Osa Ⅱ: Cistanche Tubulosa fenyylietanoidiglykosidit indusoivat hepatosellulaaristen karsinoomasolujen apoptoosia mitokondrioista riippuvaisilla ja MAPK-reiteillä ja tehostavat kasvainten vastaista vaikutusta yhdistelmällä sisplatiinin kanssa

Yhteystiedot: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Sähköposti:audrey.hu@wecistanche.com

Arvioimme edelleen CTPG:n immunostimuloivaa vaikutusta (Cistanche Tubulosa fenyylietanoidiglykosidit) hiirillä. Ip-injektion, sc-injektion ja CTPG:n (200 ja 400 mg/kg) ig-antamisen jälkeen hiirten tilassa ei tapahtunut merkittävää muutosta käsittelemättömään ryhmään verrattuna. Hiirien ruumiinpainossa ei myöskään ollut merkittävää eroa CTPG:llä käsiteltyjen ryhmien ja käsittelemättömien ryhmien välillä (kuvio 7A). Hiirten sydän-, maksa-, perna-, keuhko-, munuais- ja kateenkorvaindeksit olivat samanlaiset kaikissa ryhmissä paitsi hiirten pernaindeksit 400 mg/kg CTPG:tä ip-injektioryhmässä (taulukko 1). Tulokset viittasivat siihen, että valituilla CTPG-annoksilla ei ollut sivuvaikutuksia hiirillä. Perna on tärkeä immuunipuolustuselin nisäkkäillä, ja sen kehitys vaikuttaa suoraan yksilön immuunitoimintaan ja kykyyn vastustaa sairauksia. Immuunielinten indeksi heijastaa immuunielinten kehitystä ja immuunitoimintaa. Perna sisältää erilaisia ​​immuunisoluja, mukaan lukien T-soluja, B-soluja, luonnollisia tappajasoluja (NK-soluja), makrofageja, dendriittisoluja (DC:itä) ja muita, joilla on tärkeä rooli immuunijärjestelmässä.30 On raportoitu. että polysakkaridit voivat lisätä immuunisolujen määrää parantaakseen kehon toimintaaimmuniteetti.31 Koska CTPG:n ip-injektio lisäsi merkittävästi pernaindeksiä (lisäsi 0,55 kertaa), analysoimme edelleen erilaisten immuunisolujen lukumäärää pernassa. Tulokset osoittivat, että CTPG:n ip-injektio lisäsi merkittävästi T-solujen (CD3 plus CD19−solut) (lisäys 0,49 kertaa), B-solujen (CD3−CD19 plus solut) (lisäys 0) määrää. 0,49 kertaa) ja NK-solut (CD3-CD19-CD49b plus solut) (lisääntyivät 1,63 kertaa) verrattuna käsittelemättömään ryhmään. CD4 plus- ja CD8 plus T-solut T-solujen pääalatyyppeinä näyttelevät tärkeätä roolia antigeenispesifisessä soluimmuunivasteessa.32 Siksi analysoimme edelleen CD4 plus- ja CD8 plus -T-solujen lukumäärää ja aktivaatiotilaa solussa. perna. Tulokset osoittivat, että CTPG:n ip-injektio ei ainoastaan ​​lisännyt merkittävästi CD4 plus- ja CD8 plus T-solujen määrää (lisäsi 0,55 ja 0,34 kertaa, vastaavasti), vaan myös paransi solujen aktivaatiotilaa. CD4 plus T-solut (CD4 plus CD44 plus -solut) (lisääntynyt 0,84 kertaa) (kuvio 7B), nämä tulokset viittaavat siihen, että CTPG:llä oli immuunivastetta vahvistavaa toimintaa.

CTPG:n yhdistelmä(Cistanche Tubulosa fenyylietanoidiglykosidit) ja sisplatiinilla oli voimakas antituumorivaikutus H22-kasvainhiirimallissa

On yleisesti hyväksyttyä, että kemoterapia tai sädehoito voi johtaa huonoon ennusteeseen ja aiheuttaa lukuisia haittatapahtumia, jotka voivat johtua immuunijärjestelmän heikkenemisestä ja normaalien kudosten ja elinten vaurioista. TCM:n polysakkarideilla on immuunijärjestelmää vahvistavia vaikutuksia ja ne lievittävät kemoterapian aiheuttamia immuunielinten ja immuunisolujen vaurioita, esimerkiksi kitosaani33 ja Lycium barbarum -polysakkaridit.34 Yllä oleva tulos osoitti, että CTPG(Cistanche Tubulosa fenyylietanoidiglykosidit) voi lievittää sisplatiinin immuunijärjestelmään kohdistuvia sivuvaikutuksia. Siksi sisplatiinin kanssa yhdistetyn CTPG:n kasvainten vastainen vaikutus arvioitiin H22-kasvainhiirimallissa. Kuten kuviossa 8A esitetään, pelkkä CTPG, pelkkä sisplatiini ja CTPG:n ja sisplatiinin yhdistelmä (CTPG plus sisplatiini) suppressoivat merkittävästi H22-kasvaimen kasvua verrokkiryhmään verrattuna. CTPG plus sisplatiini osoitti voimakkaamman estovaikutuksen kuin CTPG ja sisplatiini yksinään. 20. päivänä tuumoritilavuudet kontrolliryhmissä, pelkkä sisplatiini, pelkkä CTPG ja CTPG plus cis-platiiniryhmä, olivat vastaavasti noin 1707,8, 722,5, 1033,8 ja 367,5 mm3. Samana päivänä kasvaimet kerättiin visuaalista tarkkailua (kuvio 8B) ja painon vertailua (kuvio 8C) varten. CTPG plus sisplatiini osoitti parempia terapeuttisia vaikutuksia H22-kasvainhiirimalliin kuin CTPG tai sisplatiini yksinään. Kasvaimen paino CTPG- ja sisplatiiniryhmässä oli pienempi kuin muissa ryhmissä. Nämä tulokset viittaavat siihen, että CTPG:n ja sisplatiinin kasvaimia estävä vaikutus johtaa synergistisiin vaikutuksiin.

Hiirten ruumiinpainot mitattiin heijastamaan hiirten terveydentilaa. Ruumiinpaino laski huomattavasti sisplatiinihoidon jälkeen, mikä viittaa sisplatiinin aiheuttamaan vakavaan systeemiseen toksisuuteen.35 Vertailun vuoksi CTPG yhdistettynä sisplatiiniin paransi merkittävästi sisplatiinin aiheuttamaa painonpudotusta, kun taas CTPG(Cistanche Tubulosa fenyylietanoidiglykosidit) yksinään ei vaikuttanut merkittävästi hiirien ruumiinpainoon (kuvio 8D). Elimet, mukaan lukien perna, sydän, maksa, keuhkot, munuaiset ja kateenkorva, eristettiin myös elinindeksien laskemiseksi. Verrattuna käsittelemättömään ryhmään, sisplatiini ja CTPG laskivat merkittävästi pernaindeksit ja nostivat niitä. CTPG plus sisplatiini palautti pernaindeksit verrattuna pelkkään sisplatiiniin. Muut elinindeksit eivät osoittaneet merkitsevää eroa kaikkien ryhmien välillä (taulukko 2).CTPG(Cistanche Tubulosa fenyylietanoidiglykosidit) Yhdessä sisplatiinin kanssa TehostettuImmuniteettikasvainhiiristä.

Yllä olevat tulokset osoittivat, että CTPG(Cistanche Tubulosa fenyylietanoidiglykosidit) lisäsi immuniteettiahiiristä ja esti sisplatiinin indusoimaa pernasolujen apoptoosia. Tutkimme edelleen, korreloiko CTPG:n ja sisplatiinin kasvainten vastainen vaikutus lisääntyneen immuniteetin kanssa. Kasvainten esiintymisen ja kehittymisen prosessissa kehon immuunijärjestelmällä on tärkeä immuunivalvontatoiminto, ja T-soluvälitteisellä soluimmuniteetilla on keskeinen rooli. CD4 plus T-solujen tehtävänä on auttaa soluimmuniteettia ja humoraalista immuunivastetta, ja CD8 plus T-solut ovat immuunivasteen tärkeimmät efektorisolut, jotka voivat spesifisesti tappaa kohdesoluja ja joilla on tärkeä rooli kasvainimmuniteetissa ja antiviraalisessa immuniteetissa.32 Kasvainta kantavien hiirten pernat kerättiin T-solujen ja B-solujen lukumäärän havaitsemiseksi virtaussytometrisesti. T-solujen, mukaan lukien CD4 plus ja CD8 plus T-solut, esiintymistiheydet ja lukumäärät CTPG plus sisplatiini -ryhmässä olivat merkittävästi korkeammat kuin kontrollissa (lisääntyivät 0,55 ja 0,7 kertaa, vastaavasti). ja sisplatiiniryhmät (lisääntyivät 0,92 ja 1,16 kertaa, vastaavasti) (kuvio 9A ja B). Verrattuna kontrolliryhmään, CTPG yksin myös lisäsi osittain CD4 plus- ja CD8 plus T-solujen määrää, vaikkakaan merkittävää eroa ei ollut. B-solujen esiintymistiheydissä ja lukumäärässä ei ollut merkittävää eroa kaikkien ryhmien välillä.

Myeloidista peräisin olevat suppressorisolut (MDSC) ja säätelevät T-solut (Treg-solut) lisääntyvät kasvaimissa ja estävät kasvainten vastaisia ​​immuunivasteita; ne estävät CD4 plus T-solujen aktivaatiota ja laajenemista, efektori-T-solujen toimintaa, CD4 plus- ja CD8 plus T-solujen aktivaatiota ja/tai proliferaatiota ja sytokiinien muodostumista, B-solujen lisääntymistä ja immunoglobuliinin tuotantoa ja luokan vaihtoa, NK-solujen ja luonnollisten tappaja-T-solujen (NKT) sytotoksiset toiminnot sekä DC-solujen toiminta ja kypsyminen.36-38 MDSC-solujen (CD11b plus Gr-1 plus ), makrofagien (CD11b plus Gr) taajuudet ja lukumäärät -1−), ja Tregit (luonnolliset Tregit: CD4 plus CD25 plus Foxp3 plus; indusoidut Tregit: CD4 plus CD25-Foxp3 plus) kasvainhiirten pernoissa analysoitiin virtaussytometrialla. Verrokkiryhmään verrattuna MDSC:iden esiintymistiheys ja lukumäärä vähenivät merkittävästi sen jälkeen, kun sisplatiinia annettiin yksinään (pieni 1,56 kertaa) tai yhdessä CTPG:n kanssa.(Cistanche Tubulosa fenyylietanoidiglykosidit) (laskettu 0,62 kertaa). Myös CD11b plus Gr{3}}− -makrofagien määrät vähenivät merkittävästi, vaikka niiden esiintymistiheydissä ei tapahtunut merkittävää muutosta (kuva 9C). Lisäksi CTPG(Cistanche Tubulosa fenyylietanoidiglykosidit) yksinään ja CTPG- ja sisplatiinihoito vähensivät merkittävästi indusoitujen Tregien esiintymistiheyttä (pieni {{0}},33 ja 0,37 kertaa, vastaavasti) (kuvio 9D). Nämä tulokset viittasivat siihen, että CTPG:n ja sisplatiinin kasvaimia estävä vaikutus saattaa korreloida lisääntyneen immuniteetin kanssa, jolle on tunnusomaista lisääntynyt T-solujen määrä ja vähentynyt MDSC:iden ja Tregien määrä.