Uusia antioksidanttisia ainesosia panimoiden sivutuotteista kosmeettisiin valmisteisiin

Jul 07, 2022

Ota yhteyttäoscar.xiao@wecistanche.comLisätietoja


Abstrakti:Tämän työn tarkoituksena oli arvioida erityyppisten käsintehtyjen oluiden (Ego, Alter, Fiat Lux, Triplo Malto, Ubi ja Maior) fenolipitoisuutta ja antioksidanttiaktiivisuutta sekä lähtöaineita (maltaat, humalat ja hiiva), välituotteet ja jätetuotteet (käytetyt maltaat, humala ja hiiva), koska niitä voidaan käyttää innovatiivisissa kosmeettisissa formulaatioissa. Uutteet lähtö- ja käytetyistä näytteistä otettiin vedestä tai 70-asteisesta alkoholista. Kaikkien panimotuotteiden fenolin kokonaispitoisuus (Folin Ciocalteau Essay) riippui tietystä tutkimuksen kohteena olevasta tuotteesta. Korkeimmat arvot löytyivät lähtöhumalasta (vaihtelevat noin 93 - 155 mg GAE/g uuttoliuottimesta riippuen), keskiarvot lähtömaltaalla ja aloituspaastossa ja alhaisimmat vierteessä. Lopullisten oluiden fenolin kokonaispitoisuus on peräisin fenoleista, jotka on uutettu eri ainesosista eli lähtömaltaista, humalasta ja hiivasta, mutta käytetyissä tuotteissa havaittiin silti mitättömiä arvoja.cistanche-varsiAntioksidanttiaktiivisuuden, Trolox-ekvivalentin antioksidanttikapasiteetin (DPPH), rauta-ioneja vähentävän antioksidanttiparametrin (FRAP) sekä radikaalikationinpoistoaktiivisuuden ja pelkistystehon (ABTS) arvioinnissa käytetty menetelmä vaikutti voimakkaasti tuloksiin. Yleisesti ottaen tulokset heijastelevat kokonaisfenolipitoisuudessa havaittua trendiä: oluet rikastuvat asteittain kaikista lähtöaineista peräisin olevilla fenoleilla ja että käytetyillä tuotteilla on edelleen merkityksetöntä antioksidanttiaktiivisuutta. On mielenkiintoista huomata, että jätehiiva osoitti usein korkeampia arvoja kuin lähtöaineen arvot; voidaan päätellä, että hiiva pystyy imemään fenoleja oluesta panimon aikana. Ottaen huomioon kiinnostuksen hyödyntää elintarvikkeiden jalostuksessa syntyvää jätettä, Alter-panimotuotteiden jätteiden biologista aktiivisuutta on arvioitu keratinosyyttien (käytetyt maltaan, humalan ja hiivan tuotteet) soluviljelmässä. Alustavat in vitro -määritykset keratinosyyttien HaCaT-soluissa suoritettiin käytettyjen uutteiden mahdollisen bioaktiivisuuden arvioimiseksi. Käytetyistä uutteista käytetyt humala- ja hiivauutteet osoittivat kykyä parantaa mitokondrioiden toimintaa ja ehkäistä oksidatiivista stressiä HaCaT-soluissa, jotka ovat kaksi ihon ikääntymisen ominaisuutta. Yhteenvetona voidaan todeta, että tämä tutkimus tarjoaa todisteita siitä, että käsintehtyjen oluiden jätteet voivat olla mielenkiintoinen fenolien lähde ihon ikääntymistä estävän kosmetiikan valmistuksessa.

Avainsanat:käsintehty olut; panimo tuotteet; fenolin kokonaispitoisuus; antioksidanttiaktiivisuus; sytotoksisuus; ikääntymisen esto

KSL11

Napsauta tätä saadaksesi lisätietoja

1. Esittely

Käsityöoluesta on tullut yhä suositumpi Yhdysvalloissa ja Euroopassa [1, millä on merkittäviä vaikutuksia talouteen [3]. Tätä menestystä on ruokkinut kuluttajien kiinnostus maistaa uusia maku- ja aromioluita [2] ja huomio maltillisen oluen kulutuksen terveyshyötyihin [4].

Toisin kuin kaupalliset oluet, käsityöoluet ovat suodattamattomia ja pastöroimattomia, joten niiden aistinvaraiset ominaisuudet säilyvät muuttumattomina panimoprosessin aikana. Lisäksi voidaan säästää terveydelle hyödyllisiä aineita, kuten antioksidantteja.

Kaupallisten oluiden ja niiden jätetuotteiden antioksidanttiset ominaisuudet on jo arvioitu. Zhao et al.[5] määritti 34 kaupallisen oluen fenoliprofiilit ja vastaavat antioksidanttiaktiivisuudet ja havaitsi merkittäviä eroja kokonais- ja yksittäisissä fenolipitoisuuksissa ja antioksidanttiaktiivisuudessa.cistanche tubulosa hyödyt ja sivuvaikutuksetYleisimmät fenoliyhdisteet olivat galli- ja ferulihappo. Samaan aikaan Ribeiro Tafulo et ai. [6] määritti 27 muun kaupallisen oluen antioksidanttiaktiivisuuden käyttämällä useita spektrofotometrisiä menetelmiä. Samana vuonna Piazzon et al., 2010[7|arvioivat erityyppisten kaupallisten oluiden (abbey-, ale-, bock-, vehnä-, lager-, pilsner- ja alkoholittomien oluiden) antioksidanttiaktiivisuutta ja fenolipitoisuutta ja löysivät niistä suuren valikoiman. Kotitekoisia oluita koskevassa tutkimuksessa Farcas et al. [8] määritti kokonaispolyfenolipitoisuuden ja antioksidanttiaktiivisuuden koko tuotantoprosessin ajan raaka-aineista (mallas ja humala) hyödynnettyyn jätteeseen asti. Ne osoittivat, että alun perin korkeampi kokonaispolyfenolipitoisuus ja antioksidanttiaktiivisuus raaka-aineissa johtuivat maltaiden läsnäolosta ja että kokonaispolyfenolipitoisuus laski voimakkaasti siirtyessään olueen ja käytettyyn maltaan lopullisessa oluttuotteessa ja käytetyssä maltaissa. Hiivaa ei analysoitu.

KSL12

Cistanche voi estää ikääntymistä

Zhao ja työtoverit [9] osoittivat maltaista peräisin olevat antioksidanttiyhdisteet, jotka osoittivat useiden mallasohralajikkeiden antioksidanttiaktiivisuuden ja kokonaisfenolipitoisuuden. Muut kirjoittajat tunnistivat neljäkymmentäseitsemän fenoliyhdistettä neljästä kaupallisesta oluesta käyttämällä nestekromatografiaa yhdistettynä sähkösumutusionisaatiohybridiin lineaariseen ioniloukkukvadrupoliin Orbitrap-massaspektrometriatekniikkaan [10]. Äskettäin pienmolekyylipainoisten fenoli- ja typpiyhdisteiden tunnistaminen käsityöoluista saavutettiin HPLC-ESI-MS/MS-analyyseillä [11]. Kirjoittajat yrittivät erottaa oluet, kuten IPA, Lager ja Weiss, fenoli- ja typpiyhdisteiden mukaan, mutta eivät löytäneet merkittäviä eroja eri oluttyyppien välillä näissä yhdisteissä.

Hiljattain [12] 20 fenoliyhdistettä, esimerkiksi gallushappo, katekiini, kofeiinihappo, kversetiini, ksantohumoli ja humuloni, valittiin ja määritettiin erilaisissa käsityöoluissa, vierteissä, panimon lähtöaineissa (ohramallas, humala ja hiiva). ) ja sivutuotteet (ohran kuori, käytetty humala ja käytetty hiiva).cistanche tubulosa -uuteTästä tutkimuksesta havaittiin, että kaikkien näytteiden välillä oli merkittäviä eroja ja että oluen koostumus riippuu vastaanotto- ja haudutusprosessista. Oluiden fenoliyhdisteet olivat pääasiassa peräisin ohramallasista, ja mielenkiintoista kyllä, hiiva pystyi imemään fenolisia yhdisteitä muista lähteistä.

Siten oluentuotannon jätetuotteissa olevien antioksidanttien arvioinnilla voi olla suuri merkitys, kun otetaan huomioon käsityöolutmarkkinoiden nopea kasvu maailmanlaajuisesti.

Panimoiden sivutuotteiden hyödyntäminen terveystuotteiden, kuten kosmetiikan ja/tai lisäravinteiden, kehittämiseen auttaisi lisäämään olutuotannon kestävyyttä. Tällä tutkimuksella on useita tavoitteita: arvioida erityyppisten italialaisten käsityöoluiden (laager-, meripihka-, kolmimallas-, puna- ja musta-oluiden) fenolin kokonaispitoisuus ja antioksidanttiaktiivisuus sekä arvioida niiden tuotannon välituote sekä jätetuotteet. Alter-panimon jäteuutteiden biologinen aktiivisuus arvioitiin siten ihmisen keratinosyyteillä. Tämä avaa uusia ja mielenkiintoisia mahdollisuuksia hyödyntää uusia ainesosia panimoiden sivutuotteista kosmeettisiin formulaatioihin.

2. Kokeellinen

2.1. Materiaalit

1,1-difenyyli-2-pikryylihydratsyyli (DPPH),2,4,6-tris(2-pyridyyli)-s-triatsiini (TPTZ), (±){{9 }}Hydroksi-2,5,7,8-tetrametyylikromaani-2-karboksyylihappo(TROLOX),2,2'-atsinobis(3-etyylibentsotiatsoliini{{20} }sulfonihappo) diammoniumsuola (98 % TLC) (ABTS), gallihappo, natriumkarbonaattimonohydraatti-ACS-reagenssi, natriumasetaatti ja etanoli (etanolin absoluuttinen laatu) ostettiin Sigma-Aldrichilta (Steinheim, Saksa). Mangaani (IV) hapettui aktivoituna (suurempi tai yhtä suuri kuin 90 prosenttia) ja Folin-Ciocalteun fenolireagenssi ostettiin Flukalta (Buchs, Sveitsi). Vedetön natriumasetaatti ja vedetön rauta(III)kloridi ostettiin JTBakerilta (Center Valley, PA, USA) ja vedetön natriumkarbonaatti ostettiin Carlo Erbalta (Milano, Italia). Kaikki liuottimet ja reagenssit olivat analyyttistä laatua. Ultrapuhdasta vettä tuotti Gradient Milli-Q (Millipore, Molsheim, Ranska). Lähtöaineet, käsityöoluet, vierteet ja niiden jätetuotteet toimitti ystävällisesti Birrificio Collesi (Apecchio, Italia).

Tässä tutkimuksessa tutkittujen oluiden yksityiskohtaiset ominaisuudet on esitetty taulukossa 1. Lähtömaltastyyppi ja humala määrittelivät tärkeimmät erot kaikkien oluiden välillä. Voidaan käyttää viittä erilaista lähtömallasta, usein seoksissa ja eri suhteissa. Perle- ja Saaz-humalaa käytetään eri suhteissa niiden eri aromin vuoksi. Samaa hiivaa, Saccharomyces Cerevisiaea, käytettiin kaikissa oluissa, jotka olivat kaikki korkeakäymisisiä. Eri yhdistelmät tuottavat erityyppisiä oluita (laager-, meripihka-, kolmimalla-, punainen ja musta), joiden alkoholipitoisuus vaihtelee välillä 6.0 - 9.{5}} % V/V.

image

2.2. Näytteen valmistelu

Ennen analyyseja lähtöaineet (mallas, humala ja hiiva), oluet, vierteet ja jätteet (käytetty mallas, humala ja hiiva) altistettiin erilaisille prosesseille niiden fysikaalisen olomuodon mukaan, joka voi olla kuivattua kiinteää, kosteaa. kiinteää tai sameaa nestettä (taulukko 2).

Kosteat kiinteät aineet ja nesteet lyofilisoitiin ensin {{0}} asteen lämpötilassa ja 0,03 baarin paineessa (FreeZone 1 Liter Benchtop Series 77 400 kylmäkuivausrumpu, LABCONCO, Kansans City, MO, USA). Kuivatut kiinteät aineet jauhettiin leikkurimyllyssä. Seuraavaksi kaikki näytteet uutettiin. Näytemäärä punnittiin huolellisesti ja dispergoitiin 100 ml:aan liuotinta (vettä tai 70-asteista etanolia). Saatu neste laitettiin Erlenmeyer-pulloon, joka suljettiin sitten huolellisesti. Näytteitä sekoitettiin magneettisesti 24 tuntia huoneenlämpötilassa, sitten sentrifugoitiin 12, 000 rpm 20 asteessa 10 minuuttia liukenemattomien hiukkasten poistamiseksi (Zetalab CNZ-140HE, Padova, Italia). Näytteet lyofilisoitiin ja säilytettiin -20 asteessa 50 ml:n polyeteenipulloissa, joissa oli kierrekorkki (BD Falcon TM, BD Biosciences, Bedford, MA, USA) optimaalisten säilytysolosuhteiden varmistamiseksi.

2.3. Kokonaisfenolipitoisuuden määritys

Näytteiden kokonaisfenolipitoisuus (TPC) määritettiin Folin-Ciocalteu-spektrofotometrisen menetelmän [13] mukaisesti tietyin muutoksin [14]. Lyhyesti sanottuna kaikkia pakastekuivattuja tuotteita käytettiin kirkkaiden liuosten valmistukseen pitoisuudella 10 mg ml -1. 50 µl:n erä tätä liuosta lisättiin 150 µl:aan Folin-Ciocalteun fenolireagenssia, joka oli laimennettu 1–4 vedellä. Sitten lisättiin 50 µl Na2CO3 kyllästettyä liuosta. Huoneenlämmössä 10 minuutin inkuboinnin jälkeen kunkin kuopan absorbanssi määritettiin 765 nm:ssä käyttäen mikrolevylukijaa (FLUOstar Omega, BMG Labtech GmbH, Ortenberg, Saksa). Mittausta verrattiin gallushapon (GA) kalibrointistandardiliuokseen, ja tulokset ilmaistiin milligrammoina gallushappoekvivalenttia (GAE) grammaa kohden sivutuotetta (mg GAE/g).

2.4. Antioksidanttiaktiivisuuden arviointi

Käsityöoluen ja sivutuotteiden antioksidanttiaktiivisuus arvioitiin mittaamalla 11-difenyyli-2-pikryylihydratsyyli (DPPH)-radikaaleja poistava aktiivisuus, 2,2'-atsino-bis(3-etyylibentsotiatsoliini) -6-sulfonihappo)(ABTS* plus )radikaalikationien poistokyky ja rautapitoisuutta vähentävä antioksidanttikapasiteetti (FRAP). Troloxia (6-hydroksi-2,5,7,8-tetrametyylikromaani-2-karboksyylihappo) käytettiin kalibrointistandardina. Arvot ilmaistiin mmol Trolox-ekvivalenttia/g näytettä IC50:n funktiona, joka määritellään testatun materiaalin konsentraationa, joka vaaditaan aiheuttamaan 50 prosentin lasku DPPH:n, ABTS:n tai raudan alkupitoisuudessa.

2.5. Troloxia vastaavan antioksidanttikapasiteetin (DPPH) arviointi

DPPH:n vapaita radikaaleja poistava aktiivisuus arvioitiin mikrolevyanalyysimenetelmällä aiemmin julkaistujen menetelmien mukaisesti [15] joissakin muokkauksissa [16]. Lyhyesti sanottuna 50 ul:n alikvootti näytteestä (konsentraatio 10 mg ml-) ja standardi lisättiin 150 µl:aan DPPH:ta absoluuttisessa etanolissa 96-kuoppamikrotiitterilevyllä (BD FalconM) 37 asteen inkuboinnin jälkeen. C 20 minuutin ajan, kunkin kuopan absorbanssi määritettiin 517 nm:ssä käyttämällä mikrolevylukijaa. Antioksidanttiaktiivisuus laskettiin ja ilmaistiin Trolox-määrää vastaan ​​yhtälön (1) mukaisesti [17], jossa Ao ja A ovat DPPHe-radikaaliliuoksen absorbanssit aallonpituudella 517 nm kontrollinäytteen ja vastaavasti uutenäytteiden läsnä ollessa.

KSL13

2.6. Radikaalikationinpoistoaktiivisuus ja vähennysteho (ABTS)

ABTS-määritys suoritettiin noudattamalla aikaisempia menettelyjä [18] ja sovellettiin 96-kuoppamikrolitralevyanalyysiin. ABTS9 plus -liuos (5 mM) valmistettiin hapettamalla ABTS MnO:lla vedessä 30 minuuttia pimeässä. 50 µl:n alikvootti eri konsentraatioista näytettä ja standardia (Trolox) lisättiin 150 µl:aan ABTS*-liuosta 96-kuoppamikrotiitterilevy (BD Falcone). Kun oli inkuboitu huoneenlämpötilassa 10 minuuttia, kunkin kuopan absorbanssi määritettiin 734 nm:ssä käyttäen mikrolevylukijaa. Arvot laskettiin ja ilmaistiin Trolox-määrää vastaan ​​yhtälön (2)[17] mukaisesti, jossa A ja A ovat OHe-radikaaliliuoksen absorbanssi aallonpituudella 734 nm kontrollinäytteen ja uutenäytteiden läsnä ollessa, vastaavasti.

2.7. Ferric-long-Reducing Antioxidant Parameter (FRAP)

Käsityöoluen/sivutuotteiden FRAP-arvot määritettiin aiemmin julkaistulla menetelmällä [19], joissain muutoksin [20]. FRAP-reagenssi valmistettiin sekoittamalla seuraavat kolme liuosta:

1,50 ml 0,3 M asetaattipuskuria pH 3,6 (1,23 g natriumasetaattia 50 ml:ssa vettä happamoittava

etikkahapon kanssa);

2. 5 ml 5 mM TPTZ(24,6-tripyridyyli-s-triatsiini) (15,6 mg) varastoliuosta 40 mM HCl:ssa; 3,5 ml 5 mM FeCl3·6H20:ta (16,2 mg) 40 mM HCl:ssa.

FRAP-reagenssi kuumennettiin 37 asteeseen ennen käyttöä. Alikvootit 25 µl:sta näytteestä (liuokset pitoisuudella 10 mg ml-l) lisättiin kolmena rinnakkaisena 96-kuoppalevyn (BD Falcon) kuoppiin. Määritys aloitettiin lisäämällä 175 ui FRAP-reagenssia kuhunkin kuoppaan. Levyä ravisteltiin välittömästi FLUOstar Omega -levynlukijassa 30 sekuntia ja reaktion annettiin käydä 10 minuuttia, minkä jälkeen levy luettiin levynlukijalla (593 nm). Troloxin vertailuliuos ajettiin samanaikaisesti ja sitä käytettiin kalibrointikäyrän muodostamiseen lineaarisella regressiolla.cistanche tubulosa arvostelutStandardikäyrä oli lineaarinen välillä 25 - 800 uM Trolox(TE). Tulokset ilmaistiin uM Trolox-ekvivalenttina (TE)gI-näytteenä.

KSL14

2.8. SoluviljelmäS

Ihmisen keratinosyyttisolulinjaa, HaCaT, kasvatettiin rutiininomaisesti Dulbeccon modifioidussa Eagle's Mediumissa (DMEM), johon oli lisätty 10 prosenttia naudan sikiön seerumia (FBS), 2 mM L-glutamiinia, 50 U/ml penisilliiniä ja 50 ug/ml streptomysiiniä 37 asteessa. kostutettu inkubaattori, jossa on 5 prosenttia CO2:ta. Sytotoksisuuden, mitokondrioiden aktiivisuuden ja solunsisäisen ROS-muodostuksen arvioimiseksi HaCaT-solut kylvettiin 96-kuoppalevyille tiheydellä 2 x 10* solua/kuoppa. Kaikki kokeet suoritettiin 24 tunnin inkuboinnin jälkeen 37 asteessa 5 % C02:ssa. HaCaT-soluilla tehtäviä kokeita varten valmistettiin käytettyjen uutteiden kantaliuoksia veteen 60 mg/ml. Varastoliuokset laimennettiin sitten täydelliseen väliaineeseen käytettyjen uutteiden haluttujen pitoisuuksien saamiseksi.

2.9. Sytotoksisuus ja mitokondrioaktiivisuus

Solujen elinkelpoisuus arvioitiin vähentämällä {{{{10}}}}(4,5-dimetyyli-2-tiatsolyyli)-2,5-difenyyliä -2H-tetratsoliumbromidi (MTT) liukenemattomaksi formataaniksi, kuten aiemmin on kuvattu [21]. Lyhyesti sanottuna HaCaT-soluja käsiteltiin 24 tuntia eri uutteen pitoisuuksilla (0003-3 mg/ml) 37 asteessa 5 prosentissa CO2:ssa. Myöhemmin hoitoaine korvattiin MTTin Hankin tasapainotetulla suolaliuoksella (HBSS). (0,5 mg/ml) 2 tunnin ajan 37 asteessa 5 % C02:ssa. HBSS-pesun jälkeen formatsaanikiteet liuotettiin isopropanoliin. Formatsaanitasot mitattiin (570 nm, vertailusuodatin 690 nm) käyttämällä monimerkkilevylukijaa VICTORTM X3 (PerkinElmer, Waltham, MA, USA). Solujen elinkelpoisuus ilmaistiin prosentteina kontrollisoluista.

Mitokondrioiden aktiivisuus määritettiin MTT:llä, kuten aiemmin on kuvattu, pienin muutoksin [22]. Lyhyesti sanottuna HaCaT-soluja käsiteltiin 4 tunnin ajan joko DMEM:llä 10 % FBS:llä (ravinneelatusaine) tai Dulbeccon fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella ( suolaliuos ilman ravinteita) 0,03 mg/ml uutteen läsnä ollessa 37 asteessa 5 % CO:ssa.cistanche UKSen jälkeen käsittely korvattiin MTT:llä 2 tunnin ajaksi 37 asteessa 5 prosentin CO2:ssa. HBSS-pesun jälkeen formatsaanikiteet liuotettiin isopropanoliin. Formatsaanitasot, jotka korreloivat mitokondrioiden aktiivisuuden kanssa, mitattiin (570 nm, vertailusuodatin 690 nm) käyttämällä monimerkkilevylukijaa VICTORTM X3 (PerkinElmer). Mitokondrioaktiivisuus ilmaistiin prosenttiosuutena kontrollisoluista.

2.10. Solunsisäinen ROS-muodostus

Reaktiivisten happilajien (ROS) muodostuminen arvioitiin fluoresoivalla koettimella 2'-7'diklooridihydrofluoreseiinidiasetaatilla (H, DCF-DA), kuten aiemmin on kuvattu [23] (HaCaT-soluja käsiteltiin 2 tuntia 0 .03 mg/ml uutetta 37 asteessa 5 % CO:ssa. Sen jälkeen käsittelyväliaine poistettiin ja kuhunkin kuoppaan lisättiin 100 µl H2DCF-DA:ta (10 ug/ml). 30 minuutin inkuboinnin jälkeen huoneenlämpötilassa H2CF-DA-liuos korvattiin H-O2-liuoksella (100 µM) 30 minuutin ajan. Rinnakkainen joukko HaCaT-soluja käsiteltiin H2Oz:lla ja 0,03 mg/ml uutteella 30 minuutin ajan. ROS-muodostus mitattuna mielivaltaisina fluoresenssin yksiköinä, AUF (viritys 485 nm:ssä ja emissio aallonpituudella 535 nm) käyttämällä monileimalevylukijaa VICTORTM X3 (PerkinElmer) Tulokset ilmaistaan ​​ROS-muodostuksen kerroinlisäyksenä verrattuna käsittelemättömiin soluihin (eli AUF). Hoz/AUF:llä käsitellyt solut käsittelemättömistä soluista) 2.11. Tilastollinen analyysi

Tiedot esitetään keskiarvona ± keskihajonta (SD) vähintään kolmesta riippumattomasta kokeesta. Tilastollinen analyysi suoritettiin käyttämällä yksisuuntaista ANOVAa Dunnettin tai Bonferronin post hoc -testillä ja Studentin t-testillä, tapauksen mukaan. Eroja pidettiin merkittävinä p<0.05. analyses="" were="" performed="" using="" graphpad="" prism="" software="" (version="" 5.0;="" graphpad="" software,="" la="" jolla,="" ca,="" usa)="" on="" a="" windows="">

hyvin. 3 0 minuutin huoneenlämpötilassa inkuboinnin jälkeen H2CF-DA-liuos korvattiin H-O2-liuoksella (100 µM) 30 minuutin ajaksi. Rinnakkainen joukko HaCaT-soluja käsiteltiin H2Oz:lla ja 0,03 mg/ml uutteella 30 minuutin ajan. ROS:n muodostuminen mitattiin mielivaltaisina fluoresenssin yksiköinä, AUF (viritys 485 nm:ssä ja emissio 535 nm:ssä) käyttämällä monimerkkilevylukijaa VICTORTM X3 (PerkinElmer). Tulokset ilmaistaan ​​ROS-muodostuksen kerta- nousuna käsittelemättömiin soluihin verrattuna (ts. Hoz:lla käsiteltyjen solujen AUF käsittelemättömien solujen AUF).

2.11. Tilastollinen analyysi

Tiedot esitetään keskiarvona ± keskihajonta (SD) vähintään kolmesta riippumattomasta kokeesta. Tilastollinen analyysi suoritettiin käyttämällä yksisuuntaista ANOVAa Dunnettin tai Bonferronin post hoc -testillä ja Studentin t-testillä, tapauksen mukaan. Eroja pidettiin merkittävinä p<0.05. analyses="" were="" performed="" using="" graphpad="" prism="" software="" (version="" 5.0;="" graphpad="" software,="" la="" jolla,="" ca,="" usa)="" on="" a="" windows="">


Tämä artikkeli on poimittu julkaisusta Cosmetics 2021, 8, 96. https://doi.org/10.3390/cosmetics8040096 https://www.mdpi.com/journal/cosmetics


















































Saatat myös pitää