Mekaaninen tutkimus Cistanche-pohjaisesta kasviperäisestä koostumuksesta eturauhasen hyvänlaatuisen liikakasvun hoidossa: verkostofarmakologia ja kokeellinen validointimenetelmä Ⅱ

2. Tulokset

2.1 Cistanche-yhdisteen mahdolliset terapeuttiset kohteet BPH:n hoidossa

Yhteensä218 tavoitetta, jotka liittyvät Cistanche-pohjaisen formulaation vaikuttaviin ainesosiinhaettiin tietokannoista, ja kirjallisuuden louhinnalla tunnistettiin 42 lisäkohdetta, mikä tuotti260 ainutlaatuista kohdetta. sillä välinBPH:hen liittyvät sairaudetkerättiin GeneCards (843), CTD (951), DrugBank (7) ja DisGeNET (37), mikä johti1 584 ainutlaatuista BPH:hen liittyvää kohdettaduplikoinnin jälkeen.

Leikkaamalla yhdisteisiin liittyvät kohteet BPH:hen liittyvien kohteiden kanssa,125 mahdollista terapeuttista kohdettavartenCistanchehoidossahyvänlaatuinen eturauhasen liikakasvu (BPH)tunnistettiin. Venn-kaavio on esitetty kuvassaKuva 1.

 

Cistanche-pohjainen yrttikoostumus, jossa on korkea aktiivinen ainesosahoidossahyvänlaatuinen eturauhasen liikakasvu (BPH)

Siirry tuoteluetteloon Hanki lisätietoja

 

 

 

2.2 Mahdollisten kohteiden PPI-verkkoanalyysi

Theproteiini-proteiini-vuorovaikutusverkko (PPI).125 mahdollisesta kohteesta on kuvattuKuva 2. Tässä verkossa paksummat ja tummemmat reunat osoittavat vahvempaa vuorovaikutusta kohteiden välillä, kun taas suuremmat ja tummemmat solmut merkitsevät suurempaa keskeisyyttä ja merkitystä taudin kannalta.

Mukana tärkeimmät tavoitteet korkealla liitettävyydellä ja osuvuudellaAKT1, TNF, TP53, IL1, EGFR, CASP3, jaPTGS2, joilla voi olla suuri rooliCistanchen vaikutusmekanismi BPH:ta vastaan.

2.3 GO ja KEGG Pathway Enrichment Analysis

Kuva 3esittelee GO- ja KEGG-rikastustulokset. Suuremmat pisteet osoittavat korkeampia rikastustasoja, kun taas värin intensiteetti heijastaa tilastollista merkitystä.

GO analyysipaljasti, että Cistanche voi vaikuttaa BPH:hen biologisten prosessien, kuten esimpuolustusvaste lipopolysakkarideille, bakteeriärsykkeille ja oksidatiiviselle stressille, sekä solukomponentit, kutensytoplasma ja solunulkoinen tila.

KEGG-reitin analyysiosoitti merkittävää rikastumistaIL-17, HIF-1, TNF, jaPI3K-Akt-signalointireitit, ehdottaa sitätulehdus, immuunimodulaatio ja solujen lisääntyminen/apoptoosiovat keskeisiä mekanismeja.

 

2.4 Herb-Compound-Target-Pathway verkon rakentaminen

Kuten näkyyKuva 4,"yrttiyhdiste-kohdepolku" -verkostosisältää172 solmuaja626 reunaa. Solmun koko ja väri kuvastavat liitettävyyden astetta.

The6 parasta avainyhdistettä(tutkinnon mukaan) olivat:

Luteoliini

Apigeniini

Plantain glykosidi

Mangiferiini

Shafotaxin

Isovitexin

Nämä yhdisteet ovat peräisin formulaatiossa yleisesti käytetyistä yrteistäCistanchejohdannaiset, kuten shafotaksiini ja isoviteksiini, näyttelevät merkittäviä rooleja.

Tärkeimmät polut, kutenIL-17, HIF-1, TNF ja PI3K-AKTlinkitettiinydintavoitteetkutenPTGS2, AR, CASP3, IL6, PTGS1, jaAKT1. Nämä kohteet osoittivat voimakkaita assosiaatioita aktiivisten yhdisteiden kanssa, mikä osoittaamonen kohteen ja monen reitin synergia.

2.5 Molecular Docking Verification

Kuten näkyyKuvio 5A, 24 yhdiste-kohde pariaoli sitovia energioitaVähemmän tai yhtä suuri kuin –6 kcal/mol, mikä viittaa vahvaan sitoutumisaffiniteettiin.

Kuvio 5Bkuvaa kuusi parasta telakointimallia. Kohokohtia ovat:

PTGS2osoitti vahvaa sitoutumista kanssaluteoliinijaapigeniini.

AKT1osoitti hyvää affiniteettiaplantain glykosidi, mangiferiini, shafotaksiini, isoviteksiini, luteoliini, jaapigeniini.

Tämä vahvistaamolekyylipohjafarmakologisissa ja reittianalyyseissä havaittujen yhteisvaikutusten osalta.

 

2.6 Cistanchen vaikutukset kehon painoon, eturauhasen painoon ja eturauhasindeksiin BPH-rotilla

Koko kokeen ajanruumiinpainossa ei ole merkittäviä erojaryhmissä havaittiin (P > 0,05), mikä osoittaa hoidon turvallisuuden.

Verrokkiryhmään verrattunamalliryhmäosoitti merkittävästilisääntynyt eturauhasen märkäpaino ja eturauhasindeksi(P < 0,01), mikä vahvistaa onnistuneen BPH-induktion.

Hoito kanssaCistanche-yhdiste (keskikokoiset ja suuret annokset), samoin kuinQianlie Shutong, merkittävästipienentynyt eturauhasen paino ja indeksi(P < 0,05, P < 0,01), kuten näkyyTaulukko 1, ehdottaa sitäCistanche estää eturauhasen liikakasvuaBPH-rotissa.

12 % Acteoside Cistanche käyttää intro

 

2.7 Histopatologiset vaikutukset eturauhaskudoksiin

Kuva 6osoittaa histologisia muutoksia:

Kontrolliryhmä: Normaali eturauhasen kudosrakenne litteällä tai matalalla pylväsepiteelillä, tasaiset rauhasten luumenit.

Malliryhmä: Merkittävä hyperplasia, hypertrofiset tyvisolut, paksuuntunut sileä lihas, epäsäännölliset epiteelisolut.

Cistanche-käsitellyt ryhmät: Parempi rakenne, vähentynyt solujen lisääntyminen, säännöllisemmät rauhasontelot, erityisesti sisälläkeskisuurten ja suurten annosten ryhmät.

Wecistanchen tukipalvelu - Ota yhteyttä saadaksesi näyte- tai tukkuhinnan
Sähköposti:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Puhelin:+86 15292862950

 

2.8 Vaikutukset seerumin COX-2-, VEGF- ja PGE2-tasoihin

Kuten näkyyTaulukko 2:

Themalliryhmäoli merkittävästi kohonnutCOX-2, VEGF ja PGE2(P < 0,01).

Hoito kanssaCistanche-rakeet (keskikokoiset ja suuret annokset)jaQianlie Shutongmerkittävästivähentyneet tulehdusmerkit(P < 0,05, P < 0,01).

Tämä osoittaa, ettäCistanchella on anti-inflammatorisia ja antiangiogeenisia vaikutuksia, mikä saattaa olla sen terapeuttisen vaikutuksen taustalla BPH:ta vastaan.

SEO avainsanat: COX-2 VEGF PGE2 BPH, Cistanche anti-inflammatorinen, sytokiinien yrttimodulaatio

 

2.9 Cistanche-yhdisteen vaikutukset AKT1-, p-AKT1-, PI3K-, p-PI3K-, COX-2- ja VEGF-ilmentymiseen eturauhaskudoksessa

Kuten näkyyKuva 7, proteiinin ilmentymistasojap-AKT1, p-PI3K, PI3K, COX-2, jaVEGFolivat merkittävästisäänneltyinBPH malliryhmäverrattunakontrolliryhmä(P < 0,05, P < 0,01). Hoito kanssaCistanche-pohjainen yhdisteklokeskisuuret ja suuret annoksetmerkittävästialassäänneltynämä proteiinitasot (P < 0,05, P < 0,01), mikä viittaa siihenCistanchella voi olla proliferatiivisia vaikutuksia moduloimalla PI3K/AKT-tulehdussignaalisarjaa.

 

3. Keskustelu

Hyvänlaatuinen eturauhasen liikakasvu (BPH)on yleinen ikään liittyvä urologinen sairaus miehillä. Perinteisessä kiinalaisessa lääketieteessä (TCM) se luokitellaan oireyhtymiin, kuten"Pitkä bi"tai"Jing Long", ja sen katsotaan johtuvanQi:n pysähtyminen virtsarakossa ja Sanjiaon (kolmiopolttimen) toimintahäiriö. Hoitoperiaatteet sisältävät yleensätonisoi munuaisia, edistää virtsaamista ja aktivoi verenkiertoa.

Vaikka BPH:n patogeneesin tarkka mekanismi on edelleen epäselvä, nykyiset teoriat sisältäväthormonaalinen epätasapaino, tulehdus, kasvutekijän yli-ilmentyminen, epiteeli-stromaalinen vuorovaikutus, jaapoptoosin säätelyhäiriö[3,15]. Epiteeli- ja stroomasolujen liiallinen proliferaatio ja epänormaali apoptoosi hormonien ja tulehduksen ohjaamana tunnetaankeskeiset patologiset prosessitBPH:ssa [16–18].

Tämä tutkimus keskittyi aCistanche-pohjainen yrttiyhdisteBPH:n hoitoon. Cistanche (肉苁蓉) on tunnettuYang-virkistävä yrttiTCM:ssä, joka tunnetaan siitämunuaisia ​​vahvistava, tulehdusta ehkäisevä, jaeturauhasta ravitsevaominaisuuksia. Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet sen parantavan vaikutuksenvirtsan virtaus, vähentääeturauhasen koko, ja säätelyandrogeenien aineenvaihdunta.

 

Network Pharmacology and Molecular Mechanism Insights

Integroimalla verkostofarmakologian tunnistimme125 päällekkäistä kohdettavälilläCistanchen aktiiviset ainesosatjaBPH:hen liittyvät geenit. PPI-verkkoanalyysi korostettunaAKT1, TNF, TP53, IL1, EGFR, CASP3, jaPTGS2keskusnapaproteiineina.

"Yrttiyhdiste-kohdepolku" -verkosto tunnistettuplantain glykosidi, mangiferiini, luteoliini, apigeniini, shafotaksiini, jaisoviteksiinitärkeimpinä bioaktiivisina yhdisteinä kaavassa. Nämä yhdisteet osoittivat voimakkaita vuorovaikutuksia ydinkohteiden kanssa, mukaan lukienPTGS2, AR, CASP3, IL6, PTGS1, jaAKT1.

Molekyylitelakkaanalyysivahvistettu suotuisa sitoutuminen (sitoutumisenergia alle tai yhtä suuri kuin –6 kcal/mol) näiden yhdisteiden ja ydinkohteiden välillä, erityisesti:

PTGS2kanssaluteoliini ja apigeniini

AKT1kanssaplantain glykosidi, mangiferiini, luteoliini, apigeniini, shafotaksiini, jaisoviteksiini

 

Mukana olevat avainsignalointireitit

KEGG-rikastusanalyysipaljasti, että Cistanchen anti-BPH-vaikutukset liittyvät läheisestineljä keskeistä reittiä:

IL-17 signalointireitti

HIF-1 signalointireitti

TNF-signalointireitti

PI3K-AKT-signalointireitti

Heidän joukossaanPTGS2 (COX-2)jaAKT1olivat yhteisiä solmuja kaikilla neljällä reitillä, mikä viittaa siihen, että ne ovatkeskeisiä sääntelytavoitteitaBPH:n Cistanche-välitteisessä hoidossa.

 

PI3K/AKT-signalointi ja BPH:n eteneminen

ThePI3K/AKT-reittion vakiintunut sääntelijäsolujen kasvu, lisääntyminen, aineenvaihdunta, jaangiogeneesi[19–20]. BPH:ssa tämän reitin epänormaali aktivoituminen johtaaeturauhasen epiteelisolujen ja endoteelisolujen liiallinen lisääntyminen.

PI3Ktoimii ylävirran modulaattorina jaAKT1on ensisijainen alavirran efektori.

PTGS2 (COX-2), tulehdusta edistävä entsyymi, on useinyli-ilmentynyt BPH-kudoksissa, edistäminenPGE2-synteesi.

KohonnutPGE2tasot stimuloivatVEGF:n ilmentyminen, tuloksenaangiogeneesi ja kudosten liikakasvu [21–22].

In vivo -löydösmme vahvistavat tämän mekanismin:Cistanche-hallinto vähensi p-AKT1:tä, p-PI3K:ta, COX-2, PGE2:ta, jaVEGFpitoisuudet eturauhaskudoksessa ja seerumissasolujen lisääntymisen ja verisuonten kasvun estäminen.\

 

Johtopäätös

Yhteenvetona,Cistanche-pohjainen kasviperäinen koostumusponnisteleeehkäiseviä ja terapeuttisia vaikutuksiavastaan ​​BPH kautta amonitavoite, monitie lähestymistapa:

Aktiiviset yhdisteetpitääplantain glykosidi, mangiferiini, luteoliini, apigeniini, shafotaksiini, jaisoviteksiini

Kohdistus ydinproteiineihin: AKT1, PTGS2, CASP3, IL6, AR

Moduloivat avainsignalointireitit: PI3K/AKT, TNF, IL-17 ja HIF-1

Tukahduttaa tulehduksen välittäjäaineita: COX-2, PGE2, VEGF

Patologisen angiogeneesin ja epiteelin lisääntymisen estämineneturauhasessa

Nämä havainnot tarjoavat atieteellinen perusta Cistanchen käytölle luonnollisena terapeuttisena aineenavartenhyvänlaatuinen eturauhasen liikakasvukorostaen sen potentiaalia toimia avähätoksinen, monikäyttöinen vaihtoehto tavanomaisille BPH-hoidoille.