Cistanche-fenyylietanoidiglykosidien vaikutusten tutkiminen alkoholittomiin rasvamaksasairauksiin verkkofarmakologian ja solukokeiden perusteella

 

Abstrakti

Tavoite: Tutkia Cistanchen fenyylietanoidiglykosidien parantavia vaikutuksia alkoholittomaan rasvamaksatautiin (NAFLD).

menetelmät: Verkkofarmakologiaa käytettiin ennustamaan Cistanchen fenyylietanoidiglykosidien mahdolliset mekanismit NAFLD:tä vastaan. In vitro NAFLD-malli perustettiin indusoimalla HepG2-soluja vapailla rasvahapoilla (FFA). Solujen elinkelpoisuus arvioitiin käyttämällä CCK-8-määritystä; Oil Red O -värjäystä käytettiin lipidien kertymisen tarkkailuun; triglyseridi- (TG) ja kokonaiskolesterolin (TC) tasot mitattiin käyttämällä määrityspakkauksia; JC-1-värjäystä käytettiin mitokondrioiden kalvopotentiaalin arvioimiseen; solunsisäiset ROS-tasot arvioitiin DCFH-DA fluoresoivalla koettimella; apoptoosi havaittiin käyttämällä Hoechst 33342 -värjäystä; ja TNF-, PI3K-, Akt- ja Bax-proteiinien ilmentyminen mitattiin Western blot -menetelmällä.

Tulokset: Kymmenen aktiivista yhdistettä ja 77 mahdollista kohdetta, jotka liittyvät NAFLD:n vastaisiin vaikutuksiin, tunnistettiin, ja ydinkohteita olivat TNF, NFKB1 ja TLR4. Yhdisteet osoittivat hyvää sitoutumisaffiniteettia kohteiden, erityisesti TNF:n, kanssa. Malliryhmään verrattuna Cistanche-fenyylietanoidiglykosidit vähensivät merkittävästi FFA:n aiheuttamaa lipidien kertymistä HepG2-soluihin (P < 0,01), laskivat solunsisäisiä TG-, TC- ja ROS-tasoja (P < 0,01), palauttivat mitokondrioiden kalvopotentiaalin, lievittivät mitokondrioiden vaurioita ja alensivat apoptoosia, vähensivät P- ja apoptoosia. vähensi TNF-, PI3K- ja Akt-proteiinin ilmentymistä (P < 0,05, P < 0,01).

Johtopäätös: Cistanche-fenyylietanoidiglykosidit vaikuttavat NAFLD:tä vastaan ​​parantamalla FFA:n aiheuttamaa lipidien kertymistä, mitokondrioiden toimintahäiriöitä, oksidatiivista stressiä ja apoptoosia HepG2-soluissa. Nämä vaikutukset voivat liittyä TNF/PI3K/Akt-signalointireittiin.

Avainsanat: Cistanche-fenyylietanoidiglykosidit; alkoholiton rasvamaksatauti (NAFLD); lipidien aineenvaihdunta; oksidatiivinen stressi;apoptoosi; TNF/PI3K/Akt signaling pathway; verkko farmakologia; solukoe

 

Cistanche-fenyylietanoidiglykosidit

 

 

 

Myydään korkeapitoisuus Cistanche-uutetta

Ota yhteyttä osta nyt

 

 

1. Johdanto

Alkoholiton rasvamaksatauti (NAFLD) on krooninen maksasairaus, jolle on tunnusomaista maksan rasvoittuminen ilman liiallista alkoholinkäyttöä. Kiinassa esiintyvyys on noussut 32,9 prosenttiin. Sen patogeneesiin liittyy useita mekanismeja, mukaan lukien insuliiniresistenssi, oksidatiivinen stressi ja suoliston mikrobiston epätasapaino. Kliinisiä oireita ovat väsymys, epämukavuus maksan alueella ja vatsakipu, ja vaikeissa tapauksissa se voi edetä alkoholittomaksi steatohepatiittiksi (NASH).

Tällä hetkellä elämäntapainterventiot ovat NAFLD:n ensisijainen hoito. Vaikka FDA hyväksyi ensimmäisen lääkkeen NAFLD:lle, Resmetirom (Rezdiffra), vuonna 2024, sillä on mahdollisia haittavaikutuksia, kuten maksavaurioita ja kardiovaskulaarisia riskejä. Siksi on kiireellisesti löydettävä turvallisia ja tehokkaita hoitoja NAFLD: lle.

Perinteinen kiinalainen lääketiede (TCM), jossa on useita komponentteja, useita kohteita ja useita reittejä, sopii hyvin yhteen NAFLD:n monimutkaisen patogeneesin kanssa ja tarjoaa ainutlaatuisia etuja sen hoidossa.

Cistanche deserticolajaCistanche tubulosaovat Orobanchaceae-heimon lääkekasveja, jotka on lueteltu luettelossaShennong Bencao Jing. Niiden meheviä, runsaasti suomuja sisältäviä varsia käytetään perinteisesti maksan ja munuaisten vahvistamiseen, esanssin ja veren täydentämiseen sekä suoliston kostuttamiseen. Ensisijaisilla aktiivisilla komponenteilla - fenyylietanoidiglykosideilla - on anti-inflammatorisia, lipidejä alentavia ja hepatoprotektiivisia ominaisuuksia. Järjestelmällisiä tutkimuksia niiden vaikutuksista NAFLD:ään ei kuitenkaan vielä ole.

Tämän tutkimuksen tavoitteena on analysoida Cistanchen fenyylietanoidiglykosidien farmakologista perustaa ja mahdollisia mekanismeja NAFLD:n hoidossa verkkofarmakologian avulla ja tutkia niiden mekanismeja edelleen solukokeiden avulla, mikä tarjoaa teoreettisen perustan uusien lääkkeiden kehittämiselle.

 

2. Materiaalit

2.1 Network Pharmacology Tools

TCMSP: https://tcmspw.com/tcmsp.php

CNKI: https://www.cnki.net/

PubMed: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/

PubChem: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/

SwissTargetPrediction: http://www.swisstargetprediction.ch/

NetInfer: http://lmmd.ecust.edu.cn/netinfer/

SuperPred: https://prediction.charite.de/subpages/target_prediction.php

GeneCards: https://www.genecards.org/

DisGeNET: http://www.disgenet.org/

STRING: https://string-db.org/

Bioinformatiikka: https://www.bioinformatics.com.cn/

UniProt: https://www.uniprot.org/

RCSB ATE: https://www.rcsb.org/

Cytoscape 3.9.1: https://cytoscape.org/

R 4.3.3: https://www.r-project.org/

AutoDock Vina 1.5.7: https://vina.scripps.edu/

2.2 Solulinja

Ihmisen HepG2-maksasyöpäsolut, ostettu Wuhan Procell Life Science & Technology Co., Ltd:ltä.

2.3 Reagenssit ja lääkkeet

Cistanche-fenyylietanoidiglykosidit (eränumero. 201610, puhtaus suurempi tai yhtä suuri kuin 80 %, sisältäen 44,5 % ekinakosidia ja 16,1 % verbaskosidia), hankittu Hotan Dechen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd:ltä. Kantaliuos valmistettu 6,40 mg/ml, suodatettu 0 astetta 2 astetta.

Muita reagensseja ovat:

Naudan sikiön seerumi (FBS), DMEM-elatusaine, penisilliini-streptomysiini, Oil Red O -värjäyssarja, BCA-sarja, ROS-detektiosarja, Hoechst 33342, BSA-V, natriumoleaatti, natriumpalmitaatti, TG- ja TC-määrityssarjat, CCK-8-määritys, mitokondrioiden potentiaaliset kalvot, JC-1 PI3K p85, Akt, Bax, -aktiini ja sekundaariset HRP-konjugoidut vasta-aineet.

2.4 Instrumentit

CO₂-hautomo (Forma 371)

Bioturvallisuuskaappi (HERASAFE KS18)

Mikrolevylukija (Multiskan GO)

Käänteinen mikroskooppi (Nikon TS2-S-SM)

Vesihaude, sentrifugi (H1750R), analyyttinen vaaka, kemiluminesenssikuvausjärjestelmä (Azure 600), fluoresenssimikroskooppi (Leica DMi8)