Bushen Huoxue Xiezhuo -keitteen vaikutus munuaiskudoksen apoptoosiin ja fibroosiin rotilla, joilla on 5/6 nefrektomia HIF-1 / PKM2:n perusteella

3.4 Bushen Huoxue Xiezhuo Decoctionin vaikutukset -SMA:n, TGF-:n, FN:n ja kollageeni-1:n proteiiniekspressioon CRF-rottien munuaiskudoksessa

Kuten kuvioista 3-6 näkyy, valeleikkaukseen verrattuna -SMA:n, TGF-:n, FN:n ja kollageeni-1:n proteiiniekspressiot malliryhmän munuaiskudoksessa lisääntyivät merkittävästi (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of α-SMA, TGF-β, FN, and collagen-1 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

Taulukko 2 Bushen Huoxue Xiezhuo Decoctionin vaikutukset seerumin urea-, Scr- ja ₂-MG-tasoihin CRF-rotilla (x̄±s, n=10)

ryhmä	Urea/(mmol/l)	Scr/(μmol/L)	₂-MG/(mg/l)
Valeleikattu ryhmä	6.23±0.63	37.35±0.83	0.98±0.13
Malliryhmä	23.02±0.73*	118.57±1.03*	3.95±1.07*
Pieniannosryhmä	21.23±0.69#	112.45±0.87#	2.57±0.35#
Keskiannosryhmä	18.02±0.54#	93.18±1.17#	1.98±0.09#
Suuriannosryhmä	15.23±0.33#	87.24±1.08#	1.13±0.17#
benatsepriiliryhmä	19.09±0.59#	105.77±0.67#	2.48±0.15#

Huomautus: *P<0.05 vs. sham-operated group; #P<0.05 vs. model group

3.5 Bushen Huoxue Xiezhuo -keitteen vaikutukset HIF-1, PKM2:n ja HK2:n mRNA-ilmentymiseen CRF-rottien munuaiskudoksessa

Kuten kuvasta 7 näkyy, verrattuna valeleikkausryhmään, HIF-1, PKM2:n ja HK2:n mRNA:n ilmentyminen malliryhmän munuaiskudoksessa lisääntyi merkittävästi (P<0.05). Compared with the model group, the mRNA expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

 

Kuva 3. Munuaista tonisoivan, verta aktivoivan ja sameutta poistavan kaavan vaikutukset -SMA-proteiinin ilmentymiseen CRF-rottien munuaiskudoksessa (ICH, × 400)

A. Huijauksellinen ryhmä
B. Malliryhmä
C. Pieniannoksinen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
D. Keskiannoksen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
E. Suuriannoksinen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
F. Benatsepril Group

 

Kuva 4. Munuaista tonisoivan, verta aktivoivan ja sameutta poistavan kaavan vaikutukset TGF-proteiinin ilmentymiseen CRF-rottien munuaiskudoksessa (ICH, × 400)

A. Huijauksellinen ryhmä
B. Malliryhmä
C. Pieniannoksinen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
D. Keskiannoksen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
E. Suuriannoksinen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
F. Benatsepril Group

 

 

Napsauta saadaksesi lisätietoja

 

Wecistanchen tukipalvelu - Lisätietoja yhteistyöstä
Sähköposti:wallence.suen@wecistanche.com

 

3.6 Bushen Huoxue Xiezhuo Decoctionin vaikutukset HIF-1-, PKM2- ja HK2-proteiinien ilmentymiseen CRF-rottien munuaiskudoksessa

Kuten kuvasta 8 näkyy, valeleikkaukseen verrattuna HIF-1, PKM2:n ja HK2:n proteiiniekspressiot malliryhmän munuaiskudoksessa lisääntyivät merkittävästi (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

3.7 Bushen Huoxue Xiezhuo Decoctionin vaikutukset Baxin, Bcl-2:n ja kaspaasi-3:n proteiiniekspressioon CRF-rottien munuaiskudoksessa

Kuten kuvasta 9 näkyy, valeleikkaukseen verrattuna Baxin ja kaspaasi-3:n proteiiniekspressiot malliryhmän munuaiskudoksessa lisääntyivät merkittävästi, kun taas Bcl-2:n proteiiniekspressio väheni merkittävästi (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of Bax and Caspase-3 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased, and the protein expression of Bcl-2 was significantly increased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.

 

Kuva 7. Munuaista tonisoivan, verta aktivoivan ja sameutta poistavan kaavan vaikutukset HIF-1, PKM2- ja HK2-mRNA:n ilmentymiseen CRF-rottien munuaiskudoksessa

A. Huijauksellinen ryhmä
B. Malliryhmä
C. Pieniannoksinen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
D. Keskiannoksen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
E. Suuriannoksinen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
F. Benatsepril Group
Huomautus: Verrattuna valeleikkausryhmään,

∗ P<0.05; Compared with the model group,

#P<0.05

Kuva 8. Munuaista tonisoivan, verta aktivoivan ja sameutta poistavan kaavan vaikutukset HIF-1-, PKM2- ja HK2-proteiineihin CRF-rottien munuaiskudoksessa

A. Huijauksellinen ryhmä
B. Malliryhmä
C. Pieniannoksinen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
D. Keskiannoksen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
E. Suuriannoksinen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
F. Benatsepril Group

 

Kuva 9. Munuaista tonisoivan, verta aktivoivan ja sameutta poistavan kaavan vaikutukset Bax-, Bcl-2- ja kaspaasi-3-proteiinien ilmentymiseen CRF-rottien munuaiskudoksessa

A. Huijauksellinen ryhmä
B. Malliryhmä
C. Pieniannoksinen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
D. Keskiannoksen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
E. Suuriannoksinen munuaisia ​​vahvistava, verta aktivoiva ja sameutta poistava kaavaryhmä
F. Benatsepril Group

Huomautus: Verrattuna valeleikkausryhmään,

∗ P<0.05; Compared with the model group,

#P<0.05

 

4 Keskustelu

Viime vuosina CKD-potilaiden määrä on lisääntynyt, ja myös sen esiintyvyys on kasvanut merkittävästi. Professori Tan Jinchuan ehdotti terapeuttista periaatetta munuaisten ja pernan tonisoimiseksi, verenkierron aktivoimiseksi ja sameuden poistamiseksi. Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction voi säädellä reittejä, kuten autofagiaa, apoptoosia ja fibroosia munuaisten toiminnan suojelemiseksi. Asiaankuuluvat tutkimukset ovat osoittaneet, että raparperi, astragalus, angelica, salvia miltiorrhiza ja niiden vaikuttavat aineet voivat kaikki estää munuaisfibroosia ja suojata munuaisten toimintaa [7]. Tämän tutkimuksen tulokset osoittivat, että malliryhmään verrattuna kaikki Bushen Huoxue Xiezhuo Decoctionin annosryhmät paransivat seerumin Urea-, Scr- ja ₂-MG-pitoisuuksia sekä kollageenikuitujen kertymistä munuaiskudokseen eriasteisesti, mikä viittaa siihen, että Bushen Huoxue Xiezhuo Decoctionilla on tärkeä rooli uusiutuvien fibronaalisten toimintojen suojaamisessa ja suojaamisessa.

Erityisesti samankaltaisia ​​munuaisia ​​suojaavia vaikutuksia on raportoitu Cistanche tubulosalla, klassisella TCM-yrtillä, joka tunnetaan nimellä "aavikon ginseng" ja joka on tunnustettu huippuluokan munuaisia ​​ravitsevaksi lääkeaineeksi [15]. TCM-teoriassa Cistanche tubulosaa arvostetaan suuresti sen kyvystä "elävöittää munuaisten yangia ja täydentää esanssia", ja nykyaikainen tutkimus on vahvistanut, että se sisältää runsaasti aktiivisia ainesosia, kuten ekinakosidia, verbaskosidia ja flavonoideja [15]. Nämä komponentit voivat estää munuaissolujen apoptoosia, edistää munuaissolujen lisääntymistä, korjata vaurioitunutta munuaiskudosta ja laajentaa munuaisten verisuonia – vaikutuksia, jotka vastaavat Bushen Huoxue Xiezhuo Decoctionissa havaittuja munuaisia ​​suojaavia mekanismeja [15]. Tällaiset havainnot korostavat TCM-yrttien potentiaalia, joilla on munuaisia ​​ravitsevia ominaisuuksia, CKD:n hoidossa.

Apoptoosi on yksi tärkeimmistä CRF:n patogeneesin taustalla olevista mekanismeista. Fysiologisissa olosuhteissa herkkä dynaaminen tasapaino säilyy pro-apoptoottisten ja anti-apoptoottisten perheenjäsenten välillä. Kun apoptoosi aktivoituu liikaa, se johtaa patologisiin muutoksiin glomeruluksissa ja munuaistiehyissä, mikä vahingoittaa munuaisten toimintaa. Kun pro-apoptoottinen proteiini Bax aktivoituu, se lisää mitokondrioiden ulkokalvon läpäisevyyttä, mikä johtaa mitokondrioiden sisäkalvopotentiaalin romahtamiseen ja sytokromi C:n (CytC) vapautumiseen sytoplasmaan, mikä aktivoi kaspaasi-9:n ja laukaisee edelleen kaspaasi-cascade-riippuvaisen [8]. Asiaankuuluvat tutkimukset ovat osoittaneet, että proksimaalisissa tubulaarisissa epiteelisoluissa Bax-geenin poistaminen tai Bcl-2:n ilmentymisen lisääminen voi tehokkaasti estää apoptoottista prosessia [9]. Tässä tutkimuksessa havaittiin, että kaikki Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction -annokset vähensivät merkittävästi proapoptoottisten tekijöiden Bax ja Caspase-3 ilmentymistä ja lisäsivät anti-apoptoottisen tekijän Bcl-2 ilmentymistä, mikä viittaa siihen, että Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction voi parantaa munuaisten toimintaa estämällä apoptoottisen reitin.

Munuaisfibroosi on monien sytokiinien välittämä krooninen munuaissairaus, jota säätelevät useat signalointireitit ja jota useat tekijät ohjaavat. Se on yleinen reitti, joka johtaa loppuvaiheen munuaissairauteen, jolle on tunnusomaista munuaiskudosvaurio, tulehdus, ECM-kertymä ja tubulaarinen epiteeli-mesenkymaalinen siirtymä. Munuaisfibroosi sisältää glomerulaarisen fibroosin ja tubulointerstitiaalisen fibroosin [8]. Tutkimukset ovat vahvistaneet, että varhaisen CRF:n pääasiallinen patologinen ilmentymä on munuaisfibroosi, ja munuaisfibroosin etenemisen viivyttämisellä on suuri merkitys munuaisvaurion vähentämisessä ja munuaisten vajaatoiminnan etenemisen lievittämisessä [10]. TGF- on avainalatyyppi, joka ohjaa fibroosia, joka säätelee ECM-synteesiä Smad-signalointireitin kautta. FN osallistuu solujen adheesioon, migraatioon ja ECM-kokoonpanoon. Pääasiallinen liiallisen ECM-kertymän solulähde on myofibroblastit, ja niiden rakenteellinen transdifferentiaatio on avaintekijä munuaisfibroosin esiintymisessä ja kehittymisessä. Kollageeni-1 on pääasiassa peräisin myofibroblasteista, ja -SMA, joka on yksi myofibroblastien tärkeimmistä morfologisista ominaisuuksista ja aktivaatiomarkkereista, molempien ilmentymistasot korreloivat positiivisesti munuaisfibroosin asteen kanssa [11]. Asiaankuuluvat tutkimukset ovat osoittaneet, että erilaisissa kroonisissa munuaissairauksissa -SMA:n ja kollageeni-1:n mRNA- ja proteiiniekspressiot lisääntyvät merkittävästi, ja siihen liittyy vakava munuaisfibroosi [12]. Tässä tutkimuksessa Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction vähensi merkittävästi fibroosimarkkerien, kuten -SMA:n, TGF-:n, FN:n ja kollageeni-1:n, ilmentymistä, mikä osoittaa, että Bushen Huoxue Xiezhuo Decoctionilla on tärkeitä vaikutuksia munuaistoiminnan parantamiseen ja munuaisfibroosin etenemisen hidastumiseen.

HIF-1 /PKM2-signalointireitti liittyy läheisesti apoptoosiin. HIF-1 voi edistää apoptoosia aktivoimalla transkriptionaalisesti Baxia ja inhiboimalla Bcl-2:ta, ja PKM2 voi vaikuttaa säätelemällä apoptoosiin liittyviä proteiineja, kuten p53:a tuman translokaation jälkeen [13]. Yhtenä nisäkkään hypoksisen vasteen tärkeimmistä säätelijöistä HIF-1 voi lisätä TGF-ekspressiota HIF-1:n kautta hypoksisissa munuaisten tubulusepiteelisoluissa munuaisten interstitiaalisen fibroosin mallissa, mikä aktivoi Smadiin liittyviä reittejä ja indusoi fibroosimarkkerien, kuten -SMA:n ja Collageenin, ilmentymistä. Sen lisäksi, että PKM2 osallistuu apoptoosin säätelyyn, se tukee myös fibroottisten solujen energiantarpeita säätelemällä glykolyyttistä aineenvaihduntaa [14]. Tämän tutkimuksen tulokset osoittivat, että HIF-1, PKM2- ja HK2-tasot CRF-malliryhmän munuaiskudoksessa nousivat merkittävästi, kun taas TCM-ryhmien tasot laskivat merkittävästi, mikä viittaa siihen, että Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction voi estää apoptoosia ja viivyttää munuaisfibroosia tukahduttamalla renaalkudoksen {{M2}-polun}aktivaatiota}

Yhteenvetona voidaan todeta, että Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction voi estää solujen apoptoosia ja fibroosia CRF-rotilla, parantaa munuaisvaurioita CRF-mallirotilla, ja sen mekanismi voi liittyä HIF-1 /PKM2-signalointireitin säätelyyn.

Viitteet

[1] American Journal of Health-System Pharmacy. Kdigo 2024 kliinisen käytännön ohje kroonisen munuaissairauden arviointiin ja hoitoon[J]. Kidney International, 2024, 105(4S): 117-314.[2] Zhang L, Liu L, Bai M, et ai. Hypoksian aiheuttama HE4 tubulaarisissa epiteelisoluissa edistää solunulkoisen matriisin kertymistä ja munuaisfibroosia NF-κB[J]:n kautta. FASEB Journal, 2020, 34(2): 2554-2567.[3] Hu D, Wang L, Zhang Y, et ai. Sanqi-oraaliliuos parantaa munuaisfibroosia estämällä fibroblastien aktivaatiota HIF-1 /PKM2/glykolyysireitin kautta kroonisessa munuaissairaudessa[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2024, 335: 118679.[4] Palsson-Mcdermott EM, Curtis AM, Goel G, et ai. Pyruvaattikinaasi M2 säätelee Hif-1-aktiivisuutta ja IL-1-induktiota ja on kriittinen tekijä Warburgin vaikutukselle LPS-aktivoiduissa makrofageissa [J]. Cell Metabolism, 2015, 21(1): 65-80.[5] Katso EJ, Cullen V. Kommentti KDIGO:n kliinisen käytännön ohjeen 2021 päivityksestä kroonisen munuaissairauden verenpaineen hallintaan[J]. Nephrology (Carlton, Vic), 2025, 30(1): e14414.[6] Wu ZH, Cao WX, Tan M, et ai. Raparperi Xiezhuo Decoctionin vaikutusten tutkiminen autofagiaan ja apoptoosiin rotilla, joilla on krooninen munuaisten vajaatoiminta mTORC1/p70S6K-reitin perusteella [J]. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research, 2023, 34(2): 321-324.[7] Wang J, Li YT, Liu DW, et ai. Raparperiantrakinonien tärkeimpien aktiivisten aineosien mekanismia munuaisfibroosia vastaan ​​on edistytty tutkimuksessa[J]. Traditional Chinese Medicine Research, 2023, 36(10): 92-96.[8] Askari H, Seifi B, Kadkhodaee M, et ai. Rikkivedyn suojaavat vaikutukset krooniseen munuaissairauteen vähentämällä oksidatiivista stressiä, tulehdusta ja apoptoosia [J]. EXCLI Journal, 2018, 17:14–23.[9] Solà-Riera C, García M, Ljunggren HG, et ai. Hantavirus estää apoptoosia estämällä mitokondrioiden kalvopotentiaalin menetyksen eloonjäämistä edistävän tekijän BCL-2[J] ylössäätelyn kautta. PLoS Pathogens, 2020, 16(2): e1008297.[10] Yuan L, Wang L, Wang H, et ai. Icariini estää Epo-promoottorin hypermetylaatiota, säätelee perisyytti-myofibroblastimuutosta ja parantaa munuaisanemiaa 5/6 rotilla, joilta on poistettu munuaiset [J/OL]. Kiinan Materia Medican farmakologia ja klinikat: 1-17 [2025-12-17]. https://doi.org/10.13412/j.cnki.zyyl.20250408.004.[11] Sravani S, Saifi MA, Godugu C. Riociguat parantaa munuaisvaurioita ja fibroosia eläinmallissa [J]. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020, 530(4): 706-712.[12] Li L, Zhou G, Fu R, et ai. Balanophora polyandra Griffistä (BPP) uutetut polysakkaridit parantavat munuaisfibroosia ja EMT:tä estämällä Hedgehog-reittiä [J]. Journal of Cellular and Molecular Medicine, 2021, 25(6): 2828-2840.[13] Rana NK, Singh P, Koch B. CoCl2-simuloitu hypoksia indusoi solujen lisääntymistä ja muuttaa angiogeneesiin ja apoptoosiin osallistuvien hypoksiaan liittyvien geenien ilmentymismallia [J]. Biological Research, 2019, 52(1): 12.[14] Wang Z, Yu J, Hao D, et ai. PKM2-aktivaattoriin TEPP-46 reagoivat transkriptomiset allekirjoitukset hyperglykeemisissä ihmisen munuaisten proksimaalisissa epiteelisoluissa [J]. Frontiers in Endocrinology, 2022, 13: 965379.[15] Chengdu WeCistanche Bio-Tech., Co Ltd. Cistanche munuaisten ravitsemiseen[EB/OL]. https://www.xjcistanche.com/cistanche-extract-product/cistanche-for-nourishing-kidney.html, 1.8.2022.