Ekinakosidin suojaavat vaikutukset munuaisten toimintaan, munuaiskudoksiin ja mesangiaalisoluvaurioon rotilla, joilla on diabeettinen nefropatia

Tiesitkö, että Cistanchen syöminen voi ravitsea munuaisia, lievittää diabetesta ja parantaa seksuaalista toimintaa?

HE Qin, LIU Fan, WANG Hongli, LI Jianping, DUAN Jun (Cadre Medicine -osasto, Caotang Ward, Sichuan People's Hospital, Sichuan Academy of Medical Sciences, Chengdu 610072 Sichuan, Kiina)

Abstrakti:Tavoite Tutkia ekinakosidin (ECH) suojaavaa vaikutusta munuaisten vajaatoimintaan, histopatologiaan ja mesangiaalisoluvaurioon diabeettisessa nefropatiassa (DN) rotissa ja sen mekanismissa. Menetelmät Kuusikymmentä SD-rottaa jaettiin satunnaisesti kontrolliryhmään, malliryhmään, ECH-ryhmään (suuret, keskisuuret ja pienet ECH-annokset, 100, 50, 20 mg·kg- 1 ·d- 1) ja losartaanikaliumryhmään. (losartaanikalium, 16 mg·kg- 1 ·d- 1), 10 rottaa kussakin ryhmässä. Malliryhmälle, ECH-ryhmälle ja losartaanikaliumryhmälle annettiin runsaasti rasvaa ja sokeria sisältävää ruokavaliota ja vatsaontelonsisäisesti ruiskutettiin streptotsotosiinia (40 mg ·kg- 1) DN-rottamallien luomiseksi. 2 viikon hoidon jälkeen kehorottien paino, 24 tunnin vedenotto ja virtsan tilavuus kirjattiin. Paastoveren glukoosin, seerumin kreatiniinin, ureatypen, virtsan mikroproteiinin, hyaluronihapon (HA), kudoksen metalloproteinaasin estäjän- 1 (TIMP- 1) ja laminiinin (LN) pitoisuudet määritettiin. HE-värjäys ja TUNEL-värjäys suoritettiin patologisten muutosten tarkkailemiseksi munuaiskudoksessa. RT-PCR suoritettiin B-solulymfooman (Bcl-2), Bcl2-assosioituneen X-proteiinin (Bax), kaspaasi- 3 mRNA:n ilmentymisen havaitsemiseksi. Western Blot suoritettiin verisuonten soluadheesiomolekyylin -1(VCAM-1）), transformoivan kasvutekijän (TGF-), -sileänlihaksen aktiinin (-SMA) ilmentymistasojen määrittämiseksi. Tulokset Verrattuna vertailuryhmään malliryhmän ruumiinpaino laski merkittävästi（P < 0.05）,="" water="" intake,="" urine="" volume,="" fasting="" blood="" glucose,="" urine="" microalbumin,="" urea="" nitrogen,="" creatinine,="" ha,="" timp-1="" and="" ln="" were="" significantly="">P < 0.05）.="" bax,="" caspase-="" 3="" mrna,="" and="" expression="" of="" vcam-="" 1,="" tgf-="" β,="" and="" α-="" sma="" protein="" were="" significantly="" up-regulated="">P < 0.05）,="" expression="" of="" bcl-="" 2="" mrna="" was="" significantly="">P < 0.05）.="" compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" body="" weight="" of="" rats="" was="" significantly="" increased="" in="" the="" medium-dose="">ryhmä, suuren annoksen ECH-ryhmä ja losartaanikaliumryhmä ()P < 0.05）,="" water="" intake,="" urine="" volume,="" fasting="" blood="" glucose,="" urine="" microalbumin,="" urea="" nitrogen,="" creatinine,="" ha,="" timp-="" 1="" and="" ln="" were="" significantly="">P < 0.05）.="" bax,="" caspase-="" 3="" mrna,="" expression="" of="" vcam-="" 1,="" tgf-="" β,="" and="" α-="" sma="" protein="" were="" significantly="">P < 0.05）;="" and="" expression="" of="" bcl-="" 2="" mrna="" was="" significantly="">P < 0.05）.="" he="" and="" tunel="" staining="" showed="" that="" pathological="" changes="" in="" renal="" tissue="" were="" significantly="" decreased.="" conclusion="" medium="" and="" high="" doses="" of="" ech="" can="" protect="" renal="" tissue="" damage,="" and="" improve="" renal="" function="" in="" dn="" rats="" by="" inhibiting="" protein="" expression="" of="" tgf-β="" and="" vcam-1="" and="" inhibiting="" renal="" interstitial="" fibrosis="" and="" renal="" cell="">

Avainsanat:Cistanches herba; Ekinakosidi; diabeettinen nefropatia; munuaisten interstitiaalinen fibroosi; apoptoosi; rotat

Lisätietoja saat ottamalla yhteyttä:emily.li@wecistanche.com

Cistanche deserticolalla on monia vaikutuksia, napsauta tästä saadaksesi lisätietoja

Diabeettinen nefropatia (Dibeettinen nefropatia, DN) on yleinen diabeettinen mikrovaskulaarinen komplikaatio, joka voi paitsi aiheuttaa munuaisvaurioita, myös vaikuttaa muihin elimiin. Munuaisten tubulointerstitiaalinen fibroosi on tärkein patologinen piirre kliinisissä tutkimuksissa [1]. Diabeettisen nefropatian patogeneesi on monimutkainen. Aiemmissa tutkimuksissa [2-3] uskottiin, että sairaus johtui pääasiassa diabetespotilaiden hyperglykemiasta, joka aiheutti munuaisten hemodynaamisia muutoksia ja epänormaalia aineenvaihduntaa. Kliiniset oireet olivat proteinuria ja hidastunut glomerulusten suodatusnopeus. Odota. Diabeettista nefropatiaa sairastavilla potilailla ei tällä hetkellä vielä ole tehokkaita kliinisiä hoitomenetelmiä, ja uusien tehokkaiden lääkkeiden löytäminen on avain diabeettisen nefropatian hoitoon.

Ekinakosidi(ECH) on yksi otteitaCistanche Tubulosa, jolla on munuaisia ​​ravitseva ja yangia vahvistava vaikutus [4]. Nykyaikainen farmakologinen tutkimus [5] osoittaa, että ekinakosidilla on hapettumista, apoptoosia, anti-inflammatorisia ja farmakologisia vaikutuksia, kuten verenkiertoa ja mikroverenkiertoa parantavia vaikutuksia. Se voi myös säädellä kehon glukoosiaineenvaihduntaa ja parantaa glukoosinsietokykyä. Viime vuosina tehdyt tutkimukset [6] ovat osoittaneet, että ekinakosidi voi estää diabeettisten nefropatian rottien munuaisfibroosia estämällä transformoivan kasvutekijän (TGF-) signaalireittiä ja suojaamalla rotan munuaiskudosta. Kirjallisuudessa on kuitenkin vain vähän raportteja diabeettisen nefropatian hoidosta echinacealla, ja sen spesifinen mekanismi diabeettisen nefropatian suojaamiseksi rotilla on edelleen epäselvä. Siksi tässä tutkimuksessa tutkittiin edelleen ekinakosidin vaikutuksia ja mahdollisia mekanismeja munuaisfibroosiin ja munuaiskudoksen solujen apoptoosiin diabeettisessa nefropatiassa rotilla ja pyrittiin tarjoamaan teoreettinen perustaekinakosidi.

Diabeteksen syyt ja perinteiset hoitomenetelmät

Diabeettisen nefropatian puhkeaminen on piilotettu, ja patogeneesi on monimutkainen ja monipuolinen. Kun se on muodostunut, sitä on vaikea parantaa. Se on krooninen sairaus, josta on suurta haittaa ja joka on tärkeä syy loppuvaiheen munuaissairaudelle [8]. Diabeettista nefropatiaa sairastavia potilaita hoidetaan usein angiotensiinikonvertaasientsyymin estäjillä ja angiotensiinireseptorin salpaajilla, mutta kliininen hoitovaikutus ei ole kovin tyydyttävä [9]. Losartaanikalium on angiotensiini Ⅱ -reseptorin salpaaja, jota voidaan käyttää essentiaalisen verenpaineen hoitoon. Useat tutkimukset [10-11] osoittavat, että losartaanikalium voi myös estää diabeettista nefropatiaa sairastavien rottien munuaisten interstitiumia Fibroosia ja suojata munuaisten toimintaa. Siksi tässä tutkimuksessa valittiin losartaanikalium positiiviseksi kontrolliksi vertaamaan ekinakosidin suojaavia vaikutuksia rottien munuaiskudokseen.diabeetikkonefropatia.

Kliiniset tutkimukset [12-13] ovat osoittaneet, että sisältöekinakosidiChangui Yishen -kapseleissa on noin 3,104 mg · kg-1. Ihmiselle ja hiirelle annettuun annokseen perustuvan muuntamisen jälkeen pienin rotilla diabeettiseen nefropatiaan käytetty Changui Yishen -kapselin annos on 0,648 g·kg-1, mikä vastaa suunnilleenekinakosidi2 mg·kg-1. Nykyisen kliinisen huolen vuoksi ekinakosidista diabeteksen hoidossa

Kirjallisuudessa on vähän raportteja munuaissairauksista. Siksi tässä tutkimuksessa valittiin 10 kertaa pienin kliininen annos, eli 20 mg·kg-1 ekinakosidia pieneksi annokseksi, ja sitä lisättiin asteittain asettamalla 50 mg·kg-1 ekinakosidi on keskimääräinen annos,

100 mg·kg-1Ekinakosidion suuri annos.

Ekinakosidin osoittaminen diabeteksen hoidossa ja munuaisten toiminnan parantamisessa

Tässä tutkimuksessa pieni annosekinakosidisillä ei ole ilmeistä vaikutusta diabeettisten nefropatiarottien munuaiskudokseen, kun taas keskisuuret ja suuret annokset ekinakosidi voivat merkittävästi parantaa munuaiskudoksen patologisia muutoksia ja parantaa munuaiskudosvaurioita diabeettisilla nefropatiarotilla, mikä viittaa siihen, että keskisuuret ja suuret ekinakosidiannokset voivat suojata diabeettisen nefropatian rottien munuaiskudosvaurioita pitoisuudesta riippuvaisella tavalla, ja sitä odotetaan käytettävän kliinisen diabeettisen nefropatian hoidossa.

keskisuuret ja suuret annoksetekinakosidivoi lisätä merkittävästi diabeettista nefropatiaa sairastavien rottien ruumiinmassaa ja vähentää niiden veden saantia, virtsan eritystä ja paastoverensokeria. Kliiniset tutkimukset [14] ovat osoittaneet, että diabeettista nefropatiaa sairastavilla potilailla insuliinin puutos on absoluuttinen tai suhteellinen ja veren glukoosipitoisuus on kohonnut. Liiallinen verensokeripitoisuus ylittää glomerulusten reabsorptiokapasiteetin. Se erittyy virtsaan, mikä lisää virtsaamista ja juomaveden määrää. Ruumiinmassan lasku on periaatteessa yhdenmukainen tämän tutkimuksen tulosten kanssa, mikä viittaa siihenekinakosidivoi lisätä diabeettisten nefropatian rottien ruumiinmassaa alentamalla verensokeria ja vähentämällä niiden juomista ja virtsan eritystä.

keskisuuret ja suuret annoksetekinakosidivoi vähentää merkittävästi virtsan mikroalbumiini-, kreatiniini- ja ureatyppeä rotilla, joilla ondiabeetikkonefropatia. Kreatiniini ja urea typpi erittyvät pääasiassa glomerulussuodatuksen kautta, mikä voi heijastaa tarkemmin munuaisten toimintaa. Munuaisten vajaatoiminnassa glomerulusten suodatusnopeus laskee, veren kreatiniini- ja ureatypen pitoisuus kasvaa merkittävästi [15]. Virtsan proteiinitaso on yksi yleisimmin käytetyistä indikaattoreista heijastamaan munuaiskerästen vaurion astetta, mikä voi suoraan vaurioittaa mesangiaalisoluja ja voi myös pahentaa munuaisvaurioita ja munuaisten vajaatoimintaa [16]. Zhang Yun et ai. [17] osoitti, että hyperglykemia rotilla, joilla on diabeettinen nefropatia, voi aiheuttaa glomerulusten suodatusnopeuden laskua, mikä johtaa veren kreatiniini-, ureatypen ja virtsan mikroalbumiinipitoisuuksien nousuun. Tämän tutkimuksen tulokset viittaavat siihen, että ekinakosidi voi alentaa verensokeria, parantaa munuaisten toimintaa, alentaa veren kreatiniini-, ureatyppi- ja virtsan mikroalbumiinitasoja ja parantaa munuaiskudoksen soluvaurioita.

keskisuuret ja suuret annoksetekinakosidivoi merkittävästi vähentää Bax- ja Caspase-3-mRNA:n ilmentymistä diabeettisissa nefropatiarotissa, lisää Bcl-2-mRNA:n ilmentymistä ja estää munuaiskudossolujen apoptoosia. Bax-geeni on pro-apoptoottinen Bcl-2-perheen jäsen. Fysiologisissa olosuhteissa Bax ja Bcl-2 muodostavat heterodimeerin, joka vähentää solukalvon läpäisevyyttä ja sytokromi C:n vapautumista. Kun Bcl{7}}:n ilmentyminen on alasäädelty, se lisää solujen läpäisevyyttä, sytokromi C:n vapautumista, aktivoi alavirran kaspaasikaskadin ja indusoi solujen apoptoosia [18].

Kaspaasi-3 on apoptoosia toteuttava molekyyli, joka voi hajottaa useita tärkeitä soluissa olevia proteiineja ja osallistua solujen apoptoosiin [19]. Dongin et al. [20] osoitti, että ekinakosidi voi estää useiden solujen apoptoosia, mikä on pohjimmiltaan yhdenmukainen tämän tutkimuksen tulosten kanssa, mikä viittaa siihen, että ekinakosidi voi estää munuaiskudossolujen apoptoosia ja siten suojata munuaiskudosvaurioita.

keskisuuret ja suuret ekinakosidiannokset voivat vähentää merkittävästi VCAM-1-proteiinin ilmentymistä diabeettisessa nefropatiassa rotissa. VCAM-1 on tärkeä vaskulaaristen solujen adheesiomolekyyli, joka liittyy läheisesti diabeettisen nefropatian esiintymiseen ja kehittymiseen ja jota voidaan käyttää diabeettista nefropatiaa sairastavien potilaiden kliiniseen arviointiin [21]. Zhang et al. [22] osoitti, että VCAM{5}} voi indusoida hermosolujen apoptoosia aivojensisäisen verenvuodon jälkeen rotilla. Tämän tutkimuksen tulokset viittaavat siihen, että keskisuuret ja suuret ekinakosidiannokset voivat estää VCAM-1:n ilmentymisen ja munuaissolujen apoptoosin diabeettisesta nefropatiasta kärsivillä rotilla.

Tässä tutkimuksessa keskisuuret ja suuret annoksetekinakosidivoi vähentää merkittävästi HA-, TIMP-1- ja LN-tasoja rotilla, joilla on diabeettinen nefropatia. HA on solunulkoisen matriisin pääkomponentti, ja LN on tärkeä rakenteellinen glykoproteiini, joka on yleisesti käytetty kliininen kudosfibroosin indikaattori [23]. TIMP-1 on matriksin metalloproteinaasien (MMP) estäjä, joka voi estää MMP:n ilmentymistä, estää solunulkoisen matriisin hajoamisen ja edistää munuaiskudoksen fibroosia [24]. Bieniaa et al. [25] osoitti, että TIMP-1 voi estää MMP:n ilmentymistä, edistää HA:n ja LN:n ilmentymistä ja edistää munuaiskudosfibroosin esiintymistä ja kehittymistä. Tämä on periaatteessa yhdenmukainen tämän tutkimuksen tulosten kanssa, mikä viittaa siihen, että ekinakosidi saattaa estää HA-, TIMP-1- ja LN-tasoja sekä estää munuaisfibroosin esiintymistä ja kehittymistä.

keskisuuret ja suuret annoksetekinakosidivoi merkittävästi vähentää TGF- ja -SMA-proteiinien ilmentymistä diabeettisissa nefropatiarotissa. Useat tutkimukset [26-27] ovat osoittaneet, että TGF-/Smad-signalointireitillä on tärkeä rooli munuaisten interstitiaalisen fibroosin esiintymisessä ja kehittymisessä. Kun TGF- sitoutuu reseptoriinsa solukalvossa, se voi fosforyloida Smad2:n ja Smad3:n, ja aktivoitunut Smad muodostaa trimeerin, joka siirtyy ytimeen säätelemään alavirran efektorimolekyylien, kuten -SMA:n ja matriisin metalloproteinaasien, ekspressiota. Indusoi munuaisten interstitiaalisen fibroosin muodostumista [28]. -SMA on merkki fibroblastien muuttumisesta myofibroblasteiksi, mikä voi edistää solunulkoisen matriisin erittymistä ja kerrostumista sekä edistää munuaisten interstitiaalisen fibroosin esiintymistä [29]. Li Zhong et ai. [30] osoitti, että TGF-/Smadilla on tärkeä rooli munuaiskudosvaurion säätelyssä diabeettisessa nefropatiassa. Tämän tutkimuksen tulokset viittaavat siihen, että ekinakosidi voi estää TGF-:n ilmentymisen, estää -SMA:n ilmentymisen ja inhiboida munuaiskudoksen fibroosia.

Johtopäätös

Yhteenvetona, keskisuuret ja suuret annoksetekinakosidivoi alentaa verensokeria diabeettisilla nefropatiarotilla ja saattaaestääthemunuaistenvälilehtifibroosija munuaisten interstitiaalinen fibroosidiabeetikkonefropatiarotilla estämällä TGF- ja VCAM-proteiinin ilmentymistä-1. Kudossolujen apoptoosi parantaa rottien munuaisten toimintaa.