*Cistanche Tubulosa* -vesiuutteen fytokemiallinen profilointi ja diabeteksen vastainen nefropatian mekanismit, jotka perustuvat spektri-vaikutussuhdeanalyysiin

Fytokemiallinen profilointi ja diabeteksen vastainen nefropatian mekanismitCistanche tubulosaVesipitoinen uute, joka perustuu spektri-vaikutussuhdeanalyysiin

Abstrakti

Sanojen määrä: 236 Diabeettinen nefropatia (DN) on yksi diabeteksen vakavimmista mikrovaskulaarisista komplikaatioista ja pääasiallinen loppuvaiheen munuaissairauden syy maailmanlaajuisesti. Perinteisen kiinalaisen lääketieteen (TCM) luonnolliset kasviperäiset materiaalit tarjoavat monia terapeuttisia aineita munuaisfibroosin hidastamiseen ja munuaisvaurioiden lievittämiseen.Cistanche tubulosa, klassinen "aavikon ginseng" tonic yrtti, joka on tallennettu vuonnaShennong Bencao Jing, osoittaa dokumentoituja renoprotektiivisia farmakologisia ominaisuuksia. Tässä katsauksessa syntetisoidaan prekliinisiä in vitro kokeellisia todisteita, jotka omaksuivat spektri-vaikutussuhdestrategian bioaktiivisten ainesosien seulomiseksiCistanche tubulosavesipitoinen uute. UPLC-Orbitrap-MS/MS:tä käytettiin karakterisoimaan peräkkäin eluoituneiden fraktioiden monimutkaisia ​​kemiallisia profiileja. Ihmisen munuaisten tubulusepiteelisolujen HK-2-soluvauriomallia, joka oli indusoitu korkean glukoosipitoisuuden ja runsasrasvaisen tilan indusoimiseksi, käytettiin sytoprotektiivisen aktiivisuuden arvioimiseen. Osittainen pienimmän neliösumman regressio- ja harmaakorrelaatioanalyysi tunnisti bioaktiivisia yhdisteitä. Myöhemmät solukokeet vahvistivat, että 8-epideoksilogaanihappo ja geniposidiinihappo voivat lievittää HK-2-soluvaurioita, lisätä antioksidanttientsyymiaktiivisuutta, tukahduttaa tulehdusta edistäviä välittäjäaineita ja moduloida epiteeli-mesenkymaalista siirtymää (EMT) estämällä PI3K-Akt-signalointisarjaa. Tässä artikkelissa esitetään yhteenveto fytokemiallisista ominaisuuksista, in vitro -farmakologisista havainnoista ja molekyylimekanismeista, käsitellään nykyisen tutkimuksen rajoituksia ja tarjotaan näkökulmiaCistanche tubulosadiabeettista nefropatiaa vastaan.

Avainsanat: Cistanche tubulosa; vesipitoinen uute; spektri-vaikutussuhde; UPLC-Orbitrap-MS/MS; diabeettinen nefropatia; HK-2-solut; PI3K-Akt-reitti; munuaisten fibroosi

1. Johdanto

Diabetes mellituksen maailmanlaajuinen esiintyvyys kasvaa edelleen ruokavalion muutosten, liikalihavuuden ja väestön ikääntymisen vuoksi. epidemiologiset ennusteet viittaavat yli 360 miljoonaan diabeetikkoon maailmanlaajuisesti vuoteen 2030 mennessä [1]. Noin 20–35 %:lle tyypin 2 diabetesta sairastavista ihmisistä kehittyy lopulta diabeettinen nefropatia, mikä lisää merkittävästi sairastuvuus- ja kuolleisuusriskiä [2-3]. Progressiivinen munuaisten interstitiaalinen fibroosi, joka johtuu oksidatiivisesta stressistä, jatkuvasta tulehduksesta ja tubulaarisesta epiteeli-mesenkymaalisesta siirtymästä, on DN:n keskeinen patologinen piirre. Nykyiset kliiniset interventiot eivät pysty täysin kumoamaan pitkälle edennyttä munuaisfibroosia, joten luonnonkasvivaroista saadut uudet monikomponenttiset terapeuttiset aineet herättävät kasvavaa tutkimusintressiä [4–5].

Cistanche tubulosa(Orobanchaceae-suku) on TCM-käytännössä hyvin tunnettu tonisoiva yrtti. Historialliset materia-medica-tiedot osoittavat, että sen terapeuttisia käyttöaiheita ovat muun muassa munuais-yangin puutos, esanssi-veriuupumus, lumbago, luiden ja jänteiden heikkous sekä suoliston kuiva ummetus [6–7]. Nykyaikaiset fytokemialliset tutkimukset osoittavat tämänCistanche tubulosasisältää runsaasti fenyylietanoidiglykosideja, iridoidiglykosideja, lignaaneja, betaiinia, aminohappoja ja sakkarideja, jotka antavat antioksidanttisia, ikääntymistä estäviä, lisääntymistä ja munuaisia ​​suojaavia bioaktiivisuuksia [8-9]. Tämän yrtin aiemmat farmakologiset tutkimukset keskittyivät pääasiassa fenyylietanoidiglykosidifraktioihin; vähemmän huomiota kiinnitettiin vesiliukoisiin komponentteihin, jotka on saatu vesipitoisesta keittämisestä, jotka vastaavat kliinisiä perinteisiä keittovalmisteita [10].

Spektrivaikutussuhde edustaa tutkimusstrategiaa, joka on laajalti hyväksytty TCM-kompleksi-uuttetutkimuksissa. Tämä analyyttinen työnkulku yhdistää korkearesoluutioiset massaspektrometriset kemialliset sormenjäljet ​​bioaktiivisuustestitietoihin käyttämällä kemometrisiä algoritmeja kromatografisten huippujen intensiteettien korreloimiseksi farmakologisten lukemien kanssa, jotta voidaan paikantaa tehokkaita aineita monikomponenttisista yrttiseoksista [11]. Yhdistämällä UPLC-Orbitrap-MS/MS-sormenjälkien keruun, korkean glukoosin ja rasvan HK-2-vauriosolumallin arvioinnin ja monimuuttujaisen tilastollisen mallintamisen, tutkijat voivat seuloa mahdollisia anti-DN-aineosia monimutkaisistaCistanche tubulosavesipitoisia uutteita ja vahvistavat edelleen niiden sytoprotektiiviset mekanismit molekyylitasolla [12].

Tämä katsaus organisoi uudelleen julkaistut prekliiniset in vitro kokeelliset tulokset olemassa olevasta kirjallisuudesta [12] ja laajentaa kontekstuaalista taustaa DN:n patogeneesistä jaCistanche tubulosafytologia. Tärkeimmät tavoitteet ovat: (1) tehdä yhteenveto kemiallisten komponenttien profiloinnin tuloksista peräkkäin eluoituneille fraktioille.Cistanche tubulosavesi uute; (2) ottaa käyttöön anti-DN:n bioaktiivisten ainesosien spektri-vaikutussuhteen seulontatyönkulku; (3) tulkita lyijyyhdisteiden 8-epideoksilogaanihapon ja geniposidiinihapon solumolekyylimekanismeja munuaistiehyiden soluvaurioita vastaan; (4) osoittaa nykyiset tutkimusrajoitukset ja tarjota näkemyksiä jatkotutkimukselle.

2. Yleiskatsaus materiaaleihin ja kokeelliseen työnkulkuun (syntetisoitu julkaistuista prekliinisistä raporteista)

Huomautus: Kaikki kokeelliset raakatiedot haetaan julkisesti saatavilla olevasta julkaistusta kirjallisuudesta [12]; Tämä artikkeli ei esitä alkuperäisiä instrumenttikaavioita tai laboratorioissa luotuja valokuvia. Lukijat voivat etsiä kaikki ensisijaisen kokeen tietueet lainatusta lähteestä.

2.1 Yrttimateriaali ja vesipitoisten uutefraktioiden valmistus

Kasvimateriaali:Cistanche tubulosamehevät varret korjattiin keinotekoisesti viljellyistä populaatioista Hotanissa, Xinjiangin alueella, ja kasvifarmakologian asiantuntijat ovat todenneet taksonomisesti [12]. Raakayrttiviipaleet keitettiin tislatulla vedellä kiehuvassa vedessä toistuvasti. Yhdistetyt vesipitoiset suodokset tyhjiöväkevöitiin kuivaksi raakavesiuutetahnaksi. AB-8-makrohuokoinen hartsikolonnikromatografia käytettiin gradienttieluointiin: peräkkäin käyttäen puhdasta vettä, 20 %, 40 %, 60 %, 80 %, 95 % etanoliliuosta. Kuusi erillistä eluaattifraktiota (merkitty A-F) kerättiin, konsentroitiin ja kuivattiin vastaavasti jauhenäytteiksi [12]. Jokainen fraktiojauhe liuotettiin uudelleen metanolin ja veden sekoitettuun liuottimeen myöhempää UPLC-Orbitrap-MS/MS-näytteen valmistusta varten.

2.2 Instrumentit, reagenssit ja kennoresurssit

Analyyttinen alusta: Vanquish UHPLC yhdistettynä Orbitrap Exploris 120 korkearesoluutioiseen massaspektrometriin (Thermo Fisher Scientific). Kromatografisessa erotuksessa käytettiin Waters ACQUITY UPLC BEH C18 analyyttistä kolonnia (2,1 mm × 100 mm, 1,7 um). Muita tärkeitä laboratoriolaitteita olivat MultiskanGO-mikrolevylukija, soluinkubaattori, matalan lämpötilan nopea sentrifugi, käänteinen optinen mikroskooppi [12].

Ihmisen munuaisten tubulusepiteelin HK-2-solulinja ostettiin in vitro munuaisvauriomallin luomiseksi. Kokeissa käytettiin solujen kulkua alle 30 sukupolven ajalta. Vertailustandardiyhdisteet: 8-epideoksilogaanihappo, geniposidiinihappo, pinoresinoli, syringiini, betaiini (puhtaus suurempi tai yhtä suuri kuin 98 %). Biologiset määrityssarjat sisälsivät MTT-määritysreagensseja, SOD-, GSH-Px-biokemiallisia havaitsemissarjoja; ELISA-sarjat, jotka kohdistuvat IL-1:een, TNF-, TGF-:ään; Ensisijaiset Western-blot-vasta-aineet, mukaan lukien -SMA, kollageeni Ⅰ, E-kadheriini, PI3K, p-PI3K, Akt, p-Akt [12].

2.3 Kokeellinen työnkulku

1. Kemiallinen sormenjälkien hankinta: UPLC-Orbitrap-MS/MS toimii sekä positiivisen ionin että negatiivisen ionin sähkösumutusionisaatiotilassa. Gradienttieluointiohjelma muurahaishappo-asetonitriili / muurahaishappo-vesi liikkuvassa faasissa. MS/MS-fragmenttispektrien täsmäämistä vertailustandardeihin ja julkaistuihin massaspektritietokantoihin käytettiin fytokemiallisten ainesosien karakterisoimiseen kuuden eluutiofraktion välillä [12]. 2.In vitro -vamman mallirakenne: HK-2-solut altistettiin yhdistetylle korkean glukoosin (30 mmol·L⁻¹ glukoosi) ja palmitaatin yhdisteelle korkean glukoosipitoisuuden ja runsasrasvaisen munuaistiehyen vauriofenotyypin simuloimiseksi, joka on relevanttia diabeettisen nefropatian kannalta. Sarjakonsentraatiogradienttitesteillä määritettiin optimaaliset mallintamisolosuhteet: palmitaatti 700 μmol·L⁻¹, jota inkuboitiin yhdessä 24 tuntia, tuotti vakaan solujen elinkelpoisuuden laskun [12]. 3.Fraktioaktiivisuuden seulonta: Kuuden eluutiofraktion (A-F) eri pitoisuudet annettiin loukkaantuneille HK-2-soluille. MTT-määrityksessä mitattiin solujen lisääntymisen ja elinkelpoisuuden nopeus kunkin fraktion sytoprotektiivisen tehon arvioimiseksi [12]. 4.Spektrivaikutuskemometrinen analyysi: Peak‑area data of chromatographic signals from each fraction and corresponding HK‑2 cell‑viability bio‑activity data were imported into SIMCA 14.1 and SPSSPRO platforms. Partial‑least‑squares regression calculated VIP values and regression coefficients; grey‑correlation‑analysis output correlation‑degree index. Compounds satisfying VIP > 1 and grey‑correlation‑index >0,7 valittiin ehdokkaiksi anti-DN-bioaktiivisiksi komponenteiksi [12]. 5.Yhden yhdisteen validointikokeet: Spektrivaikutteisten mallien perusteella tunnistettuja puhtaita yhdisteitä levitettiin yksittäin runsaasti glukoosia ja rasvaa sisältäviin vaurioituneisiin HK-2-soluihin. MTT-määritys vahvisti soluja suojaavan tehon. Biokemialliset sarjat havaitsivat antioksidantti-indikaattoreita SOD, GSH-Px; ELISA määritti tulehdusta edistävien tekijöiden tasot (IL-1, TNF-, TGF-). Western blot -määritys havaitsi EMT:hen liittyvän markkeriproteiinin sekä PI3K-Akt-reittiin liittyvän proteiinin ilmentymisen runsauden [12].

2.4 Tilastollinen käsittely

Solukokeen mittaustiedot ilmaistiin keskiarvona ± standardipoikkeama. Useiden ryhmien vertailuissa käytettiin yksisuuntaista ANOVAa, jota seurasi post-hoc-testaus; P< 0.05 was considered statistically significant difference. Chemometric spectral‑effect‑modelling relied on SIMCA and online‑platform grey‑correlation‑analysis modules [12].

3. Julkaistun kirjallisuuden kokeellisten tulosten synteesi

3.1 Peräkkäisten eluointifraktioiden fytokemiallinen karakterisointi

Vertaamalla retentioaikaa, esiaste-ionien massaa ja MS/MS-fragmenttitietoja vertailustandardeihin ja julkaistuihin spektritietokantoihin, kaikkiaan 72 yhteistä fytokemiallista ainesosaa tunnistettiin alustavasti kuudesta.Cistanche tubulosavesiuutteen eluutiofraktiot [12]. Havaitut yhdisteluokat kattoivat iridoidiglykosidit, fenyylietanoidiglykosidit, lignaanit, betaiinin, aminohapot, fenolihapot, sakkaridijohdannaiset ja muut sekundaariset metaboliitit. Komponenttien jakautumisessa oli ilmeisiä fraktiosta riippuvia eroja: vedellä eluoitunut fraktio (A) ja matalapitoisuudet etanolifraktiot (B, C) olivat rikkaampia erittäin polaarisissa vesiliukoisissa molekyyleissä, mukaan lukien betaiini, useita iridoidiglykosideja; vahvemmat etanolilla eluoidut fraktiot kerääntyivät suhteellisesti vähemmän polaarisia lignaaneja ja fenyylietanoli-glykosidiaineita [12].

3.2 Vaurioituneiden HK-2-solujen eluutiofraktioiden sytoprotektiivisen aktiivisuuden seulonta

Runsaasti glukoosia ja rasvaa sisältävä hoito alensi merkittävästi munuaistiehyiden HK-2-epiteelisolujen eloonjäämisastetta ja toisti menestyksekkäästi alkuvaiheen diabeettisen nefropatian in vitro munuaissoluvauriofenotyypin [12]. Kuudesta gradientilla eluoidusta fraktiosta fraktio A (vesieluaatti), fraktio B (20 % etanolieluaattia), fraktio C (40 % etanolieluaattia) saattoi merkittävästi lisätä vaurioituneiden HK-2-solujen elinkelpoisuutta, kun taas D-F-fraktioilla oli erittäin rajallinen suojavaikutus myöhempään interventiokonsentraatioon . 50}mg·L⁻½. tietojen mallinnus [12].

3.3 Spektri-vaikutus-suhde kemometrisen seulonnan tulokset

Partial‑least‑squares regression and grey‑correlation‑analysis jointly screened eight candidate compounds which simultaneously satisfied VIP > 1 and grey‑correlation‑degree >0,7: 8-epideoksilogaanihappo, geniposidiinihappo, pinoresinoli, betaiini, syringiini, tubulosidi A, akteosidi, cistanosidi E [12]. Näitä aineosia pidettiin tärkeimpänä anti-DN:n sytoprotektiivisen aktiivisuuden edistäjinäCistanche tubulosavesipitoiset uutefraktiot. Neljä edustavaa puhdasta ainetta (8-epideoksilogaanihappo, geniposidiinihappo, pinoresinoli, syringiini) valittiin muihin yhden yhdisteen soluvalidaatiomäärityksiin [12].

3.4 Yhden yhdisteen sytoprotektiivinen validointi

MTT:n tulokset osoittivat sen8-epideoksilogaanihappo ja geniposidiinihappoSillä oli huomattavia suojaavia vaikutuksia ja palautettiin runsaasti glukoosia ja rasvaa sisältävien vaurioituneiden HK-2-solujen elinkyky, kun taas pinoresinoli ja syringiini osoittivat suhteellisen heikkoa aktiivisuutta testipitoisuuksissa [12]. Siksi näistä kahdesta iridoidiglykosidimolekyylistä tuli keskeisiä lyijyyhdisteitä alavirran mekanistiseen tutkimiseen.

Antioksidantti-biokemiallinen havaitseminen: verrattuna vammamalliryhmään hoito 8-epideoksilogaanihapolla tai geniposidiinihapolla lisäsi merkittävästi antioksidanttientsyymien SOD- ja GSH-Px-aktiivisuustasoa, mikä lievensi korkean glukoosin ja runsaan rasvan stimulaation aiheuttamaa solunsisäistä oksidatiivista stressiä [12].

Tulehdustekijän ELISA-mittaus: molemmat yhdisteet voivat merkittävästi vähentää vaurioituneiden munuaisten tubulussolujen vapauttamien proinflammatoristen välittäjien IL-1:n, TNF:n ja TGF:n eritystä, mikä tukahduttaa munuaisfibroosin etenemiseen liittyvän paikallisen tulehdusvasteen [12].

Western blot -proteiinin ilmentymisanalyysi: Korkean glukoosin ja rasvan stimulaatio laukaisi tyypillisen epiteeli-mesenkymaalisen siirtymäilmiön (EMT) HK-2-soluissa: kohonnut profibroottinen markkeri-proteiini-SMA ja kollageeni Ⅰ -ekspressio, samalla adherenttien liitoskohdan proteiinien E-kertymä vähensi merkittävästi. Yhdistelmätoimenpiteen jälkeen -SMA:n ja kollageenin Ⅰ ekspressio säädeltiin alas, E-kadheriinin ilmentyminen palautui. Lisäksi PI3K-Akt-signalointireitin avainproteiinien fosforylaatiotaso (p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt-suhde) laski selvästi [12]. Nämä havainnot osoittivat, että 8-epideoksilogaanihappo ja geniposidiinihappo voivat estää PI3K-Akt-signalointikaskadin epänormaalin aktivoitumisen. Inhiboimalla PI3K-Akt:n yliaktivaatiota nämä kaksi iridoidiglykosidiaineosaa tukahduttivat oksidatiivisen stressivaurion, tulehdusvasteen ja tubulussolujen EMT-prosessin lievittääkseen diabeettisen nefropatian patologiaan liittyvää munuaistiehyiden soluvaurioita [12].

4. Keskustelu

Diabeettisen nefropatian patogeneesi edustaa monitekijäistä vuorovaikutteista patologista prosessia: hyperglykemia-lipotoksisuus aiheuttaa oksidatiivisen stressin purskeen, stimuloi voimakasta proinflammatoristen sytokiinien vapautumista, ajaa munuaistiehyiden epiteeli-mesenkymaalista siirtymää, mikä lopulta etenee peruuttamattomaan munuaisten interstitiaalifibroosiin [13-14]. PI3K-Akt-signalointiakselilla on keskeinen säätelyasema tässä patologisessa ketjussa; PI3K-Akt:n jatkuva liiallinen aktivoituminen edistää munuaistiehyiden epiteelisolujen EMT:n etenemistä, nopeuttaa solunulkoisen matriisin kerrostumista ja fibroottisten leesioiden kehittymistä [15-16]. Tästä syystä PI3K-Akt-reittiin kohdistuvilla farmakologisilla aineilla on lupaava arvo DN-interventiotutkimuksessa.

Cistanche tubulosavesipitoinen keittäminen vastaa perinteistä kliinistä antotapaa TCM-käytännössä ja sisältää runsaasti vesiliukoisia vaikuttavia aineita. Aikaisemmissa farmakologisissa tutkimuksissa kiinnitettiin pääasiassa huomiota lipofiilisiin fenyylietanoidiglykosidifraktioihin, jotka on saatu alkoholiuutolla; vesiuutteella rikastettujen iridoidiglykosidien ja betaiinin biologiset toiminnot ansaitsevat syvempää huomiota [17-18]. Spektri-vaikutussuhteen analyyttinen strategia rajaa tehokkaasti bioaktiivisten aineiden ehdokkaita monimutkaisista monikomponenttisista yrttiuutteista ilman ikävää toistuvaa jokaisen yksittäisen yhdisteen eristämistä ja puhdistusta, mikä tarjoaa tehokkaan ratkaisun TCM-monikomponenttisten valmisteiden nykyaikaiseen farmakologiseen tutkimukseen [19-20].

Yhteenveto esikliinisistä in vitro kokeellisista tuloksista, 8-epideoksilogaanihappo ja geniposidiinihappo (iridoidiglykosidityyppiset ainesosat erotettuCistanche tubulosavesiliukoiset fraktiot) voisivat suojata HK-2-munuaistiehyet-epiteelisoluja korkean glukoosin ja runsaasti rasvaa aiheuttavilta vaurioilta. Niiden sytoprotektiiviseen mekanismiin kuuluu kolme toisiinsa liittyvää ulottuvuutta: solujen antioksidanttipuolustuskapasiteetin parantaminen, tulehdusta edistävien tekijöiden liiallisen erittymisen hillitseminen ja PI3K-Akt-ohjatun epiteeli-mesenkymaalisen siirtymävaiheen etenemisen estäminen, jotka yhdessä vähentävät solutason patologisia muutoksia, jotka jäljittelevät diabeteksen varhaisen vaiheen [1-neph]atropiaa. Tämä tarjoaa uutta molekyylitason prekliinistä näyttöä, joka selittää munuaisten suojaavan tehonCistanche tubulosavesipitoinen uute. Sillä välin spektrivaikutusten mallinnus osoitti myös, että betaiini, lignaanityyppinen pinoresinoli sekä useat hyvin dokumentoidut fenyylietanoidiglykosidit voivat myös edistää anti-DN-bioaktiivisuutta; Synergistisiä monikomponenttisia yhdistettyjä vaikutuksia ei pidä jättää huomiotta monimutkaisissa yrttiuutejärjestelmissä [12].

Tällä olemassa olevalla tutkimuksella on edelleen huomattavia rajoituksia: Ensinnäkin kaikki mekaaniset havainnot ovat peräisin in vitro HK-2-solumallikokeista, joista puuttuu in vivo -eläinmallin validointi. Soluviljelyjärjestelmä ei voi täysin toistaa koko organismin diabeettisen nefropatian patologian integroitunutta monimutkaisuutta, mukaan lukien glomerulaariset vauriot, munuaisten ja solujen väliset risteykset ja metabolisen homeostaasin muutokset in vivo. Toiseksi tämä tutkimus keskittyi pääasiassa kahteen lyijy-iridoidiglykosidiyhdisteeseen; synergistinen vuorovaikutus useiden aktiivisten ainesosien välillä raakavesiuutteessa vaatii lisätutkimuksia. Kolmanneksi 8-epideoksilogaanihapon ja geniposidiinihapon farmakokineettistä käyttäytymistä koskevaa tutkimusta ei ole olemassa: biologinen hyötyosuus, jakautuminen kudoksiin ja aineenvaihduntatilanne in vivo -annon jälkeen ovat edelleen tuntemattomia. Neljänneksi ihmisillä tehdyistä kliinisistä tutkimuksista ei ole vielä saatu näyttöä, ja kliinisen muutoksen toteutettavuus vaatii lisäarviointia.

Seurantatutkimussuunnat: In vivo diabeettisen nefropatian eläinmalleja (STZ-indusoidut diabeettiset rotta-/hiirimallit) voidaan ottaa käyttöön 8-epideoksilogaanihapon ja geniposidiinihapon in vivo renoprotektiivisen tehokkuuden todentamiseksi, munuaiskudoksen ja seerumin prodeksi-biokemiallisen patologian, virtsan variiini-proteiinitason tarkkailemiseksi. Monikomponenttiset yhdistetyt interventioryhmät tulisi järjestää tutkimaan eri luokkien mahdollisia synergistisiä vaikutuksia.Cistanche tubulosaainesosat. Suorita farmakokineettisiä tutkimuksia lyijyyhdisteiden imeytymisen, jakautumisen ja metabolian ominaisuuksien selvittämiseksi. Myöhemmässä vaiheessa tarvitaan hyvin suunniteltua esikliinistä turvallisuusarviointia ja kliinistä tutkimusta ennen kuin nämä perustutkimuksen tulokset muunnetaan käytännön terapeuttisiksi viitteiksi.

Laajemmasta TCM-teorian näkökulmastaCistanche tubulosavirkistää munuais-yangia ja täydentää veren esanssia. Nykyaikaiset farmakologiset tutkimukset ovat paljastaneet sen suojaavat vaikutukset lisääntymisjärjestelmään, luu-aineenvaihduntaan ja munuaisvaurioihin. Erityyppiset kemialliset ainesosat voivat vastata tämän TCM-yrtin erilaisia ​​farmakologisia ilmenemismuotoja. Multi-omics yhdistetty spektri-vaikutussuhteen analyyttinen työnkulku toimii tehokkaana työkaluna klassisten tonic-yrttien usean kohteen farmakologisten ominaisuuksien salauksen purkamiseen tulevassa TCM:n modernisointitutkimuksessa.

5. Johtopäätös

1. UPLC-Orbitrap-MS/MS-pohjainen fytokemiallinen profilointi havaitsee 72 jaettua ainesosaa peräkkäin eluoiduista fraktioistaCistanche tubulosavesiuute, joka kattaa iridoidiglykosidit, fenyylietanoidiglykosidit, lignaanit ja muut vesiliukoiset komponentit. Vesi- ja heikkolujuusetanoli-eluointifraktioilla on huomattava sytoprotektiivinen aktiivisuus runsaasti glukoosia ja rasvaa sisältäville vaurioituneille HK-2 munuaisten tubulusepiteelisoluille . 2. Spektrivaikutussuhteen kemometrinen mallinnus tunnistaa kahdeksan antiaktiivista yhdistettä-DN-ehdokasyhdistettä. Niistä kaksi iridoidiglykosidia: 8-epideoksilogaanihappo ja geniposidiinihappo osoittavat vahvoja suojaavia vaikutuksia vaurioituneisiin HK-2-soluihin yhden yhdisteen validointimäärityksissä . 3. 8-epideoksilogaanihappo ja geniposidiinihappo voivat nostaa SOD:ta, GSH-Px-antioksidantti-entsyymi-NF-mediaa, suptoria, suptoria. TGF:n vapautuminen, EMT:hen liittyvien proteiinimarkkerien muokkaaminen ja sytoprotektiivinen vaikutus osittain estämällä yliaktivoitunutta PI3K-Akt-signalointireittiä. 4. Nykyinen näyttö rajoittuu in vitro solutason kokeisiin. Lisää in vivo -eläinmallien todentamista, farmakokineettisten ominaisuuksien analyysiä ja turvallisuusarviointia tarvitaan edistääkseen näiden bioaktiivisten aineiden translaatiotutkimusta.Cistanche tubulosa.

Kiitokset

Tämä selosteellinen katsaus syntetisoi julkisesti julkaistuja prekliinisiä kokeellisia resursseja. Kiitos alkuperäiselle tutkimusryhmälle kasvien uuttamisen, massaspektrometrian ja solumolekyylien laboratoriotyön suorittamisesta.

Viitteet

[1] Carracher A M, Marathe P H, Close K L. International diabetes federation 2017[J]. Journal of Diabetes, 2018, 10(5): 353-356.

[2] Fakhruddin S, Alanazi W, Jackson K E. Diabetes-indusoidut reaktiiviset happilajit: Niiden muodostumismekanismi ja rooli munuaisvauriossa [J]. Journal of Diabetes Research, 2017, 2017: 8379327.

[3] Lavoz C, Rayego-Mateos S, Orejudo M, et ai. Voisiko IL-17A olla uusi terapeuttinen kohde diabeettisessa nefropatiassa? [J]. Journal of Clinical Medicine, 2020, 9(1): 272.

[4] Tu P F, Jiang Y. Päivitä klassisen kirjallisuuden tutkimus Cistanches Herbasta[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2022, 47(20): 5670-5679.

[5] Xiang X J, Zhang P P, Ye Q Q, et ai. Tutkimus Xiaoyu Xiezhuo Decoctionin vaikutuksesta munuaisfibroosin ehkäisyyn ja hoitoon diabeettisilla nefropatiahiirillä [J]. Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy, 2022, 39(4): 442-449.

[6] Fu Z, Liu Y. Suvun farmakologiset edistysaskeleetCistanche: Arvostelu[J]. Phytotherapy Research, 2021, 35(8): 4234-4252.

[7] Jiang Y, Wang Y-F. Perinteiset käyttötarkoitukset, fytokemia ja farmakologiaCistanche tubulosa[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2020, 259: 112968.

[8] Ran Z, Ju B-W, Cao L, et ai. Mikrobiomi-aineenvaihduntaanalyysi paljastaa verbaskosidin mahdollisen vaikutuksen kognitiivisen heikkenemisen lievittämiseen db/db-hiirillä[J]. Food & Function, 2023, 14(8): 3488-3508.

[9] Zhi Y-J, Zhen Y-Q, Tian W, et ai. Tutkimuksen edistyminen kemiallisten aineosien ja farmakologisten vaikutusten osaltaCistanche deserticolaja laatumerkkien ennustava analyysi (Q-Marker)[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2021, 52(9): 2758-2767.

[10] Liu T-H, Ma C, Wang B-C, et al. Cistanches Herba -vesiuutteen tehokkaat komponentit ja mekanismi diabeettista nefropatiaa vastaan ​​perustuen spektri-vaikutussuhteeseen[J]. Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy, 2024, 41(10): 1313-1323.

[11] Zhang Y, Li H-Y. Spektrivaikutussuhteen tutkimusstrategia perinteisille kiinalaisen lääketieteen kompleksiuutteille[J]. Chinese Pharmaceutical Journal, 2022, 57(12): 969-975.

[12] Liu T H, Ma C, Wang B C, et ai. Cistanches Herba -vesiuutteen tehokkaat komponentit ja mekanismi diabeettista nefropatiaa vastaan ​​perustuen spektri-vaikutussuhteeseen[J]. Chin J Mod Appl Pharm, 2024, 41(10): 1313-1323.

[13] Xu Z, Xiang X, Su S L, et ai. Multi-omiikka-analyysi paljastaa db/db-hiirten diabeettisen munuaissairauden patogeneesin ja Salvia miltiorrhiza [J]:n useiden bioaktiivisten yhdisteiden yhdistelmän hoitomekanismit. Frontiers in Pharmacology, 2022, 13: 987668. [14] Zhou R, Liao J, Cai D, et ai. Nupr1 välittää munuaisfibroosia aktivoimalla fibroblasteja ja edistämällä epiteeli-mesenkymaalista siirtymää [J]. FASEB-lehti, 2021, 35(3): e21381.

[15] Dian M-J, Li J, Zhang X-L, et ai. MST4 säätelee negatiivisesti HCC-solujen EMT:tä, invaasiota ja etäpesäkkeitä inaktivoimalla PI3K/AKT/Snail1-akselin [J]. Journal of Cancer, 2021, 12(15): 4463-4477.

[16] Zhang B-B, Zeng M-N, Li B-K ym. Arbutiini heikentää LPS:n aiheuttamaa akuuttia munuaisvauriota estämällä tulehdusta ja apoptoosia PI3K-Akt/Nrf2-reitin [J] kautta. Phytomedicine, 2021, 82: 153466.

[17] Wu Y-Y, Zhang X-H. Iridoidiglykosidit suvustaCistanche: Fytokemia ja bioaktiivisuus[J]. Natural Product Research, 2023, 37(14): 2311-2326.

[18] Cao L, Ju B-W, Ran Z, et al. Herba cistanchen fenyylietanoliglykosidien suojaavat vaikutukset hiirille, joilla on kolestaattinen maksasairaus [J]. Chinese Journal of Pharmacovigilance, 2023, 20(3): 286-291.

[19] Wang L, Chen J-B. Spektri-vaikutuskorrelaation soveltaminen perinteisen kiinalaisen lääketieteen bioaktiivisten aineiden seulonnassa [J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2023, 48(7): 1801-1808.

[20] Li M-X, Huang S-Q. Yrttivalmisteiden bioaktiivisten ainesosien kemometrisesti avustettu seulonta: pieni katsaus[J]. Journal of Separation Science, 2024, 47(6): 2300897.