abstrakti

Tausta: Panax ginseng on upea yrttilääke kaikkiin kehon vaivoihin. Tästä syystä sitä kutsutaan Panaxiksi, mikä tarkoittaa "parannuskeinoa kaikille". Melaniini on pigmentti, joka antaa väriä ihollemme; lisääntynyt melaniinin tuotanto voi kuitenkin johtaa kasvaimen muodostumiseen. Ihmisten altistuminen ultravioletti-B-säteilylle on lisääntynyt voimakkaasti ilmaston lämpenemisen aiheuttaman lisääntyneen auringonvalon vuoksi. Tästä johtuen ilmiö, jota kutsutaan fotovanhenemiseksi, on havaittu kaikilla ihoväreillä ja -tyypeillä. Tämän ilmiön seurauksena joukko entsyymejä, joita kutsutaan matriksin metalloproteinaaseiksi, jotka toimivat solunulkoisten matriisiproteiinien, pääasiassa kollageenin, hajoamisentsyymeinä, lisääntyvät, mikä aiheuttaa kollageenin ehtymistä ja johtaa varhaiseen ryppyjen muodostumiseen.

Asiaankuuluvien tutkimusten mukaan kista on yleinen yrtti, joka tunnetaan nimellä "ihmeyrtti, joka pidentää elämää". Sen pääkomponentti on cistanosidi, jolla on erilaisia ​​vaikutuksia, kuten antioksidantteja, tulehdusta ehkäiseviä ja immuunitoimintoja edistäviä vaikutuksia. Cistanchen ja ihon valkaisun välinen mekanismi piilee cistanche-glykosidien antioksidanttisessa vaikutuksessa. Ihmisen ihon melaniinia syntyy tyrosiinin katalysoiman tyrosiinin hapettumisen seurauksena, ja hapetusreaktio vaatii hapen osallistumista, joten kehon happivapaista radikaaleista tulee tärkeä melaniinin tuotantoon vaikuttava tekijä. Cistanche sisältää cistanosidia, joka on antioksidantti ja voi vähentää vapaiden radikaalien muodostumista kehossa, mikä estää melaniinin tuotantoa.

Napsauta Cistanche Chemist Warehousea valkaisua varten

Lisätietoja:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

menetelmät: Siksi tutkimuksessamme käytimme hiiren melanoomasolulinjaa B16/F10 tutkiaksemme Korean punaisen ginseng (KRG) -uutteen aiheuttamaa melanogeneesin estoa in vitro ja HRM-2 karvattomia hiiriä, jotka altistettiin keinotekoiselle ultravioletti-B:lle. KRG:n tehokkuus in vivo. Valmistimme 3-prosenttisen punaisen ginseng-uutetta sisältävän voiteen ja arvioimme sen vaikutuksia ihmisen ihoon.

Johtopäätös: Tästä syystä päättelemme, että KRG on erinomainen ihoa valkaiseva ja ikääntymistä estävä tuote.

·2019 Korean Society of Ginseng. Elsevier BV:n julkaisupalvelut Tämä on avoin artikkeli

1. Johdanto

Melaniini on yhdiste, joka vastaa ihon pigmentaatiosta, ja ihmiskunnan ihon värien vaihtelu johtuu ihossa olevien melaniinia tuottavien solujen määrästä [1]. Melaniinin muodostumisesta vastaavaa prosessia kutsutaan melanogeneesiksi. Tässä prosessissa a-melanosyyttiä stimuloiva hormoni (a-MSH) sitoutuu reseptoriinsa (eli melanokortiini 1 -reseptoriin) aiheuttaen kohonneita cAMP-tasoja, mikä puolestaan ​​aktivoi mikroftalmiaan liittyvää tekijää (MITF) eri reittien, kuten syklisten, kautta. Adenosiinimonofosfaatti (cAMP) -vasteelementtiä sitova proteiini, solunulkoisen säädellyn kinaasi ja proteiinikinaasi B (AKT), mikä aiheuttaa sen hajoamisen. Tämän hajoamisen ansiosta melanogeneesiprosessin nopeutta rajoittava vaihe (eli tyrosinaasientsyymin, TYR) vaikutus vaikuttaa ja aktivoituu. TYR vastaa tyrosiinin muuntamisesta L-3,4-dihydroksifenyylialaniiniksi (L-DOPA), joka muodostaa melaniinia. Tyrosinaasiin liittyvä proteiini 1 (TRP-1) ja tyrosinaasiin liittyvä proteiini 2 (TRP-2) ovat muita TYR:n ja MITF:n alavirran tekijöitä, jotka aktivoituvat ja osallistuvat melaniinin muodostukseen. Näin ollen koko prosessin ajan TYR on tärkein komponentti ihosolujen melaniinituotannon säätelyssä [2-4].

Panax ginseng on ihmeyrtti, jota on käytetty laajalti Itä-Aasiassa yli 1,000 vuoden ajan, koska sillä on monia hyödyllisiä terveysvaikutuksia. Sitä on saatavana useissa muodoissa, mukaan lukien juomat, kapselit ja tabletit [5,6]. Aiemmat tutkimukset ovat paljastaneet ginsengin huomattavat vaikutukset, kun sitä käytetään vähentämään erityyppisten kasvainten, monien mielenterveyshäiriöiden, diabeteksen, verenpainetaudin, hyperlipidemian ja tulehduksen esiintyvyyttä [7-13]. Erityisesti Korean niemimaalla ginseng-lisäaineet ovat osa normaalia ruokavaliota. Kaupallisesti ginseng on saatavana kokonaisena ginseng-juuriuutteena, yksittäisenä ginsenosidiuutteena tai kapseleina. Ginsenosidit ovat koko ginsengin juuressa olevia aktiivisia yhdisteitä, jotka ovat vastuussa ginsengin tehokkaista terveyttä parantavista ominaisuuksista [14].

Yhden ginsenosidin vaikutuksista melaniinin tuotantoon ja melasmaan on tehty monia tutkimuksia [15]. Kuitenkaan toistaiseksi missään tutkimuksessa ei ole raportoitu Korean Red Ginseng (KRG) -uutteen melanogeenisia vaikutuksia melaniinin tuotantoon ja tutkittu sen ihoa valkaisevia ja ikääntymistä estäviä vaikutuksia erityisesti ihmisillä. Siksi tutkimme KRG:n aiheuttamaa TYR-inhibitiota ja melaniinin tuotannon estoa in vitro B16/F10-melanoomasolulinjassa mekaanisen tutkimuksen avulla tähän prosessiin osallistuvista reiteistä. Tuloksemme osoittivat, että KRG esti merkittävästi TYR-aktiivisuutta ja vähensi melaniinipitoisuutta MITF:n hajoamisreitin kautta. Lisäksi in vivo -tutkimuksemme, jossa käytettiin ultravioletti B (UVB) säteilytettyä karvatonta hiiri (HRM-2) valovanhenemis- ja hyperpigmentaatiomallia, paljasti, että melaniinin tuotanto HRM{5}}-hiirissä väheni huomattavasti ja huomattavasti KRG:tä (150 ja 300 mg/kg). Lisäksi 3-prosenttinen punaista ginseng-uutetta sisältävä voide osoitti erinomaisia ​​ryppyjä ehkäiseviä ja ihoa valkaisevia ominaisuuksia ihmisillä. Näin ollen päätimme, että KRG- ja KRG-formulaatiot voiteena pitäisi olla hyödyllisiä kosmetiikkateollisuudessa ihoa valkaisu- ja ikääntymistä ehkäisevinä aineina.

2. Materiaalit ja metodit

2.1. Kemikaalit ja reagenssit

Dulbeccon modifioitu Eagle's medium (WelGene Co, Korea); naudan sikiön seerumi (WelGene Co., Korea); streptomysiini ja penisilliini (Lonza, MD, USA); TRIzol-reagenssi (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA); oligodT-, MITF-, TYR-, TRP-1-, TRP-2- ja b-aktiinialukkeet hankittiin (Bioneer, Daejeon, Korea). 3-(4,5-Dimetyylitiatsol-2-yyli)-2,5-difenyylitetratsoliumbromidi ostettiin Sigma-Aldrichilta. Vasta-aineet MITF:lle, TYR:lle, TRP-1 ja TRP-2:lle saatiin (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, Inc., TX, USA). Mushroom TYR ja L-DOPA ostettiin Sigmalta (St. Louis, MO, USA). Kaikki muut reagenssit olivat paikallista analyyttistä laatua.

2.2. näytteen valmistus

2.3. Punaisen ginseng-kerman stabiilisuuden arviointi

(1) pH-testi

Punaisen ginsengvoiteen pH mitattiin 30-päiväkokeen päivinä 1, 7, 15 ja 30. Punaisen ginseng-kerman pH oli lievästi hapan eikä osoittanut lähes mitään muutosta 30 päivän aikana (taulukko 2).

(2) Värimuutostesti

Punaisen ginseng-kerman värjäytymisaste mitattiin päivinä 1, 7, 15 ja 30. Värissä ei havaittu muutosta 30-päivän koejakson aikana (lisäkuva 1).

(3) Patch-testi

Ginseng-voiteen allergisen reaktion tarkistamiseksi 1 ml punaista ginsengvoidetta levitettiin vapaaehtoisten selän keskiselän alueelle (1 cm × 1 cm), ja ihoreaktio arvioitiin 24 tunnin kuluttua. Erityyppisiä ihoreaktioita arvioitiin lisätaulukon mukaisesti. 3A-B, eikä punoitusta, turvotusta tai ei-toivottua reaktiota havaittu. Siksi tätä voidetta testattiin edelleen muiden ihoparametrien suhteen. Lisäksi ihoärsytysaste arvioitiin lisätaulukon mukaisesti. 4, jotta saadaan ensisijainen ihoärsytysindeksi.

2.4. Punainen ginseng -voidehoito-ohjelma ja vaikutusten arviointi öljy- ja kosteuspitoisuuteen, kimmoisuuteen ja ihon valkaisuun

Arvioidakseen punaisen ginsengvoiteen vaikutuksia ihon öljypitoisuuteen, kosteuspitoisuuteen, kimmoisuuteen ja valkaisuun, 10 naista (noin 40-vuotiaat, tupakoimattomat, joilla ei ole aiemmin ollut ihosairauksia tai kasvohoitoja) jaettiin kahteen ryhmään, joissa kussakin oli viisi yksilöä: kontrolliryhmä, johon levitettiin kermaa ilman punaista ginseng-uutetta (ei-KRG) ja koeryhmään, johon levitettiin punaista ginseng-uutetta sisältävää kermaa (KRG-käsitelty ryhmä). Yksilöiden lukumäärä laskettiin käyttämällä tilastoohjelmistoa G*Power 3.1 omicX; merkitsevyyskerroin oli 0,05, teho oli 80, ryhmiä oli 2 ja toistettuja mittauksia 6.

Voidetta levitettiin kasvojen T-alueen (1) alueelle, joka sijaitsee 1 cm T:n keskiosan yläosan yläpuolella otsassa kulmakarvojen välissä sekä oikealla ja vasemmalla puolella 3-5 sekunnin ajan. U-vyöhyke (2) piirrettiin vaakasuoraan nenästä ja pystysuoraan alas silmän hännästä, kuten on esitetty lisäkuvassa 2. Mittausolosuhteiden standardoimiseksi tutkimus tehtiin 24 C ± 1 C:ssa ja 55 prosentissa. suhteellinen kosteus ± 10 prosenttia.

2.5. Soluviljely

2.6. Soluton TYR-inhibitiomääritys

Määritys suoritettiin käyttämällä hieman muunneltua protokollaa, kuten aiemmin on kuvattu [3]. Lyhyesti sanottuna 1 0 ml KRG:tä laitettiin kolmena kappaleena 96-kuoppalevylle ja sekoitettiin 60 ml:n kanssa 50 mmol/l fosfaattipuskuria jäillä (pH 6,8). Sen jälkeen kuhunkin kuoppaan lisättiin 20 ml 0,9 mg/ml L-DOPAa. Lopuksi jokaiseen kuoppaan lisättiin 10 ml sieni-TYR:ää ja levyä inkuboitiin 27 °C:ssa 10 minuuttia. Inkuboinnin jälkeen dopakromin tuotanto mitattiin spektrofotometrisesti 450 nm:ssä käyttämällä mikrolevylukijaa (Versamax; Molecular Devices, LLC, CA, USA); tässä kokeessa kojiinihappoa käytettiin positiivisena kontrollina [16].

2.7. Melaniinin estomääritys

2.8. Eläinkoe ​​ja ryhmittely

2.9. UVB-säteily ja valovanhenemisen induktio

2.10. Vaikutus melaniinin tuotantoon HRM-2-hiirissä

2.11. Ihon ryppyjen mittaus 

UVB:n aiheuttaman ihon ikääntymisen astetta mitattiin tarkkailemalla ryppyjen muodostumista. Ryppyjen muodostumisen arvioimiseksi HRM{0}}-hiiret nukutettiin antamalla intraperitoneaalisesti kloraalihydraattia (0,1 ml 7 % kloraalihydraattia / 25 g hiirtä) viikolla 5 Altistuminen UVB-säteilylle ja näytteen käsittely kuvattiin edellisessä osassa. Ihon ryppyjä arvioitiin viikoilla 3, 4 ja 5 käyttämällä DETAX System II:ta (MIXPAC) ja Double-Stick Disc -levyä (3M Healthcare, Saksa) UVB-säteilytyksen jälkeen. Double-Stick Disc (suihkutettu DETAX System II:lla) kiinnitettiin hiiren ihoon ja poistettiin 2–3 minuutin kuluttua. Levyjen ryppyjä arvioitiin Bissetin [17] pisteytysjärjestelmällä: luokka 0, ryppyjen puuttuminen; luokka 1, useita matalia ryppyjä; luokka 2, joitakin ryppyjä; ja luokka 3, joitakin syviä ryppyjä. Kun levy oli poistettu ja iho puhdistettu 70-prosenttisella etanolilla, iho valokuvattiin käyttämällä USB-digitaalimikroskooppia (× 400; CE FOROHS, Kiina) ja ihon ryppyjen visuaalinen analyysi suoritettiin.

2.12. Entsyymi-immunosorbenttimääritys

2.13. Ihon histologinen havainto

Kustakin koeryhmästä uutetut ihokudokset kiinnitettiin 10-prosenttisessa formaliiniliuoksessa 48 tunnin ajan ja värjättiin sitten hematoksyliinilla ja eosiinilla Cardiffin menetelmällä [18] epidermaalisen paksuuden määrittämiseksi. Kollageenin visualisointia varten Massonin trikoomivärjäys suoritettiin vakiintuneiden protokollien mukaisesti [19].

2.14. RNA:n uutto ja reaaliaikainen polymeraasiketjureaktio

Kokonais-RNA uutettiin B16/F10-soluista ja UVB-ira-laajennetusta hiiren ihosta sen jälkeen, kun niitä oli käsitelty KRG:llä ja stimuloitu a-MSH:lla käyttämällä TRIzolia valmistajan ohjeiden mukaisesti. RNA:ta (2 mg) lämpökäsiteltiin oligodT:n kanssa (Bioneer Co, Daejeon) 10 minuutin ajan 70 °C:ssa ja jäähdytettiin 5 minuuttia jäillä, käänteiskopioitiin käyttämällä käänteistranskriptaasiesisekoitusta (Bioneer Co., Daejeon) 20 ml:ssa reaktioseosta. ja käytä 90 minuuttia 42,5 asteessa lämpösyklilaitteessa. Reaktio keskeytettiin 95 asteessa 5 minuutin ajaksi käänteistranskriptaasin inaktivoimiseksi. Käänteistranskriptiopolymeraasiketjureaktio (PCR) suoritettiin käänteistranskriptaasi (RT) -reaktiosta saaduille cDNA-erille PCR-esiseoksessa (Bioneer Co, Daejeon). Sitten PCR-tuotteet elektroforeesittiin 1-prosenttisella agaroosigeelillä, värjättiin etidiumbromidilla ja visualisoitiin käyttämällä ImageQuant LAS 500:ta (GE Healthcare Life Sciences, Soul, Etelä-Korea). Vyöhyketiheyksien intensiteetti normalisoitiin glyseraldehydi-3--fosfaattidehydrogenaasin (GAPDH) vastaavaksi, ja alukesekvenssit on esitetty lisätaulukossa. 1. MMP-2, MMP-9 ja interleukiini (IL)-1b:n ilmentyminen analysoitiin käyttämällä reaaliaikaista kvantitatiivista PCR:ää käyttäen Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR -järjestelmää ( Applied Biosystems, USA).

2.15. Western blot -analyysi

2.16. Tilastollinen analyysi

Lisätietoja: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501