Cistanche-pohjaiset kapselit lievittävät kroonista ei-bakteerista eturauhastulehdusta rotilla moduloimalla suoliston mikrobiota, seerumin aineenvaihduntatuotteita ja SPHK1/S1P1/PI3K/Akt-signaalireittiä

3.5 CBC:n seerumin aineenvaihduntaanalyysi EAP-rotilla

3.5.1 Ulosteen aineenvaihdunnan monimuuttujatilastollinen analyysi

Pääkomponenttianalyysi (PCA) paljasti selkeitä ryhmäerotteluja positiivisen ionin tilassanormaali-, malli- ja suuriannoksiset CBC-ryhmät, kanssaCBC-ryhmä klusteroituu lähemmäksi normaalia ryhmääja kauempana malliryhmästä. Negatiivisen ionin tilassa havaittiin osittainen päällekkäisyys normaali- ja malliryhmien välillä, kun taas CBC-käsitellyt näytteet osoittivat edelleen hyvää erottelukykyä (kuva 5).

Osittainen pienimmän neliösumman erotteluanalyysi (PLS-DA) vahvisti vahvan luokitteluvaikutuksen kaikissa kolmessa ryhmässä molemmissa ionisaatiomuodoissa. The200-kertainen permutaatiotestivalidoi mallin luotettavuuden aQ² leikkauspiste alle 0,05, mikä osoittaa, ettei yliasennusta ole. Laskeva trendiR² ja Q² arvotX-akselia pitkin vahvisti edelleen mallin vakauden (kuva 6).

CISTANCHE-POHJAINEN FORMULA-TEE

Osta nyt

 

 

 

 

 

3.5.2 Erilaisten aineenvaihduntatuotteiden tunnistaminen, joihin CBC vaikuttaa

Differentiaaliset seerumin metaboliitit suodatettiin perustuenVIP > 1PLS-DA:lta,kertaiseksi muutos Suurempi tai yhtä suuri kuin 1, jap < 0,05. Kun eksogeeniset yhdisteet on jätetty pois,10 merkittävää endogeenistä metaboliittiatunnistettiin (taulukko 9).

 

3.5.3 KEGG-reitin rikastusanalyysi

Erilaisten metaboliittien KEGG-rikastusanalyysi osoitti senCBC-hoito voi moduloida keskeisiä aineenvaihduntareittejämukana kroonisessa eturauhastulehduksessa. Rikastetut reitit sisälsivät:

Sfingolipidiaineenvaihdunta

Retinolin aineenvaihdunta

Glysiinin, seriinin ja treoniinin aineenvaihdunta

Glyserofosfolipidiaineenvaihdunta

Arakidonihapon aineenvaihdunta(Kuva 7)

Näillä poluilla tiedetään olevan tärkeä rooliimmuunijärjestelmän säätely, oksidatiivinen stressi ja tulehdus.

3.5.4 Differentiaalisten aineenvaihduntatuotteiden ja suoliston mikrobiston välinen korrelaatio

Spearman-korrelaatioanalyysi suoritettiin 10 erilaisen metaboliitin ja merkittävästi muuttuneiden bakteeritaksonien välillä. Huomattavia korrelaatioita olivat mm.

PA(6-keto-PGF1 /i-20:0): korreloi positiivisesti kanssaLactobacillusjaRomboutsia ilealis, negatiivisesti kanssaNeglectibacter timonensis

SM[d16:2/20:4-2OH]: korreloi positiivisesti kanssaParaprevotella clarajaRomboutsia ilealis

PS[18:1/20:0]: korreloi positiivisesti kanssaRomboutsia ilealis, negatiivisesti kanssaOscillospiraceae

lysoPA(0:0/18:0): korreloi negatiivisesti kanssaLactobacillusjaRomboutsia ilealis, positiivisesti kanssaNeglectibacter timonensis

Ureidoisovoihappo: korreloi negatiivisesti kanssaParaprevotella clara

16(R)-HETEja(2R,3R)-2-aminooktadekaani-1,3-dioli: korreloi positiivisesti kanssaNeglectibacter timonensis

Sfingosiini: korreloi negatiivisesti kanssaRomboutsia ilealis, positiivisesti kanssaNeglectibacter timonensis

lysoPA(18:0/0:0)jaRetinoyyli-glukuronidi: korreloi negatiivisesti kanssaBifidobacterium animalisjaRomboutsia ilealis(Kuva 8)

Nämä korrelaatiot viittaavat siihenvahva yhteys CBC:n aiheuttamien metabolisten muutosten ja suoliston mikrobiotan modulaation välillä.

 

3.6 CBC:n SPHK1/S1P1/PI3K/Akt-polun säätely

Western blot -analyysi osoitti senSPHK1- ja S1P1-proteiinien ilmentyminen oli merkittävästi kohonnut malliryhmässänormaaliin ryhmään verrattuna. CBC (korkea annos) merkittävästialensi SPHK1- ja S1P1-proteiinitasoja. SPHK2:n ilmentymisessä ei havaittu merkittävää eroa ryhmien välillä (kuvio 9, taulukko 10).

Lisäksi,PI3K ja Aktilmentymistasot laskivat merkittävästi malliryhmässä, kun taasp-PI3K ja p-Akttasot nousivat merkittävästi, mikä viittaa reitin aktivaatioon. CBC-hoitopalautettu PI3K- ja Akt-tasotjaesti niiden fosforylaatiota, vähentääp-Akt/Akt- ja p-PI3K/PI3K-suhteet.

Nämä tulokset viittaavat siihenCBC estää SPHK1/S1P1/PI3K/Akt-signalointireitin, mikä edistää sen anti-inflammatorista vaikutusta.

4. Keskustelu

Krooninen ei-bakteerinen eturauhastulehdus (CNP) aiheuttaa yli90 % kaikista eturauhastulehduksistaja siihen liittyy monimutkainen etiologia, mukaan lukienpatogeeninen mikrobi-infektio, oksidatiivinen stressi, immuunijärjestelmän häiriöt ja autoimmuunivasteet [20–21].

Viimeaikaiset todisteet viittaavat siihentulehdus ja autoimmuniteettiovat keskeisiä CNP-patogeneesissä [22–24]. Thekokeellinen autoimmuuniprostatiitin (EAP) rottamalli, joka jäljittelee ihmisen CNP:tä histopatologiassa ja immuunivasteessa, valittiin siksi [25].

Aiemmissa seerumin farmakokemian tutkimuksissamme CBC-komponentteja löydettiinsuurempi määrä ulosteessa kuin seerumissa, vihjaasuoliston vuorovaikutus ensisijaisena vaikutusreittinä(katso CNKI Enhanced Publication Materials).

CBC parantaa eturauhasen patologiaa ja tulehdusindeksejä

HE-värjäys osoitti, että CBC helpottilymfosyyttien infiltraatio, kunnostettuakinaarinen rakenne, ja lisääntynytrauhasten eritteet. CBC merkittävästivähentynyt leukosyyttien määräeturauhasen homogenaateissa ja palautetaanlesitiinin kehon tiheys-molemmat keskeiset CNP-diagnostiset markkerit [26–28]. Tulehdus johtaa epiteelin vaurioitumiseen ja lesitiinin erittymisen vähenemiseen, kun taas aktivoituneet makrofagit imevät lesitiiniä [29]. CBC kumosi tehokkaasti nämä patologiset muutokset.

CBC myösvähentyneet tulehdusta edistävät sytokiinit(TNF-, IL-1, IL-6, IL-8, IL-2, iNOS) jakohonnut tulehduskipulääke IL-10, mikä tukee sen voimakasta anti-inflammatorista vaikutusta.

 

CBC säätelee suoliston mikrobiston dysbioosia

CNP liittyy läheisestisuoliston mikrobiston epätasapaino, joka voi vähentäälyhytketjuiset rasvahapot (SCFA)ja vaarantaa suolistoesteen, mikä mahdollistaaLPS-siirtoja laukaisee eturauhastulehduksen kauttaMikrobiin liittyvät molekyylimallit (MAMP) [30].

Tutkimukset osoittavat senCistanche-polyfenolitparantaa mikrobiston epätasapainoa ja moduloida keskeisiä taksonejatulehduksellinen suolistosairaus (IBD)[31]. Tässä tutkimuksessaLactobacillus ja Bifidobacterium animalisolivat ehtyneet EAP-rotissa, mutta toipuivat CBC-hoidon jälkeen. Näiden probioottien tiedetään lievittävän urogenitaalista tulehdusta [32–33]. Sitä vastoinVeillonella, usein rikastettu autoimmuuniolosuhteissa [34], oli kohonnut EAP-rotilla ja vähentynyt CBC-annon jälkeen. SamoinPrevotellaceae, joka liittyy eturauhassyöpään [35], rikastui EAP-ryhmässä ja väheni CBC:llä.

 

CBC moduloi tärkeimpiä aineenvaihduntareittejä

Aineenvaihdunta paljastuisfingosiinin nousuEAP-rotilla, CBC vähentää merkittävästi, mikä viittaa osallisuuteensfingolipidiaineenvaihdunta. Sfingolipidit ovat tärkeitä rakenteellisia ja signaalimolekyylejä, jotka ovat mukanasolujen kasvua, apoptoosia ja immuunisäätelyä [36].

Sfingosiini-1-fosfaatti (S1P), syntetisoiSPHK1/2, on voimakas lipidivälittäjä, joka sitoutuuS1P-reseptorit (S1PR:t)säätelemään immuunisolujen kauppaa ja se on osallisenatulehdukselliset ja autoimmuunisairaudet[37–39]. S1PR-modulaattoriFTY720 (fingolimod)on osoitettu vähentävän tulehdusta ja kudosvaurioita EAP-malleissa [40].

S1P aktivoi myös alavirran reittejä, kutenPI3K/Akt, jotka liittyvät krooniseen tulehdukseen. Tutkimuksessamme CBCSPHK1:tä ja S1P1:tä säädelty alaspäin, ja estettyPI3K ja Akt fosforylaatio, mikä viittaa säätelyvaikutukseen tällä kriittisellä akselilla.

 

Johtopäätös

Tämä tutkimus, integrointisuoliston mikrobiotan sekvensointi ja kohdistamaton metabolomiikka, osoittaa senCistanche-pohjaiset kapselit (CBC)tehokkaasti:

Parantaaeturauhasen kudosvaurio

Tukahduttaatulehdukselliset sytokiinit

Palauttaahyödyllinen suolistofloora

Säännelläsfingolipidiaineenvaihdunta

EstääSPHK1/S1P1/PI3K/Akt-signalointi

Nämä havainnot tarjoavatvakuuttavia todisteitaCBC:n mahdollisuuksista amonikohde yrttihoito krooniseen ei-bakteeriperäiseen eturauhastulehdukseen, ja tarjoa atieteellistä perustaa sen laajemmalle kliiniselle sovellukselle.