Okskarbatsepiinin aiheuttama hypotermia ohimenevän etuaivojen iskemian jälkeen antaa terapeuttisen neurosuojauksen ohimenevän reseptoripotentiaalin vanilloidin tyypin 1 ja 4 kautta gerbiileissä osassa 3

4. Materiaalit ja menetelmät

4.1. Koeeläimet

Urosgerbiilejä (kokonaismäärä=252) käytettiin kuuden kuukauden iässä (paino 63–78 g). Gerbiilit kasvatettiin Kangwon National Universityn (Chuncheon, Korea) Experimental Animal Centerissä.

Gerbiilit ovat erittäin suloisia pieniä eläimiä. Ne elävät aavikkoalueilla, ovat hyviä luolien kaivamisessa ja niillä on vahvat vaistot säilyttää ja paikantaa ruokaa. Näistä pikkukavereista urosgerbiileillä on erityisen hyvä muisti, mikä saa ihmiset haluamaan tietää heidän salaisuutensa.

Ensinnäkin, kun urosgerbiilit etsivät ruokaa, ne käyttävät useita signaaleja, kuten maamerkkejä ja maastoa, määrittääkseen suunnan. Pitkäjänteisen havainnoinnin ja käytännön kautta he ovat perustaneet oman "maantieteellisen tietojärjestelmän". Sitä vastoin naarasgerbiileillä on huonompi muisti näille signaaleille, etenkin jatkuvasti muuttuvassa ympäristössä.

Toiseksi, urosgerbiileillä on myös vahva muisti taistellessaan luonnollisia vihollisia vastaan. Tiedemiesten mukaan gerbiilejä uhatessaan ne menevät nopeasti kaivoon ja yrittävät paeta. Mutta kun urosgerbiilit kohtaavat saman uhan, ne muistavat luonnollisten vihollisten hyökkäystavan ja välttävät niitä, mikä lisää heidän selviytymismahdollisuuksiaan.

Lopuksi, urosgerbiilien muisti piilee myös heidän sosiaalisessa käyttäytymisessä keskenään. Jokaisella gerbiilillä on ainutlaatuinen tuoksu. Kun he tapaavat muita gerbiilejä, he käyttävät hajuaistiaan tunnistaakseen toistensa identiteetin ja aseman. Tämä muistikyky antaa gerbiileille mahdollisuuden luoda suhteellisen vakaan sosiaalisen yhteyden, mutta se on myös tärkeä tae niiden lisääntymiselle.

Yhteenvetona voidaan todeta, että urosgerbiilien ja muistin välinen suhde on erottamaton. Etsiessään selviytymistä ja lisääntymistä luonnossa he luottavat vahvaan muistiinsa sopeutuakseen jatkuvasti ympäristöön ja parantaakseen itseään. Ihmisinä meidän pitäisi oppia näiltä pieniltä pojilta ja jatkuvasti hioa muistiamme sopeutuaksemme paremmin tähän alati muuttuvaan maailmaan. Voidaan nähdä, että meidän on parannettava muistiamme, ja Cistanche voi parantaa muistia merkittävästi, koska se voi myös säädellä välittäjäaineiden tasapainoa, kuten nostaa asetyylikoliinin ja kasvutekijöiden tasoa, jotka ovat erittäin tärkeitä muistille ja oppimiselle. Lisäksi Cistanche voi myös parantaa verenkiertoa ja edistää hapen toimitusta, mikä voi varmistaa, että aivot saavat riittävästi ravintoa ja energiaa, mikä parantaa aivojen elinvoimaa ja kestävyyttä.

Lisää muistin tehoa napsauttamalla Know

Institutional AnimalCare and Use Committee hyväksyi tätä tutkimusta varten kokeellisen protokollan (hyväksyntänumero KW-200113-1; hyväksymispäivä 18. helmikuuta 2020).

Tutkimusprotokolla noudatti The National Academies Pressin (8. painos, 2011) julkaiseman laboratorioeläinten hoidon ja käytön oppaan "Nykyiset kansainväliset lait ja käytännöt" -oppaassa ehdotettuja ohjeita.

4.2. Koeryhmät, tFI:n induktio sekä HyT- ja OXC-hoidot

Todistaakseen OXC:n suojaavat vaikutukset iskeemisiä vaurioita vastaan ​​gerbiileissä tFI:n jälkeen gerbiilit jaettiin kuuteen ryhmään: (1) vale+vehikkeliryhmä (n=24);(2) tFI+kuljetinryhmä (n {{5) }}); (3) vale+HyT-ryhmä (n=24); (4) tFI+HyT-ryhmä (n=60); (5) vale+OXC (200 mg/kg) ryhmä (n=24); ja (6) tFI+OXC-ryhmä (n=60).

Seitsemää ja viittä gerbiiliä kolmesta tFI-ryhmästä käytettiin Western blot -analyysiin ja histologiseen tutkimukseen, vastaavasti 30 minuuttia, 12 tuntia, 1 päivä, 2 päivää ja 4 päivää tFI-leikkauksen jälkeen, ja kolmessa valeryhmässä seitsemän ja viisi. gerbiilejä käytettiin 30 minuuttia ja 4 päivää valeleikkauksen jälkeen lukumäärän minimoimiseksi. Tässä kokeessa tFI kehitettiin aiemmin kuvatulla tavalla [34].

Lyhyesti sanottuna gerbiilit nukutettiin 2,5 % isofluraanilla (32 % happea ja 68 % typpioksiduulia). Nukutuksessa molemmat yhteiset kaulavaltimot eristettiin kaulavaltimon tuppivarresta, joka oli tukkeutunut aneurysmaklipsien avulla (Yasargil FE 723K, Tuttlingenculap, Saksa) ) viiden minuutin ajan.

Aivojen verensyötön täydellinen pysäytys vahvistettiin tarkkailemalla valtimoveren virtausta molemmissa verkkokalvon valtimoissa (sisäisten kaulavaltimoiden haarat) käyttämällä Heine Optotechnikin (Herrsching, Saksa) oftalmoskooppia (HEINE K180®).

Kehonlämpöä ennen leikkausta ja sen aikana kaikissa ryhmissä kontrolloitiin normotermiassa (37 ± 0,2 ◦C) lämpömittarilla. Viiden minuutin tukkeutumisen jälkeen klipsit poistettiin.

Tässä tutkimuksessa tehtiin näennäisleikkaus tekemällä heille sama tFI-leikkaus ilman yhteisten kaulavaltimoiden tukkeutumista. Kahdessa vale+HyT- ja tFI+HyT-ryhmässä HyT kontrolloitiin (samanlainen kuin kehon lämpötilan muutos tFI+:ssa). OXC-ryhmä) jäähdyttämällä koko kehoa jääpakkauksella kuuden tunnin ajan.

Kahden vale+OXC- ja tFI+OXC-ryhmän ruumiinlämpöä mitattiin kuuden tunnin ajan välittömästi vatsaontelonsisäisen 200 mg/kg OXC-injektion jälkeen (Sigma–Aldrich, St. Louis, MO, USA) tFI-leikkauksen jälkeen.

OXC:n annostus valittiin aiemman tutkimuksen perusteella, jossa kerrottiin, että 200 mg/kg OXC suojasi tehokkaasti solukuolemaa vastaan ​​aivoissa [36]. Kehonlämpötilan muutoksen kirjaamiseksi ruumiinlämpö mitattiin peräsuolessa tunnin kuluttua tFI:stä, yli. 6 tunnin ajan huoneenlämpötilassa (noin 22 ◦C).

Gerbiilit saivat toipumisajan neljä päivää tFI:n jälkeen, koska hippokampuksen CA1-alueella sijaitsevat pyramidisolut alkavat kuolla neljä päivää tFI:n jälkeen [30,34,62].

4.3. SMA testi

SMA-testillä tutkittiin hyperaktiivisuuden muutoksia kaikissa ryhmissä. Lyhyesti sanottuna, kuten aiemmin on kuvattu [63], SMA-testi tehtiin päivänä 1 tFI:n jälkeen, koska lokomotorinen aktiivisuus saavuttaa korkeimman pisteen päivänä 1 tFI:n jälkeisen iskeemisen vaurion jälkeen.

Kaikkien ryhmien gerbiilit sopeutuivat ympäristöön kahdeksi tunniksi ja ne sijoitettiin Ugo Basile SRL:ltä (Gemonia, Italia) hankittuun avoimeen kenttähäkkiin (leveys 44 cm; pituus 44 cm; korkeus 30), jossa kaksi rinnakkaista vaakasuuntaista. Infrapunasäteet 4 × 8 lattiasta asennettiin yhdeksi tunniksi. SMA tallennettiin käyttämällä Photobeam Activity System-Home Cage -laitetta San Diego Instrumentsilta (San Diego, CA, USA).

Liike (rata ja kuljettu kokonaismatka) havaittiin valokennojen tuottamien infrapunasäteiden joukon katkaisemisen kautta.

SMA:ta seurattiin jatkuvasti tunnin ajan, ja tiedot kerättiin IPC Electronicsin (Cumbria, UK) AMB-analysaattorilla.

Tiedonkeruu aloitettiin 15 minuuttia avoimessa häkissä totuttelun jälkeen. Lopuksi saadut tulokset arvioitiin testijakson (yksi tunti) liikematkana (metreinä).

4.4 Kognitiivisten toimintojen testit

4.4.1. RAMT

Tilamuistin vertailemiseksi kaikissa ryhmissä RAMT suoritettiin aikaisempien tutkimusten mukaisesti [38,44]. Tässä testissä käytettiin Stoelting Co:n (Wood Dale, IL, USA) säteittäistä 8-käden sokkeloa.

Labyrinttiinstrumentti koostui keskitasosta ja kahdeksasta varresta (kunkin varren leveys 5 cm; korkeus 9 cm; pituus 35 cm). Gerbiilejä koulutettiin kerran päivässä kolmen päivän ajan ennen.

Nimittäin DBL Co:lta (Chungbuk, Korea) saatu pellettirehu laitettiin jokaisen varren päätyosaan ja jokainen gerbiili asetettiin keskitasolle. Sen jälkeen gerbiili etsi rehua.

Vale- tai tFI-leikkauksen jälkeen varsinainen testi suoritettiin kerran päivässä neljän päivän ajan leikkauksen jälkeisestä päivästä alkaen.

Analyysia varten arvioitiin virheiden lukumäärä, ja yksi virhe tapahtui joka kerta, kun gerbiili tuli käsivarteen, jossa oli jo vierailtu aiemmin. Testi päättyi, kun gerbiili söi rehun.

4.4.2. PAT

Lyhytaikaisen muistin vertaamiseksi ryhmien välillä PAT suoritettiin aiemmin raportoitujen menetelmien mukaisesti [64, 65] joissakin muutoksissa. Lyhyesti sanottuna gerbiilejä testattiin käyttämällä San Diego Instrumentsin (SanDiego, CA, USA) Gemini Avoidance System -järjestelmää (GEM 392), joka koostuu kahdesta (tummasta ja vaaleasta) osastosta, jotka kommunikoivat keskenään pystysuoraan liukuvan portin kautta.

Kokeilujaksot suoritettiin kahdessa vaiheessa: harjoitusjakso ja todellinen testiistunto, joka suoritettiin päivää ennen tFI- tai valeleikkausta ja neljä päivää sen jälkeen.

Varsinainen testi suoritettiin 20 minuuttia harjoituksen jälkeen mittaamalla viiveaika (sekunteina) pimeässä huoneessa oleskelun aikana. Nimittäin harjoituksessa gerbiilin annettiin tutkia kahta osastoa vapaasti minuutin ajan portin ollessa auki. .

Tämän jälkeen, kun gerbiili meni pimeään osastoon, ovi suljettiin ja gerbiili sai sähköiskun (0,5 mA) lattialla olevasta teräsritilästä viiden sekunnin ajan.

Varsinaisessa testiistunnossa päivänä 4 tFI:n jälkeen gerbiili sijoitettiin valoosastoon ja valoosaston latenssiaika ennen pimeään osastoon tuloa kirjattiin.

4.5. Western blot -analyysi TRPV1:lle ja TRPV4:lle

TRPV1:n ja TRPV4:n ilmentymistasojen tutkimiseksi gerbiilihippokampuksen CA1:ssä suoritettiin Western blot -tekniikka aiemmin kuvattujen menetelmien mukaisesti [66,67].

Lyhyesti sanottuna, määrätyn aikataulun mukaisesti (30 min, 12 h, 1 päivä, 2 päivää ja 4 päivää vale- tai tFI-leikkauksen jälkeen), gerbiileille (n=5 kussakin ryhmässä) annettiin anestesia eutanasiaa varten vatsaontelonsisäisellä injektiolla. 200 mg/kg pentobarbitaalinatriumia (JW Pharm.Co., Ltd., Soul, Korea).

Sen jälkeen heidän aivonsa kerättiin ja homogenoitiin 50 mM fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella (PBS, pH 7,4), joka sisälsi 0,1 mM etyleeniglykoli-bis(aminoetyylieetteri)-N, N, N{{ 11}}, N0-tetraetikkahappo (EGTA) (pH 8.0), 10 mM etyleenidiamiinitetraetikkahappo (EDTA) (pH 8,0), 0,2 % Nonidet P{{17 }}, 15 mM natriumpyrofosfaattia, 100 mM -glyserofosfaattia, 2 mM natriumortovanadaattia, 50 mM NaF:a, 150 mM NaCl:a, 1 mM fenyylimetyylisulfonyylifluoridia (PMSF) ja 1 mM ditiotreitolia (DTT).

Seuraavaksi näytteet sentrifugoitiin ja supernatantit otettiin proteiinitasojen määrittämiseksi käyttämällä Micro BCA -määrityspakkausta, joka oli yhtiöltä Thermo Fisher Scientific Inc (Waltham, MA, USA) ja Pierce Chemical Co:n (Rockford, IL, USA) naudansumun albumiinia.

Alikvootit, jotka sisälsivät 2 0 ug kokonaisproteiinia, keitettiin latauspuskurissa, 150 mM Trisissä (pH 6,8), joka sisälsi 6 % natriumdodekyylisulfaattia (SDS), 3 mM DTT:tä, 0,3 % bromifenolisinistä ja 30 % glyserolia.

Näytteet erotettiin 10 % SDS-polyakryyliamidigeelielektroforeesilla (PAGE). Seuraavaksi geelit siirrettiin nitroselluloosakalvoille Pall Co:lta (East Hills, NY, USA) 350 mA:ssa ja 4 ◦C:ssa 90 minuutiksi.

Epäspesifisen värjäytymisen estämiseksi kalvoja inkuboitiin 5 % rasvattomassa maidossa 60 minuuttia huoneenlämpötilassa. Sen jälkeen ne saatettiin immunoreagoimaan jokaisen primaarisen vasta-aineen kanssa: kanin anti-TRPV1 (laimennettu 1:1000) (Abcam, Cambridge, UK), kanin anti-TRPV4 (laimennettu 1:1000) (Abcam) ja kanin anti-- - aktiini (laimennettu 1:2000) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) 4 ◦C:ssa 7 tunnin ajan.

Myöhemmin ne saatettiin reagoimaan piparjuuriperoksidaasilla (HRP) konjugoidulla aasin anti-kanin IgG:llä (laimennettu 1:4500) (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA) huoneenlämpötilassa 1 tunnin ajan.

Lopuksi käytettiin Thermo Fisher Scientific Inc:n (Waltham, MA, USA) aluminolipohjaista kemiluminesenssipakkausta visualisoinnin parantamiseen.

Kuten aiemmin on kuvattu [68], TRPV1:n ja TRPV4:n immunoblotit analysoitiin Scion Cropin (Frederick, MD, USA) Scion Image -ohjelmistolla. Juovat skannattiin ja densitometrinen analyysi suoritettiin. Proteiinitasot normalisoitiin vastaavaan -aktiinitasoon verrattuna.

4.6. Histologisten osien valmistelu

Immunohistokemiallisia ja histopatologisia tutkimuksia varten gerbiilit (n=7 kussakin ryhmässä) tapettiin määrätyn aikataulun mukaisesti (30 min, 12 h, 1 päivä, 2 päivää ja 4 päivää tFI- tai valeleikkauksen jälkeen).

Kuten aiemmin on kuvattu [34], gerbiilit nukutettiin syvästi pentobarbitaalinatriumilla (200 mg/kg) (JW Pharmaceutical, Soul, Korea). Anestesiassa gerbiilit huuhdeltiin transkardiaalisesti 0,1 M fosfaattipuskurisuolaliuoksella (pH 7,4) ja kiinnitettiin 4 % paraformaldehydillä (0,1 M fosfaattipuskurissa, pH 7,4).

Myöhemmin heidän aivonsa hankittiin ja jälkikiinnitettiin käyttämällä samaa kiinnitysainetta kuuden tunnin ajan. Sen jälkeen aivokudokset leikattiin (25 um:n paksuus koronatasoja) akryostaatissa (Leica, Wetzlar, Saksa).

4.7. Histokemiallinen värjäys CV:llä

Kunkin ryhmän hippokampuksen morfologisten ja hermosolujen vaurioiden tutkimiseksi suoritettiin kresyyliviolettivärjäys (CV), kuten aiemmin kuvasimme [69]. Lyhyesti, kresyyliviolettiasetaatti (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) liuotettiin 1.0 % (w/v) tislattuun veteen ja jääetikkaan (0.28). %) lisättiin tähän liuokseen. Osat värjättiin ja kiinnitettiin kanadalaisella balsamilla (Kanto, Tokio, Japani).

4.8. FJ B -värjäys

FJ B -värjäys suoritettiin hermosolujen rappeutumisen (kuolema tai menetys) tutkimiseksi. Julkaistun menettelyn [34] mukaan valmistetut aivoleikkeet liotettiin 1 % natriumhydroksidissa, siirrettiin välittömästi 0.06 % kaliumpermanganaattiin ja reagoitiin nopeasti 0,0004 % Fluoro-Jade B:n (Histochem) kanssa. , Jefferson, AR, USA).

Leikkeet pestiin lyhyesti ja laitettiin lasinlämmittimelle (noin 50 ◦C) reaktiota varten FJ B:n kanssa. OXC:n terapeuttisen vaikutuksen arvioimiseksi tFI:tä vastaan ​​laskettiin FJ B+ -solujen lukumäärä CA1-alueella menetelmällä, joka on julkaistu julkaisussa [ 70].

Lyhyesti sanottuna digitaaliset kuvat FJ B+ -soluista otettiin viidestä osasta gerbiiliä kohden käyttämällä epifluoresoivaa mikroskooppia (Carl Zeiss) (Oberkochen, Saksa) aallonpituudella 450–490 nm. Solut laskettiin 250 µm2:ssa, joka sisälsi SP:n, CA1-alueen keskellä käyttämällä kuva-analysointijärjestelmää (Optimas 6.5) (CyberMetrics, Scottsdale, AZ, USA).

4.9. Immunohistokemia

NeuN-, TRPV1- ja TRPV4-immunoreaktiivisuuden muutosten tutkimiseksi CA1-alueella suoritettiin yleinen immunohistokemia. Lyhyesti sanottuna julkaistun menetelmän [34] mukaisesti valmistettuja aivoleikkeitä inkuboitiin primääristen vasta-aineiden kanssa - hiiren anti-NeuN (laimennettu, 1:1100) (Chemicon, Temecula, CA, USA), hiiren anti-TRPV1 (laimennettu, 1:500) (Abcam, Cambridge, UK) ja kanin anti-TRPV4 (laimennettu, 1:500) (Abcam, Cambridge, UK).

Sen jälkeen näitä inkuboituja leikkeitä inkuboitiin vastaavissa toissijaisissa vasta-aineissa (laimennettu, 1:250) (Vector Laboratories Inc., Burlingame, CA, USA) ja kehitettiin käyttämällä Vectastain ABC:tä (laimennettu, 1:250) (Vector Laboratories Inc., Burlingame, CA) , USA). Lopuksi näillä immunoreagoinneilla leikkeillä oli väri 3,3'-diaminobentsidiinillä visualisoinnin jälkeen.

NeuN+-solujen lukumäärät laskettiin seuraavasti. Digitaaliset kuvat NeuN+-soluista otettiin viidestä leikeestä per gerbiili käyttämällä valomikroskooppia (AxioM1) (Carl Zeiss, Saksa).

Solut laskettiin samalla tavalla kuin FJ B+ -solumäärä. TRPV1+- ja TRPV4+-rakenteiden tiheyden arvioimiseksi CA1-alueen vastaavia alueita käytettiin viidessä osassa eläintä kohti. Kuvat TRPV1+- ja TRPV4+-rakenteista otettiin AxioM1-valomikroskoopilla (Carl Zeiss) (Saksa).

TRPV{{0}}- ja TRPV4+-rakenteiden tiheydet arvioitiin suhteelliseksi optiseksi tiheydeksi (ROD). Tätä tarkoitusta varten kuvat muutettiin keskiharmaatasolle. ROD esitettiin prosentteina käyttämällä Adobe Photoshopia (versio 8.0) ja NIH Image J -ohjelmistoa (NationalInstitutes of Health, Bethesda, MD, USA).

4.10. Tilastollinen analyysi

Esitimme tiedot keskiarvona ± keskiarvon standardivirhe (SEM). Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin GraphPad Prismin (versio 5.0) avulla (GraphPadSoftware, La Jolla, CA, USA). Koeryhmien keskiarvojen erot analysoitiin tilastollisesti kaksisuuntaisella varianssianalyysillä (ANOVA) post hocBonferronin moninkertaisella vertailutestillä tFI:hen liittyvien erojen selvittämiseksi kaikkien ryhmien välillä. Tilastollinen merkitsevyys otettiin huomioon p < 0. 05.

Tekijän panokset: Käsitteellisyys: M.-HW ja T.-KL; Methodology, J.-CL ja DWK; Ohjelmisto, H.-IK ja MCS; Validointi, JHA, IJK ja JHP; Investigation, J.-CL, H.-IK ja M.CS; Data Curation, JHC, IJK ja JHP; Kirjoitus-alkuperäisen luonnoksen valmistelu, H.-IK ja J.-CL; Writing-Review and Editing, M.-HW; Valvonta, S.-SL; Project Administration, M.-HW; Rahoitushankinta, S.-SL ja T.-KL Kaikki kirjoittajat ovat lukeneet ja hyväksyneet käsikirjoituksen julkaistun version.

Rahoitus: Tätä työtä tuki Brain Korea 21 (BK21) Fostering Outstanding Universities for Research (FOUR, 4220200913807), jota rahoitti Korean kansallinen tutkimussäätiö (NRF) ja perustieteiden tutkimusohjelma Korean kansallisen tutkimussäätiön (NRF) kautta. opetusministeriön rahoittama (NRF-2020R1I1A1A01070897).

Institutional Review Boardin lausunto: Gerbiilit kasvatettiin Kangwon National Universityn (Chuncheon, Korea) koeeläinkeskuksessa. Tätä tutkimusta varten Institutional AnimalCare and Use Committee hyväksyi koeprotokollan (hyväksyntänumero, KW-200113-1; hyväksymispäivä 18. helmikuuta 2020).

Tutkimusprotokolla noudatti The National Academies Pressin (8. painos, 2011) julkaiseman oppaan "Current International Laws and Policies" (8. painos, 2011) "Opas for the Care and Use of Laboratory Animals" -ohjeita.

Ilmoitettu suostumus: Ei sovelleta.

Tietojen saatavuusilmoitus: Tässä tutkimuksessa esitetyt tiedot ovat saatavilla pyynnöstä vastaavalta kirjoittajalta.

Kiitokset: Kirjoittajat arvostavat Hyun Sook Kimiä ja Seung Uk Leetä teknisestä avusta tässä tutkimuksessa.

Eturistiriidat: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, että taloudellista eturistiriitaa ei ole.

Lyhenteet

CA1: osakenttä Cornu Ammonis 1; CNS, keskushermosto; CV, kresyylivioletti; DG, gyrus; FJ B, Fluoro-Jade B; HyT, hypotermia; NeuN, hermosolut; OXC, okskarbatsepiini; PAT, passiivisen välttämisen testi; ROD, suhteellinen optinen tiheys; SMA, spontaani motorinen aktiivisuus; SO, stratum oriens;SP, stratum pyramidal; SR, stratum radiatum; tFI, ohimenevä etuaivojen iskemia; TRPV1, transienttireseptoripotentiaalinen vanilloidityyppi 1.

Viitteet

1. Busto, R.; Dietrich, WD; Globus, MY; Valdes, I.; Scheinberg, P.; Ginsberg, MD Pienet erot iskeemisessä aivojen lämpötilassa määräävät kriittisesti iskeemisen hermovaurion laajuuden. J. Cereb. Blood Flow Metab. 1987, 7, 729-738. [CrossRef][PubMed]

2. Maher, J.; Hachinski, V. Hypotermia mahdollisena aivoiskemian hoitona. Cerebrovasc. Brain Metab. Rev. 1993, 5 277–300.

3. Nurse, S.; Corbett, D. Neuroprotection useiden päivien lievän, huumeiden aiheuttaman hypotermian jälkeen. J. Cereb. Blood Flow Metab. 1996, 16 474–480. [CrossRef]

4. Fisher, M.; Feuerstein, G.; Howells, DW; Hurn, PD; Kent, TA; Savitz, SI; Lo, EH; Group, S. Päivitys aivohalvaushoidon akateemisen teollisuuden pyöreän pöydän prekliinisistä suosituksista. Stroke 2009, 40, 2244–2250. [CrossRef]

5. Liu, L.; Yenari, MA Terapeuttinen hypotermia: Neuroprotektiiviset mekanismit. Edessä. Biosci. 2007, 12, 816–825. [CrossRef]

6. Lyden, PD; Krieger, D.; Yenari, M.; Dietrich, WD Terapeuttinen hypotermia akuuttiin aivohalvaukseen. Int. J. Stroke 2006, 1, 9–19. [CrossRef][PubMed]

7. Klassman, L. Terapeuttinen hypotermia akuutissa aivohalvauksessa. J. Neurosci. Sairaanhoitajat. 2011, 43, 94–103. [CrossRef]

8. Groysman, LI; Emanuel, BA; Kim-Tenser, MA; Sung, GY; Mack, WJ Terapeuttinen hypotermia akuutissa iskeemisessä aivohalvauksessa. Neurosurg. Focus 2011, 30, E17. [CrossRef] [PubMed]

9. Schwab, S.; Georgiadis, D.; Berrouschot, J.; Schellinger, PD; Graffagnino, C.; Mayer, SA Kohtalaisen hypotermian toteutettavuus ja turvallisuus massiivisen aivopuoliskon infarktin jälkeen. Stroke 2001, 32, 2033–2035. [CrossRef]

10. Katz, LM; Young, AS; Frank, JE; Wang, Y.; Park, K. Säädelty hypotermia vähentää aivojen oksidatiivista stressiä hypoksisen iskemian jälkeen. Brain Res. 2004, 1017, 85–91. [CrossRef]

11. Liu, K.; Khan, H.; Geng, X.; Zhang, J.; Ding, Y. Farmakologinen hypotermia: potentiaalia tulevalle aivohalvaushoidolle? Neurol. Res.2016, 38, 478–490. [CrossRef]

12. Ma, J.; Wang, Y.; Wang, Z.; Li, H.; Wang, Z.; Chen, G. Lääkkeiden aiheuttaman terapeuttisen hypotermian neuroprotektiiviset vaikutukset keskushermostosairauksissa. Curr. Drug Targets 2017, 18, 1392–1398. [CrossRef]

13. Calabresi, P.; Cupini, LM; Centonze, D.; Pisani, F.; Bernardi, G. Epilepsialääkkeet mahdollisena neuroprotektiivisena strategiana aivoiskemiana. Ann. Neurol. 2003, 53, 693–702. [CrossRef]

14. Tanaka, T.; Litofsky, NS Epilepsialääkkeet lasten traumaattisessa aivovauriossa. Asiantuntija pastori Neurother. 2016, 16, 1229–1234.[CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com