Akteosidin edut - hoitaa glioblastoomaa

Yhteystiedot: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Sähköposti:audrey.hu@wecistanche.com

TAE WOONG HWANG;DONG HUN KIM; DA BI KIM1;TAE WON JANG;GUN-HWA KIM;MINHO MOON;KYUNG AH YOON;DAE EUN CHO;JAE HO PARK;JWA-JIN KIM

1. Esittely

Glioblastoomaon yleisin pahanlaatuisen primaarisen aivokasvaimen tyyppi ja invasiivisin ja tuhoisin primaarinen aivokasvain (1,2), jonka mediaani eloonjäämisaste on ~18 kuukautta aggressiivisella multimodaalisella hoidolla. Nykyiset hoitopäätökset ovat rajallisia ja sisältävät sädehoidon, kemoterapian ja leikkauksen yhdessä alkyloivan aineen temotsolomidin (TMZ) kanssa (3,4). Huolimatta aggressiivisten hoitojen saatavuudesta, potilaat, joilla onglioblastoomayleensä huono ennuste (5). TMZ on tärkein kemoterapeuttinen lääke, jota käytetään pahanlaatuisten kasvainten kliinisessä hoidossaglioblastooma(6-8); sarjan alkyloivana aineena se pystyy läpäisemään veri-aivoesteen (9-11). Pahanlaatuisen glioblastooman etenemisen ja laajan tunkeutumisen aikana koko aivoihin jatkuvasti lisääntyvä lääkeresistenssi TMZ:lle heikentää sen terapeuttista tehoa (12,13). Näin ollen uusia terapeuttisia lääkkeitä torjumiseksiglioblastoomaetsitään kiireesti.

Aiemmat tutkimukset ovat raportoineet, että glioomasolut läpikäyvät solukuoleman autofagian tai tyypin II ohjelmoidun solukuoleman kautta vasteena TMZ:lle (14, 15). 3-metyyliadeniini (3-MA) ​​voi estää autofagiaa muuttamalla mikrotubuluksiin liittyvän proteiinin 1 kevytketju 3 (LC3)-I LC3-II:ksi, mikä vähentääglioblastoomasolukuolema (16,17); autofagian rooli on kuitenkin riippuvainen solukontekstista. Lukuun ottamatta sytotoksista roolia TMZ:n toiminnan aikana, solustressin aiheuttama autofagian induktio on sytoprotektiivinen prosessi, joka eliminoi stressin aiheuttamat sytoplasmaaggregaatit, organellit ja makromolekyylit nisäkässoluissa lysosomaalisen järjestelmän kautta. Homeostaasin ylläpitämiseen osallistuvat solut puolestaan ​​saavat energiaa näiden katabolisten prosessien kautta (18, 19). Autofagian monimutkaiset roolit viittaavat siihen, että autofagian aktivaattorilla voi olla syöpää estäviä vaikutuksia yhdessä TMZ-hoidon kanssa indusoimallaglioblastoomasolujen autofagia aiheuttamatta haitallisia vaikutuksia tai tarjoamatta etuja normaaleille kudoksille. On huomattava, että TMZ:llä on ollut synergistisiä terapeuttisia vaikutuksia yhdessä D-vitamiinin kanssa, mukaan lukien tukahdutettu solujen elinkyky ja lisääntynyt autofagiaglioblastoomasoluja. Lisäksi TMZ:n ja D-vitamiinin yhdistelmällä on osoitettu olevan syöpää estäviä vaikutuksia in vivo, mukaan lukien kasvaimen koon pieneneminen ja eloonjäämisasteen pidentäminen. Nämä tutkimukset viittaavat siihen, että yhdistelmähoidolla voi olla synergistisiä syövän vastaisia ​​vaikutuksia autofagisten mekanismien kautta TMZ-pohjaisessaglioblastoomaterapia (15).

Acteosideon fenyylietanoidiglykosidi, jota on laajalti levinnyt useisiin tonisoiviin perinteisiin kiinalaisiin kasviperäisiin lääkkeisiin (20,21). Useita farmakologisia vaikutuksia, mukaan lukien antioksidantti, syöpää, anti-inflammatoriset, antinefriittiset ja antimetastaattiset vaikutukset, on yhdistettyakteosidi(22-24). Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet senakteosidisillä on suojaavia vaikutuksia hiilitetrakloridin ja D-galaktosamiinin aiheuttamaa maksavauriota vastaan. Akteosidin suojaavien vaikutusten taustalla olevat mekanismit liittyvät todennäköisesti sen kykyyn estää P450-välitteistä bioaktivaatiota ja hiilitetrakloridille altistumisen aiheuttamia vapaita radikaaleja poistavia vaikutuksia (25, 26).

Siksi todisteet viittaavat siihen, että molemmatakteosidija TMZ indusoivat syövänvastaisia ​​vaikutuksia solukuoleman kautta. Kuitenkin niiden yhdistyminen ja syövän vastaiset vaikutukset yhteydessäglioblastoomajää selvitettäväksi. Siksi tämän tutkimuksen tavoitteena oli varmistaa syövän vastaiset synergistiset vaikutuksetakteosidiyhdistettynä TMZ sisäänglioblastoomaterapiaa. Solujen elinkelpoisuusmääritys suoritettiin yhdistelmähoidon syövänvastaisten vaikutusten analysoimiseksi C6:ssaglioblastoomasolut (rottaglioblastoomasolulinja), ja tuloksia verrattiin pelkällä TMZ-hoidon jälkeen saatuihin tuloksiin. Tutkiakseen edelleen yhdessä käsittelyn aiheuttamaa solukuoleman mekanismiaakteosidija TMZ, apoptoosi ja autofagiaan liittyvät geenit C6-soluissa tutkittiin.

kasvaimia estävä akteosidi

2. Materiaalit ja metodit

Soluviljely:

C6-rottaglioblastoomasolulinja ostettiin American Type Culture Collectionilta (Rockville, MD, USA). Soluja viljeltiin steriileissä olosuhteissa 37 ˚C:ssa kosteassa ympäristössä, jossa oli 5 prosenttia CO2:ta Dulbeccon modifioidussa Eaglen alustassa (DMEM), jota oli täydennetty 10 prosentilla naudan sikiön seerumilla (FBS) ja 1 prosentilla antibiootteja ja sienilääkkeitä (kaikki Welgene, Daegu). , Korea).

Kasvimateriaali:

Abeliophyllum distichum Nakai [kuponki nro. Park1001(ANH)] kerättiin Misun-hyangin teemapuistossa, Seongbul-Mountain Recreation Forestissa, Koreassa.

Kallusinduktio:

Kallusmuodostuksen indusoimiseksi (27) tuoreista kasveista eristettiin 1 cm2:n lehtiä. Eksplantaattia viljeltiin Murachige- ja Skoog-elatusaineella (4 prosenttia sakkaroosia, 0,9 prosenttia agar-agarilla, johon oli lisätty 1 mg/l naftaleenietikkahappoa ja 1 mg/l 2,4-dikloorifenoksietikkahappoa, pH 5,7) 25˚C. Kallus indusoitiin 20 päivää myöhemmin. Riittävä määräakteosidisaatiin alaviljelmällä erottamiseksi ja puhdistamiseksiakteosidikalluksesta (kuva 1). Eri eriä puhdistettuaakteosidikäytettiin jokaisessa kokeessa. Jokainen koe suoritettiin kolme kertaa käyttämällä eri erää.

Eristäminen ja puhdistus:

Etyyliasetaattifraktiot väkevöitiin tyhjössä ja käytettiin näytteenä akteosidin puhdistukseen.Acteosideeristettiin ja puhdistettiin Accelerated Chromatographic Isolation -järjestelmällä (Isolera™ Spektra, Biotage, Uppsala, Ruotsi) käyttämällä SNAP KPHOSPHO-SIL- ja SNAP Ultra Cartridges -patruunoita (Biotage). Theakteosidikalluksesta puhdistettu määrä analysoitiin kvantitatiivisesti käyttämällä standardiakteosidia HPLC-PDA-analyysillä. Lopuksi kalluksesta saatiin akteosidi, jonka puhtausaste oli suurempi tai yhtä suuri kuin 95 prosenttia, ja sitä käytettiin näytteenä temotsolomidipohjaisen kemoterapiassa.glioblastooma.

3-(4,5-dimetyylitiatsoli-2-l)-,5-difenyylitetratsoliumbromidi (MTT) -määritys:

TMZ:n puolimaksimaalisen estävän pitoisuuden (IC50-arvo) tunnistamiseksi C6-soluja vastaan ​​1 x 104 solua yksisolususpensioissa siirrostettiin 96-kuoppaisten levyjen yksittäisiin kuoppiin ja inkuboitiin 24 tuntia 37 ˚C:ssa ennen TMZ-käsittelyä osoitetussa paikassa. pitoisuudet (1, 5, 10 ja 20 mM) 37 °C:ssa 24 tunnin ajan. Sen jälkeen kun TMZ IC50 -arvo oli määritetty 5 mm:ksi, soluja käsiteltiin 24 tuntia 5 mM TMZ:llä, 50 uM.akteosiditai näiden kahden yhdistelmä (5 mM TMZ ja 50 µMakteosidi). MTT-liuosta (5 mg/ml) lisättiin jokaiseen kuoppaan (10 ui) ja viljeltiin 37 °C:ssa 2 tuntia. Sen jälkeen väliaine poistettiin ja DMSO:ta lisättiin 200 ui:n tilavuudessa ja annettiin reagoida huoneenlämpötilassa 30 minuuttia. Absorbanssi aallonpituudella 595 nm mitattiin solujen elinkelpoisuuden määrittämiseksi.

Haavan paranemismääritys:

C6-solususpensiota 1 ml:ssa viljeltiin 12-kuoppaisella levyllä ja kasvatettiin konfluenssiin. Solut käsiteltiin TMZ:lla,akteosiditai TMZ plusakteosidija sitten naarmuuntunut steriilillä 10-µl pipetin kärjellä keinohaavan luomiseksi. 0 ja 24 tuntia haavan jälkeen otettiin digitaaliset kuvat haavan paranemisprosessista käänteisellä mikroskoopilla. Solujen migraatio kvantifioitiin mittaamalla arven koko 0:n ja 24 tunnin kohdalla käyttämällä kuva-analyysiohjelmistoa ImageJ 1.43u/Java1.6.0_22 (NIH, Bethesda, Maryland, USA). Jokainen koe suoritettiin kolme kertaa ja mittaukset suoritettiin kolmena rinnakkaisena.

Immunoblottaus:

C6-soluja käsiteltiin TMZ:llä,akteosiditai TMZ plusakteosidi24 tunnin ajan. Solut hajotettiin jäillä RIPA-lyysipuskurilla (25 mM Tris-HCl, pH 7,5, 150 mM NaCl, 1 prosentti Nonidet P-40, 1 prosentti natriumdeoksikolaattia, 0,1 %). täydennetty proteaasi- ja fosfataasi-inhibiittoreiden cocktaililla (Roche, Basel, Sveitsi) 30 minuutin ajan. Sen jälkeen, kun oli sentrifugoitu 18 341 xg:llä 15 minuuttia 4 °C:ssa, saatiin supernatantti. Proteiinipitoisuus määritettiin käyttämällä Bradford Protein Assays -määrityksiä (Bio-rad, Hercules, CA, USA). Yhtä suuret määrät kokonaisproteiineja (30 µg) ladattiin yksittäisiin kuoppiin ja fraktioitiin elektroforeesilla 10-15 prosentin SDS-PAGE:lla. Proteiinit siirrettiin sähköisesti polyvinylideenidifluoridikalvoille (EMD Millipore, Bedford, MA, USA). Inkuboinnin jälkeen sulkuliuoksessa, joka sisältää 5 prosenttia rasvatonta maitoa Tween/Tris-puskurisuolaliuoksessa 30 minuutin ajan huoneenlämmössä. Blotit tutkittiin suhteessa 1:1,000-laimennetuilla primaarisilla vasta-aineilla (luettelonro 9662, kaspaasi 3; Cell Signaling Technology, Inc., Danvers, MA, USA), B0-solulymfoomalla 2 (sc- 7382, Bcl-2), Bcl-2-assosioitunut X-proteiini (luettelonro 2772, Bax), fosforyloitu (p-)p53 (sc-101762), kokonais-p53 (sc-6243), -aktiini (kat. nro 4970; kaikki; Santa Cruz Biotechnology, Inc., Dallas, TX, USA), LC-3 (L8918, Sigma; Merck KGaA, Darmstadt, Saksa), Rab7 (luettelonro 9367, Cell Signaling Technology, Inc. ), p62 (luettelonro 114), p-p38 (luettelonro 9211), kokonais-p38 (luettelonro 9212), p-c-Jun N-terminaalinen kinaasi (luettelonro 9251, s. -JNK), total-JNK (luettelonro 9252), p-ekstrasellulaarisen signaalin säätelemä kinaasi (luettelonro 9101, p-ERK), kokonais-ERK (luettelonro 9102; kaikki Cell Signaling Technology, Inc. .) yön yli 4°C:ssa. Tätä seurasi inkubointi piparjuuriperoksidaasilla konjugoitujen sekundaaristen vasta-aineiden (1:2, 000; LF-SA8001A, Goat Anti-Mouse IgG-HRP) tai LF-SA8002A (Goat Anti-Rabbit IgG-HRP), AB kanssa. Frontier, Soul, Korea.) 2 tunnin ajan huoneenlämmössä. Sitten proteiinit visualisoitiin altistamalla Chemi-Docille (Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA, USA).

Immunofluoresenssivärjäys:

Lysosomaaleihin liittyvä kalvoproteiini 1 (LAMP1) ja LC3 ovat lysosomaalisen ja autofagian markkereita. Solut (1 x 105 solua/kuoppa) valmistettiin steriloiduille lasipeitelevyille (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, USA) kolmena kappaleena. TMZ-hoidon jälkeenakteosiditai TMZ plusakteosidi24 tunnin ajan soluja kiinnitettiin 4-prosenttisessa paraformaldehydissä 3 0 minuutin ajan, estettiin 5 prosentilla normaalia kanan seerumia (S-3000; Vector Laboratories, Inc., Burlingame, CA, USA), 0,1 prosentilla Triton X:ää. -100 ja inkuboitiin sitten 1 tunti permeabilisaatiota ja epäspesifisten proteiini-proteiinivuorovaikutusten estämiseksi. Sitten soluja inkuboitiin anti-LAMP1:n (1:200; sc-19992, Santa Cruz Biotechnology, Inc.) ja anti-LC3:n (1:400; PM036, MBL International, Woburn, MA, USA) kanssa yön yli 4 °C:ssa. C. Sitten solut pestiin kahdesti PBS:llä ja inkuboitiin vielä 2 tuntia pimeässä Alexa Fluor 488 ja 594 sekundaaristen vasta-aineiden seoksen kanssa (1:200; Alexa Fluor 488 (A-11008) ja 594 (A-11007), Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA) ja pestiin uudelleen PBS:llä. Tumat värjättiin 4,6-diamidino-2-fenyyli-indolilla (Sigma; Merck KGaA) ja pestiin sitten kahdesti PBS:llä. Sitten objektilasit kiinnitettiin ja kuvat otettiin LSM-700 laserkonfokaalimikroskoopilla.

Kuva 1. Akteosidin kemiallinen rakenne.

Virtaussytometria.

Solut analysoitiin Mitotracker Greenin ja MitoSOX:n suhteen virtaussytometrisesti käyttämällä FACSCanto II -virtaussytometriä, kuten valmistaja on ilmoittanut (BD Biosciences). Kahden PBS-pesun jälkeen solut kiinnitettiin 4-prosenttisessa paraformaldehydissä 3 0 minuutin ajan huoneenlämpötilassa ja permeabilisoitiin 0,25-prosenttisella Triton X-100:lla PBS:ssä 20 minuutin ajan. Solut värjättiin primäärisillä vasta-aineilla yön yli 4 °C:ssa (1:200) ja sitten sekundaarisilla vasta-aineilla 1 tunnin ajan jäissä. Kahden PBS-pesun jälkeen solut kiinnitettiin 4-prosenttisessa paraformaldehydissä ja määritettiin välittömästi. Virtaussytometriatiedot kerättiin käyttämällä 10,000 solua ja analysoitiin FlowJo 7.6.1 -ohjelmistolla (Tree Star, Inc., Ashland, OR, USA).

Tilastollinen analyysi:

Kaikki tiedot analysoitiin GraphPad Prism 5:llä.0 ja ne esitetään keskiarvona ± keskivirheenä. Tiedot analysoitiin yksisuuntaisella varianssianalyysillä Tukeyn moninkertaisella post hoc -testillä keskiarvojen vertaamiseksi useiden ryhmien välillä. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Cistanche Echinacoside: Anti-apoptoosi

3. Tulokset

3.1 Yhteishoito TMZ:llä ja akteosidisuppresseillaglioblastoomasolujen lisääntyminen ja migraatio.

Yhdistelmähoito TMZ:lla jaakteosidiesti C6-solujen elinkelpoisuutta. TMZ vähensi solujen elinkelpoisuutta annoksesta riippuvalla tavalla (kuvio 2A), kun taas akteosidilla ei yksinään ollut merkittävää vaikutusta millään hoitotasolla (kuvio 2B). Kun oli inkuboitu 24 tunnin ajan TMZ:tä sisältävässä elatusaineessa akteosidin kanssa tai ilman sitä, suoritettiin MTT-määritys eri hoitotasojen sytotoksisuuden vertaamiseksi. TMZ tukahdutti merkittävästi solujen elinkelpoisuutta, kun taas akteosidi ei merkittävästi tukahduttanut solujen kasvua. Yhdistetty hoito TMZ:lla ja akteosidilla vähensi merkittävästi solujen elinkelpoisuutta (kuvio 2C). Hoito pelkällä TMZ:llä tai akteosidilla heikensi haavan paranemiskykyä (kuva 3A). Haavan etäisyys (prosenttia) mitattiin käyttämällä kuvassa 3A esitettyjä tuloksia ImageJ-ohjelmistolla. Haavan etäisyys kasvoi merkittävästi yhdistelmähoidon jälkeen (kuvio 3B) verrattuna kumpaankin yksittäiseen hoitoon. Nämä tulokset osoittavat, että yhteishoito TMZ:lla ja akteosidilla oli tehokas estäjäglioblastoomasolujen lisääntyminen ja migraatio.

3.2 Akteosidi ja TMZ vaikuttavat apoptoosiin synergistisesti C6-soluissa.

Western blot -analyysin tulokset paljastivat, että katkaistun kaspaasi-3:n, Baxin ja fosforyloidun p53:n tasot olivat korkeammat ja Bcl-2:n tasot alhaisemmat TMZ- ja yhdistelmähoidon jälkeen.akteosidikuin pelkällä TMZ-hoidon jälkeen (kuvio 4A).Acteoside-välitteistä mitokondrioiden toimintaa ja reaktiivisten happilajien (ROS) muodostumista, jotka ovat keskeisiä apoptoottisen signaalin välittäjiä, havaittiin sitten TMZ-käsitellyissä C6-soluissa. Mitokondrioiden massan tarkistamiseksi suoritettiin fluoresenssiaktivoitu solulajitteluanalyysi MitoTracker Greenillä. Yhteishoito TMZ:llä jaakteosidijohti suurempaan mitokondriomassaan kuin hoito pelkällä TMZ:llä (kuvio 4B). ROS:n muodostuminen oli merkitsevästi korkeampi TMZ:llä ja akteosidilla suoritetun yhteishoidon jälkeen kuin pelkällä TMZ:llä (kuvio 4C). Nämä tulokset viittaavat siihen, että ROS:n muodostuminen ja mitokondrioiden toiminta ovat tärkeitä TMZ- ja akteosidihoidon aiheuttamassa apoptoosissa. Yhteiskäsittely TMZ:lla ja akteosidilla indusoi autofagiaa C6-soluissa. TMZ:n on raportoitu aiheuttavan autofagiaa (28,29); siksi tässä tutkimuksessa tutkittiin, missä määrin TMZ- ja akteosidihoito indusoi autofagiaa. C6-soluja käsiteltiin TMZ:llä akteosidin kanssa tai ilman; 24 tunnin kuluttua ja solut värjättiin immunofluoresenssia varten LAMP1:n ja LC3:n havaitsemiseksi autofagian markkereina. LAMP1:n ja LC3:n korkeampia ilmentymistasoja havaittiin yhdistelmähoidon jälkeen (kuvio 5A). Myös autofagiaan liittyvää proteiinien ilmentymistä tutkittiin, ja havaittiin, että TMZ indusoi LC3-I:n konversion LC3-II:ksi, mikä on merkki autofagosomien muodostumisesta. LC3-I:n konversio LC3-II:ksi havaittiin korkeampi TMZ- ja akteosidihoidon jälkeen kuin pelkällä TMZ-hoidolla. Rab7:n ja p62:n ilmentymistasot osoittivat autofagian induktion TMZ-käsitellyissä soluissa (kuvio 5B). Nämä havainnot viittaavat siihen, että yhteishoito TMZ:lla ja akteosidilla tehosti autofagista prosessiaglioblastoomasoluja.

3.3 Akteosidi indusoi MAPK-reitin geenin ilmentymistä TMZ-pohjaisessa hoidossa.

Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että TMZ säätelee MAPK-reittiä, mukaan lukien p38, JNK ja ERK (30). Siksi tässä tutkimuksessa selvitettiin, onkoakteosidivaikuttaa TMZ:hen liittyvään MAPK-geenin ilmentymiseen. C6-soluja käsiteltiin TMZ:lla joko ilman sitäakteosidi. 24 tunnin kuluttua TMZ-käsittely johti p-p38:n, p-JNK:n ja p-ERK:n korkeampiin ilmentymistasoihin. TMZ-säädeltyjen geenien ilmentyminen oli merkittävästi korkeampi TMZ- ja akteosidihoidon jälkeen kuin pelkällä TMZ-hoidolla (kuvio 6). Nämä havainnot viittaavat siihenakteosidivaikuttaa TMZ-pohjaisiin hoitomekanismeihin MAPK-reitin kautta.

anti-akteosidiglioblastooma

Keskustelu

Tämän tutkimuksen tulokset osoittavat, että yhdistetty hoito TMZ:llaakteosiditarjoaa terapeuttista potentiaaliaglioblastoomahoitoon ja toimittamaan todisteita siitä, että kemosensibilisaatio TMZ:n jaakteosidivoi tapahtua autofagian vahvistumisen kautta. Kuten mutaatioglioblastoomasolut voivat johtaa apoptoottisen reitin inaktivaatioon, autofagian induktioon TMZ plus:llaakteosidiYhteishoito voi olla vaihtoehtoinen menetelmäglioblastoomaterapiaa. Onko autofagia kuitenkin ainoa mekanismiglioblastoomaTMZ plus -hoitoaakteosidiyhteishoito on vielä selvittämättä.

Autofagia on olennainen solumekanismi proteiinien ja sytoplasmisten organellien hajoamisessa. Indusoidun autofagian katabolinen etu voi olla tärkeä stressaavissa olosuhteissa; siksi autofagian induktio voi olla mukautuva mekanismi solukuoleman ehkäisyyn (31-33). Aiemmat tutkimukset ovat raportoineet, että vähentynyt autofagia korreloi syövän kanssa (34–36). Lisäksi useat autofagiaan liittyvät proteiinit ja signalointireitit vapautuvat pahanlaatuisen transformaation aikana, mikä johtaa autofagisen aktiivisuuden vähenemiseen. LC3:n korkeat ilmentymistasot on myös yhdistetty lisääntyneeseen eloonjäämisasteeseen potilailla, joilla onglioblastoomahuonoilla suorituspisteillä (37,38). Vastaavasti tämän tutkimuksen tulokset osoittavat, että normaalin autofagian palauttaminen voi olla piilevä strategiaglioblastoomaterapiassa, ja se voi toimia mekanismina epänormaalin kasvainsolujen kasvun rajoittamiseksi.

Normaalissa autofagiassa tietyt sytoplasmiset komponentit eristetään autofagosomeista, jotka sitten fuusioituvat hajotettavan ja kierrätettävän lysosomin kanssa (39, 40). Kun autofagiaa säädellään ylöspäin, autofagosomien muodostumisnopeudet ylittävät lysosomaaliset hajoamisnopeudet; tätä tilaa kutsutaan autofagiseksi stressiksi. Jos stressi tai epänormaali autofagia jatkuu, solukuolema voi tapahtua energian ehtymisen tai beclin-1/Bcl-2-tasapainon muutosten vuoksi. Apoptoosin voi laukaista myös autofagosomien yliaktiivisuus, joka nielaise sytoplasmisia organelleja, mukaan lukien mitokondriot tai endoplasminen verkkokalvo (41). On ehdotettu, että yleinen autofagia voi aiheuttaa solukuolemaa terveiden solujen normaalin sytoplasman ja organellien vaihtuvuuden aikana. Tässä prosessissa solu "kannibalisoi" itsensä sisältä käsin, mikä on tyypin II ohjelmoidun solukuoleman avainominaisuus. Vaikka mekanismeja, joillaakteosiditehostaa TMZ-pohjaisen terapeuttista vaikutustaglioblastoomaHoito on vielä täysin selvittämättä, tässä tutkimuksessa tutkitun yhdistelmähoidon syövänvastaiset vaikutukset voivat liittyä näihin autofagisiin mekanismeihin.

Acteosideon fenyylietanoidiglykosidi, joka on peräisin kasveista (22,26). Aiemmat tutkimukset ovat raportoineet akteosidin erilaisista biologisista vaikutuksista. Katkaistun kaspaasi-3:n ja LC3:n ilmentymistasojen muutokset tässä tutkimuksessa osoittavat, että hoito TMZ:n ja LC3:n yhdistelmälläakteosidiindusoi apoptoosia ja autofagiaa C6-soluissa (kuviot 4 ja 5). Yhdistelmähoidolla osoitettiin olevan synergistinen vaikutusglioblastoomasoluja. Vaikka näiden synergististen vaikutusten muut mahdolliset mekanismit ovat vielä selvittämättä, tässä tutkimuksessa tunnistettiin autofagian induktio tärkeäksi kasvaimia tappavaksi mekanismiksi.akteosidikemosensibilisaatio TMZ-pohjaisen hoidon aikanaglioblastoomaterapiaa.

Akteosidilla hoidetaan glioblastoomaa

Viitteet

1. Friedman HS, Kerby T ja Calvert H: Temozolomidi ja pahanlaatuisen gliooman hoito. Clin Cancer Res 6: 2585-2597, 2000.

2. Mrugala MM ja Chamberlain MC: Taudin mekanismit: Temotsolomidi jaglioblastooma- katso tulevaisuuteen. Nat Clin Pract Oncol 5: 476-486, 2008.

3. Agarwala SS ja Kirkwood JM: Temozolomide, uusi alkyloiva aine, jolla on vaikutusta keskushermostoon, voi parantaa pitkälle edenneen metastaattisen melanooman hoitoa. Onkologi 5: 144-151, 2000.

4. Stevens MF, Hickman JA, Stone R, Gibson NW, Baig GU, Lunt E ja Newton cG: Antitumor imidatsotetratsiinit. 1. 8-karbamoyyli-3-(2-kloorietyyli)imidatso[5,1-d]-1,2,3, 5-tetratsiini-4(3H)-onin, uuden laajakirjoisen kasvaimen vastaisen lääkkeen, synteesi ja kemia agentti. J Med Chem 27: 196-201, 1984.

5. Fulda S: Solukuolemaan perustuva hoitoglioblastooma. Cell Death, 9: 121, 2018.

6. Chen PH, Shen WL, Shih CM, Ho KH, Cheng CH, Lin CW, Lee CC, Liu AJ ja Chen KC: CHAC1:n estämä Notch3-reitti liittyy temotsolomidin aiheuttamaan gliooman sytotoksisuuteen. Neuropharmacology 116: 300-314, 2017.

7. Oshiro S, Tsugu H, Komatsu F, Ohmura T, Ohta M, Sakamoto S, Fukushima T ja Inoue T: Temotsolomidihoidon tehokkuus potilailla, joilla on korkea-asteinen gliooma. Anticancer Res 29: 911-917, 2009.

8. Van den Bent MJ: Korkealaatuisten glioomien adjuvanttihoito. Ann Oncol 17 (Suppl 10): x186-x190, 2006.

9. Shen W, Hu JA ja Zheng JS: Temotsolomidin aiheuttamien kasvainten vastaisten vaikutusten mekanismi glioomasoluihin. J Int Med Res 42: 164-172, 2014.

10. Barciszewska AM, Gurda D, Głodowicz P, Nowak S ja Naskręt-Barciszewska MZ: Uusi epigeneettinen mekanismi temotsolomidin vaikutukselle glioomasoluissa. PLoS One 10: e0136669, 2015.