Cistanche-pohjaisen formulaation terapeuttisten vaikutusten tutkiminen krooniseen ei-bakteeriseen eturauhastulehdukseen (CNP) ja sen mekanismiin suolen mikrobiotan ja aineenvaihdunnan kautta rottamallissa

Abstrakti

Perustuu ankokeellinen autoimmuuniprostatiitin (EAP) rottamalli, tämä tutkimus tutkiiCistanche-pohjaisen kapselin (CBC) terapeuttiset vaikutukset ja taustalla olevat mekanismitlievityksessäkrooninen ei-bakteerinen eturauhastulehdus (CNP). Tavoitteena on tarjota prekliininen perusta kehitystyölleparannetut kasviperäiset lääkkeetlaajennetuilla indikaatioilla hallintaankrooninen eturauhastulehdus ja lantion kipuoireyhtymät.

Metodologia:

Histopatologiset muutoksetrotan eturauhaskudoksessa arvioitiin kauttahematoksyliini-eosiini (HE) värjäys.

Valkosolujen infiltraatiojalesitiinin kehon tiheyseturauhashomogenaatit arvioitiin mikroskooppisesti.

Seerumin tasotsuperoksididismutaasi (SOD)jamalondialdehydi (MDA)mitattiin käyttämällä biokemiallista analyysiä.

Tulehdukselliset sytokiinit(TNF-, iNOS, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8 ja IL-10) määritettiin käyttämälläentsyymi-immunosorbenttimääritys (ELISA).

16S rDNA:n sekvensointikäytettiin arvioimaan muutoksiasuoliston mikrobiota.

Kohdistamaton metabolomiikkaselvittämiseksi tehtiin analyysiaineenvaihduntareittejä, joihin CBC vaikuttaa.

Western blot (WB)SPHK1/S1P1/PI3K/Akt-signalointireitti.

Tulokset:

CBC:n hallinnointi merkittävästi:

Vähentynyt histologinen vaurioeturauhasen kudoksiin;

Lisääntynyt lesitiinin kehon tiheysjavähentynyt leukosyyttien infiltraatio;

Alenneet tulehdusta edistävät sytokiinit(TNF-, iNOS, IL-1, IL-2, IL-6, IL-8);

Nosti tulehdusta estävää sytokiinia IL-10;

Parannettu suoliston mikrobioottinen koostumus, lisääntyy erityisestiLactobacillusjaBifidobacterium animalisvähentäen samallaunclassified_f_PrevotellaceaejaVeillonella;

Muuttunut 10 keskeistä metaboliittia, mukaan lukiensfingosiinijaretinoyyli-glukuronidi, vaikuttaasfingolipidiaineenvaihduntajaretinolin aineenvaihdunta;

Vähentynyt SPHK1- ja S1P1-ilmentyminen, ja estettyPI3K ja Akt fosforylaatioeturauhaskudoksessa.

Johtopäätös:

Cistanche-pohjaiset kapselit (CBC) tehokkaastiparantaa tulehduksellisia vammojaEAP-rottien eturauhaskudoksessa. Mekanismeihin voi kuulua:

Suoliston mikrobiotan dysbioosin modulaatio;

Aineenvaihduntahäiriöiden korjaaminen;

SPHK1/S1P1/PI3K/Akt-signalointireitin tukahduttaminen.

Nämä havainnot tukevat potentiaaliaCistanche-peräiset yrttivalmisteetkuten aluonnollinen, monikohdeterapiavartenkrooninen ei-bakteerinen eturauhastulehdusja tarjoavat lupaavan suunnan tulevaisuutta vartenkasviperäisten lääkevalmisteiden innovaatio.

Avainsanat:

Cistanche-pohjaiset kapselit; krooninen ei-bakteerinen eturauhastulehdus; suoliston mikrobiota; metabolomiikka; SPHK1/S1P1/PI3K/Akt-reitti; yrttihoito eturauhastulehdukseen; luonnollinen anti-inflammatorinen hoito; EAP rotan malli

 

 

Cistanche-pohjainen tee

Osta nyt

 

 

Abstrakti:

Krooninen ei-bakteerinen eturauhastulehdus/krooninen lantion kipuoireyhtymä (CNP/CPPS), joka tunnetaan myös luokan III eturauhastulehduksena, aiheuttaa noin90 % kaikista eturauhastulehduksista. Sille on ominaista epämukavuus alempien virtsateiden, lantion ja välilihan kipu, seksuaalinen toimintahäiriö ja usein psyykkiset tai neurologiset oireet. Perinteisessä kiinalaisessa lääketieteessä (TCM) CNP luokitellaan "Jing Zhuoon" (siemensameus), joka liittyy usein sisäiseen kosteaan lämpöön, pernan puutteeseen tai kylmän tai katkeran lääkkeiden pitkäaikaiseen käyttöön, jotka heikentävät pernan toimintaa, mikä johtaa kosteuden ja lämmön kertymiseen eturauhasessa.

Nykyiset länsimaiset CNP:n farmakologiset hoidot, mukaan lukien antibiootit, salpaajat ja tulehduskipulääkkeet, keskittyvät ensisijaisesti oireiden hallintaan, ja niillä ei useinkaan ole pitkäaikaista tehoa. Yhä useammin tutkijat kääntyvätyrttilääkkeet turvallisempana ja kokonaisvaltaisempana vaihtoehtona.

Cistanche: Lupaava yrttiehdokas

Cistanche, perinteinen kiinalainen yrtti, joka tunnetaan siitämunuaisia ​​vahvistava, anti-inflammatorinen, immuunijärjestelmää moduloiva ja antioksidanttiominaisuuksia, on osoittanut potentiaalia erilaisten virtsatiesairauksien hoidossa. Nykyaikaiset farmakologiset tutkimukset kertovat tästäCistanche deserticolavoi säädellä tulehduksellisia sytokiinejä, tehostaa immuunivastetta ja parantaa mikroverenkiertoa, mikä tekee siitä alupaava ehdokas CNP-hoitoon.

Huolimatta kasvavasta kiinnostuksesta, tarkkaMekanismeja, joilla Cistanche lievittää CNP:tä, ymmärretään edelleen huonosti. Viimeaikaiset tutkimukset viittaavat siihensuoliston mikrobiot dysbioosisillä on kriittinen rooli CNP:n patogeneesissä. Siksi tämä tutkimus tutkii terapeuttisia vaikutuksia aCistanche-pohjainen yrttikapseli (CBC)CNP:ssä käyttämällä kokeellisen autoimmuuniprostatiitin (EAP) rottamallia, keskittyen erityisestisuoliston mikrobiotan koostumus ja metaboliset muutokset.

 

1. Materiaalit ja menetelmät

1.1 Eläimet

30 SPF-luokan urospuolista Sprague-Dawley (SD) -rottaa(300-320g) ja45 SPF-luokan urospuolista SD-rottaa(180–200 g) saatiin Hubei Beiante Biological Technology Co., Ltd:ltä.

SPF:n vakio-olosuhteissa: lämpötila 25±1 aste, kosteus 55±5%, 12 tunnin valo/pimeä-jakso.

Eläinten eettinen hyväksyntä:HUCMS00302159Hubein kiinalaisen lääketieteen yliopiston eettisen komitean myöntämä.

1.2 Lääkkeet ja reagenssit

Cistanche-pohjaiset kapselit (CBC)(Erä: 20221226) GMP-sertifioidulta kasviperäiseltä lääkeyritykseltä.

Tamsulosiinihydrokloridikapselit(positiivinen kontrolli), ostettu Hangzhou Conba Pharmaceutical Co., Ltd:ltä.

Täydellinen Freundin adjuvantti (CFA)Sigmasta (Saksa).

ELISA-sarjatIL-1, IL-6, IL-8, IL-10, TNF- ja iNOS, Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.

Oksidatiivisen stressin sarjat(MDA, T-SOD) Wuhan Elabscience Biotechnology Co., Ltd:ltä.

Suolen mikrobiotan DNA:n erotussarjatjametabolomiikkareagenssityhtiöltä Meiji Biotechnology (Shanghai).

1.3 Laitteet

Suurinopeuksinen sentrifugi (Eppendorf, Saksa), UHPLC ja Q-Exactive HF-X -massaspektrometri (Thermo Fisher Scientific) ja muut molekyylibiologian laitteet ELISA-, PCR-, sekvensointi- ja metabolomiikka-analyysiin.

2. Kokeellinen protokolla

2.1 Kokeellisen autoimmuunisen eturauhastulehduksen (EAP) mallin induktio

2.1.1 Eturauhasen proteiini-CFA-emulsion valmistus

Eturauhaskudos uutettiin luovuttajarotista, homogenisoitiin steriilissä suolaliuoksessa 0,5 % TritonX-100:lla ja sentrifugoitiin nopeudella 20 000 rpm 30 minuuttia 4 asteessa.

Proteiinipitoisuus säädettiin arvoon 20 mg/ml käyttämällä BCA-määritystä.

Proteiiniuute emulgoitiin CFA:lla suhteessa 1:1, jolloin muodostuiCNP-antigeeniemulsio.

2.1.2 Rokotusmenettely

45 SD-rotta (180 ± 20 g) jaettiin satunnaisesti, ja 10 luokiteltiin normaaliin ryhmään.

Loput rotat vastaanotettiinihonalaiset monipisteinjektiotCNP-antigeeniemulsiosta nivusissa, reiden sisäpuolella ja selässä.

Tehosteimmunisaatio annettiinPäivä 15samaa protokollaa noudattaen.

Normaalit kontrollit saivat suolaliuosta.

2.2 Ryhmittely ja käsittely

Päivänä 28 immunisaation jälkeen onnistunut mallinnus varmistettiin histologialla (HE-värjäys).

Rotat jaettiin satunnaisesti seuraaviin ryhmiin:

Normaali ohjausryhmä

Malliryhmä

Positiivinen huumeryhmä: Tamsulosiini (0,021 mg/kg)

CBC:n pieniannoksinen ryhmä: 0,63 g/kg (kliininen ekvivalenttiannos)

CBC High-Dose Group: 1,26 g/kg

Hoito annettiin suun kautta kerran päivässä 30 päivän ajan. Kontrolli- ja malliryhmät saivat suolaliuosta.

 

 

2.3 Näytteenotto ja analyysi

24 tuntia viimeisen annoksen jälkeen rotat lopetettiin.

Veri kerättiin vatsa-aortan kautta; seerumi erotettiin ja säilytettiin -80 asteessa.

Eturauhasen kudokset kerättiin, punnittiin ja tutkittiin makroskooppisesti.

TheEturauhasindeksi (PI)laskettiin:
PI=Eturauhasen märkäpaino / kehon paino

Kudokset kiinnitettiin formaliiniin histologiaa varten tai jäädytettiin sytokiinianalyysiä, Western blottausta, mikrobiota DNA:n uuttamista ja metabolomiikkaa varten.

Päätelmä ja merkitys

Tämän tutkimuksen tarkoituksena on tarjotaprekliiniset todisteetkäyttöä vartenCistanche-pohjainen yrttiterapiahoidossakrooninen ei-bakteerinen eturauhastulehdus. Integroimallasuoliston mikrobiotaanalyysijametabolomiikan profilointi, pyrimme paljastamaanmonen kohteen mekanismejajoiden kautta Cistanche käyttää anti-inflammatorisia ja immunomodulatorisia vaikutuksiaan.

Nämä havainnot tukevatCistanchen kehittäminen uudeksi kasviperäiseksi lääkkeeksiCNP:lle ja mahdollisesti johtaauusia merkkejäsen kliiniseen käyttöön.