Tulokset Saksan kroonisen munuaissairauden (GCKD) tutkimustukiyhdistyksen suhteellisesta telomeeripituudesta ja kuolleisuudesta suuressa ryhmässä potilaita, joilla on kohtalainen krooninen munuaissairaus
Mar 12, 2022
Yhteystiedot: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Sähköposti:audrey.hu@wecistanche.com
Federica Fazzini1, Claudia Lamina1, Julia Raschenberger & ym.
Kidney International (2020) 98, 488–497; https://doi.org/10.1016/j.kint.2020.02.034
Tekijänoikeus ª 2020, International Society of Nephrology. Julkaisija Elsevier Inc. Tämä on avoimen pääsyn artikkeli CC BY -lisenssillä
Telomeerien pituuden tiedetään liittyvän käänteisesti ikääntymiseen, ja sitä on ehdotettu ikääntymiseen liittyvien sairauksien merkkiaineeksi. Telomeerien kulumista voi kiihdyttää oksidatiivinen stressi ja tulehdus, joita molempia esiintyy yleisesti kroonista munuaissairautta sairastavilla potilailla. Tässä tutkimme, liittyykö suhteellinen telomeeripituus kuolleisuuteen suuressa ryhmässä potilaita, joilla oli kroonisen munuaissairauden vaiheet G3 ja A1-3 tai G1-2, joilla oli ilmeinen proteinuria (A3) ilmoittautumisen yhteydessä. Suhteellinen telomeeripituus määritettiin perifeerisessä veressä kvantitatiivisella PCR-menetelmällä 4 955 potilaalla GCKD-tutkimuksesta, joka on meneillään oleva prospektiivinen havainnointikohortti. Täydellinen neljän vuoden seuranta oli saatavilla 4 926 potilaalta, joilla kirjasimme 354 kuolemaa. Suhteellinen telomeeripituus oli vahva ja riippumaton kaikista syistä johtuvan kuolleisuuden ennustaja. Jokainen 0,1 suhteellisen telomeerin pituusyksikön pieneneminen liittyi vahvasti 14 prosentin lisääntyneeseen kuolemanriskiin (riskisuhde 1,14 [95 prosentin luottamusväli 1.06-1,22]) mallissa, joka oli korjattu. ikä, sukupuoli, lähtötilanteen eGFR, virtsan albumiini/kreatiniinisuhde, diabetes mellitus, yleinen sydän- ja verisuonisairaus, LDL-kolesteroli, HDL-kolesteroli, tupakointi, painoindeksi, systolinen ja diastolinen verenpaine, C-reaktiivinen proteiini ja seerumin albumiini. Tämä merkitsi 75 prosenttia korkeampaa riskiä niille, jotka ovat alimmassa suhteessa suhteellisen telomeeripituuden korkeimpaan kvartiiliin. Yhteyden taustalla oli pääasiassa 117 sydän- ja verisuoniperäistä kuolemaa (1,20 [1.05-1.35]) sekä 67 infektiokuolemaa (1,27 [1.07-1.50]). Näin ollen löydömme tukevat lyhyemmän telomeerin pituuden yhteyttä kaikista syistä johtuvaan kuolleisuuteen, sydän- ja verisuoniperäiseen kuolleisuuteen ja infektioista johtuvaan kuolemaan potilailla, joilla on kohtalainen krooninen munuaissairaus.
AVAINSANAT:krooninen munuaissairaus; infektiot; kuolleisuus; telomeerien suhteellinen pituus
Krooninen munuaissairaus(CKD) on monimutkainen sairaus, ja sen periytyvyyden on arvioitu olevan 30–70 prosenttia.9–12 Viime vuosina genominlaajuiset assosiaatiotutkimukset ovat tunnistaneet monia geneettisiä lokuksia, jotka liittyvät munuaisten toimintaan ja CKD:hen.13–17
Indeksin yhden nukleotidin polymorfismit tunnistetuissa lokuksissa selittävät kuitenkin vain pienen osan periytyvyydestä, ja lisää geneettisiä vaikuttajia saattaa puuttua. Tähän mennessä vain muutama pieni tutkimus on tutkinut TL:n ja munuaissairauden välistä yhteyttä. Joissakin tutkimuksissa havaittiin, että lyhyt TL korreloi munuaisten vajaatoiminnan kanssa yleisväestössä, 18, 19 sekä sydämen vajaatoimintapotilailla.20 Kuvasimme äskettäin merkittävästi lyhyemmän suhteellisen TL:n (RTL) potilailla, joilla on kohtalaisen vaikea CKD ja joilla on yleinen sydän- ja verisuonisairaus ( CVD),21 sekä yhteys CKD:n kestoon22 ja etenemiseen.23 Hemodialyysillä hoidetuilla potilailla, jotka ovat saavuttaneet munuaisten vajaatoiminnan, kuvataan heikentyneen TL:n terveisiin verrokkeihin verrattuna,24–27 ja alentunut TL liittyy käänteisesti kuolleisuuteen. 28 Vain muutamia tutkimuksia on tehty dialyysihoidosta riippumattomilla munuaispotilailla.21–23,29,30 Tietojemme mukaan tämä tutkimus on ensimmäinen prospektiivinen tutkimus, joka tutkii leukosyyttien RTL:n ja kuolleisuuden syiden välistä yhteyttä suurella alueella. ei-dialyysiriippuvainen CKD-kohortti.
Cistanchen hyöty: parantaa munuaisten toimintaa
TULOKSET
Tutkimuspopulaation perusominaisuudet
RTL kvantifioitiin perifeerisestä verestä kvantitatiivisella polymeraasiketjureaktiomenetelmällä 4955 potilaalla Saksasta.Krooninen munuaissairausopiskella. Täydellinen {0}}vuoden seuranta oli saatavilla 4926 potilaalta. Näiden 4 926 potilaan perusominaisuudet RTL:n kvartiilien mukaan esitetään taulukossa 1. RTL vaihteli vähintään arvosta {{10}},40 maksimiarvoon 2,31 (lisäkuva S1). ), jonka keskiarvo ± SD on 0,95 ±0,19 ja mediaani 0,92 (1. kvartiili ¼ 0,82; 3. kvartiili ¼ 1 .05). RTL korreloi negatiivisesti iän kanssa (r ¼ –{{30}},36, P < 0,001)="" ja="" korreloi="" positiivisesti="" arvioituun="" glomerulussuodatusnopeuteen="" (egfr;="" r="" ¼="" 0,17,="" p="">< 0,001)="" ja="" virtsan="" albumiiniin="" kreatiniinisuhde="" (r="" ¼="" 0,05,="" p="">< 0,001).="" kun="" säädimme="" rtl:ää="" iän="" ja="" sukupuolen="" mukaan,="" emme="" enää="" havainneet="" merkittävää="" korrelaatiota="" egfr:n="" ja="" virtsan="" albumiini-kreatiniinisuhteen="">
Tuleva seuranta ja kuolleisuus
Yhteensä 354 kuolemaa tapahtui 4 vuoden (1483 päivän) mediaaniseurantajakson aikana. Kuolinsyyt olivat sydän- ja verisuonitauti, mukaan lukien sydäninfarkti, sepelvaltimotauti, äkillinen sydänkuolema, kongestiivinen sydämen vajaatoiminta, keuhkoembolia, sydänläppäsairaus ja iskeeminen aivohalvaus (117 potilasta, 33,1 prosenttia), infektiot (67 potilasta, 18,9 prosenttia), ei-iskeemiset aivoverisuonit syitä (9 potilasta, 2,5 prosenttia), perifeeristä verisuonisairautta (7 potilasta, 2,{15}} prosenttia), munuaisten vajaatoimintaa (8 potilasta, 2,3 prosenttia), useita muita syitä (103 potilasta, 29,1 prosenttia) ja tuntemattomia syitä ( 43 potilasta, 12,1 prosenttia).
Kumulatiiviset ilmaantuvuuskäyrät osoittavat, että kaikista syistä johtuvan kuolleisuuden ilmaantuvuus (kuvio 1a) kasvaa lyhyemmällä RTL:llä, ja korkein ilmaantuvuus on alhaisin RTL-kvartiili. Kardiovaskulaarisen (kuva 1b) ja infektiokuolleisuuden (kuvio 1c) kumulatiivisissa esiintyvyysfunktiokäyrissä ero kvartiilien välillä oli vähemmän selvä, mutta kvartiilien järjestys oli sama.
Kuva 1|(a) kaikista syistä johtuvan kuolleisuuden, (b) sydän- ja verisuonisairauksien (CVD) kuolleisuuden ja (c) infektiokuolemien kumulatiivinen ilmaantuvuusfunktio suhteellisen telomeeripituuden (RTL) kvartiileina (Q). Q1 on kvartiili, joka sisältää potilaat, joilla on lyhin RTL.
Tulokset Cox-regressiomalleista, joissa käytettiin erilaisia säätöjä, on esitetty taulukossa 2, ja ne osoittivat merkittävän yhteyden lyhyemmän RTL:n ja kaikista syistä johtuvan kuolleisuuden välillä. Jatkuvasti arvioituna jokainen 0,1 RTL-yksikön lasku liittyi 16 prosentin lisääntyneeseen kuolemanriskiin mallissa, joka oli mukautettu iän ja sukupuolen mukaan (riskisuhde [HR], 1,16; 95 prosentin luottamusväli [CI], 1.08–1,24; P ¼ 1,7 e-05). Yhteys pysyi merkittävänä eGFR:n, virtsan albumiini-kreatiniinisuhteen, diabeteksen ja yleisen sydän- ja verisuonitautien (malli 2: HR, 1,16; 95 prosentin luottamusväli, 1,08–1,24) sekä muiden sydän- ja verisuonisairauksien riskitekijöiden (matalien tiheysten) jälkeen. lipoproteiinikolesteroli, korkeatiheyksinen lipoproteiinikolesteroli, tupakointi, painoindeksi, systolinen verenpaine, diastolinen verenpaine, C-reaktiivinen proteiini ja seerumin albumiini lähtötilanteessa (malli 3: HR, 1,14; 95 prosentin luottamusväli, 1,06–1,22; P ¼ 3,5 e-04). Epälineaariset P-spline-analyysit on esitetty kuviossa 2, ja ne paljastivat RTL:n lähes lineaarisen yhteyden kaikista syistä johtuvaan kuolleisuuteen. Potilailla, joilla oli lyhin RTL (1. kvartiili), oli 75 prosenttia suurempi riski kaikista syistä kuolleisuuteen verrattuna kvartiiliin, jolla oli pisin RTL (lisätaulukko S1, täysin mukautettu malli: HR, 1,75; 95 prosentin luottamusväli, 1,22–2,50 P ¼ 0,0024).
Seuraavaksi analysoimme, mikä ohjaa RTL:n yhteyttä kaikista aiheuttajista kuolleisuuteen (taulukko 2). Arvioimme 2 yleisintä erityistä kuolinsyytä ja havaitsimme, että jokainen 0,1 RTL-yksikön lasku liittyi 20 prosentin kohonneeseen sydän- ja verisuonitautikuoleman riskiin täysin mukautetussa mallissa (HR, 1,2). 0; 95 prosenttia CI, 1.05–1,35; P ¼ 0,0052). Vähentynyt RTL liittyi myös merkittävästi käänteisesti infektioiden aiheuttamaan kuolemaan. Jokaiseen 0,1 yksikön RTL:n laskuun liittyi 1,{18}} suurempi riski kuolla infektioista (HR, 1,27; 95 prosentin luottamusväli, 1,07–1,50; P ¼ 0,0051). Tarkasteltaessa lisätaulukon S1 eri kvartiileja koskevia arvioita infektiokuolemien osalta paljastui, että kunkin kvartiilin 1, 2 ja 3 arviot olivat samalla tavalla kohonneet verrattuna kvartiiliin 4. Analyysi muiden kuolinsyiden kanssa sekä tuntemattomat kuolinsyyt olivat ilmeisesti liian heterogeenisia eikä paljastanut mitään yhteyttä RTL:ään (tietoja ei esitetty).
Skaalattujen Schoenfeld-jäännösten kaavio ja suhteellisten vaaraoletusten testi eivät osoittaneet RTL:n ajassa vaihtelevia vaikutuksia mihinkään tutkittuihin tuloksiin. Sekä sydän- ja verisuoniperäisten että infektiokuolemien alajakauman HR-arvot, jotka on raportoitu lisätaulukossa S2, ovat vain hieman heikentyneet syykohtaisiin HR-arvoihin verrattuna.
We also evaluated whether the effect of RTL on the 3 different outcomes differed between men and women and for patients with and without diabetes mellitus, but we did not detect a significant interaction for these variables, or for age (all P values of interaction >0.1 täysin säädetyissä malleissa). Koska havaitsimme äskettäin U-muotoisen yhteyden CKD:n ja RTL:n keston välillä22, teimme herkkyysanalyysin, joka sopeutti lisäksi CKD:n kestoa lähtötilanteessa, joka määriteltiin alle 6 kuukauden, 6 kuukauden ja 5 vuoden välillä ja yli 5 vuotta. Tämä lisäsäätö johti vain marginaalisiin muutoksiin kaikkien kolmen päätepisteen kohdalla (lisätaulukko S3).
Cistanchen hyöty: parantaa munuaisten toimintaa
KESKUSTELU
Tämän tutkimuksen tulokset osoittivat, että RTL:llä oli merkittävä yhteys kaikkiin syihin liittyvään kuolleisuuteen dialyysihoidosta riippumattomassa CKD-kohortissa. Lyhyempi RTL liittyi korkeampaan kuolleisuusriskiin munuaisten toiminnasta ja perinteisistä sydän- ja verisuonitautien riskitekijöistä riippumatta. Tämä yhteys johtui sydän- ja verisuonitautien aiheuttamasta kuolemasta sekä infektioista johtuvasta kuolemasta.
Yhdistäminen kaikista syistä johtuvaan kuolleisuuteen
Aikaisemmat opinnot,5,6,31–35muutamia poikkeuksia lukuun ottamatta,36,37 ovat osoittaneet negatiivisen yhteyden RTL:n ja yleisen väestön yleiskuolleisuuden välillä. Toistaiseksi suurimman tutkimuksen (n ¼ 64 637) suorittivat Rode et al., jossa kuolleisuuden mukautettu HR oli 1,40 lyhimmän desiilin osalta verrattuna pisimmän RTL:n omaavaan desiiliin.35Näiden tulosten mukaisesti tutkimuksemme osoitti jokaisella 0.1 RTL-yksikön laskulla 14 prosenttia korkeamman riskin kaikista syistä kuolleisuuteen, mikä tarkoittaa 75 prosenttia korkeampaa riskiä heikoimmassa tilassa oleville verrattuna korkeimpaan. RTL:n kvartiili. Tietojemme mukaan vain Carrero et al.28ovat tutkineet RTL:n ja kuolleisuusriskin välistä suhdetta CKD-potilailla. He tutkivat 175 hemodialyysillä hoidettua loppuvaiheen munuaissairauspotilasta, joista 70 kuoli keskimäärin 31 kuukauden tarkkailun aikana. Kirjoittajat havaitsivat, että TL ennusti itsenäisesti potilaan eloonjäämisen iän, sukupuolen ja tulehduksen lisäsäätöjen jälkeen. Nykyinen tutkimus laajentaa nämä havainnot paljon laajempaan CKD-potilaiden ryhmään, jotka eivät tarvitse dialyysihoitoa.
Kuva 2|Muokatut epälineaariset splainit (ja 95 prosentin luottamusalueet) suhteellisen telomeerin pituuden (RTL) ja riskisuhteen (HR) väliselle yhteydelle (a) kaikista syistä johtuvan kuolleisuuden, (b) sydän- ja verisuoniperäisen kuoleman ja (c) infektiokuoleman välillä . HR on annettu log-asteikkona veroissa. Harmausviiva: säätömalli 1 (säädetty iän ja sukupuolen mukaan). Blueline: säätömalli 3 (muokattu iän, sukupuolen mukaan, arvioitu [jatkuu]
Yhteys sydän- ja verisuonitautikuolleisuuteen
Mikään tutkimuksia ei ole toistaiseksi tutkinut RTL:n yhteyttä sydän- ja verisuonitautipotilaiden sydän- ja verisuonitautikuolleisuuteen, vaikka tämä on näiden potilaiden tärkein kuolinsyy. Riippuen tutkitusta etnisestä alkuperästä ja tietojen säätömalleista, jotkin, mutta eivät kaikki, yleisväestössä tehdyt tutkimukset raportoivat yhteyden alhaisten RTL- ja CVD-tulosten välillä.33,38–41Vahva tuki syy-yhteydelle tuli Mendelin satunnaistustutkimuksesta, jossa lyhyempään RTL:ään liittyvien geneettisten varianttien havaittiin liittyvän iskeemiseen sydänsairauteen.40Tässä tutkimuksessa havaitsimme RTL:n merkittävän yhteyden sydän- ja verisuoniperäisiin kuolemiin, jolloin riski oli 20 prosenttia suurempi jokaisella RTL:n laskulla 0,1 yksiköllä tai 75 prosenttia suurempi riski niillä. potilaat kvartiilissa, jolla on lyhin TL, verrattuna kvartiiliin, jolla on pisin TL. Tämä havainto on sopusoinnussa aikaisemman raporttimme kanssa, joka koski yhteyttä yleisiin kardiovaskulaarisiin tapahtumiin tässä potilaspopulaatiossa: jokainen RTL:n lasku 0,1 yksiköllä liittyi merkitsevästi 6 prosenttia korkeampaan todennäköisyyteen vallitsevaan sydän- ja verisuonisairauksiin mallissa, joka mukautui ikään, sukupuoleen ja nykyiseen. tupakointi, verenpainetauti, diabeteksen tila, matalatiheyksinen lipoproteiinikolesteroli, korkea tiheys
lipoproteiinikolesteroli, C-reaktiivinen proteiini, eGFR ja painoindeksi.21Näiden potilaiden tuleva seuranta tässä tutkimuksessa paljasti, että erityisesti RTL:n alin kvartiili liittyi huomattavasti lisääntyneeseen riskiin, kun taas muut 3 kvartiilia osoittivat hyvin samankaltaisia arvioita (kuvio 1b).
Yhteys infektioiden aiheuttamaan kuolemaan
Vaikka kokeellinen näyttö tukee solujen vanhenemisen ja lyhyen TL:n roolia heikentyneessä immuunivasteessa, epidemiologiset tutkimukset ovat harvassa, erityisesti CKD-potilailla. Helby et ai. suoritti suurimman (n ¼ 75 309) prospektiivisen väestöpohjaisen tutkimuksen, jossa tutkittiin RTL:ää ja tartuntatautien vuoksi sairaalahoitoon joutumisen riskiä sekä infektioihin liittyvän kuoleman riskiä. Seitsemän vuoden seurannan aikana he havaitsivat korkeamman riskin saada infektioita lyhimmän kvartiilin alueella verrattuna pisimmän RTL:n kvartiiliin.42 Aiemmat tutkimukset pienemmillä otoskooilla raportoivat ristiriitaisista tuloksista.32,43,44Löydökseemme CKD-potilaista kuvaavat ensimmäistä kertaa yhteyden lyhyen RTL:n ja suuremman infektioiden aiheuttaman kuolemanriskin välillä tässä korkean riskin väestössä.
Cistanchen hyöty: parantaa munuaisten toimintaa
Mahdollinen mekanismi
RTL:n ja kuolleisuuden välisen suhteen taustalla oleva biologinen mekanismi on edelleen epäselvä. Tutkimuksemme tunnistama yhteys ei selvennä, onko RTL:n lyheneminen syy-yhteyttä sydän- ja verisuonisairauksiin ja infektioihin. Kuitenkin genominlaajuinen assosiaatiotutkimus, jota seurasi geneettinen riskipisteanalyysi, jossa yhdistettiin lyijyvariantteja 7 geneettisessä lokuksessa, osoitti lyhyempään RTL:ään liittyvien alleelien yhteyden lisääntyneeseen sepelvaltimotaudin riskiin. Tämä havainto tarjoaa mahdollista tukea RTL:n mahdolliselle kausaalille roolille CVD:ssä.45,46Lisäksi telomeerien kulumisen aiheuttama solujen vanheneminen voi laukaista sekä ateroskleroosin että arterioskleroosin. Vanhenevien solujen kerääntyminen suoneen edistää ateroskleroottisen plakin muodostumista ja väliaineen kalkkeutumista, mikä johtaa lisääntyneeseen valtimon jäykkyyteen ureemisen valtimotaudin hallitsevana piirteenä.47Suurin osa tutkimuksista on mitannut RTL:ää perifeeristen leukosyyttien DNA:sta. Leukosyyttien ja aortan seinämän kudoksen TL:n välillä on kuitenkin osoitettu läheinen korrelaatio.48Siksi solujen vanheneminen voi vaikuttaa endoteelisoluihin, mikä johtaa verisuonen seinämän toimintahäiriöön ja edistää immuunisolujen tarttumista, mikä on ensisijainen tapahtuma ateroskleroosissa. Lisäksi lyhyet telomeerit aktivoivat p53:a ja autofagiaa sydämen progenitorisoluissa, mikä horjuttaa lepotilan ja proliferaation tasapainoa kohti erilaistumista ja vanhenemista, mikä johtaa sydämen progenitorisolujen uupumiseen.49Telomeerien toimintahäiriön on osoitettu aiheuttavan mitokondrioiden biogeneesin ja toiminnan pääsäätelijöiden syvällistä p53-riippuvaista tukahduttamista, mikä johtaa bioenergeettiseen kompromissiin heikentyneen oksidatiivisen fosforylaation ja adenosiinitrifosfaatin tuotannon vuoksi.50,51
RTL:n ja infektioiden välillä on myös useita yhteyksiä. Telomeerien katoamista on havaittu T-solujen erilaistumisen aikana,52kroonisissa virusinfektioissa,53ja iän myötä.54Lisäksi lyhyen leukosyytti-TL:n on raportoitu olevan riskitekijä useissa immuuniperäisissä sairauksissa55ja diabetes.56Leukosyyttien lyhyempi TL aiheuttaa solujen vanhenemista, jota seuraa immuunisolujen lisääntymiskyvyn väheneminen. TL voi myös olla osallisena immuunitoiminnan ikääntymisen heikkenemisessä, joka johtuu riittämättömästä vasteesta rokotteisiin ja akuutteihin infektioihin.57–59TL:n mahdollista roolia infektioissa tukee myös äskettäinen genominlaajuinen assosiaatiotutkimus kiinalaisessa populaatiossa. Dorjee ja kollegat havaitsivat yhteyden TL:ää vähentävän alleelin ja hengitystieinfektiosta johtuvan kuoleman välillä.60RTL-hankautuminen voi johtua voimakkaasti kohonneesta oksidatiivisesta stressistä, joka on yleinen sairaus CKD:ssä.61 Useat in vitro ja in vivo -tutkimukset osoittivat, että oksidatiivinen stressi nopeuttaa telomeerien kulumista.62,63Itse asiassa telomeerit ovat korkealla guaniinipitoisuudellaan erittäin herkkiä oksidatiivisille vaurioille,64ja oksidatiivisen stressin aiheuttamat yksijuosteiset DNA-katkot voivat olla tärkeä tekijä telomeerien lyhentymisessä DNA:n replikaation aikana.65
Cistanchen hyöty: parantaa munuaisten toimintaa
Vahvuudet ja rajoitukset
Tämän tutkimuksen vahvuuksia ovat hyvin määritellyn populaation suuri otoskoko, jonka mediaaniseuranta on 4 vuotta, lähes ilman seurantaa, tutkimuspopulaation homogeenisuus ja keskitetty TL- ja tulosmittausten arviointi. Erityisesti RTL:n mittaus on äärimmäisen tärkeää, koska laboratorioiden välinen standardointi ei ole helppoa ja siksi prosessi tulisi suorittaa samassa laboratoriossa täsmälleen samoissa olosuhteissa protokollan, vertailugeenin, instrumentin, henkilöstön,66 ja DNA:n suhteen. uuttomenettely.67
Tässä tutkimuksessa on joitain rajoituksia. Ensin RTL mitattiin perifeerisistä leukosyyteistä. Tiedetään, että etenemisnopeus vanhenemiseen vaihtelee lymfosyyttialaryhmien välillä. 59Valitettavasti verisolujen koostumuksesta ei ollut saatavilla tietoja saksassaKrooninen munuaissairaustutkimusta, joten tätä näkökohtaa ei ollut mahdollista tutkia. RTL:n tunteminen eri munuaissolutyypeistä olisi kiinnostavaa, mutta sitä ei ole mahdollista saada suuressa epidemiologisessa tutkimuksessa, koska se vaatisi kudosmateriaalia biopsioista. Toinen rajoitus sisältää tutkimuksen havainnointisuunnitelman, joka ei salli syy-yhteyden tai biologisen mekanismin selventämistä. Kolmanneksi tutkimukseen valittiin pääasiassa CKD-potilaita vaiheissa G3 tai A3, eivätkä löydökset välttämättä ole yleistettävissä CKD:n muihin vaiheisiin. Neljänneksi yhteys tiettyihin kuolinsyihin saattoi olla tilastollisesti rajoitettu, mutta se oli silti olemassa kahdessa erityisessä kuolemansyyssä. Lopuksi, vaikka analyysimme mukautettiin perinteisten kardiovaskulaaristen riskitekijöiden sekä munuaisten toimintaparametrien perusteella, emme voi sulkea pois mahdollisuutta, että tuntematon tai mittaamaton jäännöshäiriö
muuttujia. Oli kuitenkin erittäin mielenkiintoista nähdä, että iän ja sukupuolen mukaan mukautetut arviot RTL:stä eri tuloksille olivat erittäin vakaita, kun muita muuttujia tarkennettiin edelleen, mikä osoitti, että RTL on suhteellisen riippumaton muista muuttujista, kun tietoja korjataan iän ja sukupuolen mukaan.
Johtopäätökset
Lyhyt suhteellinen TL määrällisesti perifeerisen veren leukosyyteistä liittyi riippumattomasti kaikista syistä johtuvaan kuolleisuuteen 4 vuoden seurannan aikana potilailla, joilla oli kohtalaisen vaikea CKD. Tämä yhteys johtui sydän- ja verisuonitautien aiheuttamasta kuolemasta sekä infektioista johtuvasta kuolemasta.
Cistanchen hyöty: parantaa munuaisten toimintaa
MENETELMÄT
Tutkimuspopulaatio
SaksalainenKrooninen munuaissairaus study is an ongoing prospective multicenter observational cohort. A detailed description of the study has been published previously.68 Briefly, 5217 patients under regular care by nephrologists were enrolled. Inclusion criteria were moderately reduced kidney function defined as eGFR of 30–60 ml/min per 1.73 m2 (stage G3, A1–A3) or an eGFR >60 ml/min per 1,73 m2, jos esiintyy selvä proteinuria (vaihe G1-G2, A3). Poissulkemiskriteereinä olivat muu kuin valkoihoinen etnisyys, kiinteä elin tai luuydinsiirto, aktiivinen pahanlaatuisuus 24 kuukauden sisällä ennen seulontaa, New York Heart Associationin vaiheen IV sydämen vajaatoiminta ja laillinen läsnäolo tai kyvyttömyys antaa suostumus. Esitetyt laboratorioparametrit mitattiin kerätyistä bionäytteistä keskuslaboratoriossa aiemmin kuvatulla tavalla.68 Koulutettu henkilöstö hankki tietoa sosiodemografisista tekijöistä, lääketieteellisistä ja suvun historiasta, lääkkeistä ja terveyteen liittyvästä elämänlaadusta standardoiduilla kyselylomakkeilla. Vallitseva sydän- ja verisuonisairaus määriteltiin lähtötilanteessa ei-kuolemaan johtaneeksi sydäninfarktiksi, sepelvaltimon ohitusleikkaukseksi, perkutaaniseksi transluminaaliseksi sepelvaltimoplastiikaksi, aivohalvaukseksi ja kaulavaltimoiden interventioksi (kaulavaltimon endarterektomia ja/tai kaulavaltimon palloangioplastia tai stentin implantointi).
Kaikki osallistujat antoivat kirjallisen suostumuksen, ja kaikkien osallistuvien laitosten eettiset komiteat hyväksyivät tutkimuksen ja rekisteröitiin kansalliseen kliinisten tutkimusten rekisteriin (DRKS 00003971). Kaikki menetelmät toteutettiin hyväksyttyjen ohjeiden ja Helsingin julistuksen mukaisesti. Tietoja kerätään ja hallitaan käyttämällä Askimediä (https://www.askimed.com) pilvipohjaisena verkkoalustana tapausraporttilomakkeiden ja laboratoriotietojen keräämiseen ja hallintaan.
Kliiniset päätetapahtumat tulevan seurannan aikana
Kuten äskettäin kuvattiin, koulutettu henkilökunta seuraa vuosittain 69 potilasta, jotka vuorottelevat kasvokkain puhelinkäyntejä. Näiden käyntien aikana tiedot sairaalahoidoista, lopputapahtumista ja sairaushistoriasta päivitetään osana jäsenneltyä haastattelua. Mahdolliset sairaalan kotiutusraportit kerätään hoitavilta lääkäreiltä ja/tai sairaaloista. Koulutettu ja valvottu päätepistekomitea, joka koostuu kolmesta riippumattomasta lääkäristä ennalta määritellyn päätepisteluettelon mukaisesti, ottaa näistä raporteista jatkuvasti päätepisteitä. Kuolinsyytiedot otetaan näistä raporteista sekä maistraatista kerätyistä kuolintodistuksista aina, kun tutkimushenkilöstölle ilmoitetaan tutkimukseen osallistuneen kuolemasta.
Nykyinen analyysi sisältää kaikki päätepisteet, jotka tapahtuivat 4-vuoden seurantaan asti. Jos potilas jäi väliin 4-vuoden seurantakäynnistä, sisällytimme kaikki päätepisteet 4,5 vuoden kuluttua vastaavasta lähtötilanteesta. Siksi sensurointiaika oli joko 4-vuoden seurantapäivä tai 4,5 vuotta lähtötilanteen jälkeen. Ensisijainen tulos oli kaikista syistä johtuva kuolleisuus. Sen arvioimiseksi, voidaanko tunnistettujen assosiaatioiden katsoa johtuvan tietystä kuolinsyystä, sydän- ja verisuonitaudeista ja tartuntataudeista johtuvaa kuolemaa pidettiin toissijaisina seurauksina. CVD-kuolemien ryhmään kuuluivat sydäninfarkti, sepelvaltimotauti, äkillinen sydänkuolema, kongestiivinen sydämen vajaatoiminta, keuhkoembolia, sydänläppäsairaus ja iskeeminen aivohalvaus. Myös muita kuolinsyitä kirjattiin, mutta nämä alaryhmät eivät olleet tarpeeksi suuria syykohtaisten lisäanalyysien tekemiseen.
RTL:n mittaus
Genominen DNA uutettiin kokoverestä keskuslaboratoriossa Chemagic Magnetic Separation Module I -moduulilla (PerkinElmer chromagen Technologie GmbH, Baesweiler, Saksa). Nykyinen analyysi perustui 4926 potilaaseen, joilta oli saatavilla RTL-mittauksia lähtötason verinäytteistä ja tietoja kuolleisuudesta. RTL mitattiin neljänä rinnakkaisena käyttämällä kvantitatiivista polymeraasiketjureaktioon perustuvaa määritystä, jonka on kehittänyt Cawthon70 ja modifioitu aiemmin kuvatulla tavalla.71 DNA-näytteitä ajettiin 15- ml:n reaktioissa, jotka sisälsivät 1x Quantifast TM SYBR Green PCR -perusseosta. (Qiagen, Hilden, Saksa), 10 ng DNA:ta, 1 mM telomeerialuketta tai 250 nm taloudenhoitogeenin 36B4 aluketta. Määritimme telomeerin toistokopioluvun (T) suhteellisen suhteen yhden kopion geenin kopiomäärään (36B4-geeni, joka koodaa ribosomaalista fosfoproteiinia PO, sijaitsee kromosomissa 12; S). T/S-suhteet ovat verrannollisia yksittäisiin RTL-arvoihin. Tämän suuren suorituskyvyn menetelmän automatisointi johti erittäin hyviin laadunvalvontatoimenpiteisiin, joissa T/S-suhteiden välinen määritysten välinen vaihtelukerroin oli alhainen. Kaupallisesti saatavilla olevaa DNA:ta, joka sisältyi kaikkiin kvantitatiivisiin polymeraasiketjureaktiolevyihin, käytettiin määrityksen suorituskyvyn tarkistamiseen koko tutkimuksen ajan. Tämän 112 riippumattomassa kokeessa analysoidun näytteen T/S-suhteiden välinen vaihtelukerroin oli 9,6 prosenttia ennen normalisointia ja laski 4,0 prosenttiin normalisoinnin jälkeen (lisäkuva S2).
Tilastollinen analyysi
Vertailimme osallistujien perusominaisuuksia (taulukko 1) käyttämällä Kruskal-Wallis-testiä jatkuville muuttujille ja khin-neliötestejä kategorisille muuttujille. Kumulatiivisia ilmaantuvuusfunktiokäyriä käytettiin kilpailevan riskin huomioon ottavien eri kuolinsyiden kumulatiivisen esiintyvyyden arvioimiseen.72 Coxin verrannollisten vaarojen regressiomalleja suoritettiin RTL:n assosiaatioiden arvioimiseksi kolmen tuloksen kanssa: (i) kaikista syistä johtuva kuolleisuus, ( ii) sydän- ja verisuonitautien aiheuttama kuolema ja (iii) infektioiden aiheuttama kuolema. Molemmissa syykohtaisissa päätepisteissä (ii ja iii) potilaat sensuroitiin, jos kuolema johtui jostain muusta syystä. Lisäksi yhteyksiä näihin syyspesifisiin päätepisteisiin tutkittiin käyttämällä kilpailevien riskien eloonjäämisregressiota, jossa kaikki muista syistä johtuvat kuolemat pidettiin kilpailevina tapahtumina. Siksi sydän- ja verisuonitautien tai infektioiden aiheuttamien kuolemantapausten osalta ilmoitetaan sekä syykohtaiset HR-arvot että alaosaston HR:t. Coxin suhteelliset vaaramallit asennettiin käyttämällä 3 eri säätötasoa: malli 1 säädetty iän ja sukupuolen mukaan; malli 2 on lisäksi säädetty lähtötilanteen eGFR:n, virtsan albumiini-kreatiniinisuhteen, yleisen sydän- ja verisuonitautien sekä diabeteksen perusteella; mallia 3 mukautettiin edelleen perinteisille CVD-riskitekijöille, joita ovat matalatiheyksinen lipoproteiinikolesteroli, korkeatiheyksinen lipoproteiinikolesteroli, painoindeksi, tupakointi, systolinen ja diastolinen verenpaine, C-reaktiivinen proteiini ja albumiini. Eri malleissa oikaistujen muuttujien valinta perustui taulukossa 1 esitettyjen RTL:n kvartiilien kliinisten ominaisuuksien eroihin. Regressiomalleissa RTL:ää analysoitiin jatkuvasti ja kategorisena ennustajana (RTL:n kvartiileina). Koska alkuperäiset tulokset osoittivat suuremman riskin, erityisesti RTL:n alhaisilla arvoilla, (syykohtainen) HR raportoidaan myös kvartiileille 1, 2 ja 3 verrattuna kvartiiliin 4 vertailuna (lisätaulukko S1). Myöhempi analyysi perustui P-spliinin visuaaliseen tarkasteluun RTL:n ja kuolleisuusriskin välisen suhteen muodon johtamiseksi. Käytimme Spearmanin rankkorrelaatiokerrointa arvioidaksemme tutkimusmuuttujien välistä yhteyttä. Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin käyttämällä R 3.3.2:ta (https://www.r-project.org); P-arvot<0.05 were="" considered="" statistically="">
VIITTEET
1. Moyzis RK, Buckingham JM, Cram LS, et ai. Erittäin konservoitunut toistuva DNA-sekvenssi (TTAGGG)(n), joka on läsnä ihmisen kromosomien telomeereissä. Proc Natl Acad Sci US A. 1988;85:6622-6626.
2. Baird DM. Telomeeridynamiikka ihmissoluissa. Biochimie. 2008;90:116–121.
3. von Zglinicki T, Martin-Ruiz CM. Telomeerit ikääntymisen ja ikääntymiseen liittyvien sairauksien biomarkkereina. Curr Mol Med. 2005; 5:197–203.
4. Forero DA, González-Giraldo Y, López-Quintero C, et ai. Telomeerien pituus Parkinsonin taudissa: meta-analyysi. Exp Gerontol. 2016; 75:53–55.
5. Mons U, Müezzinler A, Schöttker B, et ai. Leukosyyttitelomeerien pituus ja kaikki syyt, sydän- ja verisuonitaudit ja syöpäkuolleisuus: tulokset yksittäisten osallistujien tietojen meta-analyysistä kahdesta suuresta tulevasta kohorttitutkimuksesta. Olen J Epidemiol. 2017; 185:1317–1326.
6. Wang Q, Zhan Y, Pedersen NL, et ai. Telomeerien pituus ja kaikista syistä johtuva kuolleisuus: meta-analyysi. Aging Res Rev. 2018;48:11–20.
7. Wills LP, Schnellmann RG. Telomeerit ja telomeraasi munuaisten terveydessä. J Am Soc Nephrol. 2011; 22:39–41.
8. Kordinas V, Tsirpanlis G, Nicolaou C, et ai. Onko munuaisten vajaatoiminnassa yhteyttä tulehduksen, telomeraasiaktiivisuuden ja telomeraasin käänteiskopioijaentsyymin transkription tilan välillä? Cell Mol Biol Lett. 2015; 20:222–236.
9. Cañadas-Garre M, Anderson K, Cappa R, et ai. Geneettinen alttius krooniselle munuaissairaudelle – muutamia palasia perinnöllisyyspalapeliin. Front Genet. 2019; 10:453.
10. Satko SG, Freedman BI. Munuaissairauden ja siihen liittyvien fenotyyppien perheklusterit. Med Clin North Am. 2005;89:447–456.
11. Regele F, Jelencsics K, Shiffman D, et ai. Genominlaajuiset tutkimukset munuaissairauden riskitekijöiden tunnistamiseksi keskittyen diabetespotilaisiin. Nephrol Dial -siirto. 2015;30:iv26–iv34.
12. Wuttke M, Köttgen A. Näkemyksiä munuaissairauksista genominlaajuisista assosiaatiotutkimuksista. Nat Rev Nephrol. 2016; 12:549–562.
13. Böger CA, Gorski M, Li M, et ai. GWAS:n tunnistamien eGFR:ään liittyvien lokusten assosiaatio tapauskohtaiseen CKD:hen ja ESRD:hen. PLoS Genet. 2011;7: e1002292.
14. Chambers JC, Zhang W, Lord GM, et ai. Munuaisten toimintaan ja krooniseen munuaissairauteen vaikuttavat geneettiset lokukset. Nat Genet. 2010;42:373–375.
15. Köttgen A, Pattaro C, Böger CA, et ai. Uusia lokuksia, jotka liittyvät munuaisten toimintaan ja krooniseen munuaissairauteen. Nat Genet. 2010;42:376–384.
16. Pattaro C, Teumer A, Gorski M, et ai. Geneettiset assosiaatiot 53 lokuksessa korostavat solutyyppejä ja biologisia reittejä, jotka ovat tärkeitä munuaisten toiminnan kannalta. Nat Commun. 2016; 7:10023.
17. Wuttke M, Li Y, Li M, et ai. Luettelo munuaisten toimintaan liittyvistä geneettisistä lokuksista miljoonan yksilön analyyseistä. Nat Genet. 2019; 51:957–972.
18. Bansal N, Whooley MA, Regan M, et ai. Munuaisten toiminnan ja telomeerin pituuden välinen yhteys: sydämen ja sielun tutkimus. Olen J Nephrol. 2012; 36:405–411.
19. Eguchi K, Honig LS, Lee JH, et ai. Lyhyt telomeeripituus liittyy munuaisten vajaatoimintaan japanilaisilla koehenkilöillä, joilla on kardiovaskulaarinen riski. PLoS One. 2017;12:e0176138.
20. Wong LSM, Van Der Harst P, De Boer RA, et ai. Munuaisten vajaatoiminta liittyy lyhyempään telomeeripituuteen sydämen vajaatoiminnassa. Clin Res Cardiol. 2009;98:629–634.
21. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et ai. Suhteellisen telomeeripituuden yhteys sydän- ja verisuonitauteihin suuressa kroonisen munuaissairauden kohortissa: GCKD-tutkimus. Ateroskleroosi. 2015; 242:529–534.
22. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et ai. Onko telomeereillä suurempi plastisuus kuin luullaan? Tulokset saksalaisen kroonisen munuaissairauden (GCKD) tutkimuksesta korkean riskin väestönä. Exp Gerontol. 2015;72: 162–166.
23. Raschenberger J, Kollerits B, Ritchie J, et ai. Suhteellisen telomeeripituuden yhteys kroonisen munuaissairauden etenemiseen kahdessa kohortissa: tupakoinnin ja diabeteksen vaikutuksen muutos. Sci Rep. 2015;5:1–8.
24. Betjes MGH, Langerak AW, Van Der Spek A, et ai. Verenkierron T-solujen ennenaikainen ikääntyminen potilailla, joilla on loppuvaiheen munuaissairaus. Kidney Int. 2011;80:208–217.
25. Hirashio S, Nakashima A, Doi S, et ai. Telomeerinen G-hännän pituus ja sairaalahoito sydän- ja verisuonitapahtumien vuoksi hemodialyysipotilailla. Clin J Am Soc Nephrol. 2014; 9:2117–2122.
26. Ramírez R, Carracedo J, Soriano S, et ai. Stressin aiheuttama ennenaikainen vanheneminen pitkäaikaista hemodialyysihoitoa saavien potilaiden mononukleaarisissa soluissa. Olen J Kidney Dis. 2005;45:353–359.
27. Tsirpanlis G, Chatzipanagiotou S, Boufidou F, et ai. Telomeraasiaktiivisuus on heikentynyt hemodialyysipotilaiden perifeerisen veren mononukleaarisissa soluissa. Olen J Nephrol. 2006;26:91–96.
28. Carrero JJ, Stenvinkel P, Fellström B, et ai. Telomeerien kuluminen liittyy tulehdukseen, alhaisiin fetuiini-A-tasoihin ja korkeaan kuolleisuuteen yleisillä hemodialyysipotilailla. J Intern Med. 2008; 263:302–312.
29. Mazidi M, Rezaie P, Covic A, et ai. Telomeerien kuluminen, munuaisten toiminta ja yleinen krooninen munuaissairaus Yhdysvalloissa. Oncotarget. 2017;8:80175–80181.
30. Kidir V, Aynali A, Altuntas A, et ai. Telomeraasiaktiivisuus potilailla, joilla on vaiheen 2–5D krooninen munuaissairaus. Nefrologia. 2017; 37:592–597.
31. Batsis JA, Mackenzie TA, Vasquez E, et ai. Lihavuuden, telomeerien pituuden ja kuolleisuuden yhteys: NHANESin tiedot 1999-2002. Int J Obes. 2018;42:198–204.
32. Fitzpatrick AL, Kronmal RA, Kimura M, et ai. Leukosyyttien telomeerien pituus ja kuolleisuus sydän- ja verisuoniterveystutkimuksessa. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2011;66A:421–429.
33. Needham BL, Rehkopf D. Leukosyyttitelomeerien pituus ja kuolleisuus National Health and Nutrition Examination Survey -tutkimuksessa, 1999–2002. Epidemiologia. 2015;26:528–535.
34. Pusceddu I, Kleber M, Delgado G, et ai. Telomeerien pituus ja kuolleisuus Ludwigshafenin riski- ja sydän- ja verisuoniterveystutkimuksessa. PLoS One. 2018;13:e0198373.
35. Rode L, Nordestgaard BG, Bojesen SE. Perifeerisen veren leukosyyttien telomeerien pituus ja kuolleisuus 64 637 yksilön keskuudessa yleisestä väestöstä. J Natl Cancer Inst. 2015;107:djv074.
36. Loprinzi PD, Loenneke JP. Leukosyyttien telomeerien pituus ja kuolleisuus yhdysvaltalaisten aikuisten keskuudessa: vaikutuksen muutos fyysisen aktiivisuuden käyttäytymisellä. J Sports Sci. 2018; 36:213–219.
37. Gao X, Zhang Y, Mons U, et ai. Leukosyyttien telomeerien pituus ja epigeneettinen kuolleisuusriskipisteet: yhteys iäkkäiden aikuisten kaikista syistä johtuvaan kuolleisuuteen. Epigenetiikka. 2018; 13:846–857.
38. D'Mello MJJ, Ross SA, Briel M, et ai. Lyhennetyn leukosyyttitelomeerin pituuden ja kardiometabolisten tulosten välinen yhteys: systemaattinen katsaus ja meta-analyysi. Circ Cardiovasc Genet. 2015; 8:82–90.
39. Haycock PC, Heydon EE, Kaptoge S, et ai. Leukosyyttitelomeerien pituus ja sydän- ja verisuonitautien riski: systemaattinen katsaus ja meta-analyysi. BMJ. 2014;349:g4227.
40. Madrid AS, Rode L, Nordestgaard BG, et ai. Lyhyt telomeeripituus ja
iskeeminen sydänsairaus: havainnointi- ja geneettiset tutkimukset 290 022 yksilöllä. Clin Chem. 2016; 62:1140–1149.
41. Mwasongwe S, Gao Y, Griswold M, et ai. Leukosyyttien telomeerien pituus ja sydän- ja verisuonisairaudet afroamerikkalaisilla: Jacksonin sydäntutkimus. Ateroskleroosi. 2017; 266:41–47.
42. Helby J, Nordestgaard BG, Benfield T, et ai. Lyhyempi leukosyyttien telomeeripituus liittyy suurempaan infektioriskiin: prospektiivinen tutkimus, johon osallistui 75 309 henkilöä yleisestä väestöstä. Haematologica.2017;102:1457–1465.
43. Cawthon RM, Smith KR, O'Brien E, et ai. Veren telomeerien pituuden ja 60-vuotiaiden tai sitä vanhempien kuolleisuuden välinen yhteys. Lansetti. 2003; 361:393–395.
44. Njajou OT, Hsueh WC, Blackburn EH, et ai. Telomeerien pituuden, erityisten kuolinsyiden ja terveenä eläneiden vuosien välinen yhteys terveyteen, ikääntymiseen ja kehon koostumukseen: väestöpohjainen kohorttitutkimus. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2009;64:860–864.
45. Codd V, Nelson CP, Albrecht E, et ai. Seitsemän lokuksen tunnistaminen, jotka vaikuttavat telomeerien keskimääräiseen pituuteen ja niiden yhteys sairauteen. Nat Genet. 2013;45:422–427.
46. Zhan Y, Hägg S. Telomeerien pituus ja sydän- ja verisuonitautien riski. Curr Opin Cardiol. 2019; 34:270–274.
47. Stenvinkel P, Luttropp K, McGuinness D, et ai. CDKN2A/p16INK4a:n ilmentyminen liittyy vaskulaariseen progeriaan kroonisessa munuaissairaudessa.
Ikääntyminen (Albany. NY). 2017; 9:494–507.
48. Wilson WRW, Herbert KE, Mistry Y, et ai. Veren leukosyyttien telomeeri-DNA-pitoisuus ennustaa verisuonten telomeeri-DNA-pitoisuuden ihmisillä, joilla on verisuonisairaus tai ei. Eur Heart J. 2008;29:2689–2694.
49. Matsumoto C, Jiang Y, Emathinger J, et ai. Lyhyet telomeerit indusoivat p53:a ja autofagiaa ja moduloivat ikään liittyviä muutoksia sydämen kantasolujen kohtalossa. Kantasolut. 2018;36:868–880.
50. Lai L, Leone TC, Zechner C, et ai. Transkription koaktivaattorit PGC-la ja PGC-lb ohjaavat päällekkäisiä ohjelmia, joita tarvitaan sydämen perinataaliseen kypsymiseen. Genes Dev. 2008; 22:1948–1961.
51. Moslehi J, Depinho RA, Sahin E. Telomeerit ja mitokondriot ikääntyvässä sydämessä. Circ Res. 2012; 110:1226–1237.
52. Rufer N, Brümmendorf TH, Kolvraa S, et ai. Telomeerifluoresenssimittaukset granulosyyteissä ja T-lymfosyyttien alaryhmissä osoittavat korkeaa.