Tetrahymena Thermophilaa käytettiin kokeellisena materiaalina

Ota yhteyttäoscar.xiao@wecistanche.comLisätietoja

Tässä kokeessa koemateriaalina käytettiin Tetrahymena thermophilaa. T. thermophila on vapaana elävä ripseläin, jota esiintyy laajalti globaaleissa vesiekosysteemeissä ja joka on rakenteeltaan ja toiminnaltaan monimutkaisuus samanlainen kuin metatsosolut5. Ribosynnel6:n ja telomerasel7:n löytö Tetrahymenassa antoi merkittävän sysäyksen ikääntymistä ehkäisevälle mekanismitutkimukselle, joka palkittiin kahdella Nobel-palkinnolla8. Lyhyen kasvusyklinsä, helpon viljelynsä ja selkeän geneettisen taustansa vuoksi T. termofiili voisi tarjota kaksinkertaista tutkimusta in vivo ja in vitro yhdessä kokeellisessa suunnittelussa. T. thermophilaa on käytetty menestyksekkäästi lääkeseulonnassa ja farmakologisissa mekanismeissa20. Vielä tärkeämpää on, että tietoa T. thermophilan glutationiperoksidaasiperheen molekyylievoluutiosta on paljastettu9-2. Tietoprofiili T.cistanche Tšingis-khaanithermophila GPX -geenejä voidaan saada Tetrahymena Functional Genomics Database (TetraFGD) (http://tfgd.ihb.ac.cn/) ja TGD (http://ww. ciliate.org) 22:sta. Kymmenen kahdestatoista oletetusta GPX:stä on tunnistettu fosfolipidihydroperoksidiglutationiperoksidaasiksi (PHGPx) Tetrahymenan genomin vertailutietokannassa. PHP, seleeniriippuvainen GPX, voi spesifisesti vähentää fosfolipidihydroperoksidia suojellakseen lesitiiniliposomeja ja biofilmejä oksidatiivisilta vaurioilta23.PHGPxin T. thermophilan keskimääräinen molekyylimassa on noin 21,7 kDa22, mikä on samanlainen kuin molekyylimassa (20-22 kDa) nisäkkäissä kuvatun PHGPx-monomeeriproteiinin24. Lisäksi suuri määrä raportteja osoitti, että Tthermophilan GPX-ilmentyminen oli kvantitatiivisesti erilaista ja riippui stressin lähteestä (hapetin, apoptoosin indusoija tai metalli)2122 ja altistusajasta20-24

Napsauta tätä saadaksesi lisätietoja

Vertaamalla vesipitoisen uutteen ja G. lucidumin päämonomeerien vaikutuksia kasvukäyrään ja T. thermophilan maksimitiheyteen, tämä tutkimus sai parhaan ikääntymistä estävän G. lucidum -uutteen. G. lucidumin ikääntymistä estävää mekanismia, erityisesti GPX-perheen toimintatyypin määrittämistä, tutkittiin molekyyli-, solu- ja yksilötasolla. Tämän tutkimuksen tulosten odotetaan edistävän G. lucidum -tuotteiden kliinistä käyttöä.

Materiaalit ja menetelmät

Ganoderma lucidum vesipitoinen uute ja monomeerit. Viitaten Cuongin raporttiin 25, 20 g kuivattua G. lucidumia (Changbai Mountain Senbao Specialty Store, Jilin) ​​jauhettiin ja uutettiin 1000 ml:aan ddHO:ta. Vesipitoinen uute kerättiin sentrifugoimalla, väkevöitiin 100 ml:ksi tyhjökuivauksella ja säilytettiin -20 asteessa käyttöön asti.

G. lucidum polysakkaridi, Ganoderic Acid A, Ganoderal A ja G. lucidum ergosteroli ostettiin yhtiöltä Chengdu Must Biotechnology Co.,Ltd. Nämä kolme standardia liuotettiin metanoliin yhtenäisen mallin mukaisesti ja lisättiin SPP-väliaineeseen. Soluviljely ja lääkehoito. Tetrahymenathermophilan (SB210) toimitti Hydrobiology Institute of Hydrobiology, Kiinan tiedeakatemia, Wuhan, IPR China. T. thermophilaa viljeltiin 28-asteisessa inkubaattorissa. SPP-elatusaine sisälsi 2 prosenttia (w/v) proteoosipeptonia, 0,1 prosenttia hiivauutetta (Oxoid), 0,2 prosenttia glukoosia ja 0,003 prosenttia sekvestreeniä. Yhdenmukaisen mallin (lisätaulukot S1 ja S2) mukaan G. lucidum -vesiuute,G. lucidum polysakkaridia, Ganoderihappo A, Ganoderal A ja G. lucidum ergosteroli lisättiin viljelyalustaan. Kontrolliryhmä korvattiin samalla tilavuudella kahdesti tislattua vettä, ja kussakin ryhmässä oli 3 rinnakkaista näytettä. Logaritmiseen vaiheeseen siirtymisen jälkeen näytteet otettiin 2 tunnin välein laskuvaiheeseen asti. T. thermophilan tiheys laskettiin verisolujen laskentataululla, ja T. thermophilan tiheyden ja ajan välinen suhde piirrettiin.

Transkriptioanalyysi. Koe suoritettiin 24-kuoppalevyllä, ja jokainen kuoppa koostui 900 µl:sta SPP:tä. Koeryhmässä lisättiin 100 µl 200 mg/ml G. lucidumin vesiuutetta. Kontrolliryhmää käsiteltiin sen sijaan 100 µl:lla ddH O:ta. Kuhunkin ryhmään asetettiin kolme rinnakkaista näytettä.vesisäiliön käyttöiän pidentäminenKontrolliryhmä ja koeryhmä olivat molemmat logaritmisessa vaiheessa (20 h), ja laskuvaihe (27 h) kerättiin transkriptioanalyysiä varten. Jokainen ryhmä monistettiin biologisesti, ja kaikki näytteet altistettiin koko transkriptin mikrosiruanalyysille (Biomarker Technologies, Peking, Kiina). Geeniekspressioprofiili havaittiin Affymetrix 3'IVT Expression Arraylla Arvogeenien ilmentymisen vaikutuksen vähentämiseksi seulonnan kriteereinä käytettiin RPKM suurempi tai yhtä suuri kuin 5 ja FC (Fold Change) suurempi tai yhtä suuri kuin 2. differentiaalisesti ekspressoituja geenejä (DEG) KOBASia käytettiin GeneOntologyn (GO) ja Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) polkuanalyysin toteuttamiseen. Rikastumisreitti määritettiin korjatulla P-adj-arvolla, joka on pienempi tai yhtä suuri kuin 0,05. Transkriptiotulokset varmennettiin käyttämällä kvantitatiivista käänteistranskriptio-PCR:ää (RT-qPCR) (menetelmä, katso lisätiedosto). Sitten proteiini-proteiini-vuorovaikutusverkko (PPI) perustettiin STRING-tietokannan perusteella ja keskusgeeni seulottiin käyttämällä CytoHublaa keskussolmun tunnistamiseksi Cytoscape-ohjelmistossa.

Hopeavärjäys- ja transmissioelektronimikroskooppihavainnointi (TEM). Hopeavärjäysmenetelmä oli Foissnerin menetelmän26 mukainen. thermophila havaittiin öljymikroskoopilla. TEM:llä havaittiin T. thermophilan ultrarakenne. G. lucidumin vesiuutteella käsitellyt solut ja kontrolliryhmä kerättiin sentrifugoimalla nopeudella 600 x g 2 minuutin ajan. Solut kiinnitettiin etuliitteenä 2,5-prosenttisessa glutaraldehydissä ja pidettiin 4 asteessa 8 tunnin ajan. Näytteet pestiin PBS:llä (pH 7,5) kolme kertaa, sentrifugoitiin 3 000 x g 5 minuutin ajan ja kiinnitettiin sitten 1-prosenttisella osmiumtetraoksidilla (4 tuntia). Sen jälkeen dehydratointi suoritettiin käyttämällä gradienttiasetonia 15 % - 100 %. Sitten solut upotettiin Embed 812(TAAB)-matalan viskositeetin hartsiin. Kovetuksen jälkeen ultraohuet osat (60-80 nm) leikattiin ultraohuella viipaloittimella. Ultrarakenne tarkkailtiin transmissioelektronimikroskoopilla (JEOL JEM-1010, Japani).

Soluvaurion määrittäminen. Solunsisäinen lROS havaittiin herkällä fluoresoivalla koettimella 2',7'-diklooridihydrofluoreseiinidiasetaatti (DCFH-DA)27. Malondialdehydin (MDA) aktiivisuus määritettiin Nanjing Jiancheng Bioengineering Instituten (Nanjing, Jiangsu, Kiina) toimittamilla kaupallisilla sarjoilla. Menetelmä hydroksyyliradikaalien (·OH) eliminointikyvyn määrittämiseksi oli Takemura28:n kuvaama. G. lucidumin vesiuutteen kyky eliminoida OH-vapaa radikaali ilmaistiin koeryhmän optisena tiheytenä miinus kontrolliryhmän optinen tiheys.

Cistanche voi estää ikääntymistä

PHGPx-toiminta. Nikotiiniamidiadeniinidinukleotidifosfaatti (NADPH)/NADP* -suhde ja glutationi/glutationidisulfidi (GSH/GSSG) -suhde määritettiin käyttämällä NADP*/NADPH Quantification Kit -sarjaa (S0179, Beyotime), GSH/GSSG Assay Kit (S0053).ABeyotime. määritykset suoritettiin valmistajan protokollan mukaisesti.

Tulokset

G. lucidumin vesiuutteen ja G. lucidumin monomeerien vaikutukset T. ther-mochilan kasvuun. Kuten aikaisemmat tutkimukset7,G. lucidum polysakkaridi oli pääkomponentti G. lucidum vesiuutteen tässä kokeessa mukaan spektrofotometri tunnistus (lisäkuva. S1). G. lucidumin vesiuutteen vaikuttavat aineet analysoitiin myös GC-MS:llä. G. lucidumin vesiuutteen kokonaisionidiagrammi osoitti, että vesiuutteessa oli ll komponentteja (lisäkuva S2). G. lucidumin vesiuutteen yhdisteistä (lisätaulukot S3 ja S4), G. lucidum acid A, Ganoderal A ja G. lucidum ergosteroli valittiin niiden retentioajan ja yhteensopivuusasteen mukaan.

G. lucidumin vesiuutteen ja näiden päämonomeerien vaikutusten vertaamiseksi T. thermophilan kasvuun, G. lucidumin vesiuute ja G. lucidum monomeeriliuos lisättiin T. thermophilan viljelyalustaan. Tulokset on esitetty kuvassa 1. Kontrolliryhmän maksimitiheys oli 6 x 104 solua/ml 24 tunnin kohdalla. G. lucidumin vesiuutteen ryhmän solutiheys 12 - 20 tunnin välillä oli lähes sama kuin kontrolliryhmän, mutta 20 - 25 tunnin välillä se oli merkittävästi suurempi kuin kontrolliryhmän solutiheys.cistanche nzSamanaikaisesti logaritminen vaihe pidennettiin 1 tunnilla, maksimitiheys oli 1,15 × 105 solua/ml. Vaikka G. lucidumin polysakkaridiryhmän maksimitiheys oli suurempi kuin kontrolliryhmän 9,7 x 104 solua/ml, se oli pienempi kuin G. lucidumin vesiuuteryhmän. G. lucidum acid A:n, Ganoderal A:n ja G. lucidum ergosterolin maksimitiheys ei ylittänyt kontrolliryhmän tiheyttä, mikä osoitti, että näiden monomeerien alkoholiliuenneet aineet eivät edistäneet T. thermophilan kasvua. Voidaan päätellä, että G.lucidum-vesiuute, joka sisältää erilaisia ​​vaikuttavia aineita, voi edistää T. thermophilan kasvua enemmän kuin sen monomeerit.

G. lucidumin vesiuutteen ikääntymistä estävä vaikutus. Viljelyajan pidentyessä ROS:n valon intensiteetti laskuvaiheessa (kuva 2b) oli suurempi kuin logaritmisessa vaiheessa (kuvio 2a). G. lucidumin vesiuutteen lisäämisen jälkeen, vaikka laskuvaiheen (kuvio 2d) fluoresenssin intensiteetti oli edelleen parantunut logaritmisen faasin intensiteettiin verrattuna (kuvio 2c), se oli merkittävästi alhaisempi kuin kontrolliryhmän. MDA-pitoisuus kontrolliryhmässä oli myös korkeampi laskuvaiheessa kuin logaritmisessa vaiheessa (kuva 2e). Samaan aikaan OH:n huuhtelukyky laskuvaiheessa oli pienempi kuin logaritmisessa vaiheessa (kuva 2e). Hapettumisen ja pelkistyksen välinen tasapaino menetettiin ja keho ikääntyi. G. lucidumin vesiuutteen lisäämisen jälkeen MDA-pitoisuus oli alhaisempi kuin kontrolliryhmässä (vasen sarake kuvassa 2e), ja solujen poistaman OH:n määrä logaritmisessa faasissa ja laskuvaiheessa oli suurempi kuin OH:n määrä. vertailuryhmä (oikea sarake kuvassa 2e). T[termofilan kasvua voidaan verrata monisoluisten organismien ikääntymisprosessiin sen soluvaurioiden kautta. ROS:n ja MDA:n kertyessä kasvu estyi ja T. thermophilan tiheys väheni. G. lucidumin vesiuutteen lisääminen voisi ylläpitää redox-tasapainoa T. thermophilassa ja saavuttaa ikääntymistä estäviä vaikutuksia.

Erilaisesti ilmentyneiden geenien analyysi ja todentaminen RT-qPCR:llä. Verrattuna kontrolliryhmään, 11 519 geenin ilmentyminen T. thermophilan logaritmisessa faasissa muuttui merkittävästi sen jälkeen, kun G. lucidumin vesiuutetta oli lisätty SPP:hen. Niistä 6201 geeniä oli säädelty ylöspäin ja 5318 geeniä alasäädelty.cistanche peniksen koko8772 geenin ilmentyminen muuttui merkittävästi laskuvaiheen aikana, joista 4721 geeniä oli säädelty ylöspäin ja 4051 geeniä alasäädelty. Aiemmissa laboratoriossamme tehdyissä tutkimuksissa

G.lucidumin ikääntymistä estävä vaikutus Stylonychiaan heijastui antioksidanttiindeksissä, joten 10 antioksidantteihin liittyvää geeniä (lisätaulukko S5) valittiin satunnaisesti DEG:istä, ja RNA-seq-tietojen tarkkuus varmistettiin RT- qPCR. Näiden 10 geenien ilmentymismallit logaritmisessa vaiheessa ja laskuvaiheessa olivat yhdenmukaisia ​​RNA-seq-tietojen trendin kanssa (täydentävä kuva S3). Tulos osoitti, että RNA-seq-tiedot olivat luotettavia ja niitä voitiin käyttää myöhempään analyysiin.

GO-rikastus- ja KEGG-polkuanalyysit. Logaritmisen vaiheen DEG:t osallistuivat 14 biologiseen prosessiin (BP), joissa oli 6 tyyppistä molekyylitoimintoa (MF), ja niitä esiintyi kaikissa solukomponenteissa (CC) (kuvio 3a). Laskuvaiheen DEG:t olivat mukana 12 BP:ssä 4 eri MF:n kanssa ja niitä esiintyi 12 CC:ssä. Eniten osallistunut verenpaine kahdessa vaiheessa oli metabolinen prosessi, MF sitoutui ja CC oli kalvo. Aineenvaihduntaprosessista, sitoutumisesta ja kalvosta, ylössäädellyt geenit edustivat 70 prosenttia logaritmisessa vaiheessa (kuva 3b) ja 75 prosenttia laskuvaiheessa (kuvio 3c). Nämä tulokset osoittavat, että G. lucidumin vesiuute voisi edistää solukalvon eheyden ylläpitoa molemmissa vaiheissa.

KEGG-reitin rikastusanalyysi suoritettiin näiden kahden vaiheen välisten DEG-arvojen analysoimiseksi edelleen. Logaritmiseen vaiheeseen keskittyi 94 reittiä, joista 68 prosenttia kaikista geeneistä osallistui aineenvaihduntaan. Laskuvaiheessa rikastui 91 reittiä, joista aineenvaihdunta oli edelleen suurin reitti, joka vastasi 68 prosenttia. Logaritmisen vaiheen (kuva 3d) ja laskuvaiheen (kuva 3e) 20 parasta reittiä käytettiin piirtämään kuplakaavio, ja ne osoittivat, että riippumatta G:n merkityksestä tai mukana olevien geenien lukumäärästä.cistanche jauhelucidum-vesiuute keskittyi ensisijaisesti glutationin aineenvaihduntareittiin. Logaritmisessa vaiheessa 38 eri tavalla ilmentynyttä geeniä rikastui tällä reitillä, mikä vastaa 45 prosenttia. Vähenemisvaiheessa 43 eri tavalla ilmentynyttä geeniä rikastui tällä reitillä, mikä vastaa 50 prosenttia.

DEG:ien proteiini-proteiini-vuorovaikutusverkot (PPI). DEG:ien selvittäminen glutationin aineenvaihduntareitillä ja käsitys niiden vuorovaikutuksista muiden proteiinien kanssa auttaa edelleen tutkimaan G. lucidumin vesiuutteen mahdollista säätelymekanismia. Sekä logaritmisella vaiheella (kuva 4a) että laskuvaiheella (kuva 4b) oli tärkeimmät vaikutukset GPX1:een, GPX2:een, GPX7:ään ja GPX11:een. TetraFGD-tietokannan kyselyn kautta nämä GPX-entsyymit kuuluivat PHGPx:ään (lisätaulukko S6). Siksi antioksidanttientsyymeillä, erityisesti PHGPx:llä, on tärkeä rooli T. thermophilan kasvun edistämisessä G. lucidumin vesiuutteen indusoimisen kautta.

GPS-toiminnan ja toiminnan vahvistus. PHGPx:n aktiivisuus viittaa NADPH:n absorption vähenemisnopeuteen2". NADPH/NADP*-arvo kontrolliryhmän laskuvaiheessa oli pienempi kuin logaritmisessa vaiheessa (kuva 5a). Tulos viittaa siihen, että PHGPx:n aktiivisuus G. lucidumin vesiuutteen lisäämisen jälkeen NADPH/NADP plus -arvo laskuvaiheessa oli edelleen pienempi kuin logaritmisessa vaiheessa, mutta korkeampi kuin kontrolliryhmän molemmat faasit. G. lucidumin vesiuute voisi edistää PHGPx:n aktiivisuutta.

PHP voi spesifisesti katalysoida fosfolipidihydroperoksidin pelkistystä pelkistetyllä glutationilla (GSH), jotta myrkyllinen lipidiperoksidi (PL-PUFA-OOH) muunnetaan myrkyttömäksi monityydyttymättömiksi rasvahapoiksi (PL-PUFA-OH) tehokkaasti30. GSH/GSSH-suhteen muutos voi heijastaa PL-PUFA-OOH:n ja PL-PUFA-OH:n muutosta PHGPx-aktiivisuuden vähenemisen vuoksi (kuva 5a), myös GSH/GSSH-suhde kontrolliryhmässä laski viljelyajan pidentyminen (kuvio 5b). G. lucidumin vesiuutteen lisäämisen jälkeen GSH/GSSH-suhdetta kuitenkin nostettiin logaritmisessa ja laskuvaiheessa. Solunsisäinen myrkyllinen PL-PUFA-OOH koeryhmässä muunnettiin myrkyttömäksi PL-PUFA-OH:ksi, mikä oli enemmän kuin kontrolliryhmässä. Mikroskooppisen morfologian ja ultrarakenteen havainnointi. G. Luci-dumin vesiuutteen suojaava vaikutus kalvoon visualisoitiin ammoniakkihopeavärjäyksellä ja TEM:llä. Vertaamalla kontrolliryhmän logaritmista vaihetta (kuvio 6a) ja kontrolliryhmän laskuvaihetta (kuva 6c), havaittiin, että T. thermophilan solumorfologia muuttui vakavasti viljelyajan pidentyessä, ja ydin oli epäselvä, mikä osoitti, että solut näyttivät olevan ikääntyvässä tilassa. Kuitenkin G. lucidumin vesiuuteryhmässä solujen morfologia ja eheys olivat hyvin suojattuja logaritmisessa faasissa (kuvio 6e) ja laskuvaiheessa (kuvio 6g). Ultrastrukturaaliset muutokset soluissa havaittiin TEM:llä. Mitokondrioiden harjanne ja ääriviivat olivat epäselviä laskuvaiheessa (kuvio 6d) verrattuna logaritmiseen vaiheeseen (kuvio 6b) kontrolliryhmässä. Mitokondrioiden hajoaminen lisääntyi viljelyajan pidentyessä. G. lucidumin vesiuutteen lisääminen paransi mitokondrioiden morfologiaa logaritmisessa vaiheessa (kuva 6f) ja laskuvaiheessa (kuva 6h). G. lucidumin vesiuute takasi mitokondrioiden toiminnan, mikä liittyy läheisesti kalvon eheyteen. On huomattava, että logaritmisessa vaiheessa koeryhmän mitokondriot osoittivat morfologisia muutoksia (kuvio 6f, h), mutta kalvon eheys ei vaikuttanut.

Keskustelu

G.lucidum-uutteiden käytöllä on pitkä historia sekä perinteisessä kiinalaisessa lääketieteessä että Itä-Aasiassa. Suuri määrä tutkimuksia on osoittanut niiden tehokkuuden. Aiemmissa raporteissa havaittiin, että G. lucidum -vesiuute ei sisältänyt vain G. lucidumin polysakkarideja, vaan myös Glucidum triterpenoideja. Aiempien raporttien mukaan Ganoderma-happo, Ganoderma-aldehydi ja Ganoderma-ergosteroli ovat G. lucidum triterpeeni 3:n pääainesosia. Niillä on erilaisia ​​solujen korjaustoimintoja (taulukko 1). Ganoderma lucidum -vesiuute sisältää erilaisia ​​vaikuttavia aineita, jotka yhdistävät neljän muun aktiivisen aineen toiminnot, jotka eivät vain kestä hapettumista, vaan myös säilyttävät kalvon eheyden. Tässä tutkimuksessa

G. lucidumin vesiuutteen kasvun edistäminen T. thermophilassa vahvisti tämän inkluusiosuhteen. G. lucidumin vesiuutteen kokonaisionivirtauskromatografialla (lisäkuva S2) analysoimalla voitiin havaita, että eri vaikuttavien aineiden liukenemisaika oli erilainen. Joten G. lucidumin vesiuutteesta tulee monimutkainen orgaaninen liuotin kiehumisajan pidentyessä. Uskomme, että G.lucidumin vesiuutteen vaikuttavat aineet voivat toimia eri aikoina, mikä johtaa synergiaan. Tämän pitäisi olla jatkotutkimusta.

T. thermophilan transkription analyysissä tutkittiin G. lucidumin vesiuutteen vaikutusta geenin ilmentymiseen kasvun aikana. G. lucidumin vesiuutteella käsittelyn jälkeen PHGPx näytti olevan avainvaikuttaja solutiheyteen ja synnytysaikaan. Tämä tulos vahvisti, että G. lucidum -vesiuute vaikutti seleeniriippuvaiseen GPX-perheen tyyppiin. PHP on monitoiminen selenoproteiini, joka jakautuu laajalti kehossa ja joka ei voi vain osallistua antioksidanttisiin reaktioihin, vaan myös vähentää suoraan kalvon lipidejä suojellakseen kalvojärjestelmän eheyttä40. Muihin GPX:eihin verrattuna PHGPx:llä on pienempi tilavuus ja suurempi hydrofobisuus. Monet raportit ovat osoittaneet, että PHGPx:n yli-ilmentyminen soluissa voi vastustaa soluvastetta endogeenisille (esim. ikääntyvä) fl ja eksogeenisille (esim. ympäristön) peroksidaatiovaurioille 2-45.PHP on ainoa entsyymi, joka voi suoraan vähentää PL-PUFA- kalvon OOH vastaaviksi hydroksyyliyhdisteiksi, mikä mahdollistaa peroksidoinnin lopettamisen ja suojaa biologista kalvoa peroksidaatiovaurioilta4647. PL-PUFA-OOH-pitoisuuden kasvu oli syynä kontrolliryhmän solukalvon vaurioitumiseen laskuvaiheen aikana, josta muodostui noidankehä ja kiihdytti solujen vanhenemista. Tässä tutkimuksessa ROS- ja MDA-pitoisuudet olivat (Kuva 2) T.thermophilan määrä kontrolliryhmässä lisääntyi viljelyajan pidentyessä. Kalvo näytti vakavalta muodonmuutokselta laskuvaiheessa morfologisen havainnon perusteella. Kuitenkin, kun G. lucidunin vesiuutetta lisättiin, PHGPx:n ilmentyminen lisääntyi. Siten kalvolla oleva PL-PUFA-OOH muuttui myrkyttömäksi PL-PUFA-OH:ksi ja kalvorakenteen stabiilisuus paranee sekä logaritmisessa että laskuvaiheessa. Ammoniakkihopeavärjäyksellä ja TEM:llä tehdyn kalvon havainnoinnin perusteella voitiin päätellä, että G.lucidum-vesiuute tunkeutui solukalvon läpi kasvuprosessin aikana. Tämä solukalvoon kohdistuva korjausvaikutus voi saada G. lucidumin vesiuutteen aktiiviset aineet pääsemään sytoplasmaan ja suojaamaan ytimen ja mitokondrioiden kalvorakennetta edistämään T. thermophilan aineenvaihduntaa ja saavuttamaan ikääntymistä estäviä vaikutuksia. Kuten lKEGG-rikastuksen tulokset osoittavat, suuri määrä differentiaalisia geenejä on keskittynyt aineenvaihduntareitteihin. Nämä tulokset osoittivat, että G. lucidumin vesiuute oli hyödyllinen glutationin metabolialle ja solujen ikääntymisen tuottamien myrkyllisten peroksidien eliminaatiolle.

Yleensä G. lucidumin vesiuute edisti seleeniriippuvaisen entsyymin PHGPx ilmentymistä GPX-perheessä. PHGPx-aktiivisuuden tehostaminen ei voinut ainoastaan ​​vähentää oksidatiivista stressivastetta in vivo, vaan myös spesifisesti ja tehokkaasti vähentää biologisen kalvon lipidien kertymistä ja säilyttää kalvon eheyden (kuvio 7). Näin ollen G. lucidumin vesiuutteen vaikuttavat aineet pääsevät soluihin ehjän kalvon kautta ja edistävät niiden aineenvaihduntaa. Tämä loi hyvän kierteen ikääntymistä estävän vaikutuksen saavuttamiseksi.

Tämä artikkeli on poimittu Scientifc-raporteista|(2022) 12:3139|https://doi.org/10.1038/s41598-022-06985-z