Yleiskatsaus Florotanniinien aineosista Fucalesissa, osa 1

Abstrakti: Fucales on Phaeophyceae-laji, joka sisältää suurimman osan lauhkean ja subtrooppisen rannikkoalueen tavallisista rannikon merilevistä. Monet tämän lajin lajit ovat pitkään olleet osa ihmiskulttuuria, ja niitä on käytetty ravinnoksi, rehuksi ja lääkkeinä kansanlääketieteessä. Korkean ravintoarvon lisäksi nämä merilevät ovat myös tunnettu monien bioaktiivisten yhdisteiden varasto, josta on suurta teollista kiinnostusta. Heidän joukossaan florotaniinit, ainutlaatuinen ja monipuolinen ruskealeväperäisten fenolien luokka, ovat keränneet paljon huomiota viime vuosina niiden lukuisten mahdollisten terveyshyötyjen vuoksi. Kuitenkin niiden monimutkaisten rakenteellisten ominaisuuksien ja standardien niukkuuden vuoksi se asettaa suuren haasteen näiden yhdisteiden tunnistamiselle ja karakterisoinnille, ainakin tällä hetkellä saatavilla olevalla tekniikalla. Siitä huolimatta on tehty paljon ponnisteluja florotaniinien rakenteellisten piirteiden selvittämiseksi, mikä on johtanut asiaankuuluviin näkemyksiin näiden yhdisteiden kemiasta. Tässä yhteydessä tässä katsauksessa käsitellään merkittäviä panoksia ja teknologista kehitystä florotaniinien uuttamisen ja karakterisoinnin alalla, keskittyen erityisesti Fucalesiin.

Cistanchen glykosidi voi myös lisätä SOD:n aktiivisuutta sydämen ja maksan kudoksissa ja vähentää merkittävästi lipofussiinin ja MDA:n pitoisuutta kussakin kudoksessa, poistaen tehokkaasti erilaisia ​​reaktiivisia happiradikaaleja (OH-, H2O₂ jne.) ja suojaamalla DNA-vaurioilta. OH-radikaalien toimesta. Cistanche-fenyylietanoidiglykosideilla on vahva vapaita radikaaleja poistava kyky, suurempi pelkistyskyky kuin C-vitamiini, ne parantavat SOD:n aktiivisuutta siittiösuspensiossa, vähentävät MDA-pitoisuutta ja niillä on tietty suojaava vaikutus siittiöiden kalvon toimintaan. Cistanche-polysakkaridit voivat lisätä SOD:n ja GSH-Px:n aktiivisuutta D-galaktoosin aiheuttamien kokeellisesti vanhentuvien hiirten punasoluissa ja keuhkokudoksissa sekä vähentää MDA- ja kollageenipitoisuutta keuhkoissa ja plasmassa sekä lisätä elastiinipitoisuutta. hyvä huuhteluvaikutus DPPH:lle, pidentää hypoksian aikaa vanhenevilla hiirillä, parantaa SOD:n aktiivisuutta seerumissa ja viivyttää keuhkojen fysiologista rappeutumista kokeellisesti vanhenevilla hiirillä Solumorfologisen rappeutumisen yhteydessä kokeet ovat osoittaneet, että Cistanchella on hyvä antioksidanttikyky ja sillä on potentiaalia olla lääke ihon ikääntymisen sairauksien ehkäisyyn ja hoitoon. Samaan aikaan Cistanchen ekinakosidilla on merkittävä kyky poistaa DPPH-vapaita radikaaleja ja sillä on kyky poistaa reaktiivisia happilajeja ja estää vapaiden radikaalien aiheuttamaa kollageenin hajoamista, ja sillä on myös hyvä korjaava vaikutus tymiinin vapaiden radikaalien anionien vaurioihin.

Napsauta Cistanche Tubulosa Supplement -kohtaa

【Lisätietoja:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

1. Esittely

Fucales on yksi suurimmista ja monipuolisimmista Phaeophyceae-luokan lahkoista (eli ruskealevät), joka sisältää joitain yleisimmistä merilevistä lauhkeilla ja subtrooppisilla rannikkoalueilla seitsemästä erillisestä perheestä, nimittäin Sargassaceae, Fucaceae, Himanthaliaceae, Durvillaeaceae, Notheiaceae, Hormosiraceae ja Seirococcaceae [1]. Tämän luokan jäsenet ovat monisoluisia ja niillä on tyypillinen suurten merilevien rakenne, ja niillä on hyvin erilaistuva risoidi, särmä ja lamelli [2]. Terä on yleensä suurennettu ja siinä voi olla kaasurakkuloita, jotka kelluvat vapaasti vedessä.

Sargassaceae on Fucalesin suurin edustaja, jonka jäsenistä Sargassum-suku edustaa noin 65 prosenttia. Euroopassa kotoperäiset Sargassaceae-lajit, kuten Cystoseira, Ericaria ja Gongolaria, elävät enimmäkseen vuoroveden kivialtaissa ja/tai vuorovesialueella. Erityisesti Cystoseira, johon kuuluu yli 30 lajia, on yksi tärkeimmistä Välimeren ja Atlantin valtameren suvuista, joka on välttämätön biologiselle monimuotoisuudelle ja ekosysteemin toiminnalle [3]. Sen väitetään myös olevan lupaava bioaktiivisten yhdisteiden lähde [4]. Sijaintinsa vuoksi tämän suvun lajit ovat alttiina lämpötilan, meriveden suolaisuuden ja valon määrän/laadun vaihteluille, mikä saa ne sopeutumaan ja kehittämään suojastrategioita, kuten lisäämään joidenkin pigmenttien pitoisuutta valon säteilyn vaihtelun vuoksi. [5]. Sargassum-suku, johon kuuluu yli 350 lajia [6], on enimmäkseen pelaginen ja levinnyt maailmanlaajuisesti, vaikka sitä tavataan enimmäkseen trooppisissa ja subtrooppisissa ympäristöissä [7]. Viime aikoina tämän suvun kaksi halo-pelagista lajia (S. fluitans ja S. natans) ovat aiheuttaneet Sargassum-vuoroveden Karibian ja Länsi-Afrikan rannikolla, mikä on vaikuttanut kielteisesti meren ekosysteemeihin [7]. Sargassum-lajeja on käytetty vuosisatojen ajan maataloudessa lannoitteina, vaikka ne ovatkin

levittäminen voi mennä lannoitustarkoituksiin. Itse asiassa ne ovat osoittaneet erityisen mielenkiintoisia ominaisuuksia kasvien biostimulaatiostrategioiden ja/tai abioottisen stressin lieventämisen, kuten kuivuuden, kehittämisessä [8,9]. Lisäksi näitä merileviä on tutkittu raaka-aineina biopolttoaineiden tuotannossa (esim. metanoli ja bioetanoli), lääke-, kosmetiikka- ja tekstiiliteollisuudessa, biomuovin kehittämisessä ja bioremediaation raaka-aineina [10–12]. Äskettäin Persianlahdella, Pohjois-Australiassa, Välimerellä, Tyynellämerellä sekä Intian valtameren trooppisilla ja subtrooppisilla alueilla laajalle levinneen lajin Polycladia myrica havaittiin myös sisältävän florotanniineja, joilla on lupaavia UVR-suojavaikutuksia, mikä herätti suurta kiinnostusta kosmeettisiin sovelluksiin. [13].

Fucaceae on toinen suuri Fucales-perhe. Tämä on laajalti levinnyt perhe pohjoisen pallonpuoliskon vuorovesialueilla, ja siinä on kuusi taksonia: Ascophyllum, Fucus, Hesperophycus, Pelvetia, Pelvetiopsis ja Silvetia, joista Ascophyllum, Fucus ja Silvetia ovat merkittävimmät suvut [14]. Näitä sukuja on perinteisesti käytetty ihmisten ravitsemuksessa vuosikymmeniä, ja viime aikoina niitä on tutkittu mahdollisina ainesosina funktionaalisissa elintarvikkeissa niiden runsaan bioaktiivisten yhdisteiden vuoksi [15,16]. Fucus on laajalti levinnyt Fucaceae-heimon kattamille alueille ja käsittää 10 hyväksyttyä lajia, joista F. vesiculosus on tunnetuin, kun taas Ascophyllum on monotyyppinen suku, jota edustaa Ascophyllum nodosum. F. vesiculosus on hyvä jodin lähde, olennainen kilpirauhashormonien komponentti, ja siksi sitä on käytetty perinteisessä lääketieteessä kilpirauhasen toimintahäiriöiden, mukaan lukien struuma [17] ja liikalihavuus [18], hoitoon. A. nodosum puolestaan ​​on tärkein merilevä, jota käytetään teollisten ja kaupallisten kasvien biostimulanttien lähteenä, koska sen on osoitettu parantavan tehokkaasti kasvien kasvua, lieventävän joitain abioottisia ja bioottisia rasituksia ja samanaikaisesti tehostavan kasvien puolustuskykyä säätelemällä molekyylejä, fysiologiset ja biokemialliset prosessit [19,20]. Lisäksi Fucus- ja Ascophyllum-uutteilla on runsaasti bioaktiivisia yhdisteitä, ja niillä on suuri potentiaali käyttää ravintoaineina ja terveydenhuollossa [21].

Muut Fucales-perheet ovat vähemmän edustavia ja edustavat alle kymmentä sukua: Himanthaliaceae, yksityyppinen perhe, joka koostuu vain yhdestä Himanthalia-suvusta ja yhdestä lajista (H. elongate), on kotoisin Koillis-Atlantin valtamerestä, mutta sitä löytyy myös Pohjanmeri ja Itämeri; Durvillaeaceae, myös yksityyppinen (Durvillaea), tavataan eteläisellä pallonpuoliskolla, jossa joitain lajeista käytetään perinteisessä keittiössä [22]; Notheiaceae, toinen monotyyppinen perhe (Notheia), jossa on vain yksi tunnettu laji (N. anomala), joka on pakollinen epifyytti, jota esiintyy yleisesti Hormosira-lajeissa Australian etelärannikolla [23]. Hormosira, yksittäinen suku, joka kuuluu monotyyppiseen Hormosiraceae-perheeseen ja on kotoisin Kaakkois-Australiasta ja Uudesta-Seelannista, on yksi yleisimmistä vuorovesileväistä kivisillä rannoilla näillä alueilla [24]. Lopuksi Seirococcaceae on perhe, jossa on viisi sukua, joista vain kuusi lajia esiintyy yksinomaan eteläisellä pallonpuoliskolla ja jonka levinneisyys on suhteellisen rajoitettu [25].

Fucales-jäsenillä, kuten ruskealevällä yleensä, on aineenvaihduntakyky biosyntetisoida ainutlaatuisia fenoliyhdisteitä, nimeltään florotaniinit (PT:t). PT:t ovat olleet monien tutkimusten valokeilassa, koska näillä yhdisteillä voi olla lukuisia bioaktiivisia ominaisuuksia, jotka antavat niille suuren potentiaalin soveltaa erilaisilla lääketieteen ja teollisuuden aloilla. Antimikrobisten ja antioksidanttisten ominaisuuksiensa vuoksi PT:t löytävät sovellutuksia elintarvikepakkausteollisuudessa, erityisesti säilöntäaineina lihakäärekalvoissa säilyvyyden ja lihan aistinvaraisten ominaisuuksien parantamiseksi [26]. Florotaniinit ovat kosmetiikkateollisuudessa yhä kiinnostavampia ainesosia niiden ikääntymistä estävän ja UV-suojaavan vaikutuksensa vuoksi [27]. Näitä löytyy jo joidenkin aurinkosuojatuotteiden, kuten voiteiden [28] ja puikkojen [29] koostumuksista.

2. Menetelmät

Tämä katsaus tarjoaa kattavaa tietoa viimeaikaisista florotaniinitutkimuksen edistysaskeleista, erityisesti Fucales-lajista. Kaikki saatavilla oleva tieto kerättiin sähköisellä haulla eri tieteellisistä lähteistä, mukaan lukien PubMed, ScienceDirect, Google Scholar, Scientific Electronic Library Online (SciELO), Maailman henkisen omaisuuden järjestö (WIPO) ja Euroopan patenttivirasto (EPO). Kirjoittajat valitsivat seuraavat avainsanat löytääkseen asiaankuuluvia tutkimuksia: "phlorotanniinit" "Fucales" "Sargaceae" "Fucaceae", "Durvillaeaceae", "Himanthaleaceae", "Hormosiraceae", "Notheiaceae", "Seirococcaceae", "HPLCtraction" ", "Massaspektrometria" ja "NMR". Näitä termejä käytettiin yksinään tai yhdistelmänä Boolen operaattoreilla ("ja", "tai", "ei")

3. Florotanniinit ja pääluokat Fucalessa

Kemiallisesti PT:t edustavat luokkaa floroglusinolin (PHG) monomeeriyksiköiden (1,3,5-trihydroksibentseeni) dehydropolymeerejä, joilla on laaja molekyylipainoalue (126-650 KDa), mutta yleisimmin näiden biopolymeerien molekyylipaino vaihtelee välillä 10 - 100 kDa, jaettuna monomeeriyksiköiden sidostyypin mukaan: polttoaineet (-CC-fenyylisidokset), hallit ja kloorietyyli (-COC-eetterisidokset erosivat säännöllisestä para- ja ortoeetterisidokset ylimääräisten OH-ryhmien läsnä ollessa), fukofluorietolit (sekä -CC- että COC- sidokset) ja ekkolit/karmalolit (sisältävät dibentsodioksiinisidoksia). Eckolit eroavat karmaloleista tavallisesti alhaisella molekyylipainollaan ja fenoksyylisubstituutiolla (kuva 1).

Lähes 90 prosenttia PT:iden kokonaismäärästä löytyy vapaassa tilassa fysodeista eli solun sytoplasmasta, erikoistuneista kalvoon sitoutuneista vesikkeleistä, kun taas loput ovat soluseinässä, kompleksoituneena algiinihapon kanssa kovalenttisilla esteri- ja puoliasetaalisidoksilla, toimii rakennekomponenttina osmoottisen paineen säätelyssä [30]. Niiden tiedetään keräävän jopa 25 prosenttia merilevien kuivapainosta (DW), vaikka niiden määrät riippuvat suuresti levälajeista ja muista tekijöistä, kuten maantieteellisestä kasvualueesta, iästä, kudostyypistä, veden suolaisuudesta, vuodenajasta ja levämäärästä. ravinteet, valon voimakkuus ja veden lämpötila [31–33]. Esimerkiksi seitsemästä Fucale-lajista, eli Pelvetia canaliculata, Fucus spiralis, Fucus serratus, Bifurcaria bifurcate, Himanthalia elongata, A. nodosum ja F. vesiculosus, kaksi viimeistä, joiden tiedetään kehittävän sekavyöhykkeitä vuoroveden puolivälissä. , on osoitettu sisältävän korkeimman fenolipitoisuuden (noin 5,80 prosenttia DW), kun taas pienempiä pitoisuuksia löytyy lajeista, jotka kasvavat alemmalla vuorovesitasolla (4,3 prosenttia DW) ja vuorovesivyöhykkeen ylemmällä tasolla (3,9 prosenttia ja 3,4 prosenttia DW F. spiralis ja P. canaliculata, vastaavasti) [34].

Lopes et ai. [35] raportoivat PT-vaihteluista kahdesta Fucale-perheestä kuuluvien lajien välillä, nimittäin F. spiralis- (Fucaceae), Cystoseira nodi caulis-, Cystoseira tamariscifolia-, Cystoseira usneoides- ja Sargassum vulgare- (Sargassaceae) -lajeissa. ensimmäinen, joka edustaa noin 12 kertaa S. vulgaresta löydettyä. Keskimääräisiä ja erittäin vaihtelevia määriä havaittiin myös kolmen Cystoseira-lajin joukossa.

Maantieteellisen sijainnin ja veden suolaisuuden vaikutuksen (positiivinen korrelaatio) PT:iden pitoisuuteen F. vesiculosus -lajissa arktiselta alueelta osoittivat selvästi Obluchinskaya et al. [36], jotka rekisteröivät pitoisuudet välillä 72,4–158,1 mg PHG-ekvivalenttia/g DW-levää näytteenottopaikoista riippuen. Lisäksi Pedersen [37] raportoi, että A. nodosumin ja F. vesiculosuksen fenolipitoisuus lisääntyi suolaisuuden lisääntyessä niiden elinympäristöissä. Lisätutkimukset vahvistivat, että suolapitoisuuden lasku vastasi A. nodosumin ja F. vesiculosuksen fenolien runsasta erittymistä ympäröivässä vedessä, mikä johti näiden kahden lajin fenolipitoisuuden merkittävään laskuun [38].

PT:iden kausivaihtelut Fucalessa on seulottu eri lajeissa. Kun seurataan PT:iden pitoisuuksia viidessä monivuotisessa Sargassacean-lajissa Japaninmeren rannikolta, Kamiya et al. [39] rekisteröi suuria vaihteluita ympäri vuoden, mutta suhteellisen samanlainen vaihtelumalli viiden lajin välillä, joka koostui maksimista kesällä, jota seurasi lasku talvea kohti ja nousu huhtikuussa. Vaikka kirjallisuudessa on raportoitu joitakin ristiriitaisia ​​tuloksia Fucale-lajeista, kuten A. nodusum ja Fucus, suurin osa tiedoista viittaa siihen, että PT:iden tuotanto on suurinta kesällä, mikä vastaa suurimman auringon altistumisen ajanjaksoa, ja siis samaa mieltä näiden yhdisteiden UV-suojatoimintojen kanssa [34,40–42]. Mielenkiintoista on, että jotkut kirjoittajat ovat raportoineet myös suuremmasta PT:iden tuotannosta merilevissä, jotka kasvavat korkeammilla leveysasteilla, joissa veden lämpötilat ovat yleensä alhaisempia, kuin alemmilla leveysasteilla, joissa veden lämpötila on lauhkeampi. Kaakkois-Tyynenmeren lajin, Durvillaea antarctica, havaittiinkin sisältävän huomattavasti suurempia florotaniinipitoisuuksia, kun niitä kerättiin korkeammilla leveysasteilla (lähempänä etelänapaa) kuin keski- ja alemmilla leveysasteilla (lähempänä päiväntasaajaa) [43]. ]. Osittain se tosiasia, että tämä laji on sopeutunut paremmin subantarktisiin alueisiin ja voimakkaisiin aaltovoimiin, voisi selittää tällaiset havainnot, koska nämä voivat olla tärkeä tekijä rakenteellisten PT:iden synteesin stimuloinnissa UV-suojaavien PT:iden sijaan, vaikka näin ei ollutkaan. tekijöiden arvioima.

Huomionarvoista on, että edellä mainitut muuttujat kumuloituvat florotaniinin polymeroitumisasteen muutosten myötä, mihin vaikuttavat myös suuresti levälajit sekä bioottiset ja abioottiset rajoitukset, mikä lisää entisestään PT:iden rakenteellista monimuotoisuutta ja vaikeuttaa niiden selvittämistä. Suurin osa julkaistuista tiedoista kertoi vain makrolevänäytteiden kokonaispitoisuuksista sen sijaan, että selventäisivät eroja niiden profiileissa. Fucalesin tapauksessa PT:iden koostumuksen analyysi rajoittui pääasiassa sukuihin Fucaceae ja Sargassaceae, erityisesti suvuihin Fucus, Ascophyllum ja Cystoseira [44–47].

Fucaceae-lajeissa F. vesiculosus on ylivoimaisesti eniten tutkittu PT:n laji. Muun muassa UHPLC-DAD-ESI-MSn-analyysi, jonka ryhmämme suoritti tästä levälajista saadun hydroasetonisen uutteen etyyliasetaattifraktiosta, paljasti tavallisten polttoaineiden, fukofloretolien, hallien sekä useiden muiden PTs-johdannaisten läsnäolon. Polymeroitumisaste vaihtelee välillä 3 - 22 floroglusinoliyksikköä. Lisäksi tässä lajissa on alustavasti tunnistettu mahdollisia uusia PT:itä, mukaan lukien fukofurodifloretoli, fukofurotrifluoretoli ja fukofuropentafloretoli [48].

Erityisesti UPLC-MS, Tierney ja työtoverit [45] ehdottivat, että A. nodosum ja P. canaliculata sisälsivät pääasiassa suurempia PT:itä (polymerointiaste (DP) 6), kun analysoitiin PTs-rikastettuja fraktioita kolmen makrolevän vesi- ja hydroetanoliuutteista. -13 monomeeria), verrattuna F. spiralis -bakteeriin (4-6 monomeerin DP). PT:n ainesosien monimutkaisuuteen viitattiin myös Sargassaceae, erityisesti Sargassum-suvun kohdalla. Yhdessä muiden Sargassum-lajeihin keskittyvien töiden kanssa Li et al. [49] raportoivat täysityypin florotaniinien vallitsevan S. fusiformen PTs-rikkaassa fraktiossa (DP 2–10 monomeerit) ja muiden asiaankuuluvien yhdisteiden, erityisesti floretolien ja fukofloretolien, joilla on vaihteleva polymerointiaste (DP 2–) havaitsemisesta. 11 monomeeria); he raportoivat myös äskettäin löydetyistä eckoleista ja karmalolijohdannaisista. Yleisesti ottaen kirjoittajat tunnistavat monia haasteita PT:iden rakenteellisessa selvittämisessä, jotka estävät suhteiden luomista PT:iden koostumuksen ja uutteen bioaktiivisuuden välillä ja siten näiden luonnonvarojen täysimääräistä käyttöönottoa teollisuudessa. Siten leväyhteisön yhteinen pyrkimys kehittää tehokkaita ja standardimenetelmiä PT:iden analysointiin on ratkaisevan tärkeää.

4. Poistoprosessit ja patentit

Florotaniinit, kuten tanniinit yleensä, on ensisijaisesti uutettu käyttämällä kiinteä-neste-uuttoa (SLE) hydroasetonisilla seoksilla, vaikka muita liuottimia on yritetty. Vastaavasti, kun vertaillaan erilaisia ​​uuttoliuottimia, Wang et ai. [50] saavutti paremman tehokkuuden uutettaessa PT:itä F. vesiculousuksesta hydrokodonilla (70 prosenttia) eikä hydrometanolilla, hydroetanolilla, hydroksietyyliasetaatilla tai vedellä (20 ◦C tai 70 ◦C), yhteensä 393 mg PGE/ g uutetta (78,6 mg PGE-ekvivalenttia/g DW-levää), vaikka suurin uuttosaanto saatiin vesiuutteista. Catarino et ai. puolestaan ​​optimoidakseen PT:iden uuttamisen samasta lajista. [48] ​​testasi äskettäin erilaisia ​​uutto-olosuhteita ja päätteli, että uutto 67 % asetonilla (v/v), liuotin-kiintoainesuhde 70 ml/g ja lämpötila 25 ◦C tuotti suurimman uuttosannon (28 % ). Tämä on samanlainen kuin edellinen tutkimus, mutta kokonaisflorotaniinipitoisuudella on pienempi (10,7 mg PGE/g uutetta), mikä korostaa vaihtelua levänäytteiden välillä. Äskettäin kehitettiin luonnollisia syväeutektisia liuottimia (NADES), jotka koostuvat seoksista, joissa on eri suhteita koliinikloridia, maitohappoa, omenahappoa, betaiinia, glukoosia ja glyseriiniä [51]. Vaikka kyseessä oli SLE-uutto, sitä voidaan pitää evoluutiona kohti vihreämpiä menetelmiä käytetyn liuottimen ansiosta. Lisäksi kirjoittajat havaitsivat, että valmistettujen NADES-vesiliuosten käyttö voi parantaa PT:iden uuttosaantoa levistä, F. vesiculosuksesta ja A. nodosumista, jolloin saavutetaan samanlaiset arvot kuin yleisimmillä orgaanisilla liuottimilla [51].

Tehokkaampia ja ympäristöystävällisempiä uuttomenetelmiä, mukaan lukien mikroaaltoavusteinen uutto (MAE), ultraääni-avusteinen uutto (UAE), paineistettu liuotinuutto (PSE), ylikriittinen nesteuutto (SFE) ja entsyymiavusteinen uutto (EAE), on äskettäin ilmaantunut. vaihtoehtoisina menetelminä tavanomaisille SLE-uuttoille orgaanisia liuottimia käyttäen. Kaikkia näitä uusia tekniikoita sovellettiin jo yhdisteiden uuttamiseen levistä tai ainakin joillakin yhdisteillä rikastettujen leväuutteiden saamiseksi [52–54]. Joten niiden soveltamista PT:iden uuttamiseen odotettiin. Äskettäin Meng et ai. [55] tarkasteli näiden tekniikoiden soveltamista PT:iden uuttamiseen useista ruskeista makrolevistä. Yleensä mukana olevissa tutkimuksissa pyrittiin saamaan runsaasti uutteita niiden biologisen toiminnan arvioimiseksi; Poimintamenetelmä ei siksi ollut pääkysymys.

Siitä huolimatta on mielenkiintoista huomata, että jotkut ryhmät muuttivat uuttometodologiaansa vuosien varrella ja saivat silti runsaasti PT:tä sisältäviä uutteita. Yksi näistä esimerkeistä on Valentão ja työtoverit, jotka alkoivat käyttää SLE-metodologiaa asetoni:vesi-seoksella (7:3). Myöhemmin sama ryhmä käytti Arabiemiirikuntien tekniikkaa saadakseen PTs-rikkaita uutteita useista Fucus-lajeista. Vaikka tekijöiden tavoitteena ei ollut vertailla kahta uuttamismenetelmää ja samoissa tapauksissa mutta eri yksiköissä ilmoitettuja määriä, näyttää siltä, ​​että Arabiemiirikunnat eivät parantaneet PT:n määrää tutkituissa makrolevissä [16,56]. Toinen esimerkki, jota voidaan korostaa, on Shikov ja työtoverit, jotka käyttivät aiemmin valmistettuja NADES-laitteitaan PT:iden uuttamiseen F. vesiculosuksesta Yhdistyneiden arabiemiirikuntien olosuhteissa. Uuttosaanto ei kuitenkaan parantunut tekijöiden aikaisempiin tietoihin verrattuna [51]. On syytä mainita, että uuttoaika lyhennettiin 60 minuuttiin, mikä on etu [57].

Kun keskitytään vain PT:iden uuttamiseen, näyttää ilmeiseltä, että vaikka SFE on erittäin tehokas muiden metaboliittien uuttamisessa, sitä ei ole käytetty laajasti PT:iden uuttamisessa [55]. EAE näyttää olevan tehokas menetelmä, mutta raportteja on vain muutama [58], ja sen kustannukset voivat olla esteenä sen laajamittaiselle käytölle.

Harvat makrolevälajit on altistettu erilaisille tekniikoille, mikä tekee asianmukaisen vertailun muodostamisen vaikeaksi, koska uutettujen PT:iden määrä riippuu sijainnista ja keräysajasta [59,60]. Esimerkiksi F. vesiculosus PT:t uutettiin käyttämällä eri prosenttiosuuksia etanolia ja SLE [61], UAE [62] ja PSE [63] tekniikoita. Raportoidut tulokset osoittivat, että etanoliprosentti vaikutti PTs-pitoisuuteen, mutta voidaan myös päätellä, että PSE oli tehokkain. Suurempi määrä uutettiin (3690 mg gallushappoekvivalenttia / 100 g DW-merilevää) vain 4,68 minuutissa, kun taas muissa tekniikoissa käytettiin 30 minuuttia ja 24 tuntia vastaavasti Arabiemiirikuntien ja SLE:n osalta ja määrät alle 60 mg gallushappoekvivalenttia / 100 g DW-merilevää. Lisäksi MAE:n osoitettiin uuttavan onnistuneesti PT:itä suurempina määrinä ja lyhyemmällä uuttoajalla [31,64,65]. Tätä tekniikkaa sovellettiin myös F. vesiculosuksessa [66], mutta lisätutkimuksia tarvitaan Fucales-lajeissa.

Vaikka ei-tavanomaisten uuttomenetelmien käyttö on vielä vähäistä, niiden käyttöön voidaan ottaa muutamia huomioita. MAE, Yhdistyneet arabiemiirikunnat ja PSE vaativat lyhyempiä uuttoaikoja ja siten pienempää energiankulutusta. Ne voivat kuitenkin aiheuttaa hajoamista, jos korkeita lämpötiloja saavutetaan. Ne voivat soveltua laajamittaiseen tuotantoon, mutta kustannukset ovat suhteellisen korkeat. Luonnollisesti SLE on helpommin saatavilla oleva ja halvempi tekniikka suuressa mittakaavassa käytettäväksi; Valitettavasti se sisältää myös liuottimia, jotka ovat vähemmän ympäristöystävällisiä.

Taulukossa 1 on yhteenveto patenttikirjallisuudessa kuvatuista erillisistä menetelmistä PT:iden erottamiseksi Fucalesista, ja kuviossa 2 esitetään patenttien lukumäärän jakautuminen vuodessa ja maantieteellinen kattavuus. Koska Aasian maissa on pitkät perinteet merilevien ja niistä johdettujen tuotteiden käyttämisessä elintarvikkeissa ja kosmetiikassa, ei ole yllättävää löytää Aasiassa rekisteröityjä patentoituja prosesseja PT:iden uuttamiseksi merilevästä.

Saatavilla on samanaikaisesti joitain eurooppalaisia ​​ja maailmanlaajuisia patentteja, mikä osoittaa kasvavaa kiinnostusta PT:iden sovelluksiin. Mitä tulee uuttoprosesseihin sinänsä, on syytä huomioida, että SLE-menetelmien käyttö perustuu ihmisille turvallisiin liuottimiin, kuten veteen, glyseriiniin ja hydroetanoliseoksiin. Tällaisten liuottimien käytön perusteet liittyvät uutteiden käyttötarkoituksiin: PT-pitoisten uutteiden väitettyihin sovelluksiin kuuluvat valkaisevat, antioksidantit, tulehdusta ehkäisevät ja kosteuttavat aineet kosmetiikassa [67–70] sekä funktionaaliset ainesosat elintarvikkeissa. [71].

【Lisätietoja:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】