Cistanche-pohjaisen Bushen Kaixuan Tongluo -kaavan renoprotektiiviset vaikutukset Db/db-hiirissä CAMP/PKA/CREB-signalointireitin aktivoinnin kautta

3. Tulokset

3.1 Cistanche-pohjaisen Bushen Kaixuan Tongluo -kaavan vaikutukset db/db-hiirten yleiseen tilaan

Hiiret tyhjässä ryhmässä olivat aktiivisia ja niillä oli kiiltävä turkki. Sitä vastoin malliryhmän hiiret näyttivät lihavilta, letargisilta ja merkittävästi vähemmän aktiivisilta. Hoitoryhmissä olevien hiirten yleinen kunto parani vaihtelevasti malliryhmään verrattuna.

 

 

 

Cistanche-pohjainen Bushen Kaixuan Tongluo -kaava munuaisten ja maksan terveydelle

 

3.2 Kaavan vaikutukset db/db-hiirten painoon

Koko koejakson ajan malliryhmän hiirten ruumiinpaino nousi merkittävästi tyhjään ryhmään verrattuna (P<0.01). Compared with the model group, mice in all treatment groups showed a downward trend in body weight, with differences appearing from week 8 onward. The high-dose Cistanche-pohjainen kaavaryhmä osoitti voimakkaimman vaikutuksen. (Katso taulukko 2)

3.3 Vaikutukset munuaisten toimintaan

Verrattuna nollaryhmään seerumin kreatiniini (Scr) osoitti malliryhmän nousevaa trendiä, joskaan ei tilastollisesti merkitsevästi, kun taas veren ureatyppi (BUN), virtsan albumiini (uALB) ja albumiinin ja kreatiniinin suhde (ACR) olivat merkitsevästi koholla (P<0.05). Compared with the model group, mice in the formula-treated groups showed a decreasing trend in Scr (not significant), and significantly reduced levels of BUN, uALB, and ACR (P<0.05), with the medium-dose group showing the best results. In the irbesartan group, Scr and BUN showed a downward trend (not significant), while uALB and ACR were significantly reduced (P<0.01). (See Table 3)

3.4 Vaikutukset maksan toimintaan ja rasva-aineenvaihduntaan

Verrattuna nollaryhmään ALT, AST, kokonaiskolesteroli (TC) ja triglyseridit (TG) lisääntyivät merkittävästi malliryhmässä (P<0.05). Compared with the model group, the treatment groups showed a decreasing trend in AST and ALT (not significant), and a significant decrease in TC (P<0.01). TG levels were significantly reduced in the medium-dose formula group (P<0.05), while other formula groups showed a downward trend (not significant). In the irbesartan group, TC showed a decreasing trend (not significant), and TG was significantly reduced (P<0.01). (See Table 4)

3.5 Vaikutukset glukoosiaineenvaihduntaan

Verrattuna tyhjään ryhmään, paastoveren glukoosi (FBG), leptiini (LEP), glykosyloituneen seerumiproteiinin (GSP) ja insuliinin (INS) tasot olivat merkittävästi kohonneet malliryhmässä (P<0.05). Compared with the model group, FBG showed no significant downward trend in any group; LEP levels decreased (not significant) in the formula groups, whereas irbesartan significantly reduced LEP (P<0.05). All treatment groups showed significantly reduced GSP and INS levels (P<0.05), with the high-dose Cistanche-pohjainen kaavaryhmä, joka näyttää parhaan vaikutuksen. (Katso taulukko 5)

 

3.6 Vaikutukset munuaisten histopatologiaan

HE värjäys: Tyhjäryhmä osoitti normaalia munuaisarkkitehtuuria säännöllisellä glomerulaarisella morfologialla ja ehjiä tubulaarisia epiteelisoluja. Malliryhmässä esiintyi epäsäännöllisiä glomeruluksia, kohtalaista mesangiaalisolujen lisääntymistä, tulehduksellista infiltraatiota ja tyhjiödegeneraatiota tubulaarisissa epiteelisoluissa. Nämä patologiset ominaisuudet lieventyivät matalan, keskisuuren ja suuren annoksen kaava- ja irbesartaaniryhmissä. (Katso kuva 1)

PAS-värjäys: Tyhjäryhmä osoitti minimaalista ekstrasellulaarisen matriisin (ECM) kertymistä. Malliryhmässä oli merkitty ECM:n kertymistä ja paksuuntuneita tyvikalvoja. Hoitoryhmissä parannus oli vaihtelevaa. (Katso kuva 2)

Massonin värjäys: Nollaryhmä paljasti normaalin glomerulaarisen rakenteen minimaalisella kollageenikertymillä. Malliryhmä osoitti laajaa sinivärjättyä kollageenia munuaisten glomeruluksissa ja munuaisten interstitiumissa. Patologiset muutokset lievittyivät kaikissa hoitoryhmissä. (Katso kuva 3)

 

3.7 Vaikutukset p-PKA:n ja p-CREB:n ilmentymiseen munuaiskudoksessa

Verrattuna nollaryhmään p-PKA- ja p-CREB-värjäytyminen malliryhmän munuaiskudoksissa väheni merkittävästi (P<0.01). Compared with the model group, the medium-dose formula group had significantly increased p-PKA expression (P<0.01), and p-CREB showed an upward trend (not statistically significant). (See Figure 4, Table 6)

 

3.8 Vaikutukset p-PKA-, PKA-, p-CREB-, CREB- ja Bcl-2-proteiinin ilmentymiseen

Verrattuna tyhjään ryhmään malliryhmä osoitti merkitsevästi vähentynyttä p-PKA/PKA:n, p-CREB/CREB:n ja Bcl-2:n ilmentymistä (P<0.05). These levels were significantly elevated in the medium-dose Cistanche-pohjainen kaavaryhmä (s<0.01). (See Figure 5, Table 7)

 

4. Keskustelu

Vaikka perinteisen kiinalaisen lääketieteen (TCM) kirjallisuudessa ei kuvata nimenomaisesti diabeettista munuaistautia (DKD), oireet, kuten vaahtoava virtsa, ovat linjassa TCM-tilojen, kuten "virtsan sameus" ja "guan ge" kanssa. Professori Lü Cuiyan kehitti vuosikymmenien kliinisen kokemuksen perusteellaBushen Kaixuan Tongluo -kaava, käyttämälläCistancheAstragaluksen tilalla hallitsijayrttinä, joka vahvistaa Qi:tä ja Yangia, yhdistettynä akoniitin kanssa munuaisten lämmittämiseen ja sameuden muuttamiseksi.

Salvia ja Hirudo toimivat avustavana yrtteinä, jotka aktivoivat verta ja vapauttavat tukisoluja, kun taas Saposhnikovia, Bombyx batryticatus ja cicada slough karkottavat tuulta ja taudinaiheuttajia. Rehmannia ja Cornus ravitsevat munuaisesanssia; Achyranthes ohjaa yrttejä alaspäin; Rosa laevigata, Euryale, Rubus ja Cnidium vahvistavat olemuksen; Dioscorea vahvistaa pernaa ja munuaisia. Yhdistelmällä saadaan aikaan pernan ja munuaisten tonisaatio, sameuden poisto ja staasin erottelu, mikä osoittaa lupaavaa kliinistä tehoa.

Nykyaikaiset farmakologiset tutkimukset osoittavat, että kaavan komponentit vaikuttavat useisiin kohteisiin munuaistoiminnan parantamiseksi:

Tanshinone IIAjahirudiiniestävät TGF-/Smad-signalointia vähentäen fibroosia ja mikroverenkiertohäiriöitä

Saposhnikovian polysakkariditheikentää NF-κB-välitteistä tulehdusta

Cornuksen iridoidiglykosiditaktivoi Nrf2/ARE-reitti antioksidanttientsyymien tehostamiseksi

Achyranthes-sterolitmoduloivat PI3K/Akt-reittiä, estäen podosyyttien apoptoosia

Dioscinaktivoi AMPK/mTOR:n säätelemään autofagiaa ja epiteelisolujen aineenvaihduntaa

ThecAMP-signalointireitti, joka on keskeinen solujen energia-aineenvaihdunnalle ja geeniekspressiolle, on elintärkeä munuaisten homeostaasille. Adenylaattisyklaasi (AC) tuottaa cAMP:tä, joka allosteerisesti aktivoi PKA:n; aktivoitu PKA fosforyloi CREB:n muodostaen p-CREB:n, joka siirtyy ytimeen ja käynnistää kohdegeenien transkription, kutenBcl-2edistää anti-apoptoottisia vaikutuksia ja vähentää munuaisvaurioita.

DKD:ssä jatkuva hyperglykemia häiritsee cAMP-tasapainoa estämällä AC-toimintaa ja tehostamalla PDE-välitteistä hajoamista, mikä johtaa alentuneisiin cAMP-tasoihin. Tämä heikentää PKA/CREB-signalointia, vaarantaa mitokondrioiden toiminnan, antioksidanttipuolustuksen ja anti-apoptoottisen geenin ilmentymisen, kiihdyttäen glomerulaarista skleroosia ja interstitiaalista fibroosia.

Tutkimukset osoittavat sencAMP/PKA-reitin aktivoiminenauttaa säilyttämään podosyyttien rakokalvon eheyden ja vähentämään proteinuriaa. Lisäksi,CREBindusoi transkriptionaalisesti antioksidanttientsyymejä, kutenSOD2, vähentää putkimaista oksidatiivista stressiä.Bcl-2vähentää myös mitokondrioiden ROS-vuotoa ja suojaa podosyyttejä ja tubulussoluja hyperglykemian alla.

Normaalien glukoositasojen palauttaminen vähentää AGE:n kertymistä, lievittää tyvikalvon paksuuntumista ja podosyyttivaurioita. Lipidiprofiilien parantaminen vähentää munuaisten lipidien kertymistä ja makrofagien infiltraatiota, mikä hidastaa fibroosin etenemistä.

Kuitenkin,tutkimus siitä, kuinka Bushen Kaixuan Tongluo -kaava vaikuttaa DKD:hen cAMP-reitin kautta, on edelleen rajallista.

Tässä tutkimuksessa db/db-hiiriä käytettiin simuloimaan ihmisen DKD:tä. TheCistanche-pohjainen kaavaparansi merkittävästi munuaisten toimintaa, yleistä tilaa ja aineenvaihduntahäiriöitä hiirillä, ja maksan turvallisuusprofiilit olivat suotuisat. Histopatologia osoitti vähentynyttä munuaiskerästen tyvikalvon paksuuntumista, mesangiaalista laajenemista ja interstitiaalista kollageenin kertymistä – tunnusomaisia ​​DKD-vaurioita.

Molekyylitasolla kaavaPKA:n, CREB:n ja Bcl-2:n mRNA:n ja proteiinin ilmentyminen lisääntyi, mikä lisää PKA:n ja CREB:n fosforylaatiotacAMP-reitin aktivoiminen, parantaa antioksidanttikapasiteettia ja palauttaa suodatussulkutoiminnon.

Johtopäätös

TheCistanche-pohjainen Bushen Kaixuan Tongluo Formula:

Parantaa maksan ja munuaisten toimintaa

Korjaa glukoosi- ja lipidiaineenvaihduntahäiriöitä

AktivoicAMP/PKA/CREB-signalointireitti

Vähentää munuaisfibroosia ja oksidatiivista stressiä

Tarjoaa munuaissuojan DKD:ssä

Nämä havainnot tarjoavat farmakologisen perustan sen kliiniselle sovellukselle ja tukevat cAMP-reitin kohdentamista mahdollisena strategiana DKD:n hoidossa. Tulevan tutkimuksen tulisi tutkia alavirran molekyylejä, kuten BDNF, mekanismin selvittämiseksi.