Ruokavalion humusaineiden vaikutus porsaiden solujen immuunijärjestelmään ja veren ominaisuuksiin

Abstrakti: Tämän tutkimuksen tavoitteena oli määrittää ravinnon humusaineiden vaikutus porsaiden immuunivasteeseen ja veriprofiileihin. Yhteensä 24 risteytettyä porsasta (Slovakian White × Landrace; 35 päivää vanha; keskipaino 11,67 kg) jaettiin kahteen ravintoryhmään joko (kokeellinen; 5 g·kg-1) tai ilman (kontrolli; 0 g·kg−1 ) luonnollinen humusainelisä. Tässä tutkimuksessa havaitsimme CD4+CD8--lymfosyyttien osuuden merkittävän kasvun (p < {{10},001) koeryhmässä. Tulokset osoittivat myös taipumusta fagosyyttiaktiivisuuden ja fagosyyttien imeytyskyvyn lisääntymiseen sekä muiden seurattujen lymfosyyttialapopulaatioiden (CD3+, CD21+, CD4-D) lukumäärään. 8+, CD4+CD8+, CD4+CD25+) koeryhmän porsailla verrattuna kontrolliryhmään. Huumusin lisäys lisäsi seerumin alkalista fosfataasia verrokkiryhmään verrattuna (p < 0,05). Ruokavaliohoito ei vaikuttanut merkittävästi muihin seurattuihin veriparametreihin. Se päätteli, että humusaineiden sisällyttäminen porsaiden ruokavalioon voisi stimuloida solujen immuniteettia ilman, että hematologisiin ja biokemiallisiin parametreihin olisi kielteinen vaikutus.

Avainsanat: humusaineet; fagosytoosi; lymfosyytti; veren biokemia; hematologia; porsaat

cistanche-lisän edut - kuinka vahvistaa immuunijärjestelmää

1. Esittely

Humusaineet (HS) ovat maaperässä muodostuvien ei-ravitsevien luonnollisten orgaanisten bioaktiivisten yhdisteiden luokka [1]. Ne ovat tärkeitä humuskomponentteja, joiden ensisijaisena tehtävänä on siirtää ravinteita maaperästä eläviin organismeihin. HS sisältää erityisesti humiinihapon, fulvohapon ja humiinin niiden pääaineosina [2]. Nämä komponentit ovat välttämättömiä kasvien kasvulle [3] ja voivat edistää kasvin ravinteiden tehokasta hyödyntämistä [4]. Koska antibioottien käyttö kasvunedistäjinä on kielletty Euroopan unionissa, kiinnostus vaihtoehtoisia rehun lisäaineita kohtaan on lisääntynyt [5]. Kahden viime vuosikymmenen aikana kiinnostus HS:n käyttöä kohtaan eläinten ruokinnassa on lisääntynyt [2,6]. Monet kirjoittajat havaitsivat tutkimustensa aikana tuotantoparametrien paranemisen HS:n lisäämisen jälkeen rehuun. Viime vuosina on osoitettu, että yksimahaisten eläinten, kuten sikojen, siipikarjan ja kanien, rehuun lisätty HS edistää kasvua [7–10]. Lisäksi HS:ää on käytetty immunostimulatorisena, ripulia estävänä, kipua lievittävänä ja antimikrobisena aineena eläinlääkintäkäytännöissä [11–13]. Biologisesti aktiivisten humusluonteisten lisäravinteiden lisääminen eläinten ruokavalioon stimuloi aineenvaihduntaprosesseja ja ravintoaineiden sulavuutta ja aktivoi myös joidenkin mineraalielementtien imeytymistä [14]. Muissa tutkimuksissa havaittiin, että HS auttaa vähentämään ammoniakin erittymistä lannasta ja parantamaan veren lymfosyyttien suhteellista määrää. Yllä mainitut modifikaatiot auttavat eläinten immuniteettia [2,8,15]. Kuitenkin johtuen HS-valmisteiden eri lähteistä ja tyypeistä sekä siitä, että aitojen HS-vaikutusten mittaamiseen ei ole olemassa yhtä standardia, niiden biovaikutus riippuu spesifikaatiosta. Perustuu aikaisempiin tuloksiimme ja kokemuksiimme siipikarjatutkimuksista (broilerit ja munivat kanat) humusaineiden vaikutuksesta (pitoisuuksina 0,8 % ja 0,5 %) immuunitilaan. ja immuunivaste, päätimme varmistaa tämän vaikutuksen porsailla. Havaitsimme fagosyyttiaktiivisuuden ja B-soluvasteen merkittävän lisääntymisen sekä CD4+:CD8+-lymfosyyttisuhteen merkittävän kasvun [16,17]. Yleisesti ottaen lisäravintoa sikojen rehun lisäaineena ei ole raportoitu hyvin siipikarjaan verrattuna, ja tieteelliset tutkimukset HS-lisän vaikutuksesta sikojen ruokavalioon immuniteettiin ja aineenvaihduntaan ovat edelleen suhteellisen rajallisia. Siksi tämä pilottitutkimus suoritettiin, jotta voidaan arvioida 0,5 % HS:n lisäyksen vaikutusta immuuni-indikaattoreihin sekä biokemiallisiin ja hematologisiin muuttujiin porsaiden veressä.

cistanche-lisän edut - kuinka vahvistaa immuunijärjestelmää

Napsauta tästä nähdäksesi Cistanche Enhance Immunity -tuotteet

【Kysy lisää】 Sähköposti:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2. Materiaalit ja metodit

2.1. Kokeellinen suunnittelu

Koe suoritettiin "tieteellisiin tarkoituksiin käytettävien eläinten suojelusta annetun eurooppalaisen direktiivin" [18] mukaisesti. Eläimiä pidettiin akkreditoiduissa talleissa, jotka ovat Eläinlääketieteen yliopiston eläinlääketieteen yliopistossa Košicessa, Slovakiassa, vaadituissa eläinhygieniaolosuhteissa. Kokeen aikana tallin keskilämpötila oli 20,2 ± 1,5 ◦C ja suhteellinen kosteus 68,5 ± 4,8 %. Košicen eläinlääketieteen ja farmasian yliopiston eettinen toimikunta hyväksyi kokeen (pöytäkirja nro EKV/2022-11). Yhteensä 24 risteytettyä (Slovakian White x Landrace) 35-vuorokauden ikäistä porsasta jaettiin kahteen ryhmään (n=12; 50 % uroksia ja 50 % naaraita molemmissa ryhmissä). Ennen kokeen alkua eläimen keskimääräiseksi ruumiinpainoksi (BW) kirjattiin 11,68 ± 1,35 kg kontrolliryhmässä ja 11,65 ± 1,34 kg koeryhmässä. Tutkimukseen osallistuivat seuraavat koeryhmät: kontrolliryhmä ja koeryhmä, jossa koeryhmän ruokavaliota täydennettiin 0,5 % HS-lisäaineella. Kokeilu kesti 4 viikkoa. Kokeessa käytettiin samoja ruokavalioita molemmille ryhmille (taulukko 1). HS-lisän lisääminen ruokavalioon toteutettiin koeryhmän ohran kustannuksella. Siat ruokittiin kahdesti päivässä täysrehuseoksilla. Juomavettä oli eläinten saatavilla ad libitum koko koejakson ajan. Kokeen täysrehuseokset formuloivat ravitsemustarpeiden mukaan Šimeˇcek et al. [19]. Ruokavalion luonnollinen HS-lisä (HUMAC® Natur AFM; Humac, Ltd., Košice, Slovakia) jauhettiin ja puhdistettiin fysikaalisesti Leonarditella ilman kemiallista käsittelyä. Täydellisistä rehuseoksista analysoitiin kuiva-aine, raakavalkuainen, raakakuitu, kokonaistuhka, tärkkelys ja kokonaisfosfori EY:n komission asetuksen 152/2009 [20] mukaisesti. Ruokavalion kalsiumin ja natriumin taso analysoitiin käyttäen liekkimenetelmää atomiabsorptiospektrometrillä (Unicam Solar 939, Camberley, Surrey, UK). Täydellisten rehuseosten metaboloituvan energian arvot laskettiin kaavalla Šimeˇcek et al. [19].

2.2. Näytteenotto ja mittaukset

Viikolla 4, koepäivän viimeisenä aamuna, kaikilta molemmilta ryhmiltä otettiin verinäytteitä orbitaalisinus-punktiolla erikseen myöhempää analyysiä varten. Seerumi saatiin sentrifugoimalla (3000 rpm 30 min) ja säilytettiin -20 ◦C:ssa analyysiin asti. Heparinisoitua verta käytettiin hematologisten parametrien määrittämiseen, fagosyyttiaktiivisuuden testaamiseen ja lymfosyyttialapopulaatioiden tunnistamiseen.

Taulukko 1. Sikojen rehuseosten kaava ja kemiallinen koostumus (ruokittuina).

2.2.1. Hematologiset ja seerumin biokemialliset parametrit

Täydellinen verenkuva suoritettiin automaattisella hematologisella analysaattorilla (scil Vet ABC™ Hematology Analyzer, Saksa). Tutkimuksessamme arvioidut muuttujat olivat hematokriittiarvo (HCT), hemoglobiinipitoisuus (Hb), punasolujen määrä (RBC), keskimääräinen verisolujen tilavuus (MCV) ja valkosolujen kokonaismäärä (WBC). Seerumin biokemialliset parametrit – kokonaisproteiini, albumiini, glukoosi, urea, triglyseridit, kolesteroli, kreatiniini, aspartaattiaminotransferaasi (AST), alkalinen fosfataasi (ALP) ja fosfori mitattiin käyttämällä täysin automaattista hajasaantityöpöytäanalysaattoria (Ellipse, Italia). Kalsiumin pitoisuus seerumissa määritettiin liekkiatomiabsorptiospektrometrillä (Unicam Solar 939, Camberley, Surrey, UK).

2.2.2. Lipidiperoksidaation biomarkkeri

Lipidiperoksidaatiotuotteiden pitoisuudet (malondialdehyditasot, MDA) seerumissa mitattiin tiobarbituurihapporeaktiivisina aineina (TBAR) Costan et ai. kuvaaman spektrofotometrisen modifikaatiomenetelmän mukaisesti. [21]. Lyhyesti sanottuna seeruminäytteet sekoitettiin liuokseen, joka koostui trikloorietikkahaposta (15 %; Merck, Darmstadt, Saksa), tiobarbituurihaposta (0,38 %; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ja kloorivetyhapolla (0,25 N; Mikrochem, Pezinok, Slovakia) ja kuumennettiin 30 minuuttia kiehuvassa vesihauteessa. Jäävedessä jäähdyttämisen ja sentrifugoinnin jälkeen supernatantin absorbanssi mitattiin aallonpituudella 535 nm. TBAR:ien pitoisuus määritettiin standardikäyrästä, joka valmistettiin käyttämällä 1,1,3,3-tetrametoksipropaania (malondialdehydi-bis (dimetyyliasetaali); Acros Organics, Geel, Belgia). Tulokset ilmaistiin nmolina MDA:ta/ml seerumia.

cistanche-kasveja lisäävä immuunijärjestelmä

2.2.3. Fagosyyttiaktiivisuuden testaus ja lymfosyyttialapopulaatioiden tunnistaminen

Kaupallista Phagotest®-määritystä (Celonic, München, Saksa) käytettiin fagosyyttisen aktiivisuuden ja fagosyyttien imeytyskyvyn määrittämiseen. Testiä suoritettaessa noudatettiin valmistajan ohjeita. Suoraa immunovärjäysmääritystä käytettiin lymfosyyttien valittujen alapopulaatioiden tunnistamiseksi. Kahta yhdistelmää konjugoituja hiiren anti-sian monoklonaalisia vasta-aineita: CD3e/CD21 ja CD4/CD8a/CD25 käytettiin taulukossa 2 annettujen spesifikaatioiden mukaisesti. Heparinisoitua verta 50 µl:n määrä inkuboitiin monoklonaalisten vasta-aineiden kanssa 15 minuuttia pimeässä. laboratoriolämpötilassa. Inkuboinnin jälkeen putkiin lisättiin 1 ml BD FACS -lyysiliuosta. Putkia inkuboitiin vielä 20 minuuttia pimeässä laboratoriolämpötilassa ja sitten sentrifugoitiin (300 x g 5 min). Sitten solupelletit pestiin ja sentrifugoitiin kahdesti 1 ml:lla fosfaattipuskurisuolaliuosta (PBS; MP Biomedicals, Illkirch-Graffenstaden, Ranska) nopeudella 300 x g 5 minuutin ajan. Lopuksi solut suspendoitiin uudelleen 200 ul:aan PBS:ää myöhempää sytometristä analyysiä varten.

Taulukko 2. Käytettyjen hiiren monoklonaalisten monoklonaalisten vasta-aineiden spesifikaatiot ja määrät.

Fagosyyttisen aktiivisuuden analyysi sekä lymfosyyttialapopulaatioiden tunnistaminen suoritettiin kuusivärisellä BD FACSCantoTM -virtaussytometrillä (Becton Dickinson Biosciences, San Jose, CA, USA) käyttäen BD FACS DivaTM -ohjelmistoa. Analysoitujen solujen sijainti avainnoitiin FSC vs. SSC -pistekäyrillä. Granulosyytit, monosyytit ja molemmat solupopulaatiot yhdessä, vastaavasti, avainnoitiin fagosyyttisen aktiivisuuden analyysiä varten. Punaisen fluoresenssihistogrammin (FL-2) alhaisen DNA-pitoisuuden perusteella bakteeriaggregaatit jätettiin jatkoanalyysin ulkopuolelle. Aktiivisten fagosyyttien prosenttiosuus ja keskimääräinen fluoresenssin intensiteetti määritettiin vihreästä fluoresenssihistogrammista (FL-1). Aidattuja lymfosyyttejä (kuvio la, b) käytettiin lymfosyyttialapopulaatioiden tunnistamiseen. CD3+-lymfosyytit edustavat T-lymfosyyttejä ja CD21+-B-lymfosyyttejä (kuva 1c). CD4+CD8--alapopulaatio arvioitiin T-auttajalymfosyytteinä, CD4-CD8+ sytotoksisina lymfosyyteinä, CD4+CD8+ kaksoispositiiviset T-lymfosyytit (kuva 1d) ja CD4+CD25+ säätelevinä T-lymfosyytteinä (kuva 1e). Lymfosyyttien osuudet ilmaistaan ​​prosentteina.

2.3. Tilastollinen analyysi

Tulokset arvioitiin tilastollisesti parittomalla t-testillä tilastoohjelmistolla GraphPad Prism 8.0. Arvoa p < 0,05 pidettiin tilastollisesti merkitsevänä. Tässä kokeessa saadut tulokset ilmaistiin keskiarvona ± keskiarvon standardivirhe (SEM).

Kuvio 1. Avainnusstrategia: (a) lymfosyyttien (punainen) sijainnin määrittäminen peruspistekuvaajalla (FSC-A versus SSC-A); (b) duplettien ja agglomeraattien poistaminen analyysistä; (c) CD3+- ja CD21+-lymfosyyttien esityksen analyysi; (d) CD4+- ja CD8+-lymfosyyttien esityksen analyysi; (e) CD4+CD25+-lymfosyyttien esityksen määrittäminen CD4+-positiivisten solujen histogrammissa (vihreällä aidatulla).

3. Tulokset

3.1. Hematologiset ja seerumin biokemialliset parametrit

HS:n vaikutukset hematologisiin ja biokemiallisiin veriprofiileihin on esitetty taulukossa 3. Määritetyt veriparametrit mukaan lukien punasolujen pitoisuus, valkosolut, hemoglobiini, hematokriitti, keskimääräinen verisolujen tilavuus, kokonaisproteiini, albumiini, glukoosi, urea, triglyseridit HS-hoito ei vaikuttanut kolesteroliin, kreatiniiniin, AST:iin, Ca:iin ja P:iin. Ravintolisä HS:llä lisäsi kuitenkin ALP:n aktiivisuutta (p < 0,05).

Taulukko 3. Humusaineiden vaikutus porsaiden hematologisiin ja seerumin biokemiallisiin parametreihin

HS:n lisääminen ei vaikuttanut seerumin TBAR-tasoon, lipidiperoksidoinnin sekundaarisiin tuotteisiin (jotka ovat tärkeä parametri, jota käytetään lipidien peroksidaatiossa).

3.2. Solujen immuunivaste

HS:n lisäämisellä porsaiden rehuun ei ollut merkittävää vaikutusta aktiivisten fagosyyttien prosenttiosuuteen (taulukko 4) eikä fagosyyttien imeytyskykyyn (taulukko 5). Näiden luontaisten immuunivasteparametrien korkeammat arvot havaittiin koeryhmässä verrattuna kontrolliryhmään.

Taulukko 4. Huumusaineiden vaikutus porsaiden veren fagosyyttiaktiivisuuteen mitattuna aktiivisten fagosyyttien prosenttiosuutena – fagosyyttinen aktiivisuus

Taulukko 5. Humusaineiden vaikutus fagosyyttien imeytymiskykyyn ilmaistuna keskimääräisenä fluoresenssiintensiteetinä (MFI).

Kuva 2. Jatk.

Kuva 2. Huumusaineiden vaikutus lymfosyyttien prosenttiosuuteen: (a) CD3+; (b) CD21+; (c) CD4+CD8-; (d) CD4-CD8+; (e) CD4+CD8+; (f) CD4+CD{{10}}; ja (g) CD4:CD8-lymfosyyttien suhde porsaiden veressä. Tähdellä merkitty sarake eroaa merkittävästi kontrollista (*** p < 0,001).

4. Keskustelu

4.1. Solujen immuunivaste

Tutkimuksemme päätavoitteena oli seurata, kuinka humusaineet (HS) vaikuttavat muutamaan eri soluimmuniteettiindikaattoriin. Aktiivisten fagosyyttien prosenttiosuus ja niiden imeytymiskyky valittiin indikaattoreiksi seurattaessa vaikutusta synnynnäiseen soluimmuniteettiin. Aiemmassa tutkimuksessamme havaittiin, että HS:n lisääminen broilerien ruokavalioon ({0}},8 %) lisäsi merkittävästi fagosyyttistä aktiivisuutta sekä keskimääräistä fluoresenssin intensiteettiä [16]. Lisäksi ELnaggar ja El-Kelawy [22] havaitsivat fagosyyttisen aktiivisuuden ja fagosyyttiindeksin lisääntymisen sen jälkeen, kun ruokavalioon lisättiin humiinihappoa (0.1, 0.2 ja 0). 4 %) Sacco-kanoista. Samanlaisia ​​löydöksiä saatiin munivista kanoista [17]. Tässä tutkimuksessa HS:n lisäämisellä porsaiden ruokavalioon ei ollut merkittävää vaikutusta fagosytoosiin. Aktiivisten fagosyyttien prosenttiosuus ja niiden imeytymiskyky olivat kuitenkin numeerisesti korkeammat HS:llä täydennetyillä porsailla kuin kontrolliryhmän porsailla. Sanmiguelin ja Rondónin [23] mukaan HS:n vaikutus fagosyytteihin on ajasta riippuvainen. He havaitsivat, että HS:n lisäys munivien kanojen ruokavalioon (0,1 ja 0,2 %) lisäsi fagosyyttiindeksiä levityspäivinä 8 ja 30, mutta vertailtiin Wangin et al. [2], joka havaitsi, että sioilla, joiden rehuun oli lisätty 10 % HS:ää, oli korkeampi suhteellinen lymfosyyttimäärä. Samanlaisia ​​tuloksia saatiin siipikarjasta, jolle annettiin 0,15 % humaattia täydennetty ruokavalio [24] tai 20 mg humushappoa/kg ruumiinpainoa juomavedessä [25]. Cetinin et al. [24], munivien kanojen ravinnon täydentäminen humusyhdisteillä johtaa lymfosyyttien määrän merkittävään lisääntymiseen, mikä johtuu lisääntyneestä IL-2-tuotannosta sekä IL{{29}:n ilmentymisestä. } reseptori lymfosyyteissä. Humusaineet näyttävät tehostavan IL{30}}tuottavien solujen toimintaa. Muut kirjoittajat eivät kuitenkaan havainneet merkittävää vaikutusta lymfosyyttien määrään sioissa, joita ruokittiin humushapolla täydennetyllä rehulla [26], eikä kanoilla, joille annettiin humushappoja juomaveteen [27] tai ruokavalioon [22]. . Tuloksemme ovat samanlaisia ​​kuin Mudro ˇnová et al. [16], joka havaitsi, että CD4-lymfosyyttien prosenttiosuus kasvoi merkittävästi broilereilla, joille syötettiin HS-lisää (0,8 %) verrattuna kontrolliryhmään. He havaitsivat myös CD8+-lymfosyyttien (T-sytotoksisten lymfosyyttien) merkittävän vähenemisen, mikä johti tilastollisesti korkeampaan CD4:CD8-suhteeseen, jota käytetään immuunijärjestelmän stimulaation merkkiaineena. Toisaalta munivien kanojen ruokinta 0,5 % HS:n ruokavaliolla lisäsi merkittävästi B-lymfosyyttien alapopulaatiota edustavien IgM+-lymfosyyttien osuutta ja vähensi merkittävästi T-lymfosyyttien kokonaismäärää edustavien CD3+-lymfosyyttien osuutta. T-auttaja- ja T-sytotoksisten lymfosyyttien osuus ei muuttunut [17]. Tulostemme sekä useiden tutkimusten perusteella voidaan päätellä, että HS:llä voi olla immunostimuloiva vaikutus, johon voivat vaikuttaa käytettyjen humaattien koostumus ja määrä, niiden antotapa, eläinlaji sekä ELnaggarin ja Elin mukaan. -Kelawy [22], kasvattamalla eläimiä eri alueilla maailmassa, jotka vaihtelevat ilmastoltaan. HS:n immunomodulaatio voi teoriassa koostua humaattikompleksien muodostumisesta sakkaridien kanssa. Nämä kompleksit sitoutuvat T-lymfosyyttien ja NK-solujen pintaan ja vaikuttavat niiden toimintaan, mukaan lukien sytokiinien tuotantoon, jotka vaikuttavat edelleen immuunijärjestelmän muihin soluihin [28].

cistanche tubulosa - parantaa immuunijärjestelmää

4.2. Hematologinen ja seerumin biokemiallinen parametri

Tämän tutkimuksen toisena tavoitteena oli arvioida valikoituja hematologisia ja biokemiallisia veriparametreja porsaiden ruokinnassa, johon on lisätty HS:ää. Valikoiduissa proteiini-, energia- ja kivennäisaineenvaihdunnan muuttujissa sekä hematologisissa indekseissä ei havaittu merkittäviä eroja HS-ravintolisiä saaneiden koe-eläinryhmän ja kontrolliryhmän välillä, lukuun ottamatta ALP-aktiivisuutta tässä tutkimuksessa. Tutkimuksemme biokemialliset indikaattorit olivat vertailualueella kaikissa porsaissa Doubekin et al. [29] sekä Kraft ja Dürr [30]. Tuloksemme ovat linjassa Wangin et al. [2], jotka eivät löytäneet merkittäviä muutoksia puna- ja valkosoluissa tutkimuksen aikana, kun he selvittivät HS:n vaikutuksia verimuuttujiin viimeistellyissä sioissa. HS:tä sisältävällä ruokavaliolla käsittelyn jälkeen Herzig et ai. [31] ja myös Šamudovská ja Demeterová [32] havaitsivat ei-merkitsevästi lisääntyneen ALP-aktiivisuuden kanoissa. Tutkimuksessamme havaitsimme, että koeryhmällä oli merkittävästi korkeampi ALP-aktiivisuus kuin kontrolliryhmällä. Sen sijaan niiden arvot pysyivät sian ALP-tasojen vertailualueella (2–17 kat·L −1 ) [29,30]. Toisaalta Jad'uttová et ai. [33] ja Rath et ai. [34] havaitsivat merkittävän ALP-aktiivisuuden vähenemisen kanoilla HS-ruokinnan jälkeen. ALP-pitoisuudet veressä broilereilla, joille annettiin 100 % HS-rehulisää, laskivat näiden kirjoittajien mukaan. Vaikka ALP-aktiivisuuden alentuneet arvot Rath et ai. [34] tutkimukset olivat tilastollisesti erilaisia ​​kuin kontrollit, ne eivät heijastaneet HS:n myrkyllistä vaikutusta valikoiviin elimiin (lihas, munuainen, sydän tai maksa). Ruokavalion tuottama HS:n määrä voi vaikuttaa veren kivennäisainepitoisuuteen. HS:n antaminen pitoisuutena 0,5 % ei vaikuttanut porsaiden veren seerumin kalsium- ja fosforitasoihin. HS:n kyky kelatoida metalleja, johon vaikuttaa merkittävä määrä karboksyylihapposivuketjuja, voi olla syynä mineraaliseerumin pitoisuuksien laskuun [34]. Tutkimuksessamme porsaiden veren kalsiumin ja fosforin pitoisuudet eivät laskeneet viitearvojen alapuolelle lisäämällä koeryhmän rehuseokseen HS:ää. MDA on happivapaiden radikaalien aiheuttaman lipidiperoksidaation tuote, jota voidaan käyttää markkerina antioksidanttitilan ja lipidiperoksidaatioiden arvioinnissa [35]. MDA määritettiin oksidatiivisen stressin biomarkkeriksi mittaamalla tiobarbituurihapporeaktiivisten aineiden (TBAR) tasot veressä. Oksidatiivisen stressin vähenemiselle on tunnusomaista MDA-tasojen lasku. Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että HS:llä voi olla antioksidanttisia ominaisuuksia, jotka suojaavat erilaisilta häiriöiltä, ​​jotka liittyvät oksidatiiviseen stressiin, jota vapaat radikaalit tyypillisesti aiheuttavat. Esimerkiksi Wang et ai. [15] havaitsivat, että natriumhumaatin (2000 mg·kg−1) ravintolisä voisi parantaa vieroitettujen porsaiden antioksidanttitasoa. He havaitsivat merkittävän seerumin MDA-pitoisuuden vähenemisen sekä merkittävän lisääntymisen antioksidanttikapasiteetissa. HS:t ovat kuitenkin vaihtelevan koostumuksen omaavia luonnonmateriaaleja, jotka voivat aiheuttaa erilaista tehokkuutta, joka voi riippua myös niiden annetusta määrästä. Tässä kokeessa ei havaittu vaihtelua HS:llä ruokittujen porsaiden seerumin MDA (TBAR) tasoissa verrattuna kontrolliryhmään. Tuloksemme ovat yhdenmukaisia ​​Zhang et al. [36], joka havaitsi, että natriumhumaatin lisäämisellä munivien kanojen ruokavalioon (0,1, 0,3 ja 0,5 %) ei ollut vaikutusta seerumin kokonaisantioksidanttikapasiteettiin eikä MDA-arvoihin.

cistanche-lisän edut - kuinka vahvistaa immuunijärjestelmää

5. Johtopäätökset

Tässä tutkimuksessa saatujen tulosten perusteella voidaan päätellä, että ravintolisällä 0,5 % humusaineita voi olla stimuloiva vaikutus joihinkin porsaiden immuunisoluihin. CD4+CD8--lymfosyyttien osuus veressä kasvoi merkittävästi. Täydennys humusaineilla lisäsi seerumin ALP:tä. Nämä arvot olivat kuitenkin edelleen vertailualueen sisällä. Tulokset osoittivat, että jopa niin alhainen HS-pitoisuus voi vaikuttaa positiivisesti porsaiden soluimmuniteettiin. Koska valitsemamme humusaineiden pitoisuudet vaikuttivat merkittävästi vain joihinkin soluimmuniteetin indikaattoreihin, tarvitaan lisätutkimuksia sopivan pitoisuuden valitsemiseksi ja immuniteetin stimuloivan vaikutuksen vahvistamiseksi tässä eläinryhmässä.

Viitteet

1. Peña-Méndez, EM; Havel, J.; Patoˇcka, J. Humusaineet-yhdisteet, joiden rakenne on vielä tuntematon: Sovelluksia maataloudessa, teollisuudessa, ympäristössä ja biolääketieteessä. J. Appl. Biomed. 2005, 3, 13–24. [CrossRef]

2. Wang, Q.; Chen, YJ; Joo, JS; Kim, HJ; Cho, JH; Kim, IH Täydentävien humusaineiden vaikutukset sikojen kasvukykyyn, veren ominaisuuksiin ja lihan laatuun. Elävin. Sci. 2008, 117, 270–274. [CrossRef]

3. Visser, SA Humusaineiden vaikutus korkeampiin eläimiin ja ihmisiin, humusyhdisteiden mahdollinen käyttö lääkehoidoissa. julkaisussa Proceedings of the International Humic Acid Society Meeting, Sevilla, Espanja, 1988; s. 27.

4. Stevenson, FJ Humuskemia: synty, koostumus, reaktiot; Wiley-Inter-Science: New York, NY, USA, 1994; s. 34–41.

5. Hassan, HMA; Mohamed, MA; Youssef, AW; Hassan, ER Orgaanisten happojen käytön vaikutus antibioottisten kasvunedistäjien korvaamiseen broilerien suorituskykyyn ja suoliston mikroflooraan. Aasian-Aust. J. Anim. Sci. 2010, 23, 1348–1353. [CrossRef]

6. Gálik, B.; Hrnˇcár, C.; Gašparoviˇc, M.; Rolinec, M.; Hanušovský, O.; Juráˇcek, M.; Šimko, M.; Zábranský, L.; Kovacik, A. Humusaineiden vaikutus lihan laatuun maatilafasaanien (Phasianus colchicus) lihotuksessa. Maatalous 2023, 13, 295. [CrossRef]

7. Karaoglu, M.; Macit, M.; Esenbuga, N.; Durdag, H.; Turgut, L.; Bilgin, OC Täydentävän humaatin vaikutus eri tasoilla broilerien kasvukykyyn, teurastus- ja ruhoominaisuuksiin. Int. J. Poult. Sci. 2004, 3, 406–410.

8. Ji, F.; McGlone, JJ; Kim, SW Ravinnon humusaineiden vaikutukset sikojen kasvukykyyn, ruhojen ominaisuuksiin ja ammoniakkipäästöihin. J. Anim. Sci. 2006, 84, 2482–2490. [CrossRef]

9. Lacková, Z.; Zigo, F.; Farkašová, Z.; Ondrašoviˇcová, S. Humusaineiden vaikutus orgaanisena lisäravinteena kaniinin lihotussuorituskykyyn, lihan laatuun ja valittuihin biokemiallisiin parametreihin. Elämä 2022, 12, 1016. [CrossRef]

10. Kaevska, M.; Lorencova, A.; Videnska, P.; Sedlar, K.; Provaznik, I.; Trckova, M. Vieroituksen jälkeisen ripulin ehkäisyssä käytetyn natriumhumaatin ja sinkkioksidin vaikutus ulosteen mikrobiotan koostumukseen vieroitetuissa porsaissa. Vet. Med. 2016, 61, 328–336. [CrossRef]

11. Trckova, M.; Matlova, L.; Hudcova, H.; Martin, F.; Zraly, Z.; Dvorska, L.; Beran, V.; Pavlik, I. Turve eläinten ravintolisänä: Katsaus. Vet. Med. - Tšekki. 2005, 50, 361–377. [CrossRef]

12. Weber, TE; van Sambeek, DM; Gabler, NK; Kerr, BJ; Moreland, S.; Johal, S.; Edmonds, MS Ravinnon humus- ja voihapon vaikutukset kasvukykyyn ja lipopolysakkaridivasteeseen nuorilla sioilla. J. Anim. Sci. 2014, 92, 4172–4179. [CrossRef]

13. Mao, Y. Broilerien kasvukyvyn, lihan koostumuksen, oksidatiivisen tilan ja immuniteetin modulaatio ruokavalion fulvohapoilla. Poult. Sci. 2019, 98, 4509–4513. [CrossRef] [PubMed]

14. Stepchenko, LM Huumusvalmisteiden rooli aineenvaihduntaprosessien hallinnassa maatalouseläinten biologisten tuotteiden muodostumisessa. julkaisussa humusaineiden käytön saavutukset ja näkymät maataloudessa; Maatalousinstituutin kustantamo: Dnepropetrovsk, Ukraina, 2008; s. 70–74. (Venäjäksi)

15. Wang, Q.; Ying, J.; Zou, P.; Zhou, Y.; Wang, B.; Yu, D.; Li, W.; Zhan, X. Ravintolisän humushapponatriumin ja sinkkioksidin vaikutukset vieroitettujen porsaiden kasvukykyyn, immuunijärjestelmään ja antioksidanttikapasiteettiin. Animals 2020, 10, 2104. [CrossRef] [PubMed]

16. Mudro ˇnová, D.; Karaffová, V.; Pešulová, T.; Košˇcová, J.; Marušˇcáková, IC; Bartkovský, M.; Marcinˇcáková, D.; Ševˇcíková, Z.; Marcinˇcák, S. Huumusaineiden vaikutus broilerien suoliston mikrobiotaan ja immuunivasteeseen. Food Agric. Immunol. 2020, 31, 137–149. [CrossRef]

17. Mudro ˇnová, D.; Karaffová, V.; Semjon, B.; Nad', P.; Košˇcová, J.; Bartkovský, M.; Makiš, A.; Buj ˇnák, L.; Nagy, J.; Mojžišová, J.; et ai. Huumusaineiden ravintolisän vaikutukset munivien kanojen tuotantoparametreihin, immuunitilaan ja suoliston mikrobiotaan. Maatalous 2021, 11, 744. [CrossRef]

18. Euroopan komissio. Euroopan parlamentin ja neuvoston direktiivi 2010/63/EU, annettu 22 päivänä syyskuuta 2010, tieteellisiin tarkoituksiin käytettävien eläinten suojelusta. Vinossa. J. Eur. Unioni 2010, 276, 33–79.

19. Šimeˇcek, K.; Zeman, L.; Heger, J. Sianrehujen ravintoaineiden tarve ja ravintoarvotaulukot, 3. painos; Tšekin maataloustieteiden akatemia: Brno, Tšekin tasavalta, 2000; 125p (tšekin kielellä)

20. Euroopan komissio. Komission asetus (EY) N:o 152/2009, annettu 27 päivänä tammikuuta 2009, näytteenotto- ja analyysimenetelmistä rehujen virallista valvontaa varten. Vinossa. J. Eur. Liitto. 2009, 54, 2–54.

21. Costa, CM; Santos, RCC; Lima, ES Yksinkertainen automatisoitu menetelmä tiolin mittaamiseen ihmisen seeruminäytteistä. J. Bras. Patol. Med. Lab. 2006, 42, 345–350. [CrossRef]

22. ELnaggar, AS; El-Kelawy, MI Humiinihappolisän vaikutus Sasso-kanan tuotantokykyyn, veren ainesosiin, immuunivasteeseen ja ruhon ominaisuuksiin. Egypti. J. Anim. Tuot. 2018, 55, 75–84.

23. Sanmiguel, PR; Rondón, BI Humusaineilla täydentäminen vaikuttaa paastovaiheessa olevien kanojen synnynnäiseen immuniteettiin. Rev. MVZ Córdoba 2016, 21, 5198–5210. [CrossRef]

24. Cetin, E.; Guclu, BK; Cetin, N. Ravinnon humaatin ja orgaanisen hapon lisäyksen vaikutus munivien kanojen suuren eläintiheyden aiheuttamaan sosiaaliseen stressiin. J. Anim. Vet. Adv. 2011, 10, 2402–2407.

25. Salah, H.; Mansour, E.; Reham, RR; Abd El Hamid, ES Tutkimus humushapon vaikutuksesta kasvukykyyn, immunologisiin, joihinkin veriparametreihin ja suoliston Clostridium-kontrolliin broilereilla. Zag. Vet. J. 2015, 43, 102–109. [CrossRef]

26. Kim, K.; Bae, I.; Cho, J.; Choi, Y.; Ha, J.; Choi, J. Rehujen humushapon ja mustikkalehtijauheen lisäyksen vaikutukset sikojen tuottavuuteen, veren ja lihan laatuun. Food Sci. Anim. Resurssi. 2019, 39, 276–285. [CrossRef] [PubMed]

27. Lala, AO; Okwelum, N.; Irekhore, OT; Ogunlade, BA; Adigun, AA; Elegbede, LA; Oyedeji, MM Broilerikanan hematologiset ja biokemialliset parametrit juomaveteen lisättynä humushapolla. Appl. Trop. Agric. 2016, 21, 74–78.

28. Terratol, LLC Humic Acidin vaikutukset eläimiin ja ihmisiin. Saatavilla verkossa: https://fulvic.info/wp-content/uploads/2019 /01/M-Terratrol_Artikkeli-1.pdf (käytetty 10. elokuuta 2022).

29. Doubek, J.; Šlosárková, S.; ˇReháková, K.; Bouda, J.; Scheer, P.; Piperisová, I.; Tomenendálová, J.; Matalová, E. Biokemiallisten ja hematologisten peruslöydösten tulkinta eläimillä, 2. painos; Noviko: Brno, Tšekki, 2010; s. 102. (tšekin kielellä)

30. Kraft, W.; Dürr, UM Klinická Laboratorna Diagnostika vo Veterinárnej Medicíne, 1. painos; Hajko & Hajková: Bratislava, Slovakia, 2001; s. 1–380. (slovakiksi)

31. Herzig, I.; Navrátilová, M.; Totušek, J.; Suchý, P.; Vecerek, V.; Blahová, J.; Zralý, Z. Humushapon vaikutus sinkin kertymiseen broilerin kudoksiin. Tšekki J. Anim. Sci. 2009, 54, 121–127. [CrossRef]

32. Šamudovská, A.; Demeterová, M. Luonnollisilla humusyhdisteillä ja natriumhumaatilla täydennetyn ruokavalion vaikutus suorituskykyyn ja valittuihin aineenvaihduntamuuttujiin broilereilla. Acta Vet. Brno 2010, 79, 385–393. [CrossRef]

33. Jad'uttová, I.; Marcinˇcáková, D.; Bartkovský, M.; Semjon, B.; Harˇcárová, M.; Nagyová, A.; Váczi, P.; Marcinˇcák, S. Ravinnon humusaineiden vaikutus broilerikanojen lihotuskykyyn, ruhosatoon, veren biokemiallisiin parametreihin ja luun mineraaliprofiiliin. Acta Vet. Brno 2019, 88, 307–313. [CrossRef]

34. Rath, NC; Huff, ME; Huff, GR Humiinihapon vaikutukset broilereilla. Poult. Sci. 2006, 85, 410–414. [CrossRef]

35. Sumida, S.; Tanaka, K.; Kitao, H.; Nakadomo, F. Harjoituksen aiheuttama lipidiperoksidaatio ja entsyymien vuoto ennen E-vitamiinilisää ja sen jälkeen. Int. J. Biochem. 1989, 21, 835-838. [CrossRef]

36. Zhang, AR; Pirzado, SA; Liu, GH; Chen, ZM; Chang, WH; Cai, HY; Bryden, WL; Zheng, AJ Ravintolisä natriumhumaatilla parantaa munien laatua ja munivien kanojen immuunitoimintaa. J. Appl. Anim. Nutr. 2020, 8, 93–99. [CrossRef]