HydroZitLa estää kalsiumoksalaattikivien muodostumista nefroliittisissa rotissa ja edistää pitkäikäisyyttä sukkulamatossa Caenorhabditis Elegans, osa 2

Cistanchen glykosidi voi myös lisätä SOD:n aktiivisuutta sydämen ja maksan kudoksissa ja vähentää merkittävästi lipofussiinin ja MDA:n pitoisuutta kussakin kudoksessa, poistaen tehokkaasti erilaisia reaktiivisia happiradikaaleja (OH-, H₂O₂ jne.) ja suojaamalla DNA-vaurioilta. OH-radikaalien toimesta. Cistanche-fenyylietanoidiglykosideilla on vahva vapaita radikaaleja poistava kyky, suurempi pelkistyskyky kuin C-vitamiini, ne parantavat SOD:n aktiivisuutta siittiösuspensiossa, vähentävät MDA-pitoisuutta ja niillä on tietty suojaava vaikutus siittiöiden kalvon toimintaan. Cistanche-polysakkaridit voivat lisätä SOD:n ja GSH-Px:n aktiivisuutta D-galaktoosin aiheuttamien kokeellisesti vanhenevien hiirten punasoluissa ja keuhkokudoksissa sekä vähentää MDA- ja kollageenipitoisuutta keuhkoissa ja plasmassa sekä lisätä elastiinipitoisuutta. hyvä huuhteluvaikutus DPPH:lle, pidentää hypoksian aikaa vanhenevilla hiirillä, parantaa SOD:n aktiivisuutta seerumissa ja viivyttää keuhkojen fysiologista rappeutumista kokeellisesti vanhenevilla hiirillä Solumorfologisen rappeutumisen yhteydessä kokeet ovat osoittaneet, että Cistanchella on hyvä antioksidanttikyky ja sillä on potentiaalia olla lääke ihon ikääntymisen sairauksien ehkäisyyn ja hoitoon. Samaan aikaan Cistanchen ekinakosidilla on merkittävä kyky poistaa DPPH-vapaita radikaaleja ja kyky poistaa reaktiivisia happilajeja ja estää vapaiden radikaalien aiheuttamaa kollageenin hajoamista, ja sillä on myös hyvä korjaava vaikutus tymiinin vapaiden radikaalien anionien vaurioihin.

cistanche supplement

Napsauta Cistanche Norge

【Lisätietoja:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】

Nykyisten löydöstemme perusteella HydroZitLa käytti antipatogeenistä toimintaa ainakin kahdella tavalla. Ensinnäkin se vähensi virtsan oksalaatin erittymistä, vähensi virtsan CaOx-kiteytyskapasiteettia ja toimitti sitraattia. Toiseksi se sisälsi kasviperäisiä polyfenoleja, jotka kykenivät heikentämään oksidatiivista stressiä ja tulehdusta ja siten estämään CaOx-litogeneesiä. Pohjimmiltaan oksalaatti syntetisoituu endogeenisesti maksassa käyttämällä glyoksylaattia näkyvänä esiasteena41. Glyoksylaatti syntetisoidaan glykolaatista glykolaattioksidaasi (GO) -entsyymin toimesta, ja laktaattidehydrogenaasi (LDH) muuttaa sen edelleen oksalaatiksi. Havaitsimme, että HydroZitLa vähensi merkittävästi virtsaan oksalaatin erittymistä EG-käsitellyillä rotilla. Arvelimme, että HydroZitLa esti oksalaattisynteettistä reittiä maksassa glyoksylaattimetaboliaan osallistuvien maksaentsyymien, erityisesti LDH:n ja GO:n, alasäätelyn kautta. Kailashin ja Varalakshmin edellinen tutkimus osoitti, että banaanivarren uute alensi maksan GO- ja LDH-tasoja natriumglykolaatti-indusoiduilla hyperoksalurirotilla27. Poonguzhali ja Chegu raportoivat myös, että banaaninvarresta saatu raakauute vähensi virtsan oksalaattia, glykolihappoa ja glyoksyylihappoa glykolaatti-indusoiduissa hyperoksalurirotissa30. Äskettäin Patankar et ai. osoittivat, että heidän yrttikoostumuksensa, nimeltään Herbmed Plus (sisältää banaanin vartta), alensi LDH-aktiivisuuden tasoa maksa- ja munuaiskudoksissa42. Spekulaatiomme vahvistamiseksi oksalaattisynteesiin osallistuvien maksa- ja munuaisentsyymien ilmentymistä EG-rotissa, joita on hoidettu HydroZitLa:lla, tulisi tutkia tarkemmin.

cistanche nedir

Useat todisteet tukevat vahvasti sitä, että oksidatiivinen stressi, tulehdus ja munuaistiehyiden vauriot ovat kriittisesti mukana CaOx-litogeneesissä3, 4, 15, 43–45. Oksalaatti- ja/tai CaOx-kiteiden aiheuttama oksidatiivinen stressi aiheuttaa munuaistiehyissä vaurioita, jotka luovat kohdat kiteen ytimelle, adheesiolle, retentiolle, aggregaatiolle ja lopuksi nidus-muodostukselle43, 46, 47. Lisäksi oksidatiivinen stressi aktivoi tulehdusreaktion, joka puolestaan kiihdyttää litogeenistä prosessia4,47,48. Näin ollen antioksidanttisia ja anti-inflammatorisia ominaisuuksia omaava kasvilääketiede on lupaava toimenpide munuaiskivien muodostumisen estämiseksi24. Aggarwal et ai. osoitti EG-indusoidussa nefroliittisessa rottamallissa, että bergeniinillä (Bergenia ligulatasta eristetty bioaktiivinen fenoliyhdiste) oli voimakas antipatogeeninen vaikutus vähentämään oksidatiivista stressiä, parantamaan mitokondrioiden toimintahäiriöitä ja vähentämään tubulusvaurioita ja tulehduksia49. Rutiinin ja kurkumiinin (hyvin tunnetut alkuperäiset fytokemikaalit, joilla on antioksidanttisia ja anti-inflammatorisia ominaisuuksia) osoitettiin estävän tubulointerstitiaalisia vaurioita ja kidekertymiä EG-indusoiduissa nefroliittisissa rotissa50. Rypäleen siemenistä peräisin olevien polyfenolien osoitettiin myös estävän munuaistensisäisiä CaOx-kidekertymiä EG-indusoiduissa litiaasirotissa, todennäköisesti niiden antioksidanttiaktiivisuuden kautta51. Ayurveda-yrttivalmisteen Herbmedin osoitettiin vähentävän tulehdusvaurioita ja kidekertymiä EG:n aiheuttamien nefroliittisten rottien munuaisissa42. Tässä tutkimuksessa osoitimme, että HydroZitLa vähensi munuaistensisäistä oksidatiivista stressiä, tulehdusta ja CaOx-kidekertymiä, mikä viittaa siihen, että HydroZitLa käytti antioksidanttisia ja anti-inflammatorisia vaikutuksia estääkseen CaOx-munuaiskivien muodostumista.

Useiden kasvien polyfenolien on kokeellisesti osoitettu olevan hyödyllisiä eliniän pidentämisessä ja ikääntymisen viivyttämisessä52. Resveratroli on parhaiten luonnehdittu elinikää pidentävä polyfenoliyhdiste. Se vaikuttaa ensisijaisesti sirtuiinin aktivoitumisen ja oksidatiivisen stressin vaimennuksen kautta53. C. elegans -mallissa testatun resveratrolin pitkäikäisyysvaikutus vaihtelee tutkimusten välillä, ja keskimääräinen elinikä on pidentynyt 10-65 prosentilla 54,55. HydroZitLa pidensi villin tyypin C. elegansin elinikää merkittävästi jopa 34 prosenttiin ilman myrkyllisyyden merkkejä, mikä viittaa siihen, että HydroZitLa:n elinikää pidentävä vaikutus oli verrattavissa resveratrolin vaikutukseen. Ruokavalion rajoittaminen on tunnettu avainmekanismi pitkäikäisyydessä56. HydroZitLa-matojen ja kontrollimatojen väliset nielun pumppausnopeudet olivat vertailukelpoisia, mikä osoittaa, että HydroZitLa:n eliniän pidentäminen ei johtunut ruokavalion rajoituksista.

HydroZitLa vähensi merkittävästi autofluoresoivan ikäpigmentin lipofussiinin kertymistä C. elegansissa, mikä viittaa ikääntymistä estävään vaikutukseen. ROS ja oksidatiivinen stressi ovat tunnettuja SIPS:n indusoijia, ja oksidatiivinen stressi nopeuttaa telomeerien lyhentymistä57. Osoitimme äskettäin, että CaOx-kiviä sairastavien potilaiden oksalaatti, COM ja virtsa aiheuttivat ennenaikaista vanhenemista, p16:n noususäätelyä ja telomeerien kulumista munuaisten tubulussoluissa oksidatiivisen stressin kautta. 58 Tässä tutkimuksessa osoitimme, että HydroZitLa esti telomeerien kulumista, p16:n lisääntymistä ja ennenaikainen vanheneminen HK-2-soluissa, jotka ovat altistuneet H2O2:lle, oksalaatille ja COM:lle. Vaikka tämän ikääntymistä estävän vaikutuksen molekyylimekanismia ei kehitetty, HydroZitLa:n ehdotettiin mekaanisesti estävän ennenaikaista vanhenemista estämällä telomeerien lyhenemistä ja p16:n ilmentymisen alasäätelyä.

Vaikka kasviperäisistä lääkkeistä ja fytolääkkeistä tulee vähitellen suosittuja ja maailmanlaajuisesti hyväksyttyjä, tehosta ja turvallisuudesta on esitettävä tieteellistä näyttöä, eikä niitä saa vaarantaa. Yrttien ja lääkkeiden yhteisvaikutusta tuskin ennakoidaan, koska se vaihtelee suuresti yksilöiden välillä, riippuen useista tekijöistä, kuten sytokromi P450 -entsyymin ja lääkekuljettajien polymorfismista ja olemassa olevista lääketieteellisistä tiloista59. Yrttien ja lääkkeiden yhteiskäytön haittavaikutuksia on seurattava tarkasti mahdollisten yrtti-lääkkeiden yhteisvaikutusten tunnistamiseksi. Tunnetuimpia yrttejä, jotka ovat olleet vakavasti vuorovaikutuksessa huumeiden kanssa, ovat valkosipuli, Baizhi, Danggui, ginseng, ginkgo, lakritsi, mäkikuisma, Kava, musta- ja pitkäpippuri, Danshen, Huangqin ja maitoohdake59. Tietojemme mukaan banaanin varrelle, perhosen siniherneen kukkalle ja sappapuulle ei ole raportoitu vakavia sivuvaikutuksia tai lääkkeiden yhteisvaikutuksia. Thaimaassa banaaninvartta kulutetaan ruoan ainesosana. Liiallinen (ylikulutus) banaanivarren mehun juominen voi aiheuttaa allergiaa, vatsakipua ja oksentelua, joten kohtuullista käyttöä suositellaan. Siniherneen kukkaa käytetään yleisesti elintarvikkeissa luonnollisena väriaineena, ja sitä käytetään myös teen valmistukseen. Perhonen siniherneenkukkateen liiallisen käytön haittavaikutuksia, kuten vatsavaivoja, pahoinvointia ja allergisia reaktioita, on raportoitu harvoin. Sappanpuuta käytetään usein myös luonnollisena elintarvikevärinä, ja yhteisöissä (mukaan lukien yhteisöt Thaimaassa) sitä käytetään yleisesti terveellisenä juomana. Sappapuuuutteen ehkäisytoiminto (urosten hedelmällisyyttä estävä) on kuitenkin osoitettu rottamallissa, koska se häiritsee spermatogeneesiä60. Toisaalta Caesalpinia sappan L.:n sydänpuuta käytetään gynekologisten oireiden, kuten oligomenorrean ja amenorrean, lääkkeenä61. Siksi HydroZitLa:n pitkäaikaisen käytön turvallisuus ihmisillä on vielä selvittämättä kliinisessä tutkimuksessa.

rou cong rong benefits (2)

Tällä tutkimuksella on joitain rajoituksia. Tarkkoja aktiivisia yhdisteitä, jotka ovat vastuussa CaOx-kiviä estävästä toiminnasta, ei tunnistettu eikä karakterisoitu. HydroZitLa:n tarkkoja mekanismeja CaOx-kivien muodostumisen estämiseksi rotilla ei ole tutkittu laajasti. HydroZitLa:n annoksesta riippuvaa antipatogeenistä vaikutusta ei ole tutkittu. HydroZitLa-annosta, joka voisi merkittävästi lisätä virtsan sitraattipitoisuutta nefroliittisilla rotilla, ei tutkittu. HydroZitLa:n fenoliprofiilia tulisi tutkia tarkemmin. HydroZitLa:n pitkäikäisyyden edistämismekanismia C. elegansissa ei tutkittu intensiivisesti. Lopuksi, tiettyjä HydroZitLa-yhdisteitä, jotka ovat vastuussa pitkäikäisyydestä ja ikääntymisen estämisestä, ei tunnistettu eikä karakterisoitu.

Yhteenvetona voidaan todeta, että HydroZitLa kehitettiin samanaikaisesti normalisoimaan CaOx-kiven muodostumisen riskitekijöitä toimittamalla nestettä, sitraattia ja luonnollisia antioksidantteja. Kokeellisesti HydroZitLa esti munuaistensisäistä CaOx-kertymää nefroliittisissa rotissa. HydroZitLa:n CaOx-kiveä estävä teho vastasi tällä hetkellä käytössä olevaa kaliumsitraattia (Uralyt-U). HydroZitLa vaimenti tehokkaasti oksidatiivista stressiä sekä in vitro että in vivo. Huomattavaa on, että HydroZitLa pidensi C. elegansin elinikää ja viivästytti ikääntymisen alkamista. Lisäksi HydroZitLa esti merkittävästi telomeerien lyhenemistä, p16-ilmentymistä ja ennenaikaista vanhenemista ihmisen munuaissoluissa. Nämä prekliiniset havainnot viittaavat siihen, että HydroZitLa oli kliinisesti lupaava vaihtoehto CaOx-munuakivitaudin hoidolle, johon liittyy pitkäikäisyyttä edistäviä ja ikääntymistä estäviä etuja. Kliiniset tutkimukset ovat välttämättömiä HydroZitLa:n terapeuttisen tehon takaamiseksi ihmisillä.

Materiaalit ja menetelmät

HydroZitLa-tuotanto, antioksidanttipitoisuus ja ravitsemustieto. HydroZitLa on Tailandissa paikallisesti saatavilla oleva lääkekasviperäinen juomatiiviste32. Juoma valmistetaan laimentamalla HydroZitLa-konsentraatti (55 ml suljetussa pussissa) juomavedellä (lopulliseen tilavuuteen 500 ml). Sillä on vaaleanpunaisen violetti väri ja herkullinen hapan-makea maku. HydroZitLan pääainesosat olivat banaanivarren (Musa sapientum L.) vesiuute ja sitruunahappo (16 mekv/pussi). Perinteisiä tai-lääkekasveja, mukaan lukien Clitoria ternatea L. (Butterfly blue herne kukkajauhe) ja Caesalpinia sappan L. (Sappan-puujauhe), käytettiin luonnollisina väriaineina. Stevia ja sukraloosi olivat makeutusaineita. Tai FDA hyväksyi tuotteen 10. huhtikuuta 2019 suljetussa pakkauksessa juomaluokkaan (elintarvikesarjanro 10–1-02,244–5-0005).

HydroZitLa:n kokonaisantioksidanttikapasiteetti (TAC) oli 21,87 ± 7,96 mg C-vitamiinia vastaavaa antioksidanttikapasiteettia pussia kohti (täydentävä kuva 8). Kokonaisfenolipitoisuus (TPC) oli 19,99 ±0,83 mg gallushappoekvivalenttia/100 g. Favonoidin kokonaispitoisuus (TFC) oli 4,59 ± 0,31 mg katekiiniekvivalenttia/100 g. Laadunvalvonnassa TAC, TPC ja TFC käytettiin laadunvalvontaparametreina. TAC:n, TPC:n ja TFC:n tasot banaanin varressa, perhosen sinihernekukassa ja sappapuuuutteissa erien ja varastointiaikojen välillä eivät eronneet merkittävästi. HydroZitLa:n tuotannossa TAC-, TPC-, TFC- ja brix-arvoja (17±2) käytettiin laadunvalvontaparametreina erien välisen yhtenäisyyden säilyttämiseksi.

HydroZitLa:n kokonaisenergia pussia kohti (annos) oli 25 kcal. Proteiinia, rasvaa ja kolesterolia ei havaittu. Hiilihydraattia oli yhteensä 6 g, sokeria oli<1 g, and sodium was 10 mg. The potassium content was 240 mg/100 g. Soluble and insoluble dietary fibers were 0.74 and 0.43 g/100 g, respectively. Te pH of HydroZitLa was 3.4.

Myrkyllisyyden arviointi.Escherichia colin, Clostridium spp.:n, Salmonella spp.:n ja Staphylococcus aureuksen esiintymisen HydroZitLassa analysoi Bureau of Quality and Safety of Food, Department of Public Health, Thailand. HydroZitLa:n metalliprofiili analysoitiin ICP-OES:llä.

HydroZitLa:n akuutti myrkyllisyys in vivo hiirillä testattiin Thaimaan kansanterveysministeriön lääkekasvien tutkimuslaitoksessa. HydroZitLaa tai vettä (kontrolli) annettiin hiirille suun kautta annoksella 20 ml/kg (n=10 ryhmää kohti). Hiiriä tarkkailtiin 14 päivää ennen ruumiinavausta. Karkeat vauriot sisäelimissä tutkittiin ja niitä verrattiin HydroZitLa- ja kontrolliryhmien välillä.

CaOx-aggregaatiomääritys.Valmistettiin siemen-COM-kiteet62 ja laimennettiin pitoisuuteen 50 mg/ml 0.05 M Tris/0.15 NaCl, pH 6,5. HydroZitLa:ta tai BSA:ta tai tislattua vettä (nolla) (200 ui) lisättiin juuri valmistettuun työsiemenen COM-suspensioon (2 ml). Sekoituksen jälkeen absorbanssi 620 nm:ssä mitattiin perusviivana (AT0). Kun oli inkuboitu 37 asteessa 10 minuuttia, absorbanssi mitattiin uudelleen aallonpituudella 620 nm (AT10). Aggregaatiokerroin (AC) laskettiin seuraavasti: AC=((AT0−AT10)/10)×1000. Korkeampi AC-arvo tarkoittaa suurempaa COM-aggregaatiota.

Solulinjan, sytotoksisuuden ja solunsisäisen ROS:n määritys.HK{{0}}-soluja (ATCC, VA, USA) pidettiin DMEM:ssä, jota oli täydennetty 10 prosentilla naudan sikiön seerumilla ja 1 prosentilla Pen-Strepillä alle 37 asteen, 5 prosentin CO2:n ja 95 prosentin kosteudessa. HydroZitLa:n sytotoksisuus HK-2-soluissa arvioitiin MTT-määrityksellä63. HK-2-soluja kylvettiin (200 solua/kuoppa), kasvatettiin yön yli 96-kuoppalevyllä ja käsiteltiin erilaisilla HydroZitLa-konsentraatioilla (0 kontrollina, 1,25 prosenttia, 2,5 prosenttia, 5 prosenttia, 10 % , 20 % , 40 % , 50 % , 80 % ja 100 % v/v) 24 tunnin ajan. Pesun jälkeen lisättiin MTT-liuos, inkuboitiin 1 tunti ja sitten heitettiin pois. Dimetyylisulfoksidia lisättiin formatsaanikiteiden liuottamiseksi. Absorptio 570 nm:ssä mitattiin. Solujen elinkelpoisuus (%) laskettiin käyttämällä käsittelemättömiä soluja kontrollina (100-prosenttinen elinkelpoisuus).

Solunsisäisen ROS-tuotannon esto HydroZitLa:lla määritettiin diklooridihydrofluoreseiinidiasetaatti (DCFH-DA) -määrityksellä 96-kuoppalevyllä 64,65. HK-2-solut yhdistettiin 0,1 M DCFH-DA-liuokseen ja inkuboitiin 37 asteessa 30 min. Pesun jälkeen solut altistettiin H202:lla tai COM:lla (10 tilavuusprosentin HydroZitLa:n kanssa ja ilman). Fluoresenssiintensiteetti (viritetty 485 nm:ssä ja emittoitu aallonpituudella 535 nm) mitattiin alussa (TO) ja 60 minuutin kohdalla (T60). Mielivaltainen fluoresoiva yksikkö (AFU), joka osoitti ROS-kehityksen tason, laskettiin seuraavasti: AFU= T60/T0.

Proteiinin karbonylaatiomittaus.Proteiinin karbonyylipitoisuus proteiinin hapettumisen indikaattorina mitattiin aikaisempien raporttiemme mukaan64–66. Käsitellyt HK-2-solut (100-mm-maljassa) hajotettiin radioimmunosaostusmäärityspuskurilla, joka sisälsi proteaasi-inhibiittoriseoksen. Kokonaisproteiinikonsentraatio mitattiin Bradford-määrityksellä. Solulysaattia inkuboitiin 10 mM dinitrofenyylihydratsiiniliuoksen (DNPH) tai 2 N HCl:n kanssa 1 tunti pimeässä. Kylmää 20-prosenttista trikloorietikkahappoa lisättiin ja inkuboitiin 10 minuuttia jäillä. Pelletit kerättiin sentrifugoimalla, pestiin etyyliasetaatti:etanolilla (1:1) ja liuotettiin uudelleen 6 M guanidiini-HCl:lla. Absorbanssi (A) 375 nm:ssä mitattiin. Kokonaisproteiinipitoisuudella normalisoitu proteiinikarbonyylipitoisuus laskettiin seuraavasti: ((ADNPH – AHCl)×45,45)/proteiinipitoisuus.

cistanche side effects reddit

Rotan malli CaOx-nefrolitiaasille.EG:tä (1 % tilavuus/tilavuus) juomaveteen lisättynä (vapaa pääsy ad libitum, 35 päivää) käytettiin CaOx-munuakivitaudin induktioon rotilla. Urospuoliset Wistar-rotat (6–8 viikkoa vanhat, 180–300 g) jaettiin neljään ryhmään, nimittäin EG (n=6), EG plus HydroZitLa (n=6), EG plus Uralyt-U (n=6) ja normaalit kontrolliryhmät (n=2). Kaikki rotat pidettiin ruostumattomasta teräksestä valmistetuissa häkeissä 25 asteessa 12:12 tunnin valo-pimeä-syklin alla. Kahta kontrollirottaa käytettiin tarkoituksella vain CaOx-kertymien vertailuun rotan munuaisissa ja immunohistokemiassa, ei virtsan kemiassa. HydroZitLaa ja Uralyt-U:ta pakkosyötettiin kahdesti päivässä (aamulla ja illalla) kokonaissitraattiannoksella 2 meekv. päivässä. Tämä annettu sitraattiannos vastasi 60,8 mekvivalenttia sitraattia ihmisillä laskettuna Reagan-Shaw'n et al.67 ehdottaman annoksen muuntamisen perusteella. 24-h virtsanäytteitä otettiin toimenpiteen lopussa (päivä 35) käyttämällä tymolia säilöntäaineena. Rotat nukutettiin isofluraanilla ja tapettiin. Molemmat munuaiset poistettiin, leikattiin ja kiinnitettiin 10 prosentin neutraaliin formaliinipuskuriin histologista tutkimusta varten.

Kaikki rotat ostettiin National Laboratory Animal Centeristä, Salaya Campus Mahidol University, Nakhonpathom, Thaimaa. Koetoimenpiteet suoritettiin Thaimaan kansallisen tutkimusneuvoston koe-eläinten ohjeiden mukaisesti ja hyväksyttiin Institutional Animal Care & Use Committee, Faculty of Medicine, Chulalongkorn University (nro 022/2560). Tutkimuksemme suoritettiin ARRIVE-ohjeiden mukaisesti.

CaOx-kertymä munuaisleikkeissä polarisoidulla mikroskopialla.Formaliinilla kiinnitetyt parafiiniin upotetut rotan munuaisleikkeet valmistettiin automaattisella kudosprosessorilla. H&E-värjäys suoritettiin standardimenettelyn mukaisesti. Kahtaistaitteiset CaOx-kidekertymät H&E-värjätyissä leikkeissä visualisoitiin käyttämällä polarisoitua valomikroskooppia (OLYMPUS BX50, Japani).

Yasue-värjäys CaOx-histokemiaa varten.Munuaiskudosleikkeistä tehtiin parafiini, ne hydratoitiin uudelleen, upotettiin 5-prosenttiseen etikkahappoon 30 minuutiksi kalsiumfosfaatin ja kalsiumkarbonaatin poistamiseksi ja pestiin tislatulla vedellä 68. Leikkeitä inkuboitiin 5-prosenttisella AgNO3:lla 12 minuuttia, pestiin ja inkuboitiin kylläisellä rubeenihapolla. happoa 10-prosenttisessa ammoniumissa 1 minuutin ajan. Värjätyt leikkeet huuhdeltiin 50-prosenttisella etanolilla, pestiin tislatulla vedellä, dehydratoitiin, kirkastettiin ja kiinnitettiin. Mustat CaOx-saostumat visualisoitiin valomikroskoopilla69.

Immunohistokemiallinen värjäys.Paraffinoinnin ja rehydratoinnin jälkeen antigeenin haku suoritettiin keittämällä natriumsitraattipuskurissa käyttäen mikroaaltouunia. Endogeeninen H2O2 inaktivoitiin inkuboimalla 0,3 prosentin H2O2:n kanssa 30 minuuttia. Epäspesifinen sitoutuminen estettiin inkuboimalla normaalin hevosen seerumin kanssa 20 minuuttia. Sitten leikkeitä inkuboitiin 1:1, 000 4-HNE (ab46545, Abcam, Cambridge, UK) tai pilkotun kaspaasin-3 (5A1E, Cell Signaling Technology, MA, USA) primaarisen vasta-aineen kanssa 4 asteessa yön yli. jota seurasi inkubointi sekundaarisen vasta-aineen kanssa 37 asteessa 30 minuutin ajan. Pesun jälkeen leikkeitä inkuboitiin ABC-reagenssilla (VECTASTAIN® ABC kit) 30 minuuttia, liotettiin 1-prosenttisessa diaminobentsidiinivärjäysreagenssissa 5 minuutin ajan ja vastavärjättiin hematoksyliinillä 5 minuutin ajan. Lopuksi leikkeet kuivattiin, puhdistettiin, kiinnitettiin ja visualisoitiin valomikroskoopin alla.

Virtsan sitraatin, oksalaatin, virtsahapon ja iCOCI:n mittaukset. Sitraatin määrä virtsassa määritettiin korkean erotuskyvyn nestekromatografialla (Varian Medical Systems, CA, USA) käyttäen ROAorganic Acid H plus -kolonnia (300 × 7,8 mm) (Phenomenex, CA, USA) ja eluoitiin 5 mM H2SO4:lla virtausnopeudella 0,5 ml/min. Virtsan oksalaatti- ja virtsahappotasot mitattiin kapillaarielektroforeesilla (Beckman Coulter, CA, USA) erotettuna 25 asteessa −20 kV:n jännitteellä. Virtsan iCOCI-testi suoritettiin edellisen raportimme 38 mukaan.

C. elegans rasitus ja huolto.C. elegansin villityypin kanta Bristol N2 ja sen laboratorioruokalähde E. coli OP50 saatiin Caenorhabditis Genetics Centeristä, University of Minnesota, USA. Niitä kasvatettiin ja pidettiin sukkulamatokasvatusalustan agarmaljoilla, joissa oli E. coli OP50:n nurmikko 20 70 asteessa. Kaikki kokeet suoritettiin iän mukaan synkronoiduilla nuorilla aikuisilla matoilla.

Elinikämääritys.Elinikäanalyysi suoritettiin nestemäisissä väliaineissa71. Lyhyesti sanottuna 10 ikäsynkronoitua nuorta aikuista sukkulamatoa siirrettiin 24-kuoppalevylle M9-puskurilla yhdessä E. coli OP50:n ja 5-fuoro-2'-deoksiuridiinin kanssa jälkeläisten tuotannon estämiseksi. Erilaisia HydroZitLa-konsentraatioita lisättiin käyttämällä tislattua vettä vehikkelikontrollina. Elävät sukkulamadot laskettiin 24 tunnin välein. Nematodeja pidettiin kuolleina, kun ne eivät reagoineet kevyeen tönäytykseen platinasilmukan avulla.

Nielun pumppausmääritys.Nielun pumppaus (ravinnon saantikyvyn indikaattori) mitattiin nuorilla aikuisilla sukkulamadoilla (~10) verrokin ja HydroZitLa-lisän välillä tarkkailemalla nielun supistumista 30 sekunnin ajan 24 tunnin välein stereomikroskoopilla (SMZ{). {3}}, Motic, Kiina) päivinä 0 (ennen lisäystä), 5, 10 ja 1572.

Lipofuskiinimääritys.Lipofussiinin kerääntymistä villin tyypin sukkulamadoissa seurattiin erilaisten HydroZitLa-pitoisuuksien (20 %, 30 %, 40 % tilavuus/tilavuus) täydentämisen jälkeen 5 päivän ajan. Kontrollina käytettiin E. coli OP50--syötettyjä matoja. Intervention jälkeen madot pestiin M9-puskurilla useita kertoja ja asetettiin lasilevylle natriumatsidipisaraan. Fluoresoiva kuvantaminen suoritettiin ZEISS LSM 700 konfokaalimikroskoopilla. Kuvia analysoitiin edelleen käyttämällä Image J -ohjelmistoa, ja fluoresenssin intensiteetti esitettiin mielivaltaisina yksikköinä (AU)72.

Suhteellisen telomeeripituuden mittaus. Suhteellinen telomeeripituus (RTL) mitattiin HK-2-soluista, joita käsiteltiin H2O2:lla (25 µM), natriumoksalaatilla (NaOx, 900 µM) ja COM:lla (25 µg/cm2) joko HydroZitLa:n kanssa tai ilman sitä (10 % v. /v). RTL määritettiin reaaliaikaisella kvantitatiivisella polymeraasiketjureaktiolla (qPCR)73. Se lasketaan perustuen telomeeritoistojen kopiomäärän suhteeseen yksikopiogeenin (36B4-geenin) kopiomäärään, joka on verrannollinen keskimääräiseen telomeerien pituuteen. Käytetyt alukkeet olivat seuraavat: Telomeeri (eteenpäin) 5′-CGGTTTGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTT-3′, Telomeeri (käänteinen) 5′-GGC TTGCCTTACCCTTACCTACCCTTA{18CCTACCCT) CAAGTGGGAAGGTGT AATCC{{23 }}′ ja 36B4 (käänteinen) 5′-CCCATTCTATCATCAACGGGTACAA-3′. PCR monistettiin 95 asteessa 10 minuutin ajan, mitä seurasi 40 sykliä 95 astetta 15 s ja 54 astetta 1 min.

SA-galin ja p16:n kaksoisvärjäys.Peitelasiilla kasvatettuja HK{{0}}-soluja käsiteltiin H2O2:lla, NaOx:lla ja COM:lla 10 tilavuusprosentin HydroZitLa:lla ja ilman sitä 72 tunnin ajan SIPS:n indusoimiseksi. Käsittelyn jälkeen solut kiinnitettiin ja värjättiin juuri valmistetulla X-gal-liuoksella (Vivantis, Malesia) 12–16 tuntia, pestiin, läpäistiin 0,1-prosenttisella Triton X-100 -liuoksella (Amresco, TX, USA) 3 minuutin ajan. ja estettiin epäspesifisen sitoutumisen suhteen 1 prosentin normaalilla hevosen seerumilla (Gibco, MA, USA) 37 asteessa 1 tunnin ajan. Sitten soluja inkuboitiin 1:10,000 p16 primaarisen vasta-aineen (ab108349, Abcam) kanssa 4 asteessa yön yli, mitä seurasi 1:10,000 Alexa Fluor® 488-konjugoitu sekundaarinen vasta-aine ( Cell Signaling Technology) 37 asteessa 30 minuuttia. Värjätty peitinlasi kiinnitettiin Fluoroshield-asennusaineella, jossa oli 4′,6-diamidino-2-fenyyli-indoli (Abcam). SA- -gal-positiiviset vanhenevat solut (sininen) ja p16-ekspressoivat solut (vihreä) visualisoitiin ja kuvattiin käyttämällä EVOS FL Auto 2 -kuvausjärjestelmää (Thermo Fisher Scientific, MA, USA).

Tilastollinen analyysi.Kaikki tiedot esitettiin keskiarvona ± keskihajonta tai mediaani (neljännesten välinen alue), tarpeen mukaan. Kahden näytteen t-testi tai Mann-Whitney-testi suoritettiin kahden ryhmän välisen eron testaamiseksi. Kolmen tai useamman ryhmän välisen eron testaamiseen käytettiin yksisuuntaista varianssianalyysiä tai Kruskal–Wallis-testiä, jota seurasi moninkertainen vertailutesti. GraphPad Prism -ohjelmiston versiota 9 (GraphPad Software Inc., CA, USA) käytettiin laskennassa ja kaavioissa. P<0.05 was considered significant.

Viitteet

1. Michell, AR Virtsakivitauti – historialliset, vertailevat ja patofysiologiset näkökohdat: Katsaus. JR Soc. Med. 82, 669-672 (1989).

2. Shah, J. & Whitfield, HN Urolithiasis kautta aikojen. BJU Int. 89, 801-810 (2002).

3. Boonla, C. et ai. Monosyyttikemoattraktanttiproteiinin-1 ja interleukiinin-6 lähetti-RNA:n ilmentyminen kiviä sisältävissä munuaisissa. BJU Int. 101, 1170–1177 (2008).

4. Boonla, C. et ai. Fibroosi ja todisteet epiteeli-mesenkymaalisesta siirtymästä staghorn-kiviä sairastavien potilaiden munuaisissa. BJU Int. 108, 1336–1345 (2011).

5. Chuang, TF et ai. Kroonisen munuaissairauden riski potilailla, joilla on munuaiskiviä - valtakunnallinen kohorttitutkimus. BMC Nephrol. 21, 292 (2020).

6. Dhondup, T. et ai. ESRD:n ja kuolleisuuden riski munuaisten ja virtsarakon kivimuodostajissa. Olen. J. Kidney Dis. 72, 790–797 (2018).

7. Kum, F. et ai. Tappaavatko kivet edelleen? Analyysi kivitautikuolemista 1999–2013 Englannissa ja Walesissa. BJU Int. 118, 140–144 (2016).

8. Geraghty, RM, Cook, P., Walker, V. & Somani, BK Munuaiskivisairauden taloudellisen taakan arviointi Yhdistyneessä kuningaskunnassa: Retrospektiivinen kohorttitutkimus, jonka keskimääräinen seuranta on 19 vuotta. BJU Int. 125, 586–594 (2020).

9. C. Türk (puheenjohtaja), AN, A. Petrik, C. Seitz, A. Skolarikos (varapuheenjohtaja), K. Tomas & Guidelines Associates: NF Davis, JFD, R. Lombardo, N. Grivas, Y. Ruhayel. Euroopan urologialiiton (EAU) ohje virtsakivitautia varten.

10. Jendle-Bengten, C. & Tiselius, HG Pienellä natriumkaliumsitraattiannoksella käsiteltyjen kivenmuodostajien pitkäaikainen seuranta. Scand. J. Urol. Nephrol. 34, 36-41 (2000).

11. Schwille, PO, Herrmann, U., Wolf, C., Berger, I. & Meister, R. Sitraatti ja toistuva idiopaattinen kalsiumvirtsakivitauti. Pitkittäinen pilottitutkimus suun kautta annetun kaliumsitraatin metabolisista vaikutuksista miespuolisten kivipotilaiden lyhyt-, keskipitkän ja pitkän aikavälin lääkityksen aikana. Urol. Res. 20, 145-155 (1992).

12. Tracy, CR & Pearle, MS Päivitys kivitaudin lääketieteellisestä hoidosta. Curr. Opin. Urol. 19, 200–204 (2009).

13. Mechlin, C., Kalorin, C., Asplin, J. & White, M. Splenda(R) parantaa oraalisen kaliumsitraattilisän sietokykyä kiven muodostumisen estämiseksi: Satunnaistetun kaksoissokkotutkimuksen tulokset. J. Endourol. 25, 1541–1545 (2011).

14. Boonla, C. Oksidatiivinen stressi virtsakivitaudissa, reaktiiviset happilajit (ROS) elävissä soluissa, Cristiana Filip ja Elena Albu, IntechOpen.

15. Boonla, C., Wunsuwan, R., Tungsanga, K. & Tosukhowong, P. Virtsan 8-hydroksideoksiguanosiinipitoisuus on kohonnut potilailla, joilla on munuaiskivitauti. Urol. Res. 35, 185–191 (2007).

16. Khan, SR Hyperoksaluria-indusoitu oksidatiivinen stressi ja antioksidantit munuaisten suojaamiseen. Urol. Res. 33, 349–357 (2005).

17. Khan, SR Reaktiiviset happilajit kalsiumoksalaattimunuaiskivien muodostumisen molekyylimodulaattoreina: näyttöä kliinisistä ja kokeellisista tutkimuksista. J. Urol. 189, 803–811 (2013).

18. Kittikowit, W. et ai. Lisääntynyt oksidatiivinen DNA-vaurio, joka havaitaan munuaiskivitautipotilaiden viereisissä kivissä olevissa munuaisbiopsioissa. Urolithiasis 42, 387–394 (2014).

19. Yasui, T. et ai. Urolitiaasin patofysiologiaan perustuva hoito. Int. J. Urol. 24, 32–38 (2017).

20. Huang, HS, Ma, MC & Chen, J. Vähän E-vitamiinia sisältävä ruokavalio pahentaa kalsiumoksalaattikiteiden muodostumista lisääntyneen oksidatiivisen stressin kautta rotan hyperoksalurisessa munuaisissa. Olen. J. Physiol. Munuaiset. Physiol. 296, F34-45 (2009).

21. Huang, HS, Chen, J., Chen, CF & Ma, MC E-vitamiini heikentää kiteiden muodostumista rotan munuaisissa: Munuaisten tubulussolujen kuoleman ja kiteytymisen estäjien roolit. Kidney Int. 70, 699–710 (2006).

22. Tamilselvan, S. & Menon, M. E-vitamiinihoito estää hyperoksaluria-indusoidun kalsiumoksalaattikiteiden laskeuman munuaisissa parantamalla munuaiskudoksen antioksidanttitilannetta. BJU Int. 96, 117–126 (2005).

23. Tamilselvan, S. & Selvam, R. E-vitamiinin ja mannitolin vaikutus munuaisten kalsiumoksalaattiretentioon kokeellisessa munuaiskivitaudissa. Intialainen J. Biochem. Biophys. 34, 319-323 (1997).

24. Butterweck, V. & Khan, SR Kasviperäiset lääkkeet virtsakivitaudin hoidossa: Vaihtoehtoinen vai täydentävä? Planta Med. 75, 1095–1103 (2009).

25. Kasote, DM, Jagtap, SD, Tapa, D., Khyade, MS & Russell, WR Intiassa ja Kiinassa käytetyt yrttilääkkeet virtsakivien hoitoon: arvostelu. J. Ethnopharmacol. 203, 55–68 (2017).

26. Abu Zarin, M., Tan, JS, Murugan, P. & Ahmad, R. Erilaisten Musa-pseudovarren uutteiden mahdollisen virtsakivitaudin vastaisen aktiivisuuden tutkiminen kalsiumoksalaattikiteytymisen estämisessä. BMC Complement Med. Ter. 20, 317 (2020).

27. Kailash, P. & Varalakshmi, P. Banaanivarren mehun vaikutus normaalien ja hyperoksaluristen rottien maksan biokemiallisiin muutoksiin. Intialainen J. Exp. Biol. 30, 440-442 (1992).

28. Prasad, KV, Bharathi, K. & Srinivasan, KK. Musan (paratiisiaalinen Linn. cultivar) - "Puttubale" -varren mehun arviointi albiinorottien antilitian vaikutukselle. Indian J. Physiol. Pharmacol. 37, 337-341 (1993).

29. Panigrahi, PN, Dey, S., Sahoo, M. & Dan, A. Musa paradisiaca pseudostemin urolitiaa ja hapettumista estävä tehokkuus etyleeniglykolin aiheuttamassa munuaiskivitaudissa rotassa. Indian J. Pharmacol. 49, 77–83 (2017).

30. Poonguzhali, PK & Chegu, H. Te vaikutus banaanivarren uutteen virtsan riskitekijöitä kiviä normaaleissa ja hyperoxaluric rotilla. Br. J. Urol. 74, 23-25 (1994).

31. Pillai, RG Musan pseudostem-ydin virtsakivien hoidossa. Anc Sci Life. 15, 2-6 (1995).

32. Lordumrongkiat, N., Chotechuang, N., Madared, N., Jindatip, D. & Boonla, C. Lääkekasviperäisten juomien fenolien kokonaismäärä, flavonoidin kokonaismäärä ja antioksidanttikapasiteetti: HydroZitLa. Chula Med. J. 64, 381–388 (2020).

33. Sakhaee, K. Kivisairauksien farmakologia. Adv. Krooninen munuaishäiriö. 16, 30–38 (2009).

34. Baumann, JM & Afolter, B. Virtsan makromolekyylien paradoksaalinen rooli kalsiumoksalaatin aggregaatiossa: Toinen kanneperuste diureesin lisäämiseksi kiven metafylaksissa. Urolithiasis 44, 311–317 (2016).

35. Reddy, AJ et ai. Musa sapientum -varsiuutteen kouristuksia estävät ja antioksidanttiset vaikutukset epilepsian akuuteissa ja kroonisissa kokeellisissa malleissa. Pharmacogn. Res. 10, 49–54 (2018).

36. Jaafar, NF, Ramli, ME & Mohd Salleh, R. Optimaaliset uuttoolosuhteet Clitorea ternatea fower antioksidanttiaktiivisuus, kokonaisfenolipitoisuus, kokonaisflavonoidi ja antosyaanien kokonaispitoisuus. Trop. Life Sci. Res. 31, 1–17 (2020).

37. Nirmal, NP, Rajput, MS, Prasad, RG & Ahmad, M. Brazilin Caesalpinia sappan heartwoodista ja sen farmakologiset toiminnot: Katsaus. Aasian Pac. J. Trop. Med. 8, 421–430 (2015).

38. More-Krong, P. et ai. Virtsan indolireagoineen kalsiumoksalaattikiteytysindeksin (iCOCI) kliininen validointi kalsiumoksalaattivirtsakivitaudin diagnosoimiseksi. Sci. Rep. 10, 8334 (2020).

39. Yasui, T. et ai. Sitraatin vaikutukset munuaiskivien muodostumiseen ja osteopontiinin ilmentymiseen rotan virtsakivitautimallissa. Urol. Res. 29, 50–56 (2001).

40. Ghaeni, FA, Amin, B., Hariri, AT, Meybodi, NT & Hosseinzadeh, H. Antilithiatic vaikutukset crocin on etyleeniglykolin aiheuttama litiaasi rotilla. Urolithiasis 42, 549–558 (2014).

41. Holmes, RP & Assimos, DG Glyoksylaattisynteesi ja sen modulaatio ja vaikutus oksalaattisynteesiin. J. Urol. 160, 1617-1624 (1998).

42. Patankar, S., Fanthome, B. & Bhalerao, SS Herbed plus tehokkuus urolithic rotissa: kokeellinen tutkimus. J. Ayurveda Integr. Med. 11, 250–255 (2020).

43. Chaiyarit, S. & Tongboonkerd, V. Mitokondrioiden toimintahäiriö ja munuaiskivitauti. Front Physiol. 11, 566506 (2020).

cistanche portugal

44. Holoch, PA & Tracy, CR Antioksidantit ja itse ilmoittama munuaiskivien historia: National Health and Nutrition Examination Survey. J. Endourol. 25, 1903–1908 (2011).

45. Khan, SR Onko oksidatiivinen stressi, yhteys munuaiskivitaudin ja liikalihavuuden, verenpainetaudin, diabeteksen, kroonisen munuaissairauden, metabolisen oireyhtymän välillä? Urol. Res. 40, 95–112 (2012).

46. Hirose, M. et ai. Munuaisten tubulaaristen epiteelisolujen vaurio ja oksidatiivinen stressi aiheuttavat kalsiumoksalaattikiteiden muodostumista hiiren munuaisissa. Int. J. Urol. 17, 83–92 (2010).

47. Khan, SR Reaktiiviset happilajit, tulehdus ja kalsiumoksalaattinefrolitiaasi. Käännös Androl. Urol. 3, 256–276 (2014).

48. Boonla, C. et ai. Tulehdukselliset ja fibroottiset proteiinit, jotka on tunnistettu tärkeimmiksi proteiiniaineosiksi munuaiskivistä kärsivien potilaiden virtsassa ja kivimatriisissa. Clin. Chim. Acta 429, 81–89 (2014).

49. Aggarwal, D., Gautam, D., Sharma, M. & Singla, SK Bergenin heikentää munuaisvaurioita kääntämällä mitokondrioiden toimintahäiriöitä etyleeniglykolin aiheuttamassa hyperoksalurirottamallissa. euroa J. Pharmacol. 791, 611–621 (2016).

50. Ghodasara, J., Pawar, A., Deshmukh, C. & Kuchekar, B. Rutiinin ja kurkumiinin estävä vaikutus kokeellisesti aiheutettuun kalsiumoksalaattivirtsakivitautiin rotilla. Pharmacogn. Res. 2, 388–392 (2010).

51. Grases, F. et ai. Rypäleen siemenistä peräisin olevien polyfenolien vaikutukset munuaisten litiaasiin. Oksid. Med. Cell. Longev. 2015, 813737 (2015).

52. Cherniack, EP Kasvipolyfenolien mahdollinen vaikutus ikääntymisprosessiin. Forsch Komplementmed. 17, 181–187 (2010).

53. Wood, JG et ai. Sirtuiiniaktivaattorit jäljittelevät kalorirajoitusta ja viivästävät metazoan ikääntymistä. Nature 430, 686–689 (2004).

54. Bonkowski, MS & Sinclair, DA Suunniteltu ikääntymisen hidastaminen: NAD(plus) ja sirtuiinia aktivoivien yhdisteiden nousu. Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 17, 679–690 (2016).

55. Bhullar, KS & Hubbard, BP Elinajan ja terveyden pidennys resveratrolin avulla. Biochim. Biophys. Acta. 1852, 1209–1218 (2015).

56. von Frieling, J. & Roeder, T. Tekijät, jotka vaikuttavat ruokavalion rajoitusten muuttamiseen pidemmäksi elämäksi. IUBMB Life 72, 814–824 (2020).

57. von Zglinicki, T. Oksidatiivinen stressi lyhentää telomeerejä. Trends Biochem Sci. 27, 339–344 (2002).

58. Chuenwisad, K. et ai. Oksalaattien, kalsiumoksalaattimonohydraatin ja virtsan oksidatiivisen stressin aiheuttama ennenaikainen vanheneminen ja telomeerien lyheneminen potilailta, joilla on kalsiumoksalaattinefrolitoosi. Edessä. Immunol. 12, 696486 (2021).

59. Hu, Z. et ai. Yrttien ja lääkkeiden vuorovaikutukset: kirjallisuuskatsaus. Drugs 65, 1239-1282 (2005).

60. Susanti, S. & Imannura, P. Secang Wood (Ceasalpinia Sappan L.) -uutteen vaikutus siittiöiden morfologiaan ja palautuvaan prosessiin urosrotilla. Meneillään Te 2nd Joint International Conferences. ISBN: 978-602-5842-03-0 (2018).

61. Kim, BS et ai. Caesalpinia sappan indusoi apoptoottista solukuolemaa ektooppisissa kohdun limakalvon 12Z-soluissa estämällä pyruvaattidehydrogenaasikinaasi 1:n ilmentymistä. Exp. Ter. Med. 21, 357 (2021).

62. Boonla, C., Youngjermchan, P., Pumpaisanchai, S., Tungsanga, K. & Tosukhowong, P. Munuaiskivispotilaiden virtsasta ja kivistä uutettujen lipidien litogeeninen aktiivisuus ja kliininen merkitys. Urol. Res. 39, 9–19 (2011).

63. Kloypan, C., Srisa-art, M., Mutirangura, A. & Boonla, C. LINE-1 reaktiivisten happilajien indusoima hypometylaatio välittyy S-adenosyylimetioniinin ehtymisen kautta. Cell Biochem. Toiminto. 33, 375–385 (2015).

64. Whongsiri, P., Phoyen, S. & Boonla, C. Oksidatiivinen stressi uroteliaalisessa karsinogeneesissä: Proteiinien karbonylaation ja reaktiivisten happilajien solunsisäisen tuotannon mittaukset. Menetelmät Mol. Biol. 1655, 109–117 (2018).

65. Whongsiri, P. et ai. Oksidatiivinen stressi ja LINE-1-uudelleenaktivaatio virtsarakon syövissä liittyvät epigeneettisesti aktiivisen kromatiinin muodostuksen kautta. Vapaa Radic. Biol. Med. 134, 419–428 (2019).

66. Whongsiri, P. et ai. LINE-1 ORF1-proteiinia säätelevät reaktiiviset happilajit, ja se liittyy virtsarakon uroteelisyövän etenemiseen. Cancer Genom. Proteom. 15, 143–151 (2018).

67. Reagan-Shaw, S., Nihal, M. & Ahmad, N. Annosmuunnos eläimestä ihmisiin tarkasteltu uudelleen. FASEB J. 22, 659–661 (2008).

68. Yasue, T. Kalsiumoksalaatin histokemiallinen tunnistus. Acta Histochem. Cytochem. 2, 83-95 (1969).

69. Evan, AP et ai. Randallin plakki munuaiskivitautia sairastavilla potilailla alkaa Henlen ohuiden silmukoiden tyvikalvoista. J. Clin. Sijoittaa. 111, 607–616 (2003).

70. Prasanth, MI, Santoshram, GS, Bhaskar, JP & Balamurugan, K. Ultravioletti-A laukaisee valovanhenemisen mallisukkulamadotissa Caenorhabditis elegans DAF-16-riippuvaisessa reitissä. Ikä (Dordr) 38, 27 (2016).

71. Brimson, JM, Prasanth, MI, Plaingam, W. & Tencomnao, T. Bacopa monnieri (L.) wettst. Uute suojaa glutamaattimyrkyllisyydeltä ja pidentää Caenorhabditis elegansin pitkäikäisyyttä. J. Tradit. Monimutkainen. Med. 10, 460–470 (2020).

72. Prasanth, MI, Brimson, JM, Chuchawankul, S., Sukprasansap, M. & Tencomnao, T. Cleistocalyx nervosum var. ihmelääkehedelmäuutteet Caenorhabditis elegans -mallilla. Oksid. Med. Cell. Longev. 2019, 7024785 (2019).

73. Cawthon, RM Telomeerimittaus kvantitatiivisella PCR:llä. Nucleic Acids Res. 30, e47 (2002).

Kiitokset

Tutkimusta tukivat taloudellisesti tiede- ja teknologiaministeriön Research Gap Fund, National Science and Technology Development Agency (NSTDA) ja Chulalongkorn University (GB-rgf_60_2905_0003 to CB) sekä Thaimaan tiedetutkimus ja tutkimuslaitos. Innovation, Industry Division (RDG6150088 to CB) ja lääketieteellinen tiedekunta, Chulalongkorn University (Matching Fund). NL sai Chulalongkorn University Fundin (Ratchadaphiseksomphot Endowment Fund) 90. vuosipäivän. Kirjoittajat kiittävät Chulalongkornin yliopiston teknologiakeskuksen ja Thaimaan tiedetutkimus- ja innovaatiorahaston (TSRI) (CU_FRB640001_01_2) tarjoamasta tutkimus- ja innovaatiotuesta. Kiitos neiti Natcha Madaredille erinomaisesta avusta. Ole kiitollinen Chulalongkornin yliopiston lääketieteellisen tiedekunnan eläinosaston henkilökunnalle. Kiitos apulaisprofessori tohtori Sitthichai Ukritchonille ja professori tohtori Manathip Osirille heidän tuestaan polarisoidun mikroskopian käytölle.

Tekijän panokset

NL: Suoritettu solu- ja rottokokeita ja kerätty tietoja. NC: Keräsi tietoa ja auttoi suunnittelemaan tutkimusideaa ja data-analyysiä. MP: Suunnitteli ja suoritti C. elegans -kokeen ja suoritti C. elegans -dataanalyysin. DJ: Auttoi immunohistokemian kokeissa ja kuvantamisessa. CM: Auttoi kudosleikkauksessa. KC: Suoritettu telomeerien lyhentymis- ja vanhenemiskokeita. AL: Onnistui pääsemään eläintiloihin rottakokeeseen. TT: Auttoi luomaan ja suunnittelemaan C. elegans -kokeilua. CB: Suunnitteli ja suunnitteli tutkimuksen, suoritti tilastollisen analyysin ja kirjoitti käsikirjoituksen. Kaikki kirjoittajat arvostelivat käsikirjoituksen.

Kilpailevat kiinnostuksen kohteet

CB, NC ja NL ovat HydroZitLan keksijät. Chulalongkorn University ja keksijät omistavat HydroZitLan immateriaalioikeudet. Yhdelläkään muulla kirjoittajalla ei ole eturistiriitaa tämän työn suhteen.