Flavonoidit lupaavina antiviraalisina aineina SARS-CoV-infektiota vastaan-2: mekaaninen katsaus

Lisätietoja: ottaa yhteyttätina.xiang@wecistanche.com

Abstrakti: Äskettäin diagnosoitu koronavirus vuonna 2019 (COVID-19) on vaikuttanut kaikkeen ihmisen toimintaan sen löytämisen jälkeen.FlavonoiditYleisesti ihmisten ruokavaliossa esiintyvät ovat herättäneet paljon huomiota merkittävien biologisten toimintojensa vuoksi. Tämä artikkeli sisältää kattavan katsauksen flavonoidien hyödyistä COVID{0}}-taudissa. Aiemmin raportoidut flavonoidien vaikutukset viiteen RNA-virukseen, joilla on samanlaiset kliiniset ilmenemismuodot ja/tai farmakologiset hoidot, mukaan lukien influenssa, ihmisen immuunikatovirus (HIV), vaikea akuutti hengitystieoireyhtymä (SARS), Lähi-idän hengitystieoireyhtymä (MERS) ja Ebola. harkittu. Flavonoidit vaikuttavat suoraanantiviraalinenominaisuuksia, joissa ne estävät viruksen tartuntasyklin eri vaiheita ja epäsuoria vaikutuksia, kun ne moduloivat isännän vasteita virusinfektioon ja sitä seuraaviin komplikaatioihin. Flavonoidit ovat osoittaneet antiviraalista aktiivisuutta estämällä virusproteaasia, RNA-polymeraasia, mRNA:ta, viruksen replikaatiota ja tarttuvuutta. Yhdisteet olivat tehokkaita myös interferonien, tulehdusta edistävien sytokiinien ja subsellulaaristen tulehdusreittien, kuten ydintekijä-kB:n ja Jun-N-terminaalisten kinaasien säätelyssä. Baicalin,kversetiini, ja sen johdannaiset, hesperidiini ja katekiinit ovat tutkituimpia flavonoideja tässä suhteessa. Yhteenvetona voidaan todeta, että ravinnon flavonoidit ovat lupaavia hoitovaihtoehtoja COVID{0}}-infektiota vastaan. tulevia tutkimuksia suositellaan kuitenkin näiden yhdisteiden antiviraalisten ominaisuuksien arvioimiseksi tähän sairauteen.

Avainsanat: tulehdus;keuhkot; oksidatiiviset vauriot; antiviraalinen; polyfenoli

Napsauta tätä saadaksesi lisätietoja tuotteista

1. Esittely

Vuoden 2019 loppuun mennessä Kiinasta ilmoitettiin epätavallinen keuhkokuume, joka diagnosoitiin edelleen uudeksi koronavirukseksi (CoV), joka aiheuttaa vakavaa akuuttia hengitystieoireyhtymää (SARS) ja jota kutsuttiin COVID-19[1,2]. Myöhemmin virus (SARS-CoV{5}}) levisi muihin maihin, ja WHO julisti sen pandemiaksi 11. maaliskuuta 2020 [3]. Thevirustarttuu enimmäkseen hengityspisaroiden välityksellä, ja vaikeusaste vaihtelee lievistä vakaviin tappaviin oireisiin. Itämisajan oireettomien tapausten uskotaan olevan tärkeä tartuntalähde [4]. Useimmissa tapauksissa lievien oireiden häviäminen kestää 1-2 viikkoa, kun taas vakavat tapaukset voivat johtaa kuolemaan [5].

SARS-CoV-2 vaikuttaa hengityselimiin aiheuttaen kuumetta ja kuivaa yskää [4]; virus voi kuitenkin aiheuttaa elinten vajaatoimintaa, pääasiassa sydämessä ja munuaisissa, sekä sytokiinimyrskyjä, jotka lisäävät kuolleisuutta entisestään. SARS-CoV-2-viruksen elinkaari sisältää

kiinnittyminen, tunkeutuminen, biosynteesi, kypsyminen ja vapautuminen. Kiinnittymisen jälkeen viruksen RNA saapuu solun tumaan replikaatiota varten, ja viruksen mRNA alkaa tuottaa viruksen rakenneproteiineja, mukaan lukien piikki (S), kalvo (M), vaippa (E) ja nukleokapsidi (N) proteiinit [6]. Angiotensiinia konvertoivan entsyymin 2(ACE2)-reseptorin, joka ilmentyy voimakkaasti keuhkoissa, on myös osoitettu toimivan SARS-CoV:n apureseptorina [7].

SARS, MERS ja SARS-CoV-2 ovat kaikki RNA CoV:ita. SARS-CoV-2-genomi on 88-prosenttisesti identtinen lepakosta peräisin olevien vakavien akuuttien hengitystieoireyhtymien (SARS) kaltaisten CoV-sairauksien kanssa, 79-prosenttisesti samanlainen kuin SARS-CoV-virus ja 50-prosenttisesti samanlainen kuin MERS-CoV [8,9]. SARS-CoV-2-proteiinit ovat 90-prosenttisesti -100-prosenttisesti homologisia SARS-CoV:n kanssa; orf10 ja orf8 ovat kuitenkin erilaisia ​​SARS-CoV-2:n ja SARS-CoV:n välillä. Orf8 on CoV-viruksen apuproteiini. Se muodostaa kuusijuosteisen alfaheliksiproteiinin, joka tehostaa viruksen leviämiskykyä. SARS-CoV-2 orfla/b, piikki, vaippa, kalvo ja nukleoproteiini ovat myös läheistä sukua SARS-CoV:n vastaaville [10]. .

Koska SARS-CoV-2 -virusta vastaan ​​ei ole olemassa spesifistä viruslääkettä, tällä hetkellä saatavilla olevia viruslääkkeitä harkitaan COVID-taudin-19 hoidossa. Remdesivir on uusi viruslääke, joka esiteltiin erityisesti Ebola-viruksen varalta vuonna 2015. Sillä on estävä vaikutus viruksen RNA-polymeraasia, ja sitä on äskettäin käytetty joissakin COVID{4}}-hoitokokeissa [11]. Favipiraviirilla on influenssaa ja Ebola-virusta estävä vaikutus samalla mekanismilla, ja se on myös arvioitu SARS-CoV:ssa-2 [12-14]. Lopinaviiri on viruksen proteaasin estäjä, ja se kehitettiin alun perin HV:n hoitoon. In vitro -tutkimukset osoittivat lopinaviirin estävän vaikutuksen CoV-infektoituneissa soluissa [15,16]; Systemaattiset tarkastelut eivät kuitenkaan osoittaneet mitään myönteistä vaikutusta SARS-CoV:hen-2 [17].

Lääkekasvit ovat olleet luontaisten lääkkeiden, myös viruslääkkeiden, luotettava lähde muinaisista ajoista lähtien. Eri maiden perinteinen lääketiede ja etnofarmakologiset tutkimukset eri puolilla maailmaa ovat aina avanneet uusia tapoja lääkekehitykseen [18-22]. Oseltamiviiri, joka on tavanomainen viruslääke, on johdannainen shikimiinihaposta, tähtaniksen (Illicium verum Hook.f.) sekundaarisesta metaboliitista. SARS-CoV-2:n tapauksessa in silico -tutkimukset ovat paljastaneet kasviperäisten ainesosien mahdolliset antiviraaliset ominaisuudet [23-25]. Flavonoidit ovat suuri joukko fytokemikaaleja, joita esiintyy yleisesti useissa ihmisen ruokavaliossa olevissa elintarvikkeissa ja vihanneksissa ja joilla on lukuisia arvokkaita farmakologisia vaikutuksia, mukaan lukien antiviraaliset ominaisuudet. On osoitettu, että nämä yhdisteet voivat estää viruksen patogeneesiä kohdentamalla viruksen elinkaaren olennaisia ​​vaiheita [26]. Kvertsetiini, katekiinit, kaempferoli ja baicaleiini ovat esimerkkejä tärkeimmistä flavonoideista, joilla on antiviraalisia ominaisuuksia [18, 27, 28]. Tämän tutkimuksen tarkoituksena on keskustella saatavilla olevista antiviraalisista todisteista flavonoideista mahdollisena SARS-CoV-hoitona-2 ottaen huomioon näiden yhdisteiden aiemmin raportoidut vaikutukset viiteen RNA-virukseen, joilla on samanlaiset kliiniset ilmenemismuodot ja/tai farmakologiset hoidot, mukaan lukien influenssa, ihmisen immuunikatovirus (HIV), vakava akuutti hengitystieoireyhtymä (SARS), Lähi-idän hengitystieoireyhtymä (MERS) ja Ebola.

2. Tulokset

Antiviraalinen aktiivisuusFlavonoidit voidaan luokitella suoriin antiviraalisiin vaikutuksiin, joissa flavonoidi vaikuttaa suoraan virukseen, ja epäsuoriin vaikutuksiin, joissa flavonoidi parantaa isännän puolustusmekanismeja virusinfektiota vastaan. Tässä käsitellään flavonoidien taustalla olevia antiviraalisia mekanismeja viitaten tärkeimpiin flavonoideihin, jotka osoittavat näitä mekanismeja.

2.1.Suora virustorjuntamekanismi

2.1.1. Virusproteaasin esto

Viruksen proteaaseja käytetään viruksen polyproteiiniprekursorien pilkkomiseen tietyistä kohdista toiminnallisten proteiinien vapauttamiseksi. Spesifisten virusproteaasien on myös osoitettu pilkkovan isäntäsoluproteiineja, mukaan lukien translaation aloitustekijät (eF4 ja elF3d) HIV:ssä isäntäproteiinin translaation estämiseksi [29,30]. Koronavirukset tuottavat kolmen tyyppisiä virusproteaaseja, mukaan lukien 3-kymotrypsiinin kaltainen kysteiini (3CLpro), papaiinin kaltainen proteaasi (PLpro) ja pääproteaasi (M pro)[31].3CLpro on tärkeä SARS-CoV:n elämälle. PLpro osallistuu SARS-CoV-2-replikaatioon, ja Mopar vastaa SARS-CoV-2:n toiminnallisten proteiinien kypsymisestä [32,33]. Tämän seurauksena nämä molekyylit ovat sopivia lääkekohteita antiviraalisessa tutkimuksessa ja lääkekehityksessä [34].

Kaempferoli, joka on runsas flavonoidi useissa elintarvikkeissa, alensi CPE:tä Vero E6 -soluissa, jotka oli infektoitu SARS-CoV-2 kliinisillä isolaateilla, noin 88 prosentin estolla pitoisuudella 125 µM. Yhdistetty in silico -tutkimus viittaa SARS-CoV-2 3CLpro-entsyymin estoon olevan tärkein vaikutusmekanismi [35]. Kaempferolin lisääminen E. colissa ilmennetyn SARS-CoV:n ja MERS-CoV:n 3CLpro- ja PLpro-proteiiniin aiheutti antiviraalisia vaikutuksia estämällä näitä entsyymejä [36]. Park ja työtoverit (2017) osoittivat, että hydroksyyliryhmän läsnäolo kaempferolissa aiheuttaa tehokkaamman antiviraalisen vaikutuksen estämällä 3CLpro:n ja PLpron [37]. Epigallokatekiinigallaatti (EGCG) on teestä (Camellia sinensis L.) löytyvä flavonoidi, jolla on antifungaalisia, antibakteerisia ja virustenvastaisia ​​ominaisuuksia [38.39]. Tutkimukset osoittivat, että EGCG estää käänteiskopioijaentsyymin (RT) aktiivisuutta, proteaasiaktiivisuutta, p24:ää, viruksen sisäänpääsyä ja viruksen tuotantoa THP-1- ja H9-soluissa, jotka ovat infektoituneet HIV-1, ja EGCG:n liposomimodifikaatio voimistaa sen estokykyä. tehosteita. Soluttomat tutkimukset osoittivat myös proteaasikinetiikan merkittävää laskusäätelyä EGCG-hoidon jälkeen. EGCG:n galloyyliryhmän katsotaan olevan vastuussa sen antibakteerisista ja antiviraalisista vaikutuksista [40]. Isolikiviritigeniiniä, kalkonia, voidaan käyttää terapeuttisena aineena bakteeri- ja virusinfektioissa [41]. Tämä yhdiste on osoittanut estävän vaikutuksen SARS-CoV:hen sekä E. colissa ilmentyviin MERS-CoV 3CLpro:hin ja PLpro:hin. Funktionaalisen prenyyliryhmän läsnäolo resorsinolirenkaassa mahdollistaa hydrofobisten vuorovaikutusten muodostumisen proteaasien kanssa [37]. Theaflaviinit ovat polyfenoleja, joita löytyy erilaisista teetyypeistä [42]. Kokeet SARS-CoV-rekombinanttiproteaasilla osoittivat merkittävän 3CLpro-aktiivisuuden vähenemisen teaflaviini-3,3'-digallaatilla IC50-arvon ollessa 9,5 uM. Joissakin theaflaviineissa 3'-kohtaan kiinnittynyt gallaattiryhmä saattaa olla välttämätön vuorovaikutuksessa 3CL:n proaktiivisen kohdan kanssa [43]. Erythrina senegalensis DC:stä uutetut prenylisoflavonoidit. käytettiin arvioimaan anti-proteaasiaktiivisuutta rekombinantti-HIV{41}}-proteaasia vastaan. Tulokset osoittivat, että yhdisteet saattoivat estää HIV-1-rekombinanttiproteaasia in vitro 0,5-30 µMIC50-arvoilla. Hydroksi- ja prenyyliryhmät saattavat olla vastuussa HIV-proteaasin estämisestä [44]. Kversetiini ja kversetiini- -galaktosidi heikensivät PLpro-, 3CLpro-, deubikvitinaatio- ja DelSGylaatio-aktiivisuutta SARS-CoV-, MERS-CoV- ja HIV:ssä-1. Hydroksyyliryhmien sijainti saattaa olla tehokas antiproteaasiaktiivisuudessa. Kversetiinillä, jossa oli viisi hydroksyyliryhmää 3-, 5-, 7,3'- ja 4'-asemissa, oli voimakas virusproteaaseja estävä vaikutus; kun taas glykosyyliryhmän läsnäolo asemissa 3,7A' vähensi estävää vaikutusta [37,45].

2.1.2. Viruksen RNA-polymeraasin ja viruksen mRNA:n esto

RNA-riippuvainen RNA-polymeraasi (RdRp) on tärkeä entsyymi, joka katalysoi RNA:n replikaatiota RNA-sekvenssistä [46]. Tätä entsyymiä koodaavat kaikki RNA-virukset, samoin kuin jotkut eukaryootit [47]. Virukset ovat pakollisia solunsisäisiä loisia, eli ne eivät voi itsenäisesti selviytyä soluista. Heidän on käytettävä solujen translaatiolaitteistoa mRNA:iden kääntämiseen proteiinien tuotantoa varten, jota tarvitaan replikaatioon. Siten mikä tahansa häiriö mRNA:n translaatioon estäisi viruksen replikaatiota, leviämistä ja evoluutiota [48].

Zandi et al.:n tuore tutkimus. paljasti baikaliinin ja bicaleiinin in vitro antiviraalisen vaikutuksen SARS-CoV-2-infektiota vastaan ​​Vero CCL-81 -solulinjassa RdRp:n estämisen kautta, baicaleiinin tehokkaammalla teholla. Edelleen in silico -arvioinnit osoittivat, että näillä kahdella yhdisteellä on suurempi affiniteetti RdRp:hen verrattuna uudelleenjakeluun: Baikaliinin ja baikaleiinin kiinnityskohta näyttää myös olevan erilainen kuin remdesivirin kiinnityskohta; näin ollen näitä flavonoideja voidaan käyttää adjuvanttihoitona yhdessä remdesivirin kanssa [49]. Kversetiini-7-O-glukosidin (Q7G) vaikutukset arvioitiin in vitro -tutkimuksessa MDCK-soluilla, jotka oli infektoitunut influenssaviruksilla A ja B, verrattuna tavanomaiseen antiviraaliseen aineeseen oseltamiviiriin. Oseltamiviiria käytettiin kontrolloituna lääkkeenä, ja se osoitti kohtalaista antiviraalista aktiivisuutta IC50-arvoilla 25,4-42,2 ug/ml; kun taas Q7G esti influenssa A- ja B-virusta IC50-arvoilla 3,10 ug/ml - 8,19 ug/ml. Oseltamiviiri osoitti myös heikompaa aktiivisuutta influenssa B:tä vastaan ​​kuin influenssa A; kun taas Q7G osoitti voimakasta aktiivisuutta kaikkia influenssaviruksia vastaan. Lisäksi kvantitatiiviset PCR-määritykset raportoivat suuremman heikkenemisen viruksen RNA-synteesissä Q7G-hoidon jälkeen verrattuna oseltamiviiriin, mikä osoittaa Q7G:n estävän vaikutuksen viruksen RNA-polymeraasia. Molekyylitelakointianalyysi paljasti tämän vuorovaikutuksen johtuvan Q7G:n kiinnittymisestä viruksen RNA-polymeraasin PB2-alayksikköön [50].

Oroksiliini A(OA) on flavonoidi, jota löytyy Oroxylum Indicum(L.)Kurzista. On osoitettu, että OA voi inhiboida useita influenssa A -kantoja MDCK-soluissa annoksesta riippuvalla tavalla. Influenssaviruksella H1N1 ja OA:lla infektoituneiden hiirten oraalinen hoito vähensi myös viruksen aiheuttamaa kuolemaa, painon laskua ja keuhkovaurioita, ja eloonjäämisaste oli 60,0 prosenttia 100 mg/kg:n päiväannoksella. OA:n antiviraalisten vaikutusten kerrottiin johtuvan H1N1-matriisi1(M1)mRNA-transkription ja proteiinisynteesin heikkenemisestä (julkaisussa et al. 2018). M1-proteiini on viruksen vaipan sisällä oleva proteiini, joka sitoutuu viruksen RNA:han ja voi välittää RNA:n nukleoproteiiniytimien kapseloitumista kalvon vaippaan [51]. Vaikka OA voisi estää proteiinisynteesiä, se ei voinut estää viruksen pääsyä isäntäsoluun tai nukleoproteiinin (NP) pääsyä isäntäsolun tumaan [52]. Baikaliini ja biokaniini A voivat estää influenssa H5N1 -infektiota A549-soluissa IC50-arvoilla 18,79 ja 8,92 µM. Tätä vaikutusta välitti tumaviruksen ribonukleoproteiinin (RNP) viennin estäminen [53]. Muut tutkimukset ovat myös osoittaneet, että baikaliini voi vähentää influenssan M1-proteiinin ilmentymistä [54,55].

Isäntä-cdc{0}}kuten kinaasi 1 (CLK1) on avainrooli H1N1-influenssaviruksen M2-geenin silmukoitumisessa ja se on tärkeä influenssan vastainen kohde. M2 on protonikanava influenssa A -viruksen viruskuoressa [56,57]. Osoitettiin, että Pithecellobium clypeariasta eristetty gallokatekiini-7-gallaatti on isäntä-cdc2-kuten kinaasi 1:n (CLK1) estäjä, joka on influenssan vastainen kohde johtuen sen roolista viruksen M2-mRNA:n vaihtoehtoisessa silmukoitumisessa. Tutkimukset gallokatekiini-7-gallaatin vaikutuksesta vuorokausiannoksella 30 mg/kg H1N1-viruksella infektoituneilla ICR-hiirillä osoittivat merkittävästi korkeamman eloonjäämisajan 8 päivään asti. Se esti myös viruksen aiheuttamaa akuuttia keuhkovauriota ja painonpudotusta. Lisäksi arvioinnit H1N1-infektoituneista A549-soluista osoittivat viruksen NP- ja M2-mRNA:iden merkittävän heikkenemisen. Lisäksi silmukointitekijöiden SF2/ASF ja SC35, jotka ovat viruksen M2-geenin vaihtoehtoisen silmukoinnin avaintekijät, fosforylaatio väheni merkittävästi gallokatekiini{29}}gallaatilla [58] tehdyn hoidon jälkeen. Cirsimariini (CST), flavonoidi Artemisia scoparia Waldstista. ja Kitam arvioitiin koskien sen in vitro antiviraalisia vaikutuksia MDCK- ja THP-1-soluihin, jotka oli infektoitu kolmella influenssaviruskannalla, joiden IC50-arvot vaihtelivat välillä 5,8-11,1 ug/ml, kun taas ribaviriinin arvot olivat 3,4-8,9 ug/ml. Tiedot osoittivat, että CST pystyi tehokkaasti vähentämään influenssa M2:n ja proteiinien ilmentymistä annoksesta riippuvaisella tavalla siten, että CST:n teho pitoisuudella 20 ug/ml oli suurempi kuin 10 uM standardin antiviraalista ribaviriinia [59]. Luteoliini on toinen flavonoidi, jolla on estävä vaikutus M2mRNA:n ilmentymiseen. Eri influenssakannoilla infektoiduissa MDCK-soluissa 15 µM luteoliinia oli tehokkaampi kuin 10 µM oseltamiviiria sekä H1N1- että H2N3-infektoituneissa soluissa. Luteoliini vähensi myös influenssaviruksen vaippaproteiini I:n (COPI) ilmentymistä välittäen viruksen sisäänpääsyä ja endosyyttireittiä infektoiduissa soluissa [60]. Santin on flavonoidi, joka on uutettu Artemisia rupestris L.:stä, jolla myös ehdotettiin olevan influenssaviruksen vastaisia ​​vaikutuksia M2-mRNA:n ilmentymisen vaimentamisen kautta annoksesta riippuvaisella tavalla [61].

Osoitettiin, että kversetiini voisi olla todennäköinen terapeuttinen aine influenssainfektiota vastaan ​​infektion alkuvaiheessa, jotta sitä voidaan käyttää influenssaviruksen ennaltaehkäisyyn. Tutkimukset kversetiinin vaikutuksista influenssaviruksen A-kannoilla infektoituihin MDCK- ja A549-soluihin paljastivat, että se kykeni inhiboimaan viruksen NP-mRNA:ta annoksesta riippuvalla tavalla, ja sen aktiivisuus on suurin 50 µM pitoisuudella 【62】.

Tutkimukset ovat osoittaneet, että trisiinillä (4'5,7-trihydroksi-3',5'-dimetoksiflavonilla) on antiviraalista aktiivisuutta influenssa A- ja B-kantoja vastaan. RT-PCR-testit osoittivat, että trikiini voi suppressoida M-proteiinin mRNA-synteesiä MDCK-soluissa, jotka ovat infektoituneet influenssaviruksella; joilla ei ole merkittäviä vaikutuksia neuraminidaasin ja hemagglutiniinin biosynteesiin. Trisiinin 50 prosentin tehokas pitoisuus, joka voisi estää viruksen mRNA-synteesiä, oli 3.4-10 uM

influenssa A -viruskannoille ja 4,9 μM influenssa B -virukselle. Influenssaviruksella infektoituneilla hiirillä trisiini annoksella 20 ug/kg paransi kehon painon laskua ja eloonjäämisaikaa [63].

2.1.3. Viruksen sisäänpääsy, replikaatio ja tarttuvuus

RNA-virukset koodaavat proteiineja hyödyntäen isäntäsolukoneistoa elinkaarensa aikana. Näiden isäntäsolujen tarpeiden ymmärtäminen ei ainoastaan ​​kerro meille viruksen käyttämistä molekyylireiteistä, vaan se tarjoaa myös lisäkohteita lääkekehityksessä [64].

In vitro -tutkimuksessa arvioitiin kversetiinin ja isorhamnetiinin vaikutusta SARS-CoV-{1}}päättymiseen ACE2h-soluihin. Keuhkosoluissa ilmentyvä ACE2 on viruksen piikkiproteiinin rinnakkaisreseptori ja siten SARS-CoV-vastaisten antiviraalisten aineiden pääkohde-2. Havaittiin, että näillä kahdella flavonoidilla on korkea sitoutumisaffiniteetti ACE2:een ja ne vähentävät myöhemmin viruksen sisäänpääsyä estämällä piikkiproteiinin kiinnittymistä tähän reseptoriin [65]. Toisessa tutkimuksessa arvioitiin baicaleiinin vaikutusta SARS-CoV{11}}-infektioon Vero E6 -soluissa ja siirtogeenisissä hACE2-hiirissä. Merkittävä väheneminen havaittiin in vitro ja in vivo viruksen replikaatiossa sekä ruumiinpainon laskussa ja keuhkovaurioissa eläimillä [66]. Dihydroksi-6'-metoksi-3',5'-dimetyylikalkoni ja myrisetiini-3'5'-dimetyylieetteri 3-O- -D-galaktopyranosidi ovat flavonoideja johdettu Cleistocalyx operculate (Roxb.) Merry. ja LM Perry. Sytopaattisen vaikutuksen (CPE) vähentämismääritys osoitti, että nämä flavonoidit estävät influenssaviruksen H1N1-viruksen replikaatiota MDCK-soluissa. Rakenne-aktiivisuussuhdetutkimukset (SAR) osoittivat, että OH-ryhmät C-7:ssa ja C-4:ssa, kaksoissidos C-2:n ja C-3 välillä ja erityisesti karbonyyliryhmä C-4-asemassa ovat kriittisiä funktionaalisia ryhmiä, jotka parantavat merkittävästi flavonoidien antiviraalisia ominaisuuksia [67].3-Caesalpinia sappan L.:stä eristetty deoksisappankalkoni (3DSC) voi estää influenssaviruksen replikaatiota korkeina pitoisuuksina Viruksen NP-ilmentymisen estäminen MDCK-soluissa, jotka on infektoitu H1N1-viruksella. Samassa pitoisuudessa (30 uM) sekä ribaviriini että 3DSC estivät merkittävästi NP:n ilmentymistä, vaikka ribaviriinilla oli voimakkaampi vaikutus [68]. Tutkimukset ovat osoittaneet, että biokaniini A ja baicaleiini estivät kaspaasin -3 aktivaatiota, entsyymiä, joka osallistuu viruksen replikaatioon [53,69]. Nämä yhdisteet voivat myös estää viruksen RNP-kompleksien ydinvientiä, mikä on kriittistä viruksen replikaatiossa [53]. Biokaniini A:lla oli estävä vaikutus mitogeeniaktivoitua p38:aa ja NF-kB:tä vastaan, joiden osoitettiin osallistuvan viruksen replikaatioon. NF kB ja p38 aktivoituvat oksidatiivisen stressin vuoksi ja niiden tiedetään vaikuttavan influenssa A -viruksen replikaatioon ja patologiaan [53,70]. Influenssaviruksella infektoitujen MDCK-solujen ja A549-solujen soluviljelmien tutkimukset osoittivat, että baicaleiini saattoi estää viruksen replikaatiota 20-80 ug/ml pitoisuuksilla. Mielenkiintoista on, että baikaliini osoitti samanlaista antiviraalista aktiivisuutta kuin ribaviriini ja oseltamiviiri pitoisuuksina 40 ug/ml ja 60 ug/ml. Baikaliini esti myös viruksen replikaatiota hiirten keuhkoissa in vivo[71]. CST:n osoitettiin vähentävän NF-kB-proteiinin ja NF-KB:n fosforylaatiota ytimessä [59]. On jo tiedossa, että NF-KB:llä on tärkeä roolitulehdus, oksidatiivista stressiäja isännän immuniteetin suppressio [72]. NF-kB:n väheneminen estää myös replikaatiota erityyppisissä viruksissa, mukaan lukien influenssavirus [73].

SARS-CoV-2:lla infektoiduissa Vero E6 -soluissa naringeniini voi estää CPE:tä ajasta ja pitoisuudesta riippuvalla tavalla. Tämä vaikutus välitettiin endo-lysosomaalisten kaksihuokosisten kanavien (TPC) estämisen kautta. Reitti sisältää SARS-CoV-2-, Ebola- ja MERS-tarttuvuuden helpottamalla viruksen sisäänpääsyä [74]. EGCG on osoittanut annoksesta riippuvaa estävää vaikutusta (25,50 μM) HIV:n replikaatioon T-soluissa; RT-inhibitio ei kuitenkaan vaikuttanut suoraan viruksen replikaation estoon. Fassina ym. analysoivat p24-entsyymiä, joka osallistuu viruspartikkelien pakkaamiseen. Tulokset osoittivat p24-pitoisuuden ja RT-aktiivisuuden vähenemisen HIV-infektoituneissa T-lymfoblasteissa. Seuraavien tulosten perusteella havaittiin, että EGCG esti viruksen replikaatiota vähentämällä virusinfektiota. Vielä ei ole varmuutta EGCGon-virusinfektion tarkasta vaikutuksesta [75]. gp120-signalointi liittyy yleisesti lisääntyneeseen HIV{19}}-replikaatioon aiemmin infektoiduissa soluissa[75]. Tutkimukset osoittavat genisteiinin estävän vaikutuksen gp120:een ja sen jälkeen HV-1-viruksen replikaatioon. Viruksen replikaatiossa ei tapahtunut muutoksia järjestelmänvalvojan jälkeen

Genisteiinin istraatio pitoisuudella {{0}},5 ug/ml, mutta alueella 5-10 ug/ml genisteiini voi estää viruksen replikaation [76]. Herbasitriini on flavonoidi, joka on peräisin Drosera peltata Thunbista. ja se tunnettiin aiemmin antiviraalisena aineena. Osoitettiin, että herbasitriini estää sekä RT:tä että integraasia HIV-1-infektoituneissa MT-4- ja MT-2-soluviljelmissä, mikä johtaa viruksen replikaation estoon eri vaiheissa. Konsentraatiolla 21,5 ug/M herbasitriini voisi tukahduttaa R-aktiivisuutta, kun taas se voisi estää integraasia pienemmällä pitoisuudella, 2,15 uM [77]. Erigeron breviscapusista puhdistettu scutellariini on flavonoidi, jolla on anti-HIV-1-aktiivisuutta. Tämä flavonoidi esti HIV-1 RT-aktiivisuutta ja solufuusiota viruksen replikaation tärkeimpänä osallistujana [Z8]. Hesperidiini ja linariini ovat flavonoideja, joissa on rutinoosi A-renkaassa ja metoksi (-OCH3) -substituutio B-renkaassa. Isokersetiinin on osoitettu estävän influenssa A- ja B-viruksen replikaatiota infektoiduissa MDCK-soluissa. Isokersetiinin ja amantadiinin yhdistelmä osoitti myös synergististä vaikutusta viruksen replikaatioon MDCK-soluissa, jotka oli infektoitunut influenssa A -viruksella vain pieninä annoksina (0,5 uM isokersetiinille ja 1 uM amantadiinille). Virustiitteriarvot isokersetiinin ja amantadiinin annon jälkeen olivat noin 7,5; isokersetiini- ja amantadiinipitoisuuksien lisääminen alensi synergististä vaikutusta virustiittereihin arvoon 5 [79]. Houttuynia cordatasta johdettu Q3R:llä on influenssaviruksen vastaisia ​​vaikutuksia. Q3R:n vaikutuksia influenssavirus A:lla infektoituihin MDCK-soluihin verrattiin oseltamiviiriin. Q3R esti keuhkovaurioita ja turvotusta enemmän kuin oseltamiviiri. Q3R oli myös tehokkaampi kuin oseltamiviiri. Q3R:n estävä vaikutus influenssaviruksen replikaatioon oli epäsuora ja vuorovaikutuksen kautta viruspartikkelien kanssa. Oseltamiviiri osoitti kohtalaista antiviraalista aktiivisuutta, noin 58 prosenttia influenssa A -virusta vastaan, ja heikko antiviraalinen aktiivisuus alle 49 prosenttia alle 10 ug/ml annoksilla; kun taas Q3R osoitti 86-prosenttista virusinhibitiota pitoisuudella 100 ug/ml ja 66 prosenttia 10 ug/ml:n pitoisuuksilla [80]. Kversetiini 3- -OD-glukosidin (Q3G) osoitettiin estävän Ebola-viruksen replikaatiota in vitro. Ennaltaehkäisevä Q3G:n antaminen 30 minuuttia ennen tartuntaa osoitti merkittävää Ebola-viruksen estoa. Q3G voi myös estää viruksen pääsyn alkuvaiheessa. Joten O3G voisi olla tehokas flavonoidi Ebola-viruksen ennaltaehkäisyyn [81].

2.2.Epäsuorat antiviraaliset vaikutukset

2.2.1. Vaikutus interferoneihin

Interferonit (IFN:t) sisältävät ryhmän proteiineja, joita useat immuunisolut tuottavat vasteena monille patogeeneille, kuten viruksille, loisille, bakteereille ja kasvainsoluille. IFN-soluja on kolme pääluokkaa, mukaan lukien tyypin I tai happostabiilit interferonit (IFN-alatyypit, IFN-, IFN-K, IFN-e, IFN-w ja IFN-t), tyyppi II (IFN-y), ja tyypin III IFN:t, jotka tunnetaan nimellä IFN-λ 【82-84】. Niillä on laaja valikoima biologisia aktiivisuuksia, kuten synnynnäisen immuunivasteen aktivointi, tärkeimpien histokompatibiliteettikompleksin (MHC) molekyylien ilmentymisen lisääminen, angiogeneesin tukahduttaminen. Niiden tärkein tehtävä on häiritä virusinfektioita [84,85].

Virusinfektion alkuvaiheessa IFN:t aktivoivat synnynnäisenimmuunijärjestelmä. Viimeaikaiset tutkimukset ovat raportoineet tyypin I ja tyypin I IFN-induktion ja -signaloinnin vähenemisestä COVID{0}}-potilailla [86]. Tämän tyyppisillä IFN:illä on osoitettu antiviraalisia vaikutuksia vähentämällä neutrofiilien maahanmuuttoa tulehduskohtaan, lisäämällä antigeenien esiintymistä, tukahduttaen mononukleaaristen makrofagien välittämää pro-inflammatorista tulehdusta ja aktivoimalla hankittua immuniteettia antigeenispesifisten B- ja T-soluvasteiden etenemiseen. 86-90]. Siten IFN:ien käyttö taudin alkuvaiheessa voi vähentää COVID-19-oireita vähentämällä viruksen replikaatiota. Tutkijat raportoivat myös, että IFN-tasot voivat nousta COVID-19-potilailla, joilla on ARDS. IFN-tasojen nopea nousu saattaa kutsua tulehdusta edistäviä sytokiineja keuhkorakkuloihin ja johtaa keuhkotulehdukseen ja keuhkovaurioon [90,91]. Siksi näyttää siltä, ​​että joko IFN:ien ja muiden pro-inflammatoristen sytokiinireaktioiden säätely tai epäsäännöllisyys tai molemmat voivat vaikuttaa merkittävästi SARS-CoV:n etenemiseen ja patologisiin piirteisiin-2.

Olkoon al. tutkia baikaliinin, glykosyylioksiflavonin, joka on baicaleiinin 7-O-glukuronidi, influenssan vastaisia ​​vaikutuksia influenssa A -virusinfektion in vitro- ja in vivo -mallissa. TNF-reseptoriin liittyvä tekijä 6 (TRAF6) on tehokas välittäjä IFN-tuotannon signalointireitillä. TRAF6:n yli-ilmentyminen johtaa tyypin I IFN:n lisääntyneeseen tuotantoon [54]. MikroRNA:t (miRNA:t) ovat pieniä molekyylejä, jotka säätelevät geenisäätelyä transkription jälkeen [92]. miR-146a:lla on osoitettu säätelevä rooli tulehduksessa [93]. miR-146a voisi tehostaa H1N1:n ja H3N2:n replikaatiota TRAF6:n alasäätelyn kautta. Baikaliini (20 ug/ml) osoitti miR-146a-ekspression, viruksen NP-, Ml-proteiinitasojen, virustiitterin merkittävän vähenemisen ja myös hiirien eloonjäämisasteen lisääntymisen [54]. Toisessa tutkimuksessa Nayak ja kollegat edustivat baikaliinin influenssaviruksen (H1N1-pdm09) aktiivisuutta säätelemällä virusproteiinia NS1, mikä johti interferonin säätelytekijän 3 (IRF-3), IFN:n säätelyyn. - ja IFN-. Tämä IFN:n noususäätely vähensi viruksen replikaatiota, mikä saattoi vähentää virustranskriptejä ja tulehdusta edistävien sytokiinien ilmentymistä, mukaan lukien IL-8 ja TNF-x [55].

Ding et ai. suunnitteli tutkimuksen, jossa tutkittiin hesperidiinin, flavanoniglykosidin, vaikutuksia influenssa A -viruksen (H1N1) aiheuttamaan keuhkovaurioon urosrotilla. Tulokset osoittivat, että hesperidiini heikensi keuhkovaurioita vähentämällä tulehdusta edistävien sytokiinien tuotantoa, mukaan lukien IFN-, TNF-x ja IL-6, estämällä MAPK-signalointireittejä. Hesperidiini vähensi myös IFN-pitoisuutta H1N1-infektoituneissa keuhkojen mikrovaskulaarisissa endoteelisoluissa [94]. Toisessa tutkimuksessa Kim et al. isokersetiini heikensi tehokkaasti H1N1-viruksen indusoimaa keuhkovauriota hiirillä alentamalla IFN-, iNOS-, RANTES-, virustiittereitä, virusten keuhkoputkentulehdusta ja bronkioliittia [79].

Oroxylum Indicum(L.)Kurz'in oroksiliini A (OA) esti influenssa A H1NI -viruksen aiheuttaman keuhkovaurion hiirillä säätelemällä IFN- ja IFN-【52】 ylös. Wogoniini, toinen Scutellaria baicalensis Georgista eristetty flavonoidi, osoitti merkittävää influenssanvastaista aktiivisuutta säätelemällä AMPK-polkuja. Wogonin lisäsi myös IFN-, IFN-λl- ja IFN-alavirran molekyylien, mukaan lukien myksovirusresistenssigeenin A (MxA) ja 2-5'-oligoadenylaattisyntetaasin (OAS), säätelyä MDCK- ja A549-infektoiduissa soluissa [95].

2.2.2. Vaikutus tulehdusta edistäviin sytokiineihin (TNF, IL ja MCP)

CoV:t sisältävät joitakin avoimia lukukehyksiä, jotka koodaavat muutamia apuproteiineja. Näiden apuproteiinien on osoitettu moduloivan tulehdusreittejä, kuten IFN-signalointia ja tulehdusta edistäviä sytokiinejä [96]. On selvitetty, että tulehdusta edistävien sytokiinien, mukaan lukien interleukiinit, IFNy ja TNF-, erittäminen voi pahentaa COVID-19-ennustetta [97]. Blanco-Mello ym. viittasivat, että sopimaton immuunivaste saattaa auttaa viruksen replikaatiota ja komplikaatioita, jotka johtuvat vakavista COVID-tyypeistä-19 [98]. Ruan ym. osoittivat myös, että tulehduksellisten sytokiinien, kuten IL-6, nousu liittyy ARDS:iin, hengitysvajaukseen ja haitallisiin kliinisiin tuloksiin [99]. Keuhkovaurion aiheuttama hengitysvajaus johtuu tulehdusta edistävien sytokiinien ylituotannosta immuunisolujen tunkeutumisen jälkeen keuhkoihin [100]. Sytokiinimyrsky on systeeminen tulehdusreaktio, joka liittyy monenlaisiin tekijöihin, kuten infektioihin ja tiettyihin lääkkeisiin. Useat tutkimukset osoittivat merkittävän yhteyden sytokiinimyrskyn, vakavan tulehduksen ja useiden elinten vajaatoiminnan välillä COVID{13}}-potilailla [101-103]. SARS-CoV-2-viruksen tunnistaminen synnynnäisellä ja mukautuvalla immuunijärjestelmällä voi johtaa tulehduksellisten sytokiinien aktivoitumiseen ja tuotantoon. Viimeaikaisten tutkimusten mukaan tulehdusta edistävien sytokiinien tasot plasmassa ovat kohonneet COVID-19-potilailla. Nämä tulehdukselliset sytokiinit, kuten TNF-, IL6, IL 2, IL-1, IL7, IL 10 ja IL-18, sekä monosyyttien kemoattraktanttiproteiini-1(MCP-1) ), niillä on keskeinen rooli COVID-19 patologisessa etenemisessä ja vaikeusasteessa viruskuorman, keuhkokuumeen, keuhkovaurion, neurologisten häiriöiden ja kuolleisuuden lisääntymisen kautta [97,101].

Nämä tapahtumat voivat johtaa usean elimen vajaatoimintaan ja keuhkovaurioon SARS-CoV:n pääkomplikaationa-2; siksi proinflammatoristen sytokiinien modulointia voidaan pitää järkevänä COVID-hoitotavoitteena-19. Lisäksi flavonoidien merkittäviä anti-inflammatorisia vaikutuksia on osoitettu monissa tutkimuksissa; näin ollen ne voivat olla lupaavia yhdisteitä COVIDin tulehdukseen liittyvien komplikaatioiden torjunnassa-19 [97].

Yang et ai. osoitti 3-deoksisappankalkonin (30 μM) suojaavan vaikutuksen in vitro -influenssa H1N1 -viruksen aiheuttamaan tulehdukseen ja apoptoosiin alentamalla IL-1- ja IL-6-tasoja [68]. Bicaleiini, flavoni, ja biokaniini A, O-metyloitu isoflavoni, vähensivät tulehdusta edistävien sytokiinien ilmentymistä A549-soluissa ja primäärisissä ihmisen monosyyteistä johdetuissa makrofageissa (MDM), jotka ovat infektoituneet influenssa H5N1 -viruskannoilla, mikä voisi estää tulehdusreitin aktivaatiota ja kudosvaurioita [53]. Influenssa A:lla infektoiduissa A549- ja MDCK-soluissa baikaliini, baicaleiinin (baikaleiini-7-glukuronidin) glykosyloitunut muoto, voi lisätä IFN-tasoja, mikä johtaa tulehdusta edistävien sytokiinien tuotannon vähenemiseen. Siten IL-8 ja TNF- olivat merkittävästi alhaisempia baikaliinilla käsitellyissä soluissa verrattuna käsittelemättömiin kontrollisoluihin [55].

In vitro -tutkimus on osoittanut, että 2,5, 5 ja 10 ug/ml konsentraatioilla CST:tä, dimetoksiflavonia, on merkittävä vaikutus NF-kB-signaalin välitysreitin heikkenemiseen influenssa A:lla infektoiduissa THP-1-soluissa (H1N1) virus. NF-kB:n eston jälkeen tulehdusta edistävien sytokiinien, mukaan lukien I-1, IL-8, IL-10 ja TNF-, sekä tulehdukseen liittyvän proteiinin COX{{ tuotanto. 15}}, CST tukahdutti annoksesta riippuvaisella tavalla[59]. Yonekawa et al.:n in vitro -tutkimuksessa hesperidiinin ja linariinin antiviraalisista ominaisuuksista nämä flavonoidiglykosidit estivät R5-HIV-1-NL(AD8)-viruksen replikaatiota CD4- ja NKT-soluissa lisäämällä tuotantoa anti-inflammatoriset sytokiinit, mukaan lukien IL-2, IL-5 ja IL-13. Havaittiin, että näiden kahden flavonoidin stimuloiva vaikutus on kriittisesti riippuvainen sokeriosasta, koska aglykonit (hesperetiini ja asetiini) eivät osoittaneet tällaista aktiivisuutta. Lisäksi metoksi(-OCH3)-substituutio B-renkaassa on välttämätön hesperidiinin ja linariinin stimuloivalle aktiivisuudelle CD4- ja NKT-soluissa. Ne saattoivat myös indusoida RANTES-, MIP-1- ja MIP-1-erityksen V61:stä plus ilmentävistä T-solureseptoreista, jotka myöhemmin suppressoivat viruksen replikaatiota CD4- ja NKT-soluissa[104]. Kang et ai. raportoitu Pithecellobium clypearia Benthin puhdistettujen flavonoidien influenssan vastaisista vaikutuksista influenssa A -virusinfektion in vitro -malliin. Nämä puhdistetut flavonoidit tukahduttivat IL-6- ja MCP-1-tuotannon H1N1-infektoituneissa ihmisen A549-keuhkosoluissa[105]. Mehrbod et ai. tutki kversetiini-3-O- -L-ramnopyranosidin (Q3R), glykosyloidun flavonin, anti-inflammatorista vaikutusta influenssa H1N1 -viruksella infektoituihin MDCK-soluihin. Q3R pitoisuutena 150 ug/ml alensi merkittävästi virustiitteriä ja lisäsi IL-27-tuotantoa, mikä saattoi edelleen lisätä CD4 plus T-solujen IL-10-eritystä ja tehostaa niiden antiviraalista aktiivisuutta. Toisaalta O3R tukahdutti TNF-tuotannon yhtenä tärkeistä tulehdusvälittäjistä, joka aiheuttaa kuumetta ja laukaisi NF-kB proinflammatorisen reitin, mikä pahensi entisestään potilaiden tilaa [106]. Trimetoksiflavoni Santin on osoittanut influenssan vastaista aktiivisuutta THP-1- ja MDCK-soluissa 60 μM:n pitoisuudella. Influenssa A (H3N2) -virus indusoi tulehdusta edistävää sytokiinituotantoa THP{65}} -soluissa, mikä johtaa keuhkotulehdukseen ja -vaurioon [61]. Anti-inflammatoriset sytokiinit voivat myös muuttua influenssavirusinfektion aikana. IL-10 on tulehdusta ehkäisevä sytokiini, jonka influenssavirus voi indusoida. IL-10 estää invariantteja luonnollisia tappaja-T-soluja vähentämällä keuhkojen monosyyteistä peräisin olevien dendriittisolujen IL-12-tuotantoa[107]. IL-6, IL-8, IL-10, IL-1 ja TNF-tasot laskivat merkittävästi Santinilla hoidetussa ryhmässä MAPK- ja NF-säätelyn heikkenemisen vuoksi. kB signalointireitit [61].

Edellä mainittujen lisäksi gallokatekiini-7-gallaatti, genisteiini ja theaflaviinit ovat muita flavonoideja, joilla on tulehdusta edistävien sytokiinien tuotantoa moduloivia vaikutuksia [58,76,108]; näin ollen näillä molekyyleillä näyttää olevan toivottu anti-inflammatorinen vaikutus, mikä auttaa hallitsemaan virusinfektioon liittyvää tulehdusta.

2.2.3. Vaikutus solujen alaisiin tulehdusreitteihin (NF-kB, PI3K/Akt ja MAPK/JNK)

Kun virus saapuu isäntäsoluun, isäntäsolu tunnistaa replikaationsa mallintunnistusreseptorien (PRR) kautta[109]. Viruksen RNA-rakenne osallistuu PRR:ien oligomeroitumiseen ja alavirran transkriptiotekijöiden, erityisesti interferonin säätelytekijöiden (IRF) ja NF-kB:n, aktivaatioon. NF-kB:n ja IRF:ien aktivoituminen johtaa solujen antiviraaliseen puolustuskykyyn indusoimalla tyypin I ja I interferoneja ja kemokiinin eritystä [110].

Chiou ym. tutkivat 8-prenylkaempferolin(8-PK) vaikutuksia A549-soluissa, jotka olivat influenssa A (H1N1) -viruksella infektoituneet. Tulokset osoittivat, että PI3K-Akt-reitin häiritseminen on 8-PK:n päämekanismi, joka johtaa suojaaviin vaikutuksiin influenssa A -virusta vastaan.8-PK vähensi NF-kB:n ja IRF{10}} ydintranslokaatiota. Akt-fosforylaation ja PI3K-aktiivisuuden vaimentamisen kautta. Lopuksi, säädellyn aktivaation vähentyneen tuotannon vuoksi normaalit T-solut ilmentyivät ja erittyivät (RANTES) H1N1--infektoituneiden A549-solujen kautta [111]. Zhu et ai. edusti, että influenssa A (H3N2) -viruksen indusoima autofagia A549- ja Ana{20}}-infektoituneissa soluissa suppressoi mTOR-signalointireittiä. Baikaliini saattoi lisätä mTOR-fosforylaatiota ja pelastaa H3N2-viruksen vaikutuksia annoksesta riippuvaisella tavalla [112]. Toisessa tutkimuksessa baikaliinin havaittiin vaikuttavan influenssaviruksen (H1N1-pdm09) vastaiseen toimintaan heikentämällä PI3k/Akt-reittiä, joka johtuu virusproteiinin NS1-ilmentymisen moduloinnista 55]. Lisäksi biokaniini A, O-metyloitu isoflavoni, osoitti suojaavia vaikutuksia H5N1-influenssa A -viruksen infektoimiin soluihin vähentämällä AKT-, ERK1/2-, JNK- ja p38-fosforylaatiota. Se voisi myös moduloida solujen signalointireittejä, vähentää IL-6, IL-8, CXCL10(IP-10), TNF- ja parantaa IkB-tasoja [53].

CST edusti estäviä vaikutuksia influenssa A -virusinfektion in vitro -malliin inhiboimalla NF-kB/p65-signaalireittiä, mikä johti tulehdusta edistävien sytokiinien vähenemiseen. CST alensi myös fosfo-p38 MAPK- ja fosfo-JNK-tasoja [59]. Toisessa Dingin et al.:n tutkimuksessa hesperidiinin antaminen päivittäisinä annoksina 200 ja 500 mg/kg viiden päivän ajan saattoi estää keuhkotulehdusta influenssa A -viruksen (H1N1) aiheuttamassa keuhkovauriossa rotilla. Tämä vaikutus välitti tulehdusta edistävän sytokiinituotannon heikentämisen, mukaan lukien IL-6 ja TNF-. Hesperidiini vähensi myös IL-6- ja TNF-ekspressiota H1N1-infektoituneissa keuhkojen mikrovaskulaarisissa endoteelisoluissa estämällä MAPK-signalointireittejä [94]. Lisäksi tutkimukset ehdottivat ERK-signalointireittiä MAPK-signalointireitin päämodulaattoriksi. Isorham-netiini (50 μM), monometoksiflavoni, vähensi ERK-fosforylaatiota MDCK-soluissa influenssa A(H1N1) -virusinfektion jälkeen [113]. Jeong ja kollegat tutkivat pyroksyliini A:n ja tektorigeniinin sytotoksisia vaikutuksia CHME5-soluissa ja ihmisen primäärisissä makrofageissa, jotka olivat HIV-1-D3-tartunnan saaneet. Nämä flavonoidit vaikuttavat vähentämällä PI3K:n, Akt:n, mTOR:n, PDK1:n, GSK-3:n ja Badin fosforylaatiota lipopolysakkaridilla/sykloheksimidillä käsitellyissä soluissa. Santin esti influenssa A -viruksen replikaatiota MDCK:ssa ja THP:ssä-1 infektoituneet solut [114]. Konsentraatiolla 60 uM Santin heikensi p38 MAPK:n, ERK:n, JNK/SAPK:n ja NF-kB:n [61] fosforylaatiota.