Inflammatoristen ihmisen napanuoran mesenkymaalisten stroomasolujen kerta- ja toistuvan annostelun vertailu polymikrobisen sepsiksen hiirimallissa

Yhteenveto

Mesenkymaaliset stroomasolut (MSC:t) parantavat prekliinistä sepsistä ja sepsikseen liittyvää akuuttia munuaisvauriota (SAAKI), mutta kerta-annoksen MSC-solujen kliiniset tutkimukset eivät ole osoittaneet vankkaa tehoa. Tässä tutkimuksessa tutkittiin uuden MSC-tuotteen (CD362-valitut ihmisen napanuorasta johdetut MSC:t [hUC-MSC:t]) immunomoduloivia vaikutuksia hiiren endotoksemia- ja polymikrobiaalisissa sepsismalleissa. Aluksi hiiret saivat intraperitoneaalista (ip) lipopolysakkaridia (LPS) ja sen jälkeen yksittäisiä ip-annoksia hUC-MSC:itä tai vehikkeliä. Seuraavaksi hiirille tehtiin umpisuolen ligaatio ja pistos (CLP), mitä seurasi suonensisäiset (iv) annokset hUC-MSC:itä 4 tunnin tai 4 ja 28 tunnin kohdalla. Analyyseihin sisältyivät biokemiallisten indeksien, tulehdusvälittäjien ja AKI-biomarkkerin NGAL seerumi/plasmamääritykset; peritoneaalisten makrofagien (LPS) ja munuaistensisäisten immuunisolualapopulaatioiden (CLP) monivärinen virtaussytometria ja munuaisten histologia/immunohistokemia (CLP). 72 tuntia LPS-injektioiden jälkeen hUC-MSC:t vähensivät seerumin tulehdusvälittäjiä ja peritoneaalista makrofagien M1/M2-suhdetta. Toistetut, mutta eivät yksittäiset hUC-MSC-annokset, jotka annettiin 48 tuntia CLP:n jälkeen, johtivat tulehdusvälittäjien seerumipitoisuuksien alenemiseen, plasman NGAL:n alenemiseen ja sepsikseen liittyvän munuaistensisäisten T-solujen ja myeloidisten solujen alapopulaatioiden vähenemiseen. Kaikkien 48-h seerumin/plasman analyyttien hierarkkinen klusterointianalyysi osoitti toistuvan annoksen hUC-MSC CLP-eläinten osittaisen yhteisryhmittymisen valeryhmän kanssa, mutta se ei paljastanut selkeää hoitovasteen tunnusmerkkiä. Pääteltiin, että CD{28}}valittujen hUC-MSC-solujen toistuvia annoksia tarvitaan moduloimaan systeemisiä ja paikallisia immuuni-/tulehdustapahtumia polymikrobisessa sepsiksessä ja SA-AKI:ssa. Yksilöiden välinen vaihtelu ja kerta-annoksen MSC-annon tehon puute CLP-mallissa ovat yhdenmukaisia ​​varhaisen vaiheen kliinisistä tutkimuksista tähän mennessä tehtyjen havaintojen kanssa.

Avainsanat

Akuutti munuaisvaurio · Mesenkymaalinen stroomasolu · Regeneratiivinen lääketiede · Sepsis · Tulehdus · Soluterapia

Napsauta tästä ostaaksesi Cistanche-lisäosan

Johdanto

Sepsikselle on tyypillistä hengenvaarallinen elinten toimintahäiriö, joka johtuu isännän epäsäännöllisestä vasteesta bakteeri-, sieni-, virus- ja loisten aiheuttamaan infektioon [1]. Sepsikseen sairastuu vuosittain lähes 50 miljoonaa ihmistä maailmanlaajuisesti, mikä johtaa usein vakaviin systeemisiin seurauksiin ja elinvammoihin, mukaan lukien akuutti munuaisvaurio (AKI), joka johtaa noin 11 miljoonan kuolemaan [2, 3]. Mesenkymaaliset stroomasolut (MSC) ovat monipotentteja soluja, joilla on laajat immuunimodulatoriset ominaisuudet ja jotka voidaan eristää useista kudoksista [4]. Nyt tiedetään hyvin, että MSC tarjoaa potentiaalisen sairautta moduloivan hoidon sepsikselle ja sepsikseen liittyvälle AKI:lle (SA-AKI) [5, 6]. Useat viimeaikaiset tutkimukset, joissa käytettiin hiiren ja rotan umpisuolen ligaatiota ja pistosta (CLP), lipopolysakkaridia (LPS) tai ulosteen peritoniittimalleja, ovat osoittaneet, että MSC:n systeeminen antaminen voi vähentää tulehdusta, torjua bakteeri-infektiota ja parantaa vaurioituneen kudoksen korjausta. sepsis [7–11], mukaan lukien SA-AKI, [10, 12–15] moduloimalla tulehdusta edistävien ja anti-inflammatoristen tilojen välistä tasapainoa.

Äskettäinen tutkimus terveillä aikuisilla vahvisti, että ennaltaehkäisevä suonensisäinen (iv) hoito 4 × 106 MSC/kg saa aikaan varhaisia ​​immunomodulatorisia vaikutuksia isännän vasteeseen LPS:lle [16]. Lisäksi allogeenisen MSC:n antaminen potilaille, joilla oli septinen sokki (NCT01849237, NCT02421484 ja NCT02328612) ja sepsikseen liittyvä akuutti hengitysvaikeusoireyhtymä (NCT01775774), osoitti hyvän turvallisuuden ja siedettävyyden vaiheen 1 kliinisissä tutkimuksissa [16–19]. Näistä rohkaisevista tuloksista huolimatta Galstyan et ai. raportoi myös, että yksittäinen iv MSC-annos ei estänyt kuolemaa sepsikseen liittyvästä elinten toimintahäiriöstä, mikä lisää mahdollisuutta, että lisäannoksia voidaan tarvita merkittävän kliinisen hyödyn saamiseksi [17]. Äskettäinen ei-sepsis, vaiheen 2 tutkimus (NCT01602328), jossa kerta-annoksia allogeenista MSC:tä annettiin pyörteensisäisesti potilaille, joilla oli steriili AKI kardiopulmonaalisen ohitusleikkauksen jälkeen, ei myöskään osoittanut suotuisaa vaikutusta elinten toimintahäiriöihin ja potilaiden eloonjäämiseen lupaavista tutkimuksista huolimatta. prekliiniset ja vaiheen 1 tutkimustulokset [20]. Sepsiksen ja muiden akuuttien tulehduksellisten oireyhtymien varhaisen vaiheen aikana toistuva annostelu voi lisätä tai laajentaa MSC:n sairautta moduloivia vaikutuksia, on edelleen suhteellisen alitutkittua prekliinisillä ja translaatiotasoilla. Lisäksi epätäydellinen tietämys vaikutusmekanismista, annosvasteesta ja optimaalisista kliinisistä indikaattoreista MSC:n antamiselle sepsiksessä rajoittaa onnistuneiden tutkimusten suunnittelua [5, 21, 22].

Tässä tutkimuksessa suoritimme esikliinisen tutkimuksen CD362-valitun ihmisen napanuorasta johdetun MSC:n (hUC-MSC) anti-inflammatorisista vaikutuksista sepsiksen hiirimalleissa. Tämä pintamarkkerilla valittu hUC-MSC on uusi terapeuttinen tuote, joka on osoittanut tehokkuuden bakteeriperäisen keuhkokuumeen ja sepsiksen rottamalleissa, kun sitä annettiin aikaisin taudin alkamisen jälkeen [23, 24]. Kliinisen asteen tutkimuslääkkeenä (IMP) hUC-MSC:llä on parhaillaan käynnissä vaiheen I/II tutkimus potilailla, joilla on keskivaikea tai vaikea akuutti hengitysvaikeusoireyhtymä (ARDS) COVID{11}}:n aiheuttamana (NCT03042143) ja useilla potilailla. autoimmuunisairaudet (POLARISE). Pyrimme osoittamaan hUC-MSC:n yksittäisannosten anti-inflammatorisen potentiaalin LPS:n ja CLP:n aiheuttaman endotoksemian/polymikrobiaalisen sepsiksen hiirimalleissa [25, 26] ja viimeksi mainitussa määrittämään, annetaanko hUC-MSC:tä toinen annos taudin varhainen kulku johti suurempiin tai useammin hyödyllisiin vaikutuksiin systeemiseen tulehdukseen ja elinspesifiseen vaurioon, josta esimerkkinä SA-AKI.

Cistanche tubulosa

Materiaalit ja menetelmät

1. Solut

Anti-CD362 plus -valittuja hUC-MSC:itä viljeltiin eettisesti hankitusta ihmisen napanuorakudoksesta, joka oli hankittu Tissue Solutions Ltd:ltä (Glasgow, UK). CD362:n plus hUC-MSC:n primaariset eristys- ja ekspansioviljelmät suoritettiin kuten aiemmin on kuvattu [19, 23, 27]. Kryosäilötyt injektiopullot (1 x 107 1 ml:ssa) anti-CD362 plus -valittua hUC-MSC:tä sulatettiin ja siirrettiin 9 ml:aan fosfaattipuskuroitua suolaliuosta (PBS). Joko trypaaninsinisellä väriaineella tai automaattisella solulaskimella (NucleoCounter® NC-200™, Chemometec A/S, Tanska) tehdyn elävien/kuolleiden analyysin jälkeen tarvittava määrä soluja pelletoitiin sentrifugoimalla 400 x g 5 minuutin ajan ja solut suspendoitiin uudelleen 100 ul:aan steriiliä suolaliuosta intraperitoneaalista (ip) tai iv-injektiota varten.

2. Eläintoimenpiteet

Kaikki eläintoimenpiteet suoritettiin Barcelonan yliopiston Animal Experimentation Ethical Committeen luvalla (nro 255/17) ja Irlannin terveystuotteiden sääntelyviranomaisen luvalla (AE19125/P082 ja AE19125/P066) ja hyväksyttiin. NUI Galway Animal Care Research Ethics Committeen toimesta. Kaikki toimenpiteet suoritettiin lisensoiduissa eläintiloissa NUI Galwayssa ja Barcelonan yliopistossa.

Endotoksemian LPS-mallissa käytettiin 10-12 viikon ikäisiä urospuolisia C57BL/6-hiiriä Charles River Ltd:ltä, Kent, UK. Hiirille injektoitiin ip:llä 5 ug/g LPS:ää (LPS 0111:B4, luettelonumero L2630, Sigma Aldrich, UK) 100 ul:ssa steriiliä suolaliuosta. Hiiret pidettiin 3-5 hiiren ryhmissä/häkki tutkimuksen aikana yksilöllisesti tuuletetuissa häkeissä. Yksittäiset ip-injektiot 2,5 x 105 hUC-MSC:tä tai yhtä suuria tilavuuksia vehikkeliä (steriiliä suolaliuosta) annettiin 4 tuntia LPS-injektioiden jälkeen. Eläimiä seurattiin 4 tunnin välein tutkimuksen loppuun asti käyttämällä hätäpistetaulukkoa ja tukitoimenpiteitä ennalta määrätyn protokollan mukaisesti. Humaani eutanasia suoritettiin määritellyssä kokeen päätepisteessä tai aikaisemmin, jos eläimet ylittivät ennalta määritellyn vaikeusastekynnyksen. Eutanasian aikana vatsakalvon eritteet kerättiin virtaussytometria-analyysiä varten kalastamalla varovasti 5 ml steriiliä PBS:ää vatsaonteloon ja sieltä ulos.

Umpisuolen ligaatio ja pistos (CLP) suoritettiin {{0}} viikon ikäisille urospuolisille C57BL/6-hiirille (Charles River Ltd., UK). Hiiret saivat buprenorfiinia {{1{{2{23}}}}},1 mg/kg (Richter Pharma AG, Itävalta) ihonalaisesti 25-30 min ennen toimenpidettä ja ne nukutettiin 1:lla.{{8 }} prosenttia isofluraania (O2-virtauksella 0,5 l/min) NUI Galwayssa tai Anesketinilla (100 mg/ml; Dechra Veterinary Products SLU, Espanja) ja Rampunilla (20 mg/ml; Bayer, Saksa) Barcelonan yliopistossa. Vatsan alaosa ajeltiin ja puhdistettiin 4-prosenttisella klooriheksidiinillä tai povidoni-jodilla ja viillettiin 1 cm pystysuoraan keskiviivaa pitkin. Umpisuole ulkoistettiin ja distaalinen 50 prosenttia ligoitiin käyttämällä 4.{19}},0 M ompeleita. Umpisuolimateriaalia irrotettiin läpi- ja läpipistosta 21-mittaneulalla, ja tippa ulostetta erittyi ennen kuin umpisuole palautettiin vatsaonteloon ja lihaksen ja ihon ompeleminen kiinni. Valeleikkauksille hiirille tehtiin identtinen toimenpide, mukaan lukien vatsakalvon avaaminen ja suolen paljastaminen, mutta ilman umpisuolen ligaatiota ja perforaatiota. Hiiret saivat 0,5 ml Gelofusinea (Braun Melsungen AG, Saksa) ip-instillaatiolla ennen haavan sulkemista. Leikkauksen jälkeinen tuki koostui laimennettuna buprenorfiinista, joka annettiin ihonalaisesti (sc) joka 8-12 h ennalta määritettyihin päätepisteisiin saakka (48 tai 72 tuntia yksittäisissä kokeissa). 1 x 106 hUC-MSC:n tai vastaavien tilavuuksien anto vehikkeliä (steriiliä suolaliuosta) suoritettiin suonensisäisesti häntälaskimon kautta 4 tuntia tai 4 ja 28 tuntia CLP:n jälkeen. Säännöllinen seuranta ja tuki toteutettiin eettisesti hyväksytyn protokollan mukaisesti. Humaani eutanasia suoritettiin määritellyssä kokeellisessa päätepisteessä tai aikaisemmin, jos eläimet ylittivät ennalta määritellyn vakavuusrajan.

Soluannokset kahdelle tutkimuksessa käytetylle eläinmallille valittiin aiempien raporttien perusteella ihmisen MSC:n anti-inflammatorisista vaikutuksista samanlaisissa malleissa [9, 13, 14, 28, 29]. LPS-tutkimuksen ryhmäkoot valittiin empiirisesti tämän mallin asiaankuuluvien aikaisempien raporttien perusteella [30, 31]. CLP-tutkimuksen ryhmäkoot määritettiin plasman NGAL:n ensisijaisen tuloksen perusteella 24 tuntia leikkauksen jälkeen. Pilottikokeen tietojen perusteella laskettiin 9 eläimen otoskoko ryhmää kohden antamaan 90 prosentin teho olettaen 5 prosentin merkitsevyystasoa ja kaksipuolista testiä (http://www.3rs-reduction.co.uk/html). /6__teho_ja_näyte_koko.html). Odotettua 10 prosentin poistumisprosenttia käytettiin lopullisen ryhmän koon n=10 valinnassa.

Cistanche-uute

3. Verinäytteenotto ja kudosten hankinta

Laskimoverinäytteet, joiden tilavuus oli enintään 20 µl, otettiin ajoittain häntä- ja kasvojen suonista aseptisella tekniikalla käyttämällä 25-21-mittaneuloja, ja ne kerättiin hepariinia (VWR International, Dublin, Irlanti) sisältäviin putkiin. Lopullinen verinäyte otettiin sydänpunktiolla eutanasian aikana. Seerumi kerättiin mikroputkiin seerumigeelin ja hyytymisaktivaattorin kanssa (Sarstedt, Wexford, Irlanti). Plasma- ja seeruminäytteet valmistettiin sentrifugoimalla 10,000×g 10 minuutin ajan. Seeruminäytteitä säilytettiin -80 asteessa, ja NationWide Laboratories (Lancashire, UK) analysoi sen jälkeen biokemialliset parametrit. Perna, keuhkot, munuaiset ja maksa leikattiin välittömästi eutanasian jälkeen.

4. Immunomääritykset

Plasman neutrofiiligelatinaasiin liittyvän lipokaliinin (NGAL) pitoisuus määritettiin hiiren Lipocalin-2/NGAL Duo-Set ELISA -kehityssarjalla (R&D Systems, Minneapolis, MI, USA) valmistajan ehdottaman protokollan mukaisesti (yksityiskohdat osiossa Supplementary Methods ). Seerumissa olevien sytokiinien ja kemokiinien moninkertaiseen kvantifiointiin käytettiin Bio-Plex Pro hiiren sytokiinistandardin 23-plex-määritystä (Bio-Rad, Accuscience) valmistajan ohjeiden mukaisesti. Näytteet analysoitiin Bioplex 200 multiplex ELISA-järjestelmällä (BioRad, Accuscience).

5. Munuaiskudososien puolikvantitatiivinen pisteytys

Munuaisen värjätyt leikkeet analysoitiin sokeutetulla tavalla valomikroskopialla 40-kertaisella suurennuksella käyttäen Olympus BX43 kirkaskenttämikroskooppia (Olympus, Center Valley, PA) ja IS TCapture -ohjelmistolla (Tucsen Photonics Co., Fujian, Kiina). Jokaisesta munuaisesta otettiin kaksikymmentä ei-päällekkäistä kenttää värjäytyneestä osasta, ja positiivisesti värjäytynyt alue pisteytti sokeutetun tarkkailijan (A) tubulaarisen laajentumisen, kipsikudoksen ja nekroosin (PAS) ja (B) NGAL-ilmentymisen suhteen [32] Pisteytys suoritettiin 0-4 puolikvantitatiivisella pisteytysasteikolla (yksityiskohdat lisämenetelmissä). Keskimääräiset pisteet laskettiin kullekin munuaiselle ja lopulliset tulokset ilmaistiin ryhmän keskiarvoina ± SD.

Cistanche jauhe

Keskustelu

Sepsis ja sen toistuva komplikaatio SA-AKI ovat suuria kansanterveyshaasteita, koska tehokkaita hoitoja ei ole jatkuvasti ja myöhäisvaiheen kliinisten tutkimusten tulokset ovat pettymys [2, 3]. Useat viimeaikaiset prekliiniset tutkimukset ovat raportoineet tuloksia, jotka osoittavat, että eri lähteistä peräisin olevilla MSC:illä ja niiden tuotteilla on positiivisia vaikutuksia taudin vakavuuteen ja eloonjäämiseen sepsis- ja AKI-malleissa [7, 8, 11–15]. Siitä huolimatta MSC:n kliiniset hyödyt sepsiksessä ja SA-AKI:ssa ovat edelleen todistamattomia, ja ihmispotilaista on saatavilla vain vähän tietoa [5]. Tähän mennessä kliiniset tutkimukset ovat dokumentoineet, että kerta-annos iv MSC-infuusio LPS:n antamisen, sepsiksen ja ARDS:n yhteydessä on turvallista ja mahdollista [16–19], mutta se ei selvästi vähennä sepsikseen liittyvän elinten vajaatoiminnan aiheuttamaa kuolemaa [17]. . Tässä tutkimuksessa vertailimme yksilöllisen ihmisen MSC-terapeuttisen tuotteen (CD362--valittu hUC-MSC) kerta- ja kaksiannosten laskimonsisäisen annon vaikutuksia polymikrobisen sepsiksen hiiren CLP-mallissa. Aluksi samasta MSC-tuotteesta äskettäin raportoitujen tulosten mukaisesti bakteeriperäisen keuhkokuumeen ja sepsiksen rottamalleissa [23, 24] vahvistimme hUC-MSC:n varhaisen antamisen mahdollisuuden moduloida LPS:n aiheuttamaa systeemistä tulehdusta hiirillä. Polymikrobisen sepsiksen hiiren CLP-mallissa tuloksemme kuitenkin osoittivat, että hUC-MSC:n yksittäisillä annoksilla, jotka annettiin iv 4 tuntia ulosteen peritoniitin induktion jälkeen, ei ollut selvää hyödyllistä vaikutusta systeemiseen tulehdukseen tai elinspesifiseen (munuais)kudosvaurioon. Sitä vastoin toisen suonensisäisen hUC-MSC-annoksen antaminen 24 tuntia myöhemmin johti useisiin signaaleihin parantuneesta tulehduksesta ja munuaisvauriosta 48 tunnin kuluttua sepsiksen alkamisesta. Tästä huolimatta kaksinkertaisen annoksen hoito-ohjelman eloonjäämishyötyä ei osoitettu. Tuloksemme korostavat, että on tärkeää suorittaa MSC-terapeuttisten tuotteiden in vivo -tutkimuksia useissa malleissa ja raportoida sekä positiivisista että negatiivisista prekliinisistä tuloksista, jotta kliinisen käännöksen ja tutkimusten suunnittelun tiedot ovat paremmin. Yhdessä tuloksemme tarjoavat myös näyttöä siitä, että anti-inflammatoristen MSC-tuotteiden varhaisten kerta-annoshoitojen rajallinen tai puuttuva hyöty sepsiskokeissa voidaan ainakin osittain voittaa toistuvalla annostuksella.

Hiiren LPS-mallissa yksi, varhainen hUCMSC-annos moduloi sekä synnynnäisten että adaptiivisten tulehdusvälittäjien systeemisiä tasoja vähintään 72 tunnin ajan, vaikkakaan ilman ilmeistä vaikutusta vakavuuspisteisiin ja eloonjäämiseen. Peritoneaalisten makrofagien fenotyyppianalyysi tarjosi todisteita siitä, että hUC-MSC:n antaminen liittyi ennustettuun paikalliseen immuunijärjestelmää moduloivaan vaikutukseen – makrofagien vinoutumiseen kohti M2-polarisaatiota, mikä on yhdistetty tulehdusvaurion paranemiseen ja kudosten korjauksen edistämiseen [29, 35] ja Todennäköisesti välittyy MSC-ristikeskustelu residenttien myeloidisolujen kanssa [36]. Viimeaikaiset tutkimukset ovatkin raportoineet, että MSC:n terapeuttinen immunomodulaatio sepsiksen taustalla voi olla riippuvainen niiden fagosytoosista myeloidisolujen (mononukleaaristen fagosyyttien) toimesta, jotka sitten aktivoituvat vaihtoehtoisesti, mikä johtaa IL-10:n ja muiden parakriinisten anti- tulehdusvälittäjät [7, 27, 37]. Vaikka olisi ollut mielenkiintoista määrittää, tehostavatko tällaisen immunomodulaation hyödyt toistuvat hUC-MSC-annokset LPS:n antamisen jälkeen, päätimme, että kokeellisella mallilla, joka heijastaa paremmin kehittyvää sepsistä, olisi enemmän kliinistä merkitystä. Siten, koska hUC-MSC:n biologinen aktiivisuus hiirillä oli vahvistettu LPS-annostelulla, hiiren CLP-mallia käytettiin toistuvaan annostukseen liittyvien anti-inflammatoristen vaikutusten karakterisointiin ja hUC-MSC:n munuaisspesifisten vaikutusten kvantifiointiin polymikrobisen sepsiksen yhteydessä. ja SA-AKI. Käsissämme tämä malli yhdistettiin kohtalaisen vaikeaan sepsikseen (noin 70 prosenttia, 50 prosenttia ja 40 prosenttia eloonjäämisajan 48, 96 ja 168 tunnin kohdalla hoitamattomilla eläimillä) ilman ilmeistä maksan ja munuaisten vajaatoimintaa. Mallia koskevat havainnot, mukaan lukien kuolleisuusluvut ja seerumin maksaparametrien ja albumiinin suuntaukset, ovat sopusoinnussa Li et al. raportoiman hiiren CLP:n erittäin kattavan profiloinnin kanssa. [38], joka myös dokumentoi alentunutta ruumiinlämpöä, verenpainetta ja sykettä ensimmäisen 48 tunnin aikana CLP:n jälkeen. Mielenkiintoista, kun Li et ai. dokumentoitu lisääntynyt seerumin kreatiniini- ja veren ureatyppipitoisuus 8 ja 16 tuntia CLP:n jälkeen, niiden tulokset osoittavat, että nämä munuaisten toiminnalliset biomarkkerit olivat pudonneet normaaleille (tai normaalin alapuolelle) 48 tunnissa – ehkä heijastaa muuttuneen aineenvaihdunnan/lihasmassan kehittyviä vaikutuksia. nämä biomarkkerit mallin edetessä [38]. Tämän mukaisesti seerumin/plasman ja munuaiskudoksen analyysi 48 tunnin kohdalla osoitti merkittävää systeemistä tulehdusta ja munuaisvauriovastetta ilman ilmeisiä todisteita iskeemisestä vauriosta/nekroosista. Nämä jälkimmäiset analyysit antoivat selkeimmän todisteen kaksinkertaisen annoksen hUCMSC-hoidon moduloivasta vaikutuksesta polymikrobisen sepsiksen vaikeusasteeseen verrattuna kerta-annokseen, joka, toisin kuin äskettäin raportoitu rotan CLP-mallissa [24], oli mahdoton erottaa toisistaan. suolaliuoksella käsitellystä CLP-ryhmästä kaikista tutkituista indekseistä. Erityisesti kliinisesti merkityksellinen AKI-biomarkkeri, NGAL, osoittautui arvokkaaksi sepsiksen vakavuuden ja hoidon vaikutuksen erottelijaksi tässä mallissa ja voi olla tärkeä biomarkkeri tulevissa sepsiksen ja SA-AKI:n soluterapiatutkimuksissa [33, 39]. ].

Tuloksemme suonensisäisen MSC:n vaikutuksesta eloonjäämiseen pienissä sepsiksen eläinmalleissa ovat päinvastaisia ​​kuin eräät muut raportit [28, 40], mutta erityisesti ne ovat sopusoinnussa allogeenisten MSC:iden havaittujen vaikutusten kanssa ihmisillä tehdyissä kliinisissä tutkimuksissa [5, 16– 18, 41]. Tässä suhteessa korostamme julkaisuharhaisuuden – erityisesti positiivisia vaikutuksia heijastavien tulosten valikoivan julkaisemisen – mahdollista roolia tärkeänä tekijänä epärealistisissa odotuksissa kerta-annoksen MSC-hoitojen ja muiden kehittyneiden hoitojen tehosta kliinisen varhaisvaiheessa. käännös [42]. Sun et ai., äskettäisessä meta-analyysissä 29 eläintutkimuksesta MSC-hoitojen tehokkuudesta sepsiksessä, havaitsivatkin merkittävää julkaisuharhaa ja epäselvyyttä optimaalisesta soluannoksesta näissä esikliinisissä raporteissa [43]. Siitä huolimatta raportoimme myös erottuvista positiivisista löydöksistä, jotka voivat auttaa edistämään UC-MSC:iden translaatiotavoitteita sepsiksessä tai muissa systeemisissä ja elinspesifisissä tulehdussairauksissa, kuten AKI-, maksa- tai hengityselinsairauksissa. Molemmissa malleissa nämä molekyylimuutokset osoittavat hUC-MSC:n monimutkaisia ​​vuorovaikutuksia Th1- ja Th2-immuunivasteen kanssa. Tällaisilla vaikutuksilla T-efektorisolujen aktivaatioon ja T-auttajafenotyyppitasapainoon voi olla keskeinen rooli sepsiksen akuutin vaiheen modulaatiossa, koska immuuniefektorien umpimähkäinen, säätelemätön aktivoituminen, mikä johtaa verenkierrossa olevien sytokiinien korkeisiin tasoihin, myötävaikuttaa usean elimen vajaatoimintaan [44]. ja T-solujen tapauksessa sitä voi seurata laajalle levinnyt apoptoosi ja sitä seuraavat immuunipuutokset [45]. On myös osoitettu, että MSC:n antaminen voi vähentää paikallista kudostulehdusta säätelemällä sytokiinien homeostaasia ja vähentämällä immuunisolujen kulkua elimiin [44]. Tämän mukaisesti kvantitatiivinen analyysimme useista munuaistensisäisistä immuunisolupopulaatioista 48 tuntia CLP:n aiheuttaman sepsiksen jälkeen paljasti sepsiksen aiheuttamia puutteita, jotka vaikuttivat sekä synnynnäisiin että adaptiivisiin efektoreihin, mukaan lukien äskettäin raportoitujen kaksoisnegatiivisten T-solujen häviäminen. olla varhaisia ​​​​vastaajia AKI:lle [46]. Erityisesti kaksinkertaisella mutta ei kerta-annoksella hUC-MSC:llä hoidetuilla eläimillä oli näyttöä munuaisensisäisen immuunisolujen ehtymisen palautumisesta. Koska samanlaisia ​​suuntauksia havaittiin myös keuhkoissa ja pernassa, tuloksemme osoittavat, että MSC:n toistuva suonensisäinen annostelu voi yleisesti parantaa immuunisolujen ehtymistä muista kuin lymfoidisista ja lymfoidisista elimistä – sepsiksen puoli, joka on yhdistetty myöhempään kuolleisuuteen. sekundaarinen infektio [47, 48]. Hoitamattomien CLP-eläinten intrarenaalisten CD45 plus -solujen lisääntyneen solukuoleman lisähavainnon perusteella on uskottavaa, että tämä kuvastaa hUC-MSC:n suoria tai epäsuoria vaikutuksia mitokondrioiden toimintahäiriöiden ja pro-apoptoottisen signaalin vähentämisessä [49–51]. Siitä huolimatta tarvitaan tarkempia kokeita sellaisten mekanismien täydelliseksi selvittämiseksi, joilla systeeminen MSC:n antaminen säilyttää myeloidi- ja/tai lymfoidisolujen lukumäärän sepsiksessä, ja sen määrittämiseksi, voidaanko niitä hyödyntää terapeuttisesti.

Cistanche-kapselit

Kun otetaan huomioon luontainen vaihtelevuus, me ja muut havainnoimme hiiren CLP-mallin yksittäisillä tuloksilla, oletimme, että hierarkkinen klusterointianalyysi useiden kiertävien tulehdukseen liittyvien välittäjien kvantitatiivisista lukemista 48 tunnin kohdalla auttaisi määrittämään paremmin erottuvan "vastaajan allekirjoituksen". MSC-käsiteltyjen eläinten joukossa. Vaikka 60 prosenttia kaksinkertaisen annoksen saaneesta ryhmästä ryhmittyi malliin, joka erotti heidät suurimmasta osasta kerta-annoksen saaneita ja hoitamattomia ryhmiä ja oli lähempänä valeryhmää, ei kovin selkeää monianalyytin profiilia sairauden modulaatiosta voitu tunnistaa. Pääkomponenttianalyysi (PCA) tuotti samanlaisen johtopäätöksen (tietoja ei ole esitetty). On tunnustettava, että tietoja eläimistä, jotka eivät selviytyneet 48 tuntiin asti, ei voitu hankkia, ja on mahdollista, että yhdessä tai useammassa aikaisemmassa pisteessä tehdyt analyysit voisivat tarjota selvemmän vasteen ja ei-responsorin eron. Tästä huolimatta tämä analyysi korostaa yksilöiden välisen vaihtelun monimutkaisuutta, joka on luontaista sepsiksen ja soluhoitojen eläinmalleille, vaikka huomioidaan tarkasti hyvän kokeellisen suunnittelun periaatteet [52, 53], ja se heijastaa samanlaisia ​​haasteita, joita kohdataan kliinisen käytön yhteydessä. uusia sepsiksen hoitoja [18, 20, 41, 54, 55].

Tietyt tutkimuksen rajoitukset on tunnustettava. Ensinnäkin olemme keskittyneet CD{0}}valitun hUC-MSC:n in vivo -vaikutusten tutkimiseen, koska tätä solutuotetta testataan kliinisissä tutkimuksissa muiden tulehduksellisten sairauksien, mukaan lukien COVID-19-aiheutetun ARDS:n, varalta. Tämä tutkimussuunnitelma esti lisänäkemyksen saamisen vertailevista vaikutuksista sepsiksessä ja SA-AKI:ssa solutuotteella, joka testattiin valitsemattoman hUC-MSC:n tai luuytimestä tai muista kudoksista peräisin olevan MSC:n kanssa. Toiseksi, koska käytetyt soluannokset valittiin perustuen aikaisempiin tutkimuksiin ihmisen MSC:n anti-inflammatorisista vaikutuksista hiirillä, ei ole mahdollista määrittää, tuovatko useammin suuremmat vai pienemmät solumäärät suuremman hyödyn. Lopuksi, koska CLP-mallikokeiden ryhmäkoot käytettiin käsittelemään hUC-MSC-vaikutuksia sepsiksen/SA-AKI-vakavuuden systeemiseen tulehdukselliseen biomarkkeriin, on mahdollista, että suuremmilla ryhmäkooilla olisi selvemmin määritelty toistuvien annosten vaikutukset eloonjääminen. Vaikka nämä kysymykset korostavat edelleen tarvetta tehdä peräkkäisiä prekliinisiä kokeita, jotka noudattavat mahdollisimman tarkasti optimaalisen kliinisen tutkimuksen suunnittelun edellyttämiä avainparametreja, tässä esittämämme tulokset tukevat jatkuvaa keskittymistä usean annoksen anti-inflammatoriseen MSC-hoitoon sepsiksessä ja SA-AKI.

Viitteet

1. Singer, M., Deutschman, CS, Seymour, CW, Shankar-Hari, M., Annane, D., Bauer, M., Bellomo, R., Bernard, GR, Chiche, JD, Coopersmith, CM, Hotchkiss , RS, Levy, MM, Marshall, JC, Martin, GS, Opal, SM, Rubenfeld, GD, van der Poll, T., Vincent, JL ja Angus, DC (2016). Kolmas kansainvälinen konsensusmääritelmä sepsikselle ja septiselle sokille (sepsis-3). The Journal of the American Medical Association, 315(8), 801–810. https://doi.org/10.1001/jama.2016.0287

2. Isäntä, EA, Bagshaw, SM, Bellomo, R., Cely, CM, Colman, R., Cruz, DN, Edipidis, K., Forni, LG, Gomersall, CD, Govil, D., Honore, PM, Joannes-Boyau, O., Joannidis, M., Korhonen, AM, Lavrentieva, A., Mehta, RL, Palevsky, P., Roessler, E., Ronco, C., et ai. (2015). Akuutin munuaisvaurion epidemiologia kriittisesti sairailla potilailla: monikansallinen AKI-EPI-tutkimus. Intensive Care Medicine, 41(8), 1411–1423. https://doi.org/ 10.1007/s{10}}

3. Rudd, KE, Johnson, SC, Agesa, KM, Shackelford, KA, Tsoi, D., Kievlan, DR, Colombara, DV, Ikuta, KS, Kissoon, N., Finfer, S., Fleischmann-Struzek, C ., Machado, FR, Reinhart, KK, Rowan, K., Seymour, CW, Watson, RS, West, TE, Marinho, F., Hay, SI, et ai. (2020). Maailmanlaajuinen, alueellinen ja kansallinen sepsiksen ilmaantuvuus ja kuolleisuus, 1990-2017: Analyysi maailmanlaajuisen sairauden taakan tutkimiseksi. Lancet, 395(10219), 200-211. https://doi. org/10.1016/S0140-6736(19)32989-7

4. Arutyunyan, I., Elchaninov, A., Makarov, A., & Fatkhudinov, T. (2016). Napanuora mahdollisena lähteenä mesenkymaaliseen kantasolupohjaiseen terapiaan. Stem Cells International, 2016, 6901286. https://doi.org/10.1155/2016/6901286

5. Fazekas, B., & Grifn, MD (2020). Mesenkymaaliset stroomasoluihin perustuvat hoidot akuuttiin munuaisvaurioon: Edistys viimeisen vuosikymmenen aikana. Kidney International, 97(6), 1130–1140. https://doi.org/10. 1016/j.kint.2019.12.019

6. Hickson, LJ, Herrmann, SM, McNicholas, BA ja Grifn, MD (2021). Edistyminen kohti mesenkymaalisten stroomasolujen kliinistä käyttöä ja muita sairautta moduloivia regeneratiivisia hoitoja: Esimerkkejä nefrologian alalta. Kidney360, 2(3), 542–557. https://doi.org/10.34067/kid.0005692020

7. Weiss, ARR, Lee, O., Eggenhofer, E., Geissler, E., Korevaar, SS, Soeder, Y., Schlitt, HJ, Geissler, EK, Hoogduijn, MJ ja Dahlke, MH (2020). Lämmöllä inaktivoidun, erityspuutteellisen msc:n ja metabolisesti aktiivisen msc:n erilaiset vaikutukset sepsiksessä ja allogeenisessa sydämensiirrossa. Stem Cells, 38(6), 797–807. https://doi.org/10.1002/stem.3165

8. Jerkic, M., Gagnon, S., Rabani, R., Ward-Able, T., Masterson, C., Otulakowski, G., Curley, GF, Marshall, J., Kavanagh, BP ja Lafey, JG (2020). Ihmisen napanuoran mesenkymaaliset stroomasolut heikentävät systeemistä sepsistä osittain tehostamalla vatsakalvon makrofagibakteerien tappamista hemioksigenaasi-1-induktion kautta rotilla. Anesthesiology, 132(1), 140–154. https://doi.org/10.1097/ ALN.0000000000003018

9. Wu, KH, Wu, HP, Chao, WR, Lo, WY, Tseng, PC, Lee, CJ, Peng, CT, Lee, MS ja Chao, YH (2016). Toll-like reseptorin 4 signaloinnin aikasarjaekspressio septisillä hiirillä, joita on käsitelty mesenkymaalisilla kantasoluilla. Shock, 45(6), 634–640. https://doi. org/10.1097/SHK.0000000000000546

10. Chang, CL, Leu, S., Sung, HC, Zhen, YY, Cho, CL, Chen, A., Tsai, TH, Chung, SY, Chai, HT, Sun, CK, Yen, CH ja Yip , HK (2012). Apoptoottisten rasvaperäisten mesenkymaalisten kantasolujen vaikutus elinten vaurioiden heikentämiseen ja kuolleisuuden vähentämiseen rotan sepsisoireyhtymässä, jonka aiheuttaa umpisuolen pisto ja ligaatio. Journal of Translational Medicine, 10, 244. https://doi. org/10.1186/1479-5876-10-244

11. Hall, SR, Tsoyi, K., Ith, B., Padera Jr., RF, Lederer, JA, Wang, Z., Liu, X. ja Perrella, MA (2013). Mesenkymaaliset stroomasolut parantavat eloonjäämistä sepsiksen aikana hemioksigenaasin puuttuessa-1: Neutrofiilien merkitys. Stem Cells, 31(2), 397–407. https://doi.org/10.1002/stem.1270

12. Zhang, G., Zou, X., Huang, Y., Wang, F., Miao, S., Liu, G., Chen, M., & Zhu, Y. (2016). Mesenkymaaliset stroomasoluista peräisin olevat ekstrasellulaariset vesikkelit suojaavat akuutilta munuaisvauriolta hapettumisenestoaineella tehostamalla nrf2/are-aktivaatiota rotilla. Kidney and Blood Pressure Research, 41(2), 119–128. https://doi.org/10. 1159/000443413

13. Luo, CJ, Zhang, FJ, Zhang, L., Geng, YQ, Li, QG, Hong, Q., Fu, B., Zhu, F., Cui, SY, Feng, Z., Sun, XF , & Chen, XM (2014). Mesenkymaaliset kantasolut parantavat sepsikseen liittyvää akuuttia munuaisvauriota hiirillä. Shock, 41(2), 123–129. https://doi. org/10.1097/SHK.0000000000000080

14. Condor, JM, Rodrigues, CE, Sousa Moreira, R., Canale, D., Volpini, RA, Shimizu, MH, Camara, NO, Noronha Ide, L., & Andrade, L. (2016). Hoito ihmisen Whartonin hyytelöperäisillä mesenkymaalisilla kantasoluilla heikentää sepsiksen aiheuttamaa munuaisvauriota, maksavauriota ja endoteelin toimintahäiriötä. Stem Cells Translational Medicine, 5(8), 1048–1057. https://doi.org/10.5966/sctm. 2015-0138

15. Zullo, JA, Nadel, EP, Rabadi, MM, Baskind, MJ, Rajdev, MA, Demaree, CM, Vasko, R., Chugh, SS, Lamba, R., Goligorsky, MS ja Ratliff, BB (2015) ). Hydrogeeliin upotettujen endoteelisolujen ja mesenkymaalisten kantasolujen eritys ohjaa makrofagien polarisaatiota endotoksemiassa. Stem Cells Translational Medicine, 4(7), 852–861. https://doi.org/10. 5966/sctm.{8}}

16. Perlee, D., van Vught, LA, Scicluna, BP, Maag, A., Lutter, R., Kemper, EM, van 't Veer, C., Punchard, MA, Gonzalez, J., Richard, MP , Dalemans, W., Lombardo, E., de Vos, AF ja van der Poll, T. (2018). Ihmisen rasvan mesenkymaalisten kantasolujen suonensisäinen infuusio muuttaa isännän vastetta lipopolysakkaridille ihmisillä: satunnaistettu, yksisokkoinen, rinnakkaisten ryhmien, lumekontrolloitu tutkimus. Stem Cells, 36(11), 1778–1788. https://doi.org/10.1002/stem.2891

17. Gennadiy Galstyan, PM, Parovichnikova, E., Kuzmina, L., Troitskaya, V., Gemdzhian, E., & Savchenko, V. (2018). Tulokset yhden keskuksen pilotin satunnaistetusta venäläisestä kliinisestä tutkimuksesta mesenkymaalisista stroomasoluista vaikeasti neutropeenisilla potilailla, joilla on septinen sokki (RUMCESS). International Journal Blood Research and Disorders, 5(1), 33. https://doi.org/10.23937/2469-5696/1410033

18. McIntyre, LA, Stewart, DJ, Mei, SHJ, Courtman, D., Watpool, I., Granton, J., Marshall, J., Dos Santos, C., Walley, KR, Winston, BW, Schlosser, K., Fergusson, DA, & Canadian Critical Care Trials Group ja Canadian Critical Care Translational Biology Group. (2018). Solu-immunoterapia septiseen sokkiin. Vaiheen I kliininen tutkimus. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine, 197(3), 337–347. https://doi.org/10. 1164/rccm.{8}}OC

19. Matthay, MA, Calfee, CS, Zhuo, H., Thompson, BT, Wilson, JG, Levitt, JE, Rogers, AJ, Gotts, JE, Wiener-Kronish, JP, Bajwa, EK, Donahoe, kansanedustaja, McVerry , BJ, Ortiz, LA, Exline, M., Christman, JW, Abbott, J., Delucchi, KL, Caballero, L., McMillan, M., et ai. (2019). Hoito allogeenisilla mesenkymaalisilla stroomasoluilla keskivaikeaan tai vaikeaan akuuttiin hengitysvaikeusoireyhtymään (START-tutkimus): Satunnaistettu vaiheen 2a turvallisuustutkimus. The Lancet Respiratory Medicine, 7(2), 154–162. https://doi.org/10. 1016/S2213-2600(18)30418-1

20. Swaminathan, M., Staford-Smith, M., Chertow, GM, Warnock, DG, Paragamian, V., Brenner, RM, Lellouche, F., FoxRobichaud, A., Atta, MG, Melby, S., Mehta, RL, Wald, R., Verma, S., Mazer, CD, & Investigators, A.-A. (2018). Allogeeniset mesenkymaaliset kantasolut AKI:n hoitoon sydänleikkauksen jälkeen. Journal of the American Society of Nephrology, 29(1), 260–267. https://doi.org/10.1681/ASN.2016101150

21. Gotts, JE ja Matthay, MA (2018). Solupohjainen hoito sepsiksessä. Askel lähempänä. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine, 197(3), 280–281. https://doi.org/10.1164/rccm. 201710-2068ED

22. Griffin, MD ja Swaminathan, S. (2020). Pääkirjoitus: Innovatiivisia biologisia aineita ja lääkkeitä munuaistulehduksen torjumiseksi. Frontiers in Pharmacology, 11, 38. https://doi.org/10.3389/fphar.2020.00038

23. Horie, S., Masterson, C., Brady, J., Loftus, P., Horan, E., O'Flynn, L., Elliman, S., Barry, F., O'Brien, T. , Lafey, JG ja O'Toole, D. (2020). Napanuorasta peräisin olevat CD362( plus ) mesenkymaaliset stroomasolut esim. colin keuhkokuume: Annostusohjelman, siirrostuksen, kylmäsäilytyksen ja antibioottihoidon vaikutus. Stem Cell Research & Therapy, 11(1), 116. https://doi.org/10.1186/s13287-020-01624-8

24. Gonzalez, H., Keane, C., Masterson, CH, Horie, S., Elliman, SJ, Higgins, BD, Scully, M., Lafey, JG ja O'Toole, D. (2020). Napanuorasta peräisin olevat CD362(plus) mesenkymaaliset stroomasolut vaimentavat umpisuolen ligaation ja pistoksen aiheuttamaa polymikrobista sepsistä. International Journal of Molecular Sciences, 21(21). https://doi.org/10.3390/ijms21218270

25. Lewis, AJ, Seymour, CW ja Rosengart, MR (2016). Nykyiset sepsiksen hiirimallit. Surgical Infections, 17(4), 385–393. https://doi.org/10.1089/sur.2016.021

26. Remick, DG, & Ward, PA (2005). Endotoksiinimallien arviointi sepsiksen tutkimuksessa. Shock, 24 (Suppl 1), 7–11. https:// doi.org/10.1097/01.shk.0000191384.34066.85

27. de Witte, SFH, Luk, F., Sierra Parraga, JM, Gargesha, M., Merino, A., Korevaar, SS, Shankar, AS, O'Flynn, L., Elliman, SJ, Roy, D. , Betjes, MGH, Newsome, PN, Baan, CC ja Hoogduijn, MJ (2018). Terapeuttisten mesenkymaalisten stroomasolujen (MSC) aiheuttama immunomodulaatio laukaistaan ​​monosyyttisten solujen aiheuttaman msc:n fagosytoosin kautta. Stem Cells, 36(4), 602–615. https://doi.org/10.1002/stem.2779

28. Zhao, X., Liu, D., Gong, W., Zhao, G., Liu, L., Yang, L., & Hou, Y. (2014). Toll-tyyppiset reseptorin 3 ligandit, poly(I:C), parantavat mesenkymaalisten kantasolujen immunosuppressiivista toimintaa ja terapeuttista vaikutusta sepsikseen estämällä mir-143. Stem Cells, 32(2), 521–533. https://doi.org/10.1002/stem.1543

29. Nemeth, K., Leelahavanichkul, A., Yuen, PS, Mayer, B., Parmelee, A., Doi, K., Robey, PG, Leelahavanichkul, K., Koller, BH, Brown, JM, Hu, X., Jelinek, I., Star, RA ja Mezey, E. (2009). Luuytimen stroomasolut vaimentavat sepsistä isäntämakrofagien prostaglandiini E(2)-riippuvaisella uudelleenohjelmoimalla niiden interleukiini-10-tuotannon lisäämiseksi. Nature Medicine, 15(1), 42–49. https://doi.org/10.1038/nm.1905

30. Fletcher, AL, Elman, JS, Astarita, J., Murray, R., Saeidi, N., D'Rozario, J., Knoblich, K., Brown, FD, Schildberg, FA, Nieves, JM, Heng , TS, Boyd, RL, Turley, SJ ja Parekkadan, B. (2014). Imusolmukkeiden fibroblastiset retikulaariset solusiirrot osoittavat vankkaa terapeuttista tehoa korkean kuolleisuuden aiheuttamassa hiiren sepsiksessä. Science Translational Medicine, 6(249), 249ra109. https:// doi.org/10.1126/scitranslmed.3009377

31. Gonzalez-Rey, E., Anderson, P., Gonzalez, MA, Rico, L., Buscher, D., & Delgado, M. (2009). Rasvakudoksesta peräisin olevat aikuisen ihmisen kantasolut suojaavat kokeellisella paksusuolentulehdukselta ja sepsikseltä. Gut, 58(7), 929–939. https://doi.org/10.1136/gut.2008. 168534

32. Kaucsar, T., Godo, M., Revesz, C., Kovacs, M., Mocsai, A., Kiss, N., Albert, M., Krenacs, T., Szenasi, G., & Hamar, P. (2016). Virtsan/plasman neutrofiiligelatinaaseihin liittyvä lipokaliinisuhde on herkkä ja spesifinen merkki subkliinisestä akuutista munuaisvauriosta hiirillä. PLoS One, 11(1), e0148043. https://doi.org/10.1371/journ al.pone.0148043

33. Park, HK, Kim, S., Lee, S.-S., Kim, H.-J., Ahn, H.-S., Song, JY, Um, T.-H., Cho, C .-R., Jung, H., Koo, H.-K., Sim, YS, Song, J.-U., & Park, J.-H. (2015). Auttaako plasman NGAL ennustamaan akuutin munuaisvaurion sepsispotilailla?: Systemaattinen katsaus ja meta-analyysi. European Respiratory Journal, 46 (liite 59), PA2148. https://doi.org/10.1183/13993003.congr ess-2015.PA2148

34. Koeze, J., van der Horst, ICC, Keus, F., Wiersema, R., Dieperink, W., Kootstra-Ros, JE, Zijlstra, JG ja van Meurs, M. (2020). Plasman neutrofiiligelatinaasiin liittyvä lipokaliini tehohoitoyksikön vastaanotossa akuutin munuaisvaurion etenemisen ennustajana. Clinical Kidney Journal, 13(6), 994–1002. https://doi. org/10.1093/ckj/sfaa002

35. Lee, KY (2019). Makrofagien M1- ja M2-polarisaatio: minikatsaus. Medical Biological Science and Engineering, 2(1), 1–5. https://doi.org/10.30579/mbse.2019.2.1.1

36. Eggenhofer, E., Luk, F., Dahlke, MH ja Hoogduijn, MJ (2014). Mesenkymaalisten kantasolujen elämä ja kohtalo. Frontiers in Immunology, 5, 148. https://doi.org/10.3389/fmmu.2014.00148

37. Luk, F., de Witte, SF, Korevaar, SS, Roemeling-van Rhijn, M., Franquesa, M., Strini, T., van den Engel, S., Gargesha, M., Roy, D. , Dor, FJ, Horwitz, EM, de Bruin, RW, Betjes, MG, Baan, CC ja Hoogduijn, MJ (2016). Inaktivoidut mesenkymaaliset kantasolut säilyttävät immunomodulatorisen kapasiteetin. Stem Cells and Development, 25(18), 1342–1354. https://doi.org/10.1089/scd. 2016.0068

38. Li, JL, Li, G., Jing, XZ, Li, YF, Ye, QY, Jia, HH, Liu, SH, Li, XJ, Li, H., Huang, R., Zhang, Y., & Wang, H. (2018). Kliinisten sepsikseen liittyvien biomarkkerien arviointi septisessä hiirimallissa. Journal of International Medical Research, 46(6), 2410–2422. https://doi.org/10.1177/0300060518764717

39. Cai, L., Rubin, J., Han, W., Venge, P. ja Xu, S. (2010). HNL/NGAL:n useiden molekyylimuotojen alkuperä virtsassa. Clinical Journal of the American Society of Nephrology, 5(12), 2229–2235. https://doi.org/10.2215/CJN.00980110

40. Capcha, JMC, Rodrigues, CE, Moreira, RS, Silveira, MD, Dourado, P., Dos Santos, F., Irigoyen, MC, Jensen, L., Garnica, MR, Noronha, IL, Andrade, L. , & Gomes, SA (2020).

41. Schlosser, K., Wang, JP, Dos Santos, C., Walley, KR, Marshall, J., Fergusson, DA, Winston, BW, Granton, J., Watpool, I., Stewart, DJ, McIntyre, LA, Mei, SHJ, & Canadian Critical Care Trials, G. ja Canadian Critical Care Translational Biology, G. (2019). Mesenkymaalisen kantasoluhoidon vaikutukset systeemisiin sytokiinitasoihin vaiheen 1 annoksen nostamisen turvallisuustutkimuksessa septistä sokkia sairastavilla potilailla. Critical Care Medicine, 47(7), 918–925. https://doi.org/10.1097/CCM.00000000000003657

42. van Rhijn-Brouwer, FCC, Gremmels, H., Fledderus, JO ja Verhaar, MC (2018). Mesenkymaalisten stroomasolujen ominaisuudet ja regeneratiivinen potentiaali sydän- ja verisuonisairauksissa: vaikutukset soluhoitoon. Cell Transplantation, 27(5), 765–785. https:// doi.org/10.1177/0963689717738257

43. Sun, XY, Ding, XF, Liang, HY, Zhang, XJ, Liu, SH, Bing, H., Duan, XG ja Sun, TW (2020). Mesenkymaalisen kantasoluhoidon tehokkuus sepsikselle: Prekliinisten tutkimusten meta-analyysi. Stem Cell Research & Therapy, 11(1), 214. https://doi.org/ 10.1186/s13287-020-01730-7

44. Laroye, C., Gibot, S., Reppel, L. ja Bensoussan, D. (2017). Lyhyt katsaus: Mesenkymaaliset strooma-/kantasolut: uusi hoito sepsikseen ja septiseen sokkiin? Stem Cells, 35(12), 2331–2339. https:// doi.org/10.1002/stem.2695

45. Brady, J., Horie, S., & Lafey, JG (2020). Mukautuvan immuunivasteen rooli sepsiksessä. Intensive Care Medicine Experimental, 8 (Suppl 1), 20. https://doi.org/10.1186/s40635-020-00309-z

46. ​​Martina, MN, Noel, S., Saxena, A., Bandapalle, S., Majithia, R., Jie, C., Arend, LJ, Allaf, ME, Rabb, H., & Hamad, AR (2016) ). Kaksoisnegatiiviset alfa-beeta-T-solut reagoivat varhain Akille, ja niitä löytyy ihmisen munuaisista. Journal of the American Society of Nephrology, 27(4), 1113–1123. https://doi.org/10.1681/ ASN.2014121214

47. Hotchkiss, RS, Tinsley, KW, Swanson, PE, Schmieg Jr., RE, Hui, JJ, Chang, KC, Osborne, DF, Freeman, BD, Cobb, JP, Buchman, TG ja Karl, IE (2001) ). Sepsiksen aiheuttama apoptoosi aiheuttaa B- ja CD4- ja T-lymfosyyttien progressiivisen syvän ehtymisen ihmisissä. The Journal of Immunology, 166(11), 6952–6963. https://doi.org/10.4049/jimmunol.166.11.6952

48. Condotta, SA, Cabrera-Perez, J., Badovinac, VP ja Grifth, TS (2013). T-soluvälitteinen immuniteetti ja TRAILin rooli sepsiksen aiheuttamassa immunosuppressiossa. Critical Reviews in Immunology, 33(1), 23–40. https://doi.org/10.1615/critrevimmunol.{12}}

49. Khosrojerdi, A., Soudi, S., Hosseini, AZ, Eshghi, F., Shafee, A., & Hashemi, SM (2021). Mesenkymaalisten kantasolujen immunomoduloivat ja terapeuttiset vaikutukset elinten toimintahäiriöihin sepsiksessä. Shock, 55(4), 423–440. https://doi.org/10.1097/SHK.{8}}

50. Nie, P., Bai, X., Lou, Y., Zhu, Y., Jiang, S., Zhang, L., Tian, ​​N., Luo, P., & Li, B. (2021) . Ihmisen napanuoran mesenkymaaliset kantasolut vähentävät oksidatiivisia vaurioita ja apoptoosia diabeettisessa nefropatiassa aktivoimalla Nrf2. Stem Cell Research & Therapy, 12(1), 450. https://doi.org/10.1186/s13287-021-02447-x

51. dos Santos, CC, Murthy, S., Hu, P., Shan, Y., Haitsma, JJ, Mei, SH, Stewart, DJ ja Liles, WC (2012). Kokeellisen sepsiksen mesenkymaalisen kantasoluhoidon indusoimien transkriptiovasteiden verkkoanalyysi. American Journal of Pathology, 181(5), 1681–1692. https://doi.org/10.1016/j.ajpath.2012.08.009

52. von Kortzfeisch, VT, Karp, NA, Palme, R., Kaiser, S., Sachser, N., & Richter, SH (2020). Eläintutkimuksen uusittavuuden parantaminen jakamalla tutkimuspopulaatio useisiin "minikokeisiin". Scientifc Reports, 10(1), 16579. https://doi.org/10. 1038/s41598-020-73503-4

53. Tanavde, V., Vaz, C., Rao, MS, Vemuri, MC ja Pochampally, RR (2015). Tutkimus mesenkymaalisia kanta-/stromasoluja käyttäen: Laatumittari vertailumateriaalin kehittämiseksi. Cytotherapy, 17(9), 1169-1177. https://doi.org/10.1016/j.jcyt.2015. 07.008

54. Pickkers, P., Heemskerk, S., Schouten, J., Laterre, PF, Vincent, JL, Beishuizen, A., Jorens, PG, Spapen, H., Bulitta, M., Peters, WH ja van der Hoeven, JG (2012). Alkalinen fosfataasi sepsiksen aiheuttaman akuutin munuaisvaurion hoitoon: Prospektiivinen satunnaistettu kaksoissokkoutettu lumekontrolloitu tutkimus. Critical Care, 16(1), R14. https://doi.org/10.1186/cc11159

55. Pickkers, P., Mehta, RL, Murray, PT, Joannidis, M., Molitoris, BA, Kellum, JA, Bachler, M., Hoste, EAJ, Hoiting, O., Krell, K., Ostermann, M. ., Rozendaal, W., Valkonen, M., Brealey, D., Beishuizen, A., Meziani, F., Murugan, R., de Geus, H., Payen, D., et ai. (2018). Ihmisen rekombinantin alkalisen fosfataasin vaikutus 7-päivän kreatiniinipuhdistumaan potilailla, joilla on sepsikseen liittyvä akuutti munuaisvaurio: satunnaistettu kliininen tutkimus. The Journal of the American Medical Association, 320(19), 1998–2009. https://doi.org/10.1001/jama.2018.14283

Barbara Fazekas1 · Senthilkumar Alagesan2 · Luke Watson2 · Olivia Ng1,2 · Callum M. Conroy1,2 · Cristina Català3 · Maria Velascode Andres3 · Neema Negi1 · Jared Q. Gerlach4 · Sean O. Hynes5,6 · Francisco Lozano3,7,8 · Stephen J. Elliman2 · Matthew D. Grifn1,9,10

1 Regeneratiivisen lääketieteen instituutti, CÚRAM Center for Research in Medical Devices, School of Medicine, National University of Ireland Galway, Galway, Irlanti

2 Orbsen Therapeutics Ltd., Galway, Irlanti

3 Institut d'Investigacions Biomèdiques August Pi i Sunyer, Barcelona, ​​Espanja

4 Glycoscience Group, National Center for Biomedical Engineering Science, Irlannin kansallinen yliopisto Galway, Galway, Irlanti

5 Patologian tieteenala, lääketieteellinen tiedekunta, Irlannin kansallinen yliopisto Galway, Galway, Irlanti

6 Histopatologian osasto, Galway University Hospitals, Galway, Irlanti

7 Servei d'Immunologia, Hospital Clínic de Barcelona, ​​Barcelona, ​​Espanja

8 Department de Biomedicina, Universitat de Barcelona, ​​Barcelona, ​​Espanja

9 Nefrologian laitos, Saolta University Health Care Group, Galway University Hospitals, Galway, Irlanti

10 National University of Ireland Galway, REMEDI, Biomedical Sciences, Corrib Village, Dangan, Galway H91 TK33, Irlanti