Cistanche Deserticolan aiheuttama anti-nosiseptiivinen ja anti-inflammatorinen vaikutus jyrsijöillä

Kontakti:joanna.jia@wecistanche.comWhatsApp: 008618081934791

Li-Wei Lin, ym.

Abstrakti

Tässä tutkimuksessa juurakotCistanchedeserticola(Orobanchaceae, lyhennettynä CD) uutetaan 50-prosenttisella etanolilla ja eristettiin järjestyksessä etyyliasetaatilla, n-butanolilla ja vedellä. Kipulääke jaanti-tulehduksellinenCD-uutteen ja kolmen kerroksen vaikutuksia arvioitiin useissa eläinmalleissa. CD(Cistanchedeserticola)uutteet estivät tehokkaasti vääntymisvasteen, jonka aiheuttivat 1%: n etikkahappo- ja bifaasiset nuolemisvasteet, jotka johtuivat 1%: sta formaliinista, ja vähensivät myös 1%: n karrageenin, mutta ei zymosaanin aiheuttamaa turvotusta. Lisäksi CD:n butaani- ja vesikerrokset(Cistanchedeserticola)uute ei ainoastaan vähentänyt etikkahapon ja formaliinin aiheuttamaa kipua, vaan myös vähensi karrageenin aiheuttamaa turvotusta. CD:n butaanikerroksen vaikutukset(Cistanchedeserticola)uute on parempi kuin vesikerroksen. Lisäksi CD:n butaanikerroksen vaikutus(Cistanchedeserticola)uutetta ei poistettu naloksonilla. Nämä tulokset paljastivat, että sillä on kipua lievittävä jaanti-tulehduksellinenvaikutukset, ja butaani- ja vesikerrokset ovat pääasiassa aktiivisia ainesosia. Lisäksi kipulääke jaanti-tulehduksellinenCD:n butaanikerroksen vaikutukset(Cistanchedeserticola)uute ei liittynyt opioidireseptoreihin ja immuunijärjestelmään.

Avainsanat:Cistanche deserticola; Analgeettinen aktiivisuus; Anti-inflammatorinen aktiivisuus

1. Esittely

CistanchedeserticolaÄiti. (Orobanchaceae, lyhennettynä CD), kiinalaista kotoperäistä yrttiä käytetään laajalti perinteisessä lääketieteessä erilaisiin hoitoihin, mukaan lukien rauhoittavat, kipulääkkeet ja immuunijärjestelmää parantavat käyttöaiheet (Lee, 1986). Nykyaikaiset farmakologiset tutkimukset osoittivat CD: n(Cistanchedeserticola)uutteella oli immunoa parantava (Chin and Su, 1993), vapaiden radikaalien raadonsyöntivaikutus (Hsu et ai., 1995) ja SOD-aktiivisuuden lisääntyminen (Chang et ai., 1995). Tuoreessa tutkimuksessa vapaiden radikaalien reaktiolla oli merkittävä rooli tulehdusprosesseissa (Arrigoni-Martelli, 1985). Siksi tässä tutkimuksessa yritettiin tutkia CD: n oletettuja kipua lievittäviä vaikutuksia(Cistanchedeserticola)uutetta hiirillä, joilla on etikkahapon aiheuttama vääntötesti (Taber et ai., 1969) ja formaliinin aiheuttama nuolemistesti (Shibata et ai., 1989). Toiseksi tutkimme myös mahdollistaanti-tulehduksellinenCD:n toiminta(Cistanchedeserticola)ote klassisesta tulehdusprosessista karrageenin aiheuttamalla turvotustestillä (Winter et ai., 1962) ja vaihtoehtoisella tulehdusprosessilla zymosanin aiheuttamalla turvotustestillä (Tarayre et ai., 1989). Lopuksi tutkimme aktiivisia CD-uutekerroksia, jotka oli erotettu eri liuottimilla. '

2. Materiaalit ja menetelmät

2.1 Kasviaineisto ja -uutteet

CD:n juurakot(Cistanchedeserticola)ostettiin Taiwanin markkinoilta ja vahvisti professori M.T. Hsieh. Tositenäyte (ei. CMC-ICPS-000626) säilytettiin Kiinan farmaseuttisten tieteiden instituutin herbaariossa Kiinan lääketieteellisessä korkeakoulussa tulevaa käyttöä varten. CD-levyn uuttaminen ja eristäminen(Cistanchedeserticola)seurattiin aiempina raportteina (Lu, 1998). CD(Cistanchedeserticola)uutteen valmistukseen käytettiin uutetta (saanto 34,2 %) ja kolmea kerrosta*/etyyliasetaattikerrosta, butanolikerrosta ja vesikerrosta (niiden saanto 3,4, 10,2, 30,6 %) (lyhennettynä CDE, CDB ja CDW) */.

2.2 Uutteiden ja lääkkeiden valmistus

CD(Cistanchedeserticola)uute (0,1, 0,3, 1 g/kg) ja kolme kerrosta CD-levyä(Cistanchedeserticola)uutteet (0,03, 0,1, 0,3 g/kg) liuotettiin 0,5-prosenttiseen karboksimetyyliselluloosaan ja annettiin suun kautta 60 minuuttia ennen induktorin injektointia. Asetyylisalisyylihappoa (ASA) (100 300 mg/kg) ja indometasiinia (INDOL) (10 mg/kg) valmistettiin suspensiona, jossa oli 0,5 % karboksimetyyliselluloosaa, ja annettiin vatsaontelonsisäisesti ennen induktorin induktionaalista injektiota. Naloksoni (1 mg/kg) liuotettiin normaaliin suolaliuokseen.

2.3 Eläimet

Urospuolisia Sprague-Dawley-rottia (200-250 g) käytettiin tutkimukseenanti-tulehduksellinenToimintaa. Urospuolisia ICR-hiiriä (20-25 g) käytettiin analgeettisten vaikutusten testaamiseen. Kaikkia eläimiä käytettiin kokeissa koe-eläinten hoitoa ja käyttöä koskevien ohjaavien periaatteiden mukaisesti. Niitä pidettiin vähintään 1 viikko ennen kokeen aloittamista 239/1 8 ° C: n lämpötilassa ja 60%: n kosteudessa säädellyssä ympäristössä, jossa oli vapaa pääsy tavalliseen ruokaan pelleteissä (toimittanut ja suunnitellut Fwusow Industry Co. LTD., Taiwan) ja vesijohtovedessä, jossa ylläpidettiin 12-12 tunnin valo- / pimeää sykliä (valovaihe: 08:00-20:00 h). Sitten annettiin lääkkeitä ja kipulääkettä jaanti-tulehduksellinenmäärityksiä käytettiin kaksoissokkomenetelmällä. Käyttäytymismittauksen jälkeen kaikki eläimet tapettiin hiilidioksidilla.

2.4. Antinositseptiivinen tutkimus

2.4.1 Etikkahapon aiheuttama vatsan vääntövaste hiirillä

Hiiret jaettiin satunnaisesti useisiin ryhmiin. Jokaiselle hiirelle annettiin intraperitoneaalisesti 1% etikkahappoliuosta (10 ml/kg ruumiinpainoa). Hiiret sijoitettiin yksittäisiin havaintolaatikoihin. Etikkahapon aiheuttaman vatsan vääntymisen oireet olivat samanlaisia kuin Taber et ai. (1969). Kontrollieläimet saivat ajoneuvoliuoksia samoissa kokeissa. Viisi minuuttia etikkahapon injektion jälkeen vääntyvien vasteiden määrä hiirtä kohti laskettiin 10 minuutin ajan etikkahapon aiheuttaman vatsan vääntelyn aikana. Lopuksi vääntyvien vastausten määrä antoi meille mahdollisuuden ilmaista suojausprosentti seuraavalla suhteella: (kontrollin keskiarvo käsitelty keskiarvo)/100/kontrolli keskiarvo.

2.4.2 Formaliinin aiheuttama nuolemisvaste hiirillä

Tämä menetelmä edusti muunnosta Shibata et al. (1989) kuvaamasta menetelmästä. Jokainen hiiri sijoitettiin havaintokammioon akryyli-läpinäkyvälle levylattialle 5 minuutiksi ennen formaliini-injektiota. Lattian alla suuri peili oli kalteva 458 kulmassa, jotta eläimen tassut voitaisiin havaita selkeästi. Eläimille annettiin 25 ml 1-prosenttista formaliinia oikeaan alaplanttiin. Sitten jokainen eläin palautettiin kammioon ja havaittiin kaksi erillistä intensiivisen nuolemisvasteen jaksoa. Ensimmäinen jakso (varhainen vaihe) kirjattiin 0/5 min formaliinin injektion jälkeen ja toinen jakso (myöhäinen vaihe) kirjattiin 10/35 min injektion jälkeen. Injektoidun tassun vasteiden nuolemiseen käytetty aika (t) mitattiin kipuvasteen indikaattorina.

2.5. Anti-inflammatorinen tutkimus rotilla

Sitäanti-tulehduksellinenaktiivisuus määritettiin rotilla mittaamalla takatassujen tilavuuden keskimääräistä kasvua tulehduksellisten aineiden, kuten karrageenin (Winter et ai., 1962) tai zymosanin (Tarayre et ai., 1989), ruiskutuksen jälkeen. Eläimille injektoitiin 0,1 ml 1% karrageenia tai 2% zymosania oikeassa takajalassa plantaarisen aponeuroosin alla. Tulehdus kvantifioitiin millilitroina käyttäen pletyylismometriä (7150 Ugo Basile), joka kirjasi pieniä eroja vedenkorkeudessa, joka johtui tilavuuden siirtymisestä. Ennen hoitoa määritettiin kunkin eläimen takatassujen keskimääräinen tilavuus (Vo) kolmella mittauksella, jotka eivät eronneet yli 4 prosentista (laitteen tarkkuus). Sitten 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 min tulehdusaineiden injektion jälkeen määritettiin kunkin eläimen takatassujen keskimääräinen tilavuus (Vt) kolmella mittauksella, jotka eivät eronneet yli 4 prosentista.

Kunkin tietueen turvotusprosentit laskettiin vertaamalla kunkin eläimen takatassujen keskimääräistä tilavuutta (Vt) tulehdusaineiden injektion jälkeen kunkin eläimen takatassujen keskimääräiseen tilavuuteen (Vo) ennen mitään hoitoa (Palanichamy ja Nagarajan, 1990). Inhibitioprosentit saatiin kullekin ryhmälle käyttäen seuraavaa suhdetta: [(Vt-Vo)kontrolli/(Vt-Vo)käsitelty]-100/ (Vt-Vo)kontrolli.

2.6 Tilastollinen analyysi

Kaikki tiedot, jotka on saatu kipulääkkeen jaanti-tulehduksellinenaktiivisuus ilmaistiin keskiarvoina ja keskivirheinä, ja sitä analysoitiin edelleen käyttämällä ANOVA:n yksisuuntaista varianssianalyysiä, jota seurasi Scheffin testi. Kun todennäköisyys (P) oli alle 0,05, eroa pidettiin merkittävänä.

3. Tulokset ja keskustelu

Esikäsitellyt eläimet, joiden cd-annoksilla on suun kautta otettavia annoksia(Cistanchedeserticola)uute (0,1–1 g/kg) johti annoksesta riippuvaan ja merkittävään etikkahapon aiheuttaman vääntymisvasteen (taulukko 1) ja formaliinin aiheuttamien nuolemisvasteen kaksivaiheisten vaiheiden estoon hiirillä (kuva 1(A)). CD: n aiheuttama esto(Cistanchedeserticola)uute 1 g/kg etikkahapon aiheuttamalla vääntövasteen ja formaliinin aiheuttamilla nuolemisvasteilla oli noin 54 ja 45 %. Positiivinen kontrolliasetyylisalisyylihappo annoksella 0,1-0,3 g/kg vähensi myös etikkahapon aiheuttamaa vääntymisvastetta estämällä 45-64 % (taulukko 1). Kuitenkin toinen positiivinen kontrolli-indometasiini nopeudella 10 mg/kg esti formaliinin aiheuttaman nuolemisvasteen myöhäisen mutta ei varhaisen vaiheen vain hiirillä, joiden suurin esto oli 32% (kuva 1(A)). Lisäksi vain butanoliset ja vesipitoiset kerrokset kolmen CD-kerroksen välissä(Cistanchedeserticola)uute 0,1-0,3 g/kg tuotti myös merkittävää antinosseptiota, ja nämä butanolikerroksen analgeettiset vaikutukset olivat parempia kuin vesikerroksen (taulukko 1 ja kuva 1(B)). Toiseksi tilintarkastustuomioistuin arvioianti-tulehduksellinenCD:n toiminta(Cistanchedeserticola)uutetta ja kolme kerrosta klassista (karrageenin aiheuttamaa) ja vaihtoehtoista (zymosanin aiheuttamaa) turvotuksen muodostumista vastaan. Tilintarkastustuomioistuin havaitsi, että CD(Cistanchedeserticola)uute annoksella 0,1-1 g/kg esti myös merkittävästi karrageenin aiheuttaman turvotuksen muodostumisen annokseen liittyvällä tavalla ja indometasiini 10 mg/kg:lla esti myös tehokkaasti karrageenin aiheuttaman turvotuksen muodostumista rotilla (kuva 2). CD ei kuitenkaan estänyt zymosanin aiheuttamaa turvotuksen muodostumista(Cistanchedeserticola)uutto 0,1–1 g/kg rotilla (tietoja ei esitetty). Lisäksi vain butanolinen kerros kolmen CD-kerroksen joukossa(Cistanchedeserticola)uute 0,1-0,3 g/kg esti myös merkittävästi karrageenin aiheuttaman turvotuksen muodostumista rotilla (kuva 2). Fytokemiallisten raporttien mukaan akteosidi ja meripihkahappo, jotka kuuluvat BUTANOLISEN CD-kerroksen ainesosiin(Cistanchedeserticola)ote (Hsu et al., 1994, 1995), omistianti-tulehduksellinenaktiivisuus kemikaalien aiheuttamassa turvotuksen muodostumisessa (Murai et ai., 1995; Kabachnyi ym., 1987). Nykyisten tietojemme ja muiden aiempien raporttien perusteella ehdotimme CD-juurakoita(Cistanchedeserticola)hänellä oli kipulääke jaanti-tulehduksellinenaktiivisuus jyrsijöillä, ja aktiiviset ainesosat poistuvat pääasiassa CD-levyn butanolikerroksesta(Cistanchedeserticola)uute. Ovatko akteosidi ja meripihkahappo CD:n vaikuttavia aineita(Cistanchedeserticola), eristämme ja arvioimme heidän kipulääkkeensä jaanti-tulehduksellinentoiminta tulevaisuudessa.

Kuva 1. CD:n vaikutus(Cistanchedeserticola)uute (0,1, 0,3 ja 1 g/kg), etyyliasetaatti-, butanoli- ja vesipitoiset CD-kerrokset(Cistanchedeserticola)uutetta (CDE, CDB ja CDW) (0,03, 0,1 ja 0,3 g/kg) ja indometasiinia (INDOL, 10 mg/kg) formaliinin aiheuttaman nuolemisvasteen varhaisessa vaiheessa (0/5 min) ja myöhäisessä vaiheessa (10/35 min) hiirillä. Jokainen arvo esitetään muodossa keskiarvo9/S.E. (N/7). *P B/0,05, *** P B/0,001, verrattuna VEH-ryhmään.

Kuva 2. CD:n vaikutus(Cistanchedeserticola)uute (0,1, 0,3 ja 1 g/kg), etyyliasetaatti-, butanoli- ja vesipitoiset CD-kerrokset(Cistanchedeserticola)uute (CDE, CDB ja CDW) (0,03, 0,1 ja 0,3 g/kg) ja indometasiini (INDOL, 10 mg/kg) karrageenin aiheuttamassa tassun turvotuksessa rotilla. Jokainen arvo esitetään muodossa keskiarvo9/S.E. (N/6). *P B/0,05, ** P B/0,01, verrattuna VEH-ryhmään

(1989) viittaavat siihen, että formaliinin aiheuttaman nuolemisvasteen alkuvaihe liittyi bradykiniiniin ja aineeseen P, ja myöhäinen vaihe liittyi bradykiniiniin, autokriiniin ja prostaglandiiniin. Nykyiset tietomme osoittivat, että naloksoni ei poistanutanti-tulehduksellinenCD:n butanolikerroksen aktiivisuus(Cistanchedeserticola)Uute formaliinin aiheuttaman nuolemisvasteen molemmissa vaiheissa (kuva 3) ja analgeettinen vaikutus etikkahapon aiheuttamaan vääntymisvasteeseen (taulukko 1). Siksi kipulääke jaanti-tulehduksellinenCD-uutteen butanolikerroksen vaikutukset eivät välttämättä liity opioidireseptoreihin. Lisäksi CD(Cistanchedeserticola)uute ja sen butanolinen kerros estivät vain karrageenin aiheuttaman turvotuksen muodostumista rotilla. Karrageenin aiheuttama turvotus polymorfonukleaarisen leukosyytti-infiltraation ja aktivoidun kiniinijärjestelmän kautta, erityisesti bradykiniini, eroaa zymosaanin aiheuttamasta turvotuksesta monosyyttien sisäänvirtauksen ja aktivoidun immuunijärjestelmän kautta (Damas et ai., 1990; Dawson et ai., 1991). Meripihkahappo, CD-uutteen butanolikerroksen ainesosa, esti polymorfonukleaarisen leukosyytin toimintaa (Rotstein et ai., 1985). Nämä tulokset paljastivat, että kipulääke jaanti-tulehduksellinenCD:n butanolikerroksen vaikutukset(Cistanchedeserticola)uute voi liittyä kiniinijärjestelmään, mutta ei opioidireseptoreihin ja immuunijärjestelmään, vaikka CD(Cistanchedeserticola)hänellä oli immuunipuutosvaikutus (Chin and Su, 1993). Yksityiskohtainen kipulääkkeen mekanismi jaanti-tulehduksellinentoimintaa, tutkimme edelleen CD-uutteen aktiivisilla kerroksilla tai ainesosilla.

Cistanchetubulosaon monia tehosteita, klikkaa tästä saadaksesi lisätietoja

Viittaukset

Arrigoni-Martelli, E., 1985. Vapaiden radikaalien farmakologia tulehduksessa. Kansainvälinen kudosreaktioiden lehti 7, 513 / 519.
Chang, Y., Wu, H., Wang, S.N., Cheng, H.C., 1995. Tutkimus voimakkaista vaikutuksistaCistanchedeserticolaMa., Cistanche salsa (C.A. Mey) G. Beck ja Cistanche tubulosa (Schenk) R Wight. Kiina Journal of Chinese Materials and Medicine 26, 143/146.
Chin, H.L., Su, Y.C., 1993. Tutkimus farmakologisista vaikutuksistaCistanchedeserticolaÄiti. Kiina Journal of Chinese Materials and Medicine 19, 143/146.
Damas, J., Bourdon, V., Remacle-Volon, G., Adam, A., 1990. Karrageeniinin ja zymosaanin aiheuttamat kiniinit ja peritoneaaliset eritteet rotilla. British Journal of Pharmacology 101, 418/422.

Dawson, J., Sedgwick, AD, Edwards, J.C., Lees, P., 1991. Vertaileva tutkimus solu-, eksudatiivisista ja histologisista vasteista karrageeniin, dekstraaniin ja zymosaaniin hiiressä. Kansainvälinen kudosreaktioiden lehti 13, 171/185.

Hsu, W.H., Chu, S.H., Chao, C.H., Hsu, Y., Yuan, K.W., Jeni, C.H., Chi, C.Y., Chan, C., 1994. Tutkimus kemiallisista ainesosistaCistanchedeserticolaÄiti. China Journal of Chinese Materials and Medicine 25, 509/513.
Hsu, W.H., Chu, S.H., Sheng, L.C., Yuan, K.W., Mao, C.N., 1995. Tutkimus kemiallisista ainesosista ja farmakologisista vaikutuksistaCistanchedeserticolaÄiti. ja Cistanche salsa (C.A. Mey) G. Beck. Kiinalaiset perinteiset kasviperäiset lääkkeet 26, 143/146.
Kabachnyi, V.I., Chernykh, V.P., Drogovoz, S.M., Golubenko, Iu.A., Bogutskaia, E.E., 1987. Etsiäanti-tulehduksellinenvalmisteet meripihkahapon heteryyliamidien johdannaisten joukossa. Farmakologiia i Toksikologiia 50, 94/97.
Lee, S.L., 1986. Pen-Tsao-Kun-Mu. Kiinan lääketieteen julkaisujen kansallinen tutkimuslaitos, Taipei, s. 20.
Lu, M.C., 1998. Tutkimukset rauhoittavasta vaikutuksestaCistanchedeserticola. Etnofarmakologian lehti 59, 161/165.
Murai, M., Tamayama, Y., Nishibe, S., 1995. Fenyylietanoidit Plantago lanceolatan yrtissä ja estävät vaikutuksen arakidonihapon aiheuttamaan hiiren korvan turvotukseen. Planta Medica 61, 479/480.
Palanichamy, S., Nagarajan, S., 1990. Cassia alata leat -uutteen ja kemp Eerol 3-0-Sophorosidin analgeettinen aktiivisuus. Etnopharmakologian lehti 29, 73/78.
Rotstein, O.D., Pruett, T.L., Fiegel, V.D., Nelson, R.D., Simmons, R.L., 1985. Meripihkahappo, Bacteroides-lajien metabolinen sivutuote, estää polymorfonukleaarisen leukosyytin toimintaa. Infektio ja immuniteetti 48, 402/408.
Shibata, M., Ohkubo, T., Takahashi, H., Inoki, R., 1989. Modifioitu formaliinitesti: tyypillinen kaksivaiheinen kipuvaste. Kipu 38, 347 / 352.
Taber, R.I., Greenhouse, D.D., Rendell, J.K., Irwin, S., 1969. Opioidien agonistien ja antagonistien vuorovaikutukset etikkahapon aiheuttamassa vatsan venyttelyssä hiirillä. Farmakologian ja kokeellisen terapeuttisen lehden lehti 169, 29/38.
Tarayre, J.P., Delhon, A., Aliaga, M., Barbara, M., Bruniquel, F., Caillol, V., Puech, L., Konsuli, N., Tisne-Versailles, J., 1989.
Farmakologiset tutkimukset zymosan-tulehduksesta rotilla ja hiirillä. 1: Zymosanin aiheuttama tassuturvotus rotilla ja hiirillä. Farmakologinen tutkimus 21, 375/384.
Winter, C.A., Risley, E.A., Nuss, G.W., 1962. Karrageenin aiheuttama turvotus rotan takatassussa määrityksenäanti-tulehduksellinenhuumeet. Kokeellisen biologian ja lääketieteen seura 111, 544/547.