Polyfenolirikas Ocimum Gratissimum -uute esti syklofosfamidin myrkylliset vaikutukset Wistar-rottien munuaisten toimintaan

Lisätietoja saat ottamalla yhteyttä:oscar.xiao@wecistanche.com

Abstrakti

Tausta:Syklofosfamidi (CP) on yksi tehokkaimmista ja edullisista kemoterapioista, joita käytetään kliinisissä olosuhteissa monenlaisia ​​kasvaimia vastaan. Sen yhteys nefrotoksisuuteen rajoittaa kuitenkin sen terapeuttista käyttöä. Ocimum gratis simum -lehti on lääkekasvi, jolla on lukuisia farmakologisia ja terapeuttisia tehokkuuksia, kuten antioksidanttisia, tulehdusta ja apoptoottisia ominaisuuksia.

Menetelmät: Tämä tutkimus suunniteltiin arvioimaan Ocimum gratissimumin (OG) suojaavaa vaikutusta CP:n aiheuttamaa munuaisten vajaatoimintaa vastaan ​​rotilla. Rotille esikäsiteltiin 400 mg/kg Ocimum gratissimum (Ocimum G.) -lehtiuutetta 4 päivän ajan ja sitten 50 mg/kg CP:tä annettiin samanaikaisesti päivästä 5 päivään 7 yhdessä Ocimum G. Munuaistoiminnan markkerien kanssa. ja oksidatiivinen stressi, ruoan ja veden saanti, elektrolyytit, aldosteroni, leukosyyttien infltraatio, tulehdus ja histopatologiset muutokset arvioitiin.

Tulokset:CP:llä hoidetuissa ryhmissä havaittiin ilmeistä munuaistulehdusta ja munuaisvaurioita. Ocimum G.:n lehtiuutteen antaminen esti kuitenkin oksidatiivista stressiä, munuaisvaurioita, heikentynyttä tulehdusta, lisääntynyt aldosteronin tuotanto ja vähentynyt natriumionien ja veden menetys rotilla. Plasman kreatiniini-, urea- ja virtsan albumiinikonsentraatiot normalisoituivat Ocimum G. -uutteen antamisen jälkeen CP:llä hoidetuilla rotilla. Ocimum G. alensi myös interleukiini-(IL)-6, C-reaktiivisen proteiinin pitoisuutta plasmassa sekä myeloperoksidaasin ja malondialdehydin aktiivisuutta CP-käsitellyissä rotissa.

Johtopäätös: Ocimum G. esti munuaisvaurioita ja tehosti munuaisten toimintaa estämällä tulehdusta ja hapettimen aiheuttamaa CP-toksisuutta. Ocimum G.:n tehokkuus liittyy erilaisten fytokemikaalien läsnäoloon kasveissa.

Avainsanat:Antioksidantti, kreatiniini, syklofosfamidi, Ocimum gratissimum -lehti, munuainen, natrium.

Tausta

Syklofosfamidi (CP) on antineoplastinen yhdiste, joka liittyy typpisinappiin. Sitä käytetään kliinisessä ympäristössä monien erilaisten syöpäsairauksien hoitoon ja immunosuppressiivisessa hoidossa elinsiirtojen jälkeen, autoimmuunisairauksien, kuten nivelreuman, Wegenerin granulomatoosin ja lasten nefriittisyndrooman hoidossa [1]. Huolimatta lääkkeen laajasta kliinisestä käytöstä, CP:n tiedetään aiheuttavan lukuisia annoksesta riippuvaisia ​​elinvaurioita, mikä siksi rajoittaa sen terapeuttista käyttöä kliinisissä olosuhteissa. Koska sen tiedettiin olevan hyödyllinen lasten nefroottisen oireyhtymän hoidossa [1], sen on päinvastoin joissain aiemmissa tutkimuksissa raportoitu aiheuttavan virtsarakon vaurioita [2, 3] ja aiheuttavan munuaistoksisuutta, kun sitä käytetään väärin CP:n käytön vuoksi. yliannostus [4–6]. Te CP:n aktiivinen metaboliitti, 4-hydroksisyklofosfamidi, tautomeroituu osittain aldosfosfamidiksi, joka puolestaan ​​hajoaa fosfataasilla verenkierrossa ja elävissä soluissa ja tuottaa kaksi sytotoksista metaboliittia, fosforamidisinappia ja akroleiinia [6]. Fosforamidisinapin terapeuttisen vaikutuksen on aiemmin raportoitu olevan vastuussa kasvainten vastaisista vaikutuksista [6], kun taas akroleiini on vastuussa CP:n sytotoksisista vaikutuksista, kuten verenvuotokystiitistä lääkkeen annon aikana [2, 7]. Te CP:n myrkyllinen metaboliitti vahingoittaa eläviä kudoksia heikentämällä kudoksen endogeenistä antioksidanttijärjestelmää synnyttämällä reaktiivisia happivapaita radikaaleja, jotka ovat mutageenisia eläville soluille. Suuren CP-annoksen antamisen on raportoitu lisäävän lipidien peroksidaatiota ja vähentävän endogeenisten entsymaattisten ja ei-entsymaattisten antioksidanttien määrää [7, 8]. Aiemmat tutkimukset ovat kuvanneet antioksidanttiaineiden hyödyllisiä käyttöjä yhdessä kemoterapian kanssa estämään lääkkeen sivuvaikutuksia kehon kudoksissa [7, 9, 10]. Antioksidantit, kuten kolaviron, osoittautuivat tehokkaiksi CP:n kardiotoksisuuden ehkäisyssä rotilla [11]. Näin ollen yhdistelmähapettumisenestoaineYhdessä kemoterapialääkkeiden kanssa voi olla potentiaalinen terapeuttinen lähestymistapa CP:n sytotoksisen kehittymisen estämiseksi tai pysäyttämiseksi. Ocimum gratissimum (Ocimum G.) on Lamiaceae-heimo, joka kuuluu ruohokasveihin. Se tunnetaan neilikkana tai afrikkalaisena basilikana monissa trooppisten alueiden maissa (Aasia, Intia, Brasilia ja Länsi-Afrikka jne.). Sitä tavataan laajasti Nigeriassa [12]. Monet tämän maan osavaltiot (Nigeria) käyttivät Ocimum G.:ta kastikkeena ja kasviskeittona. Ocimum G.:n lehdissä ja sievissä on havaittu olevan polyfenoleja ja muita bioaktiivisia yhdisteitä [13, 14]. Ocimum gratissimum -kasveja käytetään erilaisten sairauksien, kuten ripulin, haavaisen paksusuolitulehduksen, kuumeen ja katarrin hoitoon [14–17]. Kasvilla on monia farmakologisia etuja sen anti-inflammatoristen, antioksidanttisten, antibakteeristen, diabeteksen ja malariaa ehkäisevien ominaisuuksien ansiosta [14, 18–20]. Ocimum G. -uutteen antimikrobinen vaikutus on testattu in vitro erilaisia ​​ihmisen patogeenejä vastaan, kuten Klebsiella pneumonia, Staphylococcus aureus, Escherichia, Vibro spp, Enterobacter spp, Enterococcus faecalis jne. Ocimum G:n eteerisen öljyn antifungaalinen vaikutus .-uutteita on havaittu in vitro [19, 21, 22], ja Ocimum G.:tä on käytetty hyttysten valittajana [23]. Äskettäinen eläintutkimus ehdotti Ocimum G. -uutteiden suojaavan vaikutuksen tärkeyttä verenpaineen epäsäännöllisyyksien ehkäisyssä kobolttikloridin myrkyllisyyttä vastaan ​​[24] sekä maksafibroosiin liittyvien sydämen poikkeavuuksien lieventämisessä interleukiinia säätelemällä-6 signalointireittiä [25] tai indusoimalla antioksidanttisia vaikutuksia [26]. Ocimum G. -lehtien vesipitoinen lehtiuutte osoitti antioksidanttisia vaikutuksia kobolttikloridin aiheuttamaa sydän- ja munuaisvauriota vastaan ​​[24] ja esti mahahaavoja vähentämällä mahahapon eritystä ja haavaumia [27]. Myös Ocimum G. -uutteista saatu ursolihappo osoitti sirppiä estävää vaikutusta [28] ja syöpää ehkäisevää vaikutusta [29, 30]. Lisäksi Ocimum G.:n eteeristen öljyjen on osoitettu olevan endoteelistä riippuvaisia, verisuonia rentouttavia ominaisuuksia rotilla [31]. In vivo- ja in vitro -tutkimuksissa on arvioitu, että eugenoli, Ocimum G.:n lääkeaine, alentaa veren glukoositasoja alfa-glukosidaasia estämällä [32]. Lisäksi kliininen tutkimus vahvisti Ocimum G:n farmakologisen riittävyyden osoittamaan samanlaista aktiivisuutta kuin klooriheksidiini plakkia ja ientulehdusta vastaan ​​[33]. Kaikkien näiden Ocimum G.:n ominaisuuksien perusteella oletimme, että Ocimum G. saattaa olla mahdollinen hoitokeino, kun sitä käytetään yhdessä CP:n kanssa estämään tai lopettamaan CP:n haittavaikutuksia. Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli siksi tutkia polyfenolirikkaan Ocimum gratissimum -lehtiuutteen hyödyllisiä vaikutuksia CP:n aiheuttamaan munuaistoksisuuteen Wistar-urosrotilla.

Napsauta tätä saadaksesi lisätietoja

Materiaalit ja menetelmät

Syklofosfamidi-injektio (200 mg/10 ml) hankittiin Celon Laboratorylta (Hyderabad, Intia); ketamiinihydrokloridi-injektio (50 mg/10 ml) ostettiin yhtiöltä Popular Pharmaceuticals Ltd., (Gazipur, Bangladesh); Biokemiallisten parametrien määrityssarjat hankittiin Randox Laboratories Limitediltä (Crumlin, UK) jne. 1-difenyyli-2-pikryylihydratsyyli (DPPH), metanoli, natriumkarbonaatti, Trolox ja Folin–Ciocâlteu-reagenssi ostettiin Merck & Co:lta, Kenilworth, NJ, USA. Käytettyjä instrumentteja ovat kaasukromatografia-massaspektrometri (GCMS-QP2010 SE, Shimadzu Corporation, Kioto, Japani) ja ultravioletti-näkyvä spektrofotometri (Beckman, DU 7400, USA), Soxhlet-laite, pyöröhaihdutin, mikroskooppi (Olympus CH; Olympus). , Tokio, Japani); kamera (Leica DM 750).

Ocimum gratissimum -lehtien polyfenoliuutteen valmistus

Ocimum gratissimum -lehdet kerättiin puutarhasta Usista, Ekitin osavaltiosta Nigeriasta. Ocimum gratissimumin keräämiseen hankittiin asiaankuuluvat laitoksen luvat. Tämä tutkimus noudattaa kansainvälisiä, kansallisia ja/tai institutionaalisia ohjeita laitoksen eri osien käytöstä. Kasvin näytteet vahvisti herra Omole, kasvitieteen laitoksen herbaariumin kuraattori, Obafemi Awolowo University, Ile-Ife, jossa voucher-näyte (1945) talletettiin yliopiston herbaarioon. Polyfenolirikas uute saatiin Ocimum G.:n lehdistä (900g) aiempien kasvin uuttomenetelmiemme mukaisesti [14]. Metanolia käytettiin lopullisen uuttotuotteen, Ocimum gratissimum (PREOG) -lehtien polyfenolipitoisen uutteen saamiseksi alennetussa paineessa 4 0 asteessa käyttämällä pyöröhaihdutinta. Saatu uutekonsentraatti pakastekuivattiin lyofilisaattorin avulla. Jäännös (8{{40}},85 g) säilytettiin petrimaljoissa tiukasti suljetuilla kansilla ja säilytettiin −20 asteessa, kunnes sitä tarvittiin tutkimukseen. Saatu Te OG -uute liuotettiin veteen (0,2 ml/annos) ja annettiin rotille suunnitellun annostuksen mukaisesti. (GC-MS) OG-uutteiden kaasukromatografia-massaspektrometria-analyysi Saadun uutteen kemiallinen koostumus tarkistettiin kaasukromatografia-massaspektrometrialla (GC-MS). Chavez et ai. [34] menetelmä otettiin käyttöön pienin muutoksin. Yhdisteiden määrittämiseen käytettiin sulatettua piidioksidikapillaarikolonnia (kalvon paksuus 30 × 0,25 HP-5Ms, 0,25 μm), joka sisälsi kantokaasuna heliumia (virtausnopeus 1/ml). Uunin lämpötila asetettiin 40 asteeseen ja sitä pidettiin 5 minuuttia, minkä jälkeen sitä nostettiin asteittain 3 astetta/min 270 asteeseen asti. Jakosuhteeksi asetettiin 60:1. Liitososille ja ionilähteille asetettiin 180 asteen lämpötila ja massaspektrometrille rajapintalämpötilaksi 240 astetta. Ionisaatioenergiamääräksi käytettiin 70 eV, kun taas elektroniiskutila (EI) valittiin tuottamaan vakaat ja toistettavat massaspektrit, ja näytteiden ajamiseen käytettiin arvoaluetta 50–650 m/z. MS-viiveaika ennen skannausta oli 5 minuuttia. Saadut yhdisteet esitettiin taulukossa 2. Kokonaisfenolipitoisuuden määrittäminen Uutteiden kokonaisfenolipitoisuus (TPC) arvioitiin käyttämällä Folin-Ciocâlteu-tekniikkaa, kuten ovat kuvanneet Gulcin et ai. [35] muutamalla muutoksilla. Lyhyesti sanottuna 100 µl (0,5 mg/ml) Ocimum G.:n polyfenolipitoisia uutteita laitettiin erillisiin tavallisiin putkiin. Noin 500 µl (1 % tilavuus/tilavuus) Folin-Ciocâlteu-fenolireagenssia lisättiin jokaiseen putkeen, joka sisälsi Ocimum G. -uutetta, ja putkien annettiin seistä 5 minuuttia. ja sitten pyörteillä. Kun oli annettu seistä 5 minuuttia, noin 400 µl (20 % w/w) natriumkarbonaattia lisättiin eriin, joita inkuboitiin sitten pimeässä huoneenlämpötilassa 90 minuuttia. Värinkehitystä varten. Kunkin seoksen absorbanssi arvioitiin ultravioletti-näkyvällä spektrofotometrillä (Beckman, DU 7400, USA) 765 nm:ssä. Nollanäytteenä käytettiin natriumkarbonaattiliuosta ilman Folin-Ciocâlteu-fenolireagenssia. Kalibrointikäyrää varten käytettiin gallushappostandardeja. Näytteiden TPC:t määritettiin gallushappostandardien lineaarisesta regressiosta. Tulokset esitettiin gallushappoekvivalentteina (GAE) grammaa kohti Ocimum gratissimum -uutteen kuivapainoa (mg GAE/g). Toimenpide suoritettiin kolmena kappaleena (n=3). DPPH:n vapaita radikaaleja poistava määritys Uutteen vapaita radikaaleja poistava aktiivisuus määritettiin menetelmän mukaisesti, jonka ovat kuvanneet RakMai et ai. [36] pienin muutoksin. Noin 2 ml DPPH-metanoliliuosta (180 μmol/L) lisättiin ja sekoitettiin uutteen kanssa 0,1 mg/ml. Te alikvootteja inkuboitiin pimeässä 25 asteessa. Näytteen absorbanssi määritettiin käyttämällä spektrofotometriä aallonpituudella 517 nm eri aikavälein välillä 0 ja 60 minuuttia. Uutteiden alikvootteja ilman DPPH-metanoliliuosta käytettiin nollanäytteinä. Trolox, synteettinen analogivitamiiniE:tä käytettiin positiivisena kontrollina. Alla olevaa yhtälöä käytettiin uutteiden huuhteluominaisuuksien arvioimiseen. Toimenpide suoritettiin kolmena kappaleena (n=3). Kun näyte on uute plus DPPH, nollakoe on vain uute, A kontrolli on kontrolliliuoksen absorbanssi (sisältää vain DPPH:ta). Eläinten hoito Tutkimukseen käytettiin 28 (28) urospuolista Wistar-rottaa, jotka painoivat 120-180 g. Tey hankittiin Animal Holding of College of Health Sciences -yliopistosta, Obafemi Awolowo University, Ile-Ife. Kaikkia rottia pidettiin tavanomaisissa häkeissä 1 viikko, jotta ne sopeutuivat 28-32 asteen ympäristöolosuhteisiin, ja niille annettiin vapaa pääsy ruokavalioon ja puhtaaseen juomaveteen. Kokeen hyväksyi Obafemi Awolowon yliopiston Health Research Ethics Committee (HREC), ja tutkimus on kuvattu ARRIVE-ohjeiden mukaisesti (eläimet tutkimuksessa: raportointi in vivo -kokeesta) [37].

Cistanche väsymystä vastaan

Histopatologiset tutkimukset

Kudokset leikattiin {{0}} μm paksuiksi paloiksi mikrotomilla, kiinnitettiin objektilaseille ja värjättiin PAS:lla. Diat tarkkailtiin valomikroskoopilla (Olym pus CH; Olympus, Tokio, Japani) ja mikrokuvat otettiin Leica DM 750 -kameralla ×400 mag-ilmoituksilla. Munuaiskudososan arvioi sertifioitu patologi, joka oli sokeutunut kokeelliselle protokollalle. Glomerulaarinen vaurio pisteytettiin asteiden 0 ja 4 välillä arvioimalla mesangiaalisen proliferaation, tyvikalvon paksuuden ja fibrinoidimuutoksia. Tubulusvaurio pisteytettiin asteiden 0 ja 4 välillä arvioimalla tyhjiön rappeutumista, hilseilyä, tubulusten rappeutumista, proksimaalista tubulusnekroosia ja kipsien muodostumista. Tubulointerstitiaaliset tulehdukselliset infiltraatit pisteytettiin asteiden 0 ja 2 välillä arvioimalla väliaineessa olevien tulehdussolujen monimuotoisuutta ja infiltraattien esiintymistä tubulusten epiteelissä (taulukko 1) [44]. Munuaisvaurion kokonaispistemäärä 0–2 edusti ei mitään / lievää nefrotoksisuutta, 3–6 kohtalaista munuaistoksisuutta ja 7–10 vakavaa nefrotoksisuutta [44].

Tulokset

Ocimum gratissimum -lehtiuutteen kaasukromatografia-massaspektrometria-analyysi, fenolipitoisuudet ja DPPH-poistokyky GC-MS-analyysi paljasti joitakin Ocimum gratissimum -lehtiuutteen bioaktiivisia yhdisteitä (taulukko 2). Uutteen polyfenolipitoisuudet tunnistettiin Folin–Ciocâlteu-menetelmällä (taulukko 2). Ocimum G. -uutteesta saatu kokonaisfenolipitoisuus (TPC) (80,36±0},50 mg GAE/100 g) paljasti, että Ocimum gratissimum -uutte sisältää runsaasti fenolia. Uutteen DPPH-puhdistuskykyä arvioitiin myös laskemalla IC50-arvo, joka liittyy uutteen määrään, joka pystyy poistamaan 50 prosenttia reaktioseoksen sisältämistä vapaista radikaaleista. Uutteen IC50-arvo (22,12±0,43 mg/ml) oli korkea ja tämä osoitti korkeaaantioksidanttiOcimum gratissimum -lehtien aktiivisuus. Siten kasvin korkean fenolipitoisuuden tehtävä osoitti sen kyvyssä poistaa vapaita radikaaleja (taulukko 2).

PREOGin ja syklofosfamidin vaikutus kreatiniinipuhdistumaan

Merkittävä munuaisten kreatiniinipuhdistuman lasku havaittiin pelkällä CP-ryhmällä verrattuna kontrolliin (p<0.05). however,="" the="" preog-treated="" groups="" revealed="" a="" significant="" increase="" in="" the="" creatinine="" clearance="" when="" compared="" with="" cp="" alone="" treated="" group=""><0.05)>

Keskustelu

Tässä tutkimuksessa on viitteitä kohonneista oksidatiivisen stressin muuttujista, kuten lipidiperoksidaatiosta, vetyperoksidista (H2O2) ja typpioksidista (NO), mikä viittaa siihen, että rottien munuaisten kalvon lipidit ja proteiinit, joita on hoidettu Yksin CP vaurioitui. Myös antioksidanttientsyymien, kuten superoksididismutaasin ja katalaasin, aktiivisuus ja ei-entsymaattisen antioksidantin, pelkistyneen glutationin, määrä väheni ryhmässä, jota hoidettiin pelkällä CP:llä. Antioksidanttien väheneminen pelkällä CP:llä käsiteltyjen rottien munuaissoluissa oli osoitus redox-homeostaasin epätasapainosta. CP:n on aiemmin osoitettu aiheuttavan oksidatiivisia vaurioita, tulehdusta ja solunekroosia tai apoptoosia reaktiivisten happilajien (ROS) aktivoitumisen ja edistämisen jälkeen metaboliittinsa, akroleiinin, kautta [7, 11, 14], mikä myöhemmin laukaisee happisolujen deaktivoitumisen ja vähenemisen.antioksidanttinen puolustussairastuneiden organismien kapasiteetit [10, 11, 45]. Tässä tutkimuksessa ROS:n ylituotanto on suurempi kuin endogeeninenantioksidanttikapasiteetti, laukaisee oksidatiivisen stressin ja vahingoittaa sen jälkeen CP-käsiteltyjen rottien munuaissoluja, mikä ilmeni lisääntyneillä oksidatiivisen stressin merkkiainetasoilla ja vähentyneilläantioksidanttiparametrit. Myös näiden rottien histologinen näkymä osoitti munuaissolujen glomerulusvaurioita ja tubulusnekroosia. Lisäksi redox-epätasapaino saa aikaan tulehdusta edistävien sytokiinien ylituotannon [3, 14]. Havaittu ROS:n ylituotanto laukaisi lipidien peroksidaatiota ja proinflammatoristen sytokiinien mobilisaatiota ja aiheutti samanaikaisesti tulehduksellisia munuaissoluvaurioita. IL-6-arviointi tässä tutkimuksessa oli merkittävästi kohonnut CP-käsitellyillä rotilla, mikä viittaa oksidatiiviseen stressiin ja munuaissolujen tulehdukseen. IL-6:n nousun on havaittu laukaisevan ja/tai stimuloivan maksan käynnistämään akuutin vaiheen vasteen, mikä johtaa verenkierron C-reaktiivisen proteiinin (CRP) ja muiden bioaktiivisten välittäjien tuotannon lisääntymiseen [46]. CRP lisääntyi merkittävästi CP-käsitellyillä rotilla, ja tämän biomarkkerin kohonnut taso oli osoitus varhaisesta puolustusjärjestelmästä infektioita, tietoa ja kudosvaurioita vastaan ​​[47, 48]. CRP-tason kohoaminen tässä tutkimuksessa vahvisti edelleen tulehduksen läpikäymisen rotilla, joita hoidettiin pelkällä CP:llä. CP:n on havaittu laukaisevan munuaisten endogeenisten antioksidanttien vähenemistä, kuten GSH:n ylikäyttöä munuaisissa johtuen syklofosfamidin metaboliittituotteiden kertymisestä munuaisten tubulussoluihin [9]. Tämän prosessin seurauksena pelkästään CP:llä käsiteltyjen rottien munuainen saattoi nostaa immuunivastetta solujaan vastaan, mikä johti myöhemmin tulehdukseen, kuten plasman CRP:n nousu osoittaa. Samaa mieltä, CP voi aiheuttaa tulehdusta ja todennäköistä immunologista vauriota CP-käsiteltyjen rottien munuaisissa.

Johtopäätös

Yhteenvetona voidaan todeta, että näiden löydösten tulokset osoittivat, että polyfenolirikas Ocimum gratissimum -uute esti CP:n haitallisia sivuvaikutuksia munuaisten toimintaan vähentämällä oksidatiivista stressiä, esti tulehdusta edistävien sytokiinien ylituotantoa ja leukosyyttien infltraation sekä paransi antioksidanttientsymaattista toimintaa. munuaiskudosten toimintaa. Lisäksi vahvistettiin, että CP indusoi aldosteronin erityksen vähenemistä ja helpotti liiallista natriumin ja veden menetystä virtsan kautta rotilla. Kuitenkin Ocimum G. -uute paransi munuaisten toimintaa lisäsi aldosteronin tuotantoa ja esti liiallista natrium- ja vesihukkaa CP-käsitellyissä rotissa. Polyfenolin ja antioksidanttien läsnäolo Ocimum gratissimum -kasvin lehdissä tekee siitä täydellisen ehdokkaan syklofosfamidin munuaistoksisen vaikutuksen hoitoon ja/tai ehkäisyyn.

Viitteet

1. Chabner BA, Ryand DP, Pax-Ares L, Garcis-Carbonero, Calaresi P. Neoplastiset aineet. Julkaisussa: Harnam JG, Libmirde LE, editors. Goodman ja Gilman ovat terapian farmakologinen perusta. 10. painos New York: McGraw Hill; 2001. s. 1389–459.

2. Chabner BA, et ai. Antineoplastiset aineet. Julkaisussa: Brunton LL, Lazo JS, Parker KL, toimittajat. Goodman ja Gilman ovat terapian farmakologinen perusta. 11. painos New York: McGraw Hill; 2006. s. 1322-8. 1694.
3. Ge B, Yang D, Wu X, Zhu J, Wei W, Yang B. Glysyrretiinihappoliposomin sytoprotektiiviset vaikutukset syklofosfamidin aiheuttamaa kystiittiä vastaan ​​estämällä tulehdusstressiä. Int Immunopharmacol. 2018;54:139–44.
4. Sinanoglu O, Yener AN, Ekici S, Midi A, Aksungar FB. Spiruliinin suojaavat vaikutukset syklofosfamidin aiheuttamassa nefrotoksisuudessa ja urotoksisuudessa rotilla. Basic Transl Sci. 2012.
5. Caglayan C, Temel Y, Kandemir FM, Yildirim S, Kucukler S. Naringin suojaa syklofosfamidin aiheuttamalta maksatoksisuudelta ja nefrotoksisuudelta moduloimalla oksidatiivista stressiä, tulehdusta, apoptoosia, autofagiaa ja DNA-vaurioita. Environ Sci Pollut Res Int. 2018;25(21):20968–84.
6. Zhang J, Tian Q, Yung S, Chuen S, Zhou S, Duan W, et ai. Oksatsafosforiinien aineenvaihdunta ja kuljetus sekä kliiniset vaikutukset. Drug Metab Rev. 2005;37:611–703.
7. Famurewa AC, Edeogu CO, Ofor FI, Besong EE, Akunna GG, Maduagwuna EK. Redox-epätasapainon ja iNOS/NF-ĸB/kaspaasi-3-signaloinnin heikkeneminen sinkin lisäyksellä estää syklofosfamidin aiheuttaman verenvuotokystiitin urotoksisuuden rotilla. Life Sci. 2021;266:118913.
8. Oyagbemi AA, Omobowale TO, Saba AB, Olowu ER, Dada RO, Akinrinde AS. Galliahappo parantaa syklofosfamidin aiheuttamaa hermotoksisuutta Wistar-rotissa vapaita radikaaleja poistavan toiminnan ja antioksidanttisen puolustusjärjestelmän parantamisen kautta. J Diet Suppl. 2016;13:402–19.
9. Abraham P, Isaac B. Oraalisen glutamiinin vaikutukset syklofosfamidin aiheuttamaan nefrotoksisuuteen rotilla. Hum Exp Toxicol. 2010;30(7):616–23.
10. Sherif IO. Neuroprotektiivinen mekanismikversetiinisyklofosfahiirien aiheuttamaa urotoksisuutta vastaan: vaikutus oksidatiiviseen stressiin ja tulehdusmarkkereihin. J Cell Biochem. 2018;119(9):7441–8. 11. Omole JG, et ai. Kolavironin suojaava vaikutus syklofosfamidin aiheuttamaan sydäntoksisuuteen rotilla. J Evid-pohjainen Integr Med. 2018; 23:1
11. Efraim KD, Jacks TW, Sodipo OA. Histopatologiset tutkimukset Ocimum gratissimumin toksisuudesta jättävät uutetta joihinkin kaniinien elimiin. Afr J Biomed Res. 2003; 6:21–5.
12. Akinmoladun AC, Ibukun EO, Emmanuel A, Obutor EM, Farombi EO. Ocimum gratissimum -puun lehdistä saadun uutteen fytokemiallinen ainesosa ja antioksidanttiaktiivisuus. Sci Res Essays. 2007;2:163–6.
13. Alabi QK, Akomolafe RO, Omole JG, Adefsayo MA, Ogundipe OL, Aturamu A, et ai. Polyfenolirikas Ocimum gratissimum -lehtien uute parantaa paksusuolentulehdusta heikentämällä paksusuolen limakalvovaurioita ja säätelemällä tulehdusta edistävien sytokiinien tuotantoa ja oksidatiivista stressiä rotilla. Biomed Pharmacother. 2018; 103:812–22.
14. Ofah VN, Chikwendu UA. Ocimum gratissimum -lehtiuutteen ripulia estävät vaikutukset koe-eläimillä. J Etnopharmacol. 1999;68:327–30.