Tulehduksen vastaiset periaatteet Pinus Taiwanensis Hayatan neuloista ja In Silico -tutkimukset niiden mahdollisista ikääntymistä ehkäisevistä vaikutuksista Ⅱ

Männyn neulaset uutettiin metanolilla ja jaettiin heksaaneilla, etyylilläasetaatti ja vesi, jolloin saadaan vastaavasti kolme liukoista kerrosta. Thetulehdusta ehkäisevämurto-osa,etyyliasetaattikerros, altistettiin jatkuvalle tavanomaiselle kromatollegraafisen tekniikan yhdistelmä ja viisi kuvaamatonta yhdistettä karakterisoitiinmukaan lukien kaksi uutta lignaania, 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -dihydroksi-70 -(4-hydroksifenyyli)propaani-80 -yylioksi]bentsoehappo (1), 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -dihydroksi-70 -(4-hydroksi-3-metoksifenyyli)propaani-80 -yylioksi]-2-hydroksibentsoehappo (2), yksi uusi diterpenoidi, (13E,12R)-12 -hydroksiagaattinenhappo (3), yksi monoterpenoidi, 5-isopropyyli-3-oksosykloheks-1-eeni-1-karboksyylihappo (4), ja yksifenyylipropaani, styraksinolihappo (5). Näiden uusien yhdisteiden kemialliset rakenteetrakennettiin NMR-spektriselvityksen ja MS-spektrin avullametrinen analyysi. Lisäksi seitsemänkymmentäkaksi tunnettua yhdistettä, jotka sisältävät yhden steroidin, -sitosteroli (6); yksi seskviterpenoidi, (-)-oplopan-4-yksi-10- -O- -D-glukosidi (7); yksikumariini, umbelliferoni (8); yksialkaloidi, indoli-3-aldehydi (9); neljä diterpenoidia,

Napsauta tästä saadaksesi Anti-Aging Cistanche Cream

3-metoksifenyyli)-1-propanoni (64), 3-hydroksi-1-(4-hydroksifenyyli)-1-propanoni (65),2-(4-hydroksifenyyli)etikkahappo (66), fenyylietikkahappo (67), on vanilliinihappo (68), bentsoehappo (69), vanilliini (70), p-hydroksiasetofenoni (71), natriumsalisylaatti (72), vanilliinihappo4-O- -L-ramnosidi (73), trans- ferulihappo (74), natriumiap-kumaraatti (75), p-kumarihappo (76), trans-metyylip-kumaraatti (77), tunnistettiin tutkimuksessaniiden fyysiset ja spektroskooppiset tiedot aiemmin julkaistujen tietojen kanssa (viitteet tunnetuistayhdisteet toimitettiin lisämateriaalien liitteessä B).

3.1. Yhdisteiden 1-5 rakenteellinen selvitys

Yhdiste1 eristettiin optisesti aktiivisena värittömänä siirappina, ja molekyylikaava annettiin C:ksi16H16O6 HR-ESI-MS-analyysillä ([M− H]−, m/z 303,0855, lask.C:lle16H15O6, 303,0869, kuva S1). IR-spektri osoittaa hydroksyylin läsnäolon(3412 cm−1 ) ja konjugoitu karbonyyliryhmä (1598 cm−1 ). The1H-NMR-tiedot (kuva S2)näytti signaalit kahdellekohta-substituoidut aromaattiset osat [δH 6.72 (2H, d, J = 8,4 Hz,H-30 , -50 ), 6.86 (2H, d, J = 8,8 Hz, H-2, -6), 7,24 (2H, d,J = 8,4 Hz, H-20 , -60 ) ja 7,83(2H, d, J = 8.8 Hz, H-3, -5)], kaksi hapetettua metyyliä [δH 4.48 (1H, m, H-80 ) ja 4,85(1H, d, J = 5,6 Hz, H-70 )] ja kaksi metiiniä [δH 3,81 (1H, dd,J {{0}}.0, 4,0 Hz, H-90 a), ja 3.86 (1H, dd,J {{0}},0, 5,6 Hz, H-90 b)]. The13C- ja DEPT-NMR-spektrit (kuva S3)/1 esitti kuusitoista hiiltä, ​​jotka vastaavat yhtä metyleeniryhmää, kaksi hapetettuahiiltä, ​​kaksitoista aromaattista hiiltä ja yksi konjugoitu karbonyyli (taulukko1). The2 J- ja3 J- HMBC-korrelaatiot arvoista H-2, -6 arvoon C-1 ja 4; H-3, 5 - C-1 ja 7; alkaen H-20, 60 toC-40 ja 70 ; alkaen H-70 C-80 ja 90 ; ja H-80 C-1, vastaavasti, havaittiin vuonnaHMBC-spektri1 (Kuva S4). Lisäksi suuri kytkentävakio välillä H-70 ja H-80 (J = 5.6 Hz) tuki suhteellista määritystä1 klo C-70 /C-80 kutenkolme[44]. Absoluuttiset kokoonpanot kohdassa C-70 ja C-80 /1 määritettiin sähköisellä kiertokirjeellädikroismi (ECD) -analyysi. Positiivinen puuvillaefekti 230 nm:ssä (∆ε plus 0.17) paljasti 8S konfiguraatio varten1, julkaistun kirjallisuuden mukaan [37,38] ja siksi 70 R oli myöspäättänyt. Muut 2D-spektrit (kuvat S5–S7) antoivat täydellisen protonien jahiilisignaaleja. Näin ollen rakenne1 määrättiin nimellä 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -dihydroksi-7 0 -(4-hydroksifenyyli)propaani-80 -yylioksi]bentsoehappo, kuten kuvassa on esitetty1. 

Molekyylikaava2 nimettiin C17H18O8 HR-ESI-MS:n perusteellaanalyyttiset tiedot (m/z 349.0936 [M − H]−, kuva S8). Absorptio IR-spektrissä(3425 ja 1541 cm−1 ) ilmaisi hydroksyyli- ja konjugoidun karbonyylifunktionaalisuuden,vastaavasti. NMR-spektrien vertailussa1 ja2, se voisi huomata, että heniillä oli erilaisia ​​aromaattisia osia. Kaksi sarjaa ABX-kytkettyä aromaattista rengasta ja yksimetoksiryhmä voidaan havaita1H- (kuva S9) ja13C-NMR (kuvio S10) tiedot/2 (Pöytä1), ja se ehdotti yhdistettä2 hallussaan kaksi trisubstituoitua sijaankohta-disubstituoidut aromaattiset osat. Merkittävät HMBC-korrelaatiot (kuva S11) alkaenH-3 - C-1, C-5 ja C-7; H-6 - C-4; OCH:lta3-30 C-30 ; alkaen H-60 C-40 jaC-70; alkaen H-70 C-10 , C-20 , C-80 ja 90 ; alkaen H-80 C-1 totesi senrakenne2 oli myös uusoligaaninen luuranko. Suuren kytkimen yhdistelmällävakio (J7,8 = 5,2 Hz) ja positiivinen puuvillavaikutus 230 nm:ssä (∆ε plus 1,14), absoluuttinenkonfigurointi2 määrättiin nimelläkolme- ja (70 R,80 S)-muoto, sama kuin1 [44,45]. Muut2D-spektrit (kuva S12–S14) antoivat täydellisen protoni- ja hiilisignaalien määrityksen.Nämä havainnot päättivät rakenteen2 kuten 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -dihydroksi-70 -(4-hydroksi-3-metoksifenyyli)propaani-80 -yylioksi]-2-hydroksibentsoehappo (kuva1). 

Yhdiste3 saatiin värittömänä jauheena ja sen molekyylikaava olinimetty nimellä C20H30O5 HR-ESI-MS analyyttisten tietojen perusteella (m/z 349.2024 [M − H]−, Kuva S15). Yhdiste3 osoitti absorptiopiikkejä 3450 (OH) ja 1648 (karboksyylihappo)happo) cm−1 sen IR-spektrissä. Sen osoitti13C-NMR-spektri (kuvio S16) injossa havaittiin kaksi karboksyylifunktionaalisuuttaδC 167,2 (C-15) ja 181,5 (C-19). Sisäänsen1H-NMR (kuvio S17), resonanssit kohdassaδH 4,03 (1H, dd,J = 9.2, 2,8 Hz, H-12) jaδC 75,5 (C-12) osoitti sekundaarisen alkoholiryhmän läsnäolon. Terminaalinen metyleeniryhmä voitaisiin muodostaa protoniresonanssien vuoksiδH 4,53 (1H, s, H-17a) ja4,91 (1H, s, H-17b), ja hiilisignaalit kloδC 106,9 (C-17) ja 150,2 (C-8).Kaksi metyyliryhmää kloδH 0,63 (3H, s, CH3-20) ja 1,21 (3H, s, CH3-18) oli yhdistettykvaternaariset hiilet (C-10 ja C-4), jotka todistetaan HMBC-korrelaatioilla (kuva S18).Karboksyyliryhmän suojavaikutus C-4:ssa johti CH:n yläkentän siirtymään3-20 (δH 0.63), ehdottaa sitä-kokoonpano [46]. Lisäksi H-17a (δH 4.53) ilmestyi yläkentän alueelle, mikä viittaa 12R kokoonpano [47]. Sen HMBCspektri, korrelaatiot välillä H-12 arvoon C-9, C-14 ja C-16; H-17 - C-7 ja C-9;alkaen CH3-16 - C-12 ja C-14; alkaen CH3-18 - C-3, C-4 ja C-19; alkaen CH3-20 - C-1, C-5,C-9 ja C-10 rakensivat tasorakenteen3 kuten aiemmin kerrottiin12-hydroksiagaattihapolle [46]. Kuitenkin C-13-määritykset3 päätettiinkutenE NOESY:n analyyttisillä tiedoilla (kuva S19), jotka osoittivat NOE-vaikutukset joukossaH-5/H-9, H-5/H-18 ja H-12/H-14. Lisäksi NOE H-14:n ja CH:n välillä3-16, joka tulee kirjata 12-hydroksiagaattihappoon [46], ei havaittu3. Muut2D spektrit (Kuva S20–S21) toimitti protoni- ja hiilisignaalien täydellisen määrityksen.Lopulta rakenne3 perustettiin nimellä (13E,12R)-12-hydroksiagaattihappo kutenesitetty (kuva1).

HR-ESI-MS-spektri4 esitteli [M− H]− ionihuippum/z 181.0855 (Kuva S22), yhdenmukainen C:n pseudomolekulaarisen kaavan kanssa10H13O3. Imeytyminenhuiput ovat 3456 ja 1635 cm-1 sen IR-spektrissä oli hydroksyyli ja konjugoitu karbonyyliryhmät vastaavasti. Kaksi metiiniprotonia kloδH 2,09 (1H, m, H-5) ja 6,32 (1H, dd,J = 2.4, 1,2 Hz, H-2), kaksi metyleeniryhmääδH 1.84 (1H, m, H-4a), 2.02 (1H, m, H-4b), 2.50 (1H, dddd,J = 19,2, 9,2, 4,8, 2,4 Hz, H-6a) ja 2,70 (1H, dddd,J = 19,2, 5,2, 5,2, 1,2 Hz,H-6b) ja yksi isopropyyliprotonisarja atδH 0.88 (3H, d, J = 6,8 Hz, CH3-9), 0.98 (3H, d, J = 6,8 Hz, CH3-10) ja 2,31 (1H, hept,J = 6.8 Hz, H-8) ilmestyi1H-NMR-spektri/4 (Kuva S23). Lisäksi yksi konjugoitu karbonyylihiili kohdassaδC 174,8 (C-7) ja yksikarboksyylihiili atδC 205.7 (C-3) voidaan havaita sen13C- ja DEPT NMR-spektrit(Kuva S24). Havaitut HMBC-korrelaatiot (kuva S25) välillä H-2 arvoon C-7; alkaen H-4 kohteeseenC-3; H-6:sta C-1, C-2 ja C-5; alkaen CH3-9 - C-5 ja CH3-10; alkaen CH3-10 - C-8,vastaavasti rakensi rakenteen4 5-isopropyyli-3-oksosykloheks-1-eeni-1-karboksyylihapponahappo (kuva1). Muut 2D-spektrit (kuva S26–S28) antoivat täydellisen protonin määrityksenja hiilisignaalit. Stereokemia C-5:ssa jäi kuitenkin määrittelemättömäksi.

Yhdiste5 sillä oli molekyylikaava C11H14O5 määritetty deprotonoidustamolekyyli-ionihuippu negatiivisessa moodissa HR-ESI-MS-analyysi (m/z 225.0767 [M − H]−, KuvaS29). IR-spektrissään hydroksyyli (3421 cm−1 ) ja karboksyyli (1572 cm−1 ) toimintoja voitaisiin havaita. The1H-NMR-spektri (kuvio S30) paljasti kaksi pitkän kantaman spektriäaromaattisten protonien kytkeminen kloδH 6.86 (1H, d, J = 2,4 Hz, H-4) ja 7,31 (1H, d,J = 2.4 Hz, H-6), yksi metoksiryhmä osoitteessaδH 3.56 (2H, t, J = 6.8 Hz, H-9) ja yksi sarjapropanoliprotonit kloδH 1,82 (2H, tt,J {{0}},0, 6,8 Hz, H-8), 2,61 (2H, t,J {{0}},0 Hz, H-7) ja 3,56(2H, t, J = 6,8 Hz, H-9). Lisäksi yksi karboksyyliryhmä sijaitsi osoitteessaδC 176,2 (C-10) tuumaasen13C-NMR-spektri (kuvio S31). Tasomainen rakenne5 oli merkittäväOCH:n HMBC-korrelaatiot (kuva S32).3-3 - C-3; H-6 - C-2, C-4, C-7 ja C-10; H-7C-4, C-5 ja C-8; H-9 - C-7 ja C-8, vastaavasti. Muut 2D-spektrit (kuva S33–S35)toimitti täydellisen protoni- ja hiilisignaalien määrityksen. Yllä olevat todisteet viittaavat siihenrakenne5 2-hydroksi-5-(3-hydroksipropyyli)-3-metoksibentsoehappona (kuva1), joka on jo raportoitu styraksinolihappona aikaisemmassa synteettisessä kirjallisuudessa [48]. Tästä huolimatta tämä tutkimus on ensimmäinen raportti5 luonnollisista lähteistä.

3.2. Tulehdusta ehkäisevä toiminta

Tulehdus on yksi tärkeimmistä bakteerien stimuloimista itsepuolustusmekanismeista,virus, haavat tai monet muut ympäristötekijät. Se on immuunijärjestelmän ensimmäinen vastejärjestelmä infektioita ja ärsytystä vastaan. Neutrofiilit kuuluvat runsaaseen lajiinmakrofagien ja niillä on tärkeä rooli tulehduksessa, ja ne ovat yleensä ensimmäinen lymfosolut pääsemään tartunnan saaneelle alueelle [49]. Neutrofiilit erittävät sarjaa sytotoksiineja, kutensuperoksidianioni ja elastaasi vasteena immuunijärjestelmän aktivoitumiseen [50]. Sisäänviime vuosina useiden ihmisten sairauksien on osoitettu liittyvän neutrofiileihinyliilmaisu [51–55]. Tulehduksen ja syövän välinen suhde on osoitettu, ja kirjoittajat huomauttivat, että syöpäsolujen muodostuminen liittyy suoraan toisiinsatulehdukseen [49]. Siksi uudet tulehdusta ehkäisevät yhdisteet ovat kannattavialisätutkimuksia syövän hoidosta. Neljäkymmentäkolme eristettyä yhdistettä arvioitiinihmisen neutrofiilien superoksidianionin muodostumisen ja elastaasin vapautumisen estäminenvastauksena fMLF/CB:lle [56] (katso lisämateriaalit, taulukko S2). Merkittävä sisällähibitaalitulokset (taulukko2) osoitti vain sen45, 47, 48, 49, ja50 (Kuva2) näytetäänsuperoksidianionin muodostumisen merkittävä esto IC:llä50 arvot vaihtelevat3.3 ± 0.9 to7.7 ± 0.9 µM verrattuna positiiviseen kontrolliin LY294002 (IC50 1.1 ± 0.3 µM). Lisäksi,48, 50, ja51 (Kuva2) paljasti elastaasin vapautumisen merkittävän estonIC:n kanssa50 arvot vaihtelevat välillä 5.3± 0.2–8.3± 0.8 µM verrattuna positiiviseenohjaus LY294002 (IC50 3.2 ± 1.0 µM) (taulukko2). Yhdisteet48 ja50 näytti molemmatsuperoksidi-anionin muodostumisen ja elastaasin vapautumisen estoja, mikä osoittaa niiden moninkertaisuudenanti-inflammatoriset bioaktiivisuudet. NeulatP. morrisonicolaon raportoitu olevananti-inflammatorinen vaikutus RAW 264.7 -makrofageissa [13]. Kirjoittajat ehdottivat sitäepikatekiini jap-kumariinihappo, joka on tunnistettu kohdassaP. morrisonicolavoivat olla aktiivisia aineita.Tässä tutkimuksessa kaikki aktiiviset yhdisteet sisälsivät samanlaisen flavonin rungonettä epikatekiinin jap-kumaroyyliosaa voitiin myös havaita49, 50, ja51. Tämä osoittaa, että flflavonoidi jap-kumaroyylifunktionaaliset ryhmät voivat osallistuaanti-inflammatorinen bioaktiivisuus tässä tutkimuksessa. Nämä biotestien tulokset viittaavat siihenflavonoideilla on keskeinen rooliPinuslajien tulehdusta estävä bioaktiivisuus.

Taulukko 2.Puhdistettujen yhdisteiden estävät vaikutukset superoksidianionien muodostumiseen ja elastaasin vapautumiseenihmisen neutrofiilit vasteena fMLF/CB:lle.

Kuva 2.Anti-inflammatoristen periaatteiden rakenteet45, 47, 48, 49, 50, ja51. 

3.3. Molecular Docking Study

Ikään liittyvää kasvuhormonitasojen laskua pidetään neuroendokriinisen oireenaikääntyminen [57]. Tämä ilmiö esiintyy useissa nisäkäslajeissa, kuten ihmisissä, kotieläiminäkoirat ja laboratoriojyrsijät [57]. Ihmisellä plasman GH-tasot alkavat laskeaiän myötä täyden fyysisen kypsymisen jälkeen ja jatkuu elinvuosikymmenien ajan [57]. Ghreliini tunnistetaan endogeeniseksi ligandiksi GHSR:lle ja se on pääsäätelijäGH:n eritys [18,19]. Ghreliini osallistuu erilaisiin fysiologisiin ja patofysiologisiinihmisen mekanismit, kuten ikääntyminen [24,25]. Lisäksi voidaan ajatella, että greliiniliittyvät tulehdusta estävään vaikutukseen. Immuunisolujen aktivaatiota rajoitti greliinihoito estämällä NF-κB-aktivointi ja sitä seuraava MCP{0}}-eritys [26]. Synteettinen greliinianalogi, kasvuhormonia vapauttava peptidi-2 (GHRP-2) on raportoituvähentää tulehduksellisia tekijöitä niveltulehduksellisilla rotilla, ja se tukee immuunisolujavälitti greliinireseptorien aktivaatio [27]. Neves et ai. myös ehdotettutulehduksen säätely ikääntymistä ehkäisevänä toimenpiteenä [58]. Näin ollen mukaananti-inflammatorinen biotesti kokeelliset tiedot,45, 47, 48, 49, 50, ja51 (Kuva2) näyttimerkittäviä estäviä vaikutuksia, ja ne valittiin määrittämään niiden sitoutumiskykygreliinireseptori. Ennen telakointisimulaatiota natiivi ligandi (8QX) sisällytettiin 6KO5:eenPDB-tiedosto telakoitiin uudelleen vahvistusta varten. Vuorovaikutus 8QX:n ja 6KO5:n jalaskettujen tulosten paras asento osoitti suurta samankaltaisuutta ja toistettavuutta alkuperäisten tietojen kanssa(tietoja ei näytetä). Tulokset osoittavat olemassa olevan simulointijärjestelmän suuren tarkkuudenja tuki lisälaskentaa.

Kunkin ligandin pienintä sitoutumisenergiaa pidettiin parhaana konformaationa. Thesitoutumisaffiniteetit on lueteltu taulukossa3. Kasvuhormonia vapauttava peptidi 6 (GHRP-6) olikäytetään positiivisena kontrollina telakointiin greliinireseptorin sitoutumistaskuun, kuten meilläedellinen raportti. Vaikka AutoDock Vinaa ei ole rakennettu peptidien välistä telakointia vartenja proteiineja, aiemmissa raporteissa on julkaistu useita onnistuneita tuloksia [59–61]. Siksi tässä tutkimuksessa GHRP{0}} laskettiin ensimmäisenä määrittämäännykyinen telakointimalli ja tulokset osuivat hyvin yhteen (kuva3A). Verrattuna GHRP:hen-6,sitovat energiat49, 50, ja51 olivat alhaisemmat kuin−10,3 kcal/mol (taulukko3). Tämäehdottaa sitä49, 50, ja51 voisi telakoida greliinireseptorin taskuun samanlainen taijopa parempi kuin GHRP-6. varten49, vetysidoksia voitiin havaita välilläkaksi karbonyyliryhmää (C-4 jap-kumaroyyli) ja Arg283, C-5 hydroksyyli ja Gln120,C-7 hydroksyyli ja Tyr313 ja C-40 hydroksyyli ja Cys304, vastaavasti. Arg199 muodosti atavanomainen vetysidos karbonyyliryhmän kanssap-kumaroyyli. Lisäksi,49 oliliittyy Arg283-, Arg102-, Asp99-, Phe279-, Phe312-, Leu181- ja Pro200-tähteisiingreliinireseptorin erilaisten vaikutusten kautta, kutenπ-kationi,π- anioni,π–π T-muotoinen jaπ-alkyylivuorovaikutuksia. Nämä sallivat yhdisteen49 ja proteiinia stabiilin kompleksin muodostamiseksi(Kuva3B). 50 oli sidottu Asp99:een, Arg102:een, Gln120:een, Arg283:een, Leu103:een, Asn305:een jaArg199 erilaisten vetysidosten kautta, kun taas muut vuorovaikutukset (π-kationi,π-anioni,π–π T-muotoinen jaπ-alkyyli) havaittiin myös Asp99:llä, Arg102:lla, Arg283:lla, Phe279:llä, Phe312:lla,Leu181 ja Leu210 (kuva3C). 51 myös muodostanut vety- tai hiili-vety-sidoksiaTyr313:n, Ser123:n, Arg283:n, Arg102:n ja Asn305:n kanssa yhdessä muiden vuorovaikutusten kanssa (π-kationi,π- anioni,π-sigma,π–π T-muotoinen jaπ-alkyyli) Asp99:n, Arg283:n, Arg102:n, Leu181:n,Greliinireseptorin Phe312- ja Pro200-tähteet voitiin havaita (kuva3D). Verrattunayhdisteet45, 47, ja48 kanssa49, 50, ja51, entisellä ryhmällä oli flflavonoidivain luuranko, kun taas jälkimmäisessä ryhmässä oli sokeri- ja kumaroyyliosia. Siitä kerrottiinsokeriin kiinnittynyt kumaroyyliryhmä oli ratkaiseva sitoutumisaffiniteetille greliiniinreseptori [34]. GHSR:n aukkorakenne vuorovaikutuksessa greliinin asyylihappoosan kanssajohti greliinireseptorin muuttumiseen aktiiviseksi konfiguraatioksi [43]. Lisäksi GHSR:n sidostasku on kaksihaarainen Glu124:n välisellä suolasillallaja Arg283, ja tämä alue on runsaasti hydrofobisia aminohappoja [43]. Meidän mukaantiedot, telakointipisteet49, 50, ja51 olivat korkeammat kuin45, 47, ja48, mikäehdotti parempaa sitomiskykyä. Tärkeimmät rakenteelliset ominaisuudet olivatkumaroyyliryhmiä sokeriosien sijaan, ja tämä voisi olla lisätodisteuseampien yhdisteiden tutkiminen, joilla on funktionaalisia kumaroyyliryhmiä. Tässä tutkimuksessaaktiiviset ainesosat49, 50, ja51 sillä ei ollut ainoastaan ​​tulehdusta estävää bioaktiivisuutta, vaan myösgreliinireseptorin sitoutumispotentiaali. Tämä osoitti, että väitetyt ikääntymistä estävät vaikutuksetmännyn neulatee voi myös perustua näihin teegreliinin kaltaisiin yhdisteisiin.

4. Johtopäätökset

Yhteensä seitsemänkymmentäseitsemän isolaattia, jotka käsittivät viisitoista kuvaamatonta yhdistettä, puhdistettiin.varmistettu metanoliuutteistaP. taiwanensisneuloja. Niiden rakenteet karakterisoitiinspektroskooppisten ja spektrometristen analyysien avulla. Puhdistettuja yhdisteitä oli 43tutkittu heidän puolestaantulehdusta ehkäisevä toimintamukaansuperoksidianionin muodostumisen estäminenjaelastaasin vapautuminen neutrofiilimallissa. Tulokset viittaavat siihen45, 47, 48, 49, 50, ja51 omata merkittäväätulehdusta ehkäiseviä mahdollisuuksia. Molekulaarinen telakointi lisäälaskentatuloksia tuetaan49, 50, ja51 joilla on sitoutumisaffiniteetti aktiiviseen aineeseengreliinireseptorin tasku. Siksi raakauutteet ja puhdistetut ainesosatP. taiwanensison mahdollista kehittää uusiksi tulehdusta ehkäiseviksi lyijylääkkeiksi tairuoan ainesosat.

Täydentävät materiaalit:Seuraavat ovat saatavilla verkossa osoitteessa, Liite A: Täydelliset uutto- ja eristysmenettelyt,Liite B: Viitteettunnetuista yhdisteistä, Taulukko S1: Neulojen alustava bioaktiivisuuden seulontaP. taiwanensissuperoksidillaihmisen neutrofiilien anionin muodostuminen ja elastaasin vapautuminen vasteena fMLF/CB:lle,Taulukko S2: Puhdistettujen yhdisteiden estävät vaikutukset superoksidianionien muodostumiseen ja elastaasiinihmisen neutrofiilien vapautuminen vasteena fMLF/CB:lle, kuva S1-S35: HRMS- ja NMR-spektrituusia yhdisteitä

1–5. Tekijän panokset:Käsitteellistäminen, P.-CK ja JTCT; Methodology, P.-CK ja T.-LH;Tutkimus, Y.-CL, AMK ja M.-LY; Resources, S.-YW; Tietojen kuratointi, Y.-CL ja G.-HY;Kirjoittaminen – alkuperäisen luonnoksen valmistelu, P.-CK ja Y.-CL; Kirjoittaminen – tarkistus ja editointi, P.-CK Allkirjoittajat ovat lukeneet käsikirjoituksen julkaistun version ja hyväksyneet sen.

Rahoitus:Tätä tutkimusta sponsoroi Taiwanin tiede- ja teknologiaministeriö (MOST). Thetutkimusta tuki osittain Higher Education Sprout Project, opetusministeriöUniversity Advancementin päämaja National Cheng Kung Universityssä (NCKU).

Institutionaalisen tarkastuslautakunnan lausunto:Tutkimus tehtiin laitoksen luvallaChang Gung Memorial Hospitalin tarkistuslautakunta (IRB nro 201800369A3).Ilmoitettu suostumus:Selvitys voidaan toimittaa pyynnöstä.

Tietojen saatavuusilmoitus:Alkuperäiset tiedot saa pyynnöstä vastaavalta tekijältä.

Kiitokset:Kirjoittajat ovat kiitollisia myös Chang Gung Memorial Hospital -sairaalalle (CMRPD1B0281~3,CMRPF1D0442~3, CMRPF 1F0011~3, CMRPF1F0061~3 ja BMRP450 myönnetty T.-LH:lle)tämän tutkimuksen osittainen taloudellinen tuki. Kirjoittajat kiittävät NMR:n käytöstäkansallisen Cheng Kung -yliopiston instrumenttikeskuksen laitteet.

Eturistiriidat:Kirjoittajat ilmoittavat, että ne eivät ole eturistiriitoja.

Viitteet

1. Xie, Q.; Liu, Z.; Li, Z. Kuuden eteerisen öljyn kemiallinen koostumus ja antioksidanttiaktiivisuusPinusKiinasta kotoisin olevat taksonit.Molekyylit2015, 20, 9380–9392. [CrossRef] 

2. Kim, KY; Chung, HJ Männynversoteen ja männyn neulateen makuyhdisteet.J. Agric. Food Chem.2000, 48, 1269–1272. [CrossRef] 

3. Park, G.; Paudyal, DP; Hwang, I.; Tripathi, GR; Yang, Y.; Cheong, H. Fermentoitujen neulauutteiden valmistus punaisesta männystä janiiden toiminnallinen luonnehdinta.Biotechnol. Bioprosessi Eng.2008, 13, 256. [CrossRef]

4. Idžojti´c, M.; Kajba, D.; Franji´c, J. Differentiation of F1 hybridsP. nigraJF Arnold× P. sylvestrisL., P. nigraJF Arnold× P. densifloraSiebold et Zucc.,P. nigraJF Arnold× P. thunbergianaFranco ja heidän emolajinsa neulan haihtuvan koostumuksen mukaan.Biochem.Syst. Ecol.2005, 33, 427–439. [CrossRef] 

5. Kim, YS; Shin, DH Männyn neulan haihtuvat komponentit ja antibakteeriset vaikutukset (Pinus densiflfloraS. ja Z.) otteet.Food Microbiol.2005, 22, 37–45. [CrossRef] 

6. Dob, T.; Berramdane, T. Eteeristen öljyjen koostumusPinus halepensisMill. kolmelta eri Algerian alueelta.J. Essent. Oil Res.2007, 19, 40–43. [CrossRef] 

7. Nam, AM; Tomi, F.; Gibernau, M.; Casanova, J.; Bighelli, A. Neulaöljyn koostumus ja kemiallinen vaihtelevuusPinus halepensiskasvaa Korsikassa.Chem. Biosukeltajat.2016, 13, 380–386. [CrossRef] 

8. Sezik, E.; Üstün, O.; Demirci, B.; Ba¸ser, KHC Eteeristen öljyjen koostumusPinus nigraArnold Turkista.Turkki. J. Chem.2010, 34, 313–325.