Abstrakti

Dendrobium loddigesii -lajin jauhemaisten varsien vesipitoiset etanoliuutteet tuottivat kolme uutta fenolia, mukaan lukien kolme -7-O-etyyli-9-O-(4-hydroksifenyyli)propionyylidiasyyliglyserolia (1), (R){{ 7}},5,4'-trihydroksi-3,3', -trimetoksibibentsyyli (2) ja (S)-5,5',7-trihydroksi-3',4' -dimetoksifavanoni (3) yhdessä yhdentoista tunnetun analogin kanssa. Niiden rakenteet määritettiin laajalla spektroskooppisella analyysillä. Luonnollisten antioksidanttien, valkaisuaineiden ja ikääntymistä ehkäisevien aineiden tunnistamiseksi arvioitiin näiden fenolien kykyä poistaa 1,2-difenyyli-2-pikryylihydratsyyli (DPPH) -radikaali, niiden kyky estää tyrosinaasin tuotantoa ja heidän kykynsä stimuloida kollageenin tuotantoa ihmisen ihon fibroblastien aikuisten (HDFa) -määrityksellä. Havaittiin, että yhdisteillä 1, 4-8, 13 ja 14 oli merkittäviä DPPH-radikaaleja poistavia aktiivisuuksia, yhdisteellä 10 tyrosinaasia estävä aktiivisuus (IC50 37.904 ug/ml) ja yhdiste 9 osoitti merkittävää kollageenin tuotantoa EC50-arvo 3,182 ug/ml. Nämä tulokset viittaavat siihen, että D. loddigesii -lajin fenoliset aineosat voivat olla antioksidantteja, ihoa valkaisevia ja/tai ikääntymistä estäviä aineita.

Asiaankuuluvien tutkimusten mukaancistancheon yleinenyrttijoka tunnetaan "ihmeyrttinä, joka pidentää elämää". Sen pääkomponentti oncistanosidi, jolla on erilaisia ​​vaikutuksia, kutenantioksidantti, tulehdusta ehkäisevä, jaimmuunijärjestelmän toiminnan edistäminen. Mekanismi cistanchen jaihon valkaisuunpiilee antioksidanttisessa vaikutuksessacistanche-glykosidit. Ihmisen ihossa oleva melaniini syntyy hapettumallatyrosiinityrosinaasi katalysoi, ja hapetusreaktio vaatii hapen osallistumista, joten kehon happivapaista radikaaleista tulee tärkeä melaniinin tuotantoon vaikuttava tekijä. Cistanche sisältää cistanosidia, joka on antioksidantti ja voi vähentää vapaiden radikaalien muodostumista kehossa, jotenestää melaniinin tuotantoa.

Napsauta Cistanche Tubulosa Supplement -kohtaa

Lisätietoja:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Graafinen abstrakti

1. Esittely

Dendrobium-sukuun (Orchidaceae) kuuluu maailmanlaajuisesti noin 1500 lajia, joista noin 80 lajia kasvaa Kiinassa [1]. Useiden tämän suvun kasvien varret tunnetaan nimellä "Shi-Hu", joita on käytetty tuhansia vuosia sekä perinteisenä kiinalaisena lääketieteenä että kansanlääkkeinä kroonisen atrofisen gastriitin, ihon ikääntymisen, kuumeen, sydän- ja verisuonitautien ja tonic, joka edistää kehon nesteiden tuotantoa [2]. Aiemmat tutkimukset tästä suvusta johtivat sarjan polysakkarideja, fenoliyhdisteitä, alkaloideja ja seskviterpenoideja [1, 3–5], joista joillakin on erilaisia ​​bioaktiivisuutta, mukaan lukien anti-inflammatorinen [6], antimikrobinen [2], antioksidantti. [7], kasvainten vastainen [8], verihiutaleiden aggregaatiota estävä [9], immunomoduloiva [10] ja influenssa A:ta vastaan ​​[11].

Dendrobium loddigesii, monivuotinen epifyyttinen yrtti, on levinnyt laajalti Kiinan lounaisosassa, kuten Guangxin, Guizhoun ja Yunnanin maakunnissa [12]. Sen vartta on käytetty kansanlääketieteessä gastriitin, kuumeen ja huimauksen hoitoon [13]. Jatkaessaan tämän suvun rakenteellisesti monimuotoisten ja biologisesti aktiivisten luonnontuotteiden etsimistä [1, 5, 14–17], tässä tehtiin perusteellinen tutkimus tämän kasvilajin farmakologisesti aktiivisista ainesosista. Tuloksena kolme uutta fenolista yhdistettä (1–3) sekä yksitoista tunnettua (kuva 1) eristettiin D. loddigesii -lajin varren 80-prosenttisesta etanoliuutteesta. Näiden yhdisteiden eristäminen, rakenteen selvitys ja biologinen arviointi esitetään tässä.

2 Tulokset ja keskustelu

Yhdiste 1, joka saatiin valkoisena kiinteänä aineena, antoi C21H26O7:n molekyylikaavan määritettynä (-)-HRESIMS-ionilla m/z:llä 389,1602 [M−H]− (laskettu yhdisteelle C21H25O7, 389,16{{). 28}}6) yhdeksän tyydyttymättömyysastetta. Yhdisteen 11H NMR-spektri sisältää seitsemän aromaattista protonia arvoilla 8H 6,85 (1H, d, J=1,7 Hz), 6,75 (1H, d, J=8,0 Hz), 6,68 (1H). , dd, J = 8,0, 1,7 Hz), 7,01 (2H, d, J = 8,5 Hz) ja 6,68 (2H, d, J = 8,5 Hz), mikä viittaa 1,3,4-trisubstituoidun bentseenirenkaan ja 1,4-disubstituoidun bentseenirenkaan olemassaoloon. Sen 13C NMR-spektri osoitti 21 hiiliresonanssia, mukaan lukien kaksi metyyliä (yksi metoksi), neljä alifaattista metyleeniä, yhdeksän metiiniä (kaksi sp3, seitsemän sp2) ja kuusi kvaternaarista hiiltä (yksi karbonyyli, viisi olefiinista, joista kolme hapetettua). H-7/C-1 (δC 131,6), C-2 (δC 111,7), C-6 (δC 121,4), C HMBC-korrelaatiot (kuva 2) -8 (δC 74,2) ja C-10 (δC 65,3); H-9/C-7 (δC 83,8) ja C-8 (δC 74,2); H-10/C-11 (δC 15,6); 3-OMe (δH 3,81)/C-3 (δC 149,1) sekä H-7/H-8/H2-9- ja H{{-korrelaatiot 87}}/H3-11 1 H–1 H COZY -spektristä (kuva 2) osoitti 7-O-etyyliguajasyyliglyserolin [18] läsnäolon. On raportoitu, että J7,8 oli noin 5 Hz erytro-isomeerille ja 7 Hz kolmelle isomeerille ruiskujen - glyserolien ja diasyyliglyserolijohdannaisten tapauksessa. Siten yhdisteen 1 katsottiin olevan kolme isomeeriä, joissa on J7,8 (6,5 Hz) [18]. HMBC-korrelaatiot H-7ʹ (δH 2,79, t, J = 7,5 Hz)/C-8ʹ (δC 37,1), C-1ʹ (δC 132,7), C-2ʹ, 6ʹ (δC 130,2) ja C-9ʹ (δC) 174,6), H-8ʹ (δH 2,59, t, J = 7,5 Hz)/C-7ʹ (δC 31,0), C-1ʹ ja C-9ʹ sekä COSY-ristihuiput H-8ʹ/H-7ʹ. p-hydroksikumaarihapon läsnäolo [19]. Yllä kuvattujen todisteiden perusteella ehdotettiin, että yhdisteellä 1 on 7-O-etyyliguajasyyliglyseroliosa ja p-hydroksikumaarihappo esterisidoksen kautta. HMBC-korrelaatio H-9:stä C-9':ään ehdotti, että esterisidos oli välillä C-9 ja C-9'. Siten 1:n rakenne määritettiin esitetyllä tavalla.

(R){{0},5,4'-trihydroksi-3,3',-trimetoksibibentsyyli (2) saatiin valkoisena kiinteänä aineena. HRESIMS-spektri 2 osoitti kvasimolekylaarisen ionihuipun m/z:ssä 319,1180 [M−H]− (laskettu C17H19O6:lle, 319,1187) 8 tyydyttymättömyysasteen kanssa. Yhdisteen 21H NMR-spektri osoitti kolme metoksyyliryhmää arvoilla 8H 3,75 (3H, s), 3,7 0 (3H, s) ja 3,17 (3H, s); yksi hapetettu metiiniprotoni δH 4,13:ssa (1H, t, J=6,8 Hz, H-); kaksi metyleenisignaalia δH:ssa 2,73 (1 H, dd, J=13,5, 6,9 Hz) ja 2,96 (1 H, dd, J=13,5, 6,9 Hz); ja viisi aromaattista protonia, jotka esiintyvät 1,3,4,5-tetrasubstituoituna aromaattisena renkaana δH 6,28 (1H, d, J=1,8 Hz) ja 6,34 (1H, d, J{{) 60}},8 Hz) ja 1,3,4-trisubstituoitu aromaattinen rengas δH:lla 6,49 (1H, d, J=2,0 Hz), 6,62 (1H, d, J=8,0 Hz) ja 6,52 (1H, dd, J = 8,0, 2,0 Hz). 2:n 13CNMR- ja DEPT-spektrit osoittivat kolme oksimetyleeniä, yhden metyleenin, yhden hapetettua metiiniä ja 12 aromaattista hiiltä (viisi hapetettua). Sen NMR-tietojen (taulukko 1) vertailu dendrokandiini C:n [20] tietoihin osoitti suuria yhtäläisyyksiä lukuun ottamatta yhtä metoksyyliryhmää, joka sijaitsi kohdassa C-3' HMBC-korrelaatioiden perusteella 3'-OMe:stä ja H-5':stä. C-3' (δC 148,4). Lisäksi 3-OMe:n ja H-2/C-3:n (δC 149,5) useat HMBC-vuorovaikutukset (kuvio 2); -OMe/C- (δC 86,9) ehdotti muita metoksyyliryhmiä C-3:ssa ja C-:ssä, vastaavasti. Absoluuttinen konfiguraatio kohdassa C- määritettiin R:ksi negatiivisen optisen kierron perusteella ([훼] 26 D –12,46), joka on samanlainen kuin afyllinen D [훼] 20 D –20,3, MeOH) [15]. Vastaavasti yhdisteen 2 rakenne määritettiin esitetyllä tavalla.

(S){{0}},7,5′-trihydroksi-3′,4′-dimetoksifavanoni (3) saatiin keltaisena amorfisena jauheena ja sen molekyylinen C17H16O7 (1{{69} } vedyn puutteen indeksit) (-)-HRESIMS-ionin mukaan m/z:ssä 331,0819 [M – H]− (laskettu 331,0823). UV-absorptiomaksimit aallonpituudella 206 ja 294 nm osoittivat flavanonin läsnäolon [21]. 1H-NMR-spektri (taulukko 1) osoitti kolme signaalia ei-aromaattisella alueella, jotka olivat 8H 5,29 (1H, dd, J=12,7, 3,1, H-2), 3,04 (1H, dd, J=17,1, 12,7, H-3ax) ja 2,71 (1H, dd, J=17.1, 3,1, H-3 ekv), neljä aromaattiset protonit δH 5,87 (1H, d, J=2,2, H-6), 5,91 (1H, d, J=2,2, H-8), 6,62 (1H, d, J=2,0, H-2ʹ) ja 6,61 (1H, d, J=2,0, H-6'), kaksi metoksyyliryhmää 8H 3,83 (3H, s) ja 3,77 (3H, s). 13C NMR- ja DEPT-spektrit (taulukko 1) sisältävät resonansseja 17 hiilelle mukaan lukien kaksi metoksia, yksi metyleeni, yksi metiini, yksi karbonyylihiili ja 12 aromaattista hiiltä. Sen NMR-tietojen kattava analyysi osoitti, että sen tasomainen rakenne on läheisesti sukua dihydrotrisiinin [22] rakenteeseen, paitsi että dihydrotrisiinin OH-4ʹ- ja OCH3-5ʹ-resonanssit transponoitiin kohtaan 3. Tämän vahvisti HMBC-risti piikit (kuva 2) H-2', H-6' ja OCH3-4' - C-4' (δC 137,7), H-6' - C-5' (δC 151,8). Absoluuttisen konfiguraation C-2:ssa oletettiin olevan S-muodossa sen optisen kierron negatiivisen ominaiskiertoarvon (- 46,64, MeOH) perusteella [23]. Siksi yhdisteen 3 rakenne määritettiin yksiselitteisesti esitetyllä tavalla.

Yksitoista tunnettua yhdistettä tunnistettiin trepidation 4 [24], meskaliini 5 [25], 4,5,4'-trihydroksi- 3,3'-dimetoksibibentsyyli 6 [26], 4', 5- dihydroksi-3,3'-dimetoksibibentsyyli 7 [27], Tristin 8 [28], bataatit III 9:ssä [27], 3,5,3′-hydroksibibentsyyli 10 [29], afyllinen C 11 [15], dentiform A 12 [30], dihydrokoniferyylidihydro-p-kumaraatti 13 [31], p-hydroksifenyylitransferulaatti 14 [32] spektroskooppisella analyysillä ja vertaamalla niiden spektritietoja kirjallisuuteen.

Fenoliyhdisteet ovat olennainen osa ihmisen ruokavaliota, ja ne tunnetaan voimakkaina antioksidantteina voimakkaan ketjua katkaisevan vaikutuksensa ansiosta, ja ne voivat myötävaikuttaa suoraan hapettumisenestovaikutukseen [33]. DPPH-radikaalinpoistomääritys on yksi yleisimmistä ja suhteellisen nopeista menetelmistä, joita käytetään antioksidanttiaktiivisuuden arvioinnissa. Yhdisteitä, jotka voivat luovuttaa vetyatomin DPPH-radikaalille ja sitten saada aikaan DPPH:n pelkistetty muoto, pidetään mahdollisina antioksidanttina. Kaikki yhdisteet arvioitiin niiden DPPH-radikaaleja poistavien aktiivisuuksien suhteen. Nykyiset tulokset (taulukko 2) osoittivat, että suurin osa fenoliyhdisteistä (1, 4-8, 13 ja 14) osoitti merkittäviä aktiivisuuksia huuhtelukapasiteetin ollessa 89,411-94,278 prosenttia 100 ug/ml:ssa.

Toisaalta tyrosinaasi on kuparia sisältävä entsyymi ja sillä on kriittinen rooli melaniinin biosynteesireitin säätelyssä melanosyyteissä [34]. Siksi tyrosinaasin estäjistä tuli tärkeitä ainesosia kosmetiikassa tai lääkkeissä hyperpigmentaatioon ja ihon valkaisuaineiden kehittämiseen. Tässä tutkimuksessa kaikki isolaatit arvioitiin niiden tyrosinaasia estävän aktiivisuuden suhteen (taulukko 2). Positiivisena kontrollina käytettiin Kojic-happoa, väitettyä ihoa vaalentavaa ainetta. 3,5,3'-hydroksibibentsyyli (10) paljasti merkittävän estävän aktiivisuuden IC50-arvon ollessa 37,904 ug/ml. Aphyllals C (11) osoitti kohtalaista inhibitiota (IC50, 152,56 ug/ml). Kaikki jäljellä olevat yhdisteet olivat inaktiivisia pitoisuuksilla 200 ug/ml asti. Tässä tutkimuksessa voidaan päätellä, että yhdisteet 10 ja 11 voivat olla potentiaalisia kandidaatteja melaniinin biosynteesiin liittyvien ihosairauksien hoitoon.

Ottaen huomioon, että tätä lajia käytetään lääketieteellisesti ihon ikääntymiseen, koska kollageeni on kriittinen ihon lujuudelle ja kimmoisuudelle, ja sen hajoaminen johtaa ryppyihin, jotka liittyvät ikääntymiseen [35]. Tästä syystä kaikkien yhdisteiden vaikutusta HDFa:n kollageenin tuotantoon arvioitiin myös tarkoituksella. Tulokset (taulukko 2) osoittivat, että yhdiste 9 stimuloi merkittävästi HDFa-kollageenin tuotantoaktiivisuutta (EC50 3.182 ug/ml). Yhdisteet 6 ja 7 osoittivat heikompia aktiivisuuksia, ja kollageenin tuotanto oli 33,062 prosenttia ja 29,157 prosenttia pitoisuudella 10 ug/ml, vastaavasti. Tämänhetkiset tulokset eivät ainoastaan ​​tukeneet D. loddigesiin etnofarmakologista käyttöä, vaan tarjosivat myös luotettavan rakennemallin kollageenin puutteeseen liittyvien sairauksien, kuten palovammojen ja haavaumien, kehittämiseen.

3 Kokeellinen

3.1 Yleiset koemenettelyt

3.2 Kasvimateriaali

D. loddigesiin varret kerättiin syyskuussa 2014 Wenshan Citystä, Yunnanin maakunnasta, Kiinan kansantasavallasta, ja professori Hong Yu (Yunnanin yliopisto, Kunming, Kiinan kansantasavalta) identifioi ne. Lahjakorttinäyte (nro 20 140 829) on talletettu Länsi-Kiinan fytokemian ja kasviresurssien valtion keskeiseen laboratorioon, Kunming Institute of Botany, Kiinan tiedeakatemia.

3.3 Poisto ja eristäminen

Kuivatut ja jauhetut D. loddigesii -varret (10,2 kg) uutettiin kolme kertaa 80-prosenttisella etanolilla huoneenlämpötilassa ja konsentroitiin alennetussa paineessa. Sitten jäännös suspendoitiin veteen ja jaettiin EtOAc:lla, jolloin saatiin EtOAc-fraktio (22{95}} g), jolle suoritettiin silikageelipylväskromatografia eluoiden petrolieetteri/asetoni-gradientilla (15:1 - {). {110}}:1) tuottaa 22 fraktiota (Fr.1–22). Fr.11 (6 g) altistettiin silikageeli-CC:lle, joka eluoitiin CHCl3/MeOH:lla (300:1), sitten MCI-kolonni (MeOH/H2O-gradientti, 60:40-95:5) ja silikageeli-CC (CHCl3/ MeOH, 200:1), jolloin saatiin 12 (4 mg). Fr.13 (850 mg) erotettiin MCI-kolonnissa (MeOH/H2O, 60:40 - 95:5), jolloin saatiin viisi fraktiota (Fr.13.1-Fr.13.5). Fr.13.4 (150 mg) tuotti yhdisteet 4 (3 mg) ja 5 (5 mg) HPLC-valmisteella (MeOH/H20, 60:40). Fr.16 (19 g) kromatografoitiin silikageelipylväässä eluoiden CHCl3/MeOH-seoksella (100:1 - 20:1), jolloin saatiin 6 alafraktiota (Fr.16.1-Fr.16.6). Fr.16.4 (2,3 g) levitettiin MCI-kolonniin, joka eluoitiin MeOH/H2O:lla (50:50-100:0) ja fraktioitiin sitten edelleen Sephadex LH-20 -kolonnissa (MeOH/H2O, 90:10) saanto 7 (716 mg) ja 13 (39 mg). Käyttämällä samoja olosuhteita kuin Fr.16.4, Fr.16.6 (240 mg) tuotti yhdisteen 9 (7 mg). Fr.18 (10 g) erotettiin silikageeli-CC:llä (CHCl3/MeOH, 100:1-20:1), sitten se kuljetettiin MCI:n (MeOH/H2O-gradientti, 50:50-100:0) ja Sephadex LH{{ 96}} (MeOH/H20, 90:10) pylväät, jolloin saatiin 3 (25 mg) ja 11 (4 mg). Fr.19 (20 g) altistettiin MCI-pylvääseen, joka eluoitiin MeOH/H2O:lla (30:70-100:0), jolloin saatiin seitsemän fraktiota (Fr.19.1-Fr.19.7). Fr.19.5 (2,3 g) erotettiin toistuvalla silikageelipylväällä (CHC13/MeOH, 30:1), jolloin saatiin 8 (15 mg) ja 10 (7 mg). Fr.19.6 (4.3 g) fraktioitiin silikageelikolonnissa (CHCl3/MeOH, 30:1), jolloin saatiin 5 fraktiota (Fr.19.6.1 - Fr.19.6.5). Fr.19.6.1 (1,2 g) altistettiin silikageelipylvääseen (CHC13/MeOH, 30:1) ja HPLC:llä (MeOH/H20, 45:55) puhdistuksen jälkeen, jolloin saatiin 1 (15 mg). Fr.19.6.3 (540 mg) levitettiin Sephadex LH-20-kolonniin, joka eluoitiin MeOH/H2O:lla (90:10), ja puhdistettiin sitten edelleen puolipreparatiivisella HPLC:llä (MeOH/H2O, 45:55). tuottaa 2 (6 mg) ja 6 (5 mg). Fr.20 (12 g) levitettiin MCI-geelin (MeOH/H2O, 30:70-100:0) kromatografiseen vaiheeseen ja sitten altistettiin silikageeli-CC:lle (CHCl3/MeOH, 30:1), jolloin saatiin 14 (21). mg).kolme{{0}}O-etyyli-9-O-(4-hydroksifenyyli)propionyylidiasyyliglyseroli (1): valkoinen kiinteä aine; []D 26 - 3,72 (c 0,51, MeOH); UV (MeOH) λmax (log e) 203 (4,53), 225 (4,17), 280 (3,66) nm; IR (KBr) vmax 3426, 1727, 1516, 829 cm-1; 1H- ja 13C NMR (CD3OD), katso taulukko 1; ESIMS m/z 389 [M-H]-, HRESIMS m/z 389,1602 [M-H]- (laskettu yhdisteelle C21H25O7, 389,1606).

(R)-4,5,4'-trihydroksi-3,3', -trimetoksibibentsyyli (2): valkoinen amorfinen jauhe; []D 26 -12,46 (c 1,07, MeOH); UV (MeOH) λmax (log e) 204 (4,59), 286 (3,75) nm; IR (KBr) vmax 3418, 1607, 1517, 1455, 1434, 796 cm-1; 1H- ja 13C NMR (CD3OD), katso taulukko 1; ESIMS m/z 319 [M-H]-, HRESIMS m/z 319,1180 [M-H]- (laskettu yhdisteelle C17H19O6, 319,1187).

(2S)-5,7,3ʹ-trihydroksi-6,4,5-trimetoksifavoni (3): keltainen amorfinen jauhe; []D 26 - 46,64 (c 0,46, MeOH); UV (MeOH) λmax (log e) 206 (4,70), 294 (4,17) nm; IR (KBr) vmax 3335, 2940, 1641, 1514, 1462, 1345, 1434, 1182, 1091, 998, 833 cm-1; 1H- ja 13C NMR (CD3OD), katso taulukko 1; ESIMS m/z 331 [M-H]-, HRESIMS m/z 331,0819 [M-H]- (laskettu yhdisteelle C17H15O7, 331,0823).

3.4 DPPH-radikaalinpoistoaktiivisuusmääritys

Vapaiden radikaalien sieppausaktiivisuusmääritys suoritettiin edellisen menetelmän [36] mukaisesti muutamin modifioinnein. Lyhyesti sanottuna 30 µl näytettä (1000 ug/ml, liuotettu etanoliin) ja Troloxia (1 mM) lisättiin 270 µl:aan DPPH-liuosta (100 µM, liuotettuna metanoli), vastaavasti. Reaktio eteni 1 tunnin ajan 37 asteessa 96-kuoppamikrolevyllä. Absorbanssi luettiin sitten aallonpituudella 515 nm ja radikaalinpoistoaktiivisuuden prosenttiosuus laskettiin käyttämällä seuraavaa kaavaa: estoprosentti =[(A0−A1)/A0] × 100 prosenttia, missä A0 on ryhmän absorbanssi. DPPH ilman näytteitä (kontrollireaktio) ja A1 on näytteiden kanssa inkuboidun DPPH:n absorbanssi. Kaikki testit suoritettiin kolmena rinnakkaisena ja Troloxia käytettiin positiivisena kontrolliaineena.

3.5 Sienityrosinaasin estomääritys

Tyrosinaasiaktiivisuuden esto määritettiin spektrofotometrisesti aiemmin kuvatun menetelmän mukaisesti [36] joissakin muutoksissa. Lyhyesti, eri pitoisuudet testiyhdisteitä valmistettiin 1 0 prosenttisessa DMSO:ssa. Kukin näyteliuos (20 μM) sekoitettiin L-Dopan (1,25 mM) kanssa ja laimennettiin 970 μl:lla 0,05 mM natriumfosfaattipuskuria (PBS, pH 6,8) koeputkissa. Reaktio aloitettiin lisäämällä sienityrosinaasia (25 U/ml). Reaktioseosta inkuboitiin 5 minuuttia huoneenlämpötilassa. Dopakromin määrä seoksessa määritettiin mittaamalla kunkin kuopan absorbanssi 490 nm:ssä. Kojihappoa käytettiin positiivisena kontrollina. Tyrosinaasin estoprosentti laskettiin seuraavan yhtälön mukaisesti: Inhibitioprosentti=[(A0-A1)/A0] × 100 prosenttia, missä A0 on dopakromin absorbanssi ilman testiyhdisteitä (kontrollireaktio) ja A1 on testiyhdisteiden kanssa inkuboidun dopakromin absorbanssi.

3.6 Kollageenin tuotanto HDFa-määrityksellä

Kiitokset Tätä hanketta tuki taloudellisesti Yunnanin maakunnan tiede- ja teknologiaosasto (nro 2017ZF003-04, 2015HB093 ja 2019HA001). Kirjoittajat ovat kiitollisia Länsi-Kiinan osavaltion kasvikemian ja kasviresurssien päälaboratorion, Kunming Institute of Botany, Kiinan tiedeakatemian, analyyttisen ryhmän henkilökunnalle kaikkien spektrien mittauksista.

Eettisten standardien noudattaminen

Avoin pääsyTämä artikkeli on jaettu Creative Commons Attribution 4:n ehtojen mukaisesti.{1}} Kansainvälinen lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja jäljentämisen missä tahansa välineessä edellyttäen, että mainitset asianmukaisesti alkuperäisen kirjoittajan tai lähteen. , anna linkki Creative Commons -lisenssiin ja ilmoita, onko muutoksia tehty.

Viitteet

Lisätietoja: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501