Nannochloropsis Sp.:n potentiaalin tutkiminen. Uute kosmeettisiin sovelluksiin

Avainsanat:Nannochloropsis; antioksidantti; anti-melanogeeninen; ihoa kosteuttava; UV-suoja;ikääntymistä vastaan

Napsauta tästä saadaksesi lisätietoja Cistanche For Anti-aging -sovelluksesta

1. Esittely

Iho on suurin elin, joka peittää koko ihmiskehon ja tarjoaa fyysisen elimeneste, joka suojaa sisäisiä kudoksia ulkoisilta ärsykkeiltä, ​​kuten ultravioletti (UV)säteilyä, kemikaalit, taudinaiheuttajat ja fyysinen rasitus [1,2]. Lisäksi sillä on fysiologisestitärkeä rooli eliöiden ylläpitämisessä, mukaan lukien niiden säilyttäminenvesi, immunologiset toiminnot, sensorinen havainto ja kehon lämpötilan säätely [3,4]. Iho koostuu kolmesta kerroksesta: epidermis, dermis ja hypodermis. Vuonnaepidermis, keratinosyytit, Langerhans, melanosyytit ja talirauhaset ovat tärkeitärooli ihovaurioiden korjaamisessa, ihon värin määrittämisessä, ihon suojaamisessa UV-säteilyltäsäteilyä, suojaa ja voitelee ihoa. Dermiksessä, joka sijaitsee allaepidermiksen hallitsevat fibroblastisolut tuottavat kollageenia ja elastisia kuituja. Kollageenitarjoaa vetolujuutta ja sitkeyttä muodonmuutosten vastustamiseksi, kun taas elastiini tarjoaaelastisuutta ja joustavuutta, jolloin kudokset voivat palata alkuperäiseen muotoonsa, kun ne poistetaanmuodonmuutosvoima. Kollageeni ja elastiini ovat ristisilloitetut antamaan rakenteellista tukeaiho [4–7]. Hyaluronihappo (HA), glykosaminoglykaani, on pääkomponenttisolunulkoinen matriisi (ECM). HA on avainmolekyyli ihon kosteuden säilyttämisellesen kyky sitoa ja pidättää vesimolekyylejä jopa 1000 kertaa painonsa verran [8,9]. HAmuodostaa geelin imemällä vettä ja antaa kudoksille puristuskestävyyden. Thehypodermis, joka koostuu pääasiassa rasvasta ja löysästä sidekudoksesta, varastoi energiaaja eristää kehoa [5,6]. 

Ihon ikääntyminen on monimutkainen biologinen prosessi, joka johtuu sisäisistä ja ulkoisista tekijöistä [10,11]. Sisäinen ikääntyminen on väistämätön fysiologinen ja geneettinen prosessimuuttuu ajan myötä, mikä johtaa hienoihin ryppyihin, asteittaiseen ihon surkastumiseen jaohut ja kuiva iho [10,12,13]. Ulkoinen ikääntyminen johtuu kumulatiivisesta altistumisestaympäristötekijät, kuten UV-säteily, tupakointi ja ilmansaasteet. Nämä ympäristötekijöiden tiedetään lisäävän ihon fysiologisia ja morfologisia muutoksia,johtaa ihon ennenaikaiseen ikääntymiseen [12–14]. Ympäristötekijöistä altistuminenUV-säteily on ensisijainen syy ihon ulkoiseen ikääntymiseen, ja sitä kutsutaan valovanhenemiseksi [14–16]. Poikkeaa luonnostaan ​​ikääntyneestä ihosta, yleensä ennenaikaisesti ikääntynyt ihonäkyy karkeutta, epäsäännöllistä, täplää pigmenttiä, paksuntunutta orvaskettä, syviä ryppyjä,löysyys ja karheus [5,10,17]. Vaikka ihon sisäinen ikääntyminen ja ulkoinen ihon ikääntyminenovat eri tekijöiden aiheuttamia, molemmilla on samanlaiset molekyylimekanismit. Erityisesti,reaktiiviset happilajit (ROS) syntyvät oksidatiivisen solujen aineenvaihdunnan seurauksena ja aavainrooli molemmissa prosesseissa [18]. ROS laukaisee mitogeenin aktivoiman proteiinin aktivoitumisenkinaasit (MAPK) ja sitä seuraavat ydintekijätκB (NF-κB) ja transkriptiotekijäaktivaattoriproteiini-1 (AP-1), jotka johtavat metalloproteinaasien (MMP:t: MMP-1) lisääntymiseen,MMP-3 ja MMP-9) ja prokollageenin-1 heikkeneminen, mikä johtaakollageenipitoisuus ikääntyneessä ihossa [2,19]. ROS voi myös aktivoida veren neutrofiilejä tunkeutumaanihoa ja erittää elastaasia, joka hajottaa elastisia kuituja menettäen ihon kimmoisuutta [20]. Ihoikääntyminen liittyy myös vahvasti ihon kosteuden menettämiseen. On raportoitu, että aHA:n huomattava väheneminen orvaskedessä ihon ikääntymisen seurauksena johtaa ihon ikääntymisen menetykseenihon kosteus [8,21]. HA:ta syntetisoivat hyaluronaanisyntaasit (HAS; HAS-1, -2, -3,)epidermaaliset keratinosyytit ja ihon fibroblastit [8]. Melaniinia tuotetaan muuntamallaL-tyrosiini muuttuu L-dihydroksifenyylialaniiniksi (L-DOPA), jota tyrosinaasi katalysoi.Melaniini on vastuussa ihon väristä ja sillä on tärkeä rooli ihon suojaamisessaauringonvalolle altistumisesta aiheutuvat vauriot. ROS:n kerääntyminen lisää kuitenkin aktiivisuuttatyrosinaasin lisääntyminen, mikä johtaa hyperpigmentaatioon, kuten ikääntymiseen ja melasmaan liiallisesta liiallisesta määrästämelaniinin tuotantoa. Siksi hyperpigmentaatiota voidaan lievittää vapailla radikaaleillasieppaajat ja tyrosinaasin estäjät [22,23].

Viime vuosikymmeninä terveen ikääntymisen strategiat ovat olleet pakollisia lisääntyneenelinajanodote. Lisäksi kiinnostus nuoren ja kauniin ylläpitämiseen kasvaaulkonäköä, koska ihon terveyttä ja kauneutta pidetään tärkeinä biologisina tekijöinäedustaa ihmisten hyvinvointia. Sitä pidetään myös nuorekkaan ja kauniin ulkonäönävoi vaikuttaa positiivisesti sosiaaliseen käyttäytymiseen [10,13]. Siksi miljoonat kuluttajat käyttävätkosmeettisia ihonhoitotuotteita päivittäin, ja kosmeettisten tuotteiden globaalit markkinat ennustetaansaavuttaa 805 miljardia dollaria vuoteen 2023 mennessä, jolloin kasvuvauhti on 7,14 prosenttia vuodessa vuodesta 2018vuoteen 2023 [24,25]. Synteettisten kosmeettisten tuotteiden haitallisten sivuvaikutusten vuoksi onkasvava kysyntä käyttää luonnontuotteita, mukaan lukien kasveista, eläimistä,ja meren eliöt. Kosmeettiset valmisteet ovat peräisin kosmetiikasta ja lääkkeistä,jotka viittaavat kosmeettisiin tuotteisiin, jotka sisältävät bioaktiivisia ainesosia, joilla on UV-toimintojasuojaa, ihon valkaisua, ryppyjä ehkäisevää ja ikääntymistä ehkäisevää [26]. Kosmetiikkateollisuudessa,kosmeettiset tuotteet ovat nopeimmin kasvava ala ja luonnontuotteet ovat nousemassa uusiksimahdollisten bioaktiivisten aineiden lähde kosmeettisiin sovelluksiin [25]. 

Cistanchet ovat prokaryoottisia tai eukaryoottisia fotosynteettisiä mikro-organismeja, jotka voivatkasvavat nopeasti ja selviävät äärimmäisissä ympäristöolosuhteissa (esim.anaerobioosi, suolaisuus, valohapetus, osmoottinen paine ja UV-säteily) [27]. Cistancheovat myös parempia kuin maakasvit korkean tuottavuuden ja rajoitetun kausivaihtelun vuoksi,helpompi louhinta ja runsaasti raaka-aineita [27]. Cistanche on jatkuvasti alttiinaympäristön rasituksiin. Siten he kehittyivät kehittämään erilaisia ​​strategioita, kuten ulrakenteelliset, fysiologiset ja biokemialliset muutokset [28]. Luonnolliset tuotteetCistanchesta peräisin oleviin tuotteisiin, joita voidaan käyttää kosmeettisiin tai kosmeettisiin tarkoituksiin, ovat fotosynteettisetpigmentit, lipidit, fenoliyhdisteet, aminohapot, peptidit, hiilihydraatit,ja vitamiinit [25]. Luonnontuotteista karotenoidit, jotka tunnetaan vahvoinaantioksidantteja ja vapaita radikaaleja poistavia aineita voidaan käyttää ikääntymisen estämiseen ja valosuojaukseentarkoitukseen [29]. Karotenoideista astaksantiini, jolla on korkeampi antioksidanttiaktiivisuuskuin -karoteenia ja askorbiinihappoa, on mielenkiintoinen depigmentaatiotoiminto, joka voisuojaa ihoa ikääntymiseltä vähentämällä melaniinin synteesiä 40 prosenttia [30,31]. Zeaksantiini jamuut karotenoidit osoittavat myös UV-absorptiota ja tyrosinaasia estäviä vaikutuksia [32]. Cistanchesisältävät usein korkeita lipidipitoisuuksia, mukaan lukien monityydyttymättömät rasvahapot (PUFA).PUFA:illa on tärkeä rooli valosuojauksessa, kalvon juoksevuuden ylläpitämisessä jaestää solunsisäisen jääkiteen muodostumisen, mikä mahdollistaa selviytymisen äärimmäisissä ympäristöissäolosuhteet, kuten korkea valon intensiteetti, UV-säteily ja alhainen lämpötila [33,34]. Omega{0}}-rasvahapot, kuten dokosaheksaeenihappo (DHA) ja eikosapentaeenihappo (EPA)niillä on positiivisia vaikutuksia ihon valoikääntymisen vaimentamiseen UV-indusoitujen metalloproteinaasien vaikutuksesta(MMP:t) ja anti-inflammatoriset vaikutukset [35]. Siitä on myös raportoituettä -linoleenihapolla on joitain kosmeettisia vaikutuksia, kuten ihoa elvyttävä ja hidastavaikääntymisprosessia, ja linolihappoa käytetään ihon liikakasvun hoitoon [36]. Cistanchen fenoliyhdisteiden tiedetään osoittavan erilaisia ​​aktiivisuuksia, kutenantioksidanttiset, antiallergiset, anti-inflammatoriset ja UV-suojatoiminnot [2,37].

Nannochloropsislajit, pienet yksisoluiset eustigmatophycean-levät, tunnetaankorkean lipidipitoisuuden ja korkean fotoautotrofisen biomassan tuottavuuden vuoksiniiden menestyksekkäästä viljelystä suuressa mittakaavassa [38]. Nannochloropsison käytetty hyväksityydyttymättömien rasvahappojen (mukaan lukien EPA) lähteenä vesiviljelyssä kasvatettujen eläinten ruokavaliossameren selkärangattomat. Ne sisältävät myös fenoliyhdisteitä, vitamiineja ja erilaisiapigmentit, joilla on antioksidanttisia vaikutuksia [39]. Lisäksi ne eivät tuota myrkkyjä janiiden toksikologinen turvallisuus on todistettu niiden pitkäaikaisella käytöllä merenkalojen ravinnoksija äyriäisten toukat [40]. Vaikka niissä on erilaisia ​​arvokkaita bioaktiivisia yhdisteitä,soveltamisesta on vähän raporttejaNannochloropsiskosmeettiseen ja kosmeettiseen käyttööntarkoitukseen [41]. Ottaen huomioon, että Cistanchen biokemiallinen koostumus vaikuttaa kosmeettisiinvaikutukset voivat olla erilaisia ​​jopa saman lajin isolaattien välillä [42], lisätutkimuksiatätä mikrolevälajia tarvitaan tyydyttämään kasvavaa kysyntää luonnon- jaturvallisia kosmetiikkatuotteita. Tässä tutkimuksessa tutkimme kosmeettisia mahdollisuuksiaote kohteestaNannochloropsissp. G1-5 (NG15) on eristetty eteläisestä länsimerestäKorean tasavalta. Analysoimme sen erilaisia ​​biologisia aktiivisuuksia, mukaan lukien sen anti-melanogeeninen, antioksidantti, ihoa kosteuttava, tulehdusta ehkäisevä, ryppyjä ehkäisevä ja UVsuojaustoiminnot. Analysoimme edelleen sen biokemiallista sisältöä ja koostumustarasvahapot, karotenoidit ja fenoliyhdisteet.

2. Tulokset

2.1. Nannochloropsis sp. G1-5 ja biokemiallisen koostumuksen analyysi

Tässä tutkimuksessa eristimme pesäkkeen, jonka väri oli ruskehtava, mikä viittaa pesäkkeen esiintymiseenkarotenoidien ja polyfenolien pigmentit, jotka saatiin levittämällä merivettänäytteet F/2-agarmaljoille. Tunnistamme isolaatin käyttämällä 18S rDNA PCR:ää, jota seurasisekvensoimalla ja nimesi sen nimelläNannochloropsissp. G1-5 (NG15). Viljelyn jälkeenNG15 ja uuttaminen etanolilla, rasvahappojen metyyliesterien koostumus ja pitoisuus(FAME:t), karotenoidit ja fenoliyhdisteet NG15-uutteessa määritettiin.Rasvahappojen, karotenoidien, fenolien jaflavonoiditraakaöljyssäuute oli 58,2 prosenttia , 1,6 prosenttia 7,7 prosenttia ja 2.{7}} prosenttia (taulukot)1–3). Tarkemmin sanottuna raakauute sisälsi erilaisia ​​PUFA:ita lipidipitoisuudessa, kuten -linoleeni-, linolihappo- jaEPA, joilla on ikääntymistä estäviä, valolta suojaavia ja tulehdusta estäviä vaikutuksia (taulukko1). Sesisältää myös erilaisia ​​karotenoidiyhdisteitä, mukaan lukien astaksantiini, -karoteeni, zeaksantiini,kantaksantiini ja violaksantiini (taulukko2, kuva S1, taulukko S1), jotka olivat tunnettujaniillä on antioksidanttisia, valolta suojaavia ja melanogeenisia toimintoja. Lisäksi yhteensäNG15:n raakauutteen fenoli- ja flavonoidipitoisuudet (taulukko3) olivat suhteellisenkorkea verrattuna muihin aiemmin raportoituihin Cistanche [43–45].

2.2. NG15-uutteen sytotoksisuus in vitro

NG15-uutteen vaikutus B16F10:n elinkelpoisuuteen, CCD-986sk, normaali humiehen dermaalinen fibroblasti (NHDF) ja NF-κB-lusiferaasireportteri NIH3T3-solut olivat stabiilejamääritetty MTT-määrityksellä konsentraatiolla 100-1500µg/ml. Hoito kanssaNG15-uute ei merkittävästi vähentänyt kaikkien testattujen solulinjojen elinkelpoisuuttapitoisuus 1000µg/ml, mutta se laski hieman 1500:ssaµg/ml (kuva1a–d). 

2.3. NG15-uutteen melanogeeninen vaikutus

Arvioidaksemme, onko NG15-uutteella ihoa valkaiseva vaikutus, analysoimme senvaikutus tyrosinaasiaktiivisuuteen ja solunsisäiseen melaniinin synteesiin. Tyrosinaasin estämisestämäärityksessä havaitsimme, että tyrosinaasiaktiivisuus väheni käsittelyllä NG15:lläannoksesta riippuvaisella tavalla. Tyrosinaasia estävät aktiivisuudet olivat7.84 ± 2.54, 19.68 ± 2.64, 26.24 ± 1.21, 40.16 ± 0.55 ja 59.2± 0,48 prosenttia NG15-hoidon jälkeenuute pitoisuuksina 100, 250, 500, 750 ja1000 µg/ml, vastaavasti, kun taas arbutiini(300 µM), jota käytettiin positiivisena kontrollina, osoitti tyrosinaasia estävää aktiivisuutta47.52 ± 3,09 prosenttia(Kuva2a). NG15-uutteen tyrosinaasia estävä aktiivisuus klo1000 µg/mloli korkeampikuin arbutiini (300µM). NG15:n anti-melanogeenisen aktiivisuuden määrittämiseksiuute, B16F10-soluja stimuloitiin - melanosyyttejä stimuloiva hormoni ( -MSH,100 nM) ja melaniinipitoisuudet B16F10-soluissa, jotka on käsitelty NG15-uutteella tai arbutiinillamitattiin. NG15-uutte osoitti merkittävää melaniinia estävää vaikutustasynteesi annoksesta riippuvalla tavalla. Verrattuna käsittelemättömiin soluihin, melaniinipitoisuusuutteen käsittelyn jälkeen olivat212.53 ± 4.72, 171.06 ± 3,57 ja128.60 ± 3,67 prosenttiaklopitoisuudet 250, 500 ja1000 µg/ml, vastaavasti. B16F10:n melaniinipitoisuusvain käsitellyt solut -MSH (100 nM) näytti 247,65± 4,15 prosenttia. Tämä tulos edustaatosiasia, että NG15-uute vähensi melaniinipitoisuutta -MSH-käsitellyt B16F10-solut ylös48 prosenttiin. Positiivinen kontrolli, arbutiini (300µM), osoitti 88,27± 1,50 prosenttia melaniinipitoisuudestakäsittelemättömiin soluihin verrattuna, mikä vastaa 64 prosentin melaniinipitoisuuden vähenemistä -MSH-käsitellyt B16F10-solut (kuva2b). 

Kuva 1. NG15-uutteen (0-1500 ug/ml) vaikutus (a) B16F1{{10}}, (b) NHDF, (C) NF-KB lusiferaasireportteriNIH3T3 elinkelpoisuuteen vakaat solut ja (d) CCD{8}}sk-solut. Kontrolli tarkoittaa solujen elinkelpoisuutta ilman NG15-uutetta; * tarkoittaa ap-arvoa < 0,05, n=3, Studentin f-testi; ** tarkoittaa ap-arvoa < 0,01, n=3, Studentin t-testi.

2.4. NG15:n antioksidantti-, tulehduksia estävä ja UV-suojaaktiivisuus

Uute DPPH-määritystä käytettiin arvioimaan NG15-uutteen antioksidanttiaktiivisuutta. NG15-uutteen DPPH-radikaaleja poistava aktiivisuus lisääntyi annoksesta riippuvalla tavalla konsentraatioalueella 100-1000 ug/ml. Tarkemmin sanottuna DPPH:n radikaalien poistoaktiivisuudet olivat 8.71 士 1.38,20.12 土 1.38, 51.65  1.88, 54.95 土 2.38 ja 57.{{20}}. 52 prosenttia käsittelyn jälkeen 100, 250, 500, 750 ja 1000 ug/ml NG15-uutetta, kun taas askorbiinihappo (5 ug/ml) osoitti 54.{30}} 土 0,31 prosenttia DPPH-radikaaleja poistavasta aktiivisuudesta. DPPH-radikaalinpoistoaktiivisuus 1 000 ug/ml NG15-uutetta oli hieman korkeampi kuin askorbiinihapon (5 ug/ml) (kuvio 3a). NG15-uutteen anti-inflammatorisen aktiivisuuden tutkimiseksi analysoimme uutteen vaikutuksen TNF-a:n aiheuttamaan NF-B-aktivaatioon NF-kB-riippuvaisella lusiferaasireportterimäärityksellä. Kun NF-kB-lusiferaasireportteri NIH3T3-stabiileja soluja käsiteltiin erilaisilla pitoisuuksilla NG15-uutetta, TNF-a:n aiheuttama lusiferaasiaktiivisuus väheni annoksesta riippuvaisella tavalla 15,40 plus 0,38 prosenttiin 1 000 ug/ml:lla verrattuna soluihin, joita oli käsitelty pelkällä aineella. TNF-a (kuvio 3b). NG15-uutteen suojaavan vaikutuksen määrittämiseksi ihosoluissa UVB-altistuksen jälkeen, elinkelpoisuusCCD{0}}sk-solujen määrä mitattiin MTT-määrityksellä. CCD{1}}sk-solujen elinkelpoisuus sen jälkeenaltistuminen 30 mJ/cm2 UVB laski 79,01:een± 2,57 prosenttia kontrollisoluista. Kuitenkin,käsittely NG15-uutteella vähensi merkittävästi UVB-indusoitua solukuolemaa aannoksesta riippuvaisella tavalla. NG15-uutteella käsitellyn CCD{1}}sk:n solujen elinkelpoisuus oli87.49 ± 7.49, 89.00 ± 2.89, 97.17 ± 7.19, 100.45 ± 5,62 ja 109,48± 8,25 prosenttia hoidon jälkeen100, 250, 500, 750 ja 1000 kanssaµg/ml NG15-uutetta, vastaavasti, verrattuna kontrolliinsolut (kuva3c). 

Kuva 2. NG15-uutteen melanogeeninen vaikutus. (a) NG15-uutteen in vitro tyrosinaasia estävä aktiivisuus sienityrosinaasia vastaan.** tarkoittaa p-arvoa < 0.01 verrattuna normaaliin (käsittelemättömään) ryhmään. # tarkoittaa ap-arvoa < 0.01 versusarbutiinilla käsitellyt solut; n=3: Oppilaan f-testi. (b) NC15-uutteen vaikutus melaniinipitoisuuksiin a-melanosyyttiä stimuloivan hormonin (MSH) stimuloimissa B16F10-soluissa. ## ja ** denoe ap-arvo < 0,01 verrattuna vain c-MSH:lla käsiteltyihin soluihin; n=3; Oppilaan testi. Positiivisena kontrollina käytettiin arbutiinia (300 uM).

2.5. NG15-uutteen ihoa kosteuttava ja ryppyjä ehkäisevä vaikutus

NG15-uutteen ihon kosteutusaktiivisuuden arvioimiseksi, ilmentymistäON-2 (kosteuttamiseen liittyvä geeni) NHDF-soluissa tutkittiin käyttämällä qPCR:ää. TheON-2mRNA:n ilmentyminen parani merkittävästi käsittelemällä NG15-uutteella aannoksesta riippuvaisella tavalla. Suhteellinen mRNA:n ilmentymistasoON-2verrattuna hoitamattomiinsolut olivat 199,88± 10.63, 263.91 ± 2,47 ja 274,58± 1,37 prosenttia hoidon jälkeen250, 500 ja 1000µg/ml NG15-uutetta 24 tunnin ajan, vastaavasti, kun taasON-2mRNAretinoiinihapolla (50 nM) käsiteltyjen NHDF-solujen ilmentymistaso oli 316,31± 8,89 prosenttia(Kuva4a). Määrittää NG15-uutteen vaikutus kollageenin hajoamiseen jasynteesi, ilmaisuMMP-1jaCol1A1analysoitiin käyttämällä qPCR:ää. TheMMP-1NHDF-solujen mRNA:n ilmentyminen väheni käsittelemällä NG15-uutteellaannoksesta riippuvaisella tavalla jopa 26,71 prosenttia 1000 °C:ssaµg/ml, verrattuna käsittelemättömäänohjaus (kuva4b). TheCol1A1NHDF-solujen mRNA-ilmentymistä, jotka on käsiteltyNG15-uute ei osoittanut tilastollisesti merkitsevää eroa alle 500:n annoksillaµg/ml,mutta se nousi 15,53± 2,75 prosenttia 1000:ssaµg/ml, verrattuna käsittelemättömään kontrolliin(Kuva4c). Tutkimme myös NG15-uutteen vaikutusta elastaasin estoontoiminta. NG15-uute osoitti elastaasia estävää aktiivisuutta annoksesta riippuvaisella tavalla,24.88 asti± 0,80 prosenttia 1000:ssaµg/ml, verrattuna käsittelemättömään kontrolliin (kuva4d)

Kuva 3. NG15-uutteen antioksidantti-, tulehdus- ja UV-suojaaktiivisuus. (a) NG15-uutteen DPPH-vapaita radikaaleja poistava aktiivisuus. L-askorbiinihappoa (5 ug/ml) käytettiin positiivisena kontrollina. ** tarkoittaa p-arvoa < 0.01 verrattuna normaaliin (käsittelemättömään) ryhmään. n {{1{{30}}}}; Opiskelijan t-testi. (b) NG15-uutteen vaikutus NF-xB-riippuvaiseen TNF-a-indusoituun lusiferaasiaktiivisuuteen NF-B-lusiferaasireportteri NlH313-stabiileissa soluissa. ** tarkoittaa arvoa < 0,01 verrattuna vain TNF-a:lla käsiteltyihin soluihin. n=3; Opiskelijan t-testi. (C) NG15-uutteen suojaava vaikutus CCD-986sk-solujen elinkelpoisuuteen UVB:lle (30 m)/cm') altistumisen jälkeen. ## tarkoittaa p-arvoa < 0,01 verrattuna normaaliin (käsittelemätön ja UVB-säteilylle altistamaton) ryhmään. ** tarkoittaa ap-arvoa < 0,01 verrattuna vain UVB-käsiteltyyn ryhmään. n=3; Opiskelijan f-testi.

Kuva 4. NG15-uutteen ihoa kosteuttava ja ryppyjä ehkäisevä vaikutus. (a) HAS-2b)MMP-1:n ja (C) Col1A1:n mRNA-ilmentymistaso. (d) NG15-uutteen in vitro -elastaasia estävä aktiivisuus NHDF-soluista peräisin olevaa elastaasia vastaan ​​tarkoittaa p-arvoa < 0.05 verrattuna normaaliin (käsittelemättömään) ryhmään. tarkoittaa ap-arvoa < 0,01 verrattuna normaaliin (käsittelemättömään) ryhmäänn=3; Opiskelijan koe. Positiivisena kontrollina käytettiin retinoiinihappoa (50 nM), TCF-3 (5 ng/ml ja fosforamidonidinatriumsuolaa (10 uM)). Kunkin geenin mRNA:n ilmentymistaso normalisoitiin B:n tasolle. -aktiinigeeni.