Suoliston läpäisevyys ja masennus potilailla, joilla on tulehduksellinen suolistosairausⅠ
Dec 20, 2023
Tiivistelmä: Masennus on maailmanlaajuinen terveysongelma, joka vaatii varhaista ja tarkkaa diagnoosia varmistaakseen nopean pääsyn asianmukaiseen hoitoon. Viimeaikainen huomio on keskittynyt analysoimaan aivo-suolisto-mikrobiota-akselia useiden psykopatologisten polkujen joukossa. Suolistoesteellä on keskeinen rooli, ja tällä tasolla esiintyvillä toimintahäiriöillä on vaikutuksia mielenterveyteen. Tämän tutkimuksen tavoitteena oli selvittää suoliston läpäisevyyden biomarkkerien, eli kalprotektiinin, zonuliinin, lipopolysakkaridia sitovan proteiinin (LBP) ja suoliston rasvahappoja sitovan proteiinin (I-FAB) roolia tulehduksellisen suolistosairauden (IBD) masennuksessa. ).
Tämä on ensimmäinen tällainen tutkimus, joka suoritetaan Romaniassa ja Itä-Euroopassa, ja siinä painotetaan potilaita, joilla on Crohnin tauti ja haavainen paksusuolitulehdus. Masennuksen ja kalprotektiinin sekä masennuksen ja LBP:n väliset korrelaatiot voivat valaista masennuksen nopeaa diagnosointia biomarkkerien avulla. Koska masennus korreloi IBD-potilaiden elämänlaadun heikkenemisen kanssa, asianmukaisten hoitojen saatavuuden on oltava kiireellistä.
1. Esittely
Masennus on yksilöllinen, ammatillinen ja sosiaalinen vamma, joka liittyy somaattisiin sairastumiin [1,2] ja korkeaan itsemurhakuolleisuuteen [3]. Kuitenkin pääsy asiantuntijoille, oikea diagnoosi ja tehokas hoito on rajoitettua [4]. Varhainen ja tarkka diagnoosi [5,6] sekä yksilöllinen hoidon valinta [7] ovat välttämättömiä sairauden kärsimyksen ja taloudellisen taakan vähentämiseksi [3]. Mielenterveyshäiriöiden diagnostiikka- ja tilastokäsikirjan diagnostisten kriteerien mukaisesti (DSM V) [8], masennus on mielialahäiriö, jolla on heterogeeninen ryhmä oireita. Diagnoosin saamiseksi tarvitaan viisi yhdeksästä seuraavasta oireesta: masentunut mieliala, nautinnon puute, uni- ja ruokahaluvaikeudet, alhainen energiataso, kognitiiviset muutokset, syyllisyyden ja syyllisyyden tunteet sekä itsemurha-ajatukset. patofysiologisia mekanismeja tehokkaasta hoidosta hyötymiselle ei tunneta. Useita mekanismeja on kyseenalaistettu, mutta teoriat ovat vielä kehittymässä.
Siten hypotalamus-aivolisäke-akselin toimintahäiriöitä, välittäjäaineita, vagushermoa, lyhytketjuisia rasvahappometaboliitteja, tryptofaania, tulehdustekijöitä ja aivo-suoli-mikrobisto-akselia on tutkittu [9-12]. On osoitettu, että stressiin liittyvät häiriöt eivät ainoastaan aiheuta muutoksia suoliston mikrobiston koostumukseen hypotalamus-aivolisäke-lisämunuaisen akselin kautta, vaan myös suolisto vaikuttaa
keskushermosto emättimen stimulaation, suolen läpäisevyyden sekä tulehdus- ja anti-inflammatoristen yhdisteiden vapautumisen ja verenkierrossa kiertävien aineiden muutosten kautta [13]. Kahden viime vuosikymmenen aikana aivo-suoli-mikrobi-akselin osallistuminen mielenterveyshäiriöihin on saanut vauhtia [9,14]. Tässä yhteydessä vuotavan gutsyndroman rooli on saanut enemmän huomiota [15,16].
Suolistoesteellä on päärooli ruoansulatuksessa ja ravintoaineiden imeytymisessä; toiseksi se valvoo tiukasti antigeenien kuljetusta luumenista submukoosiin ja ylläpitää tasapainoa toleranssin ja tulehdusta aiheuttavan immuunivasteen välillä. Ruokavalio, suoliston mikrobiotan dysbioosi tai muut tekijät voivat vaikuttaa suolistoesteen eheyteen. Nämä voivat aiheuttaa immuuniaktivaatiota mikrobiantigeenien ja aineenvaihduntatuotteiden siirtyessä. Tällä hetkellä seerumin zonuliinia, suoliston rasvahappoja sitovaa proteiinia (IFABP/FABP2) ja LBP:tä sekä ulosteen albumiinia, kalprotektiinia ja zonuliinia on analysoitu suolen läpäisevyyksinä. markkerit [17]. Kalprotektiini on kalsiumia ja sinkkiä sitova proteiini, joka on alun perin eristetty leukosyyteistä; se on hyödyllinen tulehduksellisen suolistosairauden erottamisessa ärtyvän suolen oireyhtymästä. Sillä on tärkeä rooli tulehduksen aikana, ja sitä pidetään akuutin vaiheen proteiinina [18 ].
Normaaliarvot ovat 10 ja 50 tai 60 (ug/g) välillä. Yli 200 (ug/g) arvot voivat viitata tulehdussairauteen, ja arvot yli 500–600 (ug/g) osoittavat varmasti suolistosairauden [19]. Lipopolysakkaridia sitova proteiini (LBP) on ulkokalvon välttämätön lipidikomponentti. gram-negatiiviset bakteerit [20], joka aiheuttaa endotoksemiaa [21]. Maksasolujen, rasvakudoksen ja suolistosolujen tuottamat LBP:t toimivat akuutin faasin I proteiinina, ja niillä on tärkeä rooli immuunivasteessa [22]. LBP:tä on seerumissa pitoisuuksina 5–15 mg/ml ja se lisääntyy 10–50 kertaa akuutin faasin reaktion aikana. Estetoimintoa ylläpitää zonuliini, joka tunnetaan ainoana läheisten solunsisäisten liitoskohtien (TJ) fysiologisena modulaattorina [15,23, 24]. Zonuliini avaa reversiibelisti TJ:n vaikuttaen proteaasiaktivoituun reseptoriin 2, joka sijaitsee liitoskompleksin solunsisäisessä tilassa [25]. Zonuliinin mediaaniarvo on 34 ng/ml [26].
Suoliston rasvahappoja sitova proteiini (I-FABP/FABP2) on yksi yhdeksästä eri FABP-tunnistetusta proteiinista, jotka kuuluvat lipidejä sitovien proteiinien superperheeseen. Päärooli on solunsisäinen kuljetus ja rasvahappojen imeytymisen säätely [27]. Kun epiteelin suolistoeste vaurioituu, I-FABP vapautuu verenkiertoon ja sen plasmapitoisuus kasvaa [28]. I-FAPB:n kynnysarvoksi katsotaan 2 ng/ml. Tässä yhteydessä pyrimme tutkimaan suolen läpäisevyyden biomarkkeriinin masennuksen merkitystä potilailla, joilla on tulehduksellinen suolistosairaus (IBD) (i) tutkimalla kalprotektiinin, zonuliinin ja LBP:n välistä suhdetta. IFABP/FABP2 ja masennus sekä (ii) arvioimalla masennuksen vaikutusta elämänlaatuun.
2. Materiaalit ja metodit
2.1. Opiskeluryhmä
Alkuryhmään kuului 60 potilasta Constantan läänin kliinisen sairaalan gastroenterologian klinikalta huhti-kesäkuussa 2021. Osallistumiskriteerit olivat IBD-diagnoosi, 18-vuotiaat ja sitä vanhemmat, luku- ja kirjoitustaito sekä suostumus tutkimukseen osallistumiseen. Poissulkemiskriteereinä olivat suostumuksen epääminen, vaikea masennus tai muut vakavat mielenterveyden häiriöt, joiden vuoksi heidät ohjattiin psykiatriseen erikoishoitoon. Tietoisen suostumuksen saatuaan tutkija otti potilaisiin yhteyttä puhelimitse sosiodemografisen masennuksen kyselyn ja kyselyn laadusta. Tutkimuksessa oli mukana 30 potilasta, jotka kävivät läpi kaikki tutkimuksen vaiheet.
2.2. Kyselylomakkeita käytetty
Potilaiden terveyskyselyä-9 (PHQ-9) [29] sovellettiin osallistujiin sen arvioimiseksi, kuinka paljon masennusta heihin vaikutti. Tämä vakiokysely sisältää yhdeksän kohtaa, joihin on vastattava potilaan oireiden perusteella viimeisten 14 päivän aikana. Pisteet luokitellaan seuraavasti: 1–4 minimaalinen masennus, 5–9 lievä masennus, 10–14 keskivaikea masennus, 15–19 keskivaikea masennus ja 20–27 vaikea masennus. Vastaavasti käytimme elämänlaatukyselyä (EQ{{ 14}}D) [30,31] kerätä tietoa elämänlaadusta. Tämän työkalun osat ovat potilaan liikkuvuus, itsehoito, tavanomaisiin toimintoihin sitoutuminen, kipu tai epämukavuus sekä koettu ahdistus tai masennus. Asioihin vastataan viisitasoisella asteikolla.
2.3. Näytteenotto ja laboratorioanalyysi
Serologiset näytteet zonuliinille, IFABP/FABP2:lle, LBP:lle ja ulostenäytteet kalprotektiinille kerättiin mahdollisesti tarttuvien biologisten näytteiden keräämistä ja kuljettamista koskevan protokollan mukaisesti. Seeruminäytteet kerättiin laskimopunktiolla, paastoamalla ja vacutainerissa aktivaattorikankaalla. Ulostenäytteet kerättiin spontaanisti erittyneistä ulosteista säiliöissä ilman kantajaväliainetta. Seerumi testattiin zonuliinin suhteen MyBioSource Kit, Inc:llä (San Diego, CA, USA). ja IFABP/FABP2 ja LBP Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. Kitin kanssa (Wuhan, Kiina). Näytteet testattiin kalprotektiinin suhteen EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG -sarjalla. Kaikki testit suoritettiin entsyymiin liittyvällä immunosorbenttitestillä (ELISA) ADALTIS-analysaattorilla GEN-4 ja Victor X4:llä pakkauksen valmistajan ohjeiden mukaisesti.
Kitin valmistaja määritteli normaaliarvojen alueen vain kalprotektiinille seuraavasti: pienempi tai yhtä suuri kuin 50.0 mcg/g normaalisti, 50,1– 120,0 mcg/g raja-arvona ja suurempi tai yhtä suuri kuin 120,1 mcg/g positiivisena suolistosairauteena. Tsonuliinille reaktiosarjan valmistaja ei määrittänyt alempia havaitsemisrajoja. IFABP/FABP2-sarjan havaitsemisraja oli 0,156 ng/ml, LBP:lle 3,125 ng/ml ja kalprotektiinille 3,125 ng/ml. Tsonuliinin, I-FABP/FABP2:n ja LBS/LBP:n osalta pakkauksen valmistaja ei ilmoittanut normaaliarvojen vaihteluväliä, ja käytettiin muiden kirjoittajien tutkimuksissaan käyttämiä arvoja. Seerumi uutettiin jokaisesta verinäytteestä sentrifugoimalla nopeudella 3000 × g 30 minuuttia käyttämällä Thermo Scientific SL16R -sentrifugia.
Kaikki saadut seerumit pidettiin pakastettuna -200 ◦C:ssa, kunnes analyysit suoritettiin. IFABP/FABP2:lle ja LBP:lle näytteet laimennettiin puoleen näytteen laimennuspuskurilla ennen testausta. Ulostenäytteet pidettiin -20 ◦C:ssa testipäivään asti. Ulostenäytteen uutto suoritettiin käyttämällä 980 l:n uuttopuskuria yhdessä 20 mg:n kanssa ulostetta, sekoitettiin 30 s ja sitten sentrifugoitiin nopeudella 2000 x g 10 minuuttia käyttämällä Thermo Scientific SL16R -sentrifugia. Näytteiden laimentaminen suoritettiin sitten 980 iu:lla näytepuskuria ja 20 iu:lla uuttosupernatanttia.
Neljää markkeria varten käytettiin mikrolevyjä, joissa oli 96 kuoppaa, jotka oli päällystetty sieppausvasta-aineilla: anti-kalprotektiinivasta-aineet, anti-IFABP/FABP2-vasta-aineet, anti-LBP-vasta-aineet tai anti-zonuliini-vasta-aineet. Testin periaatteet olivat samat perustuen entsyymiin liittyvään immunologiseen testaustekniikkaan (ELISA). Standardinäytteet, testinäytteet ja biotiinilla konjugoidut detektiovasta-aineet lisättiin myöhemmin kuoppiin. TMB-substraatteja (3,30,5,50-tetrametyylibentsidiini) käytettiin visualisoimaan entsymaattinen reaktioHRP (piparjuuriperoksidaasi). HRP katalysoi TMB:tä tuottaen sinisen tuotteen, joka muuttui keltaiseksi hapon pysäytysliuoksen lisäämisen jälkeen.
Keltapilkun tiheys oli verrannollinen levylle siepatun näytteen määrään. Värin intensiteetti mitattiin 450 nm:ssä mikrolevylukijassa ja sitten laskettiin tavoitepitoisuus.
2.4. Tilastollinen analyysi
Tilastollinen analyysi suoritettiin käyttämällä IBM SPSS -tilastoohjelmiston versiota 23 (Armonk, NY, USA: IBM Corp.). Tiedot esitetään mediaanina ja IQR:nä (interkvartiilialue P75–P25) jatkuville muuttujille vääristyneiden jakaumien tapauksessa tai prosentteina kategorisille muuttujille.
Koska Shapiro–Wilk-normaalisuustesti osoitti analysoitujen jatkuvien muuttujien tapauksessa testin tilastolliset arvot, joiden todennäköisyys (p) oli pienempi kuin merkitsevyystaso {{0}},05, ehto normaaliarvo ei täyttynyt, paitsi muuttujat LBP ja PHQ 9, joiden p >=0.05. Katsoimme, että anonparametrinen lähestymistapa kyseisten muuttujien välisen korrelaation tutkimukseen Spearmanin rho-korrelaatiokertoimen (ρ) ja siihen liittyvän todennäköisyyden (p) esittämisellä oli sopivampi. Merkitsevyystasoksi asetettiin 0,05.
Luonnollinen kasviperäinen lääke ummetuksen lievitykseen-Cistanche
Cistanche on loiskasvien suku, joka kuuluu Orobanchaceae-heimoon. Nämä kasvit tunnetaan lääkeominaisuuksistaan, ja niitä on käytetty perinteisessä kiinalaisessa lääketieteessä (TCM) vuosisatojen ajan. Cistanche-lajeja esiintyy pääasiassa kuivilla ja aavikkoalueilla Kiinassa, Mongoliassa ja muissa Keski-Aasian osissa. Cistanche-kasveille on tunnusomaista niiden mehevät, kellertävät varret, ja niitä arvostetaan suuresti niiden mahdollisten terveyshyötyjen vuoksi. TCM:ssä Cistanchella uskotaan olevan tonisoivia ominaisuuksia, ja sitä käytetään yleisesti munuaisten ravitsemiseen, elinvoiman lisäämiseen ja seksuaalisen toiminnan tukemiseen. Sitä käytetään myös ikääntymiseen, väsymykseen ja yleiseen hyvinvointiin liittyvien ongelmien ratkaisemiseen. Vaikka Cistanchella on pitkä käyttöhistoria perinteisessä lääketieteessä, sen tehoa ja turvallisuutta koskeva tieteellinen tutkimus on jatkuvaa ja rajallista. Sen tiedetään kuitenkin sisältävän erilaisia bioaktiivisia yhdisteitä, kuten fenyylietanoidiglykosideja, iridoideja, lignaaneja ja polysakkarideja, jotka voivat myötävaikuttaa sen lääkevaikutuksiin.
Wecistanchencistanche-jauhe, cistanche-tabletit, cistanche-kapselitja muita tuotteita kehitetään käyttämälläaavikkocistancheraaka-aineina, joilla kaikilla on hyvä vaikutus ummetusta lievittämään. Erityinen mekanismi on seuraava: Cistanchen uskotaan olevan potentiaalisia etuja ummetuksen lievittämisessä sen perinteisen käytön ja tiettyjen sen sisältämien yhdisteiden perusteella. Vaikka tieteellinen tutkimus erityisesti Cistanchen vaikutuksesta ummetukseen on rajallista, sillä uskotaan olevan useita mekanismeja, jotka voivat edistää sen potentiaalia lievittää ummetusta. Laksatiivinen vaikutus:CistancheSitä on pitkään käytetty perinteisessä kiinalaisessa lääketieteessä ummetuksen lääkkeenä. Sillä uskotaan olevan lievä laksatiivinen vaikutus, joka voi auttaa edistämään suoliston liikkeitä ja aiheuttamaan ummetusta. Tämä vaikutus voidaan johtua useista Cistanchen yhdisteistä, kuten fenyylietanoidiglykosideista ja polysakkarideista. Suoliston kosteuttaminen: Perinteisen käytön perusteella Cistanchella katsotaan olevan kosteuttavia ominaisuuksia, jotka kohdistuvat erityisesti suolistoon. Suoliston kosteutuksen ja voitelun edistäminen voi auttaa pehmentämään työkaluja ja helpottamaan kulkua, mikä lievittää ummetusta. Tulehdusta ehkäisevä vaikutus: Ummetus voi joskus liittyä ruoansulatuskanavan tulehdukseen. Cistanche sisältää tiettyjä yhdisteitä, mukaan lukien fenyylietanoidiglykosideja ja lignaaneja, joilla uskotaan olevan anti-inflammatorisia ominaisuuksia. Vähentämällä suoliston tulehdusta se voi auttaa parantamaan suoliston säännöllisyyttä ja lievittämään ummetusta.