SARS-CoV-2 Muisti B- ja T-soluprofiilit lievillä COVID-19 toipilaspotilailla ✩

Abstrakti

Tavoitteet:

Antiviraalinen adaptiivinen immuniteetti sisältää muisti-B-soluja (MBC) ja muisti-T-soluja (MTC). MBC:n ja MTC:n dynamiikka vakavan akuutin hengitystieoireyhtymän koronavirus 2:n (SARS-CoV-2) toipilaspotilailla vaatii lisätutkimuksia.

Antiviraalinen adaptiivinen immuniteetti on kehon muodostama immuunivaste virusinfektiota vastaan, mukaan lukien kaksi soluimmuniteetin ja humoraalisen immuniteetin aspektia. Soluimmuniteetti käyttää pääasiassa T-soluja ja luonnollisia tappajasoluja tappamaan suoraan tartunnan saaneita viruksia tai edistämään virusten poistumista; humoraalista immuniteettia välittävät pääasiassa vasta-aineet, jotka neutraloivat, puhdistavat ja estävät uudelleentartunnan. Immuniteetti viittaa ihmiskehon kykyyn vastustaa ulkoisten patogeenisten mikro-organismien ja haitallisten tekijöiden tunkeutumista ja on tärkeä tae ihmiskeholle vastustaa sairauksien hyökkäystä. Antiviraalinen adaptiivinen immuniteetti liittyy läheisesti immuniteettiin, koska antiviraalinen adaptiivinen immuniteetti on tärkeä keino ihmiskeholle vastustaa virusinfektiota. Vain vahvan immuniteetin tilassa elimistö voi tuottaa riittävän antiviraalisen adaptiivisen immuunivasteen ja poistaa viruksen mahdollisimman pian. , jotta saavutetaan virusinfektioiden ehkäisy ja hoito. Sitten meidän jokapäiväisessä elämässämme meidän on myös parannettava vastustuskykyämme. Voimme käyttää Cistanchea. Cistanche sisältää runsaasti erilaisia ​​antioksidanttisia aineita, kuten C-vitamiinia, C-vitamiinia, karotenoideja jne. Nämä ainesosat voivat poistaa vapaita radikaaleja ja vähentää oksidatiivista stressiä, parantaa immuunijärjestelmän vastustuskykyä.

Napsauta cistanche tubulosa -etuja

Menetelmät:

Tässä poikkileikkaus- ja pitkittäistutkimuksessa veriperäisiä MBC- ja MTC-vasteita arvioitiin 68:lla anti-piikki-IgG-positiivisella lievällä koronavirustaudin 2019 (COVID-19) toipilaskerralla käynnillä 1, 1-7 kuukautta (mediaani 4,1 kuukautta) taudin alkamisen jälkeen. SARS-CoV-2 anti-spike IgG määritettiin ELISA:lla, MBC määritettiin SARS-CoV-2-spesifisen reseptoriin sitoutuvan domeenin (RBD) ELISpotin avulla ja interferoni-gamma (IFN-)-, interleukiini 2 (IL2) )- ja IFN- plus IL2-erittävät MTC:tä IFN- ja IL2 SARS-CoV-2 FluoroSpotin avulla. 24 potilaalle, jotka otettiin ensimmäisellä käynnillä, IgG-, MBC- ja MTC-analyysit tehtiin myös 3 kuukautta myöhemmin toisella käynnillä.

Tulokset:

72 prosenttia toipilista oli sekä MBC- että MTC-positiivisia, 18 prosenttia MBC-positiivisia ja MTC-negatiivisia ja 10 prosenttia MTC-positiivisia ja MBC-negatiivisia. MBC-vasteen huipputaso havaittiin 3 kuukautta COVID{10}} puhkeamisen jälkeen, ja se säilyi 7 kuukautta tartunnan jälkeen. Merkittävät MTC-tasot havaittiin kuukauden kuluttua alkamisesta vasteena S1-, S2_N- ja SNMO-peptidipoolille. MTC-vasteen taajuus ja suuruus SNMO:lle olivat korkeammat kuin S1:lle ja S2_N:lle. Pitkittäinen analyysi osoitti, että vaikka spesifinen humoraalinen immuniteetti heikkeni, soluimmuniteetti säilyi. Johtopäätökset: Tutkimustulokset osoittavat adaptiivisen soluimmuniteetin kestävyyden vähintään 7 kuukauden ajan SARS-CoV{20}}-infektion jälkeen, mikä viittaa pitkäaikaiseen suojaukseen.

1. Esittely

Vaikean akuutin hengitystieoireyhtymän koronavirus 2:n (SARS-CoV-2) vasta-ainetasojen asteittainen lasku toipilaspotilailla primaarisen infektion jälkeen (Achiron et al., 2021; Hartley et al., 2020; Rodda et al., 2021; Sakharkar et al., 2021) nostaa esiin SARS-CoV-2-uudelleentartunnan mahdollisuuden, kun humoraalinen immuniteetti on heikentynyt. Tämän seurauksena huomiota on kiinnitetty pitkäaikaiseen immuniteettiin SARS-CoV-2:a vastaan, johon liittyy muisti B- ja muisti-T-soluja (MBC ja MTC, vastaavasti). Spesifisten anti-SARS-CoV-2 MBC:n ja MTC:n esiintyminen on osoitettu toipilaan olevilla potilailla (Forthal, 2021; Hartley ym., 2020; Peng ym., 2006; Peng et ai., 2020; Rodda et ai., 2021; Schwarzkopf ym., 2021; Sekine et ai., 2020; Sherina ym., 2021; Thieme et ai., 2020).

Useat viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että SARS-CoV-2-spesifinen IgG säilyy ja siihen liittyy samanaikaisesti lisääntynyt MBC:n ja MTC:n osuus jopa 8–9 kuukauden ajan taudin alkamisesta (Dan et al., 2021; Sandberg et al. , 2021; Sherina et al., 2021), kun taas toiset ovat osoittaneet SARS-CoV-2 IgG-tasojen laskua, johon liittyy pysyvyyttä ja jopa MBC:n lisääntymistä vähintään 5 kuukauden ajan taudin alkamisen jälkeen (Hartley et al. , 2020; Rodda et ai., 2021; Sakharkar ym., 2021).

Kun otetaan huomioon IgG-tasojen raportoitu lasku koronavirustaudin 2019 (COVID-19) toipumisen aikana, pitkäkestoinen adaptiivinen immuniteetti on olennaisin uudelleenkutsun immuunivasteen kannalta uudelleeninfektion tapauksessa. Äskettäin raportoitu alhainen SARSCoV-2-uudelleeninfektion esiintymistiheys seronegatiivisilla yksilöillä (Leidi et al., 2021; Murchu et al., 2021) on lisännyt SARS-CoV2-suojauksen mahdollisuuden uudelleenkutsumalla adaptiivista immuniteettia . Siksi tämä tutkimus suoritettiin SARS-CoV-2 MBC- ja MTC-vasteiden ja MTC-valikoiman profiloimiseksi anti-piikin IgG-positiivisilla lievällä COVID{17}}-potilailla. Erityisesti arvioitiin MBC- ja MTC-vasteet COVID{18}}-potilailla, joilla oli alentunut IgG-taso.

2. Menetelmät

2.1. Osallistujat

SARS-CoV-2 toipilaspotilaat sisällytettiin tutkimukseen seuraavien kriteerien mukaisesti: (1) positiivinen RT-PCR SARS-CoV-2 RNA nenänielun vanupuikko; (2) positiivinen anti-SARS-CoV-2 IgG-testi. Yksikään potilaista ei tarvinnut sairaalahoitoa ja sairauden vaikeusaste oli lievä, ja potilailla oli ainakin yksi seuraavista oireista: väsymys, heikkous, lihaskipu, yskä ja kuume. Terveet henkilöt, joilla ei ollut SARS-CoV-2-oireita, joilla ei ollut kotikontaktia tartunnan saaneen potilaan kanssa ja jotka olivat seronegatiivisia anti-spike SARS-CoV-2 -tartunnalle, sisällytettiin negatiiviseen kontrolliryhmään. Verinäytteet immuunijärjestelmän arviointia varten otettiin kaikilta osallistujilta (N=84), mukaan lukien 68 toipilasta ja 16 tervettä henkilöä. MBC-vaste määritettiin kaikille 68 toipilaiselle, ja 41 arvioitiin MTC:n suhteen ensimmäisellä käynnillä. Pitkittäistutkimuksessa 24 potilasta, joille oli tunnusomaista vähentynyt anti-piikin IgG-testi 3 kuukautta myöhemmin (toinen käynti), analysoitiin uudelleen MBC- ja MTC-testeillä.

2.2. Eettinen lausunto

Tämän tutkimuksen hyväksyi Sheba Institutional Review Board (SMC{0}}), ja kaikilta osallistujilta saatiin tietoinen suostumus.

2.3. SARS-CoV-2 anti-spike S1 IgG-vasta-aineiden havaitseminen

Immunomääritys SARS-CoV-2 IgG-vasta-aineiden havaitsemiseksi verinäytteistä suoritettiin käyttämällä Euroimmun (EI, Lyypekki, Saksa) anti-SARS-CoV-2 IgG kvantitatiivista ELISA-sarjaa, joka perustui rekombinantti S1:een SARS-CoV-2-piikkiproteiinin alayksikkö. Testit suoritettiin valmistajan ohjeiden mukaan käyttämällä Agility automatisoitua ELISA-analysaattoria (DYNEX Technologies Inc., Chantilly, VA, USA). Optinen tiheys (OD) havaittiin aallonpituudella 45{10}} nm, ja kunkin näytteen lukeman suhde pakkaukseen sisältyvän kalibraattorin lukemaan laskettiin kullekin näytteelle (kutsutaan jäljempänä IgG-pisteeksi ). IgG-pistearvot, jotka olivat yli 1,0, katsottiin positiivisiksi.

2.4. COVID-19-muistin B-solujen ja muistin T-solujen vasteet

SARS-CoV-2-spesifisen MBC:n analyysi suoritettiin käyttämällä FluoroSpot-määritystä reseptoriin sitoutuvan domeenin (RBD) spesifisten MBC-peräisten IgG:tä erittävien solujen havaitsemiseksi polyklonaalisen B-solustimulaation jälkeen. Ihmisen IgG SARS-CoV-2 -reseptoriin sitoutuvan domeenin (RBD) -spesifistä ELISpot PLUS -pakkausta (ALP-kitti; Mabtech, Ruotsi) käytettiin valmistajan ohjeiden mukaisesti. Lyhyesti sanottuna perifeerisen veren mononukleaarisoluja (PBMC) inkuboitiin (250 000 solua/kuoppa) anti-IgG FluoroSpot -levyllä R848:n (1 ug/ml) ja interleukiini 2:n (IL2) (10 ng) seoksella stimuloinnin jälkeen. /ml) (B-Cell stim pack; Mabtech, Ruotsi). SARS-CoV-2-spesifisten IgG:tä erittävien B-solujen määrä mitattiin spot-forming units (SFU) -yksiköissä Mabtech IRIS -lukijalla. Tulokset ilmaistiin SFU:n lukumääränä 250 000 siemennettä solua kohden, kun stimuloimattomien solujen tausta oli vähennetty. Positiivinen raja-arvo asetettiin 90 prosentin luottamusvälin yläpuolelle terveillä koehenkilöillä (HS).

Interferoni-gamma (IFN- )-, IL2- ja IFN- plus IL2-erittävä MTC havaittiin käyttämällä ihmisen IFN- ja IL2 SARS-CoV-2 FluoroSpot PLUS -pakkauksia valmistajan protokolla (Mabtech AB, Ruotsi). Esipäällystettyjä levyjä monoklonaalisella anti-IFN-/IL2:lla inkuboitiin yön yli RPMI-1640-elatusaineessa, joka sisälsi 1{{20}} prosenttia vasikansikiön seerumia (FCS), jota oli täydennetty SARSCoV:lla{{16}. } peptidipoolit tai epäspesifiset anti-CD3-ärsykkeet (0,1 ug/ml) anti-CD28:n (0,1 ug/ml) ja 300 000 solujen läsnä ollessa kostutetussa inkubaattorissa (5 % CO2, 37 astetta) ).

SARS-CoV-2 S1 -skannauspooli sisältää 166 peptidiä ihmisen SARS-CoV-2 -viruksesta (nro 3629-1; Mabtech AB). Peptidit ovat 15-meereja, jotka menevät päällekkäin 11 aminohapon kanssa ja peittävät S-proteiinin S1-domeenin (aminohapot 13–685). S1-pooli toimitetaan S1_1 (1–83) ja S1_2 (84–166) peptideinä. SARS-CoV-2 SNMO:n määrittelemä peptidipooli sisältää 47 synteettistä peptidiä, jotka sitoutuvat ihmisen leukosyyttiantigeeniin (HLA), jotka ovat peräisin S-, N-, M-, ORF3a- ja ORF7a-proteiineista (#3622-1; Mabtech). AB) (Peng et al., 2020). SARS-CoV-2 S2_N-määritelty peptidipooli sisältää 41 synteettistä peptidiä, jotka sitoutuvat HLA:han, jotka ovat peräisin SARS-CoV-2-viruksen S- ja N-proteiineista (#{{33}). }, Mabtech AB) (Ahmed et al., 2020).

ELISpot- ja FluoroSpot-määritysten tulokset arvioitiin IRIS-lukijalla ja analysoitiin käyttämällä IRIS-ohjelmistoversiota 1.1.9 (Mabtech AB). Peptidipoolikohtaiset vasteet kvantifioitiin mittaamalla IFN- -, IL2- tai IFN- plus IL2-, joka tuottaa MTC:tä. Vähintään 5.0 SFU-mittauksia, jotka olivat vähintään 2-kertaisesti korkeammat kuin SFU-tausta elatusaineissa, katsottiin positiivisiksi. Tausta-SFU vähennettiin mittauksista ja ilmaistiin SFU/250 000-soluina. Kokonais-IFN- -, IL2- tai IFN- plus IL2-MTC-vasteen määrittämiseksi positiiviseksi tai negatiiviseksi koehenkilöillä, joilla on vähintään yksi positiivinen vaste joko IFN- tai IL2:lle tai IFN- plus IL2 vähintään yhteen SARS-CoV-2-peptidipoolista otettiin huomioon. Jatkuvan kokonais-MTC-vasteen arvioimiseksi yhdestä analysoidusta sytokiinista spesifisen sytokiinia erittävän MTC:n positiivinen SFU vasteena S1-, S2_N- ja SNMO-peptideille tehtiin yhteenveto aiemmin kuvatulla tavalla (Sherina et ai. , 2021). Positiivinen raja-arvo asetettiin terveiden kontrollien spesifisten MTC-lukujen 90 prosentin luottamusvälin yläpuolelle.

2.5. Tilastollinen analyysi

Kaikki jatkuvat ominaisuudet kuvataan keskiarvona ± standardipoikkeama (SD); epäjatkuvat ominaisuudet kuvataan mediaaniksi 25–75 prosentin kvartiilivälillä (IQR). Erot määritettiin Mann-Whitneyn U-testillä, Fisherin tarkalla testillä ja Chi-neliötestillä; korrelaatio arvioitiin Spearman (rank) -testillä. P-arvo<0.05 indicated significance.

3. Tulokset

68 anti-spike-IgG-positiivista COVID-19 toipilasa, 25 naista ja 43 miestä, keski-ikä 39,3 ± 13,2 vuotta, ja mediaaniaika taudin puhkeamisesta (TFO) ensimmäisellä käynnillä oli 4,1 kuukautta (IQR). 2,6–6,1 kuukautta), olivat mukana tutkimuksessa. MBC-analyysi oli jo 1-kuukauden TFO:ssa ja kesti jopa 7 kuukautta (P< 0.005; Figure 3B–D). Notably, while anti-spike IgG levels, MBC, and MTC were significantly higher than in the HS, no statistical differences were observed in convalescents at the different time points.

Merkittäviä korrelaatioita havaittiin anti-RBD MBC:n määrän ja anti-piikki-IgG-tason (r=0.39, P=0.0009) ja IL2-erittävän MTC:n (r {) välillä. {7}}.45, P=0.004), mutta vähemmän, kun IFN- - erittää MTC:tä (r=0.3, P=0.05) (kuva 4A) –C), kun taas IFN- - ja IL2-erittävä MTC korreloivat myös (r=0.48, P=0.001; kuva 4D). Merkittäviä korrelaatioita ei havaittu IgG:n ja MTC:n välillä eikä MBC:n ja MTC:n välillä TFO:n kanssa.

3.2. SARS-CoV-2--spesifinen T-solumuistivalikoima

Sen määrittämiseksi, onko MTC syntynyt ja säilynyt COVID{{0}} toipilaspotilailla, IFN- -, IL2- ja IFN plus IL2-erittävien MTC:n määrä vaste stimulaatioon SARS-CoV2 S1-, S2_N- ja SNMO-peptidipoolilla mitattiin samanaikaisesti. Merkittävästi korkeimmat yksilöt, joilla oli positiivinen IFN- -, IL2- ja IFN- plus IL2-erittävä MTC, havaittiin vasteena SNMO-pooliin (82,9 prosenttia, 57,5 ​​prosenttia ja 72,3 prosenttia) verrattuna S1:een (56,6 prosenttia , 34,1 prosenttia ja 43.{25}} prosenttia; P < 0,0001) ja S2_N (31,7 prosenttia, 7,3 prosenttia ja 17,5 prosenttia, vastaavasti; P < 0,0001) (lisämateriaalitaulukko S1). Lisäksi SFU-tasot vähintään IFN- -tuottaville MTC:lle vasteena SNMO:lle olivat merkittävästi korkeammat kuin vastauksena S1:lle tai S2_N:lle (lisämateriaalitaulukko S2).

Kuten SFU-luku osoittaa, stimulaatiolle SNMO-poolilla oli ominaista aikaisempi välitön ja pysyvämpi vaste IFN{{0}}, IL2- ja IFN- plus IL{{3} }erittää MTC:tä kuin stimulaatiota S1- ja S2_N-peptideillä. SNMO-stimulaation jälkeen IFN- -, IL2- ja IFN- plus IL2-erittävät MTC:t ovat lisääntyneet merkittävästi jo 1 kuukauden TFO:n jälkeen ja olivat edelleen koholla jopa 7 kuukauden ajan. seuranta (P < 0,05) (kuvio 5). Vaste S1-peptideille oli viivästynyt ja erosi merkittävästi HS:n vastaavista 5 ja 7 kuukauden kohdalla kummassakin sytokiinia tuottavassa MTC:ssä (lisämateriaali kuva S2). Vaste S2_N-peptidipooliin oli vähäinen ja havaittiin IFN- -erittävässä MTC:ssä 5 kuukauden TFO:ssa (lisämateriaali kuva S3). Tilastollisia eroja ei havaittu IFN- -, IL2- ja IFN- plus IL2- MTC:tä erittävissä tasoissa toipilaisilla eri ajankohtina.

3.3. Pitkittäinen analyysi

Kuten aiemmin osoitettiin, SARS-CoV-2 anti-spike IgG -taso laski 50 prosenttia, mutta pysyi silti voimassa 9 kuukauden ajan (Achiron et al., 2021). Pitkittäisten muistisolujen vasteiden ymmärtämiseksi paremmin saman potilaan IgG:n, MBC:n ja MTC:n dynamiikkaa analysoitiin kahdella toistuvalla käynnillä. Tarkemmin sanottuna solumuisti karakterisoitiin 24 toipilaisessa, jotka olivat anti-piikki-IgG-positiivisia ensimmäisellä käynnillä ja joilla oli alentunut IgG-taso toisella käynnillä. Kuusi 24 toipilaan potilaasta, joilla oli positiivinen IgG ensimmäisellä aikapisteellä (mediaani 1,22, IQR 1,14–1,58), siirtyi IgG-negatiiviseen toisessa vaiheessa (mediaani 0,66, IQR 0). 40–0.96; P=0.008) (Kuva 6A). Kaikille tämän alaryhmän potilaille oli ominaista MBC:n määrän lisääntyminen tai ei muutosta: mediaani 23,5 (IQR 0–28,9) ja mediaani 28,1 (IQR 19.0–56,3) (P).=0.002) (Kuva 6B). Yleinen IFN-eritys, IL2-eritys ja IFN- plus IL2--eritys MTC pysyi kuitenkin pysyvinä molemmilla aikapisteillä: mediaani 17,7 (IQR 3,22–45,2) ja 5,85 (IQR 0–41,9). ), mediaani 9,5 (IQR 0–24,4) ja 7,7 (IQR 0–34,0) ja mediaani 20,9 (IQR 1,65–34,6) ja 8,95 (IQR 4,75–18,5) (P > 0,05) (lisäkuva 4A–D) ).

In contrast, the 18 patients with decreased IgG yet remaining IgG-positive (median 3.91 (IQR 2.81–7.73) and 2.53 (IQR 1.89–3.88); P = 0.01) (Figure 6C) displayed no significant changes in MBC (median 30.5 (IQR 1.73–56.3) and 12.1 (IQR 0–60.8); P = 0.2) (Figure 6D) and in the overall IFN-γ -secreting, IL2-secreting, and IFN-γ +IL2-secreting MTC (median 15.0 (IQR 0.68–38.6) and 25.7 (IQR 0.9–38.5), median 4.8 (IQR 0–22.4) and 8.45 (IQR 0–30.5), and median 5.4 (IQR 0–23.9) and 19.9 (IQR 0–42.5), respectively) (P >0.05) (Lisämateriaalikuva S4E–H).

4. Keskustelu

Uudelleentartunnan ehkäisyyn kuuluu solun muistikomponentit, jotka on ohjelmoitu reagoimaan nopeasti antigeenien kohtaamisiin, jotka synnyttävät muistia B- ja T-soluja (Cromer et al., 2021; Forthal, 2021; Mazzoni et al., 2021; Turner et al., 2021; Ueffing et ai., 2020). Tämä tutkimus osoitti voimakkaiden SARSCoV-2 anti-spike -vasta-aineiden ja kestävien SARS-CoV-2-peptideille spesifisten muisti-B- ja T-soluvasteiden samanaikaisen läsnäolon potilailla, jotka ovat toipuneet COVID-19-taudista jopa 7 vuotta. kuukautta tartunnan jälkeen. Osoitettiin, että MBC- ja MTC-tasot nousivat pian alkamisen jälkeen. Erityisesti MTC-vaste edelsi RBD-spesifistä MBC:tä, kuten on raportoitu aiemmin (Dan et al., 2021). MTC-vastetta karakterisoivat IFN- -, IL2- ja IFN- plus IL2-, jotka erittivät MTC:tä vasteena S1-, S2_N- ja SNMO-peptidipoolille.

Humoraalisen ja adaptiivisen immuunivasteen havaittu dynamiikka vahvisti aiempia julkaisuja, joissa kerrottiin, että piikin vastainen IgG pysyi vakaana jopa 6 kuukautta diagnoosin jälkeen (Dan et al., 2021; Gaebler et al., 2021; Hartley et al., 2020; Sherina et ai., 2021). Havaittu humoraalinen vaste, joka on havaittu piikkiä vastaan ​​ja muistin B-soluvaste RBD:tä vastaan, tukevat pitkäkestoista suojaa SARS-CoV{8}}-infektiota vastaan. Lisäksi tutkimustulokset viittaavat siihen, että vaikka SARS-CoV{10}}-vasta-ainetaso muuttuu seronegatiiviseksi, MBC:n ja MTC:n läsnäolo voi tarjota suojan uudelleeninfektion tapauksessa. Lukuisat tutkimukset ovat kuvanneet noin yhden prosentin uudelleeninfektioista (Leidi et al., 2021; Murchu et al., 2021). Tämä uudelleeninfektiotapausten alhainen esiintymistiheys voidaan todennäköisesti selittää adaptiivisten immuniteettikomponenttien eli muistin B- ja T-solujen läsnäololla ja osallisuudella. Tätä käsitystä vahvistaa entisestään äskettäinen tutkimus (McMahan et al., 2021), joka osoitti, että suhteellisen alhaiset vasta-ainetiitterit riittävät suojaamaan SARS-CoV-2-tartuntaa vastaan ​​reesusmakakeilla ja että solujen immuunivasteet voivat edistää suojaa. jos vasta-ainevasteet eivät ole optimaalisia.

Löydökset IFN{0}}erittävästä efektori-MTC:stä viittaavat välittömään, mutta ei jatkuvaan suojaukseen patogeenien sisäänpääsykohdissa, kun taas keskus-MTC, jolle on tunnusomaista IL2:n tai IFN- plus IL2:n eritys, viittaa pitkäkestoiseen, pitkäkestoiseen vasteeseen lisääntymällä sekundaarissa. lymfaattisia elimiä ja tuottaa uusia efektoreita (Forthal, 2021).

IL2 on kasvutekijä spesifisten T-solujen solulaajenemiseen sekä efektori- ja muisti-T-solujen tuottamiseen (Abbas et al., 2018), kuten on aiemmin havaittu sekä akuutin että toipilaan COVID-taudin PBMC-solujen in vitro -stimulaatiolla. 2}} potilasta (Braun ym., 2020; Grifoni ym., 2020; Peng et ai., 2020; Sekine ym., 2020; Thieme ym., 2020; Weiskopf et al., 2020). Solunsisäinen värjäys paljasti, että sekä CD8 plus T-solut että CD4 plus T-solut ovat tämän sytokiinin lähteitä, mutta CD4 plus T-solut näyttävät olevan tärkeimmät tuottajat (Braun et al., 2020; Grifoni et al., 2020; Peng et al. , 2020; Sekine et ai., 2020). IFN- ja IL2-tuotannon perusteella SARS-CoV-2-spesifiset CD4 plus T-solut voidaan jakaa kolmeen eri populaatioon: yksittäiset IFN- -erittävät solut, kaksinkertaiset IFN- ja IL{23} }erittävät solut ja yksittäiset IL2-erittävät solut (Yang et al., 2006). Tämä luokittelu osoittaa edelleen MTC:n heterogeenisyyden ja osoittaa myös, että muisti-CD4- ja T-solujen erillisillä alapopulaatioilla on erilaiset kyvyt kehittyä lyhyt/efektori-IFN- -erittäviksi ja pitkäikäisiksi/keski-IL2-erittäviksi ja IFN- plus IL{31}}erittävä MTC (Yang et al., 2006).

Kuten odotettiin, tutkimustulokset osoittivat T-soluvasteen kaikille SARS-CoV-2-peptidipoolille. Varsinkin toipilaspotilailla SNMO-peptidipooli sai aikaan voimakkaimmat muisti-T-soluvasteet, jotka todennäköisesti heijastavat altistumista kokonaisille virushiukkaskomponenteille, mukaan lukien piikki (S), nukleoproteiini (N), kalvoproteiini (M) ja ORF (ORF). 3}}a ja ORF-7a (Peng et al., 2020). Vaikka näyttää ilmeiseltä, että SNMO-pooli tuottaa korkeampia vasteita verrattuna S1:een tai S2:een, aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että S1-poolilla on huomattavasti suurempi reaktiivisuus COVID-19-paranneissa yksilöissä kuin terveillä kontrolleilla ja että SFU-kertymä muuttuu S1-pooli on korkeampi kuin SNMO:n (Long et al., 2021). Lisäksi huomattavasti enemmän polyfunktionaalisia T-soluja reagoivat S1-peptidipooliin verrattuna N-peptidipooliin toipilaspotilailla (Sandberg et ai., 2021). Siksi S1-pooliin verrattuna korkeamman SNMO SFU-vasteen löytäminen ei ole helppoa.

Siitä huolimatta odotamme, että rokotettujen koehenkilöiden vaste (mRNA-pohjaisella rokotteella; Pfizer BNT162b2) saadaan vallitsevasti esiin piikkiproteiinipeptidipooliin.

Ottaen huomioon äskettäin kehitetyt anti-SARS-CoV{2}}-rokotteet ja raportoitu vasta-ainetiitterien lasku rokotetuilla henkilöillä (Bates et al., 2021; Sariol et al., 2021) ja toipilaspotilailla (Gaebler et al., 2021) , oli mielenkiintoista seurata MBC- ja MTC-tasoja potilailla, jotka siirtyivät seronegatiiviseen tilaan. Kriittinen kysymys potilailla, joiden verenkierrossa olevien vasta-aineiden määrä on vähentynyt, on, onko muita immunologisen resistenssin elementtejä SARS-CoV{7}}-infektiota vastaan ​​edelleen olemassa.

Tutkimustulokset osoittivat, että tällaisten potilaiden vahvat T- ja B-soluvasteet eivät vain säilyneet, vaan jopa lisääntyneet, samoin kuin edellisessä tutkimuksessa, jossa katoava SARS-CoV-2--spesifinen IgG yhdistettiin kestävään muisti-T-soluun. vaste verrattuna toipilaisiin, jotka pysyivät IgG-positiivisina (Schwarzkopf et al., 2021). Nämä tutkimustulokset ovat linjassa aikaisempien Lähi-idän hengitystieoireyhtymän koronavirus (MERS-CoV) ja vakavan akuutin hengitystieoireyhtymän koronavirus 1 (SARS-CoV-1) infektioiden julkaisujen kanssa, joissa havaittiin muistin T-soluvaste, kun vasta-ainevaste heikkeni (Abayasingam et ai., 2021; Alshukairi et ai., 2016; Channappanavar et ai., 2014; Zhao et ai., 2017).

Samoin Sandberg et ai. (2021) ja Sherina et ai. (2020) (Sandberg et al., 2021; Sherina et al., 2021) osoittivat voimakkaita MBC- ja MTC-vasteita potilailla, joiden vasta-ainetasot laskivat asteittain 8–9 kuukauden kuluttua SARS-CoV-2-tartunnan alkamisesta (Dan et al. ., 2021). Tämä viittaa siihen, että vaikka vasta-ainetiitterit heikkenevät, solumuistikomponentit voisivat kehittää tehokkaan immuunivasteen tulevia infektioita vastaan. Ottaen huomioon SARS-CoV-2-viruksen korkean mutaationopeuden ja mahdollisen immuunipaon sekä sen, että erilaiset piikkimutaatiot heikentävät SARS-CoV-2-antigeenisyyttä (Harvey et al., 2021), on edelleen avoin kysymys, onko alkuperäiset muistisolut reagoivat ristiin SARS-CoV-2-muunnelmien kanssa.

Vaikka olemassa olevat todisteet siitä, että aminohappojen piikkimuutokset vaikuttavat vasta-aineiden neutralointiin (Harvey et al., 2021) ja jotkin muunnelmat voivat osittain välttää SARS-CoV-2-infektion tai BNT162b2-rokotteen aiheuttaman humoraalisen immuniteetin, spesifinen CD4- ja T-soluaktivaatio mutaatiot eivät vaikuta ainakaan B.1.1.7- ja B.1.351-varianteissa (Geers et al., 2021). SARSCoV-2-muunnelmat, jotka ovat analysoineet Tarke et al. vuonna 2021 ei merkittävästi häirinnyt SARS-CoV-2 T-solujen kokonaisreaktiivisuutta; vasteissa havaitut laskut kuitenkin korostavat T-solujen reaktiivisuuden aktiivisen seurannan tärkeyttä SARS-CoV{17}}-evoluution yhteydessä (Tarke et al., 2021).

Yhteenvetona voidaan todeta, että (1) kestäviä immuuni-humoraalisia ja adaptiivisia vasteita havaittiin SARS-CoV-2-potilailla, joilla oli lieviä oireita jopa 7 kuukauden ajan, mikä viittaa humoraalisen ja adaptiivisen immuniteetin pitkäikäisyyteen toipilaisilla yksilöillä. (2) Toipilaisilla potilailla T-soluvasteet S1-, S2_N- ja SNMO-peptidipoolille karakterisoitiin IFN- -- ja IL2--erittävillä T-soluilla ja polyfunktionaalisilla IFN- ja IL{11}}erittävät T-solut. (3) Toipilaisilla potilailla laskevaan piikkien vastaiseen IgG-tiitteriin voi liittyä vahvaa MBC:tä ja IFN{14}}tuottavaa MTC:tä, mikä viittaa mahdolliseen pitkäkestoiseen palautusmuistivasteeseen ja suojautumiseen uudelleeninfektiota vastaan.

julistukset

Rahoitus

Kirjoittajat eivät saaneet erityistä apurahaa julkisen, kaupallisen tai voittoa tavoittelemattoman sektorin rahoittajilta.

Eettinen hyväksyntä

Kirjoittajat vakuuttavat saaneensa tietoisen suostumuksen artikkelissa olevilta potilailta ja että tämä raportti ei sisällä henkilötietoja, jotka voisivat johtaa heidän tunnistamiseensa.

Eturistiriita

Kirjoittajilla ei ole raportoitavaa eturistiriitaa.

Täydentävät materiaalit

Tähän artikkeliin liittyvää lisämateriaalia löytyy verkkoversiosta osoitteesta doi:10.1016/j.ijid.2021.12.309.

For more information:1950477648nn@gmail.com