SLC37A2, fosforiin liittyvä molekyyli, joka lisää sileän lihaksen soluja kalkkeutuneessa aortassa Ⅱ

Tulokset

Etsi ehdokasmolekyylejäfosfaatin aiheuttama kalkkiutunutAoSMC.Jos haluat etsiä molekyylejä, joiden ilmentyminen lisääntyy kalkkeutuneessa AoSMC:ssä, suoritettiin noin 26,000 geenin DNA-mikrosiruanalyysi käyttämällä kalkkeutunutta AoSMC:tä ja kalkkiutumatonta AoSMC-mRNA:ta. Kuvio 1 esittää lämpökartan eri geeneistä, joita ilmennetään AoSMC:n, jota ei viljelty 2,6 mM:lla, ja niiden välillä, joita on viljelty 2,6 mM P:llä 12 päivän ajan. Yhteensä 3 066 geeniä kasvoi yli kaksinkertaiseksi viljellyssä ja viljelemättömässä AoSMC:ssä. Lisääntyneen ilmentymisen omaavat geenit olivat osteoblastien muodostumiseen liittyviä molekyylejä, kuten osteopontiini, periostiinin osteoblastispesifinen tekijä (POSTN), Wnt3, interleukiini-6 (IL-6) jafibroblastien kasvutekijä23 (FGF23) sekä useita SLC-superperheen molekyylejä (taulukko 1). Näiden molekyylien joukossa keskityimme SLC37A2:een, jonka mRNA lisääntyi noin 3,1 kertaa AoSMC:ssä, jota oli viljelty 2,6 mM P:llä 12 päivän ajan verrattuna AoSMCnot, joita viljeltiin 2,6 mM P:llä. SLC37A2:n on raportoitu liittyvän P-säätelyyn, mutta sen yksityiskohtainen vaikutus on tuntematon. tulehduksesta SLC37A2:n ilmentymisessä.Verisuonten kalkkiutuminenon raportoitu tulehduksen edistävän sitä, joten tutkimme, vaikuttaako tulehdusvaste SLC37A2-mRNA:han. 24 tuntia LPS-hoidon jälkeen IL-6 lisääntyi merkittävästi verrattuna AoSMC:hen, jota ei käsitelty LPS:llä (kuvio 2A). Nämä tulokset nähtiin myös 72 tuntia LPS-käsittelyn jälkeen. Ryhmien välillä ei ollut merkittäviä eroja SLC37A2mRNA:n ilmentymisessä (kuvio 2B).

NAPSAUTA TÄSTÄ SAADAksesi LUONNOLLISTA ORGAANIISTA KISTANKSIUUTEtta, JOKA SISÄLTÄ 25 % KINAKOOSIDEA JA 9 % AKTEOSIDIA MUUNAISTEN TOIMINTAAN

Wecistanchen tukipalvelu - Kiinan suurin vesisäiliön viejä:

Sähköposti:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Puhelin:+86 15292862950

Osta lisätietoja teknisistä tiedoista:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

SLC37A2:n ilmentyminen fosfaatin aiheuttamassa kalkkeutuneessa AoSMC:ssä. Sen määrittämiseksi, onko SLC37A2 mukana kalkkeutumisessa, tutkimme SLC37A2-mRNA:n ilmentymistä kalkkiutumattomassa ja kalkkiutuneessa AoSMC:ssä (kuva 3). Kalkkiutuminen havaittiin AoSMC:ssä, jota oli viljelty 2,6 mM P:llä 6 päivän ajan, ja edistyneempää kalkkeutumista havaittiin AoSMC:ssä, jota oli viljelty 2,6 mM P:llä 12 päivän ajan (kuvio 3A). Runx2-mRNA lisääntyi merkittävästi kalkkiutuneella AoSMC:llä verrattuna kalkkiutumattomaan AoSMC:hen (kuvio 3B). SLC37A2-mRNA alkoi lisääntyä merkittävästi päivänä 3 kalkkeutuneessa AoSMC:ssä, ja päivänä 9 kalkkiutunut AoSMC lisääntyi merkittävästi noin kaksinkertaiseksi verrattuna kalkkiutumattomaan AoSMC:hen (Fig). 3C). SLC37A2-proteiinin ilmentyminen lisääntyi merkitsevästi noin kaksinkertaiseksi päivänä 6 kalkkeutuneessa AoSMC:ssä verrattuna kalkkiutumattomaan AoSMC:hen (kuvio 3D).

SLC37A2:n ilmentyminen CKD-mallirotissa.

Selvittääksemme, liittyykö SLC37A2 verisuonten kalkkeutumiseen in vivo, tutkimme SLC37A2:n mRNA:n ilmentymistä adeniinin aiheuttamien CKD-rottien suonissa. Adeniinilla indusoidut CKD-rotat luotiin kuviossa 4A esitetyn protokollan mukaisesti. Taulukossa 2 esitetään ruumiinpaino ja biokemialliset tiedot teurastuspäivänä. Kehon painoadeniinin aiheuttama CKDrotilla oli merkittävästi pienempi kuin ei-CKD-rotissa. Verrattuna ei-CKD-ryhmään, CKD-ryhmillä oli korkeammat plasman P- ja Cr-tasot ja alhaisemmat plasman Ca-tasot ja 24-tunnin P-, Ca- ja Cr-eritys virtsaan. Lisäksi nämä tulokset olivat näkyvämpiä CKD-HP-ryhmässä, kuten aiemmissa tutkimuksissa havaittiin.37,39) Siten munuaisten toiminta heikkeni CKD-ryhmässä, erityisesti CKD-HP-ryhmässä. Tutkimme mRNA:n ilmentymistä CKD-rottien aortan verisuonissa (kuvio 4). Vaikka Runx2-mRNA:n, transkriptiotekijän, joka liikkuu verisuonten kalkkeutumisen mekanismin varhaisessa vaiheessa, ilmentymisessä ei ollut merkittäviä eroja, ryhmien välillä (kuvio 4B) osteopontiinin mRNA:n ilmentyminen lisääntyi merkittävästi CKD-HP-ryhmässä verrattuna muihin ryhmiin verrattuna. CKD ryhmä jaCKD-LP-ryhmä(Kuvio 4C). SLC37A2-mRNA:n ilmentyminen lisääntyi myös merkittävästi CK D-HP -ryhmässä verrattuna ei-CKD-ryhmään ja CKD-LP -ryhmään (kuvio 4D). Koska näissä rotissa oli suuria yksilöllisiä eroja, tutkimme osteopontiinin ja SLC37A2-mRNA:n välistä korrelaatiota ja havaitsimme merkittävän korrelaation näiden molekyylien välillä (kuvio 4E). Torakoabdominaalisen aortan histologinen tutkimus paljasti mediaalisen kalkkeutumisen vain CKD-HP-ryhmän aortassa (kuvio 5A). SLC37A2:n ilmentymiskohdan tutkimiseksi aortassa suoritimme CKD-HPrats-aortan immunovärjäyksen. SLC37A2 ilmeni voimakkaasti alueella, jossaverisuonten kalkkiutuminentapahtui (kuvio 5B).

Kuva 1. Eri tavalla ilmentyneiden geenien lämpökartta AoSMCnon-viljellyn 2,6 mM P:llä ja AoSMC:n välillä, jota on viljelty 2,6 mM P:llä. Punainen edustaa geenejä, joilla on korkea signaalitaso, ja vihreä edustaa geenejä, joilla on alhainen signaalitaso. AOSMC aortan sileät lihassolut. Katso kuva verkkoversiosta.

Keskustelu

Tutkimme ehdokas-P-sukuisia molekyylejä, jotka osallistuvat verisuonten kalkkeutumiseen. Tuloksemme osoittivat, että SLC37A2 on yksi molekyyleistä, jotka lisääntyvätverisuonten kalkkiutuminenin vitro ja in vivo.

SLC37-perhe kuuluu SLC-superperheeseen ja sisältää proteiineja: SLC37A 1-440) SLC37-perhe sisältää kalvon läpäiseviä proteiineja endoplasmisessa verkkokalvossa ja sen sekvenssi on homologinen bakteerien organofosfaattifosfaattiantiporterille.(41) SLC37A4 tunnetaan paremmin nimelläglukoosin6-fosfaatin kuljettaja[ ) geneettisesti liikalihavista hiirimalleista ja osteoklastien kaltaisista soluista, jotka ovat peräisin Raw264.7-soluista.(45.6) SLC37A2-proteiini kuljettaa sekä glukoosi-6-fosfaattia/fosfaattia että fosfaatti/fosfaattivaihtoa.(4) Äskettäin raportit ovat osoittaneet yhteyden SLC37A2, jolla on eläintauti. (47-49) SLC37A2-vika aiheuttaakraniomandibulaarinen osteopatia(CMO), itsestään rajoittuva proliferatiivinen luusairaus terrieriroduilla. (47) Lypsykarjalla homotsygoottinen SLC37A2-mutaatio on vastuussa alkiokuolemasta. (8.9) Lisäksi. SLC37A2:ta on pidetty D-vitamiinin kohdegeenien kohteena. (niin) Fosfori-Ser294-progesteronireseptorin kohdegeenin potentiaalia rintasyövän etenemiseen on myös harkittu(1) On raportoitu, että tulehdus voi sekä aiheuttaa että pahentaa verisuonten kalkkeutumista. (2s26) Lisäksi. SLC37A2 ilmentyy runsaasti makrofageissa ja WAT:ssa, joihin makrofagien infiltraatio vaikuttaa. (s) Siksi. ajattelimme, että SLC37A2 saattaa olla tulehduksen aikana ilmentyvä molekyyli. Tuloksemme eivät kuitenkaan osoittaneet lisääntynyttä SLC37A2:n ilmentymistä AoSMC:ssä, joka oli alttiina tulehdusvasteelle, eikä tulehduksellinen stimulaatio näytä suoraan vaikuttavan tähän molekyyliin. SLC37A2 voi osallistua verisuonten kalkkeutumiseen muun mekanismin kuin tulehduksen kautta.

On raportoitu, että SLC37A2 toimii P-kytkettynäanti-portteri. (41) Lisäksi SLC37A2:n ilmoitettiin olevan D-vitamiinin kohdegeeni, ja SLC37A2-geeni sisältää tärkeän vitamiinin Dreseptorin sitoutumiskohdan (ss2). Systemaattisesti korreloivat muutokset SLC37A2-geenien ilmentymisessä ja D-vitamiinin kiertävissä muodoissa. on havaittu ihmisen perifeerisen veren mononukleaarisissa soluissa. (50)D-vitamiinireseptorit sitoutuvat 1a-25-dihydroksi-D-vitamiiniin, joka on D-vitamiinin metaboliitti, ja säätelevät geenien ilmentymistä. lo, 25-dihydroksi-D-vitamiini, toimii Cainin ja P:n imeytymisessä suolistossa, Cainin mobilisaatiossa luussa ja Cainin uudelleenabsorptiossa munuaisissa. (3) On olemassa raportti, että adeniinilla indusoiduissa CKD-mallirotissa seerumi la, 25-dihydroksi-D-vitamiini, oli merkittävästi korkeampi rotilla, jotka saivat runsaasti p-ruokavaliota ja joilla oli pitkälle edennyt verisuonten kalkkiutuminen, verrattuna alhaisiin rottiin. -p-ruokavalion saanti.39) SLC37A2 voi liittyä P-sääntelyyn D-vitamiinin kautta. Lisätutkimuksia tarvitaan sen selvittämiseksi, että D-vitamiini vaikuttaa SLC37A2:n ilmentymiseen in vitro ja vivo.

On osoitettu, että verisuonten kalkkeutumisen mekanismi on samanlainen kuin luun muodostumisen. CMO:n aiheuttama SLC37A2:n puutos on kliinisesti verrattavissa ihmisen infantiiliin aivokuoren liikakasvuun, joka tunnetaan myös nimellä Caffeyn tauti.7 Lisäksi on raportoitu, että SLC37A2 ilmentyy luuytimessä ja osteoklasteissa. Hytone et al.(7 olettivat, että SLC37A2 aiheuttaisi epätasapainon osteoblastisen ja osteoklastisen luunmuodostuksen toiminnassa ja sen seurauksena johtaisi hyperostosiin.

Runx2 on välttämätön transkriptiotekijä verisuonten kalkkeutumiseen. On myös raportoitu, että Runx2 on osteoblastien erilaistumistranskriptiotekijä, joka ilmentyy kehittyvissä rintojen epiteelisoluissa. (s435) Runx2 näyttää olevan välttämätön fosfori-Ser294-progesteronikohdegeenien säätelemiseksi, jotka liittyvät rintasyövän etenemiseen. SLC37A2:ta pidetään fosfori-Ser294-progesteronireseptorin kohdegeeninä. (s1) Siksi katsotaan, että Runx2 voi säädellä SLC37A2:ta. Tässä tutkimuksessa SLC37A2-mRNA:n ilmentyminen CkD-rottien aortassa korreloi osteopontiinin mRNA:n kanssa, joka kohdistuu Runx2:n geeniin.