" <="" 0.05),="" while="" the="" weight="" loss="" caused="" by="" constipation="" was="" inhibited="" by="" c.="" deserticola="" treatment,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" decreased="" (p="" <="">

Paksusuolen histopatologia

Rottien paksusuolen kudoksen hematoksyliini- ja eosiinivärjäytyminen on esitetty kuvassa 1. Normaalissa ryhmässä suolen villit olivat ehjiä, suolen limakalvo oli ehjä ja jatkuva, solut ja rauhaset järjestyivät säännöllisesti. Tulehdussolut eivät tunkeutuneet limakalvoon ja limakalvon alle, ja kudosrakenne oli normaali. Malliryhmässä suolistorakkulat ja limakalvot tuhoutuivat suurelta osin, paikalliset villit irtosivat ja asettuivat löyhästi ja osa rauhasrakenteesta hävisi. C. deserticola -ryhmässä histopatologinen värjäys oli pienempi kuin malliryhmässä, mutta joissakin pikarisoluissa oli nekroosia. Intraperitoneaalisen injektion jälkeen salpaajaryhmässä, verrattuna C. deserticola -ryhmään, oli edelleen paikallista suolen villien häviämistä ja suolen limakalvon murtumia ja menetyksiä.

Kuva 2 Kantasolutekijän ja suhteellisen optisen tiheyden suhteen ilmentyminen paksusuolen kudoksessa immunohistokemiallisella detektiolla.

Kantasolutekijän ja C-kit-proteiinin ilmentymisen havaitseminen immunohistokemiallisella värjäyksellä

Immunohistokemiallinen värjäys osoitti, että SCF ja C-kit ilmentyivät kontrolliryhmän paksusuolessa. Verrokkiryhmään verrattuna SCF:n ja C-kit:n ilmentyminen malliryhmässä väheni merkittävästi (P ​​< 0.05).="" malliryhmään="" verrattuna="" scf:n="" ja="" c-kit:n="" ilmentyminen="" c.="" deserticola="" -ryhmässä="" lisääntyi="" merkittävästi="" (p="">< 0,05).="" scf:n="" ja="" c-kit:n="" ilmentymisessä="" ei="" ollut="" eroa="" salpaaja-="" ja="" malliryhmien="" välillä="" (p="">< 0,05,="" kuviot="" 2="" ja="">

RT-qPCR

RT-qPCR showed that expression of C-kit mRNA in the model group was significantly lower than in the normal group (Figure 4, P < 0.05). Compared with the model group, C-kit in the C. deserticola group was significantly increased (P < 0.05). There was no significant difference in C-kit mRNA level between the model and blocker groups (P >0.05). Nämä tulokset osoittivat, että C. deserticolan säätämä C-kit-ekspressio osallistui ummetuksen paranemiseen, ja salpaajat estivät C.:n tehokkuutta. deserticola.

cistanche-salsan edut

Western blottaus

Western blotting osoitti, että AQP3-proteiinia ilmentyi alhaisella tasolla normaalissa kontrolliryhmässä, kun taas malliryhmässä se oli merkittävästi lisääntynyt verrattuna kontrolliryhmään (Kuva 5) (P < 0.05)="" .="" aqp3-proteiinin="" ilmentyminen="" väheni="" c.="" deserticolalla="" käsittelyn="" jälkeen,="" ja="" c.="" deserticolan="" estävä="" vaikutus="" aqp3:n="" ilmentymiseen="" inhiboitui="" salpaajakäsittelyllä="" (p="">< 0,05).="" cx43:n="" ilmentyminen="" oli="" päinvastainen="" kuin="" aqp3:n="" ilmentyminen.="" nämä="" tulokset="" viittasivat="" siihen,="" että="" c.="" deserticolan="" farmakologinen="" vaikutus="" sc-rotissa="" saavutettiin="" edistämällä="" cx43:n="" ilmentymistä="" ja="" estämällä="" aqp3:n="" ilmentymistä="" (kuvat="">

Transmissioelektronimikroskooppi

Loperamidi-induktion jälkeen mitokondrioiden turvotusta ja autofagiaa esiintyi joissakin malliryhmän paksusuolen limakalvon epiteelisoluissa. Suoliston mikrovillien määrä ja pituus vähenivät ja esiintyi pikarisolupyknoosia (kuva 8). C. deserticolalla tehdyn hoidon jälkeen suoliston mikrovillien määrä lisääntyi. Themicrovillit oli järjestetty siististi ja rakenne oli valmis. Pikarisolut ovat lyhyempiä, mitokondrioiden epäsäännöllinen morfologia ja pikarisolujen vaikea pyknoosi.

Kuvio 3 C-kitin ilmentyminen ja suhteellinen optinen tiheyssuhde paksusuolen kudoksessa immunohistokemiallisella detektiolla.

KESKUSTELU

Ummetus on yleinen iäkkäillä ihmisillä, ja se on yksi yleisimmistä iäkkäiden ihmisten terveydentilaan ja elämänlaatuun vaikuttavista oireista[10,11]. Perinteisen kiinalaisen lääketieteen osatekijät, Bai et al[12] uskoivat, että SC:n peruspatogeneesi oli paksusuolen johtumistoiminnan toimintahäiriö, seniili kehon vajaatoiminta, maksan ja munuaisten toiminnan asteittainen menetys, qin ja veren puute sekä kehon nesteen menetys. , joka johti kuiviin ulosteisiin, mikä johti ummetukseen[13]. SC aiheuttaa painetta potilaille ja heidän perheilleen monin tavoin, ja on tärkeää selvittää sen patogeneesi.

C. deserticolalla on munuaisten yangin virkistys, veren hyödyn saaminen ja kehon vastustuskyvyn säätely[14]. C. deserticola ja kiinalainen yrttikeite, joka sisältää C. deserticolaa on käytetty laajalti ummetuksen hoidossa, ja kliininen vaikutus on huomattava. Du et al[15] havaitsivat Yangin puutos- ja ummetusmallissa, että C. deserticola paransi eristetyn paksusuolen supistumisamplitudia, vahvisti suoliston supistumiskykyä ja palautti maha-suolikanavan hormonien tason normaaliksi. Lisäksi C. deserticolan ravintokuitu, C. deserticolan prosessoinnin sivutuote, parantaa ulosteen vedenpidätyskykyä, ja sen etuna on pieni annos ja hyvä vaikutus suoliston ravitsemiseen ja ulostamisen parantamiseen[16]. Tutkimuksemme havaitsi, että C. deserticola -hoito paransi ummetusta sairastavien rottien ulosteiden kosteutta ja paksusuolen histopatologiaa.

ICC:itä esiintyy kaikkialla suolistossa, ja niillä on tärkeä rooli suoliston liikkeen hermostossa tahdistimena ja suoliston hermovälityksenä[17]. ICC:t ekspressoivat protoonkogeeniä koodaavaa reseptorityrosiinikinaasia, C-kit, ja SCF on suoliston ligandi. C-kit[18]. SCF/C-kit-järjestelmä on ratkaisevan tärkeä ICC:iden kehittämisessä. SCF/C-kit-signalointireittiä on analysoitu rottien hitaan siirtymisen ummetuksen akupunktiohoidon aikana[19]. Sähköakupunktio Tianshun pisteessä lisäsi paksusuolen ICC:iden määrää ACK2-käsitellyissä hiirissä, lisäsi SCF- ja C-kit-proteiinien ilmentymistä ja käänsi ICC:n fenotyypin. Qi:n ja pernan virkistysmääräys voi lisätä ICC:n ilmentymistä paksusuolen kudoksessa ja lisätä C-kit- ja SCF-mRNA:n ilmentymistä, mikä parantaa ummetusoireita[20]. Tutkimuksessamme immunohistokemia osoitti, että C. deserticola lisäsi merkittävästi SCF:n ja C-kit-proteiinin ilmentymistä SC:n rottamallissa, ja RT-qPCR osoitti, että C. deserticola lisäsi merkittävästi C-kitmRNA:n ilmentymistä. C-kit-salpaaja esti C. deserticolan indusoimaa SCF:n ja C-kit:n ilmentymisen lisääntymistä.

Ulosteen vesipitoisuus ja paksusuolen veden kulkeutuminen liittyvät läheisesti AQP:iin, joilla on tärkeä rooli suoliston veden aineenvaihdunnassa[21]. Tutkimuksessa rotilla, joilla oli hidaskuljetuskykyinen ummetus, defekaatiokeittäminen paransi merkittävästi ummetusoireita säätelemällä suoliston veden imeytymistä alentamalla AQP3:n ja AQP4:n säätelyä[22]. Funktionaalisen ummetuksen rotan mallissa Oral Xiaofu Tongjie Fluidin funktionaalisen ummetuksen hoitomekanismi voidaan toteuttaa säätelemällä vasoaktiivisen suoliston polypeptidin ja AQP3:n ilmentymistä paksusuolessa[23]. Rakoliitoksilla on olennainen rooli sileälihassolujen synkronisen supistumisen välittämisessä. Cx43 on tärkein proteiini tämän prosessin aikana[24]. Cx43:n ilmentymisen häviäminen voi olla osittain vastuussa sileän lihaksen motorisesta toimintahäiriöstä[25]. Suolen hermoston verkkorakenteen korjaaminen rotilla, joilla on hidas ummetus, voi parantaa Cx43:n jne. ilmentymistä ja ummetusoireita[26]. Nämä tulokset osoittavat, että lisääntynyt AQP3:n ilmentyminen vähentää ulosteen vesipitoisuutta, mikä johtaa ummetukseen, joka voi olla tärkeä ummetuksen mekanismi. Cx43:n ilmentyminen voi liittyä suolen sileän lihaksen supistumiseen ja vähentää ummetuksen esiintymistä. Tutkimuksessamme Western blotting osoitti, että Cx43:n ilmentyminen lisääntyi ja AQP3:n ilmentyminen esti C.deserticola-käsittelyllä, mikä johti lisääntyneeseen sileän lihaksen supistumiseen ja vähentyneeseen veden imeytymiseen, ja salpaajahoito kumosi nämä vaikutukset.

Cistanche tubulosa -uutetabletitparantaaummetusaiheuttamaloperamiinija vähentääpaksusuolen kudosvaurio.

Saat lisätietoja napsauttamalla tätä.

PÄÄTELMÄ

Yhteenvetona voidaan todeta, että C. deserticola voi estää AQP3:n ilmentymisen ja edistää Cx43:n ilmentymistä SCF/C-kit-reitin kautta, mikä parantaa loperamiinin aiheuttamaa ummetusta ja vähentää paksusuolen kudosvaurioita iäkkäillä rotilla. Tämä tutkimus tarjosi hyvän teoreettisen perustan C. deserticolan kliiniselle käytölle.