Kiinalainen lääketiede Cistanche kemiallinen koostumus ja kehon komponenttien analyysi Ⅱ

Lyhenne

Cistancheon pidetty vahvana ja ravitsevana arvokkaana perinteisenä kiinalaisena lääketieteenä muinaisista ajoista lähtien. Se tunnetaan nimellä "aavikon ginseng". Se nauhoitettu ensimmäisen kerran "Shen Nongin Materia Medica" ja se on listattu huippuluokkaan. Sillä on toiminnotravitseva munuaisten yang,täyttävä esanssi ja verta, kosteuttaa suolistoaja ulostaminen javiivyttää ikääntymistä. Sitä käytetään usein miesten impotenssin, naisten hedelmättömyyden, vilustumisen ja ripulin, vyötärön ja polvien kylmäkivun, veren kuivumisen ja ummetuksen hoitoon. Cistanche, joka on tallennettu "Kiinan farmakopean (2015 painos)" osaan 1, on kuivattuja, meheviä varsia, joissa on hilseileviä lehtiä.Cistanche deserticola YCMajaCistanche tubulosa (Schenk) R. Wight. Markkinoilla tällä hetkellä kiertävien Cistanchen lääkemateriaalien sekaannuksesta johtuen suurin osa Cistanchen laadunvalvonnasta keskittyy vain fenyylietanoidiglykosideihin. Voit arvioida paremmin laatuaCistancheja varmistaa lääkeaineiden ja -tuotteiden tehokkuus, tässä artikkelissa tarkastellaan Cistanchen kemiallisen koostumuksen analyysin ja in vivo -koostumusanalyysin tutkimuksen edistymistä, jotta voidaan luoda kattavampi ja tehokkaampi analyysimenetelmä nykyisen laatuanalyysin ja in vivo -puutteiden korjaamiseksi. opinnot.

Cistanche-lisäosa

Osa 1 Tutkimuksen edistyminen kemiallisten komponenttien analysoinnissaperinteinen kiinalainen lääketiede Cistanche

Luonnonympäristö ja alueelliset olosuhteet vaikuttavat suoraan kiinalaisten lääkeaineiden tai -valmisteiden laatuun, ja kiinalaisten lääkeaineiden tai -valmisteiden laatu liittyy läheisesti kliinisen lääkityksen turvallisuuteen. Siksi Cistanche-lääkemateriaalien tai -valmisteiden laadunvalvontatason parantamiseksi on erityisen tärkeää ottaa käyttöön tarkat, luotettavat ja nopeat määritysmenetelmät. Viime vuosina kotimaiset ja ulkomaiset tutkijat ovat tehneet paljon työtä Cistanchen kemiallisten komponenttien analysoinnissa ja ovat myös kokeilleet erilaisia ​​analyysimenetelmiä, mukaan lukien sormenjäljet, kolorimetria, HPLC-DAD, HPLC-ELSD, LC-MS, ja GC-MS. , FT-IR ja 2D-IR jne.

1. Sormenjälkikuvio

Sormenjälkimenetelmä on yhdenmukainen perinteisen kiinalaisen lääketieteen "eheyden" käsitteen kanssa. Se on käytännöllinen laadunvalvontamenetelmä perinteisen kiinalaisen lääketieteen aitouden tunnistamiseen ja sen laadun yhtenäisyyden arvioimiseen. Se on erittäin tunnustettu kansainvälisessä yhteisössä.

Zhu Nailiang et ai. käytti UPLC:tä aavikon Cistanchen ja Cistanche tubulosan lääkemateriaalien sormenjälkien määrittämiseen, kalibroi 15 yhteistä piikkiä ja tunnisti 5 yhteistä piikkiä, mikä osoittaa, että kahden farmakopeaan kerätyn Cistanchen sormenjäljet ​​ovat merkittävästi erilaisia. Tämä menetelmä on yksinkertainen ja toistettava, ja sitä voidaan käyttää aavikon Cistanche- ja Cistanche tubulosa -lääkemateriaalien erottamiseen ja lääkemateriaalien laadun arvioimiseen. Zhu Xujiang et al.12 käyttivät HPLC:tä sormenjälkien määrittämiseen 10 Lanzhou Cistanche -erästä tutkiakseen Lanzhou Cistanchen ja Cistanche deserticolan luontaista laatueroa.

Tulokset osoittavat, että Cistancheen verrattuna Lanzhou Cistanchella on monia puuttuvia tyypillisiä huippuja, erityisesti echinaceasiden tyypillisten huippujen puute: ja Lanzhou Cistanchen ja Cistanchen vertailulääkemateriaalien samankaltaisuus on vain noin {{0}}.04 , mikä osoittaa, että Lanzhou Cistanche eroaa aidosta Cistanchesta. Siinä on suuri ero. Ma Zhiguo et ai. käytti HPLC:tä sormenjälkien määrittämiseen 10 Sha Rong -keittopalaerästä ja kalibroi 7 yhteistä piikkiä. Samankaltaisuuden arvioinnin tulokset olivat kaikki suurempia kuin 0,92, mikä osoittaa, että Sha Rong -keittopalojen sormenjäljet ​​ovat spesifisiä ja voivat tarjota tietyn tason Sha Rong -keittopalojen laadunvalvonnan. viite. Xiong Yuanjun et ai. käytti HPLC-kromatografiaa ja käytti 6 fenyylietanoidiglykosidia viitteinä sormenjälkien ja analyysimenetelmien luomiseen Cistanchelle 9 eri alkuperästä Xinjiangin Uygurin autonomisella alueella. Tulokset osoittivat, että menetelmä oli vakaa, luotettava ja toistettava. Sillä on hyvät ominaisuudet ja sitä voidaan käyttää Cistanchen laadun arvioimiseen.

Xie Jieina et al [käyttivät Agilent Zorbax Extend-C8 (150mmx4,6 mm, 5 μm) kromatografiakolonnia käyttäen 0,095 % fosforihapon vesiliuosta-0,095 % fosforia hapan asetonitriililiuos liikkuvana faasin lineaarigradienttieluointina, eluointigradientti oli 0-18 min, 96 % A-4 % B; 18-40 min, 88 %A-12%B; 40-65 min, 85 % A-15 % B; 65-75 min, 85 % A-15 % B; 75-90 min, 80 %A-20%B; 90-100 min, 80 %A-20%B; 100 min, 96 %A-4%B, tunnistusaallonpituus 330 nm; tilavuusvirtaus: 1 ml/min; lämpötila on 30 astetta. HPLC-sormenjäljet ​​otettiin 16 erästä eri alkuperää olevasta aavikkosistansista. Tulokset osoittivat, että eri lähteistä peräisin olevien autiomaahansistanche-lääkemateriaalien luontainen laatu vaihteli suuresti. Tällä menetelmällä voidaan arvioida aavikon vesisäiliöiden lääkemateriaalien laatua. Tu Pengfei et ai. (käytti käänteisfaasin korkean erotuskyvyn nestekromatografiaa tutkiakseen 4 kotimaisessa lääkeaineessa ja 1 muunnelmassa ja 25 kaupallisessa lääkemateriaalissa Cistanche sisältyviä fenyylietanoidiglykosideja ja analysoi niiden HPLC-spektrit. Tulokset osoittivat, että nämä lääkeraaka-aineet sisältävät kaikki monenlaisia ​​fenyylietanoidiglykosideja, joista Cistanche, Cistanche halophylla, Cistanches alba ja Cistanches tubulosa sisältävät fenyylietanoidiglykosideja, joilla on samanlaisia ​​fenyylietanoidiglykosideja, kun taas Cistanche on melko erilainen kuin muissa lajeissa Yang Hanchun et al. käyttivät verbaskosidia vertailuaineena ja Shim-pack VP-ODS -kolonnia (150 mm x 4,6 mm, 5 μm) HPLC-sormenjälkianalyysimenetelmän luomiseksi 22 erälle Cistanchea Cistanche-lääkemateriaalien piikit kalibroitiin. Tulokset osoittivat, että Cistanche-lääkemateriaalien eri erien sormenjäljet ​​olivat merkittävästi erilaisia, mikä näkyy ilmeisinä eroina Cistanche-lääkemateriaalien eri erien kromatografisten piikkien lukumäärässä ja kromatografisten piikkien alueella. Samankaltaisuuden arvioinnin tulokset osoittivat, että Pienen näytemäärän samankaltaisuus ei ole korkea. Yang Jianhua et ai. 8 valitsi RP-HPLC:n fenyylietanoliglykosidien sormenjäljen määrittämiseen Cistanchessa ja vertasi viljeltyjen tuotteiden sormenjälkiä luonnonvaraisiin tuotteisiin, eri kasvuvaiheisiin ja lääkeosiin. Tutkimuksessa kalibroitiin 19 yleistä kromatografista huippua ja havaittiin, että viljellyn ja villin halo Cistanchen sormenjäljet ​​ovat hyvin samankaltaisia.

Kemiallisten komponenttien tyypit ja suhteellinen pitoisuus ovat stabiileja. Myös eri kasvuvaiheissa tai eri osissa olevat sormenjäljet ​​ovat konsistenssiltaan hyviä, mutta tunnusomaisten piikkien sisällössä on ilmeisiä eroja. Tällä menetelmällä on hyvä toistettavuus, ja se voi paremmin heijastaa Cistanche salinan ominaisten komponenttien luontaista laatua. Shi et ai. 9 vertaili HPLC-sormenjälkiä ja Cistanchen, Cistanche tubulosan, suolatun Cistanchen ja Cistanchesin HPLC-sormenjälkiä ja ISSR-geenien sormenjälkiä (Inter-Simple Sequence Repeat), ja havaitsi, että molemmat sormenjäljet ​​olivat hyviä Cistanchen lääkemateriaaleille. Suorita erottelu ja laadunvalvonta, ja kirjoittaja uskoo, että Cistanchen alhaisen echinacea-pitoisuuden vuoksi Cistanche ei voi korvata Cistanchea tai Cistanche tubulosaa farmakopeassa. Jiang et ai. (101 perusti HPLC-DAD-MS-menetelmän sormenjälkianalyysin suorittamiseksi 36 eri alkuperää olevasta lihatahnan lääkemateriaalista (mukaan lukien 14 aavikon lihapastaa, 14 putkimaista Cistanchea, 2 suolattua Cistanchea ja 6 Amaranthus-sormenjälkeä). 18 fenyylietanoliglykosidiyhdisteen analyysi ja tunnistaminen Tulokset osoittivat, että Cistanches tubularisilla, Cistanche halophyllalla ja Cistanchella on suurin samankaltaisuus, kun taas Cistanchen samankaltaisuus on pienempi, vain 0,053.

2. Atomiabsorptiospektrofotometria

Ihmisten kattava käsitys perinteisen kiinalaisen lääketieteen vaikuttavista aineista, epäorgaaniset alkuaineet ovat herättäneet yhä enemmän huomiota. Erityisesti viime vuosina jotkut perinteisen kiinalaisen lääketieteen vaikutukset, joita ei voida selittää perinteisellä kiinalaisen lääketieteen teorialla, voidaan selittää hivenaineiden fysiologisilla vaikutuksilla. Tästä syystä Cistanchen hiven- ja makroelementtien ja niitä vastaavien elementtikalibrointien ja standardoitujen havaitsemismenetelmien tutkiminen on erittäin tärkeää Cistanchen laadunvalvonta- ja turvallisuusarviointijärjestelmän perustamisessa ja kehittämisessä. Atomiabsorptiospektrofotometriasta on vähitellen tullut tärkein menetelmä epäorgaanisten elementtien havaitsemiseksi sen korkean herkkyyden, suuren tarkkuuden, laajan käyttöalueen, pienen näytetilavuuden ja instrumentin helpon käytön ansiosta. Chen Weijun et ai. (käytti märkämenetelmää Cistanche-jauheen sulattamiseen suoraan ja liekkiatomiabsorptiospektrometriaa (FAAS) mittaamaan suoraan Pb:tä, Cd:tä ja Cua. Tulokset osoittivat, että Cistanche Xinjiangin kolmelta päätuotantoalueelta ei ylittänyt rajaa Se oli turvallinen kliiniseen käyttöön. alhainen on Ca, Fe, Mg, Cu, Zn, Pb ja Sn, ja niissä on korkea Mg-, Ca-, Fe- ja Zn-pitoisuus, joilla on tärkeitä fysiologisia toimintoja, ravitsemuksellisia vaikutuksia ja kliininen diagnoosi ja hoito Qi Yu et al. (3) käyttivät liekkiatomiabsorptiospektrofotometriä mangaanin ja hivenaineiden hivenaineiden määrittämiseen Xinjiang Cistanchessa. Tulokset osoittivat, että kuiva- tai märkäsulatus eivät vaikuttaneet mittaustuloksiin. Xu Fang et ai. 4) Käyttäen induktiivisesti kytkettyä plasmaemissiospektrometriä (ICP-AES) mitattiin kymmenen hivenainepitoisuutta luonnonvaraisessa Cistanchessa, mukaan lukien Li, Mn, Fe, Cu, Zn, Se, Sr, Mo, [ja Ca].

3. Korkean suorituskyvyn nestekromatografia

Korkean suorituskyvyn nestekromatografiaa käytetään laajalti määrityksessäfenyylietanoliglykosiditjauhelihassa sen korkean herkkyyden ja laajan lineaarisen alueen etujen vuoksi. Dong ym.15 perustivat korkean suorituskyvyn nestefaasimenetelmän, joka käyttää absorptiokerrointa piikin korkeuden tai piikin alueen sijaan, ja määrittelivät jatkuvasti 7 fenyylietanoliglykosidia Cistanche tubulosassa ja Cistanchessa echinaceasiden ja muiden absorbanssikertoimien suhteen. yhdisteet. Sisältö, mukaan lukien echinacea-puoli, sarkobasiini A, verbaskosidi, verbaskosidi, 2'-asetyyliverbaskosidi, 6'-asetyyliverbaskosidi ja cistankeosidi C. Tämän menetelmän tulokset ovat yhdenmukaisia ​​ulkoisen standardimenetelmän kanssa, ja tulokset osoittavat, että se on tarkka ja luotettava. Song Qingqing et al.16 perustivat verkossa toimivan paineistetun liuotinmikrouutto-turbulenttivirtauskromatografia-korkean suorituskyvyn nestekromatografia-tandem-järjestelmän (online PLME-TFC-HPLC). Hivennäytejauhe asetettiin uuttosäiliöön ja ladattiin sitten esikolonnin holkkiin. Eetteriketoni (PEEK) -putki on kytketty esikolonnin holkin päähän, ja vesifaasi virtaa PEEK-putkilinjan läpi suurella virtausnopeudella korkean paineen aikaansaamiseksi Cistanchen online-paineistetun liuotinmikrouuton saavuttamiseksi. Samanaikaisesti otetaan käyttöön kaksi elektronista kuusitieventtiiliä täydentämään koko analyysi. Prosessi on jaettu uuttovaiheeseen ja eluointivaiheeseen kolmen fenyylietanoidiglykosidin pitoisuuden määrittämiseksi samanaikaisesti Cistanche tubulosassa: ekinakosidin, verbaskosidin ja isomurabastosidin. Guo Xiongfei et al.!! 7 käytti HPLC-UV-menetelmää echinaceasidin, verbaskosidin ja fenyylietanolin kokonaisglykosidien pitoisuuksien vertaamiseen Cistanchen eri osissa eri alkuperästä Hotanissa, Xinjiangissa. Tulokset osoittivat, että suurimmat erot echinaceaside-, verbascosid- ja fenyylietanoliglykosidien pitoisuuksissa saman Cistanche-kasvin juurissa ja latvoissa olivat peräti 22,4 kertaa, 16,7 kertaa ja 8,7 kertaa. Cistanchen vaikuttavat aineet jakautuvat pääasiassa juuriin. Ma Zhiguo et ai. 118 käytti käänteisfaasin korkean suorituskyvyn nestefaasimenetelmää määrittääkseen samanaikaisesti kolme fenyylietanoidiglykosidia (verbaskosidi, krysofyytti ja 2'-asetyylikrysofyytti) Amaranthus aurantiacusissa. Tulokset osoittivat, että krysofyyttipitoisuus A:ssa oli korkein. , verbaskosidin pitoisuus on alhaisin ja eri apteekeista ostettujen Amaranth vulgariksen laatu vaihtelee suuresti. Zhao Kuijun ym.119 käyttivät HPLC-ELSD-menetelmää galaktitolin analysoimiseen 20 Cistanche- ja Cistanches tubulosa -erässä.

4. LC-MS

Nestekromatografia-massaspektrometrian (LC-MS) etuna on nopea nopeus, vahva selektiivisyys, alhainen havaitsemisraja ja vahvat laadulliset ja kvantitatiiviset ominaisuudet. Se on ihanteellinen työkalu perinteisen kiinalaisen lääketieteen kemiallisten komponenttien analysointiin ja sitä käytetään pääasiassa jauhelihan kemiallisten komponenttien laadulliseen määrittämiseen. ja määrällinen tutkimus.

Song et ai. 20] käytti HPLC-Qtrap-MS-tekniikkaa luodakseen menetelmän Cistanches tubulariksen (CT) ja Cistanchen (CD) yhdisteryhmien kvantitatiiviseen erottamiseen. Koko työnkulku on jaettu kolmeen osaan: ensin parannellun täyden skannauksen (EMS), neutraalihäviön skannauksen (NL), prekursori-ionin skannauksen (Prec) ja tehostetun tuotteen ioniskannauksen (EPI) avulla, yhdistettynä standardimateriaalin ohjaukseen, toissijaiseen massaspektrometriaan. olemassa olevissa tietokannoissa raportoituja tietoja ja niihin liittyviä tietoja käytettiin jauhelihassa olevien yhdisteiden kattavaan seulomiseen; toiseksi HPLC-SMRM-menetelmää käytettiin 513 seulottujen yhdisteiden suhteellisessa kvantitatiivisessa määrittämisessä; lopuksi käytettiin monimuuttujatilastollista analyysimenetelmää yhdistettynä kvantitatiivisiin tietoihin CT:n ja CD:n kemiallisen koostumuksen ryhmän erottamiseksi. Tulokset osoittivat, että betaiini, trihapposyklin välituotteet, fenyylietanoidiglykosidit ja iridoidit olivat markkereita CT- ja CD-yhdisteiden erottamiseen. Lu et ai. 1 käytti korkean erotuskyvyn nestekromatografia-diodirividetektoria ja korkearesoluutioista massaspektrometriaa (HPLC-DAD-HRMS) tunnistaakseen 4 lajia ja yhteensä 36 erää Cistanchea (mukaan lukien 14 erää aavikko Cistanchea, 10 erää putkimaista Cistanchea ja 12 erää Cistanche-erät). ) ja mittasi näiden 10 yhdisteen pitoisuudet. Kahta kemometristä menetelmää, hierarkkista klusterointianalyysiä ja pääkomponenttianalyysiä, käytettiin erottamaan selkeästi neljä Cistanche-tyyppiä. Zhou Ye et al! 221 käytti HPLC-ESI-MS:n havaitsemaan seitsemän vaikuttavan aineen pitoisuutta perinteisessä kiinalaisessa lääketieteessä Cistanche viidestä eri alkuperästä, mukaan lukien aavikkosarkosidi A, echinaceaside, verbascoside, isolebascoside, 2'-asetyyliverbaskosidi, cistanche nosidi C ja tubuliini B. Samaan aikaan Fourier-muunnoksen infrapunaspektroskopiaa käytettiin viiden erityyppisen Cistanchen sormenjälkien määrittämiseen ja laskettiin niiden yhteinen huippunopeus ja vaihteluhuippunopeus. Tulokset osoittivat, että lääkeaineiden arviointitulokset kahdella menetelmällä olivat yhdenmukaisia. Song et al.123] perustivat online-paineistetun liuotinuutto-turbulenttinen virtauskromatografia-korkean suorituskyvyn nestekromatografia (online PLE-TFC-HPLC) -menetelmän. Ottaen esimerkkinä aavikkosistansista, he saavuttivat kahdeksan fenyylietanoliglykosidin pitoisuuden määrityksen autiomaasta. Mitattu samanaikaisesti. Samanaikaisesti HPLC-DAD-IT-TOF-MS-menetelmällä tunnistettiin 91 yhdistettä aavikon Cistanche online -uutteesta ja verrattiin online-uutteen ja ultraääniuutteen perushuippukaavioita, mikä osoitti, että uuttotehokkuus. oli yhdenmukainen ultraääniuuttomenetelmän kanssa. Wang Yiming et al.124) käytti LC/ESI-MS/MS-menetelmää tutkiakseen 7 fenyylietanoliglykosidia autiomaassa Cistanche, suola Cistanche ja putkimainen Cistanche. Tuloksena 7 lajia tunnistettiin autiomaassa Cistanche ja suola raaka Cistanche . 6 lajia löydettiin ja Cistanche-lajit sisälsivät vain 5 lajia. Cao Zhenjie et ai. (25) käytti LC-MS-menetelmää fenyylietanoliglykosidien pitoisuuden tutkimiseen Cistanchen autiomaassa eri sadonkorjuukausina. Tulokset osoittivat, että ekinakosidin, Cistanches A:n ja 2-asetyyliverbaskosidin pitoisuudet vaihtelivat sadonkorjuukausien mukaan. iso ero.

5. Infrapunaspektroskopia

Infrapunaspektroskopia on spektroskopinen menetelmä, joka käyttää infrapuna-alueen jatkuvaa sähkömagneettisten aaltojen spektriä säteilylähteenä näytteen säteilyttämiseen ja näytteen absorptiokäyrän tallentamiseen. Se on laajalti käytetty menetelmä orgaanisten yhdisteiden analysoinnissa. Sen käyttö jauhelihassa on pääasiassa erottaa jauhelihan eri osia. Xu Rong et ai. (261 käytti FT-IR-teknologiaa tutkiakseen Cistanchen siementen eri osien koostumuseroja kerrostuskäsittelyn jälkeen. Tulokset osoittivat, että Cistanchen siemenissä on hiilihydraatteja, proteiineja, lipidejä, pektiiniä ja aromaattisia aineita. Laminointi Käsittelyn jälkeen imeytymishuippu Siemenytimen lipidien määrä heikkeni merkittävästi, ja liukoisten proteiinien ja sokerin komponentit lisääntyivät, mikä tarjosi suoremman materiaaliperustan siementen itämiselle. Zhang Shengjun et al johdannaisspektrin ja 2D-IR-tekniikan tutkiakseen eri pitoisuuksia (10 %, 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %) aavikon Cistanchesta vastaava lääkejäämä Tulokset osoittavat, että etanolilla uutetun jauhelihan vaikuttavat aineet, kuten fenyylietanoli-glykosidit, heijastuvat infrapunaspektrissä, ja havaitaan, että 70-prosenttisessa etanoliuutteessa on korkein fenyylietanoliglykosidien pitoisuus. Tällä menetelmällä voidaan analysoida lääkenesteiden ja lääkejäämien komponentteja ja erottaa eri pitoisuuksilla olevien uutteiden ja lääkejäämien komponenttien hienovaraiset erot. Se voi myös yhdistää eri pitoisuuksilla olevien uutteiden komponentteja ja lääkejäämiä, jotta saadaan yleistietoa lihapastan lääkeaineista. Chen Jun et ai. ( 28 ] käytti FT-IR-tekniikkaa yhdistettynä 2D-IR-tekniikkaan aavikon Cistanchen ja sen sekalaisen tuotteen Cynomorium cynomolgusin tunnistamiseen. Todettiin, että näiden kolmen IR-spektreissä oli tiettyjä eroja, ja ero toisen asteen johdannaisspektreissä oli 2D- IR-spektrit eivät ole vain erilaisia, vaan myös intuitiivisia aavikon lihapastan makroskooppiset erot eri prosessointimenetelmissä, analysoitiin ja 180 Desert Cistanche -näytettä käsiteltiin 3 koko tehtaan prosessoinnissa ja 5 eri siivukäsittelymenetelmässä ja klusterianalyysi suoritettiin Assure ID -ohjelmistolla. Tulokset osoittivat, että näytteet eri käsittelymenetelmillä olivat merkittävästi erilaisia. Tällä menetelmällä voidaan nopeasti ja tehokkaasti tunnistaa erilaisia ​​käsittelymenetelmiä. Cistanche-näytteet. Xu Rong et ai. [30] käytti FT-IR- ja 2D-IR-tekniikoita analysoidakseen ja arvioidakseen Cistanchen aavikon ihoa, keski- ja sisäosia sekä sen alkoholi- ja vesiuutteita. Tällä menetelmällä voidaan nopeasti ja kattavasti tunnistaa hienovaraiset erot saman lääkemateriaalin eri osissa. Xu Rong ym.31 käytti FT-IR-menetelmää tutkiakseen aavikon Cistanche-siementen eri osia ja niiden spektriominaisuuksia ja koostumuseroja homeen tai korkean lämpötilan käsittelyn jälkeen. Tutkimuksessa havaittiin, että siemenkuoren ja siemenytimen koostumus erosi merkittävästi. Todettiin myös, että siementen proteiini- ja jotkin sokeripitoisuudet, jotka liittyvät läheisesti elinvoimaisuuteen, vähenivät merkittävästi homeen tai korkean lämpötilan käsittelyn jälkeen. Xu Rong et ai. 32 suoritti myös spektrianalyysin aavikko Cistanchelle, putkimaiselle Cistanchelle ja suola Cistanchelle. Tulokset osoittivat, että aavikon Cistanchen ja putkimaisen Cistanchen IR-kuviot olivat merkittävästi erilaisia, ja aavikon Cistanchen ja suolan Cistanchen toisen asteen johdannaisspektrit olivat ilmeisiä. Erot, 2D-IR-spektri heijastaa intuitiivisemmin näiden kolmen välisiä eroja. Liu Yougang et ai. 133 käytti FT-IR-tekniikkaa analysoidakseen fenyylietanoliglykosidien pitoisuutta aavikko Cistanchessa, Cistanche tubulosassa ja niiden 95-prosenttisissa etanoliuutteissa. Tulokset osoittivat, että fenyylietanoliglykosidien pitoisuus Cistanche tubuliflorassa oli merkittävästi korkeampi kuin Cistanchen autiomaassa. Havaittiin, että fenyylietanoliglykosidit rikastuivat tehokkaasti alkoholiuutteessa.

6. GC-MS

Kaasukromatografia-massaspektrometria (GC-MS) käyttää rajapintana elektronipommitusta tai kemiallista ionisaatiota yhdistettynä suhteellisen kattavaan kaupalliseen massaspektrometrian tietokantaan, mikä parantaa huomattavasti massaspektrometrian analyyttisiä ominaisuuksia ja jonka etuna on korkea herkkyys ja hyvä toistettavuus. Käytetään pääasiassa vaikeasti haihtuvien ja termisesti epästabiilien aineiden tutkimukseen. Zhou Yubi et al.141 käytti pylväskromatografiaa jakaakseen aavikon Cistanchen rasvaliukoiset komponentit kolmeen osaan: ei-polaarisiin, heikosti polaarisiin ja polaarisiin. He analysoivat nämä kolme osaa GC-MS-menetelmällä ja tunnistivat yhteensä 73 yhdistettä. Aavikon lihapastan rasvaliukoisista komponenteista tehtiin kattava analyysi. Qiao Haili et ai. [35] käytti dynaamista headspace pussitusadsorptiomenetelmää yhdistettynä GC-MS-teknologiaan tutkiakseen aavikon Cistanche-kukintojen haihtuvia komponentteja orastavasta vaiheesta täyteen kukintavaiheeseen. Tuloksena Cistanche-kukinnoista tunnistettiin 40 haihtuvaa yhdistettä. Tärkeimmät orastavassa vaiheessa olivat hiilivedyt ja vihreiden lehtien haihtuvat aineet, joiden tyypit ja suhteellinen sisältö muuttuvat kukinnan avautumisen myötä. Haihtuvat komponentit alku- ja täysikukintavaiheessa ovat pääosin aromaattisia estereitä ja bentseenirengasyhdisteitä, ja niiden suhteellinen pitoisuus on merkittävästi suurempi kuin orastavassa vaiheessa. Lisääntyä.

7. Muut

Koska fenyylietanoliglykosidien fenoliryhmä voi kehittää väriä alumiininitraatin ja diatsoniumsuolojen kanssa. Du Niansheng et ai. 136] käytti alumiininitraattikolorimetristä menetelmää fenyylietanoidiglykosidien kokonaispitoisuuden määrittämiseen Cistanchen autiomaassa. Tulokset osoittavat, että tämä menetelmä on yksinkertainen käyttää, herkkä ja tarkka, ja sen keskimääräinen palautumisaste on 100,7 % (n=5) ja variaatiokerroin (cv) 1,09 %. Li ym.1371 analysoivat fenyylietanoidiglykosidien pitoisuutta autiomaassa Cistancessa diatsoniumsuolan kolorimetrisellä menetelmällä. Tulokset osoittivat, että fenyylietanoliglykosidipitoisuus näytteessä oli 1,275 %, keskimääräinen talteenottoaste oli 101,3 % ja RSD oli 3,7 % (n =4). Gong Lidong et ai. 38) käytti kapillaarielektroforeesi-elektrokemiallista detektiojärjestelmää (CE-ED) tutkiakseen Cistanche (Sisä-Mongoliassa tuotettu aavikko Cistanche, Xinjiangin putkikukka Cistanche ja keinotekoisesti viljelty putkikukka Cistanche) polysakkaridien monosakkaridikoostumusta ja määrittää monosakkaridipitoisuuden. Li Yuxia et ai. 39 käytti aminohappoanalysaattoria analysoidakseen eri aminohappojen koostumusta Cistancessa Xinjiangin autiomaassa. Tutkimuksessa havaittiin, että Cistanche-näyte sisälsi yhteensä 17 erilaista aminohappoa happohydrolyysikäsittelyn jälkeen, aminohappojen kokonaismassaosuus oli 7,87 % ja proteiini 16,38 %. Niistä ihmiskeho Seitsemän välttämätöntä aminohappoa ovat kohtuullisessa suhteessa, E/T=38.5%, E/N=62.6%. Li Bin et ai. [40] käytti ultravioletti-näkyvä spektrofotometriä (UV) yhdistettynä Nash-reagenssiin määrittääkseen mannitolin maksimiabsorptioaallonpituuden 413 nm:ksi ja mittasi mannitolipitoisuuden 6 erästä suolattua Cistanchea. Ma Xizhong [4] käytti ylikriittistä nesteenpoistotekniikkaa (SFE) erottamaan haihtuvia komponentteja perinteisestä kiinalaisesta lääketieteestä Rouhuanrong, ja yhdisti kapillaarikaasukromatografian (CGC) ja kaasukromatografian/massaspektrometrian (GC/MS) niiden sisällön määrittämiseen.

Osa 2 Tutkimuksen edistyminen perinteisen kiinalaisen lääketieteen Cistanchen komponenttien analysoinnissa

Perinteisen kiinalaisen lääketieteen sisältämät ainesosat ovat äärimmäisen monimutkaisia, ja niiden monikomponenttiset, monireittiset, monitahoiset ja integroidut sääntelyvaikutukset ovat tulleet yksimielisyyteen alalla. Tämä on tuonut suuria haasteita perinteisen kiinalaisen lääketieteen vaikuttavien aineiden ja vaikutusmekanismien selvittämiseen. Kun kotimainen tutkija, professori Wang Xijun esitteli ja parantaa seerumin lääkekemian teoriaa perinteisen kiinalaisen lääketieteen toimesta, tutkijat ovat vähitellen ymmärtäneet, että kun perinteistä kiinalaista lääketiedettä on annettu asianmukaisia ​​reittejä pitkin, se käy läpi imeytymistä, aineenvaihduntaa ja muita prosesseja kehossa. ja mikä lopulta imeytyy vereen, on usein polymonomeerejä. Vaikuttava aineryhmä muodostuu ainesosista, sen rakenne voi olla joko prototyyppiainesosa, ainesosan monomeerin aineenvaihduntatuote tai uusi kemiallinen ainesosa, joka muodostuu perinteisessä kiinalaisessa lääketieteessä monomeeriainesosien vuorovaikutuksesta, tai se voi olla muodostunut kehossa endogeenisten fysiologisesti aktiivisten aineiden lääkkeiden vaikutuksesta.

1. Cistanchen tärkeimpien kemiallisten komponenttien koostumusanalyysi in vivo

Cistanche on perinteisessä kiinalaisessa lääketieteessä tunnettu tonic. Vaikka sitä käytetään laajalti kliinisissä sovelluksissa, sen aineenvaihdunnan tutkimus kehossa keskittyy enimmäkseen useiden yksittäisten aktiivisten aineosien, kuten echinaceaside, verbascoside ja krysofylliinin, tutkimukseen. Tällä hetkellä kirjallisuudessa raportoitu Cistanchen kehon koostumus on. Tärkeimmät analyysimenetelmät ovat HPLC-UV ja LC-MS.

Jia et ai. [{0}}] loi HPLC-UV-menetelmän tutkiakseen ekinakeasidin farmakokinetiikkaa ja metaboliaa in vivo ja uutettiin, erotettiin ja seulottiin aineenvaihduntatuotteiden tehokkuuden suhteen. Wang et ai. I44 käytti LC/MS-IT-TOF-teknologiaa yhdistettynä tehokkaisiin metaboliittien etsintästrategioihin holografisen seulonnan suorittamiseksi ja echinacean in vivo -metaboliittien tunnistamiseksi. Cui et ai. 145] käytti UPLC-ESI-Q-TOF-MS-tekniikkaa tutkiakseen echinaceasidin ja verbaskosidin, Cistanchen aktiivisten ainesosien, kemiallista koostumusta in vivo, ja lopulta tunnisti 29 yhdistettä plasmasta, virtsasta, ulosteesta ja sapesta. metaboliitti. Deng ym.146 käyttivät HPLC/Q-TOF-MS-tekniikkaa analysoidakseen järjestelmällisesti krysofylliinin metaboliitteja ja aineenvaihduntareittejä kehossa ja seuloivat ja tunnistivat 66 metaboliittia rotan ulosteista. Tutkimus osoitti, että krysofylliini muuttuu helposti isokrysosidiksi ja hydrolysoituu helposti hajoamistuotteiksi. Klorofylliinin tärkeimmät aineenvaihduntareitit ovat hydrolyysi, hydroksylaatio, asetylaatio, sulfonointi, pelkistys, dehydraus ja dimetylaatioreaktiot. Qi et al147 käyttivät UPLC/ESI-QTOF-MS:ää yhdistettynä MSE-teknologiaan verbaskosidin kemiallisten komponenttien analysoimiseen in vivo ja tunnistivat 35 metaboliittia rotan virtsasta, mukaan lukien 19 emolääkkeen metaboliittia ja 16 hajoamistuotteen metaboliittia. asioita. Tämä menetelmä on nopea ja luotettava, antaa luotettavaa tietoa verbaskosidin aineenvaihdunnasta ja sitä voidaan käyttää laajasti luonnontuotteiden metaboliittien tutkimuksessa. Yang et al.48] käyttivät LC-MS/MS:ää tutkiakseen echinacean in vivo farmakokineettistä prosessia. Wu et ai. 149] käytti LC-MS/MS-tekniikkaa yhdistettynä yksinkertaiseen kiinteän faasin uuttomenetelmään (SPE) verbaskosidin pitoisuuden määrittämiseen plasma- ja kudoshomogenaateissa ja sen jakautumisen aivoissa ja farmakokineettisten prosessien tutkimiseen in vivo. Yang et ai. (0) sovelsi menestyksekkäästi LC-MS/MS-teknologiaa gangliosidi B:n in vivo farmakokinetiikkatutkimukseen suonensisäisen antamisen kautta.

2. Cistanche-uutteen in vivo -komponenttianalyysi

Tällä hetkellä Cistanche-uutteen aineosista ei ole vielä tehty systemaattista tutkimusta. Tärkeimmät analyysimenetelmät ovat HPLC ja UPLC-Q-TOF-MS.

Zhou ym. [51] käyttivät HPLC-menetelmää käyttäen mikroemulsiota liikkuvana faasina neljän fenyylietanoliglykosidin (ekinakosidi, antosyanosidi B, verbaskosidi ja isorebaskosidi) erottamiseen ja tunnistamiseen Amaranthus mangen veren komponenteista. Tämä menetelmä eliminoi biologisten näytteiden monimutkaiset esikäsittelyvaiheet ja mahdollistaa biologisten näytteiden suoran analysoinnin vasta mikroemulsion liikkuvalla faasilla laimentamisen jälkeen. Li Wenlan et ai. 152-53] käytti korkean suorituskyvyn nestekromatografia-kvadrupolia lentoaikamassaspektrometriaa (HPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS) tutkiakseen rottien kemiallista koostumusta aavikon Cistanchen oraalisen antamisen jälkeen. Vertailemalla vertailuryhmää ja Annostusryhmän kromatogrammin mukaan rotan virtsasta ja seerumista tunnistettiin yhteensä 24 yhdistettä, mukaan lukien 9 prototyyppikomponenttia ja 15 metaboliittia. Samaan aikaan pääteltiin Cistanchen tärkeimmät aineenvaihduntareitit kehossa (yhteensä 9 tyyppiä), mukaan lukien metylaatioreaktio, demetylaatioreaktio, hydrolyysireaktio, hydroksylaatioreaktio, asetylaatioreaktio, glukuronidaatioreaktio, dehydrausreaktio, sulfonointireaktio ja esteröintireaktio. . Li et al! 54 käytti UPLC-Q-TOF-MS-tekniikkaa yhdistettynä ortogonaaliseen osittaisen pienimmän neliösumman erotteluanalyysimenetelmään (OPLS-DA) seuloakseen nopeasti rottien plasman, virtsan ja ulosteet Cistanche tuberoosin ja desert Cistanchen oraalisen antamisen jälkeen. prototyypit ja metaboliitit. Tulokset: Cistanchen autiomaasta tunnistettiin 71 kemiallista komponenttia, mukaan lukien 25 prototyyppiä ja 46 metaboliittia; Cistanche tubulosasta tunnistettiin 45 kemiallista komponenttia, mukaan lukien 18 prototyyppiä ja 27 metaboliittia. Tutkimus osoitti, että fenyylietanoidiglykosidit Aineet hajoavat pääasiassa pieniksi molekyyliyhdisteiksi rottien maha-suolikanavassa; Cistanchesid B, Cistancheoside C, Cistancheside D ja Cistancheoside E esiintyvät vain aavikko Cistanchessa ja ne metaboloituvat helposti metyloituneeksi hydroksityrosoliksi. Cistanchen ja Cistanchen metaboliitit voidaan erottaa.